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Universidad pedagogica y tecnologica de Colombia
Facultad de Ciencias Básicas – Escuela de Biología
BIOLOGÍA MOLECULAR
INFORME términos biología molecular
CUESTIONARIO
1. Define 15 palabras científicas desconocidas:
- células alogénicas: las células madre sanas se obtienen de la sangre o la
médula ósea de un donante emparentado.(1)
- Autólogo: designar a los trasplantes y las transfusiones en las que la misma
persona u organismo es a la vez donante y receptor.(2)
- adyuvante: sustancias o preparados químicos que, incorporados al antígeno
o inyectados simultáneamente con él, hacen más efectiva la respuesta
inmune.(3)
- transfección: Es un proceso que consiste en introducir nucleótidos en una
célula, cuyo producto final es la transgénesis.(4)
- terapia celular: usada para sustituir o reparar la función de células o tejidos
lesionados, consiste en trasplantar células a un órgano receptor en
cantidades suficientes para que sobrevivan y restauren su función normal. (5)
- DC: célula presentadora de los antígenos más potentes del sistema
inmunitario. (6)
- RNAasas:Las ribonucleasas, pertenecientes a la superfamilia Ribonucleasa
A, son enzimas que participan en varios procesos fisiológicos, que van desde
el procesamiento alternativo del RNA hasta la angiogénesis. (7)
- activador inmunitario: Producto o sustancia capaz de activar el sistema
inmune haciendo que su respuesta ante determinados estimulos sea más
rápida y eficaz.(8)
- vector de expresión: se utiliza para producir una proteína recombinante y
contiene un promotor y un sitio IRES (sitio de entrada interna al ribosoma),
así como una secuencia de poliadenilación.(9)
- inmunogenicidad innata: capacidad de diferentes sustancias para
desencadenar una respuesta inmunitaria adaptativa de tipo celular y humoral
que a largo plazo constituye la memoria inmunológica.(10)
- neopitopo: O nuevo determinante antigénico, es la porción de una
macromolécula que es reconocida por el sistema inmunitario,
específicamente la secuencia a la que se unen los anticuerpos, los
receptores de las células B o los receptores de las células T.(11)
- profiláctico: sirve para prevenir y proteger de algún tipo de enfermedad. (12)
- electroporación: se utiliza para aumentar la permeabilidad de la membrana
celular a iones y moléculas mediante pulsos cortos de altos campos
eléctricos. Avances recientes han mostrado aplicaciones terapéuticas en el
tratamiento clínico contra el cáncer. (13)
- sérica: proveniente del suero sanguíneo o relacionado con el. (14)
- angiogénesis: es la formación de vasos sanguíneos nuevos. Este proceso
consiste en la migración, crecimiento y diferenciación de células endoteliales,
las cuales recubren las paredes internas de los vasos sanguíneos.(15)
2. Describe the general idea of the following subtitles: (3,0/5,0)
Introduction
las vacunas provenientes de muchos años de investigación y desarrollo con
enfoques tradicionales han salvado millones de vidas cada año, sin embargo
presentan limitaciones en su producción a gran escala y en el ataque a
enfermedades no infecciosas como el cáncer, lo que deriva en una necesidad de
desarrollo de vacunas más potentes y eficaces.
durante la última década la innovación tecnológica y la inversión han logrado que el
ARNm se convierta en una herramienta prometedora en el desarrollo de vacunas,
brindando seguridad, al ser una base no infecciosa, facilidad y eficacia en sus
modificaciones que resultan ser mas estables y traducibles, y finalmente rapidez en
su producción a bajo costo permitiendo su desarrollo en masa. En esta revisión se
discuten los enfoques actuales de vacunas ARNm así como sus hallazgos, desafíos
y éxitos recientes.
Basic mRNA vaccine pharmacology
En farmacología hay dos tipos de ARN utilizados para la producción de vacunas, el
ARNm no replicante y el ARN autoamplificado que viene de un virus. Las
aplicaciones del ARNm autoamplificado son variadas y beneficiosas para las
vacunas debido a su mecanismo de acción, ya que no solo codifican el gen sino
también el mecanismo de replicación viral y la expresión de muchas proteínas; y en
terapias de reemplazo de proteínas las modifica para que queden bien formadas.
Una de sus aplicaciones es construyendo ARNm IVT mediante un molde de ADN
lineal y una polimerasa para producir un ORF que tiene; el gen, codifica la proteína
de interés, regiones no codificantes, una tapa y una cola y así se asemeja al ARNm
de la célula. otra forma de aplicación es cuando forma complejos de ARNm para uso
in vivo y gracias a esto ayuda a crear reactivos de transferencia que captan ARNm y
hacen que este no se degrade; luego el ARN pasa al citoplasma y de alli la proteina
se modifica, se traduce y se une correctamente.
Recent advances in mRNA vaccine technology.
han habido muchos avances en la ingeniería del ARNm tales como facilitar la
traducción del ARNm artificial, el desarrollo de transportadores que hacen que los
antígenos se expresan por más tiempo, así como se han desarrollado algunas
fórmulas de vacunas que contienen nuevos potenciadores de inmunogenicidad.
Recent advances in mRNA vaccine technology: Optimization of mRNA
translation and stability
Los hallazgos principales para la mejoría de las vacunas y la traducción del ARNm
son, el reconocimiento de que las regiones no traducidas o no codificantes le dan
estabilidad a la cadena de ARNm y mejoran el tiempo de expresión, puesto que se
posicionan en los extremos del ORF haciendo de caperuzas y colas; así como
actúan en la regulación en el momento de la traducción de proteínas. Otro hallazgo
importante es que también se están utilizando codones que sustituyen a otros para
aumentar la producción de proteínas. La última técnica, es el aumento de la
proporción Guanina-citosina que aumenta la cantidad de ARNm y por lo tanto la
expresión de proteínas; la cual también se puede mejorar intercambiando
nucleósidos. Así como estas técnicas representan muchas mejoras, existen
contraindicaciones en su uso ya que podrían variar la forma en la que el cuerpo
reconoce el antígeno y produce los anticuerpos.
Recent advances in mRNA vaccine technology: Modulation of immunogenicity
Progress in mRNA vaccine delivery
Progress in mRNA vaccine delivery: Ex vivo loading of DCs.
Los CD son las células que tienen los antígenos más fuertes en el cuerpo, ya que
promueven la respuesta inmune asimilandolos y enviándolos a las células T. son de
interés como desarrollo para las vacunas de ARNm porque además de que pueden
guardar intacta información genética y transmitirla; también son sensibles a
procesos de transgénesis en mamíferos como la transfección donde el ARN pasa
por los poros de la membrana de la célula CD y esta a su vez desencadena la
reacción inmune por lo cual esta técnica generalmente se usa en cáncer.
Progress in mRNA vaccine delivery: Injection of naked mRNA in vivo.
Las vacunas de ARNm desnudo generalmente se orientan hacia células que tienen
antígenos por eso se suelen hacer en los ganglios. En el caso de tumores, duplicar
la inyección aumenta la respuesta inmune.
Progress in mRNA vaccine delivery: Physical delivery methods in vivo.
para mejorar la captación de ARNm hay métodos como las pistolas de genes,
complejos de micro partículas de oro con ARNm que entran por la membrana, este
método hasta ahora solo es eficiente en ratones, carece de precisión por lo cual se
dificulta el acceso exacto, puede aumentar la necrosis celular, y es costoso. Otro
método de absorción de ARNm es la electroporación, pero no es útil para potenciar
vacunas con ARNm no replicante. por esto se ha probado usando nanopartículas.
Progress in mRNA vaccine delivery: Protamine.
La protamina es un compuesto de aminoácidos que respalda el ARNm para que no
se degrade por enzimas sericas. Aunque cuando la protamina se encuentra en
complejo con el ARNm, se disminuye la expresión de proteínas. Esto se arregla si el
ARN asociado a la protamina queda solo como promotor de la respuesta inmune.
Progress in mRNA vaccine delivery: Cationic lipidand polymer-based delivery.
La sustancia involucrada en la transfección de ARNm son altamente eficientes al ser
basados en lípidos, polímeros catiónicos, son comercialmente útiles, Los lípidos, se
han convertido en instrumentos altamente útiles en el suministros de ARNm en los
últimos años. Las nanopartículas lipídicas (LNP) son una herramienta muy atractiva
en el campo del suministros de ARNm, y consta de: un lípido catiónico ionizable,
polietilenglicol ligado a lípidos (PEG), y fosfolípidos naturales, que sustentan la
estructura de la bicapa lipídica.
mRNA vaccines against infectious diseases
el desarrollo de vacunas terapéuticas convencionales y tradicionales a pesar de ser
el método más eficaz, se queda corto para responder a epidemias o virus
infecciosos como el VIH y demas así como posee la desventaja de que tarde
demasiado tiempo por lo cual el lento desarrollo de estas no puede responder a la
veloz propagacion de una infeccion potente como las ya nombradas por lo cual las
vacunas de arnm se han convertido en una alternativa mas versatil y eficaz al
parecer han respondido bien en animales.
Self-amplifying mRNA vaccines
El desarrollo de agentes complejantes de ARN produjo una mejora notable en la
plataforma SAM con el aumento en la producción de antígenos a partir de una
pequeña dosis de vacuna, trajo notables resultados en virus letales en ratones
induciendo respuestas inmunitarias en estos al igual que en múltiples especies
como hurones, conejos , macacos entre otros.
Demostrando que la administración intramuscular de ARN produce respuestas
específicas de anticuerpos para virus como ébola, influenza Y Zika en ratones, al
igual que su eficacia en la protección contra patógenos bacterianos, de esta manera
se muestra la potencia y versatilidad de la plataforma SAM, sin embargo presenta
limitaciones en cuanto al tamaño del inserto y su uso repetitivo.
Dendritic cell mRNA vaccines
Utilizar células que presentan antígenos para inmunizar; no solo se usa contra el
cáncer, también se ha probado en voluntarios con VIH en terapia antirretroviral, los
cuales fueron vacunados con células madre sanas que se obtienen de la sangre o la
de un donante emparentado que contienen ARNm que codifica para varios
antígenos del VIH. Este método es seguro pero no hubo mejoría en el estado de los
pacientes. Otro método de vacunación con CD y ARNm para CMV en humanos
sanos probó en cambio un aumento en la respuesta inmune.
Therapeutic considerations and challenges:Good manufacturing practice
production
Resulta más eficiente la producción de vacunas de ARNm resultado de las
reacciones con enzimas especiales en comparación con las formas tradicionales
que emplean subunidades proteicas o virus inactivos, ya que su rendimiento y
simplicidad agilizan la producción de ARNm en una pequeña parte de GMP,
dependiendo únicamente de la longitud de este, la química de nucleótidos y la
purificación del producto.
Por su sencillez en producción y fácil sintetizado el ARNm puede ser estandarizado
para una respuesta mas pronta a enfermedades, aumentando su producción y
ofreciendo costos mas bajos.
el ARNm sintetizado y procesado ofrece estabilidad en los productos pudiéndose
mantener hasta 10 meses en condiciones refrigeradas, y facilitando su
empaquetado en nano particulas o con inibidores de ARNasa.
Therapeutic considerations and challenges: Regulatory aspects
Aunque los productos desarrollados a partir de ARNm no poseen un lineamiento
específico que regule su producción dado por la FDA o la EMA; debido a que ha
aumentado la cantidad de pruebas aplicando las distintas alternativas que ofrecen
los productos de ARNm, y que de la misma forma ha crecido su supervisión; se
debe demostrar ante la ley que son confiables para usarse en humanos. A pesar de
que por el momento estos se controlan mediante las regencias destinadas a
productos de inmunización genética especificados para vacunas de ADN y demás
terapias, con el tiempo y gracias a las revisiones por las organizaciones reguladoras
se debe crear una reglamentación especial para las vacunas desarrolladas por
métodos con ARNm así como de acuerdo a las revisiones realizadas hay que
enfatizar en la diferenciación de las regulaciones necesarias para la prevención de
enfermedades infecciosas en contraste con los métodos terapéuticos.
Therapeutic considerations and challenges: Safety
En la fabricación de ARNm no es necesario el uso de productos tóxicos ni cultivos
celulares, posiblemente contaminados con algún virus. La producción de ARNm
evita posibles riesgos ante situaciones similares a las de otros tipos de vacunas. Los
posibles y latentes riesgos de infección no son una preocupación para el ARNm.
Las vacunas de ARNm se consideran una estrategia segura y eficiente, siendo
varias de estas probadas de estudios clínicos, demostrando ser muy bien toleradas
y seguras. No obstante, también hay posibles fuentes de problemas, uno de ellos
podría ser originado por la presencia de ARN extracelular durante la vacunación con
ARNm.
Las vacunas de ARNm se consideran una estrategia segura y eficiente, siendo
varias de estas probadas de estudios clínicos, demostrando ser muy bien toleradas
y seguras. No obstante, también hay posibles fuentes de problemas, uno de ellos
podría ser originado por la presencia de ARN extracelular durante la vacunación con
ARNm. Un estudio demostró que el ARN extracelular promovía la coagulación de la
sangre y aumentaba la posibilidad de trombos, por ello, es importante pensar en la
seguridad que necesitará un constante chequeo y revisión para el momento en que
se utilicen por primera vez en humanos nuevos tipos de tecnología o sistemas de
suministro de ARNm.
Conclusions and future directions
Las vacunas de ARNm están pasando por una época de oro en la investigación,
donde se han empleado en estudios clínicos y preclínicos, donde se comprueba la
eficacia de estas herramientas. Si bien, los primeros trabajos acerca de vacunas de
ARNm se basaron en el cáncer, recientemente se ha demostrado la potencia del
ARNm para cuidar y proteger contra una gran variedad de patógenos.
Se requiere de más investigación para poder distinguir que tanta es la diferencia
entre los animales y su respuesta ante las vacunas de ARNm. Dado el extenso
número de posibilidades para el ARNm, se podría tener en cuenta su valor para el
área de las vacunas, debido a que esto les va a permitir a los científicos centrar su
atención en las que mejor rendimiento por aplicación tengan.
El veloz paso del mundo de las vacunas no habría sido posible sin los prometedores
avances en área de detección inmunitaria innata de ARN, su intensiva investigación
básica sobre el ARN, lípidos y polímeros ha hecho posible traducir las vacunas de
ARNm teniendo un buen nivel de inversión de empresas de vacunas de ARNm
4. Write a personal/group reflection including arguments or counterarguments (add
references properly), about allegation of anti-vaccine movements against
SARS-CoV-2 mRNA-vaccines (“mRNA vaccines are dangerous because they took
too so little time to design”, “mRNA vaccines come with chips to control us”, “mRNA
vaccines will modify our DNA”, etc). (1,5/5,0)
R: si bien es cierto que con la reciente crisis sanitaria generada por el virus
SARS-CoV-2 y la pandemia desencadenada por su rápida propagación, tenemos la
suerte de que gracias a la época en la que vivimos, contamos con los avances
médicos, moleculares y tecnológicos para crear a una velocidad abismal varias
vacunas que nos ayuden a enfrentar el virus. algunas personas no piensan lo
mismo, es entendible que muchos de ellos sientan que la rapidez con la cual se
crearon vacunas puede afectar su seguridad, o efectividad pero deben tener en
cuenta que ahora contamos con los medios para producir inmuno tratamientos a
esta velocidad, por lo cual la seguridad de estas no es de preocupación ya que
todas las vacunas se encuentran reguladas por organismos de control tales como la
EMA, la OMS entre otras las cuales poseen lineamientos específicospara cada tipo
de vacuna, si bien es cierto que para vacunas de ARNm aún no hay regulaciones
específicas, los crecientes ensayos y uso de las aplicaciones que los productos de
ARNm ofrecen han hecho que del mismo modo aumente su supervisión por lo cual
su producción y venta se rige por el momento mediante las leyes usadas para
ADN.(16)
otra de las preocupaciones más comunes de cierto grupo de personas es que
vienen con chips para controlarnos e implantar en nosotros antenas 5G, si bien es
cierto que tenemos un avance tecnológico abismal y que la genética se ha movido a
pasos enormes es cierto que aunque técnicamente es posible inyectar un microchip
en una vacuna, no es posible extraer información de él; puesto que para implantar
un chip primero tendría que poder pasar por una jeringa y además de esto debe aun
así tener contacto con el exterior para poder reunir información, por lo cual este
tendría que disponer de antenas, en este punto empezamos a ver un problema de
geometría y espacio puesto que, Según las ecuaciones de Maxwell, el tamaño ideal
de una antena debe ser igual a la relación entre la velocidad de la luz y la frecuencia
de las ondas electromagnéticas por lo cual una antena 5G tendría que tener un
tamaño de 2,1 cm para poder comunicarse por el exterior. concluyendo esto no,
tiene mucho sentido la teoría de los chips en las vacunas debido no solo a lo
anterior sino que de todas formas es un método inutil e ineficaz para el objetivo que
plantean los anti vaxxers que segun es el control puesto que de todas formas ya
existen métodos más rápidos y que recopilan mayor cantidad de información en
menos tiempo como lo son las redes sociales y demás empresas, así como el
gobierno que de todas formas ya tiene recopiladas las huellas digitales de cada
persona y un seguimiento desde su nacimiento, así que qué otra información se
supone van a usar para ejercer control si de todas formas ya tienen esa
información.(17)
Una cosa más que se oye decir de cierta gente es la duda de si la vacuna puede
modificar nuestro ADN al ser de ARNm, pero lo que sucede es que estas vacunas
están compuestas de un fragmento de la información genética que tiene el virus, esa
parte produce una proteína que es la llave de entrada del virus a las células. Lo que
tienen las vacunas es ese fragmento de información genética que va hasta las
células; y allí, el sistema inmune la reconoce como extraña y genera anticuerpos
contra el SARS-CoV-2. Esos anticuerpos son los que preparan nuestro cuerpo para
saber defendernos ante la infección real. Aunque es la primera vez que esta técnica
se utiliza de forma masiva, ya antes había sido probada en vacunas para zika y
malaria. Además, para quienes se preocupan por los posibles cambios genéticos
que pueda generar este tipo de vacuna, el RNAm definitivamente no entra al núcleo
de la célula, por lo que no tiene contacto con nuestro ADN así que en conclusión no
lo modifica.(18)
BIBLIOGRAFIA
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u%C3%A9%20es%20un%20activador%20inmunol%C3%B3gico,sea%20m%
C3%A1s%20r%C3%A1pida%20y%20eficaz.
(9) https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1473&sectionid
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(10)
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(11) National Institutes of Health (Estados Unidos) (febrero de 2008). «Epítopo». Consultado el 12
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(16) https://www.who.int/es/news-room/questions-and-answers/item/coronaviru
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https://www.javeriana.edu.co/pesquisa/la-vacuna-alterara-mi-adn-un-genetista-resuelve-dudas-sobre-la-vacunacio/