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PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 1 Evaluación Operacional de Procesos Biotecnológicos Aerobio, Anaerobio y Combinado Para el Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas Mantilla Moreno Ana María Universidad de Santander Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agropecuarias Maestría en Biotecnología Bucaramanga 2022 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 2 Evaluación operacional de Procesos Biotecnológicos Aerobio, Anaerobio y Combinado para el Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas Mantilla Moreno Ana María Trabajo de Grado Presentado Como Requisito Para Optar al Título de Magister en Biotecnología Director Epalza Contreras Jesús Manuel Mg. en Sistemas Energéticos Avanzados Universidad de Santander Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agropecuarias Maestría en Biotecnología Bucaramanga 2022 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 3 Página de Aceptación PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 4 Cesión de Derechos y Confidencialidad PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 5 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 6 Agradecimientos Primeramente, agradezco a Dios por darme la oportunidad de aprender más, en segunda instancia, pero no menos importante, agradezco a mi familia que siempre ha sido mi motor en cada paso, no solo mis padres que son un ejemplo a seguir, también mis tíos, primos y de manera inexpresable a mis abuelos, quienes hubiera querido que me vieran graduada. Por parte de la academia al profesor Manuel Epalza por la dirección del presente trabajo de grado, caracterizada por su idoneidad y disponibilidad pedagógica e investigativa, junto con un apoyo incondicional al enfrentar las diversas adversidades que se han presentado para entregar este documento. A la doctora Luz Amanda Bueno por su invaluable colaboración desde la Dirección de Posgrados UDES, permaneciendo atenta a cualquier avance y acompañando mi progreso desde el primer semestre. A la Universidad de Santander UDES por esta oportunidad de formación investigativa y de expansión de mi conocimiento, al permitir realizar este proyecto con el apoyo de profesionales como lo son los docentes de Ingeniería civil, ambiental y agroindustrial; con quienes he tenido el placar de trabajar y me han demostrado sus conocimientos en distintos ámbitos. A todos los auxiliares y profesionales de laboratorios que me acompañaron en los análisis, junto con las personas que me han colaborado con el aseo de los laboratorios y oficinas, en general a toda la comunidad UDES que me ha recibido de una manera tan cálida y amigable. Por último, agradecerles a todos mis amigos que me han dado soporte en varias ocasiones para terminar mi proyecto de maestría. Me considero de las personas más afortunadas en el mundo porque todas las personas que me rodean de una u otra manera son especiales y excepcionales. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 7 Dedicatoria A mí. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 8 Tabla de Contenido Resumen 15 Summary 17 Introducción 19 Problema de Investigación 24 Planteamiento del Problema 24 Justificación 26 Pregunta de Investigación 27 Objetivos 28 Objetivo General 28 Objetivos Específicos 28 Línea de Investigación 29 Metodología 30 Primera Fase. Análisis Bibliométrico y Vigilancia Tecnológica 30 Segunda Fase. Caracterización 33 Métodos y Reactivos. 35 Materiales. 37 Tercera Fase. Determinación y Análisis Comparativo de Cinéticas Microbianas 38 Estado del Arte 39 Marco Referencial 49 Marco Conceptual 49 Características Físicas de ARD a Medir con Parámetros Físicos. 52 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 9 Características Químicas de ARD a Medir con Parámetros Químicos. 52 Microorganismos Presentes en ARD a Medir con Parámetros Microbiológicos. 54 Marco Legal 73 Análisis Bibliométrico y Vigilancia Tecnológica 75 Análisis Bibliométrico 75 Vigilancia Tecnológica 80 Resultados del Análisis Bibliométrico y la Vigilancia Tecnológica 82 Caracterización 84 Caracterización Proceso Anaerobio 84 Caracterización Proceso Aerobio (RBS) 94 Caracterización proceso combinado 106 Caracterización Coliformes Sistemas Anaerobio, Aerobio y Combinado 116 Determinación de Cinéticas Microbianas y Análisis Comparativo de Eficiencia de los Sistemas UASB, RBS y Combinado UASB-RBS 118 Cinéticas Microbianas 118 Determinación de Coeficientes de la Cinética del 119 Análisis de Cinéticas Microbianas. 121 Balance de DQO 125 DOFA del Bioproceso Combinado UASB-RBS 127 Conclusiones 129 Recomendaciones 131 Referencias Bibliográficas 133 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 10 Lista de Tablas Tabla 1 Métodos Biológicos 20 Tabla 2 Parámetros Medidos en Cada Proceso Según Standard Methods 36 Tabla 3 Reactivos Utilizados en Caracterización de Muestras de ARD 37 Tabla 4 Equipos de Laboratorio 37 Tabla 5 Tendencia de Flujo de Agua Residual Tratada en Colombia 2014-2017 43 Tabla 6 Principales Características de los Procesos Aerobios y Anaerobios 46 Tabla 7 Comparación de Tratamientos Aeróbico y Anaeróbico 47 Tabla 8 Uso de Reactores en Sistemas Combinados Aeróbico y Anaeróbico 48 Tabla 9 Ecuaciones en el Tratamiento de Lodos Activados 60 Tabla 10 Marco Legal 73 Tabla 11 Caracterización Agua Proceso Anaerobio(UASB) 84 Tabla 12 Relación Entre los AGV y la AT del Tratamiento Anaerobio (UASB) 90 Tabla 13 Caracterización Agua Proceso Aerobio 94 Tabla 14 Caracterización Lodo Proceso Aerobio (RBS) 103 Tabla 15 Bacterias Fermentadoras de Glucosa 105 Tabla 16 Caracterización Agua Proceso Combinado 106 Tabla 17 Caracterización Lodo Proceso Combinado 111 Tabla 18 Coliformes Medio MLX- Fluorocult 116 Tabla 19 Coliformes Membrana Cromocult 117 Tabla 20 Estequiometría de Crecimiento Microbiano 121 Tabla 21 Velocidad de Crecimiento Microbiano 124 Tabla 22 Fraccionamiento de DQO 125 Tabla 23 Balance de DQO 125 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 11 Tabla 24 Cromatografía de Gases 126 Tabla 25 DOFA del Bioproceso Combinado UASB-RBS 128 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 12 Lista de Figuras Figura 1 Puntos de Recolección PTAR Río Frío 33 Figura 2 Muestras de ARD 34 Figura 3 Metodología 38 Figura 4 Ubicación PTAR Río Frío 45 Figura 5 PTAR El Santuario 45 Figura 6 Tipos de Sistemas Combinados 50 Figura 7 Microorganismos Presentes En Aguas Residuales 54 Figura 8 Hongos Presentes en Aguas Residuales 55 Figura 9 Bacterias Presentes en Aguas Residuales 55 Figura 10 Protozoos Presentes en Aguas Residuales 56 Figura 11 Coronavirus Presente en Aguas Residuales 57 Figura 12 Algas Presentes en Aguas Residuales 57 Figura 13 Arqueas 58 Figura 14 Curva de Crecimiento Microbiano 62 Figura 15 Tren de Tratamiento 63 Figura 16 Floc Presente en el Licor Mezclado 69 Figura 17 Esquema de un Reactor Biológico Secuencial (RBS) 69 Figura 18 Digestión Anaerobia 71 Figura 19 Esquema Reactor UASB 72 Figura 20 Sistema Combinado 73 Figura 21 Mapa Temático Basado en Palabras Clave 76 Figura 22 Producción Científica Anual 78 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 13 Figura 23 Conceptos y Técnicas de Interés 78 Figura 24 Ejes Temáticos 79 Figura 25 Porcentajes de Remoción DQO en el Agua del Tratamiento Anaerobio (UASB) 85 Figura 26 Porcentaje de Remoción del DQO Soluble en el Agua del Tratamiento Anaerobio (UASB) 86 Figura 27 Relación Entre el DQO Total y DQO Soluble en el Agua del Tratamiento Anaerobio (UASB). 87 Figura 28 Remoción DBO5 enel Agua del Tratamiento Anaerobio (UASB) 88 Figura 29 Remoción del DBO5 Soluble en el Agua del Tratamiento Anaerobio (UASB). 89 Figura (UASB) 30 Relación Entre el DBO5 Soluble / DBO5 Total en el Agua del Tratamiento Anaerobio 89 Figura 31 Gráfica Potencial Buffer del Tratamiento Anaerobio (UASB) 91 Figura 32 Caracterización Lodo Proceso Anaerobio 91 Figura 33 Relación Entre Sólidos de Lodo 92 Figura 34 Grupos Tróficos 93 Figura 35 Remoción DQO Total en el Agua del Proceso Aerobio (RBS) 95 Figura 36 Remoción del DQO Soluble en el Agua del Tratamiento Aerobio (RBS) 96 Figura 37 Relación entre el DQO Soluble y el Total en el Agua del Proceso Aerobio (RBS) 97 Figura 38 Porcentaje Remoción DBO5 Agua 98 Figura 39 Remoción del DBO5 en el Agua del Tratamiento Aerobio (RBS) 99 Figura 40 Relación Entre DBO5 Soluble y Total en el Agua del Tratamiento Aerobio (RBS) 100 Figura 41 Resultados en mg/L de Sulfatos en Agua de Entrada y Salida del Proceso Aerobio (RBS). 101 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 14 Figura 42 Conductividad en el Agua del Tratamiento Aerobio (RBS) 102 Figura 43 Porcentaje en Relación a los Sólidos Totales y Volátiles del Lodo del Proceso Aerobio (RBS) 104 Figura 44 Relación Entre SSed con SSV del Lodo Aerobio Proveniente del RBS 105 Figura 45 Remoción DBO5 en el Agua del Proceso Combinado (UASB + RBS) 107 Figura 46 Remoción DBO5 en el Agua Para el Proceso Combinado (UASB + RBS) 108 Figura 47 Relación del DBO5 en el agua del proceso combinado (UASB + RBS) 108 Figura 48 Porcentaje Remoción DQO en el Agua del Proceso Combinado (UASB + RBS). 109 Figura 49 Remoción del DQO Soluble en el Agua del Proceso Combinado (UASB + BSR) 110 Figura 50 Relación del DQO Total con el DQO Soluble en el Agua del Proceso Combinado (UASB + RBS). 111 Figura 51 Sólidos Sediméntales del Lodo Combinado (UASB + BSR) 112 Figura 52 Relación de Sólidos Totales y Suspendidos(UASB + RBS). 113 Figura 53 Índice de Velocidad del Lodo combinado (UASB + RBS) 114 Figura 54 Grupos Microbianos Presentes en el Proceso Combinado (UASB + RBS) 115 Figura 55 Curva de Crecimiento Microbiano 119 Figura 56 Solidos Suspendidos Volátiles del Anaerobio (USAB) 122 Figura 57 Velocidad Específica de Crecimiento Anaerobio 122 Figura 58 Velocidad Específica de Crecimiento Aerobio 123 Figura 59 Velocidad Específica de Crecimiento Combinado 124 Figura 60 Balance del DQO en el Proceso Combinado 127 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 15 Resumen Título Evaluación Operacional de Procesos Biotecnológicos Aerobio, Anaerobio y Combinado Para el Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas Autor Mantilla Moreno, Ana María Palabras Clave Agua Residual Doméstica (ARD), Tratamiento Biológico, Digestión Anaerobia, Reactores, Biotecnología Descripción Actualmente, el tratamiento de aguas residuales domésticas sigue procesos biotecnológicos con capacidad de degradar materia orgánica, ya sea mediante reacciones de fermentación (anaerobio) u oxidación (aerobio). Con el fin de establecer la viabilidad de un sistema combinado aerobio- anaerobio se realizó una evaluación de estos procesos individualmente y conjunto, a partir de un análisis bibliométrico y vigilancia tecnológica de la temática, seguido de una caracterización físico-química y microbiológica de los parámetros influyentes en los procesos, para finalizar con un análisis de las cinéticas microbianas involucradas en la disminución de carga orgánica de cada sistema por separado y como sistema mixto, según la relación entre eficiencia y producto. Metodológicamente, se trató de un estudio de corte transversal que evaluó la capacidad de degradación de materia orgánica disuelta en aguas residuales municipales desde su entrada al sistema hasta el vertimiento del agua tratada en una fuente hídrica. Para determinar ventajas y desventajas de cada proceso por separado y en conjunto, se hizo el análisis de muestras recolectadas a partir de monitoreos semanales con un total de 2800 muestras de aguas residuales PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 16 domésticas, durante un año, desde cuatro puntos a la entrada y salida del sistema combinado y 54 muestras de lodo tomadas también semanalmente de cada sistema durante el año 2019. Además, se realizaron mediciones periódicas usando métodos térmicos, título-métricos, potenciométricos y espectrofotométricos con las metodologías normalizadas por el Standard Methods, con el fin de caracterizar los procesos fisicoquímica y microbiológicamente y comparar niveles de eficiencia obtenidos en cada proceso autónomo y en correlación. Entre los resultados se destacaron la caracterización de aguas residuales durante los procesos aislados y combinado con los parámetros más representativos y la identificación del porcentaje de remoción de 70% por parte del proceso combinado junto con la presencia de células no viables en lodos que no se encuentran estabilizados. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 17 Summary Title Evaluation of Combined, Anaerobic and Aerobic Biotechnology Processes for Domestic Waste Water Treatment Author Mantilla Moreno, Ana María Keywords Domestic Waste Water, Biological Treatment, Anaerobic Digestion, Reactors, Biotechnology Abstract Currently, domestic wastewater treatment follows biotechnological processes to degrade organic matter by fermentation (anaerobic) or oxidation (aerobic) reactions. In order to establish the viability of a Mixed aerobic-anaerobic system in the treatment of domestic wastewater, it was made a bibliometric analysis and technological vigilance of the topic. It was followed by a physic-chemical and microbiological characterization of the main processes’ parameters. Finally, an evaluation of the aforementioned processes was carried out, based on the determination and comparative analysis of the microbial kinetics involved in the decrease of organic load of each system separately and as a mixed system in relation of efficient-product. Methodologically, it was a cross-sectional study that evaluated the degradation capacity of dissolved organic matter in municipal wastewater from its entry into the system until the discharge of treated water into water sources. To determine advantages and disadvantages of each process separately and together, the analysis of the samples collected from those monitored weekly was made with a total of 2800 samples of domestic wastewater, during a year, from four PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 18 points to the entrance and output of the combined system and 54 mud samples also taken weekly from each system in 2019. Periodic measurements were made using thermal, titer-metric, potentiometric and spectrophotometric methods with the methodologies standardized by the Standard Methods, in order to characterize the physicochemical and microbiological processes and compare efficiency levels obtained in each autonomous process and in correlation. The results include, characterization of wastewater during the isolated processes and combined with the most representative parameters and the identification of the removal percentage of 70% by the combined process together with the presence of non-viable cells in sludge that are not found stabilized. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 19 Introducción Según la Organización Panamericana de la Salud (OPS) el consumo básico de agua en 2010 se encontraba entre 80 – 100 litros/habitante – día (Jaramillo, Saldariaga, & Gonzalez, 2010). A este mismo ritmo este recurso escasea por la captación excesiva, efectos del cambio climático y principalmente por su contaminación. Esta última cuestión generalmente deriva en el aumento de aguas residuales a la espera de ser tratadasantes del vertimiento a fuentes hídricas naturales. Para el caso de Colombia del 0,8 a 0,85 del consumo de agua se convierte en agua residual (RAS 2016). De otra parte, los tiempos de diseño de Plantas de Tratamiento de Aguas Residuales (PTAR) son muy amplios incluso de hasta 20 años en relación con el aumento anual de consumo de agua y generación de aguas residuales (Norma Técnica de Diseño AyA 2017 y Solano Pérez, 2019). Actualmente, el Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas (TARD) sigue procesos biotecnológicos (aeróbicos o anaeróbicos) que han servido para el cumplimiento de estándares en remoción de materia orgánica. Esto ayuda a mitigar en parte el impacto ambiental negativo por vertimiento de aguas residuales a fuentes hídricas. Sin embargo, el constante incremento de asentamientos urbanos en simultáneo con el aumento de aguas residuales domésticas obliga a la evaluación de opciones medioambientales que mitiguen de alguna manera la contaminación de aguas de escorrentía, ríos y mares con agua residual ineficientemente tratada. Entre las alternativas de tratamiento de Aguas Residuales Domésticas (ARD) con que cuentan las Plantas de Tratamiento de Aguas Residuales (PTAR) locales está el sistema aerobio, que, mantienen un costo mayor de 300 millones de pesos en infraestructura (Alarcon Camargo & Pulido Ciendúa, 2015), es eficiente en remoción de materia orgánica y mínima generación de olores ofensivos. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 20 En Colombia en menor proporción se acude a sistemas anaerobios cuya operación es económica (LizarazoBecerra & Orejuela Gutierrez, 2013), saca escasos volúmenes de lodos o lodos suficientemente digeridos y obtiene como producto gas metano, durante la digestión anaerobia también se generan otros subproductos como el H2S el cual presenta olores ofensivos y corrosión (Rodríguez, 2022), por lo que se requiere de sistemas adicionales de mitigación. Este sistema tiene una eficiencia de remoción inferior al 60% y deteriora la infraestructura de la PTAR por corrosión en metales y carbonatación del concreto. De otro lado, también existe la alternativa de tratamiento de ARD mediante un sistema combinado, cuyas ventajas, desventajas y eficiencia son desconocidas en el ámbito local. Indiscutiblemente se necesita evaluar los actuales sistemas de tratamiento de aguas residuales domésticas, dado que se han identificado las ventajas y desventajas (cuadro1) que comprenden los procesos aerobios y anaerobios en trabajos como el de Amin Goli (Amin Goli, 2019) pero no de un sistema combinado. Tabla 1 Métodos Biológicos Tipo Nombre común Aplicación Procesos aerobios - Cultivo en suspensión Procesos de fangos activados -Convencional (flujo en pistón) -Mezcla completa -Aireación graduada -Oxígeno puro -Reactor intermitente secuencial -Contacto y estabilización -Aireación prolongada -Canales de oxidación -Tanques profundos (30.0) -Deep shaft Nitrificación de cultivos suspensión Lagunas aireadas Digestión aerobia -Aire convencional -Oxígeno puro Eliminación de la DBO carbonosa (nitrificación) Nitrificación Eliminación de la DBO carbonosa (nitrificación) Estabilización, eliminación de la DBO carbonosa PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 21 Tabla 1 (Continuación) Tipo Nombre común Aplicación - Cultivo fijo Filtros percoladores Baja carga Alta carga Filtros de desbaste Sistemas biológicos rotativos de contacto (RBC) Reactores de lecho compacto Eliminación de la DBO carbonosa (nitrificación) - Procesos combinados Biofiltros activados -Filtros Percoladores con contacto de sólidos, procesos de fangos activados con biofiltros, proceso de filtros percoladores y fangos activados en serie Eliminación de la DBO carbonosa (nitrificación) Procesos anóxicos Cultivo en suspensión Desnitrificación con cultivo en suspensión Desnitrificación Nota. Nombres y aplicaciones de diversos tratamientos aerobios en la actualidad. Adaptado de Metcalf y Eddy. Ingeniería de Aguas Residuales. Tratamiento, Vertido y Reutilización. Tomo I. Tercera Edición. México: Mc Graw Hill, 2000. Por lo anterior, conviene examinar los procesos comúnmente utilizados en las Plantas de Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas (PTARD), con el fin de contar con la información necesaria para tomar decisiones sobre las alternativas que pueden llegar a ser eficientes en procesos de remoción de materia orgánica en ARD. En específico, urge evaluar aquellos tratamientos en los que intervienen el reactor anaerobio de manto de lodos y flujo ascendente o tipo Upflow Anaerobic Sludge Blanket (UASB) (Kujawa-Roeleveld y Zeeman, 2006), el tratamiento con participación de un Reactor Biológico Secuencial (RBS) que comprende un sistema de lodos activados que usa microorganismos aeróbicos, con un carrusel que presenta zonas con menor cantidad de oxígeno disuelto. De Lemos, 2013) y el sistema combinado entre estos dos reactores (Romero, 2016), que en el año 2019 se empezó a implementar en plantas como la PTARD Río Frío en el municipio de Girón (Santander-Colombia). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 22 Teniendo en cuenta lo anterior, el trabajo de grado titulado “Evaluación de procesos biotecnológicos aerobio, anaerobio y combinado para el tratamiento de aguas residuales domésticas” se justifica en la medida que analiza esos procesos biotecnológicos con el ánimo de evaluar la operación actual y desde allí contribuir en la búsqueda de soluciones y optimizaciones en los TARD utilizados actualmente. Además, al evaluar la viabilidad de un sistema combinado se puede comprender su funcionamiento desde sus bases no solo fisicoquímicas sino también microbiológicas, hasta la implementación y evaluación del funcionamiento. Igualmente, el analizar las características comparativas y diferenciales de los sistemas por separado y en conjunto permite tener una idea más clara acerca de los impactos medioambientales de las ARD tratadas con los mencionados bioprocesos. Asimismo, con el análisis que se hizo en este trabajo del uso de microorganismos capaces de degradar materia orgánica disuelta en el agua residual (reacciones de óxido-reducción), se comprenderían y aprovecharían las condiciones físico-químico y microbiológicas que influyen en las cinéticas microbianas y que guían la selección de un proceso biológico en una PTAR. Además, se contribuiría a la conservación medioambiental del recurso con alternativas de mejora a la remoción de materia orgánica previa al vertimiento de ARD en fuentes hídricas. Más adelante en el estado del arte y en análisis de vigilancia tecnológica se contrastará información con otros trabajos de investigación existentes que abordan principalmente el estudio de los procesos de tratamiento aerobio y anaerobio por separado Por último, se expone en esta introducción el contenido del documento, empezando por el problema de investigación orientado a conocer qué tan viable es la operación de un sistema combinado aerobio-anaerobio en el tratamiento de ARD, el objetivo principal que fue el de evaluar los sistemas biotecnológico de tratamiento de ARD y la metodología seguida que PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 23 comprendió tres fases: un análisis bibliométrico y vigilancia tecnológica, el análisis y resultados de la caracterización de ARD y la determinación de cinéticas microbianas. Todo ello, expuesto en los siguientes capítulos. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 24 Problema de Investigación Planteamiento del Problema Según conclusiones del Informe Mundial de la Unesco sobre el Desarrollo de los Recursos Hídricos 2017 “se estima que en el mundo más del 80% de las aguas residualesse vierte al medio ambiente sin tratamiento alguno. Las consecuencias son inquietantes. La contaminación del agua en la mayoría de los ríos de África, Asia y América Latina es cada vez peor. Cada vez son más las zonas muertas desoxigenadas en mares y océanos a causa del vertido de aguas residuales sin tratar, lo cual afecta a los ecosistemas marinos con repercusiones en la industria pesquera, medios de subsistencia y cadenas alimenticias” (UNESCO, 2017). Ahora bien, desde 2015 la Asamblea General de las Naciones Unidas aprobó la Agenda de Desarrollo Sostenible 2030 y entre lo propuesto se encuentra el caso del ODS 6, que consiste en “garantizar la disponibilidad y la gestión sostenible del agua y saneamiento para todos” (ONU Agenda 2030, 2017), pero como se menciona en el artículo titulado “La gobernanza del agua como marco integrador para el cumplimiento de los Objetivos de Desarrollo Sostenible en Latinoamérica”, el prestar un servicio de saneamiento para todos sus habitantes es una gestión cada vez más compleja de alcanzar (Fernández-Vargas, 2020). El 70% del planeta está cubierto por agua y la disponibilidad de recursos hídricos en el mundo no es heterogénea. América es el único continente donde los recursos hídricos se encuentran en un porcentaje mayor con relación a su población. Latinoamérica cuenta con el 6% de la población mundial y el 12% del territorio y un tercio del agua mundial. De acuerdo con el porcentaje de población que accede al saneamiento, este es menor que el de acceso a agua potable, como por ejemplo en Haití que cuenta con un 30% en comparación con cerca del 90% en Uruguay. 117 millones de latinoamericanos, que equivale al 20% de su población, no posee PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 25 saneamiento y aunque la situación ha mejorado en las últimas décadas con respecto al sudeste asiático y África, la calidad del agua sigue sufriendo afectaciones hasta el punto que en 2004 las muertes por diarrea fueron mayores al 50%, constituyéndose en problema de salud pública en el contexto mundial (Fernández, 2018). De acuerdo con estudio referenciado en el informe de la Unesco de 2017, de 181 países, únicamente 55 contaban con información en materia de generación, tratamiento y aprovechamiento de aguas residuales, mientras los 126 restantes contaban con información parcial, desactualizada o nula. Así, “Este cuello de botella con respecto a la información impide realizar las actividades de investigación y desarrollo necesarias para diseñar tecnologías innovadoras y adaptar las existentes a las necesidades y características locales” (Unesco, 2017). Se está entonces ante una amenaza antropogénica, basada en gran parte, en el desconocimiento de mecanismos, técnicas y tratamientos que mitiguen efectivamente el daño generado al medio ambiente por inadecuado tratamiento de aguas residuales domésticas. En Colombia, las Corporaciones Autónomas Regionales definen las amenazas antrópicas como un peligro latente generado por la actividad humana al contaminar agua, suelos o aires (CAR, 2020), pero infortunadamente, desde tiempos coloniales, en Colombia las aguas residuales han sido consideradas como desechos a ignorar. Sin embargo, como todos los países en el mundo, la población colombiana aumenta exponencialmente en igual proporción a la disminución del agua potable disponible y al incremento de caudales de aguas residuales, lo que ha obligado a acudir al uso de sistemas de tratamiento. Aunado a lo anterior, según información de la Asociación Colombiana de Ingeniería (ACODAL), solo el 31% de las ciudades colombianas cuenta con sistemas de tratamiento de sus ARD y sólo “el 29% de los sistemas existentes es de tipo preliminar (remoción de sólidos PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 26 gruesos, sedimentables, arenas, grasas) y no se conoce la eficiencia de los mismos (secundario, terciario y combinado)” (El Tiempo. Vida-Medio Ambiente. 22 de marzo de 2017). Actualmente, en las PTAR se utilizan tecnologías de tratamientos fisicoquímicos y biológicos del agua residual, que, dependiendo de las características del agua a tratar, requieren de la combinación de varios procesos que conforman el denominado ‘tren de tratamiento’ (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.), consistente en un tratamiento preliminar, primario, secundario y terciario. El presente trabajo centra su atención en los procesos biotecnológicos seguidos en el tratamiento secundario, que comprende la degradación de la materia orgánica disuelta, con un porcentaje significativo de remoción, pero que hoy por hoy se realiza todavía de manera heurística, conforme al desconocimiento sobre la fisiología microbiana que interviene para generar la conversión de los carbohidratos, proteínas o grasas que se encuentran disueltas en el agua. Además, actualmente son prácticamente inexistentes los estudios y evaluaciones de las características involucradas en el proceso conjunto (aerobio-anaerobio), que permitan a los operadores de las PTARD contar con la información necesaria para tomar decisiones sobre las alternativas eficientes en el tratamiento de ARD. Justificación Toda sociedad en el mundo necesita formas de tratar sus aguas residuales domésticas, ya sea de manera aerobia o anaerobia; sin embargo, también es incuestionable que ambos tratamientos presentan múltiples desventajas por separado y que aún son inciertas las afectaciones, especialmente ambientales, de la operación combinada. Es por esto que se justifica el presente proyecto, ya que permitiría evaluar la viabilidad del uso de un sistema combinado o PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 27 aquel que comprende el tratamiento de aguas residuales domésticas, primero con UASB y en segundo lugar, con sistema de lodos activados. Así mismo, el proyecto propuesto sería de gran utilidad en la toma de decisiones acerca de la operación de sistemas de tratamiento de aguas residuales con mínimas desventajas e impactos medioambientales negativos. Finalmente, la aprobación de esta propuesta brindaría la posibilidad de aportar desde el ámbito científico, a la solución de problemas que afectan a la sociedad contemporánea y que repercuten en el futuro de la humanidad. Pregunta de Investigación Lo anteriormente planteado, llevó a la pregunta-problema: ¿Cuál sistema entre aerobio- anaerobio y combinado genera mayor reducción de materia orgánica en el tratamiento de aguas residuales domésticas? PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 28 Objetivos Objetivo General Evaluar la capacidad de un proceso biotecnológico combinado anaerobio-aerobio, a partir del análisis de literatura, de la caracterización de muestras de ARD y de cinéticas microbianas involucradas en la degradación de la materia orgánica disuelta en el ARD, en cada sistema por separado y como sistema mixto (anaerobio- aerobio). Objetivos Específicos Analizar las técnicas y parámetros que se requieren para la evaluación de los sistemas objeto de estudio. Comprobar mediante caracterización fisicoquímica y microbiológica las propiedades de los procesos por separado y en conjunto. Determinar ventajas y desventajas de cada proceso por separado y en conjunto a partir del análisis de las cinéticas microbianas involucradas en la disminución de carga orgánica de cada sistema por separado y como sistema mixto. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 29 Línea de Investigación Este estudio se encuentra enmarcado en los planteamientos de la línea de investigación en ‘Aguas’, direccionada desde la Maestría en Biotecnología. También responde al compromiso institucional UDES que vela por la conservación de los recursos naturales y el fortalecimiento de los grupos de investigación (Proyecto Educativo Institucional, 2019-2028). Esto último,gracias al apoyo del grupo de investigación GAIA (Grupo Ambiental de Investigación Aplicada). Asimismo, al seguir la línea de investigación en aguas, este trabajo también responde al compromiso social y con el entorno, mediante aportes significativos para la toma de decisiones acerca de la operación de sistemas de tratamiento de aguas residuales con mínimos impactos negativos en el medio ambiente. Así, desde el ámbito científico, el desarrollo de trabajos en la línea de aguas brinda alternativas viables para la solución de problemas que afectan a la sociedad contemporánea y que repercuten en el futuro de la humanidad, mediante una mejor gestión de las aguas residuales que reduzca la contaminación en las fuentes y contribuya a la eliminación de contaminantes en los mismos flujos de ARD, la reutilización de aguas tratadas y la recuperación de subproductos útiles. Todo ello redundaría a su vez, en beneficios socio-ambientales, económicos, seguridad del agua, seguridad alimentaria y desarrollo sostenible de las localidades beneficiadas. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 30 Metodología La investigación se desarrolló a manera de estudio de corte transversal, mediante el análisis comparativo y evaluación de la capacidad de cada sistema individualmente y combinado desde el inicio del tratamiento secundario hasta el vertimiento del agua tratada en fuentes hídricas. La metodología seguida comprendió tres fases: primero, por medio de un análisis bibliométrico y de vigilancia tecnológica sobre el estado de la literatura pertinente hasta el momento, determinando los parámetros influyentes en el tratamiento de agua residual domestica por medio de procesos biológicos. (Ver Figura 0). Segundo, la fase de caracterización fisicoquímica y microbiológica de muestras de ARD tratadas por los sistemas UASB y RBS en forma aislada y en conjunto, permite identificar el funcionamiento de los procesos biotecnológicos. La tercera fase consistió en un análisis comparativo de las cinéticas microbianas involucradas en la disminución de carga orgánica de cada sistema por separado y como sistema mixto, para determinar la eficiencia de los procesos aislados y en conjunto. Primera Fase. Análisis Bibliométrico y Vigilancia Tecnológica En la primera etapa se hizo un análisis bibliométrico con el fin de valorar los resultados de la actividad científica, el impacto de investigaciones y el conocimiento generado en el tema de los TARD. El análisis bibliométrico es “una medición cuantitativa que permite describir detalladamente una gran cantidad de información bibliográfica mediante la evaluación de desempeño y mapeo científico de la producción, divulgación y uso de la información reportada por la comunidad científica (Noyons y Moed, 1999). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 31 Como se explicará en el capítulo de Análisis bibliométrico de 4000 artículos científicos originales consultados inicialmente, publicados en los últimos quince años en revistas indexadas de la base de datos bibliográficos Scopus, se filtraron mediante ecuaciones de búsqueda estratégica 3.827 documentos. Los artículos filtrados se analizaron con ayuda de la herramienta informática software de uso libre RStudio® versión 4.1.1 (RStudio, 2021). Así, se realizó un análisis cuantitativo de 3 827 artículos, a partir de la evaluación de desempeño y mapeo científico (Raan, 2009) de la producción intelectual usada y reportada por la comunidad científica desde 2006 hasta 2021. En la evaluación de desempeño se examinó la estructura de las publicaciones y el factor de impacto de citas de información recuperada (títulos, citación, autores, resumen y palabras clave) de la base de datos bibliográficos Scopus de Elservier. Asimismo, el mapeo científico permitió identificar la dinámica de las investigaciones publicadas. La consulta inició con la ecuación de búsqueda en Scopus: “𝑤𝑎𝑠𝑡𝑒 𝑤𝑎𝑡𝑒𝑟 𝑡𝑟𝑒𝑎𝑡𝑚𝑒𝑛𝑡” 𝑂𝑅 “𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙 𝑤𝑎𝑡𝑒𝑟” 𝐴𝑁𝐷 “𝑑𝑜𝑚𝑒𝑠𝑡𝑖𝑐 𝑤𝑎𝑠𝑡𝑒 𝑤𝑎𝑡𝑒𝑟”𝑜𝑟 “𝑚𝑢𝑛𝑖𝑐𝑖𝑝𝑎𝑙 𝑤𝑎𝑡𝑒𝑟 𝑡𝑟𝑒𝑎𝑡𝑚𝑒𝑛𝑡” (2) De lo anterior se obtuvieron registros de 4000 artículos científicos originales, publicados en revistas indexadas entre 2006 y 2021 limitadas por la siguiente ecuación de búsqueda: 𝑇𝐼𝑇𝐿𝐸 − 𝐴𝐵𝑆 − 𝐾𝐸𝑌 "treatment plant" OR "domestic waste watter" AND ALL "anaerobic digestion" 𝐴𝑁𝐷 "activated sludge" 𝑂𝑅 𝐾𝐸𝑌 "UASB" AND "BSR" 𝐴𝑁𝐷 𝐴𝐵𝑆 "biological reactor" (3) Posteriormente, se empleó el software de análisis de datos bibliográficos RStudio® versión 4.1.1 de uso libre, que, mediante ecuaciones de búsqueda estratégica, permitió filtrar 3 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 32 827 documentos, principalmente artículos científicos y revisiones bibliográficas sobre las temáticas y técnicas de tratamiento de ARD con sistemas aerobio, anaerobio y combinado. Esto constituyó el 90% de las publicaciones. Este análisis permitió identificar las principales redes de trabajo científico, el desarrollo de la producción científica en los últimos 15 años hasta el año 2021, la profundización e intercambio conceptual y técnico y los principales ejes temáticos estudiados sobre los TARD. Todo esto fue esquematizado en cuatro gráficas con la ayuda del mencionado software. El porcentaje restante fue objeto de vigilancia tecnológica y se distribuyó en 1 documento público oficial de una PTAR municipal, 4 artículos, 2 tesis doctorales, 1 tesis de maestría, 1 de especialización y dos de pregrado. Entonces, en el séptimo capítulo de este trabajo se realizó la vigilancia tecnológica o “proceso organizado, selectivo y sistemático para captar información del exterior y de la propia organización sobre ciencia y tecnología” (Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación de España,2006), del Reglamento Técnico del Sector de Agua Potable y Saneamiento Básico para Colombia (RAS 2000), cuatro artículos que trataban el sistema combinado (anaerobio-aerobio), dos tesis doctorales (una sobre digestión anaerobia de residuos agrícolas y otra sobre tratamiento biológico aerobio de aguas residuales), una tesis de maestría (tratamiento anaerobio de aguas residuales de industrias de descarne), una monografía de especialización (sistemas de PTAR en Colombia) y dos trabajos de pregrado, uno en biología (aplicaciones de la microbiología predictiva en la industria alimentaria) y otro de ingeniería civil (evaluación de la remoción de carga orgánica en TARD). Con el fin de obtener información externa y local sobre ciencia y tecnología en TARD con sistemas aerobio, anaerobio y combinado, los indicadores tenidos en cuenta fueron: el PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 33 indicador de citación, el factor de impacto (registrado por cada revista) e indicadores de contenido (palabras clave, descriptores y clasificaciones estandarizadas por Tesauros (https://www.eionet.europa.eu/gemet/es/themes/). Segunda Fase. Caracterización Con el fin de caracterizar fisicoquímica y microbiológicamente los procesos por separado y en sistema combinado, se recolectaron semanalmente un total de 2800 muestras de ARD, durante un año, desde cuatro puntos distribuidos desde la entrada hasta la salida del sistema combinado (Figura 2) y 54 muestras de lodo (inóculo) tomadas también semanalmente de cada sistema en el año 2019. Figura 1 Puntos de Recolección PTAR Río Frío Nota. Imagen sobre los puntos de muestreo tomados de la planta, Los puntos rojos ilustran los lugares del muestreo incluyendo el Punto de Entrada y Punto de Salida. Tomado de Google Earth. http://www.eionet.europa.eu/gemet/es/themes/) http://www.eionet.europa.eu/gemet/es/themes/) PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 34 Las muestras se dividieron en muestras de ARD y de inóculo (Figura 2). Las primerasestaban compuestas de alícuotas y fueron tomadas cada hora durante 24 horas en un año, para identificar el grado de degradación de materia orgánica en cada sistema por aparte y en el combinado. También se tomó el inóculo, indicativo de degradación microbiana del manto de lodo del UASB y del lodo del área ventilada del RBS, llamado licor mixto. Las muestras de inóculo se guardaron en botellas plásticas, cerradas con tapa de rosca y se preservaron en refrigeración a 4°C durante un mes antes del análisis microbiológico. Figura 2 Muestras de ARD Nota. Imagen sobre las muestras tomadas de agua y lodo de los distintos puntos de muestreo. Para determinar ventajas y desventajas de cada proceso por separado y en conjunto, se realizaron análisis de las muestras recolectadas a partir de monitoreo y según parámetros de la metodología Standard Methods (Tabla 1). Además, se realizó el análisis de parámetros medidos mensualmente en comparación con los resultados obtenidos en periodos de sequía y de lluvia. Del mismo modo, gracias al análisis bibliométrico se determinaron las propiedades fisicoquímicas del ARD tratada en sistemas UASB y RBS. Aquí fue importante también reconocer los parámetros y aplicaciones de los métodos biológicos de TARD (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.). Esto PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 35 último porque, la “integración de todos los parámetros permite entender la operación de un bioproceso” (Samboni y otros, 2007). En detalle se tuvieron en cuenta dos tipos de monitoreo: el monitoreo de eficiencia y de estabilidad. Con el primero se estableció el comportamiento de cada unidad y su desempeño de acuerdo con especificaciones de diseño. Específicamente se midieron parámetros de Kit de Sólidos (Sólidos Suspendidos Volátiles (SSV), Solidos Sedimentables (SS) y Sólidos Totales (ST)), Demanda Química de Oxígeno (DQO), Demanda Biológica de Oxígeno (DBO5) y determinación de microorganismos patógenos. De otro lado, el monitoreo de estabilidad dependió del tipo de reactor. Así, en el reactor anaeróbico se monitorearon durante la digestión anaerobia, las variables de pH, Ácidos Grasos Volátiles (AGV), alcalinidad (Potencial Buffer) y generación de metano. Mientras en el proceso aeróbico fue necesario examinar la cantidad de oxígeno disuelto en ARD y flocs característicos presentes en el agua (Orozco, Triviño y Manrique, 2014). Asimismo, con el objetivo de comparar niveles de eficiencia obtenidos en cada proceso autónomo y en correlación se aplicó el Método de Titulación. Este método consiste en generar cambios de ácidos-base para comprender la actividad química según “naturaleza corpuscular de la materia, teoría cinética molecular, naturaleza y composición de soluciones, estructura atómica, ionización, vínculos iónicos y covalentes, entre otros” (Raviolo y Farré, 2017). Con este método se compararon niveles de alcalinidad y se determinaron los AGV. Métodos y Reactivos. Esta caracterización se realizó en los laboratorios de la Universidad de Santander (UDES) ubicados en el campus de Lagos del Cacique, en los laboratorios LIA, Aguas y Procesos, localizados en el bloque MUISCA; y los laboratorios Bacteriología (4005), Bioquímica de PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 36 Microrganismos (4004), Hematología (4002) y Correlación (4001) del bloque Chibcha. En los siguientes cuadros se relacionan los equipos de laboratorio y reactivos utilizados: Tabla 2 Parámetros Medidos en Cada Proceso Según Standard Methods Clasificación Parámetros Método Ácidos Grasos Volátiles (AGV) Anderson, G.K & Yang, G (1992) Water environment research 64, p 53 - 59. Método titrimétrico Turbidez SM edición 23 (2017) método 2130 Turbidity, B. Nephelometric Method Potencial Iónico (pH) SM edición 23 (2017) método 4500 pH, H, B. Electrometric Method Conductividad SM edición 23 (2017) método 2510 Conductivity, B. Laboratory Method Solidos Disueltos Totales SM edición 23 (2017) método 2540 Solids, C. Total Dissolved Solids Dried at 180°C Físico-químicos Alcalinidad SM edición 23 (2017) método 2320 Alkalinity, B. Titration Method Kit de sólidos (ST, SV, SSV,SST and SS) SM edición 23 (2017) método 2540 Solids, B. Total Solids Dried at 103–105°C, E. Fixed and Volatile Solids Ignited at 550°C. F. Settleable Solids Demanda Química de Oxígeno SM edición 23 (2017) método 5220 Chemical Oxygen Demand (COD), D. Closed Reflux, Colorimetric Method Índice Volumétrico del Lodo Método de evaluación de los lodos por medio IVL desarrollado por Mohlman utilizado por varios investigadores como (Silverstein & Schroeder, 1983; Rittmann & McCarty, 2001; Metcalff & Eddy, 2003; Rössle et al. 2009; Wett et al. 2011). Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) SM edición 23 (2017) método 5210 Biochemical Oxygen Demand (BOD), B. 5-Day BOD Test Grupos Tróficos (GT) Diaz-Baez, M (2002) p. 152 -165 y Sandoval, C (2009) Waste Managenment 29. 704 - 711. Método del Numero más Probable (MNP). Microbiológicos Coliformes Totales (CT) IDEAM (2007). TP0314 versión 03. Método de filtración por membrana en agar Chromocult. TP0423 versión 02. Método del Número más Probable, modificado con medio LMX en tubo. Coliformes Fecales (CF) Actividad Metanogénica Específica (AME) Diaz-Báez, M (2002) p.108-116 y Angelidaki, I (2009) Water Science & Technology - WST 59.5. 927 - 934. Nota. Metodologías utilizadas para realizar los análisis físico-químicos y microbiológicos. Adaptado de Angelidaki y otros (2009), Rössle y otros (2009), Silverstein, J. & Schroeder, E. (1983), Rittman, B. E. & Mccarty, P. (2001) Metcalf & Eddy (2003). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 37 Tabla 3 Reactivos Utilizados en Caracterización de Muestras de ARD Reactivo Marca Identificación Rango Kit fosfatos HACH 21060-69 0,02 – 2,5 mg/L de PO4 Kit de cloruros HACH 24441-00 0,1 -10 mg/L NO3 Y 0,3 – 3 mg/L NO3 - N Kit de Nitratos HACH 21061-69 0,002- 0,3 mg/L NO2- N Kit de nitritos HACH 21071-69 N.A Caldo Fluorocult MERCK 1.10620.0500 N.A Medio de cultivo Chromocult OXOID CM1046 N.A Nota. Reactivos utilizados por marcas comerciales en la medición de parámetros químicos y microbiológicos. Materiales. Tabla 4 Equipos de Laboratorio Equipo Justificación Identificación Nevera Conservar muestras LG GC – 132Sserial: 2008TRZY0C005, LG GC-131S 003TRYD02010 Colorímetros Medición de absorbancias HACH DR 890 y 900 seriales: 120690C90242 y 171280001055 Termo reactor Medición de DQO HACH DRB serial: 11060C0139 Vortex Homogenización de muestras Velp scientifica F202A0173 serial: 205240 Muflas Determinación de solidos E&O MD2.2 209 y PINZUAR PG191 serial : 144 Horno Determinación de solidos BINDER FD-S 115 serial: 20180000014595 Balanzas Preparación de medios y determinación de solidos Precisa XB220A serial : 3105266 y OHAUS PIONNER 3200 serial: B612258646 OHAUS PIONNER3200 serial: B6122401108 Cabina Esterilización para inocular anaerobios Esco Clase II BSC serial : 116726 Incubadoras Incubación de las muestras para el cultivo microbiano BINDER serial: 970506 , HAC BOD TRACK II , serial : 15040CD05408 y MERMMERT ALEMAN 160 single display D 516.0036 y BINDER WTB 960384 Autoclave Esterilización del material sucio y limpio CI DENTAL automat 15000 serial: 150- 0018 Microscopios Observación de microorganismos de interés Leica DM 750P Serial: 11804007 Bomba de vacío Determinación de solidos ROCKER serial: 16741-11-AIEA026 y Rocker 410 167410-11-AIEA029 Espectrofotómetro Medición de absorbancias PROVE 300 Merck serial: 1927314131 Nota. Equipos utilizados en la medición de los parámetros presentes en el documento PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 38 TerceraFase. Determinación y Análisis Comparativo de Cinéticas Microbianas En esta fase se determinaron las cinéticas microbianas en cada uno de los procesos conforme al comportamiento microbiano y se definieron las características de cada proceso. Luego, junto con los resultados de la etapa anterior, en esta fase se procedió a calcular la cantidad de inóculo, sustrato y producto en cada uno de los procesos. Así, se logró elaborar la esquematización del análisis comparativo de la calidad del efluente de los tres procesos. El análisis de cinéticas microbianas para las muestras de ARD caracterizadas partió de la determinación de coeficientes de la cinética del crecimiento microbiológico. Para determinar esta cinética de crecimiento se tomaron muestras de ARD tratadas en sistemas aerobio, anaerobio y mixto. En los sistemas los microorganismos contaban con condiciones óptimas para su crecimiento: pH entre 7,1 y 7,9; temperatura de 20,1- 23,6 °C y oxígeno suficiente. Los datos obtenidos del análisis de cinéticas microbianas se cruzaron con los resultados de la caracterización físico-química y microbiológica mencionados en el capítulo anterior y con observaciones microscópicas. Figura 3 Metodología PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 39 Estado del Arte Recordando lo mencionado en el planteamiento del problema, el agua se ha convertido en un recurso cada vez más escaso en el ámbito global, especialmente por las características de la vida urbana actual que urgen una mayor producción de agua. Además, cada día aumenta la descarga de aguas residuales e incluso ha variado la composición de los vertimientos. Esta cuestión ha llevado a considerar el tratamiento de aguas residuales como asunto de suma importancia para el desarrollo humano mundial. En ese sentido, son pertinentes los estudios realizados que afirman que las PTAR son infraestructuras que garantizan la seguridad del medio acuático y ayudan a lograr un desarrollo urbano sostenible, al jugar un papel vital en la protección de las aguas locales y por ello se debe garantizar un funcionamiento eficiente y estable (Zhang et al, 2019). En el contexto mundial, mientras en Europa y Norteamérica se usa principalmente la tecnología aerobia para el tratamiento de aguas residuales, en países como Colombia, Brasil, México, China o India se han adaptado tecnologías de tratamiento anaerobio, “destacándose la aplicación de reactores anaerobios de manto de lodos y flujo ascendente, conocido como UASB, por su sigla en inglés Upflow Anaerobic Sludge Blanket” (Kujawa-Roeleveld y Zeeman, 2006). Por los incrementos de costos y disponibilidad de terrenos al ritmo del crecimiento urbano, el Reactor de Flujo Ascendente (RALF) o UASB presenta ventajas que lo hacen un proceso competitivo en los ámbitos tecnológico y económico frente otros procesos convencionales. A escala industrial es el reactor anaerobio más utilizado ya que en un estudio constituyó 739 (64,5%) de las 1229 unidades de tratamiento anaeróbico, además Japón, Alemania, Holanda, Estados Unidos e India son los países líderes con estas instalaciones (Gandarillas y otros, 2017). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 40 Los países pioneros en el ámbito mundial en “la aplicación de la tecnología anaerobia con reactores UASB para el tratamiento de aguas residuales domésticas en condiciones de clima tropical” (Torres, 2012) son Brasil y Colombia. En este último, se destacan los estudios de Schellinkhout y Collazos, cuyas investigaciones en PTAR pilotos a escala de aplicación de UASB en tratamiento de aguas residuales resultaron en diseño, construcción y operación inicial de una planta de “160, 000 PE (31, 000 m3/d, 8 MGD) en Colombia, consta de una serie compuesta por un reactor UASB y una laguna facultativa, describiendo las posibilidades y limitaciones del uso de hormigón prefabricado como material de construcción. El costo de la construcción de la planta fue de 17 USD per cápita, junto con el costo de operación y mantenimiento ascendió a 150 USD per cápita” (Schellinkhout y Collazos, 1992). En Brasil sobresalen los estudios adelantados por Vieira y García acerca de un reactor de 120 m3 para tratamiento de aguas residuales domésticas, diseñado y construido “basado en los resultados obtenidos mediante la operación de una unidad piloto de 106 L. Este sistema se operó durante cuatro años con fines de demostración y desarrollo tecnológico” (Vieira y García, 1992). De otro lado, estudios de van Haandel y Lettinga en un reactor de 160 m3 cuyos desarrollos a partir de datos experimentales de expresiones empíricas para la reducción de DQO, confirmaron que el reactor UASB es uno de los más eficientes entre varias modalidades de tratamiento anaerobio (van Haandel et al, 2006 citado por Torres, 2012). En síntesis, las experiencias colombiana y brasileña han sido referentes mundiales para la difusión e implementación de la tecnología UASB aplicada al tratamiento anaerobio de ARD, en América Latina y en otros países como Egipto, Islas Mauricio, China e India (Wiegant, 2001). La atención en los últimos años se ha enfocado hacia el desarrollo de sistemas de depuración efectivos, incluyendo procesos terciarios que implementan procesos continuos con PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 41 eliminación de carga orgánica y nutriente. Como una alternativa a estos sistemas de tipo continuo se han utilizado sistemas de tratamiento biológico de lodos activados de flujo discontinuo, cuyas fases de reacción y decantación se realizan en un solo tanque llamado Reactor Biológico Secuencial (RBS) (Cárdenas et al, 2012). Con la finalidad de mejorar la calidad del agua en tratamiento de aguas residuales del centro de Maricultura de Waddle (Carolina del Sur E.U.), se realizó un RBS para el tratamiento de aguas residuales generadas por la industria camaronera, como una variación del proceso de tratamiento biológico de lodos activados. Este proceso utilizaba varios pasos en un mismo tanque, reemplazaba múltiples tanques y se lograba la corrección del pH, la aireación y la clarificación en una secuencia cronometrada en un tanque simple (Torres y Yauri, 2019). Con respecto al avance del sistema de lodos activados, este fue desarrollado en Inglaterra en 1914 por Arden y Lockett y consistía básicamente el contacto de aguas residuales con floc biológico, previamente formado en un tanque de aireación (Romero, 2016). El proceso de mezcla completa fue mejorado Kraus, operador de una planta en Illinois en 1955, para tratamiento de aguas residuales con concentración alta de carbohidratos y deficientes en nitrógeno. Años más tarde Smith y Eckenfelber desarrollaron el proceso de estabilización y contacto que saca ventajas de las características adsortivas del lodo activo, proceso que se basa en el fenómeno de biosorción, que ocurre en lodos activados (2016). En 2011, Mardani y otros, con su investigación titulada Determination of Biokinetic Coefficients for Activated Sludge Processes on Municipal Wastewater determinaron los coeficientes y la eficiencia biocinética para tres procesos de lodos activados que incluyen la aireación convencional y prolongada y la estabilización por contacto a escala piloto, durante un PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 42 periodo de seis meses en la planta de tratamiento de aguas residuales municipales del sur de Isfahán (Irán). Los resultados mostraron una eficiencia de eliminación de DQO que variaba para el proceso convencional entre 83 y 92,5%, para el proceso de aireación extendida entre 88 y 93,8% y para el proceso de estabilización por contacto 77 y92%. La DQO del efluente se simuló utilizando los coeficientes de biocinética determinados durante el estudio (Mardani, 2011). En Colombia, la primera planta piloto en aplicar la tecnología anaerobia con reactoresUASB para tratamiento de ARD en condiciones de clima tropical fue la PTAR de 64m3 construida en Cali en el año de 1982, “habiéndose obtenido a una temperatura de 25°C resultados satisfactorios, con eficiencias de reducción de DQO y DBO mayores de 75 %” (Schellinkhout et al., 1985; Lettinga et al., 1987 citados por Torres, 2012). Años más tarde en la misma región del Valle del Cauca, se construyó la PTAR Vivero con capacidad para tratamiento de AR para una población aproximada de 20.000 habitantes. Luego, se construyó la ya mencionada PTAR Río Frío, “la planta de mayor escala del país con esta tecnología (población equivalente 300 mil habitantes) que en la actualidad reporta eficiencias de reducción para DBO5 del 73 %” (Aparicio, 2008). De acuerdo con la Superintendencia de Servicios Públicos Domiciliarios (Superservicios) se identificaron 622 plantas de tratamiento municipales en 2014 y 682 en 2017. En otras palabras, sólo el 48,2% o 541 municipios de 1122 ciudades colombianas tienen PTAR. La Superservicios también reportó que las principales PTAR de Colombia son “Cañaveralejo” en Santiago de Cali, “PTAR Salitre Fase I” en Bogotá, “San Fernando” en el Valle de Aburrá y la “PTAR Río Frío” en el Área Metropolitana de Bucaramanga, que reportan tendencias de agua residual tratada de 25,8, 26,7 y 27,7 m3/s, de 2015 a 2017 (Superservicios, 2018). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 43 Tabla 5 Tendencia de Flujo de Agua Residual Tratada en Colombia 2014-2017 Año Flujo de Agua Residual Tratada (litros por segundo) 2014 28.019 2015 25.779 2016 26.706 2017 27.734 Nota. Flujo de agua residual tratada durante 4 años. Adaptado de Superservicios, 2018. Como se observa en la tabla anterior, la cantidad de agua tratada ha disminuido con el transcurrir del tiempo y por ende la situación de saneamiento básico de la población colombiana. En su mayoría las PTAR colombianas aplican sistemas de tratamiento aeróbicos o de lodos activados (Lizarazo y Ortega, 2013). Pero, de acuerdo con el Plan Nacional de Tratamiento de Aguas Residuales Municipales, se desconocen porcentajes reales de remoción de materia orgánica, desempeños de operación, evaluaciones de los sistemas de tratamiento seguidos en la actualidad y flujos de agua residual tratada vertida a fuentes hídricas. Sin embargo, en este plan se estima que solo el 10% de las PTAR de Colombia tuvieron operaciones aceptables y garantizaron funcionamientos anuales (Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial de Colombia -MAVDT-, 2004). Por último, es necesario reconocer que en Colombia no se encuentran una tendencia estandarizada de selección del tratamiento biológico para remover la materia orgánica en sistemas de tratamiento de aguas residuales domésticas, sino que se recurre a decidir entre tanto sistemas aerobios, anaerobios como facultativos o la combinación de estos (Méndez, 2011). En el ámbito regional, la Corporación Autónoma Regional para la Defensa de la Meseta de Bucaramanga (CDMB) realizó diversos estudios, entre ellos el “Plan Integral de Saneamiento Ambiental y su Área Metropolitana, con las firmas consultoras Hidroestudios Ltda. y Black and PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 44 Veatch de Kansas City en 1981” (Gavassa, 2005). Estos estudios fueron previos a los inicios de la construcción de la PTAR Río Frío en 1985, cuando se sugirió el tratamiento de aguas residuales mediante la tecnología UASB. Más tarde, entró en operación la Laguna Facultativa, que se trata de otro sistema de tratamiento que consiste en la circulación del agua residual por una laguna profunda, cuya parte superior funciona como laguna aerobia, en su parte inferior como laguna anaerobia y en el estrato intermedio comprende una zona facultativa con presencia de microorganismos facultativos (2005). También con la asesoría de ingenieros holandeses, en 1988 se hicieron los estudios y “diseño de la PTAR Río Frío para la zona sur con reactores anaeróbicos tipo UASB con una capacidad para 160.000 habitantes…durante el periodo de 1988-1990 se construyó la PTAR Río Frío” (2005), que fue inaugurada ese último año. Así, la ciudad de Bucaramanga y su Área Metropolitana contaron para esa época con la tercera PTAR construida para el tratamiento de aguas residuales y descontaminación hídrica en Latinoamérica (Figuras 2 y 4). En el ámbito local, en la PTAR El Santuario (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.), situada en la vereda Guatiguará en el municipio de Piedecuesta, La Piedecuestana, Empresa Servicios Públicos (ESP) terminó las obras de fase III de la primera etapa de esa PTAR en el año 2017. Con una capacidad de 224 L/s para el tratamiento diario del 100% de las aguas residuales domésticas municipales, se devuelve un porcentaje entre 90-95% de remoción mediante el desarrollo de un proceso biológico aerobio en tanques aireadores para finalmente verter el agua tratada a la quebrada Suratoque y al Río de Oro. (Piedecuestana, 2017). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 45 Figura 4 Ubicación PTAR Río Frío Nota. Mapa ilustrando la distribución del área metropolitano, para la captura de agua. Tomado de Plan Estratégico 2016-2020 Empresa Pública de Alcantarillado de Santander (EMPAS). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 46 Figura 5 PTAR El Santuario Nota. PTAR el santuario (tratamiento aerobio tipo RBS). Tomado de https://piedecuestanaesp.gov.co/ Tabla 6 Principales Características de los Procesos Aerobios y Anaerobios Característica Tratamiento Aerobio Tratamiento Anaerobio Remoción de materia orgánica Alta Alta Calidad del efluente Excelente, posee del 5 -15% de DQO inicial Moderada o pobre, posee del 10 - 30% de DQO inicial Producción de lodos Moderada, el lodo corresponde al 30 – 40 % de DQO inicial, el cual requiere de un postratamiento para generar una mejor degradación de los compuestos. Alta, los lodos se encuentran con una cantidad baja de solidos de 2 a 8 veces inferior al que ocurre en procesos aerobios, el lodo corresponde al 5 -15% del DQO inicial. Potencial Buffer Bajo, ya que al contener un consorcio diverso presenta la capacidad de degradar compuestos que posean características distintas Alto, para algunos residuos que pueden contener altas cantidades de grasas y aceites se requiere una estabilización del reactor para no generar acidificación Requerimiento de energía Alto, la mayoría del DQO inicial se convierte en dióxido de carbono (40- 50%) por medio de reacciones de oxidación que requieren una concentración constante de oxígeno. Baja, la biomasa se puede preservar sin necesidad de alimentar el reactor por varios meses. Sensibilidad a temperatura Baja, el reactor posee la capacidad de nivelar los niveles de Alta, se recomiendan climas trópicos ya que los PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 47 temperatura al tener reacciones endo y exotérmicas microorganismos anaerobios son termófilos y prefieren la temperatura de 37°C Tiempo de puesta en marcha 2 – 4 semanas, el tiempo de estabilización puede ser mayor dependiendo de la constancia en la carga de oxígeno diaria. 2 – 4 meses, en caso de tener lodo semilla o inoculo el procedimiento disminuye en tiempo. Olor No genera malos olores Las reacciones anaerobias pueden generar malos olores por los subproductos. Subproductos Dióxido de carbono Metano y dióxido de carbono Nota. Características de los procesos aerobios y anaerobios, para aguas residuales domésticas. Tomado de Chernicharo, 2013 y Amin Goli, 2019 Para finalizar este estado del arte fue necesario identificar trabajos relacionados no solamente procesos de remoción biológica como lo son el aerobio y el anaerobio, sino que también se deben comprender procesosmixtos en los cuales se encuentran reacciones que involucran la oxidación y reducción de varios compuestos y dan como resultado un proceso aerobio – anaerobio. En ese sentido, en un Review on Anaerobic – Aerobic Treatment of Industrial and Municipal Wastewater (Chan et al, 2009), los autores realizaron un análisis sobre técnicas de tratamiento de agua residual que combinan reacciones en presencia o ausencia del oxígeno como aceptor final de electrones. Así, compararon los tratamientos aeróbico y anaeróbico (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.), el uso de reactores (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.) y tipos de sistemas de tratamiento combinado (¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.). Tabla 7 Comparación de Tratamientos Aeróbico y Anaeróbico Característica Aerobio Anaerobio Eficiencia remoción orgánica Alto Alto Calidad efluente Excelente Moderado a bajo Promedio de carga orgánica Moderado Alto Producción de sludge Alto Bajo PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 48 Requerimientos de nutrientes Alto Bajo Requerimientos de alcalinidad Bajo Alto para desperdicios industriales Requerimientos energéticos Alto Bajo a moderado Sensibilidad a la temperatura Bajo Alto Tiempo de inicio 2-4 semanas 2-4 meses Olor Poca presencia de olor Problemas potenciales de olor Recuperación de bioenergía y nutrientes No Si Tipo de tratamiento Total (dependencia de las características de alimentación) Pretratamiento Nota. Comparación de las características operativas del tratamiento aerobio y anaerobio. Tomado de Chan et al, 2009. Tabla 8 Uso de Reactores en Sistemas Combinados Aeróbico y Anaeróbico Procesos Tipo de Agua Efluente COD (mg/L) OLR (kg COD/m3d) Total de COD removido (%) COD anaeróbico removido (%) COD aeróbico removido (%) Total HRT (h o d) HRT anaeróbico (h o d) HRT (h o d) UASB+ CSTR Domestica 499- 2000 - 83-97 51-84 - 3,3 d 17 h - UASB+AS Domestica + Industria aceite de oliva 1800- 4400 3 - 7 95-96 70-90 >60 28.3 14.7 13.6 UASB + AS Domestica 386 – 958 - 85 – 93 69 - 84 43 - 56 6.8 4 28 UASB + AFB Industria textil y domestica 2700 4.8 80 50 60 20 10 10 UASB + Sistema de contacto sólido aerobio Domestica 341 2.6 - 34 - 3.53 - 6.2 3.2 0.33 - 3 Nota. Procesos combinados que se han simulado para agua residual doméstica y evaluar su funcionamiento. Tomado de Chan et al, 2009. PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 49 Marco Referencial Marco Conceptual Un concepto fundamental en este trabajo fue el de tratamiento de ARD. Esta expresión implica la conceptualización de un pretratamiento y tres tratamientos, a saber: el tratamiento preliminar o pretratamiento, tratamiento primario, tratamiento secundario y tratamiento terciario. El tratamiento preliminar, también llamado pretratamiento, se fundamenta en la eliminación de residuos que se puedan separar con facilidad, ya sea por el tamaño o por su naturaleza, mediante la distribución de materiales flotantes en el agua y la remoción de partículas que pueden llegar a interferir en procesos posteriores. El tratamiento primario consiste en una clarificación del agua residual a partir de la creación de sólidos de mayor tamaño, compuestos por pequeñas partículas. Los procedimientos de pretratamiento más conocidos: coagulación, floculación y sedimentación (Cruz y Herrera, 2018) El tratamiento secundario o tratamiento biológico tiene como finalidad la reducción de la materia orgánica presente en las aguas residuales, mediante su conversión en materia orgánica disuelta. Esto se realiza por medio de procesos biológicos que pueden ser aerobios, anaerobios, facultativos o la combinación de estos, dependiendo de la presencia o ausencia del oxígeno como aceptor final de electrones en el proceso de descomposición de la materia. El tratamiento terciario, también llamado ‘tratamiento avanzado’. Este tratamiento tiene como objetivo sustraer sustancias que permanezcan en las aguas aun después de todos los tratamientos anteriores para estabilizar el agua que va a verterse a la fuente hídrica (Ureta, 2020). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 50 Figura 6 Tipos de Sistemas Combinados Nota. Tomado de Chan et al, 2009. Aquí vale aclarar que el presente trabajo centra su atención en los procesos biotecnológicos seguidos en el tratamiento secundario, que comprende la degradación de la materia orgánica disuelta, con un porcentaje significativo de remoción, pero que hoy por hoy se realiza todavía de manera heurística, conforme al desconocimiento sobre la fisiología microbiana que interviene para generar la conversión de los carbohidratos, proteínas o grasas que se encuentran disueltas en el agua. Siguiendo con los principales conceptos utilizados en esta investigación está el término Biotecnología. Inicialmente es necesario diferenciarla de la biociencia, que es aquella entendida como la ciencia que enseña la organización interna de un organismo vivo, mientras que la biotecnología utiliza organismos vivos para un beneficio humano. Curiosamente los frutos de la biotecnología son evidentes en la vida cotidiana, pero a veces no nos damos cuenta. A pesar del desconocimiento general de la definición formal de biotecnología “una cosa es cierta, todos nos hemos beneficiado de productos como el yogurt, el queso, los antibióticos, detergentes y las PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 51 vacunas” (Khan, 2020). En ese orden de ideas, este proyecto se concentra en la evaluación del proceso biotecnológico de tratamiento de aguas residuales en sistema combinado tipo UASB y de Reactor Biológico Secuencial. Asimismo, en la Agenda de Biotecnología, publicada por la Universidad Nacional de Colombia en 2013, entre las clasificaciones actuales de biotecnología moderna se proponen cinco campos de acción: “biotecnología en salud humana (incluye aplicaciones en alimentos), biotecnología animal, biotecnología industrial, biotecnología vegetal y biotecnología ambiental” (Universidad Nacional de Colombia- UNAL-, 2013). Dentro de esta tipología, el presente trabajo investigativo se sitúa disciplinariamente en la Biotecnología ambiental, que comprende el uso de la biotecnología implicando la teoría y el enfoque hacia procesos o productos que influyan en el ambiente (Fulekar, 2010). Indiscutiblemente, otro concepto importante aquí es el del agua y principalmente el agua contaminada, que es aquella que se produce cuando una o más sustancias modifican las características del agua de alguna manera negativa y pueden causar problemas a las personas o animales (Crini y Lichtfouse, 2019). Comúnmente el agua contaminada deriva en agua residual. Las aguas residuales son subproductos de actividades domésticas, industriales, comerciales o agrícolas que se han convertido en un problema de carácter mundial (Xiang, 2020). Las aguas residuales generalmente contienen materia orgánica, materia inorgánica y organismos vivos (Aydin et al, 2017). Para medir el estado del ARD actualmente se tienen en cuenta los Índices de calidad del agua, “la metodología Delphi que utiliza como mínimo nueve parámetros Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5), Oxígeno Disuelto (OD), coliformes fecales, nitratos (NO3-), pH, cambio de temperatura, sólidos disueltos totales (SDT), fosfatos totales y turbiedad” (Samboni, 2007) y parámetros físico-químicos y microbiológicos: PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 52 Características Físicas de ARD a Medir con Parámetros Físicos. Sólidos: materia orgánica o inorgánica presente en el aguaen forma disuelta o en suspensión. Se determina cuantitativamente en mg/l. Entre ellos están: Materia flotante Sólidos Totales (ST) Sólidos Sedimentables (SS) Sólidos Suspendidos Totales (SST) Sólidos Disueltos Totales (SDT) Sólidos Suspendidos Volátiles (SSV) Olor: producto de gases liberados durante el proceso de descomposición de la materia orgánica (sulfato de hidrógeno, metano y oxígeno). Se determina cualitativamente. Temperatura: suele ser más elevada al agua suministrada debido principalmente a la incorporación de aguas con mayor temperatura procedente de diferentes usos. Se determina cuantitativamente en grados Celsius (°C). Densidad: definida como masa por unidad de volumen, expresada en kg/m3. Color: representa el tiempo de existencia del agua como agua residual. Se determina cualitativamente o cuantitativamente de manera espectrofotométrica. Turbiedad: se trata de la calidad de las aguas vertidas en relación con la materia coloidal y residual en suspensión. Se determina cualitativamente. Características Químicas de ARD a Medir con Parámetros Químicos. Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO) Demanda Química de Oxígeno (DQO) PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 53 Grasas y aceites Compuestos Orgánicos Volátiles (COV) pH Nitrógeno total Nitrógeno amoniacal Nitratos Nitritos Fósforo total Sustancia Azul de Metileno (SAM) Arsénico Cadmio Sulfato Cianuro Zinc Cobre Mercurio Níquel Plomo Bario Dureza Total (DT) Alcalinidad Total (AT) Sílice Cloruros PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 54 Azufre Cloro Microorganismos Presentes en ARD a Medir con Parámetros Microbiológicos. Aunque no se han estandarizado parámetros microbiológicos en TARD, es bien sabido que en el agua residual se encuentran presentes microorganismos que pueden identificarse y medirse con test microbiológicos. Los microorganismos presentes en ARD son procariotas (organismos con un núcleo no definido) y eucariotas (seres con un núcleo evolucionado o envuelto) (Figura 7). Dentro de esa clasificación predominan tipos de microorganismos hongos (Figura 8), bacterias (Figura 9), protozoarios (Figura 10), virus (Figura 11), algas (Figura 12) y arqueas (Figura 13). Figura 7 Microorganismos Presentes en Aguas Residuales Nota. Microorganismos presentes en agua residual doméstica. Adaptado de https://www.oocities.org/edrochac/residuales/microbiologia1.pdf https://www.oocities.org/edrochac/residuales/microbiologia1.pdf PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 55 Hongos. En las aguas residuales se encuentran principalmente levaduras y los filamentosos (Figura 8) Figura 8 Hongos Presentes en Aguas Residuales Nota. Hongos presentes en agua residual doméstica. Tomado de https://www.dicyt.com/viewItem.php?itemId=22166. Bacterias. Se dividen en gram positivas y gram negativas por la tinción de gram, que permite identificar las características que posee la membrana celular de las bacterias, y, por ende, sus mecanismos de acción en las aguas residuales. En el agua residual predominan especies de bacterias de Escherichia y bacterias coliformes (Figura 9). Figura 9 Bacterias Presentes en Aguas Residuales Nota. Se muestran los géneros de microorganismos coliformes totales y fecales. Fuente: Modificado de http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/simulacion/modulos/curso/uni_03/images/U3C3S704 .gif. https://www.dicyt.com/viewItem.php?itemId=22166 http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/simulacion/modulos/curso/uni_03/images/U3C3S704 PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 56 Protozoarios. Entre los protozoos que se encuentran frecuentemente en aguas residuales están las amebas, flagelados y ciliados libres (Figura 10). Figura 10 Protozoos Presentes en Aguas Residuales Nota. Entre los protozoos se encuentran las amebas y los protozoos ciliados. Adaptado de https://www.oocities.org/edrochac/residuales/microbiologia1.pdf.http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/simul acion/modulos/curso/uni_03/images/U3C3S704.gif Virus. El agua puede ser una de las principales vías de transmisión de agentes infecciosos como los virus, más aún si se trata de aguas residuales. Entre los principales virus identificados en agua están “Los virus entéricos que incluyen especies de diferentes familias y los más representativos por su impacto en la salud humana (polio, virus huérfano citopático entérico humano - ECHO, virus Coxsackie), los astrovirus, los adenovirus, los ortorreovirus, los calicivirus (norovirus y sapovirus) y los virus de las hepatitis A y E (3-5)” (Fong y Lipp citados por Peláez y otros, 2016). Asimismo, puede hallarse el Coronavirus en aguas residuales pues “Recientes estudios desarrollados sobre la excreción en heces del coronavirus asociado al síndrome respiratorio severo agudo (SARS) han demostrado la excreción de este nuevo patógeno emergente (que se diseminó de forma global a principios del año 2003) mediante técnicas de RTPCR en muestras clínicas de heces en un promedio de 27 días pudiendo a llegar en algunos casos a 126 días” (Bonfil-Mas y otros, 2005). Igualmente, en 2020 Hai Nguyen Tran y otros http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/simul PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 57 realizaron una revisión crítica de la presencia de coronavirus (Covid 19) en aguas residuales (Figura 11). Figura 11 Coronavirus Presente en Aguas Residuales Nota. Ciclo del Covid en fuentes acuíferas. Adaptado de H.N. Tran y otros, 2021 Figura 12 Algas Presentes en Aguas Residuales Nota. Adaptado de https://www.oocities.org/edrochac/residuales/microbiologia1.pdf.http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/de mos/simulacion/modulos/curso/uni_03/images/U3C3S704.gif. http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/de http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/de PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 58 Arqueas. En aguas residuales se encuentran arqueas (Figura 13), en su mayoría quimilitótrofas y autótrofas que pueden generar metano a partir de tres tipos principales de sustratos (Ferry, 2010), característica según la cual se distinguen tres subgrupos fisiológicos diferentes (Díaz y otros, 2014): a) Sustratos tipo CO2 (CO2, CO, formiato) que son reducidos con H2 (donador de electrones) por las arqueas metanógenas hidrogenotrófas. Son las mayoritarias en los digestores anaerobios. b) Sustratos metilados (metanol, metilaminas). Las metilaminas también pueden ser utilizadas como fuente de nitrógeno por las arqueas metanógenas metilotrófas. c) Acetato: las arqueas metanógenas acetotrófas o acetoclásticas producen la descarboxilación del acetato, reacción conocida como acetoclástica. Figura 13 Arqueas Nota. Microscopia de las archaeas presentes en reactores. Fuente: Salazar, 2008. https://repositorio.umsa.bo/bitstream/handle/123456789/242/TM-1735.pdf?sequence=1&isAllowed=y. Otro concepto de gran importancia en este trabajo fue el de Cinética microbiana. “la cinética microbiana es aquel desarrollo de un bioproceso que permite evaluar rendimientos y productividades, que son datos importantes para la generación de estrategias de optimización y producción de procesos” (Duarte, 1995). PROCESO BIOTECNOLÓGICO AEROBIO ANAEROBIO Y COMBINADO 59 Dado que los reactores contienen un cultivo que debe mantener una cantidad de microorganismos en crecimiento hasta un momento cuando la escasez de nutrientes exige un cambio de las condiciones, se ha determinado como cultivo el monofásico o de tipo batch fundamentado en las etapas de crecimiento que presentan los microorganismos. Esto se entiende como la curva de crecimiento microbiano,
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