BiolmolATHQumicaClnica198873171-178

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I REVISIONES
La biologia molecular en el estudio de la arteriosclerosis
M. Fontanals-Ferrera, J. Gomez-Gerique
Resumen
La presente revision i/ustra la importancia de fa biolo-
gfa molecular en el estudio de /a arteriosclerosis. El ais-
lamiento de clones de DNA de cierto numero de pro/ei-
nas ha permitidos a numerosos grupas profundit.ar en e/
eSludio de la re/adon de las lipoprote{nas con el proceSQ
artrogenica. £1 CQnocim;ento de la estructura de los ge-
nes y los polimorrlSmos genilicos permit/! e/ucidar algu·
nos de las bases gen/ricas de los defectos del metabofis-
rna Jipopro/eico contribuyendo por 10 tanto a una mayor
comprensiOn del proceSQ QterogenicQ y a fa prevencion
de la arteriosclerosis
Introduccion
La arteriosclerosis es uno de los principales problemas
sanitarios de la poblaci6n occidental. Su incidencia ha
ido en aumento de forma paralela al aumento de los es-
tandares de vida y de la duraci6n de la misma. Si bien
los factores ambienlales son parcialmente responsables del
aumento de este proceso, existen considerables diferen-
cias respecto al grado de riesgo individual. Tanto es asl
que podemos considerar a la arteriosclerosis como el re-
suhado de factores geneticos y ambientales. Uno de los
principales factores geneticos, es el relacionado con el me-
tabolismo de las lipoproteinas yael dedicaremos esta re-
visi6n de los datos que nos aporta la biologia molecular.
El criterio mas utilizado para el estudio de las varia-
dones geneticas enlre individuos es el poUmorflSmo en
la longitud de los/rogmentos de restricci6n (RFLPs). Este
polimorfismo se detecta mediante la formad6n de patro-
nes de hibridad6n de su DNA con sondas de DNA mar-
cadas radioactivamente, despues de la digesti6n con en-
a. Servicio de Bioqulmiea del Hospital de la Santa Cruz y San
Pablo. Avda. S. Anlonio M~ Claret. 167. 0802S BARCELONA.
Sumary
This review illustrates the importance ofmolecular bio-
logy in arteriosclerosis research. DNA clones for a num-
ber ofproteins have been isolated, and provide numerous
groups for the in-depth study of the role ofIiproproteins
in the atherogenic process. Studies ofgene structure and
genetic polymorphisms furnish information abaut the ge-
netic basis for defects in lipid and lipoprotein metabo-
lism. These studies contributes to our understanding of
the atherogenic process and prevention ofatherosclerosis
zimas de restricd6n. elcctroforesis en agarosa y transfe-
renda a fillros de nitrocelulosa1• El polimorfismo ocu-
rre cuando las mutaciones en la sccuenda del DNA crean
o destruyen lugares de reconocimiento de las enzimas de
restricci6n 0 bien cuando tiene lugar inserciones 0 delec-
dones de su DNA entre los lugares de reconocimiento de
dichas endonucleasas2• En cualquier case, el RFLP pue-
de actuar como marcador de diferencias a nivel genico
entre individuos. De esta manera, analizando los RFLPs
se pueden identificar alelos de un locus genetico particu-
lar que estaran asociados 0 no con unos fenotipos
c1inicosJ . En la figura I se indican algunos de los genes
relacionados con el metabolismo de las diferentes lipo-
protelnas (quilomicrones, lipoproteinas de muy baja den-
sidad (LDL) y lipoprotelna de alta densidad (HDL» y
su localizaci6n cromos6mica. Los genes correspondien-
tes a las prindpales apolipoproteinas y eI gen del recep-
tor de la LDL han sido localizados en cuatro cromoso-
mas. EI gen de la apolipoprotelna All se encuentra en
el brazo largo del cromosoma I, en la regi6n q2l q23...6 •
EI gen de la apolipoproleina B ha side localizado en el
brazo corto del cromosoma 2. entre 2pter_2p247-IS • Los
genes de las apolipoproleinas AI, cm y AIV han side
localizados en el brazo largo del cromosoma II, en la re-
gi6n q23 16-18. Otro grupo de genes apoproteicos, apolipo-
proleinas CI , ell y E han sido localizados en el cromo-
QUiMICA CLfNICA 1988: 7 (3) 17t
Apolipoprotcina AI
Figura 1. Localizaci6n cromos6mica de los genes apolipoproleicos
y del gen del receptor de LDL
La apolipoprolcina Al cs uno de los principales com-
ponentcs de In HDL. Sc han dctcctado algunas variantes
raras de esta apolipoproteina (AI Milano, Marburg,
Munster y Giessen) consistcntes cn variaciones de un ami-
noacido y asociadas con descensos de las concentracio-
nes de HD129•
la deficiencia de HDl tambicn ha sido asociada con
dos alteraciones diferentes del DNA del gen de la apoli-
poproteina AI. Asi se ha detectado un polimorfismo en
la secucncia de DNA adyacente al extrema 3' del gen de
la apolipoproteina Al en pacientes con deficiencia fami-
liar de apolipoproteina Al y apolipoproteina CIII des-
pues de la digestion con Eco RI y Pstl JO • Actualmente se
sabe que esta mutaci6n consiste en una insercion de 7,5
kb en el exon 4 que impide la produccion de la apolipo-
proteina AI. Posteriores estudios mostraron que eI DNA
insertado en el gen de la apolipoprotcina AI deriva del
de la apolipoprote1na CHI, el cual es adyacente al gen
de la apolipoproteina AIlS.)" En este caso, eI fenotipo al-
terado es debido a una reorganizacion del DNA detecta-
da como un RFlP debido a la aparicion de un lugar de
reconocimiento para dichas enzimas de restricci6n (figu-
ra 2), siendo un excelente ejemplo de como la biologia
molecular ha sido usada para unir una lesi6n genetica es-
pedfica con enfermedad cardiovascular premalura)O-J2.
Por otro lado, se ha detectado un polimorfismo debi-
do a la ausencia de un sitio PstI en la regi6n intergenica
de las apolipoproteinas Al y cm (adyacente al extremo
3' del gen de la apolipoproteina AI). AI examinar la fre-
cuencia del alclo mutado se demostro que era significa-
tivamente mayor en pacientes con enfermedad cardiovas-
cular prematura y sujetos con hipoalfalipoproteinemia
familiar que en la poblacion controJ33.
Algunos autores, al estudiar esta misma regi6n del cro-
mosoma, han hallado asociacion entre un RFlP con
Sael, al que pertenece eI alelo 52 y la enfcrmedad
cardiovascularJ4 . Sin embargo, se han descrito variacio-
nes de la frecuencia del alelo S~ entre razas 0 entre sub-
grupos geneticos de una razaJ5 , En vistas de la existen-
cia de varias enzimas de restricci6n con lugares de
reconocimiento en esta zona se han utilizado combina-
ciones de las mismas (Mspi, PSl!, Sst!) para definir ha-
plotipos en la region apolipoproteina A!-CIII-AIY. Sin
embargo, estos analisis simultaneos no mejoran los re-
sultados obtenidos con Sst I soloJS,
19
~
E
C,
C"
rLDL
112
A"
soma 191~.1J. En el cromasoma 19lambicn se cncuentra
el gen para el receptor de la LDL. en la region
pter_pI3 19.24 •
La caracterizaci6n de los genes de las apolipoprotei-
nas AI, All, AIV, CI, ell y E apoya la hip6tcsis de que
los genes de las apolipoproteinas proceden de un gen an-
cestral comun 25_21 y nos pcrmilc aSlimir que los genes li-
poproteicos constituycn una familia, aunque por ahara
no sc sabc si el gen de la apolipoproteina B forma pane
de la misma28 •
gt'll normal:
ECORI PST1 PST] ECORI... *' 2
, 4 * *'. • /t Ij,t I •." 3'
gCIl IllUl;ldo:
J,.I 2 , 4
" "
i
ECaRl PSTl
ADN inscn<tdo
Figura 2, Gen de la apolipoproteina AI. Estructura normal y mutada. Los tra1.O, negro, represenlan los ellones 1-4.
172 QUfMlCA CLlNICA 1988; 7 (3)
MSPI
~
"
2 3
3'
FiRUI'lI J_ Gen de la apolipoproleina All. Los Ir3Z0S negros reprt'Seman los c:xones 1-4. Ellugar polimorfico Msp viene indicado por·.
Para termioar nos referiremos a un polimorfismo con
Xmnl, que detecta variacion cn el gen de la apolipopro-
teioa AI, asociado con hiperlipoprolcinemia tipo 2b, tipo
III Ytipo V Ya un polimorfismo con Msp, que dctecta
una variacion del DNA de un intr6n del gen de la apoli-
poproteina AI, asociado con hipertrigliceridemia~!.
Es probable que la mayoria de estas variaciones del
DNA no sean en si mismas razon suficiente de enferme-
dad cardiovascular, pero las asociaciones son suficienle-
mente fuertes como para sugerir que las alteraciones ge-
netkas comentadas estan de alguna manera relacionadas
con anormalidades en el metabolismo de las lipoprotei-
nas y como consecuencia con la susceptibilidadde arte-
riosclerosis. A pesar de lodos los datos de que dispone-
mos sobre los polimorfismos de la apolipoproleina AI
queda mucho trabajo por hacer para que podamos lIe-
gar a detcrminar que lesiooes especificas del DNA son
responsables de esos feootipos cHoicos.
Apolipoprofeina All
La apolipoproleina All es el segundo mayor compo-
nente proteico de la HDL. En el gen de 1a apolipoprOlei-
na All, que se encuentra en eI cromosoma 14-6, se ha
descrilo un polimorfismo para Mspl en el extremo 3' del
DNA, debido a la pcrdida de un lugar de reconocimien·
10 para dicha enzimaJ6 (figura 3). A pesar de que la base
molecular del polimorfismo lodavia no se ha eSlableci-
do, secuencias de reconocimienlo que contienen eI dinu-
c1eolido CpG son los lugares donde la mutaci6n es mas
comun. Las secuencias CpO son zonas de DNA relativa-
mente sensibles a mutaciones.
Este polimorfismo, que sc lransmile con carciclcr aUlo-
somko recesivo, esta asociado a concenlraciones cleva-
das de apolipoprolcina All. Asi las concentracioncs de
apolipoproteina All circulantcs son superiores cn los ho-
mocigotos para el alelo mutado que en los hctcrocigotos
y que en los sujetos quc no presentan dicho alclo. Epide-
mio16gicamente, la concentraci6n de apolipoproteina All
en plasma ha recibido menos atencion que otros compo-
ncnles de la HDL en relati6n a la arteriosclerosis)?, pero
algunos autores han demostrado la e.:'t.istencia de una co-
rrelacion negativa entre las concentraciones plasmaticas
de apolipoproleina AI, 1a prevalencia de infarto de
miocardial8 y [a enfermedad vascular perifericaJ9 que es
mayor a la encontrada con e[ colcstcrol de HDL 0 con-
centracion de apolipoproteina AI. Esta evidencia permi-
te deducir que la homocigosis para el alelo mUlado de-
teclado con Mspl podria conferir protecci6n contra la
arteriosclerosis.
Apolipoproteina B
Estudios epidemio16gkos, bioquimicos y c1inicos han
demOSlrado que la elevaci6n de las concentraciones de
apolipoproleina B, principal componente proteico de la
LDL, esta asociada con el riesgo de arteriosclerosis
prematural . Por esta raz6n, el analisis de las variaciones
geneticas del gen de la apolipoproteina B podrfa ser de
gran importancia, y de acuerdo can esta idea sc han ais-
lado recienlemente clones de DNA de la apolipopro-
leina 8 10.1' que estan siendo utilizados para el esludio de
los RFLPs asociados con el gen de esta apolipo-
protefnaolO.4l.
En la figura 4 se muestra un mapa delallado de los
RFLPs correspondientes a los enzimas de restricci6n
Xbal, ECO RI Y Mspl. EI ((mapage~~ genomico revel6
que eI RFLP de Xbal es debido a que se ganan lugares
de reconocimiento para Xbal en el gen de la apolipopro-
teina B y aparecen fragmenlos mas pequenos de 10 nor-
mal. Segun donde esle localizado cl nuevo sitio de corte
para eI enzima Xbal aparece el alelo X2 0 eI alelo X3.
Todavfa no se sabc si la alteraci6n de estas secucncias de
DNA afecta a la secuencia prima ria de los amino<\.cidos
de la apolipoprotefna Bl. La digestion con ECO RI pro-
duce dos tipos de bandas, una que corresponde al alelo
X 0~R R R X ®M X R+ + + + + + .u + t• • • • • • • ,e •
" --v- 3'0
FiRUni 4. Mapa de restrkci6n del CXlrcmo 3' del gen de la apolipoprOleina B. Los silios de restrlcci6n cslan indicados con ICll1l$ mayusculas:
X(Xbal), R (Eco RI) y M (Mspl).
El sitio de reslricci6n Xbal prc~nle en el alelo X2 esul indicado por x. La localizaci6n cromoromica de] ,ilio Xbal que origina el alelo XJ
est;! indicada por X.
El silio polimorfico Eco Rl est;!. indicado por R.• Nos indica una rcgi61l enlre dos sitios de reSIricci6n fijos Xbat 'i Mspl cuya lonllitud "aria
debido a la inserci6n--delecci6n de DNA de eSta lona.
QUiMICA CLiNICA 1988; 7 (3) In
Sstl
J.
Sstl
,j.
APO Al
Gcn
APO ClII
Sstl
Figura 5. Genes de las apolipoproteinas AI y CIII. EI ~tio polimorrlCO Sstl viene indicado por ".
de menor tamano RI y otra que corresponde al alelo de
mayor tamano R2. La presencia de R2 es debida a la per-
dida de un lugar de reconocimiento para esta enzima de
restriccion en el gen de la apolipoprolefna 8. Esta varia-
ci6n del DNA es responsable de que vaTie la estructura
primaria de la secuencia de aminoacidos de la apolipo+
proteina 8 1. La digestion con MspJ origina varios frag-
mentos que pueden ser c1asificados segun su tamano; a
los de mayor tamano se les denomina 101 ya los de me-
nor tamano 102. Estos alelos tienen su causa en muta-
dones de inserci6n-delecdon entre dos sitios de recono-
cimiento para MSpl njos que produce variaci6n en la
longitud del DNA entre estos dos lugares de conel.
AI examinar la relaci6n de los alelos de la apolipopro-
teina B resuhantes de estos RFLPs con eI infano de mio-
cardio se demostro que los aIelos XI. RI Y 101 se encuen-
tran con una frecuencia mucho mayor en estos
pacientes1. Sin embargo. ninguno de estos alelos esui sig-
nificativamente asociado con concentraciones elevadas de
coleslerol-LDL 0 apolipoproleina 8. Esto sugiere que es-
tas variaciones en el gen de la apolipoproteina 8 proba-
blemente no afectan a la region de union al receptor de
la apolipoprotefna B-LDL. pues tales defectos afectarian
al aclaramiento de la LDL y SC1:undariamente a las con-
centraciones plasmaticas de LDL. Asi pues, Olras carac-
terislicas de la apolipoproleina B no relacionadas direc-
tamente con la zona de la union a receptor de LDL deben
ser las responsables de la susceptibilidad a arteriosclero-
sis en el caso de los polimorfismos de estas
apolipoproleinas4!-4ol.
Apolipoproteina C
Las apolipoprotcinas C se cncuentran en elevada pro+
porcion en quilomicrones yYLDL. Existen tres subtipos
de apolipoproteina C: CI, CII y CIII. Los genes de laapo-
lipoproteina CI y apolipoproteina CII se encuentran en
el cromosoma 19 junto con los genes de la apolipopro+
teina E y del receptor de LDLl9-23. EI gen de la apolipo-
proteina CIII forma parte del conjunto AIV, AI, CIII en
el cromosoma J116-1'.
Gracias altrabajo de varios grupos se ha dado a cono-
cer la secuencia de nucle6tidos de clones parciales del
DNA de la apolipoproleina CII·s-u. Por otra parte, el
uso de sondas de DNAs de apolipoproteina CII para el
eSlUdio de DNAs procedenles de diferentes individuos ha
permitido revelar un lugar polim6rfico para TaqJl6.20. No
obstante, las investigaciones realizadas acerca de los
RFLPs para la enzima Taql en el gen de la apolipopro-
teina ell y su asociaci6n con la hipenrigliceridemia no
174 QUiMICA CLiNICA 1988; 7 (3)
permilieron observar ninguna diferencia en las frecuen-
cias de este RFLP entre individuos norm ales e individuos
hipenrigliceridemicos48 • Algunos autores han realizado
amilisis de hibridacion de DNAs de un grupo de pacien-
tes con deficiencia de apolipoproteina CII observando que
dichos pacientes muestran palrones normales para Taq
I. Este hecho sugiere que la responsabilidad del fallo en
la expresion de la apolipoproteina CII en estos individuos
no es debida a de1ecciones 0 reorganizaciones del mate-
rial genetico48 •
En el gen de la apolipoproteina elll se ha descrilO un
polimorfismo en la longitud de los fragmentos de rest ric-
ci6n como resultado del tratamiento de DNA con la en-
zima Sad (Sstl). En este RFLP el alelo S2 es la conse-
cuencia de una transversion de una base en el cumo ex6n
del gen de la apolipoproteina cm que origina un nuevo
sitio de cone para la enzima Sad produdendo un seg-
mento de restricci6n mas cono que el del alelo normal
S147.S2 (figura 5). AL eSlUdiar la frecuencia del alelo 52 se
demoslro que era mayor en pacientes con hipertrigliceri-
demia primaria y en pacientes con hipercolesterolemia pri-
maria sin xantomas tendinosossJ.ss. Tambien se ha detec-
tado una elevada incidencia del alelo S2 en pacientes con
enfermedad cardiovascular y pacientes supe:rvivientes de
infarto de miocardio en comparacion con sujetos
normalesu .s1 . No obstante, eslas asociaciones entre eI
aumenlO de la frecuencia del alelo 52 y las diferentes pa-
tologias mencionadas no han sido constantes en todas las
poblaciones eSludiadas, probablemente debido a diferen~
ciasetnicas. Esto esta de acuerdo con el hecho de que
determinados polimorfismos son utilcs para detectar pa-
cientes afectos (0 con alto riesgo) denlro de una familia
o poblacion concreta, pero que los resultados obtenidos
con los mismos no siempre son transferibles a ouas po-
blaciones.
Apolipoproteina E
La apolipoprolcina E es una apolipoproteina impor-
tante para la interaccion de determinadas lipoproteinas
(VLDL, IOL. Qr, HDL) con receplores (apolipoprotei-
na E, apolipoproteina BE). De ella se conocen diversas
variantes que estan definidas por tres alelos codominan-
tes (E2, P y E·) de amplia distribucion y Otros
minorilariosS6-S8. EI amilisis de la secuencia de estos ale-
los, nos permite saber los codones que especifican los ami-
noacidos que las caracterizanS9. Los aminoacidos para
los alelos E2 y E~ han sido determinados por el anal isis
de la secuencia de nuc1eotidos a partir de DNAc«' indi-
candonos que la suslilucion de un aminoacido es debida
Receptor LDL
flgunt 6. Alelos de la apollpoprOieina E y sustiluciones
nucle6tidas,
£1 receptor de LOL es una glucoproteina de la mem-
brana celular constituida por cinco regiones funcionales
que !leva a cabo la internalizaci6n celular de la LOL me-
diante un proceso de endocitosis en huecos recubiertos7s•
EL genoma humano haploide contiene s610 una co-
pia del gen del receptor de LOL, que se encuentra locali-
zado en eI cromosoma 19. Este gen presenta una organi-
zaci6n estructural hom610ga a los dominios funcionales
de la proteina16 (figura 7).
Recientemente ha sido posible el estudio de la biologia
molecular de las mutaciones asenladas en este gen gra-
cias a la c1onaci6n del ONA complementario del receptor
de LOL humano y el aislamiento de clones gerncos que
cubren la mayor parte del gen del receptor de LOLn.
,
•
""
"
""
"
GEN
.. ~.,
--- --".
exones
!
secuencia ~nal
dominio de uni6n
COOH dominio cilOplasm:hico
PRQTEINA
2.
3.
4. ~~~~~~ ~~ ~ ~~. ~ ~ ~~9~r!J}~}~~~ ~(~~~~~~il)~~!!~~~-_ .. -~-..
5.
Asf se ha podido comprobar la existencia de varios tipos
de genes defectuosos que aheran la estructura y la fun-
ci6n del receptor de LOL y causan hipercolesterolemia
familiar76• Cada tipo de mutaci6n afecla a una regi6n
diferente en el gen interfiriendo en diferentes pasos del
proceso de sintesis del receptor, procesamiemo en el apa-
rata de golgi, union de LDL e internalizaci6n en huecos
recubiertos (figura 8). Estas mUlaciones pueden subdivi-
dirse en diferentes a1elos mutantes7l • El tipo de alelo mu-
tanle mas comuo, es aquel en eI que la mutacion inter-
fiere en la sintesis de receptor. £1 anaIisis mediante c!onage
molecular de uno de estos alelos ha revelado una delec-
ci6n que abarca dede el ex6n 13 al intr6n 1519•
Hay casos en los que las mutaciones permiten la sinte-
sis del receptor pero por alguna raz6n el transporte des-
de el reticulo endoplasmatieo hasta el aparalo de golgi
es defectuoso. ESla es la segunda clase de mutaci6n mas
comUnllo.&l. El defecto molecular en eSle tipo de altera-
ciones geneticas todavia no ha sido delerminado. Otra
posibilidad es la de rnutaciones en las que eI receptor es
sintetizado y a1canza la superficie cdular, pero falla en
la uni6n de la LOLJO_ Se supone que estas mutaciones
implican sustituciones de aminoacidos, delecciones 0 du-
plicaciones en el dominio de uni6n (rico en cisteinas) de
la LDL 0 en la regi6n hom610ga al precursor del faclor
de crecimiento epidermico. No obstante, estos defectos
todavia no han side elucidados a nivel molecular.
Aun hay otros casas de mutaciones en las que el re-
cepwr consigue llegar a la superficie celular y une LOL
pero falla en la internalizaci6n. Actualmente cuatro de
estas mutaciones han sido elucidadas a nivel molecular.
Tres de elias suponen alteraciones en el tallo citoplasma-
tieo del receptor (figura 9) y una supone ademas una al-
teraci6n de la zona transmembranaG • En el caso mas
drastico un cod6n para lript6fano ha sido transformado
en un cod6n de para en una posicion que dista dos ami-
noacidos de la regi6n transmembrana13• produciendo un
receptor con solo dos aminoacidos en el tallo citoplas-
Figunt 7. Correlacioll entre los dominios fUllcionales de la proleina
y la organizaci6n estroctural del len en el receplor de la LDL. Los
dominios de la prOleina 1-5. estin delimilados por !ineas
discominuas.
CGC
TGC
CGC
ARG
CYS
ARG
TGC
TGC
CGC
AMINQACIDQ
.:cll:c'__:crod=o:cn .:c15:c'__:crod=o"n
CYS
CYS
ARG
E'
E'
E'
ALEW
a una mutaci6n puntual (figura 6). La sustituci6n de un
nucle6tido en el aldo £2 seria responsable del intercam-
bio de Cys por Arg en el residuo 158 y en el alelo P del
intercambio Arg por Cys en el residuo 112""'. Se ha de-
mostrado que el aldo £2 es heterogeneo. EI mas comun
presenta una Cys en el residuo 158, pero se han observa-
do E2 como resultado de la sustituci6n de una Arg por
una Cys en el residuo 145 0 de una Iys por un Gin en el
residuo 14659,61.62. Todos los productos genicos de los ale-
los E2 presentan aleraciones en la uni6n a receptores
apolipoproteina BE y a los receptores E hepatieos62.6J.
La Arg 158 parece que reside en el dominio de uni6n aI
receptor 0 bien que influencia las interacciones del recep-
tor en otro lugar de la molecula de apolipoproteina E.
Ciertos fenotipos de la apolipoproteina E estan rela-
cionados con hiperlipoproteinemia y arteriosclerosis. EI
fenotipo apolipoproteina£2/2 esta fuertemente relacio-
nado con la hiperlipoproteinemia tipo III, relacionada
con arteriosclerosis prematura64 • La hiperlipoproteine-
mia tipo III es el resultado de un adaramiento reducido
de las partieulas remanentes presumiblemente debido a
la interacci6n insuficiente de su apolipoproteina E alera-
da con los receptores hepatico6S-6ll. Sin embargo, muchos
individuos homocigotos para el alelo £2 no presentan hi-
perlipidemia, y esta claro que otros factores ambiema-
les, endocrinos 0 geneticos, intervienen en la expresi6n
de esta enfermedad69•70_ Ademas, los heterocigotos apo-
lipoproteina E3/2 pueden presentar dislipoproteinemia
can un grade intermedio entre los homocigotos apolipo-
proteina E3/3 y apolipoproteina E2/271,12. Tambien se ha
detectado una elevada frecuencia de apolipoproteina £4
en la hiperlipoproteinemia tipo V7J •7•• As! pues, la apo-
lipoproteina £4 y la apolipoproteina E2 parecen tener un
papel en la etiologia de la hiperlipidemia debido presu-
miblemente a la anormalidad de sus funciones.
QUiMICA CLfNICA 1988; 7 (3) 17S
Rcticulo
cndoplasmatico
Aparato de
golgi
,Hueco
"recubicrlo
."il\lIni II. La hipcn:olesterolclllia familiar sc producc por mUlacioncs que alleran al reccplor de LDL. Seglm eI lipo dc lllulaci6n qucda
imerferida la sintesis del r~'Ceplor (I), eI procesamienlo cn el aparalO de Goigi (2), la uni6n de LDL (3) 0 la imernaliZilci6n en huccos
recubierlos (4).
matico Otra mutacion imp[ica lIna duplicacion de cua-
tro nuclcotidos a continuacion del sexto aminoacido del
tallo citoplasmiltico83 . Esta duplicacion ahera [a secuen-
cia de Icctura y Ileva a una secuencia de ocho aminoaci-
dos adicionalcs seguida de un codon de paro. En la ter-
cera mutacion, un simple cambio de base lIeva a la
sustitucion de una cisteina por una tirosina en el residuo
807, el cual esta en cl centro del dominio del tallo cito-
A
Citoplasma 1 a
COOH
codoncs l1l111ados (-):
A- Trp -. Stop
B- duplicaci6n
C- Tir -. Cis
B
p[asmatico. Este simple cambio de base es responsable
de la internalizacion defectuosa8-l. Por ultimo tenemos
una mutacion en la que fa [tan [as rcgiones transmcmbra-
na y citop[asmatica dcbido a una dc1ecci6n de 5 Kb que
climina los exoncs 16, 17 y 1883 •
De momenta, [as RFLPs analizados para el gen del
LDLR han demostrado ser Miles para el diagn6stico pre-
coz de los miembros afectos dentro de una misma fami-
c
(
Figura II. MUlaciones que arectan al dorninio ciloplasmat1cO del rcceplOr de LDL y producen fal10s en la internalizaei6n de LDL.
176 QUiMICA CLlNICA 1988: 7 (3)
lia con un defecto conocido de este receptor. No obstan-
te, ninguno de ellos ha resultado ser utilizablecomo mar-
cador de defectos del receptor en la poblaci6n general.
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