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V Congreso Colombiano de 
Bioquímica y Biología molecular 
C2B2-2023
Estudio preliminar de la localización subcelular de la primera proteína 
residente del Compartimiento exportador de proteínas de Plasmodium 
falciparum, PfHSP70 -2
Daniel Alejandro Cubillos1, Sebastian Villamizar1, Miguel Escobar1, Ekaterina Guayacan1, Andres F. Ochoa1, Gladys Thalia Cortes Cantin1
1Grupo de Investigación de Biología Celular, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá, Colombia.
Poster 2: 
C2B220157
Plasmodium falciparum es la especie más significativa en la propagación de la malaria
en la cual se han identificado proteínas localizadas en el PEC cómo Pf HSP70-2 que
es la la primera proteína residente conocida de este compartimiento, siendo reconocida
principalmente por el anticuerpo monoclonal, AcM 7.
INTRODUCCIÓN ¿Pf68 kDa se exporta fuera del parásito al salir los merozoítos de su célula hospedera, eritrocito?
METODOLOGÍA
RESULTADOSSe partió de cultivos continuos de Plasmodium
falciparum altamente sincrónicos y en diferentes
estadios que incluyó merozoitos en proceso de
salida del eritrocito. Se realizaron dos tipos de
ensayos: el primero de ellos, la fluorescencia
indirecta, y el segundo, inmunoelectro- microscopía.
Los anticuerpos primarios anti-HSP70-2 y anti-
cleft de Maurer se detectaron mediante conjugados
fluorescentes Alexa fluor y oro coloidal para
microscopía electrónica.
del AcM7 con PfHSP70-2, y también se observó
inmunorreactividad del AcM7 con remanentes
membranales después de la salida del parásito por
microscopía confocal. Estos resultados indican que
PfHSP70-2 es posiblemente transportado hacia la
periferia después de su paso por el comportamiento
de proteínas y que su presencia enexportador
remanentes
potencial
vesiculares 
antigenicidad
permite proponer una 
de las vesículas
extracelulares procedentes de eritrocitos infectados y 
que proteínas como PfHSP70-2 en los remanentes
vesiculares pueden ser potenciales moléculas
implicadas en la modulación de la respuesta inmune 
y la fisiopatología de la malaria.
Figura 1: MENs: Remanentes 
membranales de salida de merozoitos del 
eritrocito. Se observan cleft de Maurer y 
otras estructuras membranales parasitarias 
por dentro de (A) y por fuero de posibles 
vesículas de salida (B).
Figura 2: Proteínas localizada 
en el PEC, originalmente 
propuesto sin Brefeldina A 
(BFA) a la izquierda y con 
BFA a la derecha.
Figura 3: PEC naturalmente 
observado sin BFA, en forma 
de disco aplanado o alargado 
en trofozoito.
Figura 6: Imágenes de microscopía 
confocal, Merozoitos teñidos con 
DAPI azul (A,C,G). Remanentes de 
Pf68 kDa HsP70-2/PlasWd40-1 
detectadas por el AcM7, verde 
(A,B,C). Estructuras cleft de Maurer 
positivas con AcM6B4(8) después de 
salida de merozoìtos, rojo (F,G).
Controles negativos (D,H). Control: 
imagen DIC (E).
Figura 7: Microfotografías 
electrónicas de eritrocitos 
infectados con P. falciparum. Se 
muestra localización subcelular 
del antígeno en estudio, 
Esquizonte con merozoitos (A).
Figura A ampliada (B).
Ampliación de otro merozoito
(C). Esquizonte de diferenciación 
con Cleft de Maurer (Flecha) (D).
Imagen de un cleft de Maurer 
(Flecha) positivo (E). Esquizontes 
en estadio temprano (F).
DISCUSIÓNYCONCLUSIÓN
Se ubicó PfHSP70-2 en la región periférica o
sub-membranal de merozoitos jóvenes en procesos
de división. Por primera vez se logró detectar
mediante microscopía electrónica, inmunoreacción
OBJETIVO GENERAL: Contribuir a la caracterización de las proteínas residentes del PEC
OBJETIVOS ESPECÍFICO: 1). Explorar la localización subcelular de Pf68 kDa. 2). Conocer la inmunoreactividad 
de los remanentes membranales que son producto de la salida de los merozoitos de la célula hospedera, el eritrocito
REFERENCIAS
● Cortés GT, Wiser MF, Gómez-Alegría CJ. Identification of Plasmodium falciparum HSP70-2 as a
resident of the Plasmodium export compartment. Heliyon. 2020 Jun 3;6(6):e04037. doi:
10.1016/j.heliyon.2020.e04037.
● Cortés GT, Beltran MMG, Gómez-Alegría CJ, Wiser MF. Identification of a protein unique to the genus
Plasmodium that contains a WD40 repeat domain and extensive low-complexity sequence. Parasitol Res.
2021 Jul;120(7):2617-2629. doi: 10.1007/s00436-021-07190-z.
Figura 3
Figura 5
AGRADECIMIENTOS
Vicerrectoría de investigación y extensión de la Universidad Nacional de Colombia, Vicedecanatura Facultad de Medicina, Departamento de Salud Pública, Proyecto Hermes 57633. 
Laboratorio de equipos comunes, Laboratorio Químico Nacional, Dirección de laboratorios, Profesor Claudio Jaime Gòmez Alegria, Doctorado de Biotecnología. Facultad de
Ciencias. PD: a la investigadora María Leonor Caldas y al grupo de investigación Morfología Celular del Instituto Nacional de Salud, Bogotá., D.C. por sus valiosos aportes.