BIOLOGIA_MOLECULAR_I

Vista previa del material en texto

1 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 
 
 
 
 
GUIA DE PRÁCTICA DE 
BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 
 
I – CICLO 
 
 
 
 
 
PROFESOR COORDINADOR: 
Mg. EDITH RODRIGUEZ QUISPE 
 
 
 
 
 
 
 
https://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&docid=00xEyc08sfrqQM&tbnid=0khwSCXxmTwfzM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.logrosperu.com%2Fcentros-de-estudios-superiores-del-peru%2Funiversidades-peruanas%2Flima%2F77-universidad-privada-san-juan-bautista-usjb.html&ei=XsXqUpnnEsm5kQfR_IDABw&bvm=bv.60444564,d.eW0&psig=AFQjCNESpmSquELS9CVBgpGqQ7yOs15Xtg&ust=1391204060163677
 
 
 
2 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRÁCTICA N°1 
 
 
APLICACIÓN DEL MÉTODO CIENTÍFICO 
 
 
I. OBJETIVOS: 
 
Dar a conocer los lineamientos básicos del método científico y su aplicación 
Adiestrar al estudiante en el uso del método científico para usarlos en el campo de la medicina. 
 
 
 
II. MATERIALES: 
 
 Lectura (s )seleccionada (s) a partir de revista especializada. 
 
 
 
 
III PROCEDIMIENTO. 
 - Hacer una descripción de las diferentes etapas que comprende en método científico. 
 - Leer el artículo seleccionado rápidamente para tener una idea general del mismo. 
 - Proceda a leer el artículo cuidadosamente y analizarlo con el propósito de establecer lo siguiente: 
1. Reconocimiento del problema planteado 
2. Formulación de la hipótesis 
3. Formulación de objetivos y métodos 
 4. Prueba de hipótesis mediante la experimentación 
 5. Análisis de resultados y conclusiones. 
 
 
 
IV.RESULTADO 
- Entregar el reporte del artículo evaluado considerando todos los pasos del método científico. 
 
 
 
- ArtÍculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud 
Pública 2013 30(4):616-20. 
- ArtÍculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud 
Pública 2008 25(2):250-52. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3 
 
 
 
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 
 PRACTICA N° 2 
 
 
 RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLÓGICO DE LOS CARBOHIDRATOS 
 
 
 
 
I. OBJETIVO 
 
Reconocer las unidades monoméricas y macromoleculares como componentes fundamentales de todos los seres 
 vivos. 
 
 
II. MATERIALES POR MESA 
 
 Solución de Glucosa al 1% (Monosacárido) 
 Solución de fructuosa al 1%(Monosacárido) 
 Solución de Sacarosa al 1% (Disacárido, azúcar común) 
 Solución de Maltosa al 1% (Disacárido) 
 Solución de Almidón al 1% (Polisacárido) 
 Solución de Lugol 
 Ácido sulfúrico concentrado 
 Reactivo de Molish 
 Reactivo de Benedict 
 Tubos de 13x100 
 Tubos de 16x150 
Gradillas 
 Pipeta de vidrio de 5 ml. graduada 
Pipetas Pasteur 
Propipeta 
 Pinzas de madera 
Mecheros, trípode, rejilla de asbesto 
Guantes 
Plumón marcador 
 
 
 
 
III. PROCEDIMIENTO 
 
 
 3.1. Determinación General de Glúcidos (reacción de Molish): 
 
Los Glúcidos o Hidratos de carbono por acción deshidratante del ácido sulfúrico originan compuestos derivados 
del furfural, los que en presencia del alfa-naftol presente en el Reactivo de Molish, formarán un compuesto 
coloreado. 
 
 Preparación: 
 
1. Colocar 1 ml. de cada solución del glúcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa y Almidón) en un tubo de 
13x100 y roturarlo. 
2. Adicionar a cada tubo con glúcido una (1) gota del Reactivo de Molish, agitar suavemente. 
3. Agregar lentamente por la pared del tubo sin agitar 1 ml. de ácido sulfúrico concentrado. 
 
 
 
4 
 
 
 
4. Observar la formación de un anillo coloreado en la zona de interfase. 
 
3.2. Determinación de Azúcares Reductores: 
 
Un Azúcar reductor al ser sometido a la acción del calor en el medio alcalino del Reactivo de Benedict, sufre 
fenómenos de enolización y se fragmenta formando cuerpo fuertemente reductores para el cobre del Reactivo de 
Benedict que se transforma en Ion cuproso (Cu+) el que reaccionará con los iones OH- del medio para formar 
Oxido cuproso (Cu2O) que es de color rojo ladrillo. 
 
 
 
 Preparación: 
 
1. Colocar 2 ml. de cada solución de glúcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa, Maltosa y Almidón) en 
un tubo de 16x150 mm y roturarlo. 
2. Adicionar 1 ml. de Reactivo de Benedict a cada tubo. 
3. Someter los tubos a ebullición en agua hirviendo en un beaker por 5 minutos. Retirarlos con ayuda de una 
pinza. 
4. Observar la formación del oxido cuproso que es color anaranjado hasta rojo ladrillo . 
 
 
3.3. Determinación de Almidón: 
 
El yodo del Lugol es absorbido por el almidón a nivel de los enlaces glucosidicos y forma con él compuestos 
complejos de color azul negruzco (yoduro de almidón). 
 
 
Preparación: 
 
1. Colocar 2 ml. de solución de Almidón al 1% en un tubo de 16x150 mm. 
2. Adicionar 3 gotas de Lugol y agitar. 
3. Observar la formación de color (azul a negro si es positivo) 
4. Calentar el tubo hasta perder el color y luego enfriar el tubo (interprete el proceso). 
 
III. CUESTIONARIO: 
 1. Diga cuáles son las principales fuentes de carbohidratos en nuestra dieta y cuál es el requerimiento diario? 
 2. Definir azúcares reductor y no reductor, de 2 ejemplos. 
1. Explique el significado de deficiencia de disacaridasa, de un ejemplo. 
2. Establezca las diferencias estructurales y funcionales entre el almidón y el glucógeno. 
 
IV. INFORME: Debe contener lo siguiente 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Resultados y fundamentos. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
5 
 
 
 
 
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRÁCTICA N° 3 
 
 
 RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLÓGICO DE LÍPIDOS y PROTEÍNAS 
 
 
 
I. OBJETIVO 
Reconocer que compuestos orgánicos como los lípidos y proteínas son constituyentes importantes en todos los 
seres vivos. 
 
 
II. MATERIALES POR MESA 
 
 Aceite comestible 
 Albúmina al 2% 
 Alcohol 
 Cloroformo 
 Éter etílico 
 Solución alcohólica de Sudam III 
 Hidróxido de sodio al 40% 
 Hidróxido de sodio al 20% 
 Sulfato de cobre al 1% 
 Ácido nítrico concentrado 
 Tinta roja 
 Tubos de 16 x 150 mm. 
 Tubos 13x100mm. 
 Beakers de 50ml 
 Mechero 
 Pipetas Pasteur de plástico de 2.5ml. 
 Guantes 
 Pinza de madera 
 Gradilla para tubos 
 
 
V. PROCEDIMIENTO 
 
 
1.DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS 
 
 
A. Solubilidad de los Lípidos 
Los lípidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos como el éter y cloroformo. 
 
Preparación: 
 
1. Colocar 1 ml. de Aceite en cada tubo de 13x100mm. y agitar. 
2. Agregar: 
 En el tubo N° 1: 1 ml de agua destilada 
En el tubo N° 2: 1 ml. de Alcohol 
En el tubo N° 3: 1 ml. de cloroformo 
En el tubo N° 4: 1 ml. de éter etílico 
3. Agitar (con la misma intensidad a c/u) los tubos.. 
 
 
 
6 
 
 
 
4. Observarlos y determinar el grado de solubilidad de mayor a menor. 
 
B. Solubilidad y Tinción en Sudam III 
El Sudam III es un tinte diazo del tipo lisocromo altamente soluble en lípidos tiñéndolos en la gama del 
 rojo cereza al anaranjado. 
 
 
 Preparación: 
 
1. Colocar 1 ml. de aceite comestible en dos tubos de 13x100 mm. 
2. Adicionar 1 ml. de Sudam III a uno de ellos y al otro agregar 1ml de tinta roja, agitar dejar reposar . 
3. Observar la coloración producida en en la zona del aceite en uno de los tubos.C. Saponificación. 
 Las grasas reaccionan en caliente con hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en glicerina y ácidos 
grasos. Éstos se combinan con iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son por ende las sales 
sódicas o potásicas de los ácidos grasos. 
 
 1. Colocar en un tubo 16x150mm 2ml de aceite y 2ml de NaOH 20%. 
 2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo en baño maría de 20 a 25 minutos. 
 3. Observe en el tubo las 3 fases: inferior que contiene la solución de soda sobrante junto con glicerina 
formada, Otra intermedia semisólida que es el jabón formado y la superior lipídica de aceite inalterado. 
 
 
 
II. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS 
 
A. REACCIÓN DE BIURET 
Los compuestos que contienen dos o más enlaces peptídicos forman un complejo con las sales de cobre en un medio 
fuertemente alcalino, dando un color púrpura o violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los 
iones del Cu+2 y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos. 
 
Preparación: 
1. Disponer de dos tubos 16x150mm y colocar 2ml. de la solución de Albúmina al 1% ó solución Clara de huevo al 
10% y una muestra de leche respectivamente. 
2. Agregar 2ml. de la solución de Hidróxido de sodio al 40% en cada tubo y mezclar. 
3. Añadir 6 gotas de Sulfato de cobre al 1%. 
4. Incubar a 37º C por 10 minutos. 
5. Observar la coloración producida e intérprete . 
 
B. REACCIÓN XANTOPROTEÍCA 
Se emplea para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico 
concentrado (HNO3). Las proteínas que presentan aminoácidos con anillos bencénicos, dan derivados 
nitrogenados que se colorean de amarillo. 
 
Preparación: 
 
1. Colocar 2 ml. de la solución de Albúmina al 1% o Clara de huevo al 10% en un tubo de 16x150 
2. Adicionar 2 ml. de ácido nítrico concentrado. 
3. Observar la formación de un precipitado blanco y hervir por 3 minutos. 
4. Observar la coloración producida. 
 
 
VI. CUESTIONARIO: 
 
1. Qué son los disolventes orgánicos? 
2. Qué es la obesidad y la proteinuria 
3. Qué supone la desnaturalización de una proteína? 
 
 
 
7 
 
 
 
 
V. INFORME: 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Resultados y fundamentos. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
8 
 
 
 
 
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRÁCTICA N°4 
 
 
EXTRACCIÓN DE ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO 
 
 
 
I. OBJETIVOS: 
 
Utilizar método sencillo de extracción de ADN a partir de células eucariotas poniendo de manifiesto su 
estructura fibrilar. 
Reconocer algunos componentes estructurales del ADN 
 
 
 
II. MATERIALES: 
 
- Muestras de origen vegetal y animal. 
- NaCl 0,9% mantener a 4°C 
- Solución de Lisis ( EDTA, SDS, NACl) mantenerla en frio. 
- Acetato Na 3M 
- Etanol 96° frio (mantener a °C) 
- Solución salino citratada. 
- ADN 
- Reactivo de Bial 
- Azul de metileno 
- Tubos de ensayo 16x150mm. 
- Beakers 20ml 
- Beaker de 500ml 
- Baguetas 
- Mortero y pilón 
- Embudos 
- Mechero. 
- Pinzas de madera 
- Pipetas 5ml 
- Propipetas 
- Gasas 10x15cm (3) 
- Gradilla para tubos 
- Tijera 
- Pinza de madera. 
 
 
III PROCEDIMIENTO. 
A. Extracción de ADN: 
 
El ADN en las células eucariotas se encuentra en el núcleo disperso y muy replegado unido a proteínas para formar 
la cromatina. Para extraerlo se requiere homogenizar la muestra para proceder al lisado de membranas , la liberación 
de ADN el retiro de proteínas asociadas a dicha macromolécula y su posterior obtención bajo la forma de fibras . 
 
1. Colocar en el mortero la muestra ( 3 fresas sin hojas y/o plátano 3 cm/ ) e incorporar 2 ml de NaCl 
0.9% triturar por 1 minuto. 
2. Añadir 10ml de la solución de lisis y seguir triturando hasta obtener una masa homogénea y semilíquida 
(aprox. 5minutos). 
3. Incluir a la preparación 2ml de acetato de sodio, mezclar, para luego dejar reposar por 5 
 
 
 
9 
 
 
 
 minutos. 
 4..Filtrar la preparación en untubo de 16x150 con la ayuda de un embudo cubierto con gasa. 
5. Transvasar 5-8ml d el filtrado a un beaker pequeño e incorporar 2 volúmenes de etanol frio 
 por las paredes e introducir rápidamente una bagueta delgada y girar sobre su mismo eje a fin 
 para recuperar el ADN bajo la forma de fibras y colocarla en un tubo 16x150mm 
 conteniendo 1 ml de solución salido citratada para su resuspención y uso en la parte 
 experimental B. 
6. Obtener más fibra de ADN para reconocer el carácter ácido, para ello dejar caer en las hebras 
 el colorante básico como el azul de metileno, 
 
 
B. Identificación de Pentosas (reacción de Bial) 
Las pentosas en solución ácida se deshidratan dando furfural que al reaccionar con el orcinol en presencia de FeCl3, 
dan un producto de condensación de color verde-azulado 
1. Colocar 1 ml de ADN en un tubo 16x150 y en otro tubo de 16x150 colocar 1 ml agua destilada. 
2. Agregar 3 ml de Reactivo de Bial a cada tubo; calentar cuidadosamente cada tubo en la llama de un mechero hasta 
que la solución comience a hervir. 
3. Obsérvese y anótese el color que aparece en cada tubo de ensayo. 
 
 
 
IV.CUESTIONARIO 
1. ¿Cuál es la composición básica del ADN? 
2. ¿Qué proteína está asociada al ADN, cuáles son sus características? 
 3. ¿Por qué el ADN absorbe luz UV a 260nm? 
 
 
V. INFORME: 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Resultados y fundamentos. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
10 
 
 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
PRÁCTICA Nº5 
 
 
MICROSCOPÍA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO 
 
 
 
I. OBJETIVO 
 
1. Conocer e identificar correctamente las partes ópticas y mecánicas del microscopio compuesto. 
2. Familiarizar al alumno con el uso correcto, cuidado y conservación del microscopio. 
 
 
 
II. MATERIALES 
 
 Microscopios 
 Láminas o portaobjetos 
 Laminillas ó cubreobjetos 
 Láminas artrópodo (Pulex irritans “ pulga” ó Pediculus humanus “ piojo” ) 
 Suero fisiológico 
 Pipeta Pasteur 
 1 Plumón indeleble 
 Papel lente 
 Hebra de algodón 
 Letra “e” 
 . 
 
 
III. PARTES DEL MICROSCOPIO 
 
 Reconocer cada una de las siguientes partes del microscopio: 
 
 
 PARTE MECÁNICA 
 
 Tubo portalentes y cremallera 
 Tornillos macro y micrométrico 
 Revolver 
 Platina 
 Condensador 
 Brazo y Pie 
 
 PARTE ÓPTICA 
 
 Ocular 
 Objetivos 
 Espejo 
 Lentes de condensador 
 Diafragma 
 
 
 
 
11 
 
 
 
 
IV. SISTEMAS QUE COMPRENDE EL MICROSCOPIO 
1. Sistema de soporte: comprende el brazo, el pie, el tubo ocular, el revolver y la platina. 
2. Sistema de Iluminación: comprende el foco, condensador y diafragma. 
3. Sistema de Ajuste: comprende el macrométrico, micrométrico y cremallera 
4. Sistema de Aumento: comprende el ocular generalmente de 10 x , 15 x y los objetivos de 5x, 10, 40, y 
100x. 
 
 
 
VII. PROCEDIMIENTO. 
 
1. Prepararláminas húmedas (gota de suero fisiológico mas la muestra) con hebra de algodón y letra “e” en 
posición de lectura . 
2. Realizar las observaciones de dichas muestras con los objetivos 4x, 10x y 40x 
3. Verificar con la lámina de la letra “e”, que los movimientos en estos sistemas son invertidos. 
4. Observar con los objetivos de 4x y 10x la lámina de artrópodo fijadas. 
 
VIII. CUESTIONARIO 
1. Definir que es una imagen real y que una imagen virtual 
2. Cuáles son las unidades de medida de longitud empleadas en microscopia? 
3. Defina aumento y, resolución del microscopio. 
4. Cómo se define un microscopio electrónico y cuáles son sus aplicaciones médicas. 
 
IX. INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
12 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
PRÁCTICA N° 6 
 
OBSERVACIONES CELULARES: PROCARIOTAS (BACTERIAS) 
 
 
 
I. OBJETIVO 
 
 Existen dos tipos de células, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente, en la organización de su 
material genético. 
Las procariotas no poseen envoltura nuclear, su DNA circular ocupa dentro de la célula un lugar llamado nucleoide 
y se halla en contacto directo con el protoplasma. , por ello nuestro objetivo es identificar distintos tipos de 
bacterias . 
 
II. MATERIALES POR MESA 
 
Laminas con tinción de Gram de Escherichia coli (bacilos) y Streptococcus (cocos) 
Láminas con Tinción de Ziehl Neesel de Mycobacterium 
Yogurt natural 
Palitos mondadientes 
Solución fisiológica al 0.85% 
Solución Mercurio cromo 
Solución de Violeta de genciana 
Colorante azul de metileno 
Alcohol yodado 
Lamina portaobjetos 
Lamina cubreobjeto 
Varilla de coloración 
Aceite de inmersión 
Alcohol isopropílico 
Papel lente 
Depósito para eliminar láminas y laminillas. 
Microscopios 
Guantes 
 
 
 
III.PROCEDIMIENTO 
A.Observación de Microflora bacteriana en cavidad bucal (Tinción de Vagó) 
 
1. Colocar una gota de solución fisiológica sobre una lámina. 
2. Con el mondadientes obtener una muestra de sarro dental y esparcir con movimientos circulares 
en la gota de solución fisiológica. 
3. Secar a temperatura ambiente y luego cubrir con colorante Mercurio de cromo por 5 minutos. 
4. Enjuagar y aplicar inmediatamente el colorante Violeta de genciana, dejar por 3 minutos, para 
luego lavar con agua de caño. 
5. Dejar secar la muestra preparada por acción del calor o al medio ambiente. 
6. Observar la lámina con el objetivo de 100x con un gota de aceite de inmersión, e identifique 
las diferentes formas bacterianas. 
 
 B. Observación de Lactobacillus en una muestra de yogurt. 
 1. Colocar una gota de yogurt en el extremo de un portaobjetos y con otro extender el material . 
 2. Dejar secar, colocar una gota de azul de metileno, cubrir con laminilla. 
 Observar 40x y 100x. 
 
 
 
13 
 
 
 
 
 
C . Observación de Bacterias con Coloraciónes diferenciales como Gram y Ziehl Neelsen 
 
1. Colocar sobre la lámina (E. coli) ya procesada con tinción de Gram , una gota de aceite de 
inmersión. Observar con objetivo de 100x. 
2. Colocar sobre la lámina (Streptococus sp.) ya procesada con tinción de Gram , una gota de aceite de 
inmersión. Observar con objetivo de 100x. 
3. Observación de Mycobacterium turbeculosu s (tinción Ziehl Neelsen con el objetivo de 100x 
 
V. CUESTIONARIO 
1. Como es la estructura de una célula bacteriana. 
2. Qué es la tinción o coloración de Gram, como se realiza? 
3. Describa a la bacteria que infectan el epitelio gástrico: Helicobacter pylori así como también a la 
Pseudomona aeruginosa que se relaciona con la fibrosis quística.. 
 
 
 
V.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 BACTERIAS (Procarionte) 
 
 
 
 
 
 
http://docentes.educacion.navarra.es/metayosa/bach2/2biomicro3.html
 
 
 
14 
 
 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
PRÁCTICA N° 7 
 
OBSERVACIONES CELULAS EUCARIOTAS : animal, vegetal y fungi 
 
 
 
II. OBJETIVO 
 
 Existen dos tipos de células, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente, en la organización de su 
material genético. 
En las eucariotas el DNA se asocia a proteínas formando unas estructuras complejas denominadas cromosomas, los 
cuales se encuentran dentro de un núcleo verdadero rodeado por una complicada envoltura nuclear, a través de la 
cual tiene lugar los procesos de intercambios núcleo-citoplasmáticos, 
- Poder visualizar células eucariotas unicelulares y pluricelulares. 
- Poder diferenciar al microscopio las características que presentan la membrana celular de la célula animal y la pared 
celular de la célula vegetal. 
 
 
 
II. MATERIALES POR MESA 
 
 Muestra de célula epitelial de la mucosa bucal 
 Muestra de catáfila de cebolla (Allium cepa) 
 Muestra de levadura (Saccharomyces) 
 Lámina de hongos: Penicillium y Aspergillus 
 Microscopios 
 Láminas portaobjetos 
 Laminillas cubreobjetos 
 Bisturí 
 Pinza de punta recta 
 Mechero de alcohol 
 Colorante Azul de metileno 
 Colorante Lugol 
 Alcohol yodado 
 Solución fisiológica (NaCl 0,9%) 
 Papel lente 
 
 
 
III. PROCEDIMIENTO 
 
A) OBSERVACION DE CELULA ANIMAL (RASPADO DE MUCOSA BUCAL) 
 
1. Con la ayuda de un hisopo hacer un raspado de la mucosa bucal y colocar la muestra obtenida sobre 
dos láminas . 
2. Agregar a una lámina una gota de suero fisiológico y a la otra aplicar una gota del colorante azul de 
metileno. 
3. Cubrir las preparaciones con una laminilla ó cubreobjeto. 
4. Observar las preparaciones con objetivo de 10x y 40x. 
 
 
 
 
15 
 
 
 
 
1- Membrana plasmática, 2- Mitocondria, 
3- Retículo endoplásmico rugoso, 4- Ribosomas, 
5- Nucleolo, 6- Cromatina, 
 7- Citosol (=hialoplasma), 8- Diplosoma (=centriolos), 
9- Retículo endoplásmico liso, 10- Aparato de Golgi 
 
 
 
 B) OBSERVACION DE CELULA VEGETAL (CATAFILA DE CEBOLLA) 
 
1. Con ayuda de la pinza separe una de las catáfila de la cebolla y extiéndalo sobre la lámina portaobjeto. 
2. Con el bisturí corte cuadritos de medio centímetro de catáfila. 
3. Disponga de dos láminas y coloque en ella un cuadradito de catáfila. 
4. Agregar a una lámina una gota de suero fisiológico y en l otra una gota del colorante lugol 
5. Cubrir las preparaciónes con una laminilla cubreobjeto. 
6. Observar con objetivos de 10x y 40x precisar su membrana , pared y núcleo. 
 
 
 
 
C) OBSERVACION DE UNA CELULA FUNGICA UNICELULAR Y PLURICELULAR 
C.1 En una lámina colocar dos gotas de cultivo de levadura (unicelulares) cubrir con laminilla y 
observar a 40x . 
 C.2 Observar laminas fijadas de Penicillium y Aspergillus con el objetivo de 40x y 100x. 
 
 
 
16 
 
 
 
 
 Reconocer sus partes y precisar su pared celular. . 
 
 
 HONGOS PLURICELULARES 
 
 
 
Aspergillius 
 
 
 
 Penicillium : 
 1. Conidióforo2. Métula 3. Fiálide 4. Esporas 
 
 
 
 
 
 
 
 
http://www.uprm.edu/biology/profs/betancourtc/Lab/Aspergilosis.htm
 
 
 
17 
 
 
 
 CUESTIONARIO. 
1. Cómo se define a una célula epitelial, qué función tienen y cuantos tipos tejido epiteliales se reconocen. 
2. Cuáles son los componentes y como está estructurado las paredes celulares de las bacterias, hongos y vegetales 
3. Defina tinción vital y supravital 
4. Qué es el lugol, cual es formula y cuáles son sus aplicaciones.. 
 
V.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
18 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRÁCTICA N° 8 
 
 
 FENÓMENOS FISICOS DE LA CÉLULA: DIFUSION, OSMOSIS 
 
 
I.OBJETIVO 
 
Observar los fenómenos de difusión y ósmosis y su importancia para la célula. 
 
II. MATERIALES 
 
Láminas portaobjeto 
Laminillas cubreobjetos 
Tubos de prueba 
Microscopios 
Lancetas hematológicas 
Solución de NaCl al 0.4% (medio HIPOTONICO) 
Solución de NaCl al 0.9% (medio ISOTONICO) 
Solución de NaCl al 2.0% (medio HIPERTONICO) 
Agua destilada 
Alcohol 96°C 
Algodón estéril 
Pipetas Pasteur para cada solución 
Gradillas 
Microscopios 
Papel lente 
Conteiner de descarte 
 
 
III. PROCEDIMIENTO 
 
 A) Experimento con eritrocitos (célula animal): 
 1. Recepcionar tubos de prueba perfectamente rotulados conteniendo: 
 En el 1er. tubo: 3 ml. de Sol. NaCl al 0.4 % 
 En el 2do. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 0.9 % 
 En el 3er. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 2.0 % 
 
1. Colocar 1 gota de cada concentración de la sol.NaCl en láminas portaobjetos., previamente rotuladas. 
2. Desinfectar el dedo cordial (tercero) con algodón humedecido en alcohol y realizar una punción con 
ayuda de la lanceta descartable, en el pulpejo del dedo. 
3. Dejar caer 1 gotas de sangre a cada lámina y con la ayuda de la laminillas mezclar 
 suavemente, dejar en reposo por 2 minutos. 
Colocar el cubreobjeto o laminilla y observar en el microscopio 40x.. 
 
 
 B) Experimento con catáfila de cebolla (célula vegetal): 
 1. Colocar 1 gota de cada concentración de NaCl en láminas ó portaobjeto previamente rotulados. 
 2. Agregar a cada lámina trocitos de catafila de cebolla. 
 3. Dejar en reposo dos minutos, para luego cubrirla con una laminilla. 
 4. Observar al microscopio 10x y 40x 
 
 
IV. RESULTADO: 
 
 
 
 
19 
 
 
 
 
 
 MUESTRA MEDIO FENÓMENO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
VI. CUESTIONARIO 
 
1. ¿Qué tipo de difusión es la osmosis y qué es presión osmótica?. 
2. Defina que es: Diálisis, Turgencia y Plasmólisis. 
3. ¿Qué significa homeostasis? 
4. En qué consiste los fenómenos de crenación y citólisis 
 
V.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 1 
 
Sol. NaCl 0.4% + sangre 
 
Hipotónica 
 
 
 
 
2 
 
 
 
 
 
 
Sol.NaCl 0.9 % + sangre 
 
 
 
 
Isotónica 
 
 
 
 
3 
 
 
Sol. NaCl 2 % + sangre 
 
 
Hipertónica 
 
 
 
 
 
4 
 
 
 
 
 
Sol, NaCl 0.4% + vegetal 
 
 
 
 
 
 
 
Hipotónica 
 
 
 
 
 
5 
 
 
 
Sol. NaCl 0.9% + vegetal 
 
 
 
 
 
 
Isotónica 
 
 
 
6 
 
 
 
Sol. NaCl 2% + vegetal 
 
 
 
Hipertónica 
 
 
 
 
 
20 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRÁCTICA N º 9 
 
 
ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS Y 
PLASTIDOS. 
 
 
I. OBJETIVO: 
 
 Mediante el empleo de la técnica de coloración vital se observarán las mitocondrias presentes sólo en el 
citoplasma de las células Eucariotas, que vienen a constituir las “centrales de energía” porque producen 
y almacenan energía bajo la forma de ATP. 
Las células tienen vesículas membranosas que contienen enzimas hidrolíticas que permiten la digestión 
intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales pueden pueden ser identificados en 
protozoarios con una tinción vital. 
 Con el uso de suero fisiológico observar plastidos en las células vegetales eucarióticas, los que 
contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias, como los Leucoplastos que son 
plastidos incoloros, los Amiloplastos que acumulan almidón, los Proteinoplastos que acumulan 
proteínas, los Elaioplastos que acumulan grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plastidos 
coloreados como el Caroteno que presenta un pigmento de color naranja, el Licopeno de color rojo, la 
Xantofila de color amarillo y los Cloroplastos que presentan un pigmento de color verde y cuya 
función principal es realizar la fotosíntesis. 
 
II. MATERIALES POR MESA : 
 
 Muestra de: 
 Células de epitelio bucal 
 Hoja de Elodea (Cloroplastos) 
 Ají amarillo (Xantofila) 
 Zanahoria (caroteno) 
 Papa (Amiloplastos) 
 Betarraga (Antocianina) 
 Cultivo de protozoarios (observación de lisosomas) 
 Microscopios. 
 Bisturí 
 Pinza en punta 
 Laminas y laminillas 
 Colorante Rojo neutro 
 Solución Verde Janus 1/10,000 
 Colorante Lugol 
 Hisopos 
 Mecheros de alcohol 
 Guantes 
 
 
III. PROCEDIMIENTO: 
 
A) OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL : 
 
1. Con una lámina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa bucal, 
2. Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lámina, 
3. Dejar secar la lámina con la muestra al medio ambiente, 
4. Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos, 
 
 
 
21 
 
 
 
5. Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente, 
6. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x. 
 
B) OBSERVACION DE LISOSOMAS en PROTOZOARIOS 
1. Colocar en una lámina dos gotas cultivo de protozoarios y una gota del colorante rojo neutro, mezclar 
dejar reposar 2 minutos.. 
2. Cubrir con una laminilla y observar el preparado a 10x y 40x . Visualizar en el interior de los 
Paramecium a los lisosomas . 
 
C.OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES : 
 
 CLOROPLASTOS: Se localizan en las hojas debajo de la epidermis superior. 
 
1. Seleccionar una hoja joven de Elodea, colocarla sobre una gota de agua en una lamina portaobjeto. 
2. Cubrir la muestra con una laminilla. 
3. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento. 
 
 CROMOPLASTOS: Son organelas coloreados y presentan formas variadas (redondas, elípticas, o 
aciculares). 
 
1. Realizar cortes finos de zanahoria, ají amarillo, betarraga sobre una lámina portaobjetos 
2. Colocar una gota de agua sobre el corte. 
3. Cubrir con una laminilla. 
4. Observar al microscopio con objetivos de menor y mayor aumento. 
 
 AMILOPLASTO : Son organelas que contienen almidón como sustancia de reserva. 
 
1. Sobre una lámina portaobjetos colocar una gota de Lugol. 
2. Agregar un corte transversal fino de papa . 
3. Cubrir con una laminilla. 
4. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento. 
 
 
IV. PROTOCOLO : 
 
 
 
MUESTRAS 
 
OBSERVACIÓN DE MITOCONDRIA , CLOROPLASTOS Y PLASTIDIOS20 X 
 
40 X 
 
TIPO DE ORGANELA Ó 
PLASTIDIO 
 
EPITELIO BUCAL 
 
CULTIVO 
PROTOZOARIO 
 
 
 
HOJA DE ELODEA 
 
 
 
AJI AMARILLO 
 
 
ZANAHORIA 
 
 
BETARRAGA 
 
 
PAPA 
 
 
 
 
 
 
 
22 
 
 
 
 
 
V. CUESTIONARIO 
 
1. ¿Qué son las patologías mitocondriales?. 
2. ¿Qué relación tiene los lisosomas y la autofagia? 
3. ¿Porqué las mitocondrias fijan el colorante verde de Janus?. 
4. ¿Qué función cumplen los plastidios en las célula?. 
 
VI.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
23 
 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
PRÁCTICA Nº 10 
 
ACCIÓN ENZIMÁTICA 
 
 
I. OBJETIVO: 
 Conocer el mecanismo de acción de las enzimas durante una reacción química. 
 Conocer cómo actúa un catalizador. 
 
II. MATERIALES : 
 Gradilla Mechero de alcohol 
 Mortero con pilón Hígado de pollo 
 Tubos de prueba de 16 x150 /13x100 Hisopos 
 Agua oxigenada Fósforos 
 Dióxido de Manganeso Pipetas pasteurss 
 Azul de metileno Pipetas1ml 
 Aceite Cloruro de sodio 
 Succinato sodio 0,1M Gradilla 
 Buffer Fosfato pH7.4 Placas Petri 
 NaCl 0,9% 
 Bisturí 
 
III. FUNDAMENTACION : 
Las Enzimas tienen como función acelerar la velocidad de una reacción química. El mecanismo de acción se 
realiza de la siguiente manera: 
Unión de un Sustrato a la Enzima para formar un Complejo Enzima- Sustrato y desdoblamiento del complejo 
formado para liberar los Productos. 
 
 E + S → E - S — E + P 
 
IV. PROCEDIMIENTO : 
a. Actividad de la Enzima Catalasa 
 
 
 MnO2 + 2 H2O2 → 2 H2O + O2 + MnO2 
 
 Catalasa + 2 H2O2 → 2 H2O + O2 + Catalasa 
 
 
1) Numerar los tubos del 1 al 3 
2) Colocar en cada tubo 2 ml. de Peróxido de hidrógeno (Agua oxigenada). 
 
 
3) Agregar al: 
 Tubo 1: ½ cucharita de Hígado de pollo entero 
 Tubo 2: ½ cucharadita de Hígado de pollo triturado 
 Tubo 3: 2 g. Dióxido de Manganeso 
 
4) Colocar a cada tubo el palito de Ignición encendido en la boca del tubo 
 
 
 
24 
 
 
 
5) Si el palito de Ignición aumenta la intensidad del fuego, la reacción es positiva. 
 
 b. Actividad de la Enzima Succinato Deshidrogenasa 
1) Preparar homogenizado de hígado con cloruro de sodio. 
2) Disponer de 2 tubos de 13x100 y roturarlos (tubo N° 1 y tuboN° 2) 
3) Colocar en cada tubo 1 ml de Succinato y luego 1 ml de buffer . 
4) Añadir 2 gotas de azul de metileno, agitar, anotar el color. 
5) Incorporar al tuboN° 1 0,5ml de aceite por las paredes y dejar en la gradilla NO MOVER 
6) Agregar al tubo N° 2 1ml de homogenizado de hígado e inmediatamente añadir 0,5ml de aceite por las 
paredes, No MOVER, dejar en la gradilla. 
7) Hacer el seguimiento de la decoloración de los tubos por 20minutos, 
8) Analice lo ocurrido . 
. 
 
 
V. CUESTIONARIO: 
 
1) Defina que es un catalizador 
2) ¿Qué se entiende por sitio activo.? 
3) ¿Qué tipo de enzima es la catalasa, y cuál es su importancia en el metabolismo ? 
4) ¿Cuál es el rol de la deshidrogenasa succínica y porque se relaciona con el síndrome de Kearns Sayre? 
 
 
 
VI.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marco teórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
25 
 
 
 
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 
 
 
 PRACTICA N° 11 
 
 
OBSERVACIÓN DE ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE 
 
 
I. OBJETIVOS 
 
 Determinar la presencia de elementos figurados presentes en una muestra de sangre periférica humana, 
mediante el uso de una coloración diferencial. 
 Observar la presencia de núcleos en su interior. 
 
 
II. MATERIALES 
 
Microscopios 
Colorante Wright o Giemsa 
Alcohol yodado 
Agua destilada 
Láminas portaobjetos limpias y desengrasadas 
Lancetas hematológicas 
Algodón estéril 
Varillas de coloración 
Láminas coloreadas de sangre con Wright 
Papel lente. 
Aceite de cedro 
Guantes 
Conteiner de descarte 
 
 
III. PROCEDIMIENTO 
 
A. Obtención de sangre capilar 
 
1. Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodón y con una lanceta estéril punzar el dedo y 
dejar caer una gota de sangre sobre un extremo de la lámina portaobjetos. 
2. Con ayuda de otra lámina portaobjeto formar un ángulo de 45° y realizar un frotis, tratando de 
esparcir homogéneamente la gota de sangre sobre la superficie de la lámina. 
3. Dejar secar la preparación y proceder luego a la coloración con Wright o Giemsa. 
 
B. Coloración 
 
1. Cubrir el frotis con colorante Wright o Leishman por 1 minuto. 
2. Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 minutos. 
3. Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de caño. 
4. Dejar secar la lámina coloreada. 
5. Una vez que la lámina coloreada a secado, observar al microscopio con el objetivo de 100 X y aceite 
de inmersión. 
 
IV. PROTOCOLO 
 
 
 
 
26 
 
 
 
(Esquematice los siguientes elementos que abajo se indican y que serán observados con ayuda del 
microscopio). 
 
 
1. LEUCOCITOS GRANULARES : 
 
a) Neutrófilos segmentados: presenta un núcleo con varios lóbulos (2-5) unidas por bandas de 
cromatinas. 
 
b) Neutrófilos en banda o abastonado: presenta un núcleo no dividido en forma de S o en cayado O. 
 
c) Eosinófilos: redondos, voluminosos, con granulaciones acidófilas de color anaranjado, núcleo con dos 
lóbulos. 
 
d) Basófilos: son escasos de 0-1, presenta un núcleo difícil de observar, pues se halla cubierto por una 
granulación de color violeta o morado oscuro . 
 
 
 
2. LEUCOCITOS AGRANULARES : 
 
a) Linfocitos: De forma redonda o irregular, su núcleo es morado, voluminoso y ocupa la mayor parte 
de la célula, el citoplasma es azul y sin granulaciones. Su número aumenta con las infecciones. 
 
b) Monocitos: De forma redonda u ovalada, núcleo variable generalmente en forma de riñón, citoplasma 
sin gránulos. Presenta una gran actividad fagocitaria. 
 
 
 
3. PLAQUETAS : 
Las más pequeñas de las células de la sangre, de forma redonda y no contienen hemoglobina. Son 
esenciales en la coagulación de la sangre. 
 
 
 
4. HEMATIES O ERITROCITOS : 
De forma generalmente redonda, sin núcleo, de color rosa intenso, contiene hemoglobina. La proteína que 
se encarga del transporte de oxígeno y anhídrido carbónico. 
 
 
 
 
Neutrofilos 
 
 
 
27 
 
 
 
 
 
 
Eosinófilos 
 
 
 
 
 
 
Basófilo 
 
 
Monocitos 
 
 
 
Linfocitos 
X. CUESTIONARIO 
 
1. ¿Cuál es la diferencia entre plasma y suero?. 
 2. Diga que es la fórmula leucocitaria, cuáles son los valores normales en el adulto y qué significado tiene los 
 
 
 
28 
 
 
 
valores anormales. 
3. ¿Qué es la histamina y cuál es su importancia?. 
4. ¿Qué es la anemia, y cuál es su origen? 
 
 
 
V.INFORME 
 Carátula; 
 Introducción, 
 Marcoteórico. 
 Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
29 
 
 
 
 
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
 ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
 CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 
 PRÁCTICA Nº 12 
 
 
CICLO CELULAR: División Celular : LA MITOSIS 
 
 
 
I. OBJETIVO: 
 
Se estudiará la mitosis y el ciclo de división celular en las células meristemáticas de la raíz de Allium cepa 
(cebolla). 
En este sistema la población celular esta en equilibrio dinámico y los cromosomas son relativamente grandes, con 
un número diploide ( 2n =16 ). 
 
 
 
II. MATERIALES : 
 
 Raíces de cebolla 
 Láminas fijadas de mitosis 
 Placas Petri 
 Estiletes y pinzas 
 Papel de Filtro 
 Portaobjetos 
 Cubreobjetos 
 Aceite de inmersión 
 Mechero de Alcohol 
 Orceína acética- clorhídrica 
 Aceite de inmersión 
 Papel lente 
 Microscopios 
 
 
III. PROCEDIMIENTO: 
 
1. Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeños conteniendo agua corriente, la que deberá cambiarse cada 24 
horas, mantener los bulbos en oscuridad a 25°C y sometidos a aireación constante. 
2. Después de 48 a 72 horas, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3 raíces del bulbo, cortar 2 cm. de la parte 
apical y colocarla sobre una placa Petri que contenga Orceína. 
3. Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta aproximadamente 60°C y se observe la emisión 
de vapores blancos, evitar la ebullición del colorante. 
4. Dejar enfriar y repetir esta operación cuatro veces. 
5. Enfriar y dejar reposar durante 15 minutos. 
6. Colocar la raicilla en la lámina portaobjeto, cortar 2 mm de la punta, añadir una agota de Orceína fría, cubrir la 
preparación con laminilla. 
7. Con la punta de un lápiz golpear suavemente la preparación describiendo círculos concéntricos para permitir la 
extensión del tejido meristemático. 
8. Eliminar el exceso de colorante usando una tira de papel filtro. 
9. Observar la preparación a mayor aumento y lente de inmersión. 
 
 
 
 
30 
 
 
 
 
IV. PROTOCOLO: 
 
Esquematizar las diferentes fases que se observan: 
 
Interfase: Los cromosomas no se observan al microscopio debido a que son demasiados delgados y no puede 
absorber suficiente colorante para ser visible. 
 
Profase: Fase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromátidas. 
 
Metafase: Se observa el huso acromático, los cromosomas están mas condensados y cortos. 
 
Anafase: Los cromosomas se dirigen a los polos 
 
Telofase: Los cromosomas están en los polos, empieza la formación de la membrana nuclear 
 
 
V. CUESTIONARIO : 
 
1. Qué hay de común entre mitosis y meiosis. 
 
2. Que es Indicé mitótico e índice interfásico 
 
3. Defina cariocinesis y citocinesis 
 
 
REALIZAR ESQUEMAS : 
 
 
 
 FASE DE LA MITOSIS 
 
 ESQUEMAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
31 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
32 
 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 
 PRACTICA Nº 13 
 
 GRUPO SANGUINEO Y FACTOR Rh 
 
 
I. OBJETIVO: 
 
Al finalizar la práctica el alumno debe saber qué es el grupo sanguíneo, sus aplicaciones en el campo de la 
medicina y el grupo sanguíneo al que pertenece. 
 
II. GENERALIDADES : 
 
El serólogo Karl Landsteiner, en 1900-1901 fue el primero en demostrar la existencia de grupos sanguíneos y en 
1938 el Comité de Higiene de la Liga de la ONU, el Congreso de Microbiología de 1930 en Londres y la 
Internacional de Transfusión Sanguínea de París, se adoptó definitivamente la clasificación de los grupos 
sanguíneos humanos heredables, designados como A, B, AB, O. 
 
 
 GRUPOS SANGUINEOS RESULTANTES 
 
 
 GRUPO SANGUINEO 
 
 
ANTIGENO EN GLOBULOS 
ROJOS 
(AGLUTINOGENOS ) 
 
ANTICUERPOS EN PLASMA O 
SUERO SANGUINEO 
(AGLUTININAS ) 
 
A 
 
 
A 
 
Anti-B 
 
B 
 
 
B 
 
Anti-A 
 
 
AB 
 
 
AB 
 
Ninguno 
 (Receptor universal) 
 
O 
 
 
Ninguno 
 
Anti-A + Anti-B 
 (Dador universal) 
 
 
III. MATERIAL Y METODOS : 
 
Lámina preparadas de frotis sanguíneo 
Placas excavadas de porcelana 
Lancetas hematológicas 
 
 
Sueros Anti-A, Anti-B, Anti-D o Rh. 
Mondadientes 
Algodón 
Alcohol yodado 
Guantes 
Conteiner de descarte 
 
 
 
 
33 
 
 
 
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUINEOS : 
 
La técnica de reconocimiento de grupos sanguíneos se basa en la aglutinación o no de los hematíes cuando se 
mezclan con la aglutinina Anti-A o Anti-B. 
 
IV. PROCEDIMIENTO : 
 
1. Limpie con algodón embebido en alcohol la yema del dedo anular. 
2. Realizar la punción utilizando una lanceta hematología estéril. 
3. Coloque dos gotas de sangre por separado sobre la lámina portaobjetos, de la persona a la cual se va a realizar 
la prueba y en otra lámina otra gota de sangre. 
4. Agregar a cada gota de sangre una gota de suero Anti-A y Anti-B y Anti-D o Anti-Rh por separado. 
5. Observar la reacción e identificar a que grupo pertenece y que factor Eh, si es positivo o negativo 
 
METODO DE RECONOCIMIENTO PRACTICO : 
 
 GRUPO A GRUPO B 
 
 Anti-A Anti-B Anti-A Anti-B 
 
 
 
 
 
 
 
GRUPO AB GRUPO O 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Rh: Anti –D o Rh (+) Anti- D o Rh (-) 
 
 
 
 
 
 
 
V: CUESTIONARIO : 
 
1. A quienes se les llama receptores y donadores universales, por qué? 
2. Explique la Eritroblastosis fetal. 
3. En que se basa el reconocimiento de los grupos sanguíneos? 
4. Indique que tipo de sangre pueden recibir y donar las personas de los grupos sanguíneo A,B,AB y O con 
Rh + y Rh - 
 
VI . INFORME ; Carátula, Introducción, Marco teórico. Observaciones (esquemas) con su descripción. 
 Conclusiones. 
 Cuestionario. 
 Referencias Bibliográficas (estilo Vancouver). 
 
 
 
 
34 
 
 
 
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA 
CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR 
 
 PRACTICA N°14 
 
 
CÓDIGO GENÉTICO 
 
III. OBJETIVOS: 
 
Comprender las bases moleculares del dogma de la biología molecular. 
Usar el código genético y comprender el efecto de mutaciones y sus posibles causas. 
 
IV. MATERIALES: 
 
Secuencias problemas entregadas por el docente. 
Lapiz, borrador. 
Tabla de código genético. 
 
 
 
 
 
 
 
 
35 
 
 
 
 
 
 
 
III PROCEDIMIENTO. 
 
Analice y complete las siguientes secuencias (en clase) 
 
 
Ejemplo: 
 
 Pro 
Reconocer: 
 
Sitio de N glicosilación: Asparragina-X-Serina o Asparragina-X-Serina-Treonina. 
Sitio de O Glicosilaicon: Serina o treonina 
 
 
SECUENCIA I 
 
Segmento A: 
 
ADN 5’ a t g c g c t c a c g t g a C a c a a t g 
http://divulgacientifico.wordpress.com/2013/05/06/en-palabras-de-dna/
 
 
 
36 
 
 
 
ADN3’ 
Mensajero 
Aminoácido 
 
Segmento B 
 
ADN 5’ c c c g g t a c g t g t g c A c a a a t g 
ADN3’ 
Mensajero 
Aminoácido 
 
Segmento C 
 
ADN 5’ g g t a t a c t a t c a t c T t a g a t a 
ADN3’ 
Mensajero 
Aminoácido 
 
 
 
Analice yresponda: 
 
1. Numero de codones: 
 
2. Numero de aminoácidos empleados: 
 
3. Secuencia usada por la ARN polimerasa: 
 
4. Sitios de Glicosilacion. 
 
 
 
 
 
SECUENCIA II 
 
Segmento A: 
 
ADN 5’ 
ADN3’ t a c g g c a t g g g g c a C c c a t t T 
Mensajero 
Aminoácido 
 
Segmento B 
 
ADN 5’ 
ADN3’ g c c c c g t a g a t a c a T c a t g t t 
Mensajero 
Aminoácido 
 
Segmento C 
 
ADN 5’ 
ADN3’ c g a c t t g g a a a a a t C c c g g a T 
Mensajero 
Aminoácido 
 
 
 
37 
 
 
 
 
Analice y responda: 
1. Numero de codones: 
2. Numero de aminoácidos empleados: 
3. Secuencia usada por la ARN polimerasa: 
4. Sitios de glicosilación: 
 
 
Secuencia C (para el informe: preste atención a las indicaciones que dará el profesor) 
 
*A continuación se le entrega una secuencia de aminoácidos, halle la posible secuencia nucleotídica y responda lo 
siguiente: 
 
 
FVNQHLCGSH LVEALYLVCG ERGFFYTPKS 
 
1. Numero de aminoácidos: 
2. Número de Codones: 
3. Por qué el primer aminoácido no es Metionina? 
4. ¿Cómo podríamos averiguar a qué proteína pertenece esta secuencia? 
 
 
 
 
IV.CUESTIONARIO 
1. ¿Por qué el código genético es degenerado? 
2. ¿Qué mutaciones son cruciales en el gen de hemoglobina y como atañe esto la salud? 
3. Explique, ¿por qué en el código genético se utilizan tres nucleótidos por codón? 
4. ¿Por qué son importantes las mutaciones? 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
38