10634308

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Salud Pública de México
ISSN: 0036-3634
spm@insp.mx
Instituto Nacional de Salud Pública
México
Náder, Elvira; Mondragón, Verónica Alejandra; Conde, Carlos Jesús
Empleo de la biología molecular para la caracterización epidemiológica de Neisseria gonorrhoeae
Salud Pública de México, vol. 34, núm. 3, mayo-junio, 1992, pp. 292-300
Instituto Nacional de Salud Pública
Cuernavaca, México
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Náder-García E, Mondragón-Jainies VA, 
Conde-González CJ. 
Empleo de la biología niolecular para la 
caracterización epidemiológica de 
Neissena gonorrhoeae. 
Salud Publica Mex 1992;31:292-300. 
RESUMEN 
En este artículo se detalla el uso de tecnología actual 
para la identificación de marcadores moleculares de 
una colección de cepas de Neisseria gonorrhoeae. Los 
procedimientos de auxotipificación, serotipificación y 
extracción deplásmidospermitieron la descripción de 
10 auxotipos, 19 serotipos y cinco tipos de plásmido 
(incluyendo codificadores de beta lactamasa), además 
de 12perfiles de resistencia antimicrobiana, mediante 
la prueba de susceptibilidad por dilución seriada en 
agar, en un total de 41 cepas gonocócicas analizadas. 
Estas herramientas tienen un gran valor epidemioló- 
gico, ya que permiten conocer los aspectos dinámicos 
de la historia natural de la gonorrea, a la vez que han 
conducido en este caso al establecimiento de un centro 
de referencia sobre N . gonorrhoeae en nuestra insti- 
tución. 
Palabras clave: gonococo, biología molecular, epidemiología 
molecular 
Náder-García E, Mondragón-Jaimes VA, 
Conde-González CJ. 
Application of niolecular biology to the 
epidemiologic characterization of 
Neisseria gonorrhoeae. 
Salud Publica Mex 1992;34:292-300. 
ABSTRACT 
Thispaper describes current methods useful to define mo- 
lecular markersfiom a collection of Neisseria gonorrhoeae 
strains. Tlie procedures of auxotyping, serotyping andplas- 
mid profiling led to the obtention of 10 auxotypes, 19 
serotypes and five plasmid types (including befa-lactamase 
plasmids) among 41 gonococci studied. Twelve patterns of 
antimicrobial resistance were determined as well, tlzrough in 
vitro susceptibility testing by agar dilution. These tools in 
conjunction, offer the possibility to study gonorrhea in a 
dynamic faslzion from an epidemiologic perspective. Fur- 
tlzermore, they laave allowed us to establislz a gonococcal 
reference laboratory in our institution. 
Key words: gonococcus, molecular biology, molecular epidemiology 
Solicitud de sobretiros: Dr. Carlos J. Conde G, Dirección de Microbiología, Centro de Investigaciones sobre Enfermedades Infecciosas, Av. Universidad 655, 
Col. Santa María Ahuacatitlán, 62508 Cuernavaca, Morelos, México. 
*Presentado parcialmente en el "XV Congreso Internacional de Infectología", organizado por la Asociación Mexicana de Infectología, noviembre de 1990, 
Puerto Vallarta, Jalisco, México. 
(1) Departamento de Bacteriología, Centro de Investigaciones sobre Enfermedades Infecciosas, Instituto Nacional de Salud Pública, México. 
Fecha de recibido: 14 de diciembre de 1991 Fecha de aprobado: 8 de enero de 1992 
L 
A GONORREA ES un padecimiento que en la 
actualidad sigue prevaleciendo en todo el mun- 
do,' independientemente del grado de desarrollo 
socioeconómico de los diferentes países. Aunado a esto, 
la relativamente reciente identificación de cepas produc- 
toras de beta-lactama~a,~ la caracterización de resistencia 
cromosomal hacia la penicilina y otros agentes, además 
de la alta resistencia plasmídica a la tetraciclina, refuer- 
zan la necesidad de llevar a cabo estudios moleculares 
que permitan la identificación de las características clo- 
nales de los diferentes aislamientos clínicos. 
Durante los últimos 20 años se han desarrollado dife- 
rentes métodos para clasificar a las cepas de gonococo 
aisladas de varias partes del niundo. El método de auxo- 
t ipifi~ación,~ basado en los requerimientos nutricionales 
para varios aminoácidos y bases nitrogenadas, y la se- 
r~tipificación,~ basada en la antigenicidad de la proteína 
1, que se encuentra presente en la membrana externa del 
gonococo, han servido de herramientas para conocer la 
cinética epidemiológica de la enfermedad.s La identifi- 
cación de marcadores de resistencia6 a través del método 
de concentración inhibitoria mínima, la detección de 
plásmidos productores de beta-lactamasa mediante méto- 
dos químicos directos, así como la caracterización de 
plásmidos en geles de agarosa permiten determinar no 
sólo el foco de infección en una población, sino además 
definir las estrategias de tratamiento y control, principal- 
mente en las poblaciones en riesgo. 
Los trabajos que describen la n~etodología adecuada 
para la caracterización epidemiológica molecular de los 
aislamientos clínicos de N. g~norrlzoeae'~~ han permitido 
establecer correlaciones entre regiones geográficas, pa- 
trones de serotipo y perfil pla~mídico,~ auxotipo y resis- 
tencia ant imicr~biana,~,~ al igual que entre serotipo y 
comportamiento sexual.10 
En este laboratorio se ha implementado cada una de 
estas técnicas, aplicándolas como primera instancia en 
cepas de colección, lo cual ha permitido su caracteri- 
zación íntima. Por otra parte, la aplicación de metodo- 
logía de frontera debe conducir al establecitniento de un 
laboratorio potencial de referencia, cuyo objetivo reside 
precisamente en la caracterización epidemiológica mo- 
lecular de cepas gonocócicas, aisladas de poblaciones 
mexicanas de alto y bajo riesgo. 
Cepas bacterianas. Se utilizaron 41 cepas obtenidas de 
diferentes fuentes: 20 aisladas de infección gonocócica 
diseminada (IGD) donadas por los Centros para el Control 
de las Enfermedades (CDC) de Atlanta, GA, EUA; dos 
(transformadas a serorresistentes) donadas por el Baylor 
College of Medicine, Houston, TX, EUA;" 11 cepas con- 
sideradas como control de serotipificación, donadas por 
SYVA Co., de Palo Alto, CA, EUA. Seis de las cepas 
fueron obtenidas como control de plásmidos conjugativos 
y productores de beta-lactamasa y dos como referencia de 
resistencia a la penicilina mediada por cromosoma, dona- 
das en conjunto por las instituciones ya mencionadas. 
Las bacterias se mantuvieron congeladas en caldo 
Luria Bertoni (LB) glicerolado al 20 por ciento12 a -70°C 
hasta su utilización. A su descongelación, las cepas se 
sembraron directamente en medio de gelosa chocolate, 
consistente en base de agar c c (3.6%) y hemoglobina 
(1%) (v/v) (Bioxon de México), suplementado con ami- 
noácidos y cofactores al 1 por ciento (Suplemento 11, 
Merck NC. 10728), y se incubaron a 37°C en una atmós- 
fera del 5-10 por ciento de COZ. Antes de ser utilizadas en 
cada una de las fases experimentales, las cepas se sembra- 
ron en medio de Kellogg.13 
Beta lactamasa. A cada una de las cepas utilizadas se le 
aplicó el método yodométrico14 para la identificación de 
la enzima beta-lactamasa. La bacteria se suspendió en 
una solución amortiguadora de fosfatos (SAF) (0.15 MpH 
7.2). A esta suspensión se le adicionó (v/v) una solución 
de penicilina-fosfatos (pH 6.0) (6 mg/ml) y se incubó 
por30 minutos. ~ e a ~ r e ~ ó u n v o l u m e n d e a l m i d ó n a l lpor 
ciento, seguido de una segunda incubación por 30 minutos. 
Finalmente, se adicionó 113 del volumen de una solución 
de yodo (10.16 M yIK0.32M). La ausenciade coloración 
se consideró positiva, y la coloración azul, negativa. 
Concentración inhibitoria mínima (CIM). La determina- 
ción de la resistencia o susceptibilidad a quimioterapéu- 
ticos se determinó por ensayos de la CIM de los siguientes 
antibióticos: cloranfenicol (C1) (Parke-Davis), dicloxaci- 
lina (Dx) (Roussel-Unclaf), espectinomicina (Sp) (Up- 
John), ampicilina (Am), cefazolina (Cfz) y tetraciclina 
(Te) (Bristol), norfloxacina (Nf) (Prosalud MSD), ceftria- 
xona (Cf) (Roche) y penicilina (Pe) (Lakeside). Las 
soluciones madre se disolvieron de acuerdo con lo sugeri- 
do por Anhalt.ls Los rangos utilizados para cada antibió- 
tico fueron los siguientes: Cl y Dx 0.5-4 &m]; Cft y Cfz 
0.061-1 pg/ml; Am 0.25 -4 pg/rnl; Sp 2-64 pglml; Nf 
0.06-2 pg/ml; Te 0.25-16 p g / d y Pe 0.125-16 @m]. Las 
MAYO-JUNIO DE 1992, VOL. 34, NO. 3 
CARACTERIZACIÓN EPIDEMIOLÓGICA DE NEISSERIA GONORRHOEAE 
concentraciones de trabajo se determinaron en base a la 
potencia de las sales, según el CDC. '~ E t a s concentracio- 
nes de antibiótico se usaron en base de agar de Kellogg13 
en cajas de Petri de 100 mm de diámetro. De cada una de 
las cepas se preparó una suspensión bacteriana en LB a 
una concentración de 0.5 del nefelómetro de McFar- 
land,17 y se colocaron por separado en los pozos de un 
replicador tipo Steers (Replicator, Chester, PA). Posterior- 
mente, las placas inoculadas se incubaron durante 48 
horas a 37°C y en cinco por ciento de CO,. La CIM se 
determinó como la concentración en la cual no se obtiene 
crecimiento alguno, siendo los valores de corte para Am, 
Cft, Cfz, C1, Dx, Nf y Pe de 1 pg/ml; para Sp de 64 pg/ml 
y para Te de 2 pglml.'8J9 
Determinación de auxotipo. El medio genético definido 
(MGD) para la determinación de auxotipo se preparó con 
las siguientes sales: KCl(2 mM), citrato de sodio (2 mM), 
NaCl (0.2 mM), MgC1,.6H20 (1.125 mM), NH4Cl (2.8 
mM), Na2S04 (2.6 mM), K2S04 (2.6 mM), 
CH3COONa.3H20 (5.5 mM). Por separado se preparó 
5 H P O 4 (30 mM), KH,PO, (16 mM), biotina (2 pglml), 
ácido oxalacético (0.5 mgml), piruvato de sodio (3.84 
mgml), Fe(N03),(6.1 mM), B-nicotinamín-adenín-dinu- 
cleótido (5 pglml), hidrocloruro de tiamina (10 pgíml), 
cocarboxilasa (10 pg/ml), pantotenato de calcio (10 pg/ 
ml), cisteina (0.6 mg/ml) y cistina (25 yg/ml). También se 
prepararon aminoácidos con las siguientes concentra- 
ciones finales en el MGD: Asp (24 &ni), Glu(28 pgíml), 
Arg, Hys, Leu, y Pro (12.4 ug/i). Ile, Ser, Ala, Val, Phe, 
Lys, Trn, Trp y Tyr (6.2 pg/ml). Además se pesaron Hyp 
(10 pglml) y Ura (20 pglml). La base sólida del medio se 
preparó con Agar Oxoid W 1 (1%) y almidón (1 mgíml), 
se esterilizó en autoclave, se adicionó al MGD (v/v) y se 
sirvió en cajas de Petri marcadas como: completo, Ura-, 
Hyp-, Arg-, Pro- y Met-. 
Los cultivos de gonococo de 15 horas de crecimiento 
en Kellogg sólido se resuspendieron en MGD al 50 por 
ciento y se ajustó su concentración a una densidad óptica 
de 0.3 en una longitud de onda de 530 nm. Con el 
replicador de Steers se sembraron las seis cajas, se incuba- 
ron a 37°C en 5 por ciento de CO,. La lectura se hizo 
después de 48 horas de incubación, considerándose la 
ausencia de crecimiento y crecimiento fino como negati- 
vo y el crecimiento franco como positivo. 
Determinación serológica. El crecimiento bacteriano de 
24 horas en medio de Kellogse resuspendió en 1 m1 des^^ 
y se calentó en baño a ebullición por 10 minutos. Ya frío, 
se utilizó para la coaglutinación. Los anticuerpos 
monoclonales se prepararon uniéndose previamente a la 
proteína A de células completas de S. aureu~ .~ ' Se 
centrifugaron 10 m1 de una solución al 10 por ciento de 
S. aureus (pesofvol), cepa 1 Cowan (Calbiochem Corp., 
La Jolla Ca.) y se lavaron tres veces con SAF; finalmente 
se resuspendieron en 12 m1 de SAF agitando con "vortex". 
Posteriormente, por separado los anticuerpos monoclona- 
les se mezclaron con las células des. aureus en la relación 
ya d e ~ c r i t a . ~ Para cada serogrupo se usaron seis anticuer- 
pos monoclonales: 4A12, 4G5, 2F12, 6D9, 5G9 y 5D2 
para IA; 3C8, 1F5, 2D6, 2G2, 2D4 y 2H1 para IB. La 
reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente por cinco 
minutos. Posteriormente, las células se lavaron para eli- 
minar los anticuerpos no pegados y se resuspendieron en 
10 m1 de SAF. La serotipificación se realizó en laminillas 
de coaglutinación donde se colocaron 1 vol de anticuerpo 
monoclonal ligado a S. aureus y 1 vol de la suspensión de 
N. gonorrhoeae; se agitó suavemente (30 rpm) por dos 
minutos y se hizo la lectura frente a una lámpara de luz. 
La reacción se evaluó de acuerdo con el criterio de Knapp 
y colaborado re^;^ se consideró como 4 t cuando presentó 
grumos grandes alrededor de la gota con fondo claro; 3 t 
cuando presentó grumos grandes distribuidos en la gota 
con fondo claro; 2 t cuando aparecieron grumos definidos 
ligeramente turbios, y 1t o O cuando se observaron 
grumos escasos no bien definidos con fondo lechoso o 
cuando no aparecieron grumos con textura de leche. Esta 
última reacción se consideró negativa. 
Obtención deplásmidos. Se utilizó una modificación del 
método de Birnboim- D01y.~l Las cepas se cultivaron en 
medio sólido de Kellog por 15-18 horas y las colonias se 
resuspendieronen 1 nd de^^. Las células se centrifugaron 
y resuspendieron en 0.1 m1 de lisozima 2 mglml disuelta 
en EDTA 10 mM, Tris 25 mM (pH 8) y glucosa 5 mM; se 
incubaron durante 30 minutos a 4"C, y se agregaron 2vols 
de una solución de NaOH 0.2 N y SDS al 1 por ciento. En 
seguida, la solución se incubó durante 5 minutos a 4°C; 
posteriormente se adicionaron 1.5 vols de acetato de 
sodio 3 M (pH 4.8), y se mezcló e incubó durante 30 
minutos en hielo. Posteriormente la preparaciónse centri- 
fugó en una microcentrífuga durante 10 minutos y se 
transfirieron 400 p1 del sobrenadante a otro tubo. A la 
muestra se le adicionó 1 m1 de etanol absoluto, se mezcló 
e incubó a -20°C por 3 horas y se centrifugó por 10 
minutos. A la pastilla se le adicionaron 100 p1 de acetato 
SALUD PÚBLICA DE MÉXICO 
de sodio 0.1 M, Tris 0.05 M (pH 8) y 200 pl de etanol 
absoluto; se incubó 20 minutos a -20°C y se repitió la 
precipitación con etanol absoluto. Después se le resus- 
pendió en 30 pl de solución TE (Tris 10 mM pH 8, EDTA 1 
mM), se adicionó la wAsa a una concentración final de 5 
pglml y se incubó 1 hora a 37°C. Los plásmidos se 
identificaron por medio de geles de agarosa al 0.7 por 
ciento, teñidos con bromuro de etidio en solución amorti- 
guadora de tris-boratos y corridos a 50 V por tres horas 
aproximadamente.12 El DNA se observó en un transilunii- 
nador de luz ultravioleta y sus pesos fueron estimados por 
comparación visual con cepas testigo conocidas. 
RESULTADOS 
Beta-lactamasa. De acuerdo a la interpretación del méto- 
do yodoniétrico, se encontró que de las41 cepas probadas, 
cinco (12%) produjeron la enzima. 
CIM. Se observó que del 100 por ciento de las cepas 
utilizadas, el 51.2 por ciento fue sensible a todos los an- 
tibiótico~, y el 48.8 por ciento presentó resistencia. De 
estas últimas, el 45 por ciento fue resistente a un quimio- 
terapéutico y el 55 por ciento presentó multirresistencia (a 
dos o más agentes). La distribución de los patrones de re- 
sistencia se observa en la figura 1. El porcentaje de cepas 
resistentes a cada uno de los antibióticos se presenta en el 
cuadro 1. Todas las cepas fueron sensibles a Cfz, Nf y Sp. 
Dx I'c l e Ci I'e DY Am Am (Y1 Am <'TI Am 
rc Ic I'c CI Cl C I ('ri C1 C i l 
le Cit Dx I>x CI Dx Cl 
Pc Te I'e I>x I'e I>x 
Pc Te Pe 
Patrones de resistencia Te 
FIGURA 1. Distribución de patrones de resistencia a 
quimioterapéuticos de 20 cepas de Neisseria gonorrkoeae 
Antibiótico 
utilizado 
Am 
Cft 
Te 
CI 
Pe 
Dx 
Cepas resistentes* 
NQ (%) 
Valores de CIM 
2 - 8 
2 - 4 
2 - 8 
2 - 4 
2 - >16 
2 - >4 
*La suma de las cepas sobrepasa de 20, ya quese incluyeron las 
multiresistentes 
Auxotipificación. En la figura 2 se muestranlos 10 auxo- 
tipos encontrados y su distribución en nuestra colección 
de cepas gonocócicas. 
Arg Pro Proto Ura Arg Mct Pro Arg Me1 Arg 
Pro Pro Ura Ilyx Pro Hyx 
t i r a Ura Met 
Au~ot ipo Ura , 
FIGURA 2. Distribución de auxotipos determinados en 41 
cepas de Neisseria gonorrhoeae 
MAYO-JUNIO DE 1992. VOL. 34, No. 3 
Serotipificación. Los 19 serotipos identificados, asíconio 
su frecuencia, se pueden observar en el cuadro 11. El 
serotipo más encontrado fue el IA-2 (22%). De las 20 
cepas de IGD aisladas de sangre o articulaciones (cuadro 
111), 16 (80%) pertenecieron al serogrupo IA y las cuatro 
(20%) restantes al IB. Solamente cuatro de estas cepas (3 
del serogrupoIB) mostraron ligera resistencia a un beta- 
lactámico, la dicloxacilina (cuadro IV). 
Plásrnidos. El 90 por ciento de las cepas contuvieron el 
plásniido críptico de 2.6 Megadaltones (Md); el 22 por 
ciento elplásnudo conjugativo (24.5 Md). Se encontraron 
cinco plásmidos productores de beta-lactarnasa (12%). 
En las cepas 76p, 76-061786 y 77, se identificó el plás- 
mido Africano (3.2 Md), en la 87p el plásniido Toronto 
(3.5 Md) y en la 76-073389 el plásniido Asiático (4.4Md). 
Con respecto al contenido de plásniidos en las cepas 
IGD, dos de ellas no tuvieron el plásniido críptico pero sí 
el conjugativo. De las 18 restantes, tres presentaron la 
conibinación de plásniidos críptico-conjugativo (cuadro 
111). 
Del subgrupo de cepas totalmente sensibles a los 
antimicrobianos y no provenientes de infecciones invasi- 
vas, D4 y G7 pertenecieron a las variedades Pro-AA6 y 
Met-Pro-Ura-/IAS respectivamente; ambas presentaron 
el plásmido críptico únicamente. Las otras cepas del 
subgrupo, F62, WM3 y WM6, están relacionadas porque 
las dos últimas son F62 transformadas a serorresistericia 
con material genético de un aislamiento de IGD;" aún así 
fue interesante observar que las tres compartieron el 
mismo perfil: Pro-flB7 y p 2.6 Md. 
Conio se describió en la metodología, seis de las cepas 
donadas fueron enviadas como cepas control de resisten- 
cia a la penicilina mediada por plásnudo. Sinenibargo, en 
el laboratorio sólo cinco de ellas fueron positivas al 
ensayo yodométrico, a la CIM esperada por encima del 
valor de corte, así como a la presencia de plásniidos 
productores de beta-lactariiasa evidenciados por electro- 
foresis. Esto sugiere la pérdida del plásmido en una de 
ellas (26p), probablemente al sujetarla a liofilización en 
su sitio de origen, o por la ausencia de presión selectiva al 
resembrarla. No obstante, esta cepa fue resistente cromo- 
somaln~ente a Dx, Pe y Te (cuadro IV). Asimismo, los 
CUADRO 11 
Serotipos identifícadcrs cn 41 cepas de 
NeU.ueriu gonarrhoene 
Serotipos No de cepas 
resultados del antibiogran~a obtenidos en estas cepas 
(76p, 87p, 76-061786, 76-073389 y 77) indican que la 
resistencia es mediada por plásmidos, ya que el valor de 
la CIM para Pe fue > 16 ~g/ni119 (cuadro IV). 
Por otra parte, se observa una correspondencia entre la 
resistencia a la Pe mediada por plásniido y la resistencia 
a la Arn, Cft y C1, no así en todos los casos con la Dx. Es 
probable que la presencia del plásmido influya en la 
resistencia a algunos antimicrobianos beta-lactámicos. 
Debe destacarse que la resistencia a Cft y cefalosporinas 
de tercera generación es mínima en cepas de c a n ~ p o , ' ~ y 
nuestras cepas que mostraron tal carácter forman parte de 
los controles del CDC. 
Igualmente, también se observan algunas cepas con 
resistencia mediada croniosonial~riente, además de las 
SALUD PÚBLICA DE MÉXICO 
I Plásmido Auxotipo Serotipo 
8 Jt 
17 Jt 
22 Jt 
47 Jt 
591 Jt 
11 Bl 
24 B1 
29 BI 
41 BI 
51 BI 
346 B1 
484 B1 
FA 171 
6583 
White 
Werts 
Blackwell 
DG2 
673 
JC1 
Proto 
AHU- 
Proto 
Arg-Pro- 
Proto 
Arg-Pro- 
AHUM- 
Pro-Ura- 
Pro- 
Pro- 
Pro- 
Arg-Pro- 
Ura- 
Proto 
Pro- 
Proto 
Proto 
Proto 
Proto 
Pro- 
cepas F18 y F45, las cuales fueron obtenidas por sus 
marcadores cromosomales (cuadro IV). De éstas, las 
cepas F6, N10 y 7122 presentaron resistencia cronioso- 
mal a la penicilina, así como a otros antimicrobianos 
debido a la resistencia cnizada ampliamente reportada.?" 
Ninguna de las cepas IGD fue resistente a la penicilina; 
el ensayo yodoniétrico también fue negativo, y en geles 
de agarosa no se observaron plásniidos beta-lactamasa. 
Estos resultados coinciden con los inforniados por otros 
a ~ t o r e s , ~ ~ l o s cuales observan únicamente la presencia de 
plásmidos cnptico y conjugativo para este tipo de cepas. 
El auxotipoAHU frecuenteniente relacionado con cepas 
no coincide con nuestros resultados (cuadro 111); 
esto quizá se deba a que el número de cepas probadas es 
pequeño. Además, la totalidad de estas cepas no han sido 
probadas ensu capacidad de serorresistencia (experimen- 
tos en desarrollo). Por otra parte, el 80 por ciento de las 
cepas IGD presentaron el serogrupo IA, coincidiendo con 
lo anteriormente notificado (cuadro III).23325,26 
Como ya se mencionó, la importancia de la caracten- 
zación de los plásniidos al igual que el auxotipo/serovar 
trabajados en este informe, reside en la determinación 
del comportamiento epidemiológico de la enfermedad, 
así como en la identificación de focos de diseminación y 
tratamiento. 
En el caso de los plásmidos conjugativos (24.5 y 25.2 
Md), su importancia reside en la capacidad que ellos 
confieren de transferir otros plásmidos beta-lactániicos a 
cepas de flora normal u otras cepas gonocócicas, lo que 
permite la persistencia de iiiicroorganis~iios resistente^.'^ 
Es importante recalcar que este trabajo no es reflejo de 
un comportamiento epidemiológico, ya que el 50 por 
ciento de las cepas trabajadas fueron obtenidas por sus 
características genotípicas y no son muestras aleatorias de 
una población. El 50 por ciento restante de las cepas 
trabajadas fueron obtenidas de IGD, lo que podría 
considerarse como un comportamiento representativo. 
Sin embargo, fueron aisladas de pacientes de diversos 
sitios geográficos y en épocas diferentes por lo que poco 
se puede decir de su conducta epidemiológica. En conclu- 
sión, disponemos ahora de una colección de cepas total- 
mente caracterizadas que serán útiles para propósitos de 
referencia y adiestramiento en las funciones de servicio 
de esta institución. 
Por ahora se cuenta con sólo un reporte epidemioló- 
gico del tema desarrollado aquí, a nivel nacional, donde 
los hallazgos mostraron frecuencias de gonorrea entre el 
10 (prostitutas) y el 38 por ciento (varones heterosexuales 
y honiosexuales), con un total de ocho serovariedades y 
tres auxotipos reconocidos y resistencia a varios anti- 
~iiicrobianos, en especial a la penicilina, mediada por 
plásnudos asiáticos y africanos, sin encontrar alta resisten- 
cia a la tetraciclina. Un dato importante fue asociar 
Únicamente tres clases de auxotipo/serovar a los aisla- 
mientos resistentes a betalactán~cos.~' 
La utilidad y el enriquecimiento de la información 
existente, al aplicar la epideniiología niolecular al estudio 
de la gonorrea, se logrará en la medida que existan 
investigaciones colaborativas entre múltiples laborato- 
rios interesados en documentar particularnielite el impac- 
to de la gonorrea en grupos de alto riesgo para adquirir 
enfermedades transmitidas sexualniente. 
MAYO-JUNIO DE 1991. VOL. 33, No. 3 
CWADRO IV 
Caracteristicas clonalcs de 20 cepas de Neiswriu gonorrlweoe tesistenres a quirnioterapéuticus* 
Cepa 
R 2 
F6 
H 8 
N10 
S12 
T13 
W16 
7122 
2 6 ~ 
7 6 ~ 
87p 
76-06178 
76-07338 
77 
F18 
F45 
47 Jt 
29 B1 
Blackwell 
DG2 
Auxotipo Serotipo 
Met-Pro- 
Pro- 
Met-Pro-Ura- 
Proto 
Proto 
Proto 
Pro-Ura- 
P ~ o t o 
Proto 
Pro- 
Proto 
Proto 
Proto 
Arg- 
Pro- 
Pro- 
Arg-Pro- 
Pro-Ura- 
Proto 
Proto 
Cft 
0.5 
2 
0.5 
0.5-1 
1 
0.5 
o .5 
0.5 
1 
2 
4 
2 
2 
2 
4 
o .5 
O .5 
0.5 
o .5 
0.25 
'Las últimas cuatro son cepas I G D 
s n = No determinado 
AGRADECIMIENTOS 
Al doctor Richard Rodgers de Laboratorios SYVA, Palo 
Alto, CA, USA; por elsuniinistro de los anticuerpos 
mente con el Fondo de Repatriación para Científicos 
Mexicanos, otorgado a CJCG por la Fundación Mexicana 
para la Salud y la Carnegie Corporation of New York. A 
la señorita Obdulia Escobar se le agradece el eficiente 
iiionoclonales. Esta investigación fue sufragada parcial- mecanografiado del artículo. 
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