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G E N É T I C A D E B A C T E R I A Y A R C H A E A 309 U N ID A D 2 Podemos detectar estas mutaciones solo mediante el examen de gran número de colonias y buscando las «diferentes», un pro- ceso llamado cribado (en inglés, screening). Aislamiento de auxótrofos nutricionales Aunque el cribado es siempre más engorroso que la selección, existen métodos para cribar grandes cantidades de colonias en busca de determinados tipos de mutaciones. Por ejemplo, los mutantes nutricionales defectivos pueden ser detectados mediante la técnica de réplica en placa (Figura 10.2). Las colo- nias de una placa madre pueden ser transferidas a otra placa con agar pero sin el nutriente con ayuda de un asa o palillo de dientes estériles, o incluso con un brazo robótico. Las colo- nias progenitoras crecerán con normalidad, y las colonias mutantes, no. Así, la incapacidad de una colonia para crecer en un medio sin el nutriente indica que se trata de una colo- nia mutante. La colonia de la placa madre correspondiente a la mancha ausente en la placa de réplica se puede coger, puri- ficar y caracterizar. Un mutante con una necesidad nutricio- nal para el crecimiento se llama auxótrofo, y el progenitor del que deriva recibe el nombre de protótrofo. (Un protótrofo no tiene por qué ser necesariamente del tipo salvaje. Un auxótrofo puede derivar del tipo salvaje o de un mutante derivado del tipo salvaje.) Por ejemplo, los mutantes de E. coli con feno- tipo His− son auxótrofos de histidina. En la Tabla 10.1 se indi- can ejemplos de clases habituales de mutantes y los medios con los que se detectan. MINIRREVISIÓN ¿Qué diferencia hay entre una mutación y un mutante? ¿Qué diferencia hay entre cribado y selección? (b) (a) (c) S te v e n R . S p ila tr o T. D . B ro c k S h ila d it y a D a s S a rm a , P ri y a A ro ra , L o n e S im o n s e n Figura 10.1 Mutaciones seleccionables y no seleccionables. (a) Desarrollo de mutantes resistentes a antibióticos, un tipo de mutación fácilmente seleccionable, dentro de la zona de inhibición de un disco de ensayo de antibióticos. (b) Mutaciones no seleccionables. La radiación UV induce la aparición de mutantes no pigmentados de Serratia marcescens. El tipo salvaje tiene un pigmento rojo oscuro. Los mutantes blancos o incoloros no sintetizan pigmento. (c) Colonias de mutantes de una especie de Halobacterium, miembro de Archaea. Las colonias de tipo salvaje son blancas. Las colonias marrones anaranjadas son mutantes que carecen de vesículas de gas ( Sección 2.15). Las vesículas de gas dispersan la luz y enmascaran el color de la colonia. https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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