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330 G E N Ó M I C A , G E N É T I C A Y V I R O L O G Í A por primera vez en la industria láctea en la cual los cultivos madre usados para la fermentación de la leche son susceptibles a una infección descontrolada por parte de bacteriófagos. Sin embargo, se encontró una cepa de Streptococcus thermophilus que era resistente a bacteriófagos virulentos. La diferencia entre esta cepa de S. thermophilus y las susceptibles a la infec- ción vírica eran los espaciadores que tenía dentro de la región CRISPR. Aunque no se conoce por qué algunos virus no son afectados por el sistema CRISPR, experimentos de laboratorio han mostrado que los bacteriófagos pueden superar el recono- cimiento por las proteínas Cas y los crRNAs modificando sus genomas mediante mutaciones. MINIRREVISIÓN ¿Por qué se considera el sistema CRISPR un «sistema inmunitario» procariótico? ¿Con qué se corresponden los espaciadores que hay dentro de la región CRISPR? participan en captar y guardar los fragmentos de DNA foráneo como espaciadores mediante el reconocimiento de secuencias específicas de nucleótidos asociadas con los espaciadores. Otras proteínas utilizan la información almacenada de las secuencias para reconocer el DNA invasor y destruirlo. Las propias proteí- nas Cas están codificadas por genes que se localizan junto a las secuencias de DNA CRISPR (Figura 10.28). La región CRISPR se transcribe como un todo en una molé- cula grande de RNA que es después cortada en el centro de cada una de las secuencias repetidas por la actividad nucleasa de las proteínas Cas. Así esta molécula grande de RNA se convierte en segmentos espaciadores de RNA pequeños llamados CRISPR RNA (crRNA). Si las bases de uno de estos crRNA se aparean con un ácido nucleico invasor, este DNA o RNA foráneo es des- truido por la actividad nucleasa de otras proteínas Cas. El sistema CRISPR está muy extendido tanto en Archaea como en Bacteria. Aproximadamente el 90 % de los genomas secuenciados de Archaea y el 70 % en Bacteria contienen el sistema CRISPR. La utilidad de este sistema fue demostrada Figura 10.28 Funcionamiento del sistema CRISPR. La región CRISPR en el cromosoma bacteriano se transcribe como una molécula larga de RNA que es después procesada en segmentos por algunas de las proteínas Cas. Cada segmento espaciador se corresponde con encuentros previos con ácido nucleico foráneo entrante. Si una de estas moléculas cortas de RNA CRISPR (correspondiente a un espaciador) reconoce y se aparea con ácido nucleico entrante procedente de la transducción o la conjugación, otras proteínas Cas destruirán este ácido nucleico foráneo. Secuencias espaciadoras únicasCromosoma bacteriano Proteínas Cas Repetición Infección vírica o conjugación Repetición DNA DNA plasmídico o vírico Genes cas Las proteínas Cas fragmentan y destruyen el ácido nucleico foráneo Secuencia foránea reconocida por RNA CRISPR TranscripciónTranscripción y traducción Fragmentación del DNA por proteínas Cas RNA CRISPR Una mutación es un cambio heredable en la secuencia del DNA que puede provocar un cambio en el fenotipo. Las mutaciones seleccionables son aquellas que dan al mutante una ventaja selectiva en determinadas condiciones ambientales, y son especialmente útiles en investigación genética. Si la selección no es posible, los mutantes pueden identificarse por cribado. IDEAS PRINCIPALES https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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