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E V O L U C I Ó N Y S I S T E M Á T I C A M I C R O B I A N A S 393 U N ID A D 3 todas las especies vegetales y animales juntas, y la cantidad de especies totales es probable que sea de varios órdenes de mag- nitud mayor que las 10.000 ya caracterizadas. Cada ambiente de la Tierra contiene una comunidad variada de microorganismos. Los análisis de las secuencias de los genes de rRNA 16S indican que pueden coexistir tantas como 10.000 especies diferentes en un solo gramo de suelo. Casi todas las plantas y animales tienen cierto número de microor- ganismos asociados exclusivos, ya sea como patógenos o como comensales en su superficie o en sus estructuras internas. Por tanto, los microorganismos no solo son las formas de vida más antiguas en nuestro planeta, sino también las más diversas. MINIRREVISIÓN ¿Qué diferencia hay entre taxonomía y filogenia? Describa algunos criterios fundamentales del concepto filogenético de especie utilizados para determinar si dos cepas pertenecen a la misma especie. ¿A cuántas especies de bacterias y arqueas se les ha dado un nombre? ¿Cuántas es probable que existan? 12.9 Métodos taxonómicos en sistemática Para identificar y nombrar especies de bacterias y arqueas de acuerdo con el concepto de especie taxonómica aceptado actualmente, se usa un estudio polifásico, es decir, un estudio que hace uso de muchos métodos diferentes combinados. En esta sección describiremos los métodos habituales para caracte- rizar especies microbianas, y principalmente procariotas. Análisis de secuencias génicas Como ya hemos visto, las secuencias génicas se determi- nan normalmente a partir de fragmentos de DNA amplifica- dos por PCR, y las secuencias se analizan mediante análisis en sus secuencias génicas de rRNA 16S. No existen criterios consensuados para definir rangos taxonómicos por encima del género. ¿Cuántas especies microbianas hay? El mundo microbiano que observamos hoy es el resultado de casi 4.000 millones de años de evolución (Figura 12.13). Los taxónomos microbianos coinciden en que actualmente no se puede hacer un cálculo firme del número de especies, en parte por la incertidumbre en la definición de especie. No obstante, también están de acuerdo en que en el análisis final este número será muy alto. Debido a la dificultad para visualizar y carac- terizar microorganismos, solo se han nombrado unas 10.000 especies de bacterias y arqueas mediante el concepto taxonó- mico de especie. Por ahora es imposible calcular con exactitud el número total de especies bacterianas y arqueanas de la Tierra, pero es incuestionable que su diversidad es más alta que la de Figura 12.24 La hibridación genómica como herramienta taxonómica. (a) Se aísla el DNA genómico de los organismos que se va a comparar y después se fragmenta y se desnaturaliza. Se prepara una sonda de DNA del organismo 1 fragmentando, desnaturalizando y marcando el DNA (aquí se muestra como fosfato radiactivo). (b) El DNA problema de cada genoma, fragmentado y monocatenario, se inmoviliza sobre una membrana y se hibrida con la sonda de DNA marcada del organismo 1. Se mide la radiactividad del DNA hibridado. (c) La radiactividad del control (DNA del organismo 1 hibridado consigo mismo) se toma como valor de hibridación 100 %. P Preparación de DNA Se calienta para formar cadenas sencillas Hibridación al 100 % Hibridación al 25% Se mezcla el DNA sobre una membrana de nailon y se añade sonda de DNA en exceso: Sonda de DNA DNA problema DNA genómico DNA genómico Fragmentar el DNAP 1 x 1 Hybridized DNA 1 x 2 Misma especie 100 75 50 25 0 Mismo género pero diferentes especies Diferentes géneros 1 x 1 1 x 2 100 % 25 % Misma cepa 1 y 2 pertenecen, probablemente, a diferentes géneros DNA hibridado P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P Organismos que se comparan: Experimento de hibridación: Porcentaje de hibridación Organismo 1 Organismo 2 (a) (b) (c) Resultados e interpretación: P P P P P P P P (Control) (Experimento) Fragmentar y marcar ( ) S e m e ja n z a d e s e c u e n c ia e n tr e g e n e s r R N A 1 6 S ( % ) 100 98 96 94 92 90 88 0 20 40 60 70 80 100 Hibridación genómica DNA−DNA (%) Figura 12.25 Relación entre la semejanza de secuencia de genes rRNA 16S y la hibridación genómica DNA−DNA entre pares de organismos. Se comparan pares de organismos considerando la semejanza entre sus rRNA 16S y los valores de hibridación genómica. Los puntos de la región superior derecha representan pares de cepas que comparten más del 97 % de la secuencia del rRNA 16S y tienen valores de hibridación genómica por encima del 70 % ; por tanto, es probable que sean miembros de la misma especie. Datos adaptados de Rosselló-Mora, R. y R. Amann. 2001. FEMS Microbiol. Revs. 25: 39-67, y Stackebrandt, E. y J. Ebers. 2006. Microbiology Today. 11: 153-155. https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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