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Técnicas de necropsia en animales domésticos Aline S. de Aluja Posgrado en la Universidad de Pennsylvania, EU en 1961. Profesora emérita de la Universidad Nacional Autónoma de México. Premio Universidad Nacional en Docencia 1989 y1993. Investigadora Nacional nivel III Coordinadora del programa IDPT-ILPH-UNAM. Fernando Constantino Casas Posgrado en Patología, Universidad de Cambridge, Inglaterra. Profesor titular del Departamento de Patología, FMVZ, UNAM. Jefe del Departamento de Patología, FMVZ, UNAM. Investigador Nacional nivel I Dr. Jorge Aldrete Velasco Editor responsable Editorial El manual moderno México, D.F. – Santa fé de Bogotá a) Título original de la obra: Técnicas de necropsia en animales domésticos Técnicas de necropsia en animales domésticos D. R. © 2002 ISBN 968-426-938-2 Editorial El Manual Moderno, S. A. de C. V, Av. Sonora núm. 206, Col. Hipódromo, Deleg. Cuauhtémoc, 06100 México, D. F. 52-65-11-00 Miembro de la Cámara Nacional de la Industria Editorial Mexicana, Reg. núm. 39 Todos los derechos reservados. Ninguna parte de esta publicación puede ser reproducida, almacenada en sistema alguno de tarjetas perforadas o transmitida por otro medio -electrónico, mecánico, fotocopiador, registrador, etcétera- sin permiso previo por escrito de la Editorial. All rights reserved. No part of this publication may be reproduced, stored in a retrieval system, or transmitted in any form or by any means, electronic, mechanical, photocopying, recording or otherwise, without the prior permission in writing from the Publisher. manual moderno ® es marca registrada de Editorial El Manual Moderno. S.A. de C. V. Ficha catalográfica Aluja, Aline S. de Técnicas de necropsia en animales domésticos / Aline S. de Aluja, Fernando Constantino Casas. -- México Editorial El Manual Moderno, 2002. xvi, 104 p.: il. 28 cm. Incluye índice Bibliografía: p. 97-98. ISBN 968-426-938-2 1. Autopsia veterinaria. 2. Patología veterinaria. I Constantino Casas, Fernando. II. t Diseño de portada Mario C. Galván Jiménez Revisión Técnica M.V.Z. Pedro Pradal Roa 636.08960759 ALU.t Biblioteca Nacional de México. A los estudiantes de la patología veterinaria Agradecimientos Es un grato deber expresar nuestro agradecimiento a todos los miembros del Departamento de Patología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México, que nos ayudaron en muchas formas durante la elaboración de este texto. Nuestro reconocimiento especial a los médicos veterinarios Ma. Teresa Casaubon, J.A. Barajas, G. García, J. Gay, Alfonso López-Mayagoitia, L. acampo, Alicia Pérez, René Rosiles, Francisco Trigo, Leopoldo Paasch, Agustín Montes de Oca, Juan Montaño, Francisco Suárez, Armando Mateos Poumián y a la bióloga Larisa Chávez por revisar algunos capítulos; a J. Abín, Miguel Ángel Zamora y Jaime Eugenio Córdoba por su colaboración fotográfica; a la técnica en histología Carmen Zamora y al jefe de laboratorio Aureliano García. Muchos de los dibujos fueron elaborados por la M.V.Z. Amalia Rossi, durante nuestro primer intento de una guía de técnicas de necropsia, le agradezco habernos permitido reproducirlos en este libro. Mi gratitud especial para mi esposo y mis hijos, por su comprensión y apoyo, que me permitieron la tranquilidad necesaria para dedicarme a este trabajo. Aline S. de Aluja [VII] Prefacio Con la presentación de este libro se desea ofrecer al estudiante de Medicina Veterinaria una guía para llevar a cabo estudios post mortem en los animales domésticos. De modo alguno podrá sustituir una experiencia adquirida por medio de la observación directa de los cambios que producen los múltiples agentes etiológicos en el animal. Sin embargo, para alcanzar el objetivo de una necropsia, que es explicar la causa de la muerte, es, preciso establecer un método de trabajo que el estudiante debe seguir en forma rutinaria y que podrá encontrar en estas páginas. El creciente número de jóvenes que acuden a las escuelas de Medicina Veterinaria y Zootecnia y la sobrecarga de los planes de estudio, con frecuencia impiden que en las sesiones prácticas se logren afianzar los conocimientos y que se adquieran las destrezas necesarias. Durante años dedicados a la enseñanza de la Patología Veterinaria y de convivir con los estudiantes, he sentido la falta de una guía que complemente la enseñanza y facilite el aprendizaje de los pasos a seguir para poder formular un diagnóstico post mortem. Existe mucha literatura al respecto, pero se encuentra dispersa y no siempre al alcance del alumno. En las páginas de este libro, se ha tratado de reunir la información necesaria para llevar a cabo estudios post mortem, con el deseo que le sea útil no sólo al estudiante, sino también al profesional que necesita recordar algún detalle durante su trabajo diario. Por este motivo se presentan tanto las técnicas de necropsia como también la información referente a las actividades colaterales, como lo son la toma de muestras, redacción de informes y métodos para eliminar el cadáver, una vez terminado el estudio. Se ha incluido un capítulo que trata el tema de la eutanasia. En los textos consultados y en las instituciones de enseñanza veterinaria, el tema suele tratarse de manera superficial. Sin embargo, es indispensable que tanto el profesor como los estudiantes conozcan a fondo los principios básicos que deben respetarse para evitarle sufrimientos innecesarios a un animal, cuando por alguna razón se enfrenten a la necesidad de matarlo. Por esta razón se describen en detalle los métodos más aceptados. Para esta edición tuve la suerte de contar con la colaboración y coautoría del M.V.Z. Ph.D. Fernando Constantino Casas, que ha aportado importantes ideas para actualizar este manual. Aline S. de Aluja [IX] Semblanza de la maestra Aline S. de Aluja Escribir una semblanza de la maestra Aline Schunemann de Aluja resulta una tarea agradable, pero a la vez complicada porque es difícil añadir algo nuevo sobre su actividad académica, ampliamente conocida entre los profesionales de la medicina veterinaria, en la medida que ella ha desempeñado un papel protagónico en la enseñanza y desarrollo de la patología veterinaria en México. Una trayectoria tan firme, como la de la maestra Aline, evidentemente ha sido objeto de distinciones, incluyendo el emeritazgo que es el máximo reconocimiento que otorga la Universidad Nacional de México a sus académicos y, desde luego, estos reconocimientos se han acompañado de la publicación de resúmenes biográficos, por lo que para muchos ya son conocidas sus aportaciones al estudio de plantas tóxicas, toxoplasmosis, cisticercosis, distrofias musculares y otros muchos temas en los queja maestra Aline ha sido pionera. Muchas generaciones de estudiantes de veterinaria hemos sido beneficiados con la vocación docente de la maestra Aline, que incluyó la preparación de la más importante colección de diapositivas de condiciones patológicas de los animales en Latinoamérica. Los lectores de esta obra, ciertamente encontrarán un testimonio inmediato de esa singular vocación docente, ya que está escrita con la generosidad que caracteriza al material didáctico elaborado por la maestra Aline, quien expresa el genuino deseo de enseñar compartiendo una vasta experiencia. Sin embargo, en una institución de larga vida como la Universidad Nacional de México hay muchos ejemplos, afortunadamente, de destacados académicos quienes como la maestra Aline, se han ganado el reconocimiento de alumnos y colegas por una destacada labor docente y de investigación. Falta entonces resaltar la característica que convierte a la Maestra en una personalidad tan singular y muy estimada. Sin lugar a dudas ese rasgo es el amor, respeto y responsabilidad por la vidaen general y, en especial, por el bienestar de los animales. En una era como la presente, de intercambio de información por medios electrónicos, resulta cada vez más fácil actualizar los conocimientos, pero no así, el contar con modelos de empeño, sentido ético y generosidad. Con admiración, hemos atestiguado la lucha incansable de la maestra Aline en favor de mayor sensibilidad humana para el buen trato de los animales y para sembrar en las conciencias de estudiantes e investigadores la semilla de la bioética, término que acuña felizmente una nueva actitud responsable frente a los seres vivos y el medio ambiente. El ya decano, creciente y noble programa de protección de equinos que ha beneficiado a miles de burros, mulas y caballos y, desde luego, también a sus propietarios y que [XI] XII TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS cuenta con reconocimiento y apoyo internacionales, es el mejor ejemplo de la proverbial tenacidad de la Maestra para lograr en los hechos lo que se aprecia como poco probable en el pensamiento. La Facultad de Medicina Veterinaria y la profesión veterinaria, cuyo objeto de estudio son los animales y su relación con el bienestar humano, tienen el singular privilegio de contar, en la persona de la maestra Aline, con un modelo de excelencia con sentido humano, donde la orientación del trabajo y empeño está dirigida a enseñar, educar y compartir experiencia para fomentar el cuidado y respeto a la vida. Leopoldo Paasch Martínez Índice AGRADECIMIENTOS ................................................... . .......... VII PREFACIO .................................................... ............................ IX SEMBLANZA DE LA MAESTRA ALINE S. DE ALUJA ....................... ................. .......... .......... XI 1: IMPORTANCIA DE LA NECROPSIA EN LOS ANIMALES DOMÉSTICOS....................................... 1 2. MÉTODOS DE EUTANASIA.......................................................3 Generalidades ................................. ............................ 3 Métodos físicos mecánicos ............. ............................ 3 Métodos físicos eléctricos ............... ............................ 7 Métodos químicos ........................... ........................... 10 3. PREPARATIVOS PARA LA NECROPSIA ........................ .....13 Medidas generales.........................................................13 Lugar de la necropsia ........ ........ ..................... .......... 13 Sala de necropsia ......... ........ ..................... .......... 13 Necropsia en el campo .......... ..................... ...... ... 15 Ropa para la necropsia ............... .................... . .......... 15 Instrumental y otro equipo ........ ..................... .......... 16 Material para tomar muestras .... ..................... .......... 16 Desinfectantes ....... ................... ..................... .......... 16 Desinfectantes químicos ....... ..................... .......... 17 4. LA NECROPSIA........................................................................ 21 Cambios Post mortem .... ....................... ......................... 21 Técnica de la necropsia ................. ............................. 22 Inspección externa ................... ............................. 22 Incisión primaria ...................... ............................. 22 Apertura de cavidades .............. ............................. 24 Cavidades articulares .......... , .......................... 24 Cavidad bucal, faringe y laringe ....................... 26 Cavidad abdominal ...... .................................... 26 Cavidad torácica .......... .....................................27 Cavidad pélvica ............ .................................... 28 Cavidad craneana y extracción del encéfalo .................................... . ....... 29 Cavidades de la cabeza ......................... . ....... 29 Senos de la cabeza y fosas nasales................ .. .. 29 Extracción de vísceras ..................................... . ....... 29 Vísceras torácicas .................................... . ....... 29 Vísceras abdominales ..............................................30 Perros y gatos ............................................ ....... 31 Rumiantes .............................................. . ....... 31 Caballos ................................................. . ....... 31 Órganos de los aparatos urinario y genital ........................................................... 32 Inspección de sistemas y órganos .............................. 32 Órganos de la cavidad torácica y anexos ............................................................32 Corazón y grandes vasos de la cavidad torácica ........... ............ ........ 35 Aparato digestivo .............. ............................ ....... 36 Lengua, cavidad bucal y laringe ............. .. ....... 36 [XIII] XIV TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Esófago .............................................. ............... 36 Estómago ........................................... ............... 36 Duodeno ............................................ ............... 37 Yeyuno ............................................... ............... 37 Diferencias ......................................... ............... 37 Ciego ................................................. ............... 37 Colon ................................................. ............... 37 Hígado ............................................... ............... 38 Bazo ................................................... ............... 40 Páncreas ............................................. .............. 41 Aparatos urinario y genital ..................... ............... 41 Aparato urinario ................................. .............. 41 Aparato genital femenino .................. ............... 44 Aparato genital masculino ................. ............... 44 Apertura de la cavidad craneana, extracción y examen del encéfalo .......................... 45 Enucleación de ojos .......................... .......................... 47 Extracción de la médula espinal ........ .......................... 47 Glándulas endocrinas ........................ .......................... 47 Timo ........................................ .......................... 47 Hipófisis .................................. .......................... 48 Páncreas.............................................................. 48 Adrenales ........................................................... 48 Tiroides .............................................................. 48 Paratiroides ........................................................ 49 Examen de la médula ósea hematopoyética ...................................................... 49 Nódulos (ganglios) linfáticos ....................................... 49 NECROPSIA DE AVES ................... ............................................. 49 Ma. Teresa Casaubon H. Introducción .......................... ..................... . .............. 49 Eutanasia ............................... ..................... . .............. 50 Mecánicos .. ....................... ................... . ............. 51 Químicos .......................... ..................... . ............. 51 Eléctricos ......................... ..................... . ........... . 51 Inspección externa ................ ..................... . ............. 51 Incisiones primarias .............. ..................... . ............. 51 Exposición de órganos abdominales ........... . .............52 Exposición de órganos torácicos ................. . ............. 53 Examen de órganos y aparatos ............ ............... 53 Apertura de la cavidad nasal ....................... ............... 54 Extracción de encéfalo ................................ ............... 54 Disección de la médula espinal..................................... 54 Disección del nervio ciático ........................................ 55 Examen de las articulaciones ...................................... 55 Examen de los huesos y de la médula ósea................55 Protocolo e informe de los resultados............................55 5. MATERIAL Y MÉTODOS PARA LA TOMA DE MUESTRAS .............................. ....................................... 59 Generalidades .............................................................. 59 Toma de muestra ..................................................... 59 Material para exámenes hematológicos ....................................................... 60 Indicaciones para algunas determinaciones especiales requeridas en sangre ......................................... 60 Material para exámenes bacteriológicos y micológicos ......................................................... 60 Material para exámenes virológicos ............................ 61 Material para exámenes parasitológicos ................... .................................. 62 Nematodos .......................... .................................. 62 Triquinas ............................. .................................. 62 Cestodos .............................. .................................. 62 Trematodos ......................... .................................. 62 Coccidias ............................. .................................. 62 Babesias .............................. .................................. 62 Trichomonas ......................... .................................... 62 Insectos ............................... .................................. 62 Heces ................................... .................................. 62 Raspado de piel y muestras de pelo ....................... 62 Muestras para exámenes histopatológicos ..................................................... 62 Obtención de líquido cefalorraquídeo ......................... 63 Obtención de líquido sinovial ...................................... 63 Obtención de orina ...................................................... 63 Técnica para la fijación del pulmón por perfusión con formalina ..................... ................... 63 Muestras para microscopia electrónica de transmisión ....................................................... 64 Fijador .................................................................... 64 Procedimiento ......................................................... 64 6. TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDADES EN LOS ANIMALES DOMÉSTICOS ..................................... 67 APÉNDICES APÉNDICE A ENFERMEDADES EXÓTICAS Y ENZOÓTICAS DE NOTIFICACIÓN OBLIGATORIA EN LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS .. ........................ 79 Grupo 1. Enfermedades exóticas de notificación obligatoria inmediata en los Estados Unidos Mexicanos ....... ............ .... 79 Aves ........................... ................................ ...... .... 79 Bovinos ...................... ......................... ............ .... 79 Cánidos ...................... ......................... ............ .... 80 Caprinos ................. ............................................... 80 Equinos .................. ............................................... 80 Leporidos ............... ............................................... 80 Ovinos .................... ............................................... 80 Porcinos ................. ............................................... 81 Grupo 2. Enfermedades enzoóticas de notificación obligatoria inmediata al Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica en México (SIVE) ....................... 81 Aves ....................................................................... 81 Bovinos .................................................................. 81 Cánidos .................................................................. 81 Caprinos ................................................................. 81 Equinos .................................................................. 81 Fauna silvestre ....................................................... 81 Felinos ................................................................... 81 Ovinos ................................................................... 81 Porcinos ................................................................. 81 Grupo 3. Enfermedades enzoóticas de notificación mensual obligatoria en los Estados Unidos Mexicanos ........................ 81 Aves ....................................................................... 81 Bovinos ................................................................. 82 Canideos ................................................................ 82 Caprinos ................................................................ 82 Equinos .................................................................. 82' Felinos ................................................................. , 82 Leporidos .............................................................. 82 Ovinos ................................................................. : 82 Porcinos ................................................................. 83 Fauna silvestre ....................................................... 83 APÉNDICE B EJEMPLO DE UN PROTOCOLO DE NECROPSIAS 84 Hoja de hallazgos macroscópicos ............................... 85 Diagnóstico macroscópico .......................................... 85 Lista de órganos muestra ............................................ 86 APÉNDICE C EJEMPLO DE FORMATO PARA DIAGNÓSTICO FINAL ..................................................................................... 87 ÍNDICE XV APÉNDICE D EJEMPLO DE PROTOCOLO PARA CITOLOGÍA, BIOPSIA O MICROSCOPIA ELECTRÓNICA.................. 88 APÉNDICE E EJEMPLO DE PROTOCOLO PARA INVESTIGACIÓN DE RABIA/ MOQUILLO ....................... 89 APÉNDICE F VOLÚMENES SANGUÍNEOS EN RELACIÓN CON EL PESO CORPORAL (SEGÚN SCHALM).................... 90 APÉNDICE G ESQUEMA DE LA CIRCULACIÓN LINFÁTICA EN LOS BOVINOS ................................................................. 92 APÉNDICE H ÁREAS DE DRENAJE DE LOS PRINCIPALES NÓDULOS LINFÁTICOS ....................................................... 93 APÉNDICE I DIBUJOS DE VÉRTEBRAS CERVICALES, TORÁCICAS, LUMBARES, COCCÍGEAS Y SACRAS .............................................................................. 95 APÉN'DICE J DIRECCIONES DE FABRICANTES DE INSTRUMENTOS Y APARATOS PARA LA DESTRUCCIÓN HUMANITARIA DE ANIMALES. PISTOLAS DE PERNO OCULTO O DE CONCUSIÓN, PINZAS ELÉCTRICAS .......................................................... 96 BIBLIOGRAFÍA ............................................................................ 97 ÍNDICE ANALÍTICO ..................................................................... 99 1 Importancia de la necropsia en los animales domésticos El estudio de la patología involucra la identificación de las alteraciones que las enfermedades producen sobre la estructura y la función de un órgano, tejido, aparato o sistema del individuo. Por tal motivo, en patología como ciencia biomédica, es necesario el conocimiento' de áreas como embriología, anatomía, histología, fisiología, bioquímica, inmunología, genética, toxicología, microbiología y parasitología.A su vez, del estudio de dichas áreas y su relación con la patología resultan las diversas ramas de la patología: la anatomía patológica, la patología celular, la patología ultraestructural, la patología molecular, la patología química, la patología quirúrgica, la patología clínica, la fisiopatología, la inmunopatología, etcétera. El conocimiento de la anatomía patológica se obtiene principalmente de la realización de necropsias o estudios post mortem. La necropsia es un examen sistemático de los órganos y tejidos en un cadáver para determinar la causa de muerte, el grado de enfermedad o lesión, el efecto de la terapia o la identificación de alguna condición patológica no detectada ante mortem. La identificación y descripción morfológica de las alteraciones llevadas a cabo en la necropsia servirán para el conocimiento de diversos procesos patológicos, para reconocer enfermedades y agentes causales de enfermedad, para el estudio de neoplasias y otras alteraciones. Para llevar a cabo el estudio de necropsia es necesaho que el patólogo conozca los cambios funcionales del individuo vivo. Esto se obtendrá de un expediente o historia clínica, de los datos de laboratorio obtenidos en el enfermo, como lo son los procedimientos diagnósticos hematológicos, radiográficos, parasitológicos, virológicos, citológicos, histológicos, histoquímicos y los efectos de tratamiento sobre el individuo. De lo anterior se deduce que la necropsia exige un trabajo cuidadoso y minucioso del patólogo. En resumen, se pueden señalar como objetivos de la necropsia los siguientes: a) Determinar la causa de la muerte o enfermedad. b) Identificar anomalías congénitas. c) Establecer el diagnóstico morfológico y etiológico de la enfermedad. d) Confirmar o rechazar el diagnóstico clínico y establecer la correlación entre la clínica y la patología. e) Valorar los resultados del tratamiento médico para mejorarlos en su aplicación a los enfermos. f) Informar al clínico, para la toma de medidas sanitarias o de salud pública. g) Poseer información para análisis estadísticos y epidemiológicos. [1] 2 Métodos de eutanasia GENERALIDADES Eutanasia significa muerte sin dolor. El término de sacrificio humanitario, se usa específicamente para darles muerte a los animales en rastros o para el sacrificio de emergencia. Los dos términos implican que la forma de muerte no le debe provocar ni ansiedad, ni dolor y todos los médicos veterinarios tienen la obligación ética ineludible de respetar este principio. La razón por la cual se tiene que practicar la eutanasia, en la mayoría de las veces es por una enfermedad incurable o vejez extrema, que causan sufrimiento o una calidad de vida inaceptable. Otras veces es necesario efectuar la eutanasia para poder establecer el diagnósti'co de un padecimiento que se presentó en un grupo de animales, con el fin de poder tratar a todos los demás del hato afectado. Cualquier método para sacrificar a un animal, inclusive los utilizados en los mataderos o rastros, debe cumplir con los siguientes principios: 1. No debe causar dolor ni angustia, ni poner en peligro al operador. 2. Debe ser confiable. 3. Debe ser rápido. 4.Debe ser seguro y sencillo de aplicar. 5.Si es posible, su costo no debe ser excesivo. Existen diferentes métodos de eutanasia, los que se aplican tomando en cuenta, entre otros, la especie animal y la disponibilidad del equipo. En general, los métodos pueden ser clasificados en: 1.Físicos Mecánicos Eléctricos 2.Químicos METODOS FISICOS MECANICOS a) Pistola o fusil con bala. Este sistema implica cierto riesgo, ya que la bala puede rebotar si se realiza dentro de un local. b) Armas con bala expansiva. Las balas se desintegran inmediatamente después del disparo, explotando en la cavidad craneana al haber atravesado los huesos del cráneo. c) Pistola de émbolo oculto (Stunner). Esta pistola se acciona con cartuchos que impulsan un émbolo de metal, el que regresa al mango inmediatamente después del disparo. Al penetrar por los huesos del cráneo produce un pequeño orificio en ellos. Es uno de los métodos más comunes, ya que es fácil, de bajo costo y produce una insensibilización instantánea. Al Caer el animal debe procederse inmediatamente al sangrado por medio de un corte de las venas yugulares. En las figuras 2-1 a 2-3, se ilustran diferentes modelos de pistolas de émbolo oculto. d) Pistola de concusión. También opera con cartuchos, pero el émbolo es de punta roma, de modo que no penetra a la [3] 4 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Figura 2-1. Pistola de émbolo oculto tipo "Schermer" con cartuchos para diferentes especies. masa encefálica, sino produce una insensibilización por medio de una conmoción cerebral. Después de la caída del animal debe procederse inmediatamente a su sangrado (Hg. 2-4). El lugar exacto de aplicación de estas pistolas en la cabeza del animal en las diferentes especies está indicado en las figuras 2-5 a 2-17. En el perro debe mantenerse la cabeza inmóvil sujetándola por la nuca con una mano. Si el animal es agresivo será necesario colocarle un bozal. Se trazarán dos líneas imaginarias, que van del ángulo externo de los ojos a la base de las orejas. Con una mano se apoya la pistola a 1 cm al lado del punto donde se cruzan las dos líneas imaginarias y de la línea media, para evitar la cresta ósea que corre a lo largo de la frente (fig. 2-5). La pistola se inclina de tal modo que el émbolo siga la misma dirección que la espina dorsal. Para la eutanasia de perros son preferidos los métodos químicos, como con barbitúricos. Figura 2-2. Pistola de émbolo oculto tipo "Accles and Shelvoke Ltd." para diferentes especies. Figura 2-3. Pistola de émbolo oculto, modelo "Cash" y manera de usarla en bovino (Accles and Shelvoke Ud.). En los équidos la pistola se apoya en el centro de la frente, más abajo de la línea que une las bases externas de las orejas, recordando que el encéfalo se encuentra en la parte superior de la cabeza; las figuras 2-6 a 2-9 presentan las formas correcta e incorrecta del disparo. En los bovinos adultos se apoya la pistola en la frente en un punto donde se cruzan dos líneas imaginarias, trazadas desde la base de los cuernos hasta el ángulo externo del ojo contrario (fig. 2-10). En el caso de las razas cebú, que tienen el cráneo muy convexo, el lugar del disparo debe ser arriba de este punto (Hg. 2-11 y 1-12). Otro sistema que se utiliza, es colocar la pistola atrás de la protuberancia occipital, dirigiendo el émbolo hacia adelante, en dirección a la boca. En los terneros se apoya la pistola en la línea media de la frente, ligeramente más abajo que en los bovinos adultos, pues los jóvenes tienen la parte alta del cerebro muy poco desarrollada (fig. 2-13). Figura 2-4. Rifle de concusión "Cash Knocker" (Accles and Shelvoke Ltd.). b) c) Figura 2-5. Vista frontal en un perro. Figura 2-7 Posición y trayectoria correcta del émbolo de la pistola al cerebro en équido. Figura 2-9. Posición y trayectoria incorrecta del émbolo de la pistola· en équido con dirección al Girus postlateralis y cerebelo. Posición de la pistola demasiado atrás. MÉTODOS DE EUTANASIA 5 Figura 2-6~ Sitió donde debe ser colocada la pistola en el caballo. Figura 2-8. Posición y trayectoria incorrecta del émbolo de la pistola en équido con dirección a los senos frontales y lóbulos olfatorios. Posición de la pistola demasiado adelante. Figura 2.10. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un bovino adulto. Vista frontal. 6 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Figura 2-11. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un bovino cebú. Vista lateral. El método de la "puntilla", muy usado todavía en los países en los que no existen leyes para evitar el sufrimiento innecesario a los animales, no deberecomendarse, porque aunque produce parálisis del animal, no lo insensibiliza, ya que no lesiona al encéfalo ni interrumpe la circulación sanguínea al no cortar las arterias intervertebrales. En ovejas y cabras sin cuernos, éstas se insensibilizan apoyando la pistola en la parte más alta de la cabeza, dirigiendo el émbolo hacia la garganta (fig. 2-14). En los animales con cuernos se coloca la pistola detrás y en la mitad de la elevación que corre entre los cuernos, dirigiéndola hacia la boca (fig. 2-15 y 2-16). Es importante recordar que es necesario utilizar cartuchos más potentes para ovejas y corderos pesados. En verracos y cerdas adultas se deben utilizar cartuchos de máxima potencia. El método para sacrificio de cerdos es insensibilizarlos apoyando la pistola en la mitad de la frente, Figura 2-13. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un ternero. Vista lateral. Figura 2-12. Posición y trayectoria del émbolo de la pistola, al cerebro de bovino cebú. 2 cm por encima de una línea imaginaria que une los ojos (fig. 2-17). Para animales pequeños como conejos, ratas, ratones y aves domésticas, los métodos físico-mecánicos que se recomiendan son manuales o por medio de instrumentos de metal o de madera ("desnucador"), que pueden hacerse fácilmente. Consiste en una tira de madera de 40 cm de largo, 5 cm de ancho y 1 cm de grosor, con un extremo adaptado para que pueda ser cómodamente tomado con la mano (fig. 2-18). En cada lado de la madera se le fija una tira de metal de 28 cm de largo por 0.5 cm de ancho y de un grosor de 1 cm. Otro instrumento útil, especialmente para ratas y ratones, es la guillotina que decapita a los animales (fig. 2-19). Su uso puede ser indispensable en los casos en los que son necesarios estudios de microscopia electrónica para los que no es posible utilizar medios químicos de eutanasia por las alteraciones celulares que producen. Figura 2-14. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un borrego sin cuernos. Vista lateral. Figura 2·15. Sitio donde debe ser colocada la pistola en una cabra. Vista lateral. En conejos, el animal debe ser sujetado de las extremidades posteriores (fig. 2-20), de manera que la cabeza del animal quede colgando. Con otra mano extendida o con el desnucador se aplica un golpe fuerte y seco. Para ratas y ratones el sistema de eutanasia más rápido es la guillotina. Otro método puede ser la dislocación del cuello, generalmente posible en ratones y ratas jóvenes. El animal se coloca sobre una superficie donde pueda sujetarse y se detiene por la cola. Cuando trata de ir hacia adelante, se coloca a través del cuello un palito redondo de aproximadamente medio centímetro de diámetro o un lápiz, y se ejerce fuerte presión (fig. 2-21). Con un rápido tirón de la cola se dislocará la nuca. En las aves el método más común es la dislocación del cuello. El animal se sujeta con una mano por los tarsos con la cabeza colgando y se mantiene contra la cadera del Figura 2.17. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un cerdo. Vista frontal. , MÉTODOS DE EUTANASIA 7 Figura 2-16. Sitio donde debe ser colocada la pistola en un borrego con cuernos. Vista lateral. operador. La cabeza se sujeta con los dos primeros dedos de la otra mano detrás del cráneo y con el pulgar debajo de la parte inferior del pico. El cuello se extiende mediante un tirón fuerte y rápido hacia abajo, de modo que quede dislocado entre las regiones cervical y occipital. También es posible el uso de la guillotina. Aunque la ejecución de tales maniobras manuales en estas especies es desagradable para la mayoría de las personas que las deben ejecutar, los resultados son satisfactorios, siempre y cuando sean realizados por operadores con habilidad y decisión, ya que producen una I muerte casi instantánea. MÉTODOS FÍSICOS ELÉCTRICOS , Para insensibilizar a un animal por medio de este sistema es de primordial importancia que la corriente eléctrica atraviese el encéfalo ya que, si esto no sucede, el animal quedará paralizado o inmovilizado, pero no inconsciente. Por tanto, el método usado en alguI nos lugares, que consiste en pasar la corriente por medio de un cable y dos pinzas, conectadas una en el labio y otra en el ano del animal, es totalmente incorrecto y debe ser prohibido y cambiado por métodos más humanitarios. En varios países, especialmente en las universidades de la Gran Bretaña, existen programas de investigación para Figura 2-18. Desnucador para conejos o aves. 1 8 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Figura 2-19. Guillotina para pequeñas animales de laboratorio. para establecer los mejores métodos de eutanasia por medio de la electricidad para las diferentes especies animales. El óptimo resultado del método eléctrico depende en gran parte del uso correcto de: 1. Amperaje: la medida de la cantidad de corriente eléctrica. 2. Voltaje: la presión eléctrica que mueve la corriente a través de la cabeza y del encéfalo. 3. Resistencia: el grado que impide el flujo de la corriente a través de barreras materiales como por ejemplo el hueso, el pelo o la lana. Un aturdimiento efectivo depende de una corriente que es forzada a través de la resistencia formada por la piel, los pelos, la lana o los huesos. La corriente tiene que ser de un amperaje suficiente para interrumpir la actividad normal del encéfalo y producir inconsciencia. El tiempo entre el intervalo del aturdimiento y el sangrado debe ser lo más corto posible, en ningún caso Figura 2-21. Sacrificio de ratón, desnucándolo. Figura 2-20, Modo de sujetar un conejo para el golpe en la nuca. mayor de 30 segundos. En particular en los casos de aturdimiento eléctrico, existe el peligro que el animal se recupere antes de haber perdido la mayor parte de su sangre y que despierte antes de haber completado la maniobra. Cuando el aturdimiento por electricidad se efectúa correctamente, el animal sufre contracciones tónicas y clónicas. Las primeras duran de 10 a 20 segundos y se caracterizan por contracción de los miembros pélvicos, que se flexionan hacia el cuerpo. Durante las segundas contracciones que duran de 15 a 45 segundos, se observan movimientos de carrera y un relajamiento gradual. Si el sangrado no se efectúa antes del final de las clónicas, existe el peligro que el animal recupere la conciencia. El sistema eléctrico se considera efectivo y da resultados satisfactorios en cerdos y pequeños rumiantes. Para estas especies existen pinzas eléctricas que hacen pasar una cantidad conocida de electricidad de un lado a otro del encéfalo por medio de electrodos que se deben colocar en un punto determinado de ambos lados de la cabeza (Hg. 2-22 y 2-23). En equinos y bovinos adultos el punto donde deben ir los electrodos se encuentra aproximadamente 5 cm arriba de cada ojo, sobre una línea imaginaria que vaya del ojo a la base de la oreja o del cuerno (fig. 2-24). En cerdos, cabras y borregos los sitios correctos son ambos lados de la cabeza en el vértice de un ángulo recto d) Figura 2-22. Aparato de desensibilización eléctrica para cerdos. recto formado por una línea vertical que parte de la base de la oreja a una línea horizontal que sale del borde superior de la trompa o de] hocico (fig. 2-25). La intensidad de la corriente eléctrica utilizada depende del peso del animal: Para 130 kg o más, 600 V; 6 amp. Figura 2·24. Puntos donde deben aplicarse las pinzas eléctricas en caballos. MÉTODOS DE EUTANASIA 9 Figura 2.23. Sitio correcto para la electrocución. De 90 a 130 kg, 400 V; 4 ampo De menos de 90 kg, 240 V; 2 ampo Durante la electrocutación se presentan tres fases. La primera aparece cuando se aplica la corriente, el animal flexiona los miembros pélvicos hacia adelante y cae al suelo. En la segunda, estos miembros se extienden y el animal hace movimientos de locomoción.En la, tercera se presentan contracciones espasmódicas de los miembros pélvicos y entonces debe procederse rápidamente al sangrado, ya que si se trabaja con lentitud el animal puede recuperarse. El ganado bovino permanece inconsciente aproximadamente durante tres minutos y la respiración reaparece un minuto después de la aplicación de la corriente, lo que favorece el sangrado. Para que la insensibilización por medio de la electricidad sea efectiva, deben aplicarse las siguientes recomendaciones: Figura 2-25. Puntos donde deben aplicarse las pinzas eléctricas en cerdos. 10 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS a) Revisar los electrodos con regularidad para asegurarse que estén siempre limpios. b) La piel donde van a ser colocados los electrodos debe estar limpia, libre de exceso de grasa o de lodo y humedecida con agua. c) Es preferible que los animales no coman durante unas 8 a 12 horas antes de aplicar la corriente; sin embargo, deben tener acceso al agua. d) Los electrodos siempre deben ser aplicados en el lugar correcto para tener la seguridad que la corriente pase por el encéfalo. En general, deben seguirse las instrucciones del fabricante del instrumento eléctrico que se use. Un método eléctrico que está dando buenos resultados en cerdos es el del "paro cardiaco". Consiste en colocar electrodos en la cabeza y en la columna dorsal, encima del corazón. La corriente produce inconsciencia y paro cardiaco al mismo tiempo, el sangrado es efectivo si se efectúa de inmediato. MÉTODOS QUÍMICOS El uso de sustancias químicas quizá sea el método más recomendable para la eutanasia de pequeñas especies, incluyendo los animales de laboratorio y aves. Entre los compuestos que dan resultados satisfactorios ocupan el primer lugar los barbitúricos. Otros son: sulfato de mag- nesio, hidrato de cloral, cloroformo, éter, bióxido de carbono, monóxido de carbono puro y gas argón. La estricnina no se debe usar, ya que produce violentas contracciones musculares extremadamente dolorosas sin pérdida de sensibilidad. Los cianuros y los fármacos curariformes tampoco deben ser usados por causar dolor, ansiedad o ambos. Barbitúricos (fenobarbital, pentobarbital, etc:). Deprimen al centro respiratorio y vasomotor. Debe preferirse la vía endovenosa; cuando se dificulta puede usarse la vía intraperitoneal, siendo el efecto de mayor lentitud en la última. La dosis endovenosa debe ser el doble de la usada para anestesia; para las otras vías se aumenta al triple. Sulfato de magnesia. Se aplica en forma de solución acuosa concentrada (80%) por vía endovenosa. El ion magnesio deprime uniformemente todas las partes del sistema nervioso central. La inyección debe ser rápida. Es un método útil para pequeños animales. En las especies domésticas tiene la desventaja de que, para producir la muerte, son necesarios por lo menos 250 ml de la solución, cantidad que es difícil introducir con la suficiente rapidez. Hidrato de cloral. Deprime el centro respiratorio. Se aplica por vía endovenosa o rectal, siendo el efecto en esta última relativamente lento. Existen en algunos países preparaciones especiales para eutanasia a base de barbitúricos, hidrato de cloral y sulfato de magnesio, que resultan más económicos que el uso de los productos para anestesia. Cloroformo y éter. Se usan sobre todo para animales de laboratorio. En un recipiente bien cerrado se coloca un algodón empapado con una de las dos sustancias y se introduce al animal, el que debe permanecer en el recipiente el tiempo suficiente para que después de anestesiado muera. Bióxido de carbono. La eutanasia con este gas es un método muy recomendable para gatos y animales de laboratorio, también ha dado buenos resultados en perros. Se vende en cilindros de diferentes tamaños que se conectan por medio de una manguera o un tubo a un gabinete herméticamente cerrado. Para producir la muerte tranquila, la concentración de bióxido de carbono debe ser de 50 a 60%, preferentemente mezclado con 30% de oxígeno. Existen ya en el mercado aparatos especiales y sancionados por la Universities Federation for Animal Welfare y no deberían faltar en ninguna institución en la que se trabaje con animales de laboratorio o en las que tienen que eliminarse perros y gatos callejeros. En caso de no disponer de gabinetes especiales, es posible improvisar un dispositivo para pequeños animales de la siguiente manera: el animal se coloca en una jaula y ésta se mete dentro de una bolsa de plástico (fig. 2-26). El tubo del tanque con bióxido de carbono se introduce a la bolsa, teniendo gran cuidado de que el orificio de la bolsa esté herméticamente adaptado al tubo para que no se escape el gas. Cuando se trata de animales pequeños como cuyos, ratas, ratones y conejos pueden introducirse varios en la jaula, cuidando, desde luego, que no se trate de individuos que peleen entre sí. Figura 2-26. Jaula con un roedor envuelta en una bolsa de plástico, la que está conectada por medio de una manguera a un tanque con bióxido de carbono. Un inconveniente del bióxido de carbono es que este gas es más Pésado que el aire y puede quedar cierta cantidad de oxígeno en la parte superior de la cámara. Esto puede permitir que algunos animales, como los gatos, tarden en morir. Monóxido de carbono. La inhalación de este gas en una cámara cerrada produce una muerte rápida porque se combina con la hemoglobina y causa una anoxia fatal, que MÉTODOS DE EUTANASIA 11 es tan marcada que el animal no sufre. La óptima concentración de monóxido de carbono en una cámara de gas es 6%. El monóxido de carbono producido por la combustión de automotores es impuro, razón por la cual no debe ser utilizado como método de eutanasia. Ningún químico debe emplearse si la carne va a ser consumida por personas o animales. 3 Preparativos para la necropsia MEDIDAS GENERALES El trabajo del patólogo con fines de establecer un diagnóstico post mortem, encierra siempre un peligro potencial para él y sus asistentes, razón por la cual es necesario observar reglas de limpieza e higiene y precauciones para evitar accidentes y contaminaciones. Estas medidas deben ponerse en práctica desde el momento en que se elija el lugar donde se va a trabajar, en caso de tener que hacerlo en el campo, hasta la forma en que se van a desechar los cadáveres. Como medida rutinaria debe revisar se todo el equipo necesario antes de iniciar el trabajo, así como pensar si para cada caso en particular están dispuestos todos los útiles necesarios. También debe haberse revisado en forma detenida la historia clínica que acompaña el caso, para decidir sobre lo que conviene hacer, con el fin de comprobar un diagnóstico, o bien, para implementar medidas extras de protección para los patólogos y el ambiente de trabajo, para manejo del cadáver o del material biológico. Muchas veces el clínico solicita pruebas específicas anotadas en la historia clínica, lo que debe tomarse en cuenta. Asimismo, es necesario asegurar que el caso haya sido debidamente anotado en el registro respectivo. El número de personas que observan y que intervienen en el trabajo debe ser reducido, para evitar posibles accidentes y' contaminaciones. La destrucción del cadáver después de terminada la necropsia requiere especial atención. Es indispensable tener siempre a la mano un pequeño botiquín de primeros auxilios, para poder efectuar curaciones en caso de heridas del personal. Una de las reglas, cuando ocurre esto, es el lavado prolongado con agua corriente, de preferencia caliente y jabón. Esta recomendación es de especial importancia en todos los casos de heridas cuando se trabaja con material sospechoso de rabia o de otras enfermedades zoonóticas. Existe evidencia comprobada que ningún desinfectante es tan efectivo como el lavado minucioso, primero con agua corriente y luego con jabón.Es recomendable que toda persona que trabaja con animales sospechosos de rabia esté vacunada. Es indispensable además, verificar periódicamente que el título de anticuerpos sanguíneos sea suficiente. La aplicación de la vacuna contra tétanos, puede ser necesaria en casos que lo ameriten. En una sala de necropsia no se debe fumar ni comer. LUGAR DE LA NECROPSIA El médico veterinario patólogo trabaja por lo general en una sala de necropsia, pero en ocasiones se le presenta la necesidad de hacerlo en el campo. A continuación se dan las indicaciones para cada una de estas situaciones. Sala de necropsia El diseño debe hacerse pensando en facilitar las buenas medidas de higiene, ventilación e iluminación. [13] 14 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS La entrada de insectos debe evitarse por medio de mallas de alambre en las ventanas. Existen en el mercado lámparas de luz ultravioleta que ayudan a controlar la contaminación bacteriana y otros agentes. Las paredes y los pisos deben ser de superficie lisas, fáciles de limpiar y en el piso deben existir orificios amplios para el desagüe. Para evitar la obstrucción de los tubos de desagüe y de las coladeras, es recomendable un sistema de canales abiertos en el piso, de unos 30 cm de ancho, cubiertos con rejas movibles, que tendrán el declive necesario para que los líquidos no queden estancados (fig. 3-1). Las mesas de necropsia y demás muebles, deben ser de un material que permita su lavado fácil, de preferencia acero inoxidable o en su defecto, granito pulido. Las mesas para pequeñas especies tienen que contar con llaves de agua y un drenaje amplio (fig. 3-2). Para necropsias en grandes especies es ideal una mesa hidráulica, pero si no se dispone de ella se trabaja en el piso o colgando al cadáver de los miembros pélvicos de una barra (fig. 3-3). En la entrada de la sala es conveniente construir un pasillo o manga para los bovinos y los equinos que lleguen vivos, la que servirá como cajón de sacrificio. Sus paredes deben tener una altura de 1.65 m, suficiente para que los animales no vean encima de ellas y su anchura mínima de un metro, Figura 3-1. Sistema de canal de desagüe abierto, cubierto con reja movible. Figura 3-2. Sala de necropsia con mesas para animales pequeños (a) y mesa hidráulica para grandes especies (b). para permitir la presencia de un solo animal a la vez. Por medio de un riel en el techo y un polipasto, el cadáver se llevará al lugar de la necropsia en la sala o al refrigerador. Este último nunca debe faltar como anexo a la sala de necropsia, debe ser de un tamaño tal, que quepan en él tanto grandes especies colgadas, como pequeñas, colocadas en estantes de acero inoxidable o de otro material fácil de limpiar. Es recomendable instalar dos refrigeradores grandes para la eventualidad de que uno esté fuera de servicio o para guardar las canales de animales cuya carne resulte apta para el consumo. Es útil disponer de dos lavabos de acero inoxidable, uno para el lavado de instrumental y de manos enguantadas sucias, el otro para manos sin guantes, al terminar el trabajo. Este último será del tipo de cirugía en los que las llaves se manejan con los codos. Siempre tiene que haber abundante Figura 3-2. Mesa de acero inoxidable con tarja, llave de agua y cubierta removible. agua fría y caliente y mangueras para la limpieza de paredes y pisos. Para esterilizar el instrumental es necesaria una autoclave anexa a la sala, además debe contarse con un cuarto para poder cambiarse de ropa, así como con instalaciones sanitarias y regaderas. El destino de las aguas contaminadas debe ser estudiado y resuelto con un ingeniero sanitario siguiendo las normas de manejo y destrucción de desechos orgánicos del país. Para disponer de los cadáveres y órganos, una vez terminada la necropsia, es de primordial importancia la existencia de un incinerador contiguo a la sala, ya que si los desechos tienen que ser transportados, aunque sea a poca distancia, el peligro de contaminación es evidente, lo que es particularmente peligroso en el caso de las enfermedades infecciosas, en especial las exóticas. Una negligencia en estos casos puede tener consecuencias graves. Necropsia en el campo Al escoger el lugar para trabajar en cualquier explotación ganadera, debe tenerse en cuenta que, de ser posible, sea un sitio sombreado, alejado del tránsito de personas, vehículos y animales, de superficie dura, de preferencia de cemento o en su defecto, de tierra plana y lisa. Si el tamaño del animal lo permite, es una práctica adecuada, colocarlo sobre una tela de plástico o de hule grande, lo que facilitará su remoción para la destrucción. Si no se dispone de un abastecimiento de agua para conectar una manguera, hay que acarrearla en cubetas o tambos. Debe tenerse a la mano un recipiente con desinfectante para instrumentos y demás material utilizado y de charolas o bandejas para las vísceras, evitando así su contacto con la tierra. Todo lo que se describe referente a los preparativos antes de iniciar la necropsia, la ropa y el instrumental debe tenerse en cuenta aun en las condiciones más rusticas. Al terminar el trabajo, el cadáver con sus vísceras se envuelve en el plástico al que ya se hizo referencia o en su defecto, se coloca en tambos o bolsas de plástico, para su incineración. O para que sea enterrado. El agua que se haya utilizado debe verterse en una fosa séptica o en el hoyo donde se va a enterrar el cadáver. Sobre el sitio donde se realizó la necropsia debe espolvorearse cal viva u otro desinfectante apropiado. La incineración se lleva a cabo colocando el cadáver y los residuos en un hoyo, cubriéndolo todo con un material combustible como paja, heno o ramas secas y rociándolo con petróleo para prenderle fuego. No deben quemarse al aire libre cadáveres o tejidos de animales sospechosos de ántrax u otras enfermedades causadas por gérmenes que forman PREPARATIVOS PARA LA NECROPSIA 15 esporas, ya que éstas resisten altas temperaturas y pueden ser levantadas con el humo, contaminando el ambiente. Para enterrar el cadáver se necesita abrir un hoyo a una profundidad mínima de un metro. Una vez colocado adentro, se le cubre con desinfectante o con cal viva antes de taparlo con tierra. Los cadáveres de animales que murieron de fiebre carbonosa deben ser enterrados a una profundidad mínima de 2 m y cubiertos con cal viva u otro desinfectante para finalmente cubrirlos con tierra. El sitio donde se entierren los cadáveres debe ser un lugar donde no se vaya a trabajar la tierra ni cerca de mantos acuíferos. ROPA PARA LA NECROPSIA Uno de los factores que contribuyen a la seguridad personal es el uso y el mantenimiento de la ropa apropiada (Hg. 3-4). Incluye batas u overoles de laboratorio que sean usados exclusivamente para necropsias y lavados con frecuencia, de preferencia al final de cada día de trabajo, de un mandil de hule o de plástico que cubra perfectamente el frente del Figura 3-4. Prosector correctamente vestido. e) f) 16 TECNICASDENECROPSIA'EN ANIMALES DOMESTICOS cuerpo desde el cuello hasta las piernas y de botas de hule u otros zapatos de uso exclusivo en la sala de necropsias. Para grandes especies el uso de botas y overol es indispensable. Siempre debe trabajarse con guantes de hule, preferentemente de hule grueso (tipo doméstico) y las manos enguantadas deben lavarse con frecuencia durante el trabajo y sumergirse en soluciones desinfectantes. Al finalizar el trabajo los guantes se deben esterilizar, ya sea por medio de una autoclave o con soluciones desinfectantes. El uso de cubrebocas es opcional en la mayoría de los casos, pero indispensable en aquellos donde se sospecha de enfermedades altamente contagiosas para el humano. INSTRUMENTAL Y OTRO EQUIPO No es necesario que el instrumental para llevar a cabo una necropsiasea muy complicado. En la figura 3-5 se ilustra el instrumental de rutina recomendable, aunque en condiciones rústicas, el trabajo tendrá que llevarse a cabo disponiendo solamente de cuchillo, hacha, chaira y tijeras. Se puede tener equipo adicional, como un esterilizador eléctrico para instrumental y una sierra eléctrica, y báscula que facilitarán el trabajo (Hg. 3-6). Una cámara fotográfica siempre es de gran utilidad, ya que en ocasiones el patólogo encuentra lesiones características o excepcionales que conviene fotografiar, para el acervo o archivo fotográfico. MATERIAL PARA TOMARMUESTRAS Para tomar las muestras para análisis microbiológicos es necesario tener siempre preparado un equipo estéril formado de tijeras, pinzas y bisturí. El equipo necesario para tomar diversas muestras se ilustra en las figuras 3-7 y 3-8. DESINFECTANTES Ningún desinfectante es efectivo en presencia de grandes cantidades de materia orgánica, por lo que antes de aplicarlo siempre debe efectuarse el lavado cuidadoso con agua abundante, de preferencia caliente y con jabón. Para la desinfección de instrumental y guantes, lo más efectivo es el vapor bajo presión de 15 lb durante 15 minutos Figura 3-5. Instrumental para necropsia: 1, Martillo. 2, Cucharón, 3, Costótomo para grandes especies, 4, Tijeras rectas, 5, Pinzas sin dientes de ratón, 6. Sonda acanalada, 7. Estilete, 8.Chaira, 9, Bisturí, 10. Cincel, 11. Sierra para huesos, 12. Pinzas con dientes de ratón, 13, Tijeras curvas, 14. Cuchillo, 15, Regla, 16, Hacha. Figura 3-6. Báscula y sierra eléctrica. PREPARATIVOS PARA LA NECROPSIA 17 15 min en el autoclave o en una olla de presión de tipo casero. Desinfectantes químicos Definición. Un desinfectante químico es una sustancia que destruye gérmenes de la piel y de los objetos, utensilios, instrumental y locales. Clasificación. Una de las clasificaciones más adecuadas de los desinfectantes es la que se basa en su estructura química: Grupo 1. Agentes tensoactivos: detergentes. Grupo 2. Alcoholes y aldehídos: formaldehído. Grupo 3. Agentes oxidantes: peróxido de hidrógeno. Grupo 4: Derivados de alquitrán: de hulla, de fenoles sintéticos. (madera). Grupo 5. Metales pesados y sus derivados: mercurio, bromo, etcétera. Grupo 6. Compuestos de azufre. Grupo 7. Colorantes azoicos, acridínicos. Grupo 8. Ácidos y álcalis: ácido carbólico, fenoles naturales, ácido sulfúrico. Grupo 9. Halógenos: cloro, yodo, etcétera. Los siguientes desinfectantes son los más usados para el uso en la sala de necropsia: Figura 3-7. Material para tomar muestras. 1. Frasco con formalina al 10%.2. Frascos o tubos con anticoagulante y sin anticoagulante, 3. Tela adhesiva para el marcado de las muestras. 4. Frascos estériles de tapa de rosca. 5. Mechero de alcohol (cuando exista se usará el de gas). 6. Hisopos estériles, 7. Jeringas hipodérmicas, 8. Caja de Petri, 9. Hilo de cáñamo. 18 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Grupo 1. Agentes tensoactivos (detergentes) Sustancias que tienen la propiedad de limpiar las superficies sucias por su capacidad de disminuir la tensión superficial. Se clasifican en: a)Detergentes aniónicos (jabones). b)Detergentes catiónicos (compuestos de amonio cuaternario). c) Surfactantes no iónicos Los detergentes aniónicos (jabones). Se recomiendan especialmente para el lavado minucioso de manos. Son capaces de destruir gérmenes patógenos y virus. Los detergentes catiónicos (cloruro de benzalconio). Son potentes germicidas que actúan contra gérmenes grampositivos y en menor grado contra gramnegativos, algunos géneros de virus y hongos. Tienen poca acción sobre esporas. A bajas concentraciones son bacteriostáticos, por lo que se utilizan en solución de 1: 100 para conservar el instrumental estéril. Mezclados con alcohol también se usan para desinfectar la piel. Los detergentes catiónicos son antagónicos a los aniónicos, de manera que las superficies lavadas con jabón deben ser enjuagadas con agua antes de someterlas a la acción de detergentes catiónicos. Los surfactantes no iónicos (polivinil pirrolidona) se usan en combinación con el yodo (isodine). Son potentes germicidas, especialmente contra brucelas, estafilococos, estreptococos, monilias y algunos virus. Grupo 2. Alcoholes y aldehídos Alcohol etílico. Tiene marcada acción antibacteriana, pero muy débil sobre esporas. La concentración óptima es de 70%. Puede usarse para la desinfección de manos, dejándolo actuar por lo menos dos minutos. No se recomienda para instrumental. Formaldehído. Es un gas de origen sintético y se encuentra en el comercio en solución acuosa a 40% (formol o formalina). Tiene la propiedad de polimerizarse, transformándose en paraformaldehído sólido (tabletas) que al calentado libera formaldehído gaseoso. Para la desinfección de locales puede emplearse la solución de formaldehído, calentándola, o el paraformaldehído sólido, desprendiendo ambos formaldehido gaseoso. Para un local de 50 m3 es suficiente 1 litro de la solución o100 g de sólido, dejándolos actuar durante 4 o 5 h. Una mezcla de formol con permanganato de potasio combina la acción del primero con la facultad oxidante del segundo. Se utilizan 12 ml de formol comercial (40%) y 6 g de permanganato de potasio por metro cúbico. Los locales deben permanecer cerrados durante 24 h para evitar que se escapen los vapores. Grupo 8. Ácidos y álcalis Cloro y derivados. El cloro es un elemento gaseoso y en forma de gas; sólo se usa para la desinfección de agua potable a una concentración de 0.5 ppm. Los derivados del cloro son de mayor aplicación, entre ellos los hipocloritos, que son sales del ácido hipocloroso. Figura 3-8. Material para tomar muestras para citología: 1 Vaso de Koplin, 2. Pizeta con etanol al 96%, 3. Frasco, 4. Jeringa, 5. Lápiz diamante, 6. Portaobjetos, 7. Guantes de látex. El más usado es el hipoclorito de calcio, que existe generalmente como cloruro de cal, éste es un polvo amorfo, blanco, poco soluble en agua y en alcohol y contiene 30% de cloro activo. La concentración usual es de 2% (máximo 10%). Es útil para lavar paredes y pisos de locales contaminados, como las salas de necropsia, por su acción germicida y desodorante. Hidróxido de cal o cal apagada. Es la cal viva que se moja para apagarse. Mezclada con 4 volúmenes de agua, se obtiene la lechada de cal, usada para blanquear y desinfectar a la vez pisos, paredes, corrales, etcétera. Hidróxido de sodio (sosa cáustica o lejía). Es un sólido con 94% de hidróxido de sodio y es un desinfectante muy eficaz. Debe usarse a 2% en agua caliente o hirviendo. Destruye a los virus de fiebre aftosa y fiebre porcina clásica, asimismo, bacterias patógenas. Carbonato de sodio. Se usa en solución a 4% en agua. Desinfectante muy eficaz para equipo y ropa utilizados en brotes de enfermedades vesiculares, en especial fiebre aftosa. Para la desinfección de objetos contaminados con Bacillus anthracis se usa 1 kg de sosa cáustica comercial en 45.9 litros de agua (solución al 5%). La eficacia de esta solución aumenta añadiendo 25 kg de cal apagada con agua. Fenoles. Este grupo comprende esencialmente al fenol (ácido fénico o ácido carbólico), a los cresoles (fenoles sintéticos: orto, meta y paracresol) y los halofenoles (hexaclorofeno). El fenol no se destruye en presencia de materia orgánica, es altamente bactericida a PREPARATIVOS PARA LA NECROPSIA 19 2 %, pero poco fungicida y no actúa bien contra esporas. A 0.5% posee acción bacteriostática, pero no bactericida. Cresoles. Son tres veces más potentes que el fenol. Los tres isómeros (orto, meta y paracresol) tienen acción similar. En la práctica, se emplea una mezcla de los tres, el tricresol o simplemente cresul. Es un líquido incoloro poco soluble en agua, soluble en alcohol y glicerina. La concentración para usarlo esde 2% con límites entre 0.25 y 5%. El cresol se usa generalmente como solución jabonosa (cresol 5 ml, aceite de lino 180 g, agua destilada c.b.p. 1 000 ml). Es un líquido amarillento, soluble en agua, alcohol o glicerina. La concentración usual es de 1:25, con límites entre 1:10 - 1:50. Esta solución es eficaz para la desinfección de locales y objetos y no se destruye en presencia de materia orgánica. Halofenoles. Se usan generalmente para la asepsia de la piel. Grupo 9. Halogenados Yodo. Los usos que se le han dado son más como antiséptico y contra irritante, que como desinfectante. El yodo elemental posee acción germicida y fungicida. Es uno de los germicidas más potentes, su acción es rápida, pero si se combina con materia orgánica se inactiva. En contacto con suero, sangre o tejidos, precipita las proteínas y se transforma principalmente en yoduros inactivos. El yodo destruye bacterias de todo tipo, incluso esporas bacterianas. Su acción germicida se debe a la liberación de oxígeno naciente. 4 La necropsia CAMBIOS post MORTEM Los cambios post mortem, inician inmediatamente después de que el animal ha muerto. Se establece en un tiempo más o menos corto lo que se conoce como rigidez cadavérica o rigor mortis. La presencia de este cambio, en ocasiones puede dar información importante sobre el tiempo que transcurrió desde el momento de la muerte y la realización de la necropsia. El rigor mortis se caracteriza por un endurecimiento y una contracción de la musculatura, tanto estriada como lisa. Afecta primero a los músculos de mayor actividad, iniciándose en el corazón. Externamente se presenta primero en los músculos de la cabeza, después en el cuello, tronco y en los miembros torácicos, por último en los pélvicos. Se establece entre 2 y 8 h después de haber ocurrido la muerte y desaparece, en el mismo orden; entre 24 y 48 h, dependiendo de factores que más adelante se mencionarán. Si se constata, por tanto, rigidez en los músculos de la cabeza o del cuello; puede deducirse que la muerte ocurrió pocas horas antes. En cambio, si los miembros pélvicos están rígidos y existe cierta flacidez en los músculos de la cabeza y del cuello, es indicio de que el, rigor mortis ya empieza a desaparecer, por tanto, el animal murió entre 24 y 40horas antes. En el desarrollo de la rigidez cadavérica intervienen los siguientes factores: a) La temperatura del ambiente. Temperaturas altas la aceleran, las bajas la retardan, siendo la causa, " modificaciones en la actividad enzimática, así como el desarrollo de bacterias de putrefacción. b) El estado de salud del animal. En animales muertos sacrificados en estado de caquexia, desnutrición, estrés o después de enfermedades crónicas, el rigor mortis es de poca duración. Algunas drogas, como alcohol, éter o salicilato de sodio, igualmente lo retardan o lo inhiben. c) El grado de actividad muscular antes de la muerte. La rigidez aparece rápidamente en animales que tuvieron actividad muscular intensa antes de morir, como en el caso de los caballos muertos durante competencias, animales de cacería o aquellos intoxicados con estricnina o muertos por tétanos. La aparición del rigor mortis se explica por la formación de puentes rígidos entre los filamentos de actina y miosina, resultando en el compuesto actinomiosina. Esta reacción ocurre también en vida durante la contracción muscular, pero el organismo dispone de las fuentes de energía suficientes para sintetizar el adenosin trifosfato (ATP) necesario con el fin de desdoblar la actinomiosina nuevamente en sus dos componentes. En cambio, la reacción es irreversible cuando el ATP no puede ser resintetizado, permaneciendo los músculos en estado de rigidez. Sin embargo, la resíntesis del ATP se lleva a cabo durante cierto tiempo aún después de la disponibilidad de energía, la que en vida es suministrada por fosfocreatinina y el metabolismo aerobio de la glucosa. Cuando la fuente de oxígeno falta, el metabolismo anaerobio puede, por un tiempo corto, suministrar la energía necesaria para sintetizar ATP, acumulándose entonces ácido láctico en [21] 22 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS los músculos, por lo que su pH, en vida normalmente alcalino (7.4), se convierte en ácido (5.7) después de la muerte. Si en un animal las reservas de glucógeno muscular fueron bajas, como ocurre en los animales caquécticos o agotados y en las otras condiciones citadas, no se produce ácido láctico en cantidades suficientes para producir un pH ácido, lo que favorece la putrefacción de origen bacteriano (Pseudomonas, Micrococcus, Achromobacter, Flavobacterium y Caligenes spp.). Este último punto tiene gran importancia en la calidad de la carne, ya que en los animales sacrificados para consumo humano, ocurren los mismos cambios químicos aquí descritos. La terminación de la rigidez cadavérica se debe principalmente a la acción de enzimas lisosomales y de bacterias proteolíticas. Otros cambios post mortem que suelen presentarse son: la timpanización por la fermentación en estómago e intestinos, causando su distención, sobre todo en los herbívoros. La presión desarrollada en la cavidad abdominal provoca a menudo seudoprolapso del recto, presencia de espuma sanguinolenta en los ollares, ruptura del estómago o del diafragma. Cuando un timpanismo en vida fue la causa de la muerte, los signos de asfixia acompañan el cuadro, aunado a la presencia de la línea timpánica en esófago. En la ruptura del diafragma en vida, por lo general se observa congestión del bazo y hemorragias diafragmáticas. En el rumen, retículo y amaso un signo importante de la descomposición cadavérica es la descamación de los epitelios. En un tiempo muy corto después de la muerte, puede observarse que la mucosa de los tres compartimentos se desprende fácilmente con sólo tocarla. Los borregos no trasquilados presentan autólisis o cambios post mortem con gran rapidez, debido a que, por la gruesa capa de lana, el cuerpo del animal muerto conserva mucho el calor. Lo mismo sucede con los cerdos que poseen una gruesa capa de tejido adiposo subcutáneo. La imbibición de hemoglobina y de bilis: Estos cambios son indicios importantes de procesos autolíticos. La imbibición de hemoglobina se debe a la hemólisis dentro de vasos sanguíneos. La hemoglobina liberada queda en solución en el plasma y al mismo tiempo las paredes vasculares se hacen más permeables a los lí- quidos. Por consiguiente, el plasma rojizo es absorbido por los tejidos vecinos y se forma una franja rojiza oscura a lo largo de cada vaso. La imbibición con bilis se debe a un fenómeno semejante, a través de la pared de la vesícula biliar pasa este líquido y tiñe las estructuras adyacentes de un color verduzco. La seudomelanosis es un cambio post mortem asociado a la descomposición de la hemoglobina, con tinción de los tejidos con tonalidades similares a la melanina, principalmente en vísceras. TÉCNICA DE LA NECROPSIA Existen varias técnicas descritas por diferentes autores. Cada patólogo tiene predilección por una u otra. Es importante tener presente que cada caso necesitará de ciertas modificaciones, tomando en cuenta el diagnóstico ante mortem. Sin embargo, para el estudiante es aconsejable que, como regla general, trabaje siguiendo una rutina establecida. Por la diversidad de animales que en medicina veterinaria se tienen que estudiar, los procedimientos cambian ligeramente de acuerdo con las particularidades anatómicas de cada especie. El cadáver de rumiantes adultos, se coloca en decúbito lateral izquierdo, para observar las diferentes vísceras abdominales. En equinos, éstos se colocan en decúbito lateral derecho, para una mejor apreciación y revisión in situ de todas las vísceras abdominales. En el resto de las especies, se prefiere colocarlos en decúbito dorsal, con lo cual se logra una inspección de las víscerasabdominales. La técnica de inspección de vísceras es similar en todas las especies. Se ha optado en este texto, por describir primero los pasos a seguir para abrir cavidades, para luego continuar con aparatos o sistemas y órganos, haciendo hincapié en las diferencias, según corresponda al animal doméstico. Inspección externa Antes de proceder a la abertura del cadáver, éste debe ser examinado detenidamente. Se revisan marcas, fierros, tatuajes, color, sexo, la condición general, su estado de carnes, pelos y se buscan heridas superficiales y fracturas óseas (fig. 4-1 y 4-2). Los orificios naturales se inspeccionan, buscando exudados, signos de diarrea, cambios de color o lesiones en las mucosas (fig. 4-3). En el oído externo se buscan exudados o parásitos y en los ojos se revisan la córnea y la mucosa ocular. Incisión primaria En perros, gatos, rumiantes, équidos y conejos la piel se corta a lo largo de la línea media, desde la unión de las dos ramas de la mandíbula hasta el ano. El corte debe ser de un solo trazo y firme, cuidando de no incidir músculos. En caso de animales machos, yeguas y rumiantes hembras adultas, el pene o la ubre se desprenden por medio de cortes alrededor de estos órganos (fig. 4-4). Para la Figura 4-1. Inspección externa: marcas, aretes, oído, ojos. separación de la piel, se efectúan cortes perpendiculares a la línea media en perros y gatos en cada región axilar y en las dos inguinales. En rumiantes y caballos los cortes se hacen sólo en el lado superior (fig. 4-5 y 4-6), ya que se recomienda que los rumiantes adultos se coloquen sobre su lado izquierdo y a los équidos sobre su lado derecho, como se mencionó. De esta forma la visualización e inspección de las vísceras Figura 4-2. Inspección externa: pezuñas. LA NECROPSIA 23 Figura 4-3. Inspección externa: mucosa oral y piezas dentarias. Caso de un caballo con la falta de un incisivo. vísceras abdominales podrá realizarse con facilidad, sin ser interferidas, según sea el caso, por rumen o ciego. Se separa parcialmente la piel de cada lado en perros y gatos en las otras especies sólo del lado superior, por lo ya explicado (fig. 4-5 y 4-6). En algunas instituciones se prefiere desollar al cadáver completamente, antes de iniciar el estudio post mortem. La piel de las grandes especies tiene un valor comercial considerable, por lo que esta práctica se recomienda también por razones económicas. Dado que en el campo esto no siempre es posible, se describe aquí el procedimiento sin desollamiento completo previo. Una vez quitada la piel parcial o totalmente, se examina el tejido subcutáneo, los músculos y los nódulos (ganglios) linfáticos explorables. Para facilitar los pasos subsecuentes, se procede a separar las dos articulaciones coxofemorales en perros y gatos, y sólo las que quedan del lado superior en las otras especies cortando los ligamentos que fijan la articulación, que son tres en perros, rumiantes y cerdos: redondo, cotiloideo y ácetabular transverso. En los caballos existe, además de estos tres, el haz subpúbico del ligamento redondo. Se examinan el líquido articular y las superficies articulares. También se cortan los músculos de la región pectoral que fijan la escápula a la cavidad torácica (fig.4-5 y 4-6). 24 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Figura 4-4. Posición para iniciar la necropsia en rumiantes. Las flechas, marcan las líneas de incisión de piel. En cerdos no se separa la piel del tejido subcutáneo, siguiendo la técnica descrita en la página 28. Cavidades articulares examinar en flexión, se separan ligamentos para poder observar superficies articulares, membranas sinoviales, así como color y consistencia del líquido sinovial (fig. 4-7). Cuando se requiere un examen de la articulación de la tercera y segunda falange en équidos y bovinos, de la región del hueso navicular o la comprobación de laminitis en caballos, se hace un corte longitudinal a través del casco o de la pezuña, dividiéndolos en dos partes simétricas (fig. 4-8). Apertura de cavidades Se examinan preferentemente antes de abrir las cavidades viscerales. Se incide la piel y teniendo el miembro por Figura 4-5. Desollamiento parcial, rumiante. Separación de los músculos pectorales y de la articulación coxofemoral derechos. Las líneas punteadas marcan los cortes para la apertura de cavidades. LA NECROPSIA 25 Figura 4-6. Posición para efectuar la necropsia de caballos. Desollamiento parcial. Separación de músculos pectorales y de la articulación coxofemoral izquierda. Las flechas marcan los cortes para la apertura de cavidades. Figura 4-7. Revisión de cavidades articulares. Figura 4-8. Corte longitudinal a través de las falanges y del casco (caballo). 26 TÉCNICAS DE NECROPSIA EN ANIMALES DOMÉSTICOS Cavidad bucal, faringe y laringe Por medio de cortes paralelos a lo largo de la parte interna de las ramas del maxilar inferior se llega a la cavidad bucal y se extrae la lengua (Hg. 4-9) jalándola en dirección del cuello. Se desarticulan los huesos hioides y se examinan la mucosa de la cavidad, los dientes, la laringe y faringe, así como las tonsilas y los nódulos linfáticos submaxilares, retrofaríngeos, parotídeos y la glándula parótida. Jalando la lengua hacia atrás, se cortan los músculos, del cuello, a lo largo del trayecto de la tráquea, examinando tiroides y paratiroides. De este modo, se liberan tráquea y esófago, {¡nidos a lengua y laringe, hasta la entrada a la cavidad torácica (fig. 4-10). Cuando se requiere un examen minucioso de la cavidad bucal, es necesario desprender la mandíbula, lo que se hace convenientemente al final, una vez que se haya separado la cabeza. En cada cara lateral externa se cortan los músculos de la comisura mandibular, hasta llegar a la articulación temporomaxilar. Posteriormente, apoyando fuertemente la cabeza invertida sobre la mesa, se cortan los ligamentos capsulares, se jala la mandíbula hacia atrás, separándola completamente (fig. 4-11). Figura 4-9. Extracción de lengua. Figura 4-10. Separación de lengua, tráquea y esófago hasta la entrada a cavidad torácica. Cavidad abdominal Para la exposición de vísceras abdominales, se hace un corte siguiendo la línea media, de la apófisis xifoide hasta la sínfisis pubiana. Durante este paso debe tenerse cuidado de Figura 4-11. Separación de la mandíbula. Corte de músculos, ligamentos y desarticulación. no incidir estómago o intestino. Para ello es una buena práctica introducir los dedos índice y medio, levantando con ellos la pared abdominal y cortando entre los dos, siguiendo la línea media, con el filo del cuchillo hacia arriba o en animales pequeños, con la tijera, introduciendo la punta roma. Después, se cortan los músculos abdominales paralelos al borde de la última costilla, en los perros, gatos y cerdos de cada lado, en las demás especies sólo del superior. Es conveniente hacer otro corte de la sínfisis pubiana hasta la tuberosidad isquiática; el colgajo de pared muscular así obtenido, se repliega hacia afuera, En las figuras 4-12, 4-13 y 4-14 se ilustran las vísceras abdominales en posición. En este momento se revisa el peritoneo, la posición de las vísceras, el líquido peritoneal y se toman las muestras que se juzguen necesarias para exámenes bacteriológicos, con el fin de evitar la contaminación causada por manipulaciones posteriores. Cavidad torácica Para constatar el vacío de la cavidad torácica, puede hacerse, antes de abrirla, una pequeña incisión en el diafragma, en cuyo momento se percibe el soplo característico cuando el aire entra a la cavidad, en este momento, se colapsan los pulmones sanos. LA NECROPSIA 27 Con un cuchillo o bisturí se traza una línea de la última a la primera costilla, en perros y gatos de cada lado; en caballos y rumiantes del superior, lo más cerca posible de la columna
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