Flores Effio Karin Marisela

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO 
Facultad de Farmacia y Bioquímica 
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y 
BIOQUÍMICA 
 
“INFORME FINAL DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN TIPO I 
FASE CIENTÍFICA” 
“EFECTO DE LA MEZCLA DE LOS EXTRACTOS 
CRUDOS DE Ananas comosus y Solanum 
melongena EN Rattus norvegisus var. albinus CON 
HIPERCOLESTEROLEMIA INDUCIDA” 
 
 
 
AUTORES FLORES EFFIO, KARIN MARISELA. 
 SILVA VELÁSQUEZ, JOHANA MARIANELA. 
 
 
ASESORA : Dra. Q.F. MIRIAM GUTIERREZ RAMOS. 
 
 
 
 
 
 
Trujillo – Perú 
2008 
 
 
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Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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DEDICATORIA 
 
 
 
 
 
Gracias te damos Señor con todo nuestro 
corazón por amarnos a pesar de nuestras debilidades; 
por ser la luz que lumina nuestros caminos, 
por ser nuestro amigo fiel que ríe con nuestras alegrías 
y sufre con nuestras tristezas. 
Por darnos la oportunidad de llegar a ser 
las personas que somos. 
 
 
 
 
 
 
 
Gracias Santísima Virgen María por todas 
las bondades que has tenido con nosotras, 
por ese amor de madre y protectora, por 
guiar nuestros pasos hacia el camino del 
bien. 
 
 
 
 Karin y Johana 
 
 
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Dedico la culminación de este trabajo 
con mucho amor y gratitud a lo más 
noble que Dios me ha concedido, mis 
padres: VICTOR Y ZORAIDA 
gracias por su amor, paciencia, eterna 
comprensión y sacrificio. 
Todo lo que soy es por ustedes, los 
amo mucho, Dios los bendiga siempre 
 
 
 
 
A mi hermano 
 VICTOR ENRIQUE 
 Que desde el cielo me guió para 
 culminar con éxito mi carrera. 
 
 
 
 
A mis hermanos con todo el cariño del mundo: 
Que sus gestos y consejos contribuyeron 
para salir adelante. 
Gracias por estar siempre unidos. 
 
 
 Karin 
 
 
 
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A mis padres 
 Juan y Esther 
que me brindaron su amor, enseñanzas 
y apoyo constante durante toda mi vida 
 
 
 
 
A ti Tey, por darme tu amistad, 
amor, y enseñarme ha ser fuerte en 
todo momento lo que me ha valido 
para crecer como persona. 
 
 
 
 
 
A mis queridos e incondicionales hermanos 
 Hernando, Ricardo y Beatriz 
Por ser cada uno tan diferentes pero al 
mismo tiempo tan similares en el cariño, amor y 
amistad hacia mí. Por sus invaluables 
consejos que siempre guardaré en mi corazón. 
 
 
 
 
 Johana 
 
 
 
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Nuestro especial reconocimiento a 
nuestra asesora: 
Dra. Q.F. Miriam E. Gutierrez Ramos 
Por su invalorable dedicación, la 
paciencia y los sabios consejos 
brindados, por su amistad, por 
motivarnos a ser mejores cada día. 
 Que Dios le bendiga. 
 
 
 
 
 
 
 
 
“Cada persona que pasa en nuestra vida es única, 
siempre deja algo de si y se lleva un poco de 
nosotros” 
Con mucho cariño y afecto a todos mis amigos que 
comparten parte de nuestras vidas, que nos ayudan 
a disfrutar de las alegrías y hacen menos difícil 
nuestras tristezas. 
 Los queremos mucho. 
 
 
 
Karin y Johana 
 
 
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JURADO DICTAMINADOR 
 
 
 
 
 
 
PRESIDENTE ……………………. Mg. SALOMÓN ALVA BAZÁN. 
 
MIEMBRO ……………………. Dra. Mg. MIRIAM GUTIERREZ RAMOS. 
 
MIEMBRO ……………………. Mg. ELENA MANTILLA GUTIERREZ. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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PRESENTACIÓN 
 
Señores Miembros del Jurado Dictaminador: 
 
Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de la Facultad de Farmacia y 
Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra honorable 
consideración y elevado criterio el presente Informe Final del Proyecto de Investigación 
Tipo I Fase Científica, titulado: 
 
 “Efecto de la Mezcla de los Extractos Crudos de Ananas comosus y Solanum 
melongena. en Rattus norvegicus var. albinus con Hipercolesterolemia Inducida”. 
 
Es propicia la oportunidad para evidenciar al más sincero reconocimiento a nuestra 
Alma Mater y toda su plana docente que con su capacidad, buena voluntad y enseñanzas 
impartidas han contribuido debidamente a nuestra formación profesional. 
 
Señores Miembros del Jurado dejamos a vuestra consideración la calificación del 
presente trabajo. 
 
 
Trujillo, Marzo del 2008. 
 
 
 
 
 Karin Flores Effio Johana Silva Velásquez 
 
 
 
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ÍNDICE 
 
 
RESUMEN i 
ABSTRACT ii 
I. INTRODUCCIÓN 01 
II. MATERIAL Y MÉTODO 04 
 A. MATERIAL 04 
1. Material Biológico 04 
 2. Material y Equipo de Laboratorio 04 
 B. MÉTODO 051. Adquisición e Identificación de la Especie Vegetal 05 
2. Preparación de la mezcla de los extractos crudos de Ananas 
 comosus y Solanum melongena 06 
 3. Estudio Farmacodinámico 07 
 5. Análisis Estadístico de los Resultados 11 
III. RESULTADOS 12 
IV. DISCUSIÓN 19 
V. CONCLUSIONES 24 
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 25 
 
 
 
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RESUMEN 
 
En el presente estudio se demostró experimentalmente el efecto de la mezcla de los 
extractos crudos de Ananas comosus y Solanum melongena en Rattus norvegicus var. 
albinus, para lo cual se empleó 24 especímenes agrupados aleatoriamente en tres 
grupos. Cada uno conformado por ocho animales; a los tres grupos se les indujo 
hipercolesterolemia con manteca de cerdo líquida vía oral una dosis de 3.3mL/Kg de 
peso corporal (p.c.) una vez al día por seis semanas además de su dieta habitual. 
Posteriormente se les administró a los grupos II y III por vía oral una dosis de 94.71 
mg/Kg p.c. y 189.42 mg/Kg p.c. de la mezcla del extracto seco equivalente a 1mL y 
2mL respectivamente de la mezcla de los extractos crudos de Ananas comosus y 
Solanum melongena por un lapso de cuatro semanas. Tomándose muestras sanguíneas 
semanales para las determinaciones de Colesterol Total, HDL-Colesterol y LDL-
Colesterol. Encontrándose una reducción estadísticamente significativa de los niveles de 
colesterol en los grupos II y III en comparación al grupo I que no recibió tratamiento. 
Así mismo, se pudo observar que a mayor dosis de la mezcla de los extractos 
administrados se encontró mayor efecto hipocolesterolémico. Este efecto se debió a la 
fibra soluble y fitoconstituyentes presentes en ellos. 
 
Palabras claves: Ananas comosus, Solanum melongena, fibra soluble, 
fitoconstituyentes, hipocolesterolemia. 
 
 
 
 
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ABSTRACT 
 
In the present study we demonstrated experimentally the effect of the mix of 
crude extracts of Ananas comosus and Solanum melongena in Rattus 
norvegicus var. albinus, which employs 24 specimens were grouped randomly 
into three groups. Each consists of eight animals, all three groups were induced 
hypercholesterolemia with lard liquid oral dose of 3.3mL/Kg body weight once a 
day for six weeks in addition to their usual diet. They were administered to 
groups II and III oral dose of 94.71 mg / kg b.w. and 189.42 mg / kg b.w. of the 
mixture of dry extract equivalent to 1mL and 2mL respectively of the mix of 
crude extracts of Ananas comosus and Solanum melongena for a period of four 
weeks. They took weekly blood samples for the determination of total 
cholesterol, HDL-cholesterol and LDL-cholesterol. While he was a statistically 
significant reduction in levels of cholesterol in groups II and III compared to the 
group I that did not receive treatment. Likewise, it was noted that a larger dose 
of the mixture of the extracts was found administered more hypocholesterolemic 
effect. This effect was due to the soluble fiber and phytoconstituents presence. 
 
Key words: Ananas comosus, Solanum melongena, soluble fiber, 
phytoconstituents, hypocholesterolemia. 
 
 
 
 
 
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I. INTRODUCCIÓN 
Las enfermedades cardiovasculares representan la principal causa de muerte en la 
mayoría de los países desarrollados y en vías de desarrollo. Constituyendo la 
cuarta parte de la totalidad de muertes por año en el mundo 1,2,3,4 
 
Existen varios factores de riesgo asociados al desarrollo de las enfermedades 
cardiovasculares, entre ellos: la hipertensión, el tabaco, la inactividad física, la 
obesidad, la diabetes, los antecedentes familiares y los niveles elevados de lípidos 
en sangre (colesterol total, colesterol LDL, triglicéridos). Algunos de ellos están 
relacionados con la dieta, especialmente, los niveles de lípidos en sangre 4,5. 
 
Los lípidos de la dieta están compuestos por una mezcla de derivados de ácidos 
grasos: saturados y no saturados. El último grupo incluye ácidos grasos 
poliinsaturados y monoinsaturados. El consumo elevado de grasas saturadas tiene 
un efecto mucho mayor sobre los niveles de colesterol en sangre que el consumo 
de alimentos ricos en colesterol. No todos los ácidos grasos tienen la misma 
influencia en dicho incremento. Una ingestión más alta de ácidos grasos saturados 
de cadena larga (C12:0, C14:0, C16:0, y C18:0) está asociada a un riesgo creciente 
de enfermedades cardiovasculares (ECV), mientras que los ácidos grasos saturados 
de cadena corta y mediana (4:0-10:0) no producen este efecto 6,7,8,9,10, 11,12. 
 
Debido a las posibles consecuencias de las grasas de la dieta en la salud, la 
composición de ácidos grasos saturados, monoinsaturados y poliinsaturados en la 
dieta humana ha sido tema de diversas investigaciones médicas. Se sabe que un 
consumo excesivo de grasas en general y de grasas saturadas en particular es un 
factor importante que influye en el desarrollo de enfermedades coronarias y la 
obesidad 6,9,11,12,13,14,15. 
 
Es por ello la importancia de prevenir la aparición de estas enfermedades. Hay 
evidencias que la disminución en la ingesta de colesterol, grasa de origen animal, 
el peso, la actividad física y la utilización de ácidos grasos insaturados, tiene efecto 
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http://www.eufic.org/sp/quickfacts/obesidad.htm
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favorable ya sea para incrementar el colesterol HDL y/o para disminuir el 
colesterol LDL y VLDL 11,12,15,16,17. 
Es común observar en nuestro País, el uso de plantas por parte de los pobladores, 
buscando alternativas para solucionar sus problemas de salud mediante la 
utilización de sustancias o preparados naturales de bajo costo para el paciente. 
Entre la gran variedad de plantas usadas, se encuentran: Ananas comosus, y 
Solanum melongena 18. 
Ananas comosus más conocida como “piña”, su fruto contiene de 12 a 14% de 
azúcares(sacarosa en mayor cantidad), menos de 0.5% de proteínas y menos de 
0.3% de grasas. Contiene también Bromelina, vitaminas (A, B1, B6, C), minerales, 
ácidos orgánicos y aceites esenciales, inclusive trazas de 5-hidroxitriptamina y 
abundante fibra. El zumo de ésta especie manifiesta una acción proteolítica; como 
aperitivo, prescrita en dispepsias; y como antiséptico, para tratar casos de anemia, 
gota, reumatismo; como activador de función pancreática, inflamaciones, 
afecciones hepáticas y amenorrea. 2,3,27,30. Su propiedade hipocolesterolémica se 
podría atribuir a la presencia de fibra soluble y fitoconstituyentes como los 
fenoles. 18,19,20,21,22. 
Solanum melongena “berenjena”, es una especie de alto valor nutricional, que 
contiene fibra, vitaminas (A, B1, B2, B6, C), folatos, esteroles (β-sitosterol, 
estigmasterol), ácidos fenoles (ácido clorogénico y ácido cafeico), antocianinas, 
flavonoides, pectinas y alcaloides esteroídicos. Posee actividad antioxidante, 
analgésica, antipirética, etc. Su propiedad hipocolesterolémica se podría atribuir a 
la presencia de fibra soluble y fitoconstituyentes como los flavonoides 18,20, 23. 
Por lo que, nos planteamos la siguiente interrogante: 
¿TENDRÁ EFECTO LA MEZCLA DE LOS EXTRACTOS CRUDOS DE 
Ananas comosus Y Solanum melongena EN Rattus norvegicus var. albinus CON 
HIPERCOLESTEROLEMIA INDUCIDA? 
 
Para lo cual, considerando la familia a la que pertenece y el uso que se le da en 
medicina popular, postulamos que: 
 
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LA MEZCLA DE LOS EXTRACTOS CRUDOS DE Ananas comosus Y 
Solanum melongena EJERCE EFECTO HIPOCOLESTEROLÉMICO EN 
Rattus norvegicus var. albinus. CON HIPERCOLESTEROLEMIA INDUCIDA. 
 
Planteándonos los siguientes objetivos: 
 
 Determinar el efecto hipocolesterolémico de la mezcla de los extractos 
crudos de Ananas comosus y Solanum melongena en Rattus norvegicus 
var. albinus con hipercolesterolemia inducida. 
 Determinar si se produce mayor efecto hipocolesterolémico a mayor dosis 
del extracto crudo de Ananas comosus y Solanum melongena. 
 
Para contrastar la hipótesis formulada se siguió un diseño experimental con 
estimulo creciente haciendo la medición de hipercolesterolemia previa y 
posterior a la administración de la mezcla de los extractos crudos de Ananas 
comosus y Solanum melongena, empleamos tres grupos paralelos de Rattus 
norvegicus var. albinus machos sometidos durante el tiempo de estudio a 
control y evaluación perenne, con determinación de Colesterol total, HDL- 
Colesterol y LDL- Colesterol. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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II. MATERIAL Y MÉTODO 
A. MATERIAL 
1. MATERIAL BIOLÓGICO: 
1.1. MATERIAL BOTÁNICO: 
Se utilizaron los frutos frescos de las especies Ananas 
comosus y Solanum melongena conocida como piña y 
berenjena respectivamente. Estas especies procedieron de la 
localidad de Poroto y comercializadas en el mercado central 
de la ciudad de Trujillo. 
 
1.2. ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN: 
Se utilizaron 24 especimenes de la especie Rattus norvegicus 
var. albinus machos aparentemente sanos, con peso normal entre 
180-300gr., aproximadamente de 3 meses de edad, procedentes 
del Bioterio del Instituto Nacional de Salud de la ciudad de Lima. 
Todos los especímenes fueron mantenidos en similares 
condiciones ambientales y de alimentación. 
 
2. MATERIAL Y EQUIPOS DE LABORATORIO: 
 
2.1. EQUIPOS: 
 Balanza analítica Digital METTLER TOLEDO AB204S 
 Balanza de canastilla “OHAUS” 
 Centrífuga MICRO CENTRIFUGE RM12. 
 Baño María THELCO GCA/PRECISION SCIENTIFIC Modelo 82 
 Espectrofotómetro UV “HEWLETT PACRARD” HP 8452ª 
 Extractor eléctrico PHILIPS type HL2051 
 Refrigeradora No frost COLDEX 
 Reloj cronómetro CITIZEN 
 
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2.2. MATERIAL DE VIDRIO Y OTROS: 
 Material de vidrio de uso común en el laboratorio 
 Alcohol de 70º 
 Jeringas hipodérmicas 
 Sonda de alimentación Nº6 
 Trampa para ratas 
 Guantes 
 Bisturí Nº21 
 Puntas de 100μL 
 Plastilinas 
 Gradillas 
 Capilares no heparinizados 
 
 2.3. REACTIVOS: 
 Kid Enzimático para colesterol 
 Kid Enzimático para HDL 
 Kid Enzimático para LDL 
 
B. MÉTODO: 
 
1. ADQUISICIÓN E IDENTIFICACION DE LA ESPECIE VEGETAL 
Las muestras fueron recolectadas en el mercado central de la ciudad de 
Trujillo e identificadas en el Herbarium Truxillense de la Universidad 
Nacional de Trujillo para determinar la exacta clasificación de la especie. 
 
1.1. CLASIFICACION TAXONOMICA: 24 
La especie Ananas comosus cultivada en nuestro país, de acuerdo al 
sistema de clasificación fitogenética de ADOLPF ENGLER. 
 
División……………………………….Angiospermae 
Clase…………………………………. Liliopsida 
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Orden…………………………………. Poales 
Familia………………………………. Bromeliaceae 
Género…………………………………Ananas 
Especie…………………………………Ananas comosus 
 
Y la especie Solanum melongena cultivada en nuestro país, de acuerdo 
al sistema de clasificación fitogenética de ADOLPF ENGLER. 
 
División……………………………….Magnoliophyta 
Clase…………………………………. Magnoliopsida 
Orden…………………………………..Solanales 
Familia………………………………. Solanaceae 
Género…………………………………Solanum 
Especie…………………………………Solanum melongena 
 
1.2. SINONIMIA COMÚN: 
En nuestro país las especies en estudio son conocidas comúnmente 
como: “Piña” y “Berenjena” respectivamente. 
 
2. PREPARACIÓN DE LA MEZCLA DE LOS EXTRACTOS CRUDOS 
 DE Ananas comosus Y Solanum melongena. 
 
Los extractos crudos se obtuvieron haciendo uso de un extractor eléctrico, 
colocándosele luego en un recipiente color ámbar. Luego se mezcló. 
Para la dosificación se tomó 5 mL de cada extracto en un vaso de 
precipitación previamente tarado, se evaporó hasta sequedad y peso 
constante, obteniéndose un peso promedio de 947.1mg dándonos la siguiente 
relación: 
 
 1 mL de extracto crudo 94.71mg de extracto seco. 
 
 
 
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3. ESTUDIO FARMACODINÁMICO: 
 
 3.1. DETERMINACIÓN DE BASALES: 
A todos los animales de experimentación previamente sometidos a un 
ayuno de 10 horas, se les realizó determinaciones basales de Colesterol 
total, HDL-Colesterol y LDL-Colesterol.Las muestras de sangre fueron 
obtenidas por corte de la parte terminal de la cola; la cual, fue recogida 
en capilares no heparinizados. 
 
 3.2. INDUCCIÓN DE LA HIPERCOLESTEROLEMIA:10 
Consistió en administrar por vía oral a los animales de 
experimentación manteca de cerdo líquida, por un lapso de seis 
semanas diariamente una dosis volumétrica de 3.3mL/Kg peso 
corporal, midiendo periódicamente controles a todos los animales de 
experimentación para observar y controlar el incremento de los 
niveles séricos de lípidos. 
 
3.3. DISTRIBUCIÓN Y ADMINISTRACIÓN DE LA DIETA A LOS 
 ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN: 
Al grupo I o CONTROL, constituido por 8 Rattus norvegicus var. 
albinus a los que se le indujo la hipercolesterolemia con manteca de 
cerdo líquida vía oral una dosis de 3.3mL/Kg peso corporal (p.c.) una 
vez al día por seis semanas mediante sonda de alimentación además de 
su dieta habitual. Posteriormente no se les administró la mezcla de 
extractos. 
Al grupo II o PROBLEMA, constituido por 8 Rattus norvegicus var. 
albinus a los que se le indujo la hipercolesterolemia con manteca de 
cerdo líquida vía oral una dosis de 3.3mL/Kg p.c. una vez al día por seis 
semanas mediante sonda de alimentación además de su dieta habitual. 
Posteriormente, se les administró por vía oral una dosis de 94.71mg/Kg 
p.c. de la mezcla de extracto seco equivalente a 1mL de extracto crudo 
de la mezcla de Ananas comosus y Solanum melongena, por el lapso 
de cuatro semanas. 
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Al grupo III o PROBLEMA, constituido por 8 Rattus norvegicus var. 
albinus a los que se le indujo la hipercolesterolemia con manteca de 
cerdo líquida vía oral una dosis de 3.3mL/Kg p.c. una vez al día por seis 
semanas mediante sonda de alimentación además de su dieta habitual. 
Posteriormente, se les administró por vía oral una dosis de 
189.42mg/Kg p.c. de la mezcla de extracto seco equivalente a 2mL de 
extracto crudo de la mezcla de Ananas comosus y Solanum 
melongena, por el lapso de cuatro semanas. 
 
Las determinaciones de Colesterol total, HDL-Colesterol y LDL- 
Colesterol se realizaron durante todo el tiempo que duró el tratamiento 
cada 7 días. 
 
3.4. DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE COLESTEROL 
 TOTAL, HDL-COLESTEROL, LDL-COLESTEROL: 25 
Estas determinaciones se realizaron en los especimenes del grupo control, 
y problemas (II y III) por todo el periodo de experimentación. Las 
muestras de sangre se obtuvieron por corte de la parte terminal de la cola 
de éstos; la cual, fue recogida en capilares no heparinizados. 
Centrifugándose y luego se separó el suero para la cuantificación de las 
mismas siguiendo las técnicas convencionales en el servicio de 
laboratorio, utilizando el Set de reactivos comerciales WIENER LAB. 
Para la determinación de Colesterol total, HDL-Colesterol y LDL-
Colesterol. 33 
 
3.5. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL SÉRICO TOTAL 
 (CT): 25 
Método: Enzimático (Colesterol oxidasa/peroxidasa) con colorimetría 
según Trinder. 
 Fundamento: 
El colesterol es oxidado enzimáticamente por el colesterol oxidasa 
previa hidrólisis enzimática de los ésteres mediante una lipasa de origen 
fúngico. El agua oxigenada generada en la oxidación produce la 
copulación oxidativa del fenol con la 4-amino fenazona mediante una 
8 
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reacción catalizada por la peroxidasa. El producto es una quinoimina 
roja con absorbancia máxima a 505mn. 
Procedimiento: 
En tres tubos de ensayo marcados B(blanco), S(Standard) y 
D(desconocido), se colocó: 
 
 
 B S D 
Standard - 20µL - 
Muestra - - 20µL 
Rtvo de trabajo 2mL 2mL 2mL 
 
 
Se incubó por 15 minutos en baño María a 37ºC para posteriormente 
leer en espectrofotómetro a 505nm. El color de la reacción final es 
estable 2 horas, por lo que la absorbancia se lee dentro de ese lapso. 
Cálculo de los Resultados: 
 Colesterol (g/L) = Dxf donde: f = 2.00g/L 
 S 
3.6. DETERMINACIÓN DE HDL-COLESTEROL: 25 
Método: De Warnick 
Fundamento: 
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando 
selectivamente las lipoproteínas de muy baja y baja densidad (LDL y 
VLDL) mediante el agregado de sulfato de destrón en presencia de iones 
de magnesio. 
En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan las HDL y se 
realiza la determinación del colesterol ligado a las mismas, empleando el 
sistema enzimático colesterol oxidasa/peroxidasa con colorimetría según 
Trinder. 
Procedimiento: 
En un tubo de ensayo se medió 0.5mL de muestra y agregó 50 µL de 
reactivo precipitante. Se homogeneizó agitando (sin invertir) durante 20 
9 
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segundos y se dejó de 30 a 40 minutos en refrigerador. Se centrifugó por 
15 minutos a 3000 r.p.m. 
Usar el sobrenadante límpido como muestra. 
En tres tubos de ensayo marcados B(blanco), S(Standard) y 
D(desconocido), se colocó: 
 
 B S D 
Standard - - 100 µL 
Muestra - 20µL - 
Rctvo de trabajo 2mL 2mL 2mL 
 
Mezcló e incubó por 15 minutos en baño María a 37ºC. Se retiró del baño 
y enfrió. Se lee a 505nm en espectrofotómetro, llevando a cero con el 
blanco. El color de la reacción final es estable 2 horas, por lo que la 
absorbancia se lee dentro de ese lapso. 
Cálculo de los Resultados: 
 HDL-Colesterol (g/L) = Dxf donde: f = 0.457g/L 
 S 
3.7. DETERMINACIÓN DE LDL-COLESTEROL: 25 
Método: De Warnick 
Fundamento: 
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o β-lipoproteína) se separaron 
del suero precipitándolas selectivamente mediante el agregado de 
polímeros de alto peso molecular. Luego se centrifugó, en el 
sobrenadante quedaron las demás lipoproteínas (HDL y VLDL); el 
colesterol ligado a las mismas se determinó empleando el sistema 
enzimático colesterol oxidasa/peroxidasa con colorimetría según Trinder 
(Fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol y el determinado en el 
sobrenadante, se obtuvo el colesterol unido a las LDL. 
Procedimiento: 
En un tubo de ensayo se colocó: 
Muestra 200 µL 
Reactivo precipitante 100 µL 
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Se homogenizó agitando (sin invertir) durante20 segundos y dejó 15 
minutos en baño María a 20-25ºC. Luego se centrifugó 15 minutos a 
3000 r.p.m. separando inmediatamente el sobrenadante. 
Se usó el sobrenadante como muestra para el ensayo colorimétrico. 
En tres tubos de ensayo marcados B(blanco), S(Standard) y 
D(desconocido), se colocó: 
 
 
S
e
 
 
Se mezcló e incubó 15 minutos en baño María a 37ºC, se retiró del baño 
María y enfrió. Se procedió a leer a 505nm en espectrofotómetro, 
llevando a cero con el blanco. El color de la reacción final es estable 2 
horas, por lo que la absorbancia se lee dentro de ese lapso. 
Cálculo de los Resultados: 
 LDL-Colesterol (g/L) = Colesterol total* – (Dxf) 
 
 donde: f = 0.624g/L 
 S 
(*) Valor obtenido con Colesterol Enzimático. 
3.8. DETERMINACIÓN DE VLDL-COLESTEROL: 25 
Se obtuvo reemplazando la siguiente fórmula: 
 
 VLDL = CT – (HDL + LDL) 
 
4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS: 26,27. 
Los resultados se analizaron estadísticamente mediante los siguientes 
métodos estadísticos: Análisis de Varianza (ANOVA) y L.S.D. con un 
nivel de significancia del 95% (α=0.05). 
 
 
 
 B S D 
Standard - - 100 µL 
Muestra - 20µL - 
Rctvo de trabajo 2mL 2mL 2mL 
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III. RESULTADOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
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CUADRO Nº 1: Niveles Promedio de Colesterol Total (CT), HDL-Colesterol, LDL-Colesterol, VLDL-Colesterol en los grupos I, II y 
 III en Rattus norvegicus var. albinus. 
 
Grupo 
Determinaciones 
Bioquímica 
(mg/dL) 
Basal Hipercolesterolemia. Tratamiento Valor Diferencial 
 
I 
 
 
CT 58.615 191.058 132.748 58.310 
HDL 21.640 48.116 42.461 5.655 
LDL 11.011 62.597 18.567 44.03 
VLDL 25.964 80.346 71.719 8.627 
 
II 
 
 
CT 50.322 149.991 71.708 78.283 
HDL 19.584 48.975 32.702 17.273 
LDL 12.092 61.453 12.345 49.108 
VLDL 18.646 39.562 26.661 12.901 
 
III 
 
 
CT 50.101 157.437 61.968 95.469 
HDL 21.169 48.080 27.426 20.654 
LDL 12.188 60.814 9.082 51.732 
VLDL 16.745 48.542 25.459 23.083 
 
Leyenda: 
I. Grupo sin tratamiento 
II. Grupo tratado con 1mL de extracto crudo de Ananas comosus y Solanum melongena (94.71mg/Kg p.c.) 
III. Grupo tratado con 2mL de extracto crudo de Ananas comosus y Solanum melongena (189.42mg/Kg p.c.) 
 
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GRÁFICO Nº1: Comparación de los valores diferenciales promedio en mg/dL de Colesterol Total, HDL-Colesterol, 
 LDL-Colesterol y VLDL-Colesterol en los grupos problemas I, II y III. 
 
58
.3
1 7
8.
28
3 95
.4
69
5.
65
5
17
.2
73
20
.6
54
44
.0
3
49
.1
08
51
.7
32
8.
62
7
12
.9
01
23
.0
83
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
m
g
/d
L
CT HDL LDL VLDL 
Determinaciones Bioquímicas
I II III
 
 
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CUADRO Nº2: Análisis de varianza de los niveles de Colesterol Total en los grupos I, 
 II y III en Rattus norvegicus var. albinus 
Fuente de 
variación 
S.C. D.F. P.C. F N.S. 
Inter grupos 5533.295 2 2766.647 150.575 0.000 
Intra grupos 566.409 21 26.972 
 
Total 6099.704 23 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
S.C.: Suma de cuadrados 
D.F.: Grados de libertad 
P.C.: Promedios de cuadrados 
F.: Razón 
N.S.: Nivel de significancia 0.05 
 
 
 
CUADRO Nº3: Comparación múltiple (LSD) de los valores medios de los niveles de 
 Colesterol Total en los grupos I, II y III en Rattus norvegicus var. 
 albinus. 
 
Contraste Diferencia Intervalo de confianza 95% 
Límite inferior Límite superior 
1 2 
1 3 
-19.9724* -25.3726 -14.5722 
-37.1583* -42.5584 -31.7581 
2 1 
2 3 
19.9724* 14.5722 25.3726 
17.1859* -22.5861 -11.7857 
3 1 
3 2 
37.1583* 31.7581 42.5584 
17.1859* 11.7857 22.5861 
 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
 
1- Sin tratamiento con extracto 
2- Tratamiento con 1mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (94.71mg/Kg p.c.) 
3- Tratamiento con 2mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (189.42mg/Kg p.c.) 
* Denota diferencia estadísticamente significativa 
 
 
15 
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CUADRO Nº4: Análisis de varianza de los niveles de HDL-Colesterol en los grupos I, 
 II y III en Rattus norvegicus var. albinus 
Fuente de 
variación 
S.C. D.F. P.C. F N.S. 
Inter grupos 951.811 2 475.905 49.328 0.000 
Intra grupos 202.603 21 9.648 
 
Total 1154.414 23 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
S.C.: Suma de cuadrados 
D.F.: Grados de libertad 
P.C.: Promedios de cuadrados 
F.: Razón 
N.S.: Nivel de significancia 0.05 
 
 
 
 
 
CUADRO Nº5: Comparación múltiple (LSD) de los valores medios de los niveles de 
 HDL-Colesterol en los grupos I, II y III en Rattus norvegicus var. 
 albinus. 
 
Contraste Diferencia Intervalo de confianza 95% 
Límite inferior Límite superior 
 1 2 
1 3 
-10.6188* -13.8485 -7.3890 
-14.9994* -18.2291 -11.7696 
2 1 
2 3 
10.6188* 7.3890 13.8485 
-4.3806* -7.6104 -1.1509 
3 1 
3 2 
14.9994* 11.7696 18.2291 
4.3806* 1.1509 7.6104 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
 
1- Sin tratamiento con extracto 
2- Tratamiento con 1mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (94.71mg/Kg p.c.) 
3- Tratamiento con 2mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (189.42mg/Kg p.c.) 
* Denota diferencia estadísticamente significativa 
 
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CUADRO Nº6: Análisis de varianza de los niveles de LDL-Colesterol en los grupos I, 
 II y III en Rattus norvegicus var. albinus. 
Fuente de 
variación 
S.C. D.F. P.C. F N.S. 
Inter grupos 245.367 2 122.684 11.863 0.000 
Intra grupos 217.181 21 10.342 
 
Total 462.549 23 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
S.C.: Suma de cuadrados 
D.F.: Grados de libertad 
P.C.: Promedios de cuadrados 
F.: Razón 
N.S.: Nivel de significancia 0.05 
 
 
 
 
 
CUADRO Nº7: Comparación múltiple (LSD) de los valores medios de los niveles de 
 LDL-Colesterol en los grupos I, II y III en Rattus norvegicus var. 
 albinus. 
 
Contraste Diferencia Intervalo de confianza 95% Límite inferior Límite superior 
1 2 
1 3 
-5.0785* -8.4224 -1.7346 
-7.7029* -11.0468 -4.3590 
2 1 
2 3 
5.0785* 1.7346 8.4224 
-2.6244* -5.9683 0.7195 
3 1 
3 2 
7.7029* 4.3590 11.0468 
2.6244* -0.7195 5.9683 
 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
 
1- Sin tratamiento con extracto 
2- Tratamiento con 1mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (94.71mg/Kg p.c.) 
3- Tratamiento con 2mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (189.42mg/Kg p.c.) 
* Denota diferencia estadísticamente significativa 
 
 
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CUADRO Nº8: Análisis de varianza de los niveles de VLDL-Colesterol en los grupos 
 I, II y III en Rattus norvegicus var. albinus. 
 
Fuente de 
variación 
S.C. D.F. P.C. F N.S. 
Inter grupos 882.424 2 441.212 15.111 0.000 
Intra grupos 613.148 21 29.198 
 
Total 1495.572 23 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
S.C.: Suma de cuadrados 
D.F.: Grados de libertad 
P.C.: Promedios de cuadrados 
F.: Razón 
N.S.: Nivel de significancia 0.05 
 
 
 
 
CUADRO Nº9: Comparación múltiple (LSD) de los valores medios de los niveles de 
 VLDL-Colesterol en los grupos I, II y IIIen Rattus norvegicus var. 
 albinus. 
 
Contraste Diferencia Intervalo de confianza 95% 
Límite inferior Límite superior 
1 2 
1 3 
-4.2751* -9.8937 1.3434 
-14.4561* -20.0747 -8.8376 
2 1 
2 3 
4.2751* -1.3434 9.8937 
-10.1810* -15.7996 -4.5624 
3 1 
3 2 
14.4561* 8.8376 20.0747 
10.1810* 4.5624 15.7996 
 
 
Fuente: Datos obtenidos por los autores 
Leyenda: 
 
1- Sin tratamiento con extracto 
2- Tratamiento con 1mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (94.71mg/Kg p.c.) 
3- Tratamiento con 2mL de extracto crudo de Ananas comosus Y Solanum melongena (189.42mg/Kg p.c.) 
* Denota diferencia estadísticamente significativa 
 
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IV.- DISCUSIÓN 
 
La hipercolesterolemia es el estado patológico donde se manifiesta niveles plasmáticos 
de colesterol superiores a los valores ideales. El LDL-Colesterol es un factor causal en 
las enfermedades coronarias; es por ello, el objetivo principal del tratamiento 
hipocolesterolemiante dentro de la estrategia de la prevención de dichas enfermedades28. 
 
En el cuadro Nº1, se observa los valores promedio basales de las determinaciones 
bioquímicas realizadas al grupo I fueron, CT: 58.615mg/dL, HDL-C: 21.640mg/dL, 
LDL-C: 11.011mg/dL, VLDL-C: 25.964mg/dL y al grupo II, CT: 50.322mg/dL, HDL-
C: 19.584mg/dL, LDL-C: 12.092mg/dL, VLDL-C: 18.646mg/dL y al grupo III, CT: 
50.101mg/dL, HDL-C: 21.169mg/dL, LDL-C: 12.188mg/dL, VLDL-C: 16.745mg/dL; 
siendo estos valores similares para los tres grupos, de lo que se pudo inferir que nuestra 
población es homogénea que puede ser comparada en cuanto a su condición y 
características biológicas. 
 
En los grupos II y III se observa un incremento en los niveles plasmáticos de CT, HDL-
C, LDL-C y VLDL-C, después de haber administrado la dieta hipercalórica a base de 
manteca de cerdo (Cuadro Nº1). La cual eleva los niveles de lípidos plasmáticos debido 
a su composición en un 20-32% de ácido palmítico (C16:0) y un 0.5 -2.5% de ácido 
mirístico (C14:0). Además también contiene un 5-24% ácido esteárico (C18:0), 35-
62% de ácido oleico (C18:1) y otros ácidos grasos como ácido linoleico (C18:2) y 
araquidónico (C20:0) 16,29. El consumo elevado de grasas saturadas tiene un efecto 
mucho mayor sobre los niveles de colesterol en sangre que el consumo de alimentos 
ricos en colesterol. No todos los ácidos grasos tienen la misma influencia en el 
incremento de colesterol. Una ingestión más alta de ácidos grasos saturados de cadena 
larga (C12:0, C14:0, C16:0, y C18:0) está asociada a un riesgo creciente de 
enfermedades cardiovasculares (ECV), mientras que los ácidos grasos saturados de 
cadena corta y mediana (4:0-10:0) no producen este efecto 16,30,31. 
 
Los ácidos grasos de cadena larga (C12:0, C14:0, y C16:0) tienen un potencial 
aproximadamente equivalentes para incrementar el CT y LDL-C, en cambio el ácido 
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esteárico parece ser neutral en dicho aspecto. Este efecto se debe a su rápida conversión 
en el cuerpo a ácido oleico (C18:1), un ácido graso monoinsaturado. El ácido mirístico 
es más hipercolesterolémico que los otros ácidos grasos, debido a una disminución de 
la expresión del receptor de LDL-C por el ARNm así como por una disminución de la 
fluidez de la membrana. El incremento del flujo de LDL-C puede ser debido a cualquier 
aumento en la tasa de producción de VLDL, a una mayor conversión de VLDL-C a 
LDL-C, al incremento directo de la secreción de LDL-C por el hígado o a las 
combinaciones de estos factores. Mientras que los ácidos grasos saturados cadena media 
(8 a 10 carbonos) no elevan las concentraciones plasmáticas del colesterol 31,32,33,34. 
 
Los niveles elevados de colesterol intracelular inhibe la síntesis de receptores de LDL. 
Una reducción del número de estos receptores conduce a niveles plasmáticos de LDL 
más elevados y por consiguiente, del colesterol total 9,11,32,34. 
 
En los grupos II y III después del tratamiento, se observó una disminución de los 
niveles plasmáticos de CT, LDL-C, en comparación al grupo I, debido a que se 
administró una dieta a base de extracto crudo de Solanum melongena y Ananas 
comosus, las cuales tienen un alto contenido en fibra soluble y otros fitoconstituyentes 
18,20.. 
 
La fibra soluble tiene la capacidad de facilitar la pérdida de ácidos biliares 
interrumpiendo la circulación enterohepática y con ello la tasa de absorción de lípidos y 
colesterol de la alimentación35. Como consecuencia, el aporte de colesterol y 
triglicéridos vehiculizados a través de los quilomicrones es menor; el pool hepático de 
colesterol libre para formar sales biliares disminuye, por lo tanto se estimula la 
conversiónde colesterol en sales biliares, y en este punto la enzima clave es la 
colesterol 7-α-hidroxilasa. La fibra soluble y las resinas de intercambio iónico 
incrementan la actividad enzimática de la colesterol 7-α-hidroxilasa, acción que 
contribuye a la reducción de las concentraciones intracelulares hepáticas de colesterol 
libre. La deplección de colesterol hepático impulsa la síntesis de colesterol endógeno, a 
través del aumento de la actividad de la enzima hidroximetil glutaril CoA reductasa, 
pero al mismo tiempo incrementa el número de receptores de LDL, dispuestos a captar 
colesterol esterificado de las partículas circulantes de LDL-Colesterol 34,35,36,37,38. 
 
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La deplección del pool de colesterol provocado por el consumo de fibra soluble, 
produce también alteraciones en la remodelación de las lipoproteínas. La composición 
de las partículas de lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL-C) y de LDL-C varía: 
incrementan su contenido en triglicéridos y son más pobres en colesterol esterificado. 
Las VLDL-C son catabolizadas más rápidamente y existe una menor conversión a LDL-
C. A su vez, las LDL-C han modificado su composición y debido a la existencia de un 
mayor número de receptores de LDL con una reducción de las concentraciones de LDL-
C como resultado final. La escasa cantidad de colesterol esterificado de las LDL-C, la 
actividad de la proteína transferidora de ésteres de colesterol (CETP) está disminuida lo 
que contribuye a mantener la situación de hipocolesterolemia 36,38,39. 
 
Asimismo, la producción de propionato, tras la fermentación de la fibra soluble en el 
colon, parece que interviene provocando la inhibición de la síntesis de ácidos grasos y 
de las VLDL-C en el hígado 40,41. 
 
Una de las vías por la que las fibras solubles pueden ejercer los efectos metabólicos 
positivos es a través de disminuir la tasa de absorción o de distribuir los nutrientes más 
lentamente y así convertir el intestino delgado en un depósito donde los nutrientes son 
absorbidos y entran en la circulación lentamente. En este proceso intervienen factores 
como el incremento de la viscosidad del contenido intestinal, especialmente a nivel del 
ileum terminal, que puede ser el aspecto determinante de la pérdida de ácidos biliares y 
se interrumpa la circulación entero-hepática. Esta es una de las vías propuestas para 
explicar el efecto hipocolesterolemiante de la fibra soluble 41,42,43. 
 
Otra vía propuesta para explicar la reducción de colesterol sería a nivel hepático, 
relacionada con los ácidos grasos de cadena corta que reduciría la síntesis de lípidos y 
lipoproteínas, en fase postprandial y posiblemente, induciría un incremento de la 
producción endógena de colesterol a nivel hepático 42,44,45 . 
 
Los resultados de diversos metaanálisis respaldan que el consumo de fibra, 
especialmente de tipo soluble, es capaz de disminuir las concentraciones de colesterol 
total y LDL-C de una forma dosis dependiente, sin modificar las concentraciones de 
HDL-C 41,42,45,46. 
 
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En el 2001, el National Cholesterol Education Program, en el Adult Treatment Panel 
(ATP III) recomienda por primera vez, una cantidad determinada de fibra, el consumo 
de 10 a 25 g/día de fibras solubles (viscosas), como tratamiento para potenciar la 
reducción de LDL-C (ATP III; 2001) 42. 
 
Otro de las razones por las que se observa una disminución de los lípidos plasmáticos 
es debido a la presencia de fitoconstituyentes presentes en ambos frutos 47. 
 
Los estudios farmacológicos indican que varios flavonoides presentes en Solanum 
melongana (delphinidin-3-rutinósido-3-(4'-coumaroilrutinósido)-5-glucósido) o 
nausinin ayudan a disminuir los niveles de colesterol y triacilglicéridos en la sangre en 
ratones y los humanos mediante una modulación de su metabolismo y una mayor 
excreción del mismo. Este efecto es provocado por el incremento de la actividad de 
enzimas de lecitina colesterol aciltransferasa (LCAT), enzima presente en la superficie 
de lipoproteínas de alta densidad (HDL) 47,48,49,50. 
 
Asimismo, estudios de investigación en ratones indican que Ananas comosus inhibe la 
síntesis endógena de colesterol, lo que lleva a disminuir los niveles séricos de colesterol 
total. Además, en el ensayo in vitro realizado, Ananas comosus inhibió la actividad de 
HMGCoA reductasa. Estos resultados establecieron la idea que el efecto 
hipocolesterolemico de Ananas comosus in vivo estaría correlacionado con la 
inhibición de la actividad de HMGCoA reductasa, lo cual podría estar asociado con los 
flavonoides encontrados en dicha fruta al realizar el extracto etanólico, como son: 
fenoles conocidos incluyendo ácido p-cumarico (1.5%), 1-O-p cumaroglicerol (0.3%), 
acido caféico (1.0%), y 1-Ocafeicoglicerol (0.2%); además de algunos esteroles 51,52. 
 
Al finalizar el tratamiento con la mezcla de extractos crudos de Ananas comosus y 
Solanum melongena, se observa un mayor efecto hipocolesterolémico en el grupo III 
en comparación al grupo II, debido a que este recibió una dosis mayor (189.42mg/Kg 
p.c de mezcla de extracto) de fibra soluble y fitoconstituyentes presentes en dichas 
especies. Observándose mejor los resultados en el gráfico Nº1, en donde se comparan 
los promedios diferenciales que se obtienen de la sustracción de los resultados de 
hipercolesterolemia y tratamiento final 41,42,48,51. 
 
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El trabajo realizado se analizó estadísticamente a través del método ANOVA (Análisis 
de Varianza), el cual nos permite comparar las medias entre los diferentes grupos 
mediante la razón F. Si ésta es significativa, se establece que una o más de las 
diferencias entre las medias de la variante individualizada debe ser significativa; tal es 
el caso de la comparación entre los grupos tratados. Esto se observa en los cuadros 2, 4, 
6 y 8 53,54. 
 
Para comparar la diferencia significativa utilizamos uno de los métodos de comparación 
múltiple que es la mínima diferencia significativa (LSD), su valor permite el nivel de 
significancia de 0.05 que existe o no entre ellos una diferencia real 54. 
 
Los resultados estadísticos de la comparación de promedios por mínima diferencia 
significativa (LSD), para los valores de colesterol total, HDL, LDL y VLDL en los 
grupos II y III, reportan diferencia estadísticamente significativa en comparación al 
grupo I (que no fue tratado con el extracto crudo). Esto se puede observar en los cuadros 
3, 5, 7 y 9. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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V.- CONCLUSIONES 
 
 
Del estudio sobre el efecto hipocolesterolémico de la mezcla de los extractos crudos de 
Ananas comosus y Solanum melongena en Rattus norvegicus var. albinus con 
hipercolesterolemia inducida, se llegó a las siguientes conclusiones: 
 
1- La mezcla de los extractos crudos de Ananas comosus y Solanum melongena, 
presenta efecto hipocolesterolémico. 
2- La mezcla de los extractos crudos de Ananas comosus y Solanum melongena a 
la dosis de 189.42mg/Kg p.c ejerce mayor efecto hipocolesterolémico que a la 
dosis de 94.71mg/Kg p.c. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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