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BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA TESIS I Efecto de un gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna sobre lesiones dérmicas inducidas en Mus musculusBalb/c. AUTORES: MELÉNDEZ MEDINA, Wendy Denisse PIZÁN URQUIZO, Jhoselin Stefany ASESOR: MG. CRUZADO RAZCO, José Lizardo Trujillo - Perú 2018 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A I DEDICATORIAS Meléndez Medina, Wendy Denisse A mis padres Por depositar su confianza en mí, ya que siempre estuvieron impulsándome en los momentos más difíciles de mi carrera y por incentivarme a seguir adelante. A mi abuelo Por haberme apoyado en todo momento, por sus valores, sus consejos, y la motivación constante que me dio hasta su muerte. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A II Pizán Urquizo, Jhoselin Stefany A mis padres Que me apoyaron incondicionalmente en la parte moral y económica y por haberme forjado como la persona que soy en la actualidad. A nuestro Padre celestial Por su amor y bendiciones que nos brinda cada día, y al cuidarnos y encaminarnos en la verdad, siendo él fiel siempre con nosotros. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A III AGRADECIMIENTO Un agradecimiento muy especial a Mg. José Lizardo Cruzado Razco, quien fue base esencial en la realización de nuestro presente trabajo, por ser nuestro fuente de motivación y haber aceptado ser nuestro asesor, y apoyarnos en todo momento que lo necesitábamos, brindándonos sus conocimiento, orientaciones, su manera de trabajar, su paciencia siendo fundamental para nuestra formación profesional. A su manera ha sido capaz de ganarse nuestra lealtad y admiración, así como sentirnos en deuda con él por todo lo recibido durante el periodo de realización del presente trabajo. Gracias por todo, Que Dios lo bendiga mucho. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A IV PRESENTACIÓN Señor Miembros de Jurado Dictador: Dando cumplimiento a lo establecido con las Disposiciones Legales y Vigentes del Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio profesional el presente informe titulado: “Efecto de un gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum l. Var aceituna sobre lesiones dérmicas inducidas en mus musculusbalb/c” El cual se elaboró para contribuir a nuestro desarrollo profesional y al de nuestra alma mater. Dejamos a su criterio, señores miembros del jurado la calificación del presente trabajo de Investigación Científica Trujillo, octubre del 2018 Meléndez Medina Wendy Denisse Pizán Urquizo Jhoselin Stefany Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A V JURADO DICTAMINADOR …………………………………………………….. Dr. ARBAYZA FRUCTUOSO, JUAN DELFIN PRESIDENTE …………………………………………………….. Dra. MARILÚ SOTO VASQUEZ MIEMBRO …………………………………………………….. MG. JOSÉ LIZARDO CRUZADO RAZCO MIEMBRO Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A VI RESUMEN La finalidad de esta investigación fue determinar el efecto de un gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna sobre lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c. Se utilizó 25 Mus musculus Balb/c, machos entre 15 – 24g distribuidos al azar en 5 grupos. El grupo testigo conformado por 5 Mus musculus Balb/c con lesiones dérmicas, no recibió tratamiento. El grupo problema I y II conformados por 5 Mus musculus Balb/c con lesión dérmica, recibieron el gel del extracto etanólico de la cáscara del tubérculo vía dérmica (v.d.) al 5% y 10%, respectivamente. El grupo problema III y IV conformados por 5 Mus musculus Balb/c con lesión dérmica, recibieron tratamiento con el gel del extracto etanólico de la pulpa del tubérculo v.d. al 5% y 10%, respectivamente. Los corte dérmico se realizó con un bisturí y al día siguiente se dio el tratamiento con el gel del extracto etanólico de la pulpa y cáscara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna, recibiendo 2 dosis por 7 días. En los resultados se observó que en el sexto día el grupo de gel de pulpa al 5 % se cierra por completo la herida, mientras que los grupos de gel de pulpa, cáscara de 10% y de la cáscara al 5% se cierra casi por completo en el séptimo día. Se concluyó que los extractos etanólicos de la pulpa y cáscara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna, tienen efecto cicatrizante, siendo el efecto mayor en el gel del extracto etanólico de pulpa al 5%. Palabras clave: Cicatrización, Solanum tuberosum L. var aceituna, Mus musculus Balb/c, extracto etanolico, marcha fitoquímica. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A VII ABSTRAC The finality of this investigation was to determine the effect of a gel made by ethanol extract from a tuber of Solanum tuberosum L. var aceituna over induce dermal lesions in Mus musculus Balb/c. It was used 25 Mus musculus Balb/c., males between 15-24g distributed randomly in groups of 5. The controlled group formed by 5 Mus musculus Balb/c with dermal lesions, did not receive treatment. The problem group I and II formedby 5 Mus musculus Balb/c with dermal lesions, they received the gel from ethanol extract made by the skin of the tuber via dermal (v.d) to the 5% and 10% respectively. The problem group III and IV formed by 5 Mus musculus Balb/c with dermal lesions, they received treatment from the ethanol extract gel made by the pulp of the tuber via dermal to the 5% and 10% respectively. The dermal cuts were made by a scalpel and the next day were treated with ethanol extract gel made with the pulp and the skin from the tuber of Solanum tuberosum L. var aceituna, receiving 2 doses for 7 days. In the results, it was observed that on the sixth day the group that used the gel made from the pulp at 5% was completely closed , meanwhile the group from the gel made by pulp, and skin at 10% and the skin at 5% was almost completely closed at the seventh day. It concluded that the ethanol extract from the pulp and the skin of the tuber of Solanum tuberosum L. var aceituna, it has a healing effect , being the mayor effect in the ethanol extract gel from the pulp at 5%. Keywords: Healing, Solanum tuberosum L. var aceituna, Mus musculus Balb/c, extract ethanol, starter phytochemistry. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A VIII ÍNDICE Pg. I. INTRODUCCIÓN……………………………….…………………………..……………. 1 II. MATERIAL Y MÉTODOS……………………………………………..……..................6 III. RESULTADOS…...………………………..………………………….………………... 13 IV. DISCUSIÓN...………………………………………………………..……………….… 21 V. CONCLUSIONES…………………………………………......................................... 25 VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………….......................................26 ANEXOS…..………………………………………...……………...…………................28 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 1 I. INTRODUCCIÓN La piel es considerada el órgano más grande del cuerpo, combinado con sus estructuras accesorias como pelos, glándulas, etc., ocupa el 20% del peso corporal. Tiene diferentes funciones como una barrera contra los microorganismos, mantener estables los líquidos corporales, proteger de la radiación solar y de las estructuras subyacentes. 1,2 La piel se compone de tres capas: la epidermis, la dermis y el tejido subcutáneo. La epidermis; es un epitelio estratificado plano queratinizado donde el tipo celular predominante son los queratinocitos, que se diferencian para producir queratina. Estás células se originan por división en la capa basal de epitelio y se van desplazando lentamente hacia la superficie conforme se van generando más células en el estrato basal.1 La dermis es un tejido fibroso, donde se encuentra los folículos pilosos, glándulas sebáceas y sudoríparas. Es una capa de tejido conectivo irregular donde contiene proteínas dérmicas como fibras de colágeno, elastina, reticulina, fibronectina así como varios glicosaminoglucanos y ácido hialurónico; estas proteínas y carbohidratos son secretadas por la célula principal de la dermis, los fibroblastos. La elastina le aporta elasticidad, el colágeno su fuerza de tensión y la matriz provee un medio semi-líquido, que permite la orientación del tejido conectivo y las células, la difusión de los nutrientes y oxígeno. Así mismo es el andamio para la migración celular, de nutrientes y de requerimientos para la reparación de heridas. Sus funciones son protectoras e inmunológicas, es la segunda línea de defensa mecánica contra traumatismos, es el sostén de la piel y es fundamental para la termorregulación y lubricación. Bajo la dermis se encuentra el tejido hipodérmico, es una capa de sostén o tejido graso subcutáneo que conecta todo lo que está Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 2 sobre y bajo la dermis con el músculo. Contiene macrófagos, fibroblastos y células cebadas, así como nervios, vasos linfáticos y sanguíneos que irrigan la piel.1, 3 Las lesiones cutáneas disminuyen la integridad de los tejidos; incluye la pérdida local de fluidos, dolor con estímulos neuronales hacia el cerebro y liberación de productos celulares hacia la circulación. Producidas por agentes externos, como un cuchillo o agentes internos como un hueso fracturado; pueden ser abiertas o cerradas, leves o complicadas; en todas las heridas la alteración metabólica dura semanas, meses o incluso años. 1, 3 Los mecanismos de reparación de lesiones cutáneas se producen tras una lesión que altere la continuidad de la superficie. En el proceso se han identificado tres fases: la inflamatoria, la proliferativa y la de remodelación tisular. 1,3 En la fase inflamatoria se inicia inmediatamente después de que se genera la lesión y tiene una duración entre 24 a 48 horas; hay liberación local de células y compuestos transportados por la sangre y la activación del sistema de coagulación. En la proliferativa hay formación de tejido nuevo, gracias al crecimiento y migración celular y la participación de diversas proteínas de adherencia; estos procesos involucran la proliferación de fibroblastos, revitalización, angiogénesis y la fibroplasia, que ocurren dos a cuatro días después de generar la lesión. Este proceso necesita energía, síntesis proteica y anabolismo, ya que la matriz extracelular provisional comienza a ser reemplazada por tejido de granulación. Esto se inicia gracias a la ocupación de capilares al sitio lesionado. La remodelación tisular corresponde a la última fase, cuando se desarrolla un tejido estable, similar al existente previo a la lesión, conocido como cicatriz. La cicatriz entra en un proceso de maduración final, durante el que la matriz extracelular inicial y el colágeno inmaduro tipo III son sustituidos gradualmente por colágeno maduro de tipo Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 3 I, de forma que el enlentecimiento progresivo de los procesos de cicatrización inicial conduce a la formación de cicatrices definitivas, organizadas y funcionales. El tipo de cicatriz es variable e impredecible para cada persona. El oxígeno es un elemento esencial en la síntesis de colágeno, en la proliferación celular y en la función bactericida de los neutrófilos que son los factores muy importantes en la cicatrización. 1, 2, 3,4 Uno de los cicatrizantes naturales más estudiados la especie vegetal Sangre de Grado Croton lechleri L. (Euphorbiaceae), diversos estudios in vivo e in vitro demuestran su efecto, siendo el alcaloide taspina identificado como el responsable de su efecto. 1 Las plantas como Cola de caballo (Equisetum arvense), Limón (Citrus limon), Malva (Malva silvestris) y Perejil (Petroselinum sativum, el parénquima de la sábila (Aloe vera) entre lapoblación andina se usan en quemaduras y heridas especialmente cuando están inflamadas.1, 4,5 Geles hidroalcohólicos son, por su ausencia de contenido graso, muy adecuados para aplicar a nivel de cuero cabelludo y cutis grasos o seborreicos. De forma general permiten la vehiculación de los principios activos que se pueden formular en forma de lociones hidroalcoholicos. 6 Solanum tuberosum L. es una planta perteneciente a la familia de las solanáceas, originaria de América del Sur y cultivada en todo el mundo por sus apreciables propiedades nutricionales, siendo uno de los cuatro cultivos de importancia mundial. Su origen, con más de 8 000 años de antigüedad, se localiza en los andes peruanos, al norte del lago Titicaca, estimándose en 5 500 sus distintas variedades, de las cuales más de 2 000 se cultiva en Perú. 7,8 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 4 La papa es ampliamente reconocida como una buena fuente de proteínas, carbohidratos, vitamina C, vitamina B6, vitamina B3, y ciertos minerales tales como potasio, fósforo y magnesio, 150 g de este tubérculo contiene un 45% de la dieta diaria recomendada de vitamina C8, 10% vitamina B6, 8% niacina, 6% de folatos. 9, 10,11 En la investigación de Briones12 se evaluó el efecto de los tubérculos sobre quemaduras de segundo grado inducidas en Rattus rattus var. albinus concluyendo que el cataplasma de Solanum tuberosum spp. Andigena liofilizado tienen efecto cicatrizante sobre quemaduras de segundo grado inducidas en Rattus rattus var. albinus. Ruiz13, realizó la investigación sobre cuantificación de polifenoles totales y capacidad antioxidante de los extractos de diferente grado alcohólico del tubérculo de Solanum tuberosum var. mano de oso, donde se concluyó la correlación lineal entre el contenido de polifenoles totales y la capacidad antioxidante expresada en porcentaje de captura del radical libre DPPH. En la investigación de Soto8 evaluó la capacidad antioxidante in vitro de cuatro variedades de tubérculos de solanum tuberosum L. “Papa” (Cruda y cocida, con y sin cáscara) frente al 2, 2- difenil-1-picrilhidrazil donde encontró que de todas las variedades de papa analizadas, la variedad aceituna cruda y con cáscara fue la que presentó la mayor capacidad antioxidante a una concentración de 60 mg/mL, con un porcentaje de inhibición de 74,72% y un coeficiente de inhibición al 50% de 1,70%, constituyéndose como una buena fuente de alimento con potencial antioxidante. En la investigación de González14, evaluó el efecto de la crema para el acné de productos naturales, donde se concluyó que la crema de papa tiene efecto regenerador sobre la piel con acné en adolescentes de 13 a 17 años. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 5 En la presente investigación tiene como finalidad evaluar el efecto de un gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna sobre lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c. Por ello se planteó los siguientes objetivos: Determinar el efecto del gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna sobre lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c Determinar el tiempo de cicatrización en la lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c con la aplicación del gel elaborado con el extracto etanólico de la cáscara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna Determinar el tiempo de cicatrización en la lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c con la aplicación del gel elaborado con el extracto etanólico de la pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna Analizar los hallazgos histopatológicos en relación con el proceso de cicatrización en Mus musculus Balb/c. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 6 II.- MATERIALES Y MÉTODO 2.1 MATERIAL 2.1.1 Material biológico Se utilizaron 25 Mus musculus Balb/c con peso corporal entre 15-24g adquiridos en el Instituto nacional de Salud (INS)- Lima., y fueron mantenidos a una temperatura entre 20°C- 22°C con ciclo de luz y oscuridad de 12/12 horas y con alimentación estándar y agua ad libitum. 2.1.2 Material botánico 2 kg de tubérculo Solanum tuberosum var aceituna que se obtuvo del caserío de Colpa; distrito, Sayapullo; provincia, Gran Chimú y región, la Libertad a 2357 m.s.n.m. 2.2 MÉTODO 2.2.1. Taxonomía La muestra botánica se llevó a identificar al Herbarium Truxillense (HUT) de la Universidad Nacional de Trujillo, obteniendo el código de 59206. (ver anexo 2 ) 2.2.2. Selección de la muestra Las muestras fueron transportadas al laboratorio de Toxicología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, donde se seleccionó los tubérculos teniendo en cuenta su estado de maduración, excluyendo aquellos con brotes, y partes verdes . Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 7 2.2.3. Lavado de la muestra Se lavaron los tubérculos con agua potable a chorro, seguido de una desinfección utilizando hipoclorito de sodio al 2% con 5 minutos de inmersión. Posteriormente se realizaron el enjuague de los tubérculos con suficiente agua destilada, para retirar los residuos de hipoclorito y se secaron la superficie con papel toalla. 2.2.4. Preparación de los extractos etanólicos 13 2.2.4.1 Secado de la muestra: El tubérculo fue pelado y su pulpa fue cortada en rodajas de aproximadamente 2 cm y se colocaron a secar ambas muestras a temperatura ambiente por un periodo de 3 días, luego fue molido y tamizado. 2.2.4.2 Preparación del extracto etanólico de la cáscara al 5 %: La muestra de cáscara ya tamizado se maceró con alcohol 70° luego se llevó a agitación manual por un periodo de 2 horas por 2 días. Se filtró el extracto etanólico de la cáscara primero con gasa estéril y luego con papel filtro hasta eliminar el sedimento. Finalmente se utilizó una muestra de 5 ml. 2.2.4.3 Preparación del extracto etanólico de la cáscara al 10 %: La muestra de cáscara ya tamizada se maceró con alcohol 70° luego se llevó a agitación manual por un periodo de 2 horas por 2 días. Se filtró el extracto etanólico de la cáscara primero con gasa estéril y luego con papel filtro hasta eliminar el sedimento. Finalmente se utilizó una muestra de 10 ml 2.2.4.4 Preparación del extracto etanólico de la pulpa 5 %: La muestra de pulpa previamente tamizado se maceró con alcohol 70° luego se llevó a agitación manual por un periodo de 2 horas por 2 días. Se filtró el extracto etanólico de la pulpa primero con gasa estéril y luegocon papel filtro hasta eliminar el sedimento. Finalmente se utilizó una muestra de 5 ml. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 8 2.2.4.5 Preparación del extracto etanólico de la pulpa 10 %: La muestra de pulpa ya tamizado se maceró con alcohol 70° luego se llevó a agitación manual por un periodo de 2 horas por 2 días. Se filtró el extracto etanólico de la pulpa primero con gasa estéril y luego con papel filtro hasta eliminar el sedimento. Finalmente se utilizó una muestra de 10 ml. 2.2.5. Marcha fitoquímica 16 Flavonoides: Reacción de Shinoda; se tomó X gotas de la muestra, se agregó unos trocitos de magnesio metálico y 2 gotas de ácido clorhídrico concentrado. Triterpenos y esteroides: Reacción de Liebermann-burchard; se tomó X gotas de muestra (disuelto en diclorometano), se añadió X gotas de anhidro acético, XX gotas de ácido acético y luego 1 a 2 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Se observó los cambios de coloración en el transcurso de los 30 minutos. Quinonas: Reacción de Borntrager; se tomó V gotas del extracto y se llevó a sequedad. Se agregó 0.5- 1ml de tolueno; luego se agregó 1ml de NAOH al 5%. Leucoantocianidina Rosenheinm; se tomó V gotas del extracto a analizar y se llevó a sequedad. Se agregó 0.5 – 1 ml de solución de ácido clorhídrico 2n/1-propanol. Se calentó hasta hervir de 15 – 30 minutos. Alcaloides Dragendorff; se tomó V gotas de muestra a analizar, disuelta en solución de ácido clorhídrico a l %, se agregó 2 a 3 gotas de reactivo. Mayer; se tomó V gotas de muestra a analizar, disuelta en solución de ácido clorhídrico al 1 %, se agregó 3 a 4 gotas de reactivo. Reactivo de Hager; Se midió XX gotas del extracto y se añadió II gotas del reactivo de Hager. Reactivo de Wagner: Se midió XX gotas del extracto y se añadió II del reactivo de Wagner. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 9 Sesquiterpenlactonas Reacción de Baljet: Se medió XX gotas de la muestra y se le agregó X gotas de reactivo. Fenoles Cloruro Férrico: se midió X gotas del extracto en un tubo de ensayo y se añadió II gotas de tricloruro férrico al 1 %. 2.2.6. Preparación del gel 15 Para la preparación de un lote de 100 g del gel elaborado con el extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% y 10% se ejecutó la siguiente fórmula: Componentes Gel de Cáscara 5% Gel de Cáscara 10% Gel de Pulpa 5% Gel de Pulpa 10% Extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna 5 ml 10ml 5 ml 10ml Carbapol 1 gr 1 gr 1 gr 1 gr Propilenglicol 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml Alcohol Etílico (70%) 25 ml 20 ml 25 ml 20 ml Agua purificada csp. 100 ml 100 ml 100 ml 100 ml Glicerina 3 ml 3ml 3 ml 3ml Trietanolamina 1.5 ml 1.5ml 1.5 ml 1.5ml Técnica operativa: Se procedió a medir de 3 ml de glicerina, la cual se colocó en vaso de vidrio de 100 ml, luego se agregó el alcohol de 70° y el extracto obtenido. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 10 Se pesó 1 g de Carbapol y se incorporó a la mezcla preparada anteriormente, se agitó moderadamente hasta disolución completa y se agregó agua purificada en cantidad suficiente. Finalmente se agregó 1.2 ml de propilenglicol y 1.5 ml de trietanolamina, se dejó en reposo hasta su enfriamiento en un ambiente limpio y se envasó en frascos de 100 gramos con su respectiva etiqueta. 2.2.7. Control de calidad del gel Se realizó el control de calidad de todos los geles del extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna, considerando los siguientes aspectos: Descripción de las características físicas: Color, aspecto, olor. Determinación de pH 2.2.8. Preparación de los animales de experimentación: 17 Los animales fueron acondicionados en su nuevo ambiente durante una semana. 24 horas previas a la lesión dérmica, para descartar la aparición de alguna reacción alérgica, se procedió a realizar la depilación de la zona dorsal de los especímenes, la cual fue la zona de trabajo empleando crema depiladora Depilé® para la piel sensible, se colocó la crema depiladora por un periodo de 5 minutos y se retiró con ayuda de algodón. 2.2.9. Inducción de lesiones dérmicas en los animales de experimentación 17 Método experimental: “modelo in vivo de lesión inducida por incisión en Mus musculus Balb/c”. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 11 Previo a las lesiones se desinfectó la zona de trabajo con alcohol yodado y se aplicó anestésico en crema; Lidocaína sin epinefrina al 2%, vía tópica, se procedió a realizar el corte perpendicular al eje longitudinal del ratón con bisturí, de aproximadamente 1 cm de largo por 2 mm de profundidad. 2.2.10. Distribución de los grupos experimentales 17 La distribución de los animales de experimentación se basó en 5 grupos, siguiendo el criterio al azar: Grupo 1: 5 especímenes Mus musculus Balb/c a los que se le realizó la lesión dérmica y no se le aplicó ningún tratamiento. Grupo 2: 5 especímenes Mus musculus Balb/c a los que se le realizó la lesión dérmica y se le administró el gel del extracto etanólico de la pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% 2 veces al día (8am/1pm), durante 7 días. La primera administración fué una hora después de inducir la lesión. Se aplicó el extracto etanólico con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la lesión dérmica. Grupo 3: 5 especímenes Mus musculus Balb/c a los que se le realizó la lesión dérmica y se le administró el gel del extracto etanólico de la pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 10% dos veces al día (8 am/1pm), durante 7 días. La primera administración fué una hora después de inducir la lesión. Se aplicó el extracto etanólico con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la lesión dérmica. Grupo 4: 5 especímenes Mus musculus Balb/c a los que se le realizó la lesión dérmica y se le administró el gel del extracto etanólico de la cascara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% 2 veces al día (8 am/1pm), durante 7 días. La primera administración fué una Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM ACIA Y B IO QU IM IC A 12 hora después de inducir la lesión. Se aplicó el extracto etanólico con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la lesión dérmica. Grupo 5: 5 especímenes Mus musculus Balb/c a los que se le realizó la lesión dérmica y se le administró el gel del extracto etanólico de la cascara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 10% dos veces al día (8 am/1pm), durante 7 días. La primera administración fue una hora después de inducir la lesión. Se aplicó el extracto etanólico con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la lesión dérmica. 2.2.11. Determinación del efecto del Solanum tuberosum spp aceituna sobre la cicatrización de la piel en ratones Se observó el tiempo de cicatrización de la herida y se realizó los controles fotográficos respectivos durante todo el periodo experimental. 2.2.12. Examen Histológico: 17 Los animales fueron sacrificados posteriormente a la observación de la cicatrización del primer grupo. Los ratones fueron colocados en una campana de vidrio, donde se introdujo una torunta de algodón embebido en 1 ml de cloroformo, luego se selló con la tapa. Se obtuvó las muestras de piel realizando un corte de 1,5 cm de largo y 1 cm de ancho alrededor de la cicatriz. Estas muestras fueron conservadas en frascos estériles con formol diluido al 10% para su análisis histopatológico. Con estas muestras se realizaron las observaciones microscópicas y se evaluaron los diferentes tratamientos administrados para determinar el más efectivo Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 13 III. RESULTADOS Tabla 1. Identificación de los metabolitos secundarios del extracto etanólico de la cáscara y pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna. (ver anexo 9 y10 ) Reacción de Identificación Extracto etanólico de la pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna Extracto etanólico de la cáscara del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna Sesquiterpenlactonas Baljet ++ +++ Alcaloides Wagner +++ +++ Mayer +++ +++ Hager +++ +++ Dragendorff +++ +++ Quinonas Borntrager - - Flavonoides Shinoda ++ + Triterpenos y esteroides Liebermann- Burchard - - Fenoles Cloruro férrico - ++ Leucoantocianidina Rosenheinm + + Leyenda: Color leve (+) Color medianamente intenso (++) Color intenso (+++) Sin cambio (-) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 14 Tabla 2. Control de calidad fisicoquímico del gel de extracto etanólico de la cáscara y pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% y 10%.(ver anexo 5, 6,7 y 8) PULPA CÁSCARA 5% 10% 5% 10% OLOR Suigeneris Suigeneris Suigeneris Suigeneris ASPECTO Homogéneo Homogéneo Homogéneo Homogéneo COLOR Incoloro Amarillento Incoloro Amarillento Ph 7.23 7.23 6.27 7.07 Fuente: Resultados del laboratorio INASSA S.A.C Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 15 Día Testigo Gel Pulpa 5% Gel Pulpa 10% Gel Cáscara 5 % Gel Cáscara 10% 1 2 3 4 5 6 7 Figura 1. Evolución de las lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c durante periodo experimental Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 16 Figura 2. Corte histopatológico de la piel de Mus musculus Balb/c. Grupo testigo. 10 X: A: folículo pilosos en crecimiento, B: queratina leve, C: leve aumento del epitelio y leve infiltración de células linfoides, D: fibroblastos, leve hiperqueratosis y leve hiperplasia con ausencia de mitosis. (ver anexo 11 ) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 17 Figura 3. Corte histopatológico de la piel de Mus musculus Balb/c. Grupo problema (cáscara 5%) 40 X. A: fibroblastos y macrófagos, B: aumento de queratina C: mitosis en el epitelio, D: moderada hiperplasia epitelial, presencia de tejido reparativo en la dermis superficial e intermedia. (ver anexo 12 ) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 18 Figura 4. Corte histopatológico de la piel de Mus musculus Balb/c. Grupo problema (cáscara 10%). Aumento 40 X. A: presencia de tejido muscular B: folículo piloso en crecimiento. C: Incremento del tejido fibrocolageno en la dermis superficial. No se observa mitosis, presencia de escaso tejido reparativo (colágeno inmaduro). (ver anexo 13 ) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 19 Figura 5. Corte histopatológico de la piel de Mus musculus Balb/c. Grupo problema (pulpa 5 %). Aumento 40 X. A: mayor grosor del epitelio e hiperplasia moderada epitelial con leve hiperqueratosis B: folículo pilosos maduro C: queratina .D: leve infiltrado de células linfoides en la dermis superficial. E: tejido muscular con escaso tejido fibrocolageno reparativo. (ver anexo 14 ) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 20 Figura 6. Corte histopatológico de la piel de Mus musculus Balb/c. Grupo problema (Pulpa 10 %). Aumento 40 X. A: leve hiperqueratosis B: reepitilacion y proliferación celular C: tejido reparativo D: escaso tejido de granulación en la dermis superficial e intermedia. (ver anexo 15 ) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartirbajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 21 IV. DISCUSIÓN Con los resultados obtenidos de la marcha fitoquímica (tabla 1), utilizando las reacciones coloración y precipitación para la identificación de los metabolitos secundarios presentes en los extractos etanólico de cáscara y pulpa de del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna los cuales presentaron reacciones positivas con Baljet, Wagner, Mayer, Hager, Dragendorff, Shinoda, Borntrager y cloruro férrico, lo cual nos indica, cualitativamente, la presencia de alcaloides, fenoles, Sesquiterpenlactonas, flavonoides y quinonas. Estos resultados confirman lo menciona por Soto, titulada “Capacidad Antioxidante in vitro de cuatro variedades de tubérculo de Solanum tuberosum L. ´´papa´´ (cruda y cocida, con y sin cáscara) frente al 2, 2-difenil-1- picrilhidrazil“en el cual se observa que la papa aceituna cruda con cascara y sin cascara presentó mayor intensidad de color, lo que indicaría posiblemente mayor concentración de metabolitos secundarios como flavonoide, polifenoles, antocianinas y alcaloides, la cual da su actividad antioxidante.8 Sin embargo en la investigación de Casco titulada “Evaluación de la actividad gastroprotectoras del extracto crudo de papa (Solanum tuberosum) en úlceras de estómago inducidas con etanol en ratas (Rattus norvegicus)” en el cual su marcha fitoquímica y su evolución dietética revelaron la presencia de cantidades moderadas de fósforo, magnesio, manganeso, nitrógeno, zinc, cobre y hierro, los cuales constituyen el 1% del total de la papa, destacando el potasio como elemento mayoritario, encontrándose respuesta positiva a la prueba de fenoles, siendo su principal representante el ácido clorogénico 18. La presencia de flavonoides en el extracto extractos etanólico de cáscara y pulpa de del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna, podría ser responsable de su efecto cicatrizante, ya que existen estudios de su propiedades cicatrizante debido a que producen un Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 22 aumento en la síntesis de fibronectina extracelular y colágeno, al producir la proliferación de fibroblastos normales de la piel y favorecen la angiogénesis en las heridas al acelerar la contracción de esta y su posterior cierre. Además aumenta la expresión del factor de crecimiento endotelial del borde de la herida; incrementan la fortaleza de los vasos capilares, previniendo así que éstos se cierren con facilidad y evitan que se rompan, previniendo el sangrado. Al tener ciertos flavonoides una acción similar a la de la vitamina C, protegen a los vasos sanguíneos de infecciones y enfermedades; es antinflamatoria debido a su actividad antioxidante y su capacidad de actuar contra mediadores de procesos inflamatorios como las prostaglandinas y leucotrienos y también tienen la capacidad de neutralizar los radicales libres y de esta forma impide los efectos dañinos que pueden ocasionar en el organismo 19,20. En la figura 1, se puede visualizar de forma macroscópica , el proceso evolutivo de las lesiones dérmicas, durante los días del tratamiento, evidenciando que en el sexto día el grupo de gel de pulpa al 5 % se cierra por completo la herida, mientras que los grupos de gel de pulpa y cáscara de 10% y el grupo de gel de cáscara al 5% se cierra casi por completo en el séptimo día, en comparación con el grupo testigo que presenta herida abierta aun al mismo día de finalizada la experiencia. Se observa también una mejor apariencia de la piel en los grupos tratados con el gel a base de la pulpa y cáscara del tubérculo del Solanum tuberosum L. var aceituna a diferencia del grupo testigo que no recibe tratamiento con este gel. Todos los grupos problemas, presentan una mayor diferencia partir del tercer día con respecto al grupo testigo. Esto demuestra que los grupos problemas a los cuales se les aplico el gel a base del Solanum tuberosum L. var aceituna, se observó una buena apariencia de la piel, mejorando con rapidez el proceso de cicatrización. Estos hallazgos presentan gran similitud a los reportes hechos por Horna, los cuales evidencian el beneficio del uso de un producto cicatrizante hechos a base de la tela de araña, en los procesos de cicatrización de heridas, pero en los Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. 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En las figuras 3,4 y 5 se observa aumento del epitelio formado por una o varias capas de células unidas entre sí, que puestas recubren todas las superficies libres del organismo, pero en la figura 2 solo se observa un leve aumento del epitelio 19. En la figura 2, 3 presentan fibroblastos, estas células proporcionan una estructura en forma de entramado (estroma) a muy diversos tejidos y juegan un papel crucial en la curación de heridas, y con presencia de macrófagos, mitosis y colágeno solo en la figura 2. En la figura 2 y 5 presenta leve infiltración de células linfoides desempeñando un papel muy importante en la inmunidad protectora y en la regulación de la homeostasis y la inflamación. En la figura 4 presenta fibrocolageno y tejido muscular. El la figura 6 se observó reepitilización, proliferación celular y tejido de granulación. En la figura 4 y5 presenta también tejido muscular 19. Por eso se concluye que el gel elaborado con el extracto etanólico de pulpa de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% se observó tanto macroscópicamente como microscópicamente su propiedad cicatrizante más efectivo en comparación con gel elaborado con el extracto Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 24 etanólico de la pulpa de Solanum tuberosum L. var aceituna al 10% esto se puede dar porque la papa tiene alcaloides que se encuentran de forma natural en cualquier parte de la planta, incluyendo hojas, frutos y tubérculos, , lo cual es una de las defensas naturales de la planta. Las papas sintetizan de forma natural solanina y chaconina, un glicoalcaloide 20. Biblioteca Digital - Direcciónde Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 25 V. CONCLUSIONES 1. El tiempo de cicatrización completa en la lesiones dérmicas inducidas en Mus musculus Balb/c con la aplicación del gel elaborado con el extracto etanólico de la cáscara y pulpa del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna al 10% y 5% fue de 7 y 6 dias respectivamente. 2. El gel elaborado a base del extracto etanólico de pulpa de Solanum tuberosum L. var aceituna al 5% en comparación a los otros geles, presentó mayor propiedad cicatrizante. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 26 VI. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA: 1. Proaño J. Comprobación del efecto cicatrizante de una crema a base de romero (Rosmarinus officinalis), matico (Pipar aduncum) y cola de caballo (Equisetum arvense) en heridas inducidas en ratones (Mus musculus). [grado de bioquímico farmacéutico]. Ecuador: Escuela Superior Politécnica De Chimborazo Facultad De Ciencias Escuela De Bioquímica Y Farmacia; 2013 2. Hidalgo O. Determinación del efecto cicatrizante del extracto acuoetanolico de la planta Bacopa procumbens en la línea celular 3T3 de fibroblastos de ratón. [grado de maestría en ciencias de biomedicina molecular]. 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Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 31 ANEXOS 02 IDENTIFICACIÓN TAXONÓMICA EN EL HERBARIUM TRUXILLENSE Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 32 ANEXOS 03 PREPARACIÓN DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA CASCARA Y PULPA DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Muestra lavada y seleccionada Cáscara de la papa aceituna colocadas a secar Pulpa de la papa aceituna cortadas en rodajas colocadas a secar Se molió y tamizo las muestras de pulpa de papa y cáscara de la papa aceituna Las muestras de cáscara y pulpa de la papa aceituna se colocaron en un recipiente de vidrio La muestra de cáscara se macerará con alcohol 70° Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 33 Se llevó a agitación manual por un periodo de 2 horas por 2 días. Se filtró el extracto etanólico de la cáscara y pulpa, primero con gasa estéril y luego con papel filtro hasta eliminar el sedimento. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 34 ANEXOS 04 PREPARACIÓN DEL GEL DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA CASCARA Y PULPA DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Extracto etanólico del tubérculo de Solanum tuberosum L. var aceituna Se procedió a medir de 3 ml de glicerina, la cual se colocó en vaso Becker de 100 ml Luego se agregó el alcohol de 70° y el extracto obtenido Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 35 Se pesó 1 g de Carbapol y se incorporó a la mezcla preparada anteriormente, se agitó moderadamente hasta disolución completa Se agregó agua purificada en cantidad suficiente. Finalmente se agregó 1.2 ml de propilenglicol y 1.5 ml de trietanolamina, se dejó en reposo hasta su enfriamiento en un ambiente aséptico Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 36 Se envasó en frascos de 100 gramos con su respectiva etiqueta. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 37 ANEXOS 05 REPORTE FÍSICO- QUÍMICO DEL GEL DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA CASCARA 5% DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 38 ANEXOS 06 REPORTE FÍSICO- QUÍMICO DEL GEL DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA CASCARA 10% DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 39 ANEXOS 07 REPORTE FÍSICO- QUÍMICO DEL GEL DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA PULPA 5% DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 40 ANEXOS 08 REPORTE FÍSICO- QUÍMICO DEL GEL DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA PULPA 10% DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 41 ANEXOS 09 MARCHA FITOQUÍMICA DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA CÁSCARA DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna ANEXOS 10 MARCHA FITOQUÍMICA DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA PULPA DEL TUBÉRCULO DE Solanum tuberosum L. Var aceituna Leyenda: 1. Liebermann-Burchard 2. Cloruro férrico 3. Shinoda 4. Borntrager 5. Dragendorff6. Mayer 7. Wagner 8. Baljet 9. Rosenheinm 10. Hager 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 42 ANEXOS 11 REPORTE DE PATOLOGÍA DEL GRUPO TESTIGO Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 43 ANEXOS 12 REPORTE DE PATOLOGÍA DEL GRUPO PROBLEMA CÁSCARA 5 % Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 44 ANEXOS 13 REPORTE DE PATOLOGÍA DEL GRUPO PROBLEMA CÁSCARA 10% Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 45 ANEXOS 14 REPORTE DE PATOLOGÍA DEL GRUPO PROBLEMA PULPA 5% Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU IM IC A 46 ANEXOS 15 REPORTE DE PATOLOGÍA DEL GRUPO PROBLEMA PULPA 10% Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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