Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
~ 49 AVANCES BIOTECNOLOGICOS EN SALUD Y PRODUCCION ANIMAL("). Luis L. Rodriguez Roque, M.V., Ph. D. Escuela de Medicina Veterinaria- P.I.E.T., Universidad Nacional, Heredia, Costa Rica. programa de Apoyo a Investigadores Cientificos, C.O.N.I.C.I.T. (*) Partes de este trabajo fueron publicadas par el mismo autor en: "Oportunidades de las biotecnologias agropecuarias en America Central" IICA, San Jose Costa Rica Mayo, 1989. Ponencia ante el IX Congreso Nacional Agropecuario y de Recursos Naturales. San Jose, Costa Rica, Octubre 1993. Durante los ultimos arias, especialmente durante los ultimos 15 arias, se ha desarrollado una serie de tecnologias completamente novedosas en el area de las ciencias biol6$icas, que hall encontrado aplicaciones especificas en salud y producclon animal. Estos nuevas conocimientos se hall llamado par varios nombres como par ejemplo: "manipulacion genetica", "ingenieria genetica", "clonaje ,molecular", "ADN recombinante" y mas genericamente "biotecnolQgia" (Sommer, 1986). La biotecnologia puede definirse genericamente como" la aplicacion ~ de principios cientificos y tecnol6gicos al procesamiento de materiales par agentes biol6gicos para proveer bienes y seIVicios" (Wilkie, 1988) . A pesar de que los conceptos actuales de biotecnologia comprenden toda una serie de conocimientos y tecnicas de desarrollo muy reciente y revolucionarios, la idea de usar organismos vivos para obtener procesos 0 productos beneficiosos es rnuy antigua, como ejemplos tenemos el usa de la fermentacion para.~roducir bebidas alcoholicas, las levaduras ~ara producir pan, bacterlas para producir quesos, yogurt, antibiotlcoS (penicilina) y otros productos (Hodges, 1986). Entonces que es 10 nuevo en biotecnologia? Todos los ejemplos anteriores dependen de caracteristicas ya inherentes a los organismos, tanto microorganismos como animales 0 plantas. Estas caracteristicas especiales, las obtuvieron par seleccion natural y evolucion, y la Unica forma de cambiarlas es par cruzamientos selecti vas y seleccion genetica, 0 par mutaciones que ocurren natural 0 espontaneamente. La gran contribucion de la biotecnologia moderna es la capacidad que posee de identificar, separar y manipular artificialmente estas caracteristicas geneticas (Glover, 1984). No solo esto sino que ahara se cuenta con la capacidad de "crear" organismos, 0 sustancias biol6gicas con las caracteristicas deseadas y obtener el resultado deseado en una sola generacion, sin necesidad de cruzar selecti vamente los organismos durante largos periodos de tiempo (Koshland, 1985). Lo que es mas, en algunos cas os se pueden producir sustancias con acti v~dad biol6gica como peptidos u oligonucleotidos (partes de proteinas y acldos nucleicos respectivamente) par sintesis quimica artificial, fuera de los 'J organismos vivos (Arnon, 1983). Con estos procedimientos biotecnologicos se obtienen resultados mas especificos, sin efectos . . colaterales indeseables y en mucho menor tiempo de 10 que seria posible r' par seleccion genetica natural par muchas generaciones, 0 atin par ~",;mutaciones geneticas inducidas al azar en log organismos (Sonmer, 1986) . ~ '. En el caBO especifico de la produccion y salud animal, la biotecnologia tiene aplicaciones principalmente en lag siguientes areas: 1. Diagnostico, prevencion y control de enfermedades animales. A. produccion de vacunas subunitaria par ADN recombinante (ADNr) 0 peptidos sinteticos, modificacion genetica de microorganismos. Vacunas de ADN. B. Produccion de zooterapicos, interferon, anticuerpos monoclonales, yotros. C. produccion de reacti vas de diagnostico, anti cuerpos monoclonales jPara ELISA, radioinrnunoensayo, sondag de acidos nucleicos, hibridizacion, y otros. 2. Nutricion animal y promocion de crecimiento. A. Inoculos ruminales de bacterias y protozoarios geneticamente modificados. B. Produccion de hormonas de crecimiento sinteticas. ~ 3. Mejoramiento genetico animal. 4 ' A. Inseminacion artificial, sexado de semen. B. Transferencia y manipulacion genetica embrionaria, "clonaje embrionario", sexado de embriones, animales transgenicos, quimeras yotros. 4. produccion de sustancias de origen animal para usa en diagnostico, investigacion y terapeutica (suero fetal bovino, hormonas animales, y otros). 1. DIAGNOSTICO, PREVENCION Y CONTROL DE ENFERMEDADES. A. Produccion de vacunas. Al<JUI:las enfermedades animales son causadas par agentes infecciosos diflciles de cultivar en el laboratorio en cantidades suficientes para producir vacunas. En otros casas lag vacunas producen efectos se~undarios indeseable~ (como 10 es el hecho de no poder distinguir anlmales vacunados de lnfectados), 0 lag vacunas existentes son poco eficientes en producir la inrnunidad deseada, 0 poco estables. En estos casas se esta tratando de desarrollar vacunas producidas par media de ingenieria genetica para prevenir y controlar dichas enfermedades (Schudel, 1988). ~isten diferentes metodos de producir vacunas par ingenieria, gen~tlcai se pueden producir vacunas subunitarias ya sea individuales C=)' 0 lncorporadas en otros agentes virales, 0 vacunas sinteticas ~ . (peptidos), 0 vacunas a base de microorganismos manipulados \-I geneticamente (Gorham, 1988). Mas recientemente se hall desarrollado las "vacunas de ADN" (llamadas "gene vaccines" en ingles) que consisten en inyectar el animal con un plasmido que contiene la informaci6n genetica de la vacuna y es capaz de expresar esa informaci6n y producir la proteina vacunal dentro del mismo animal. A.1. Vacunas subunitarias: i. Clonaje y expresi6n en bacterias 0 levaduras 0 en celulas de mamifero. Usando cualquiera de estos metodos el producto final es una proteina 0 un fragmento de proteina el cual se ha determinado que es capaz de inducir una respuesta inmune contra el microorganismo causante de la enfermedad (Kupper, 1988) . Esta proteina debe purificarse antes de poder servir como vacuna. Las ventajas de este metoda es que se suministra al animal una parte del agente, y no el agente completo, par 10 cual no es capaz de revertir y convertirse en pat6geno, 10 que las hace muy seguras (Macfarland, 1984; Barchrach, 1982). Entre las desventajas se encuentran el hecho de tener que purificar la proteina de otros productos del microorganismo usado para la producci6n de la vacuna (Bachrach, 1982). Par otro lado las dosis que se deben suministrar de este tipo de vacunas son muy al tas debido a que son par 10 general poco antigenicas (no inducen buena inmunidad) (McKercher, 1985). ii. Clonaje y expresi6n en vectores virales como Vaccinia, Papilloma, Adenovirus, Retrovirus, yotros. En este caso se pueden incorporar las proteinas inmunogenicas (que V inducen inmunidad) de varios agentes virales (por ejemplo rabia, distemper, herpesvirus) en un s610 virus vivo que es inoculado e induce protecci6n contra las tres enfermedades con una sola vacunaci6n (Paoletti, 1983). En el caso de la ganaderia 0 avicultura, el poder aplicar una sola vacuna contra varias enfermedades reduciria los costas de manej 0 . Par otro lado las proteinas serian mas inmunogenicas al estar incorporadas en la membrana del virus vacunal (Gillespie, 1986). iii. Vacunas de ADN (gene vaccines) : este es un nuevo concepto en materia de vacunas. Consiste en la inyecci6n de un plasmido de expresi6n directamente al animal. La forma en que este sistema funciona aun no esta muy claro pero se cree que la informaci6n genetica contenida en el plasmido es expresada par las celulas del animal e inducen una respuesta inmune (Cox, G.J., T. Zamb, and L. Babiuk. 1993. Bovine herpesvirus 1: itmlune response in mice and cattle injected with plasmid DNA. J. Viral. 67:5664-5667.) A.2. Vacunas sinteticas (peptidos). Estas vacunas son producidas par metodos quimicos fuera de organismos vivos. Se sintetiza la cadena de aminoacidos (componentes de las proteinas) de acuerdo a la secuencia del producto deseado (Arnon, 1983). Estas vacunas tienen la ventaj a que con ellas se pueden producir anticuerpos especificos contralas porciones mas relevantes de los virus 0 bacterias (Mcfarland, 1984). Una de las mayores desventajas de est"e metoda es la relativa facilidad con que un virus podria cambiar esa porci6n de una de sus proteinas y par tanto "escapar la respuesta inmune ~ generada par el peptido sintetico. Un ejemplo de una vacuna sintetica es contra el virus de la Fiebre Aftosa, sin embargo en pruebas de . I laboratori~ se enc=tro ~e el vi=s f~ capaz ~ ~tar yesca~r la~ Orespuesta lnmune en los anlrnales vacunados (McKercher, 1985). En la actualidad se realizan pruebas para tratar de producir peptidos mas i;," complejos 0 series de peptidos que eviten que el virus mute tan facilmente (Duque, 1987). A.3. Agentes rnanifulados geneticamente. Par 10 genera son agentes de baj a patogenicidad y con rnarcadores geneticos ~e permi ten distinguirlos de los agentes de campo y par 10 tanto permlte distinguir anirnales vacunados de animales infectados naturalmente. un ejemplo de este tipo es una vacuna contra la Pseudorabia (upjohn) consistente en un virus mutante producido par rnanipulacion genetica, el cual no posee una de la proteinas virales (Kit, 1987). Esta proteina no influye sabre la efectividad de la vacuna, sin embargo permite par media de una muestra de suero y una sencilla prueba inmunol6gica, distinguir animales vacunados de animales que poseen el virus de campo. Esto es de suma importancia en programas de control de esta enfermedad, ya que se puede remover los animales infectados y dejar solamente los vacunados (Kit, 1986). Otro ejemplo de una vacuna en base a un agente modificado es la vacuna contra el virus de la rinotraquei tis infecciosa bovina (virus herpes bovino tipo 1, IBR/IPV). Uno de los problemas mas graves con este virus es el hecho de que los anirnales vacunados con vacuna viva, al igual que aquellos infectados en forma natural, mantienen la infeccion para siempre, siendo capaces de transmi tir el virus y provocar epizootias de la enfermedad. Otra de las desventajas del virus vivo como vacuna, es que produce aborto en enimales prenados (Whetstone, 1983). Par esta razon es muy deseable una vacuna que se pueda distinguir de las cepas pat6genas de campo, y que a su vez sea capaz de inducir inmunidad adecuada (Rodriguez, 1988). B. Produccion de zooterapicos: Entre los zooterapicos mej or conocidos estan los interferones, las cuales son sustancias de tamafio relativamente pequeno, que usa el organismo para defenderse inespecificamente de las infecciones principalmente par virus. Estas sustancias han sido clonadas y se producen en bacterias y levaduras manipuladas geneticamente (Guzman, 1987). Sus usos potenciales incluyen la proteccion de animales bajo "stress" contra lnfecciones virales. , Otro ejemplo son los anticue~os monoclonales, los cuales son producidos par celulas "hibridomas" producto de la fusion de celulas productoras del anticuerpo deseado (linfocitos) con celulas tumorales (mielomas) 10 cualles permite crecer y producir anticuerpos especificos indefinidamente (Sherman, 1986). Los anticuerpos monoclonales se han usado como terapeuticos (Colonno, 1986) y como prevencion para infecciones gastrointestinales en terneros causadas par Escherichia coli cepa K-99. Esta bacteria es una import ante causa de diarrea en terneros, penetra par via oral y se adhiere a las paredes del intestino a traves de "vellos" 0 "pilus" en su superficie. Los anticuerpos monoclonales (Gen-coli Molecular Genetics Inc.), se pueden adquirir comercialmente, estan dirigidos y reconocen tinicamente estos "pilus" par 10 cual bloquean la adherencia de la bacteria y previenen la diarrea (Sherman, 1983). Los mismos anticuerpos se usan en un "kit" de diagnostico de campo para K-99 (Coli-tect, Molecular Genetics Inc.) con el cual se puede diagnosticar el problema en los primeros animales con diarrea y suministrar el anticuerpo a los otros para prevenir la enfermedad. Este enfoque de suministrar el diagnostico de campo y el tratamiento especifico podria extenderse a otros tipos de problemas . virales y bacteriales, gastrointestinales y respiratorios y en otras \-/ especies ademas de bovinos como par ej emplo en porcinos 0 en aves, donde el nlimero de individuos y el potencial de venta es mucho mayor (Afshar, 1986). Par supuesto debemos de considerar aqui. la produccion de sustancias terapeuticas de amplio usa en produccion animal, como es el caso de la Hormona Foli.culo Estimulante (FSH) bovina que es amplia mente usada en reproduccion animal y ya se produce par tecnologi.a de ADN recombinante (Chappel, 1988). C. produccion de reactivos de diagnostico. El diagnostico de las enfermedades animales es de las areas mas deficientes en el area centroamericana. AUn los metodos tradicionales de laboratorio que no involucran nuevas biotecni cas, son poco usados a nivel de campo. Estos servicios par 10 general son prestados par insti tuciones estatales. Sin embargo conforme se crean nuevas empresas productivas mas sofisticadas, se van requiriendo mejores servicios de diagnostico de enferme dades animales. El diagnostico de las enfermedades animales se obtiene par media de la identificacion en el laboratorio ya sea del agente especi.fico (bacteria, virus, parasito, etc), 0 de partes del mismo (anti.genos, acidos nucleicos) (Afshan, 1986). Alternativamente se detecta la presencia de anticue:rpos especi.fi cas contra el agente (Veijalainen, 1986). Los productos biotec nol6gicos que tienen mas usa en diagnostico son los anticuerpos monoclonales (AcMo). En la actualidad se comercializan, princi 'palmente en Norteamerica y Europa, varios "kits" para diagnostlco de enfermedades animales basados en nuevas biotecnologi.as, algu nos ejemplos son: Rotavirus (Rotazyme, Abbott Labs.), Leucemia Felina, Leucosis Bovina y ~ Anemia Infecciosa Equina (Pitmann Moore Inc.), Enfermedad de Gumboro, Bronquitis Infecciosa y Enfermedad de Newcastle (Orgenics, Ltd., Israel), yotros. Este ultimo ejemplo es en particular interesante ya que es un metoda sumamente sencillo de usar a nivel de campo y permite obtener los ni veles de inmunidad en poblaciones de aves, con 10 cual se puede determinar la ectad optima de vacunacion, 0 evaluar la efecti vidad de varias vacunas en pocos minutos. El principia de este "kit" es el usa de la tecnica de "inmunopeine" que consiste en aploicar varios anti.genos a cada uno de los "dientes" de un peine hecho de un tipo es~ecial de ny~os 0 de nitrocel~losa. Esto permite incubar cada "dlente" del pelne con un suero dlferente par sepa rado, con 10 que se pue?en probar simultaneamente varios sueros (8 par cada peine) contra varlOS agentes (3-5) (Obata, 1988). 2. Nutricion animal y promocion de crecimiento. CUalquier producto que promueva la nutr'icion 0 el crecimiento animal,tiene el potencial de tener buena aceptacion en la industria pecuarla. Las hormonas naturales y esteroides sinteticos son ampliamente usados en todo el mundo para promover el crecimiento animal. Algunos de estos compuestos actuan sabre los microorganismos presentes en el tracto intestinal, ya sea bajando la poblacion de microorganismos dafiinos 0 promoviendo el crecimiento de otros beneficiosos. Otros inducen mej or aprovechamiento de nutrientes, y otros proveen nutrientesen forma directa. . ) La hormona de crecimientc? \BST) ha sido P?t,entada ,(Monsant?) y ~e ~ esta usando aunque su usa es Ilmltad. El proposlto es lntroduclr mas hormona de crecimiento de 10 normal para que el animal continue . creciendo mas aceleradamente. Par otro lado se ha reportado que bovinos que reciben ~osis controladas de hormona de crecimi~nto (somatotropina, ~~ BST) produclda par ADNr producen de un 10- 25% mas de leche, par 10 ~tanto teoricamente se podria mantener la misma produccion de leche con "0.' 25% menos de animales en laB fincas (Annexstad, 1987). La ventaja de esta hormona es que a diferencia de otras hormonas animales como esteroides ( ej. estr6genos) , la somatotropina bovina no se acumula en loB animales tratados y no funciona en humanos (no inducecrecimiento) ya que se probo en casas de enanismo y no funciono. Sin embargo, uno de loB principales problemas de estas sustancias es la administracion contin~a que es necesaria, y la se~ridad de que no afecte a :1.os consumldores de productos animales (Mlller, 1986). Algunas investigaciones en el area de nutricion animal estan comenzando a ser dirigidas hacia loB microorganismos intestinales que participan en la digestion y absorcion de nutrientes, es~ecialmente en rumiantes. Como sabemos loB rumiantes, a traves de loB mlcroorganismos ruminales (bacterias, hongos y protozoarios) , son capaces de utilizar la celulosa y obtener una serle de nutrientes de loB pastas y forrajes. Si estos microorganismos se modifican geneticamente para cumplir esta funcion en forma mas eficiente esto beneficiaria el aprovechamiento nutritivo y aumentaria la productividad. Esto seria de suma utilidad especialmente en paises en desarrollo donde laB dietas animales son bajas en proteinas. Estos microorganismos modificados podrian "inocularse" facilmente en el rumen par media de bolos. Estas tecnologias estan en fase de investigacion y desarrollo en algunos paises como loB Estados Unidos, Canada y Gran Bretafia (Taylor, 1987). 3. M&JORAMIENTO GENETlCO. ~ c~-"i{.;j A. Inseminacion artificial: Durante muchos afios la Inseminacion Artificial (IA) ha sido usada para el mejoramiento genetico. En este momenta la tecnica cuenta con amplia aceptacion en todo el mundo. En centroamerica un alto porcentaje de loB cruzamientos fueron hechos par I.A. De estos gran parte (mas del 80%) fue con semen import ado principalmente de loB EEUU y Canada y menos del 20% fue con semen local (Informe sabre la situacion actual de la inseminacion artificial en el contexto de la ganaderia bovina en Costa Rica, Ministerio de Agricultura y Ganaderia, Diciembre 1983). La tecnologia de congelacion de semen existe a nivel de todos loB paises centroamericanos sin embargo la comercializacion interna es minima. El area de evaluacion genetica computadorizada unida a tecnicas de control de calidad adecuadas permitirian la sustitucion de mucho del material genetico que hay se importa. Una de laB principales areas de investigacion en inseminacion artificial es el sexado del semen, a traves de diferentes metodos como centrifugacion diferencial e inmunoafinidad. Esto permitiria aumentar laB posibilidades de escoger el sexo de laB crias (Johnson, 1987; Seidel, 1988). B. Transferencia v maniDulacion qenetica de- embrion~~ = La transferencia de embriones es en laactualidad una de laB biotecnicas que mas auge va tomando en todo el mundo, dado que perfil te obtener un mayor nUrnero de animales progenie de aquellos animales geneticamente valiosos en un tiempo muy carta (Smith, 1988). Sip embargo la transferencia de embriones es una parte de toda una ~ serle de tecnicas relacionadas a esta. En breve, la transferencia de; . embriones consiste en inducir a un animal geneticamente valioso ~ (donadora) a producir varios ovulos (superovulacion) que son fecundados para producir embriones (Carney, 1987). Estos embriones son recuperadosdel utero del animal a traves de un "lavado" 0 "flushing". Los embriones asi recuperados, son transferidos a otras vacas (receptoras) lascuales se encargan de llevar a termino la gestaci6n (Britt, 1988). De esta manera se pueden producir hasta 15 terneros hijos de una vacageneticamente valiosa (donadora) , con un mismo taro, en ~lperlodo de una sola gestacion (9 meses). Este procedimiento es el basico yesta siendo usado con cierto exi to par medicos veterinarios en todo el mundo inclusive en varios paises latinoamericanos (Del Campo, 1988) . En Centroamaerica se ha realizado transferencia de embriones en fo!:ma semi-comercial desde 1983, con exito variable. Algunos de log veterinarios dedicados a este campo reportan porcentaj es de exi to de un 30~50% en condiciones de campo; Par supuesto log porcentajes de exito son mejores durante log ultimos arias. Se transfieren tanto embriones obtenidos de donadoras locales como embri one s import ados de Norteamerica. EXisten algunas variables a la tecnica basica, como 10 son la congelacion de embriones i 10 cual permi te transferirlos en el momen~o adecuado, en cas~ de no pbseer s~ficien17es ani.~les receptores (SUZukl, 1986) . Otro e]emplo es la mlcromanlpulaclon de embrlones 0 "embryo splitting" que consiste en "~artir" el embrion de 4-;-8 celulas en dos nuevas embrl one s , con 10 cual se pueden obtener anlmales totalmente identicos; Otras tecnicas usadas son la fertilizacion in vitro que consiste en ~e~tilizar lo~ ovulos fue-;:a ~el animal y lue$9 t~anf~rirlos. V Es~e procedlffilento, c~lnado con tecnlcas ~e madurac~on In v~trQ de OOCl tOg (precursores de ovulos maduros) , perml te produclr embrlones de animales que se han sacrificado y de log que se ha recuperadQ los ovarios (Ly, 1988). TransQlgntenucle§r. Uha de ~as tecnicas mas novedosas es el transplante nuclear en embriones (Prather., 1987).. La tecnica consiste en colectar oocitos (huevos no fecundados) de animales poco valiosos y remover la informacion genetica propia, luego se taman los blastomeros (informacion genetica) del embrion que se desea "clonar" y se inserta uno en cada oocito. Asf de un embrion de 4 blastomeros se producen 4 oocitos "transplantados". Luego los oocitos se someten a pulsos electricos (electrofusion) para pramover la fusion del materlal genetico y se ponen a madurar en el oviducto ligado de una oveja. Aqui los nuevas embriones maduran y se puede volver a repetir el procedimiento, para producir mas individuos identicos (clones) estos embriones se pueden transferir aanimales receptores para producir progenie (Prather, 1988) . Par el momenta el metoda no es muyeficiente, pero hay varios grupos trabajando en el perfeccionamiento de estas tecnicas especialmente en la Uni versidad de Wisconsin en el laboratorio del Dr. Neil First (Marx, 1988) . ,,--, ""_- Una de lag aplicaciones biotecnolOgicas que mas interesa a los productores pecuarios es el poder determinar el sexo de la progenie de BUS animalesi asi a los productores de leche le interesa aumentar el nUffiero de hembras y al de carne el nUffiero de machos. Un grupo de trabajo en la Uhiversidad de Davis- California ha descubie~to un ~ anticuerpo monoclonal que reacciona con antigenos especificos del . embri6n macho (H-Y) (Anderson, 1987). Con un metoda de --);; inmunofluorescencia son capaces de selecccionar los embriones macho de ~~'t los embriones hembra, con un exito del 85% en la predicci6n del sexo, i~~, y sin afectar la viabilidad de los embriones para ser transplantados. Otros procedimientos que se hall usado para identificar el sexo, incluyen el usa de sondas de ADNr especificas para el genoma del macho, sin embargo este procedimiento requlere obtener el ADN del embri6n con 10 cual puede bajar sensiblemente la viabilidad del mismo (Ellis, 1988) Animales transqenicos: Una de las aplicaciones mas interesantes de la biotecnologia seria la manipulaci6n genetica a nivel embrionario para producir animales transgenicos, 0 sea que contienen genes foraneos incorporados a sus propios genes (Reed, 1988i Murray, 1988). Tal es el caso de ratones transgenicos a los cuales se les incorpor6 durante la fase embrionaria, el gene de la lactoalbUrnina de oveja. AI G+ecer estos ratones produjeron leche que contenia lactoalbUrnina de oveja (Simons, 1987). El ej ernplo clasico es aquel en que el .;3:en de la honnona de crecimiento es incorporado a embri one s , con 10 cual se producen animales de tarnafio mucho mayor de 10 que seria norrnalmente. Hastael momenta esto se ha logrado en ratones, ovejas, cerdos y bovirios,con exito relativo (Rexroad, 1988). La regulaci6n de la producci6n de la hormona puede ser inducida con sustancias como el Zinc, ya que el gen de la homona se puede asociar al promotor del gen de la metalotionina, una sustancia que solamente se produce en presencia de al tas cantidades de estos metales. Par ej ernplo en ratones se ha logrado producir"superratones" capaces decrecer hasta un 35% mas que los ratones norrna1es. Una ventaj a de estos ~ metodos es que esto se logra sin suministrar sustaricias foraneas a 10s ~, animales, como hormonas artificiales, y la producci6n de 1a hormona natural se puede detener al suspender la dieta rica en Zinc, con 10 cua1 se podria evitar problemas para el consumo hurnano {Palmiter, 1982). Un usa practico de los animales transgenicos es incorporar en ellos genes de sustancias utiles desde el punta cte vista terapeutico y que son dificiles de producir 0 purificar a partir de microorganismos modificados par ingenieria genetica. Asi tenemos que se hall producido ovej as transgenicas que producen en su leche el factor de coagulaci6n IX de humanos, usado para el tratamiento dehemofilicos (Wilmut, 1988). Sin embargo los niveles obtenidos hasta ahara son muy bajos para ser aprovechados comercialmente. Entre 1as mayores ventajas de producir proteinas para terapia en humanos en animales transgenicos, es la reducci6n en e1 costa ya que estos productos se obtienen actualmente de plasma 0 de tej idos humanos (cadaveres) a un costa sumamente alto y con el riesgo de transmisi6n de infeccionesgraves como 10 es e1 virus del SIDA. Mientras que en animalestransgenicos podrias obteperse a partir del plasma 0 la 1eche de estos '(Wilmut, 1988). 4. PRODUCCION DE SUSTANCIAS DE ORIGEN ANIMAL PARA USa EN DIAGNOSTICO, INVESTIGACION Y TERAPEUTICA. Muchas materiales de origen animal siguen siendo usadas para la purificaci6n de hormonas, sales biliares, y otras sustancias que se usan tanto para diagn6stico e investigaci6n como para terapia, tanto en anima1es como en humanos. Entre estas sustancias tenemos: suero fetal "~ bovino, abomasos, pancreas, glandulas suprerrenales, bilis, crista1ino J'J de cerda, y otros. En la actualidad el suero fetal bovino, es usado en ii' . grandes cantidades en investigacion y diagnostico tanto en Norteamerica ~ como en Europa,' Tenemos datos de que solamente Costa Rica exporto al menDs 25,000 lltros de este suero durante 1987, como "materia prima" que fue procesada en otros pafses y vendido a mas de $230 par litro ($5,750,000) par estas compafifas (Castro, C. Cornunicacion Personal, 1988). Este proc~samientopodrfa real~zarse loca~mente y,exportar el producto ya termlnado. El procesamlento conslste baslcamente de centrifugacion, filtracion e irradiacion con rayos gamma, ademas de las pruebas de esterilidad y control de calidad necesarios (APHIS, 1988). Como este caso, existen otros productos que podrfan exportarse en forma mas ,t~rminada generando un mayor ingreso de di visas y mayor empleo en la reglon. CONCLUSIONES. Esta breve revision presenta una serie de tecnologias innovadoras que se h~ desarrollado en ]os 61 timos afio~. El pote~cial de usa de estas es lnmenso para los palses centroamerlcanos y podrlan representar fuentes de ingreso al ternas a los productos tradicionales de exportacion y sustituir productosde importacion de alto costa. Debemos recordar que las necesidades de usa de la biotecnologfa en centroamerica son diferentes de las de los pafses desarrollados 0 de otras regiones, y par tanto nos va a corresponder desarrollarlas en forma autoctona, basadas en nuestra propia realidad. La produccion animal en toqo el area de Centroamerica representa una de las mas importantes fuentes de prptefna para la poblacion. Ademas es fuente de divisas producto de la exportacion de carne, cueros y otros subproductos de origen animal. Sin embargo el sector pecuario ~ atraviesa una seria crisis producida par los bajos precios de la carne y otros productos de origen animal en los mercados internacionales y al aumento en los cos~tos de produccion. Una posible solucion a este problema serfa el aumento en la eficiencia de producci6n. Sin embargo para aumentar la eficiencia es necesario mejorar cuatro areas que van estrechamente relacionadas: nutricion, reproduccion, mejoramiento genetico y salud. En cada una de estas areas la biotecnologfa presenta opciones para el mejoramiento de la eficiencia productiva. Par ejemplo la transferencia embrionaria permitirfa la evaluacion rapida del material genetico de 10s animales en terminos de su adaptabilidad a condiciones tropicales (Smith, 1988). La aplicacion de tecnicas de diagnostico a la ganaderia podrfa disminuir las altas perdidas ocas~onadas po~ las enfermedades ani~lep, la mayorfa de,~ las cuales podrlan prevenlrse con prqgrama~ de dlagnostico y vacunaclon adecuados (cuadro 4) . Un casotipico es el de la Anaplasmosis, una enfermedad del ganado en el tropico. Ya existe al menDs una vacuna subunitaria, que podrfa ser de extrema utilidad en Centroamerica, sin embargo no se comercializa debido en parte a que en el pais donde se produj 0 la vacuna esta enfermedad no tiene tanta importancia como en Centroamerica y otras regiones tropicales (Palmer, 1986). De aquf la importancia de poder desarrollar nuestra propia biotecnologfa. " ,;',;4.;+ v . BibliQgrafia. ~ A.P.H.I.S. (USDA). 1988. Fetal Bovine Serum Import Requirements. Ii Afshar, A, et al. 1986. Dot-Enzyme Immunoassay for visual detection of antibodies to pseudorabies virus in swine serum. J. Clin. Microbiol. 23:563-565. Anderson, G.B. 1987. Identification of embryonic sex by detection of H-Y antigen. Theriogenology. 27: 81-97. Annexstad, J. 1987. New facts on bovine s~atotropin research. Dairy Herd Management magazine, January 1987. Arnon, R. ~gl. 1983. Synthetic Vaccines (review article). J. Immunol. Meth. 61:261-273. Bachrach, H.L. 1982. Recombinant DNA technology for the preparation of subunit vaccines. JAVMA 181:992-999. Biotecnologia yTercer Mundo: Politicas y Estrategias. 1988. Boletinde Biotecnologia (CONICIT, Costa Rica). Vol. 5 (1): 1-3 Britt, J.H., and Holt, L.C. 19~8: Endocrino,logical screenin$of embryo donors and embryo transfer reclplents: A reVlew of research Wl th cattle. Theriogenology. 29:189-201. Carney, E.,and B. Bavister. 1987. Stimulat,ory and Inhibitory Effects of Amlnoaclds on the Development of Hamster Elght-Cell Embryos ln Vitro. J. in Vitro Fertilization and Embryo Transfer. 4: 162-167. U;~,--~ Chappel, S. ~gl. 1988. Bovine FSH produced by recombinant DNA technology. Theri~enolo~29:235-236. Colonno, R. J. et al. 1986. Isolation of a monoclonal antibody that blocks attachment of the major group of human rhinoviruses. J. Virol. 57: 7-12. Del Campo, M.R., et al. Bovine embryo transfer under field conditions in Chile. XI International Congress on Animal Reproduction and Artificial Insemination. June 26-30 1988. Duque, Hernando. Compania VECOL, Bogota, Colombia. Comunicacion personal, 1987. Ellis, S.B. et al. 1988. Sex determination of bovine embryos using male specific DNA probes. Theriogenology. 29:242. Gillespie J.H. et al1986. Response of dairy calves to vaccinia viruses that express foreign genes. J. Clin. Microbiol. 23: 283-288. Glo,!er, J?M. (ed). 1984. Gene c;oni~g: th~ mechanics of DNA manlpulatlon. Chapman and Hall., New York. Guzman, G., Kouri, G., Aguilera, A. Soler, M. Inhibicion de la mul tiplicacion del virus dengue en presencia del interferon. Interferon y Biotecnologia (Cuba), 4:108-114. ~ Hodges, H. 1986. Biotechnology and domestic animals. World Animal ,~: . Review. 59: 2-10. V . Johnson L.A., Flook, J.P., Look M.V. 1987. Flow sorting of X and Y chromosome-bearing spermatozoa into two populations. Gamete Research. 16:1-9. Kit, S., Kit M., McConnell, S. 1986. Intramuscular and intravaginal vaccination of pregnant cows with thyrl1idine kinase- negative, temperature resistant infectious bovine rhinotracheitis virus (bovine herpesvirus 1) . Vaccine 14: 55-61. Kit, S" Sheppard, M., Ichimura, H. 1987. Second-generation pseudorabies virus vaccine with deletions in thyrl1idine kinase and glycoprotein genes. Am. J. Vet. Res. 48: 780-793. Koshland, D.E. 1985. Excursions in biotechnology. Science 229:1191. . , Kupper, H. etal. 1981. Cloning of cDNA of major antigen of foot and mouth disease virus and expression in E. coli. Nature. 289: 5798-5801.Lu, K.H. ~.Q;l. 1988. Production of cattle embryos by ifLvitro maturation and fertilization of follicular oocytes and their subsequent culture in vivo in sheep. Theriogenology. 29: 272. Macfarland, R. et al. 1984. T cell responses to cleaved rabies virus glycoprotein and to synthetic p~ptides. J. Immunol. 133:2748-2751. . '. Marx, J. L. 1988. Cloning sheep and cattle embryos. Science, 239: '-./, 463-464. McKercher, P.D. etal. 1985. Dose-response of a genetically engineered foot-and-mouthdisease virus polypeptide immunogen in cattle. Am. J. Vet. Res. 46:587-590. ... Miller, L.A., Vice -,President and General Manager, Animal Science Division, Monsanto Agrid.11.tural Company. Testimony given to the Livestock, Dairy and Poultry Corrnnittee on Agriculture, U.S. House of Representatives, WashingtQnD.C. June 11, 1986. ~urray, ~.D., et al. 1988. Techniques for the transfer of foreign genes lnto anlmals. Proceedings, XI International Congress on Animal Reproduction and ArtifitialInsemination, Dublin, June 26- 30 1988, Vol. _5: 19-27. Obata, T. and S.Y. Cheng. 1988. Strip-comb dot inInUnobinding: a rapid, easy and sensitive method to screen monoclonal antibodies. Bio Techniques 6:299-303. Palmer G.H. et al. 1986. Immunization with an isolate-common surface antigen protects cattle against anaplasmosis. Science. 231:1299-1302. p~lmiter, R.D., Brinster, R.L., Hammer, R.E., 1982. Dramatic growth of mlce that d~velope from eggs microinjected with methalothionein-growth hormone fuslon genes. Nature 300: 1046- 1048. Paoletti, E. ~.Q;l. 1983. Construction of live vaccines using~ geneticallyengineeredpoxviruses. Proc. Natl. Acad. Sci. 81:193-197. . Prather, R.S., et al. 1987. Nuclear transplantation in the bovine embryo: ~ assesment of donor nuclei and recipient oocyte. Biology of Reproduction. 37: 859-866. Prather, R. S. et al. 1988. Nuclear transplantation in the early porcine embryo. Theriogenology 29:290. Reed, M.L. et al. 1988. Microinjection of liposome-encapsulated DNA into murine and bovine blastocysts. Theriogenology 29: 293. Rexroad, C.E., and V.G. Pursel. 1988. Status of gene transfer in domestic animals. Proceedings, XI International Congress on Animal Reproduction and Artifitial Insemination. June 26-30 1988, Vol. 5: 28-35. Rodriguez, L., Fernandez, S. 1988. Aislamiento del virus herpes bovino tipo 1 asociado a casos de vulvovaginitis, conjuntivitis y rinitis en hatos lecheros de Costa Rica. Ciencias Veterinarias (Costa Rica), 9:105-109. Schudel A.A. Biotechnology in Veterinary Science: perspectives in Latin America and the Caribbean. XI Congreso Latinoamericano de Ciencias Ve~erinarias. 14-20 de ~gosto, 19~8. . ~ . Seldel, G.E. 1988. Sexlng malmlallan sperm and embryos. Proceedlngs, XI International Congress on Animal ReprOdu~tion and Artificial Insemination. June 26-30 1988, Vol. 5: 136-144. Sherman, D.M., Acres, S.D., Sadowski, P.L. 1983. Protection of calves \-) against fatal enteric colibacillosis by orally administered Escherichia coli K-99-specific monoclonal antibody. Infection and Immunity 42:653-658. Sherman, D.M., Markham, R.J.F. 1986.. Current and future applications of monoclonal antibodies against bacteria. 3: 295- 340. Simons J.P. ~Ql. 1987. Alteration of the quality of milk by expression of sheep B-lactoglobulin in transgenic mice. Nature. 328: 530-532. Smith, C. 1988. Applications of Embryo Transfer in Animal Breeding. Theriogenology. 29: 203-212. -' - Sommer, R.G. 1986. New directions: emphasizing biotechnology. Science232: part II: 5 . . Taylor, K.A., Crosby, B., McGavin, M., Frosberg, C.W., Thomas,D.Y., Characteristics of the endogluconase encoded by a cel g~ne from Bacteroides succinogenes expressed in E. coli. Applied and envlromental microbiology. 53:41-46. Veijalainen P. ~~ 1986. Latex agglutination test ~or detecting feline panleukopenia virus, canine parvovirus, and parvovlruses of fur animals. J. Clin. Microbiol. 23: 556-559. ~~~~~~: ~. (2t~8~~2 .BioteChnOlogy and Animal Health. Ontario Veterinary ~ .
Compartir