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ODONTOLOG~R SRNMRRQUINR ISSN: 1560-911 1 Anti bacterianos naturales orales: Estudios en la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos Hilda Moromi,' Elba Martinez C a d i l l ~ , ~ Donald Ramos Per fe~to .~ Mg. Profesor Pr incipal del Dpto. d e Ciencias Básicas. Jefe del Laboratorio de Microbiologia. 3ocentes del Dpto d e Ciencias Básicas. Laboratorio de Microbiología. Antibacterial oral natives: Studies i n the Faculty of Odontolgy of the National Correpondencia: Major University of San Marcos Hilda Moromi Nakata La Verbena 377. La Molina Resumen Teléfono: 996175270 La caries dental es una enfermedad que afecta al 95 % de la población humana. Uno de hmnbiOQhotmail.cOm los medios para enfrentarla en los tiempos modernos, es el uso de las sustancia naturales, especialmente aquellas que contienes polifenoles, sea: 1) como simple infusión, 2) luego de un tiempo de hervido, y 3) como extracto luego de un proceso químico; que además tienen las ventajas como: fácil acceso y manejo, bajo costo y sobre todo pocos efectos colaterales indeseables. En la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, se han efectuado vanos estudios, tanto in vitro, como in vivo los cuales fueron analizados con el objetivo de proveer un panorama sobre los antibacterianos naturales orales estudiados y continuar los estudios para su posible aplicación preventivas tendientes contribuir a la solución del problema: caries dental. A partir del análisis de los resultados de los estudios se puede citar las siguientes conclusiones: 1) En estudios in vitro, hay evidencias del efecto antibacteriano de los principios naturales (Extracto de P a 1 a b r a s c 1 a v e : C a r i e S d e n t a 1, Propóleo, En~tl~rosyluni novogranatense, Mintl~ostachys mollis, Camellia sinensis y Croton antibacterianos naturales orales, estudios lnchleri ) para la flora bucal. Asi mismo, no se observó efecto antibacteriano con: Aloe vera i n oi tro e iti v i vo , propóleo peruano, y Uiicnrin ton~entosn. 2) En estudio in vitro, Cnnlellia sinensis 11a denlostrndo capncidad de evitnr Erythroxylum novogrnnntense, Caiizellin la formación de plnca bacteriann y 3) En estudio in vivo, Cnnlellin sinensis en colutorio mostró sinensis, M e n thostncliys niollis, Croton efecto antibactenano oral hasta 30 minutos después del enjuague bucal. lnckleri. Abstract Dental caries is a disease that affects 95 % of the human population. One of the mechanisms to prevent it in modern times, is the use of natural substances, specially those thatconbin polyphenols: 1) like a simple infusion, 2) after a boiled time, and 3) like an extract after a chemical process. They also have advantages such as easy access and management, low cost and, most of all, few undesirable side effects. In the Faculiy of Odontolegy of the National Major University of San Marcos, several studies have been carried out in vitro and in vivo. They were analyzed to search for evidence in order to show actual tendencies to possible application for a final solution: dental caries. Final conclusions are: 1) In vitro studies, there are evidences of the anti-bacteria1 effect of the natural principles (Propóleo, novogranatense Erythroxylum, Minthostachys mollis, Camellia sinensis and Croton Key words: Dentalcaries, antibacterialoral lachleri extracts) for the oral flora. Also, anti-bacteria1 effect was not observed with: Aloe natural,invitrostudiesandinlive, propoleo vera and Uncaria tornientosa. 2) In vitro studies, Camellia sinensis has demonstrated capacity peruvian, Ery throsylum novogrnnn tense, to avoid bacteria1 plaque formation. 3) In vivo study, Caniellin sinensis in colutorio showed Canzellin sinensis, Men tliostachys mollis, oral anti-bacteria1 effect up to 30 minutes after mouthwash. Croton lnclileri. Introducción los microorganismos relacionados con la placa dental, así como del proceso En la cavidad oral habitan mas d e 500 carioso, es de vital importancia para especies d e bacterias, e n niveles d e 108 control de la enfermedad, y uno de - lo9 bacteria por m1 d e saliva o mg d e los mecanismos es el uso de antimi- placa dental? crobianos.4, La caries dental e s a ú n el gran proble- m a e n la salud bucal e n todas la lati- tudes mundo. E n el Perú el Ministerio d e salud, notifica una prevalencia d e 95 % caries dental.2 El biofilm d e la placa dental está íntimamente ligado a tal patología, siendo el Streptococcus mutnns, el microorganismo más impor- tante seguido por el Lac toba~i~us y el , Actinornyce~?,~ Deahf que el control de La medicina natural, a partir d e las plantas y sus propiedades antimi- crobianas, últimamente ha recibido mucha atenci6n d e los científicos, com- probando una series d e propiedades d e compuestos como los polifenoles, q u e van confirmando que permiten combatir a los agentes patógenos como el S tclpliylococcirs niireils resistentes,"' y adicionalmmte a otras bacterias b u c a les como S. riiu y Porplzyro~iio~iins gingivnlis, referido por O k a m ~ t o ; ~ ~ así como la actividad enzimática protei- nica importante que afecta los tejidos periodontales." Las ventajas son diversas: fácil acceso y manejo, bajo costo y sobre todo po- cos efectos colaterales indeseables. Entre los fito principios que ofrece ma- yores ventajas, es el té, especialmente el verde y el blanco, por la presencia d e taninos que inhibe la síntesis del dextran,I2 el fluor que inhibe al acción enzimática, así como los flavonoides q u e inhibe la adherencia, la inhibición Hilda Moromi N a k f a de la producción de acido Iáctico13 por los extractos, entre otros, confieren efecto inhibitorio en el desarrollo del S. ninfnns, y también sobre los hongos, conocimientos que han propiciado la adición de los extractos en algunas pastas dentales," a tal punto que la Sociedad Americana de Microbio- logía, en su encuentro del 2004 con los investigadores de la Universidad de Pace de Nueva York, concluyen que los extractos de té verde matan las bacterias y que por tal caracterís- tica ya puede se incluido dentro de las alternativas para la higiene oral. Sin embargo están también las otras sustancias naturales, que se refieren y destacan más adelante. El objetivo de la publicación es pro- veer un panorama cuantitativo y cualitativo de Ia ciencia y la tecnología sobre los antibacterianos naturales orales; y brindar elementos para el análisis de las tendencias en este campo. En tal sentido, comprende un relevamiento de los hallazgos de conocimientos básicos que sobre e1 tenia se han conseguido en la Facultad de OdontotoIogía de Ia Universidad na- cional Mayor de Saii Marccts, y ofrecer informacio~ies referentes para la eje- cución de i~vesiigaciones preventivas tendientes $1 la solucióri del problema: caries dcrital. Método Se realizó la investigación bibliográfica a partir de Tesis cie Grado y Artículos publicados en la Revista Ouontología sanriiarqilina, desde los cuales, los conociiiiientr~s fueron analizados y sinteiizados en función a los objetivos planteados para ésta revisión. Las evidencias analizadas compren- den 13s estudios in uitro e irr vivo, de los principios naturales, en tanto antibac- terianos orales, en las modalidades de uso: conio e'fecto dc la dilución de los extractos, y como efecto de Id infusión inmediata. 1. Estudios irz vitro: El análisis del referente: tamaño del dijmetro del halo dc inhibición (Fig 1) de los estudios in vitro, muestran que los halos de las sustancia natu- rales frisan entre los 10 - 20 nun, (y en $1 caso de Croforr lncirleri llega a 30 nlm); comparados con el 15 mm de la Clorliexidina y el 33 - 68 nim dr la Amoxicilina; demostrándose la evidente efectividad antibacteriana de las sustancias naturales. Otra notoria evidencia es la acción de extractos de propóleo, se encontró de Muña: efectiva bajo laforma de unefecto antibacteriano inversamente extracto, pero inefectiva en la foma de proporcional a la concentración de la infusión al 10 %. dilución Ce aprecia a la dilución 0,8 % como las efectiva, asi como sus halos a. Estudio con extracto de propóleo mavores respecto a los de la Clorhexi- Usando cepas patrones en cultivos nd di&, y en 41 % mayor al referente hoc, adicionadas con tres diluciones testigo (Cuadrol). Cuadro 1. Diámetros de los halos de inhibición en mm in vitro del efecto antibacteriano del extracto etanólico del Propóleo peruanoIs Dilución porcentual del Extracto Propoleo Clorhexidina Testigo Bacteria 0'8 20 30 Prom % Prom % Prom % Prom % Prom % S. mutans 13,56 141,l 12,OO 124,9 12,33 128,3 11,72 121,O 9,61 100 L. casei 11,25 126,4 10,10 113.5 11.20 1253 10.26 115.3 8.90 100 b. Estudio con el extracto alcohólico de Erythroxylum novogranatense (Coca) Cuadro 2. Diámetros de los halos de inhibición en mm in vitro por efecto del extracto aicoholico de Ert;tlzroxylri~~i noaogrnnnfense sobre la flora bacteriana saliva1 mixtai6 Concentració~i Proiiiedio* D.S Mínimo Máximo 250 ~ i g 10,96' 1,20 9,25 12,75 500 Pg 12,2!Ib 0'99 10,50 13,75 1000 ~ i g i3,46 0,87 11,75 14,75 1500 pg 14,71",87 13,OO 16,50 *Hay diferencia estadlst;ca, cuando ias letrillas soti diferentes c, Esttrdio de8 extracto de hfirrf~zc?stacF1tfs ~nollis (Muña) Cuadro 3. Diámetros de los halos de inhibición en inni in zlitro por efecto del extracto de h~infl~ostnclzys rrtollis sobre la flora bacteriana17 Bacteria Min t/~ostcich!ls rrrollis Amoxicilina d Estudio de la infusión de Ctllrellin sitmuis (TG verde) y híenthtwtt~cfrys rnollis Cuadro 4. Diámetros de los halos de inhibicióii en mm in vitro por efecto de la infusión de Cizirrellin sir~~:r:sis y i2.letit:rostncliys rt~ollis sobre la flora bacteriana saliva1 mixtalb Cntrzdlin sinensis + Meritliost~iclii~s ?r~ollis ., Clorhexidina 14,85 2,V 10,OO 20,OO Testigo (agua) 0,OO 0,OU 0,OO 00,OO - 26 Odontol. Sanmaíquitia 2009,12(l): 25-28 Aiiiibncteriniios rinturnles ornles: Estirdios eri In Fnnrltnd de Odoritologín dr ln Uiiiarrsidnd Nnciorinl Mnyor de Snii Mnrcos e. Analisis comparativo de los estudios in v i t r o Cuadro 5. Diámetros de los halos de inhibición en mm i n z~itro del efecto antibacteriano oral de sustancias naturales Extracto IJropóleo" Cocale Muña17 (1500 Té + Té18 Té Muña S. m** L.c** pg) S.m** L.sp** F.n** A.a** A.sp** 13,52 14,71 14,71 16,50 14,38 20,13 14,42 11,OO 10,43 15,27 0,OO 12,70 *Flora bacteria saliva1 mixta **S.iii = Sti~eptococci~s iiiritni~s. L.c = Lnctohncillils cnsei. L.sp = Lnctobncrllus sp. F.n = F. iiil- clentitnr. A.n = Actiiiobncill~ts nct~noilrecetencoiliitnns. A. sp = Actirioniyces sp. f. Fito sustancias en pasta dental experimental Cuadro 6. Diámetros de los halos de inhibición en mm i n uitro del efecto antibacteriano oral de fito sustancias naturalesz0 Sab + Sab + Cab + Uña + Uña + Bacteria Sab" Uña" SGc Uña CG SG sG Actirzorrlyces sp O0 O0 16 O0 13 12 8 Lnctobncillils sp O0 15 30 O0 28 25 28 Strezitococc~~s snlivnri~ls 00 00 10 00 8 8 O0 Eikerielln sp O0 O0 32 O0 30 30 32 "Sábila = Aloe vern. "Uña de gato = Uiicaria toriieritosn. Sangre de Grado = Crofori lacllleri. g. Infusión de C a ~ n e l l i a s i n e n s i s (té se consideran como inhibidores de la verde) en la formación de la Placa adherencia bacteriana del S. irrntnns, y bacteriana por S t r e p t o c o c c u s tnu- el extracto puede inhibir la actividad taizs de los microorganismos cariogénicos por la reducción de la producción de Cultivos de S. rilirtnrzs sin adición de Té á ~ i d o s . ~ - ~ verde mostraron formación de Placa bacteriana adherida fuertemente en el 2. Estudios i n v i v o : alambre; en tanto que los cultivos con Estudio con la Carnellia s inens is (Té adición de infusión de té verde mos- traron muy poca formación de Placa, verde) < A y los residuos formados tenían muy En el Cuadro 7, el colutorio de la in- poca adherencia, con desprendimiento fusión empleado ha mostrado efecti- rápido, Fig 2. vidad en la reducción del recuento de - las bacterias orales, tanto al registro El hallazgos es una evidencia más, de inmediato a su empleo (22,9 %) como las propiedades del té verde, como también al registro luego de los 30 antitumoral, antimicrobiano, antimi- minutos de utilización (41,l %). ~ ó t i c o . ~ Donde los polifenoles del té, Cuadro 7. Recuento total de bacterias en Agar Tripticasa Soya colectadas en saliva luego de la infusión del Té verdez2 efectos mostrados tanto i n vitro, como i n vivo. Por ejemplo la evidencia más notoria es el efecto del extracto de la Muña y no así de la infusión. Es tam- bién saltante el efecto de la infusión del Té verde bajo la modalidad de un sólo enjuagatorio," y en el deterioro en la formación de la Placa ba~te r iana .~~ Estos hallazgos sugieren la necesidad de estudios complementarios, entre los que se incluya, por ejemplo: la frecuencia de enjuagues, otras concen- traciones de la infusión, etc. Unidades formadoras de colonias / mL Parametro Inmediatamente 30 minutos después Antes Después n % N % Promedio 16 648 062,5 12 831 250,O 77,l 9 743 750,O 58,9 D.§ 7 332 722.0 7 410 658.3 7 493 762.5 Discusión cobrando cada vez una mayor aten- ción, especialmente en lo referente a la Los efectos antimicrobianos para el acción de los polifenoles (catequinas). control de microorganismos orales En este marco los hallazgos citados, mediante sustancias naturales, se permiten afianzar los conocimientos estudia desde décadas anterioresz3 sobre la materia, evidenciadas por los Fig. 1. Halo de inhibición de desarrollo bactenano.' Independientemente de la necesidad de mayores estudios, se puede arribar a señalar la aplicación práctica en el uso cotidiano de enjugue bucal con infusión del Té verde,puesto que ahora hay evidencias de otras bon- dades terapeúticas del Té. Existen diversos mecanismos por los cuales el té verde produce acción sobre las bacterias, entre ellas, la inhibición de la producción de ácidos y de la enzima glucosiltransferasa.24 La mayoría de los polifenoles en el té verde son flavonoides, comúnmente conocidos como catequinas. Las prin- cipales catequinas son: (-)-epicatecl-iin, (-)-epicatechin-3-gallate, (-)-epiga- Ilocatechin, y (-)-epigallocatechin-3- gallate.25 Conclusiones 1. En estudios in vitro, hay evidencias del efecto antibacteriano de los principios naturales (Extracto d e Propóleo , E r y t l i r o s y l r ~ r i r r~ouogrni~nterzse, Miiitliostncliys rirollis, Cniilellia sirierlsis y Crotoii lnclileri) para la flora bucal. Asi mismo, no se observó efecto antibacteriano con: Aloe r>ern y Uiicnrin torrreritosn. 2. En estudio in vitro, Cnrirellin sinensis ha demostrado capacidad de evitar la formación de placa bacteriana. 3. En estudio ii-i vivo, Cnirlel l in siiierisis en colutorio mostró efecto Odontol. Sanmarquina 2009; 12(1): 25-28 27 Hildn Moronti Nnkntn antibacteriano oral hasta 30 minutos después del enjuague bucal. Referencias bibliográficas 1. Rosan B, Lamont RJ. Dental plaque formation. Microbes Infect. 2000;2:1599- 1607. 2. Ministerio de Salud del Perú: "Plan de Salud Bucal 2005" http://www.minsa. 4. N e g r o n i M. M i c r o b i o l o g í a estomatológica. Argentina: Edit. Panamericana. 1999223-225. 5. N e g r o n i M. M i c r o b i o l o g í a estomatológica. Argentina: Edit. Panamericana. 1999237 6. Newson SWB. MRSA: Past, present, future. Journal of Roya1 Society of Medicine London. 2004;97:509. 7. Dryden MS, Dailly S, Crouch M. 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