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Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA UNAN-LEÓN ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS Y VETERINARIAS CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Tesis para optar al título de Médico Veterinario Tema: Evaluación de la Abundancia e Intensidad de la Carga parasitaria gastrointestinal en iguanas verdes (Iguana iguana) en zoocriaderos del municipio de Télica y León, marzo 2022. Autores: Br. Fernando Alberto García Rodríguez. Br. Elder William Gómez Diaz. Br. Kevin Josdany Suarez Talavera. Tutor: PhD Luz Adilia Luna Olivares. León, agosto de 2022 “A LA LIBERTAD POR LA UNIVERSIDAD” Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León DEDICATORIA Dedicamos nuestro trabajo investigativo a Dios en primer lugar, por darnos fuerza, salud y sabiduría para culminar con éxito nuestra carrera. A nuestros padres por ser un apoyo incondicional desde el inicio de nuestra carrera hasta culminar. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León Agradecimientos Agradecemos a Dios por acompañarnos y guiarnos a lo largo de nuestra vida, y permitirnos haber concluido con paciencia, responsabilidad y dedicación. Gracias a nuestros padres, por brindarnos apoyo y confianza para cumplir nuestras expectativas, por los consejos, valores y principios que nos han inculcado. Agradecemos a nuestros docentes de la Escuela de Ciencias Agrarias y Veterinarias, por habernos compartido sus conocimientos a lo largo de la preparación de nuestra profesión, por el esmero en infundir con paciencia y dedicación lo necesario para nuestra formación como profesionales. Además, se le agradece a todas las personas e instituciones involucradas en el proceso de elaboración de esta monografía, a MARENA por habernos brindado información y por estar dispuestos a colaborar; a los dueños de los zoocriaderos por compartirnos información y apoyarnos durante el proceso de recolección de muestras. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León Resumen El presente estudio tuvo como objetivo, evaluar la abundancia y la intensidad de la carga parasitaria gastrointestinal en iguanas verde (Iguana iguana) en zoocriaderos del municipio de Télica y León. Se evaluaron 136 muestras fecales de reptiles de tres zoocriaderos del departamento de León; dos zoocriaderos ubicados en la comarca pueblo redondo: zoocriadero “San Luis” y zoocriadero “San Nicolás”; y el zoocriadero de la cooperativa Eco albergue “El pilar” en la comarca “Lechecuagos” en las faldas de los volcanes “Las Pilas” y “Cerro negro” del municipio de León. La captura de iguanas para la toma de muestras fecales se realizó con lazadas de cuerdas, utilizando la técnica apropiada para la especie. Las muestras fueron recolectadas y rotuladas con código único de cada animal para su posterior análisis coprológico mediante frotis directo (técnica cualitativa) y conteo de huevos en cámara MacMaster (técnica cuantitativa) permitiendo conocer el género de los parásitos encontrados y la carga parasitara de cada espécimen. Se identificó un total de tres géneros parasitarios Strongyloide spp, Trichostrongylus spp y Ascaris spp, en un total de 106 muestras (77.94%) positivas. Del total de casos positivos el 41.18% (56) pertenecen al zoocriadero “San Luis”; 27.21% (37) al zoocriadero “San Nicolás” y 9.56% al zoocriadero del eco albergue “El pilar”. Se presentó una abundancia promedio de 560 huevos de parásitos por gramo de heces en un hospedador, Strongyloides spp fue el género con mayor abundancia (340) hpgh respectivamente y Ascaris spp con menor abundancia (15). una intensidad promedio de 719 huevos parasitarios por individuo positivo, mostrando mayor intensidad la infestación parasitaria por Strongyloide spp (437 hpgh) frente a los demás géneros parasitarios encontrados, del mismo modo fue el género mayor encontrado, con mayor intensidad y abundancia en los tres zoocriaderos estudiados. Las hembras presentaron la mayor abundancia e intensidad comparada con los machos. Así mismo, al comparar adultos y jóvenes, se determinó que las iguanas adultas estaban más infestadas (639/836) frente a las iguanas juveniles (430/534). Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León Índice 1. Introducción......................................................................................................................................1 2. Objetivos............................................................................................................................................2 Objetivo general...................................................................................................................................2 Objetivos específicos .........................................................................................................................2 3. Marco teórico ....................................................................................................................................3 3.1. Clasificación taxonómica de Iguana ...................................................................................3 3.2. Características de la iguana verde ......................................................................................3 3.3. Distribución ...............................................................................................................................4 3.4. Hábitat ........................................................................................................................................5 3.5. Reproducción ...........................................................................................................................6 3.6. Alimentación .............................................................................................................................7 3.7. Problemática de la población de iguanas verdes ............................................................7 3.8. Generalidades de los zoocriaderos.....................................................................................9 3.9. Constitución de un zoocriadero...........................................................................................9 3.10. Materiales de construcción ...............................................................................................9 3.11. Necesidad de un zoocriadero. ........................................................................................10 3.12. Reproducción en cautiverio ............................................................................................10 3.12.1. Manejo de la hembra .................................................................................................10 3.12.2. Desove ..........................................................................................................................10 3.12.3. Manejo de las crías ....................................................................................................11 3.12.4. Alimentación en cautiverio ......................................................................................12 3.13. Implicación económica de los zoocriaderos ..............................................................12 3.14. Parasitología en iguanas .................................................................................................13 3.14.1. Parásitos internos. ....................................................................................................14 3.14.1.1. Nematelmintos........................................................................................................14 3.14.1.2. Clase nematoda ......................................................................................................143.14.1.3. Oxyuroidae ..............................................................................................................15 3.14.1.4. Ascaridoidea ...........................................................................................................16 3.14.1.4.1. Clasificación Taxonómica .............................................................................16 3.14.1.4.2. Generalidades ..................................................................................................16 3.14.1.4.3. Ciclo biológico. ................................................................................................17 3.14.1.5. Strongyloides ..........................................................................................................17 Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 3.14.1.5.1. Clasificación Taxonómica .............................................................................17 3.14.1.5.2. Generalidades ..................................................................................................18 3.14.1.5.3. Ciclo Biológico ................................................................................................18 3.14.1.6. Trichostrongyloide ................................................................................................18 3.14.1.6.1. Clasificación Taxonómica .............................................................................18 3.14.1.6.2. Generalidades ..................................................................................................19 3.14.1.6.3. Ciclo biológico .................................................................................................19 4. Diseño metodológico ...................................................................................................................20 4.1. Tipo de estudio: .....................................................................................................................20 4.2. Área de estudio: .....................................................................................................................20 4.3. Población de estudio ............................................................................................................21 4.4. Tipo de muestreo ...................................................................................................................21 4.5. Tamaño de la muestra ..........................................................................................................21 4.6. Instrumentos de recolección de los datos ......................................................................22 4.7. Procedimiento de recolección de las muestras .............................................................23 4.8. Procedimiento de análisis de las muestras recolectada .............................................24 4.8.1. Técnica McMaster ..........................................................................................................24 4.8.2. Frotis directo...................................................................................................................26 4.9. Análisis de las Variables ......................................................................................................26 5. Resultados y Discusión ...............................................................................................................28 6. Conclusión ......................................................................................................................................35 7. Recomendaciones .........................................................................................................................36 8. Referencias bibliográficas...........................................................................................................37 9. Anexos .............................................................................................................................................42 Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 1 1. Introducción La población de iguanas verdes en nuestro país ha disminuido considerablemente en los últimos años, debido a la caza indiscriminada para el consumo de carne y huevo demandado por la calidad, sabor de la carne y como fuente de proteínas en la dieta del hombre; más en las familias rurales y de escasos recursos económicos, Esquivel (1999), incluso para elaborar productos artesanales; Garza, & Quirarte. (2019). Con el objetivo de preservar la especie y evitar la disminución drástica se han creado centros de producción y reproducción conocidos como zoocriaderos donde se busca la crianza bajo las máximas condiciones sanitarias y baja predisposición a enfermedades parasitarias. Los zoocriaderos en el país comienzan a ganar popularidad a causa de la disminución en la distribución natural debido a la fragmentación y alteración del hábitat, por la destrucción de la selva tropical y la transformación de la superficie para la cría extensiva de animales domésticos, la agricultura, los asentamientos humanos, la cacería excesiva y el comercio ilegal. Esto conlleva a la probabilidad de tener altas cargas de infestaciones parasitológicas gastrointestinales, debido a condiciones higiénicas-sanitarias poco adecuadas y considerando el estrés como factor adicional favoreciendo la colonización cooparasitaria (Oros 2008). Considerando que se ha venido trabajando en este rubro desde hace varios años atrás con diversas instituciones gubernamentales y proyectos sociales en diversos departamentos de Nicaragua, no se cuenta con un estudio que nos demuestre la carga parasitaria, además los estudios investigativos enfocados en esta rama de la producción en nuestro país son mínimos. El trabajo investigativo pretende identificar y cuantificar los diferentes géneros parasitarios que afectan dicha especie. Debido a la escasa información de las parasitosis en iguanas, los resultados encontrados aportaran conocimiento sobre la situación de problemas parasíticos que enfrentan los zoocriaderos en nuestro país y así contribuir a ampliar información útil, junto con otros estudios similares. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 2 2. Objetivos Objetivo general ➢ Evaluar presencia, abundancia e intensidad parasitaria gastrointestinal en iguanas verdes de zoocriaderos de los municipios de Télica y León. Objetivos específicos ➢ Identificar parásitos gastrointestinales de iguanas verdes mediante técnicas parasitológicas cualitativas y cuantitativas. ➢ Determinar la carga parasitaria encontrada en diversos zoocriaderos. ➢ Valorar abundancia e intensidad parasitaria encontrada según edad y sexo de las iguanas verdes. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 3 3. Marco teórico 3.1. Clasificación taxonómica de Iguana El manual del MARENA, al igual que Millefanti, M. (2016). Definen la Clasificación taxonómica de la iguana verde de la siguiente manera: Descripción Denominación Reyno Animalia Phylum Cordados Subphylum Vertebrados Clase Reptilia Orden Squamata Familia Iguanidae Género Iguana Especie Iguana A esta especie se le conoce con diversos nombres, la revista mexicana ENCICLOVIDA recoge al menos 3 nombres comunes como: gallina de palo, iguana común, iguana verde. Del mismo modo González, A. (2003); menciona que se le conoce como gallina de palo o gallina de árbol “por su sabor parecido que tiene con la carne de gallina común”. 3.2. Características de la iguana verde “Es un reptil de cuerpo robusto, con cuatro patas y cinco dedos en cada una de ellas, los cuales terminan en unas garras afiladas, posee una cola larga desprovista de anillos, tiene una cresta de púas blandas a lo largo del lomo, desde la nuca hasta la cola, a menudo alcanza unalongitud de 1.80 y 2 metros desde el hocico hasta la punta de la cola” Dunn, (1944) mencionado por MARENA. González, A. (2003) plantea que “en su estado adulto, puede llegar a pesar de 2 a 12 kilos (4 a 24 libras)”. El peso promedio de las crías al nacer es de 7.5 gramos y las hembras pesan entre 1.6 y 2.6 kg (Esquivel, F.1999). En la línea dorsal del cráneo tienen un ojo pineal que sirve como Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 4 contador de energía solar. Sus garras son afiladas y los ojos son relativamente grandes con pupilas de forma elípticas (Vanegas, F. 2008). Gonzales (2003) menciona que el color de su cuerpo va desde un verde brillante (cuando jóvenes) a un pardo grisáceo (cuando adultos), con rayas negras transversales marginadas en ocasiones de color amarillo o verde turquesa en el cuerpo, el color varía según su humor, temperatura, salud o condición social. Por la mañana tiene tonalidades más oscuras y al medio día adquiere tonalidades claras a pálidas para reflejar el calor (Vanegas, F. 2008) Las características esenciales de todos los reptiles es que son ectotermos, en otras palabras, los reptiles dependen del calor medioambiental y se comportan para mantenerse en una Temperatura Corporal Preferida (TCP). La cual varía con la especie, la edad, época del año, y el día, es la temperatura con la que el metabolismo del animal es óptimo (Varela, N. 2002). La iguana verde es un animal de sangre fría es decir que no puede autorregular su temperatura corporal, sino que esta varía según las condiciones externas. Para calentarse necesita el sol; para enfriarse, un lugar con sombra y agua (Pérez, G. J. 1994) El macho se distingue de la hembra porque tiene una cresta más grande y protuberante, la cabeza es corta y no tan alargada. La papada suele ser más grande. Los poros femorales, protuberancias que van por abajo de sus piernas, son más marcados que en la hembra, además tienen dos bultos en la zona de la cloaca que son los hemipenes, por su parte las hembras tienen la cara más alargada, su cresta es pequeña, su papada no es tan grande y los poros femorales no son tan notorios y protuberantes, Apolinario, C. (2011). González, A. (2003) menciona que la iguana utiliza el sentido del tacto y el gusto, para identificar a sus congéneres, para establecer el sitio donde pondrá sus huevos, para ubicar su área de descanso y hasta para escoger su alimento. Su sensor del tacto y el gusto se ubica en la lengua. 3.3. Distribución Las iguanas están distribuidas principalmente en América (desde el suroeste del Canadá hasta la tierra del fuego) pero también en las islas Fiji y Madagascar (Khoker y Butter 2001). La iguana verde vive en áreas tropicales y subtropicales del continente Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 5 americano, desde México hasta el Brasil y norte de Argentina. En Nicaragua se encuentra en ambas vertientes hasta los 800 m.s.n.m (Esquivel 1999); por su parte Etheridge, 1982 mencionado por Vindell, K (2008) menciona que “los registros de altitud incluyen 800 msnm en Michoacán, México, 500 msnm en Surinam y 100 msnm en Colombia”. En nuestro país esta especie “vive en la zona seca de Nicaragua; es decir por Rivas, Carazo, Granada, Managua, León, Chinandega, Madriz, Estelí y la parte oeste de Jinotega, Matagalpa y Boaco” (Otero, C., 2014) 3.4. Hábitat Las iguanas viven en zonas de vegetación espesa como manglares, selvas, pastizales, riveras de ríos, donde la temperatura media anual es de 27-28°C. Buscan climas templados donde no llueva todo el año; el promedio de temperatura al cual se adaptan es de 32°C, aunque pueden vivir a temperaturas de 23 °C; Gonzales et. Al., (2003) mencionado por García J (2018). El hábitat de la iguana verde está restringido a sectores de baja altitudes que no sobrepasan los 1,000 msnm, debido a que las áreas más altas no ofrecen una temperatura lo suficientemente alta como para que los animales realicen sus funciones vitales de subsistencia (MARENA). Viven principalmente en las copas de los árboles, y en todos aquellos lugares que permiten a la iguana asolearse y refugiarse, preferiblemente en los bordes de los bosques y cerca de los ríos (Vanegas, F. 2008). Aunque también pueden vivir en peñascales, pero siempre cercanos al agua. Las iguanas jóvenes prefieren situarse en una altura baja-media del bosque donde el calor no es tan sofocante y la humedad es más elevada. Por el contrario, las iguanas adultas suelen ocupar las copas altas de los árboles donde el Sol da con más intensidad y donde la humedad es menor (Apolinario, C. 2011). Prácticamente la iguana verde es una especie arborícola diurna, es decir, vive en la copa de los árboles y su actividad es fundamentalmente de día. Fuera de la época de reproducción pasa inmóvil la mayor parte de su periodo de actividad diaria, descansando sobre las ramas de los árboles; kholer (1999) mencionado por García, J. (2018) Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 6 Apolinar, C (2011) considera que las iguanas son animales bastante solitarios y sólo viven en comunidad mientras dura el periodo de celo y reproducción, durante el cual se juntan en grupos de unos 5 a 8 miembros, formados por un macho dominante, varias hembras, y ejemplares jovencitos 3.5. Reproducción La época reproductiva está relacionada, con la época de verano y de invierno. A fines de octubre comienza el período reproductivo, iniciándose con el cortejo y cambio de coloración en los machos, de verde a naranja, especialmente las extremidades y la papera. Un macho puede atraer hasta 4 hembras o más. En los meses de febrero y marzo inicia la puesta de huevos en sitios arenosos, barrancos y/o playas iniciando de esta forma el proceso de incubación el cual puede durar 75 días. En mayo nacen o eclosionan las primeras iguanas (Vanegas, F. 2008). De acuerdo con García, J. (2018) plantea que “la reproducción es influenciada en primer lugar por factores externos como el periodo de lluvias y sequía, por tanto, el celo y apareamiento coinciden con el periodo de sequía, caracterizado por fuertes vientos en la mayoría de las zonas de su distribución”. El periodo de celo se da en iguanas que han alcanzado la madurez sexual repitiéndose año tras año siempre por las mismas fechas, de octubre a marzo. Durando desde semanas hasta meses, con una fertilización interna. Una hembra adulta puede llegar a poner de 25 a 35 huevos en promedio. Dependiendo de la edad las iguanas pueden poner de 12 a 90 huevos (González, A. 2003). Una característica en el periodo de apareamiento es que “los machos también tienden a cambiar a un color anaranjado en época de apareamiento” (Apolinario, C 2011). Para el apareamiento el macho utiliza uno de los dos hemipenes, siendo capaz de fecundar dos hembras seguidas. “Durante la época de reproducción los machos son territoriales, lo que origina frecuentes peleas cuando algún macho trata de invadir el territorio de otro, se causan serias heridas, en algunas veces hasta la muerte” (Esquivel, F. 1999). Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 7 3.6. Alimentación Son generalmente herbívoras se alimentan de hojas, flores y frutos (flor de avispa, banano, papaya, quelite, marango, jocote, campanita, hojas de frijoles, entre otros) aunque ocasionalmente se alimentan de pequeños invertebrados (insectos) (Vanegas, F 2008). Si la dieta herbívora está bien formulada, las iguanas en crecimiento deben ser suplementadas a diario con carbonato de calcio, con contenido mínimo de fósforo y vitamina D (Aguilar R. 2010). khoker y butter (2001) enfatizan que “la mayoría de las especies de iguanas pequeñas se alimentan de manera carnívora, mientras que las especies grandes de la subfamilia iguanidae ha cambiado a una dieta casi totalmente vegetal”. Las proteínas necesariaspara su crecimiento las obtienen de hojas, frutas y flores. Las iguanas pequeñas dependen de hojas que tienen poca fibra y alto valor nutritivo (Pérez, G. J. 1994), pero también “en algunas ocasiones comen insectos, además de brotes de hojas tiernas y flores”, (Esquivel, F. 1999). Lara, M (2002) menciona que las hojas constituyen el principal alimento a lo largo del año, siendo consumidas principalmente en verano (100%), disminuyendo su consumo en otoño (88.62%), invierno (69.95%) y primavera (39.32%). Además de observar un consumo de flores durante el invierno (30.04%) y la primavera (49.50%) que corresponde a la época seca y a la floración de algunas especies de la zona (Gliricidia sepium, Mangifera indica y Tabebuia rosea), y un porcentaje menor en otoño (11.37%). sosteniéndose que las iguanas son vegetarianas por lo que su dieta está basada en verduras, plantas de casi todo tipo y frutos. 3.7. Problemática de la población de iguanas verdes Durante años su carne y sus huevos han sido una parte fundamental de la dieta alimenticia de las comunidades, desempeñando un papel importante en el desarrollo socio-económico de la población rural. Es así que Esquivel, F. (1999) puntualiza que “la creciente comercialización ilegal de productos de estas especies, sumado a la pérdida de su hábitat, producto de la deforestación y las prácticas agrícolas de alto impacto ambiental en la faja del pacifico de Nicaragua han contribuido a disminuir su población en el país”. Por otro lado, Robleto, S et. Al:, (2017) apunta a que su comercialización ilegal es con fines de usarlos como alimento, artesanías o mascotas. En Nicaragua y Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 8 Costa Rica se utiliza el cuero para elaborar numerosos productos artesanales de indudable calidad como monederos, billeteras, zapatos, bolsos, carteras y fajas que venden en mercados locales. Garza, & Quirarte. (2019). Apolinario, C. (2011). Sostiene que “En Latinoamérica la gente puede pagar más por la carne de iguana que por la de pescado o pollo, y es un aliciente común de las recetas tradicionales. Además, el uso de la piel para la fabricación de artículos de artesanía constituyendo un ingreso adicional para esta gente, aunque su comercialización sea ilegal”. Del mismo modo existe la costumbre de capturar a las iguanas hembras en periodos próximos a su postura para extraer y vender sus huevos; Castellón R (2008) enfatiza que “los animales vivos siguen siendo expuestos para su comercialización en los mercados, tal es el caso de garrobos e iguanas verdes”. Del mismo modo apunta que “El tráfico ilegal de fauna se desarrolla de forma simultánea a la actividad legal, y son los mismos acopiadores registrados por las empresas los que alimentan este mercado” Individuos procedentes del municipio de La Concepción, departamento de Masaya, realizan un comercio de forma espontánea, especialmente en los semáforos de Managua. El sitio de mayor importancia para la compra ilegal de fauna por parte de los comerciantes ilegales es el Mercado Oriental; algunos campesinos viajan directamente de las zonas de extracción a vender de uno a dos especímenes en la parte periférica de los mercados de los departamentos de Chinandega y Granada, Mercado Mayoreo y Mercado Central de Managua y en la terminal de autobuses de León (Castellón, R 2008). En Nicaragua se ha tomado como referencia la categorización establecida por la UICN, CITES y sistema nacional de vedas para enmarcar el estado de conservación de las especies herpetológicas en el país. Es así que la especie Iguana iguana se clasifica como una especie de Preocupación Menor (PM), las especie aquí incluidas son consideradas generalistas, encontrándolas en todos los hábitats y en más de diez localidades del país. Tanto así que están protegidas mediante Veda nacional Parcial (VNP) durante el período del primero de enero al 30 abril. Robleto, S. et. Al:, (2017). Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 9 3.8. Generalidades de los zoocriaderos En la actualidad son necesarias crear estrategias, técnicas que conserven, regulen, minimicen o pongan en riesgo la existencia de algunas especies como venados y garrobos, este último muy consumidos por la población de bajos recursos económicos. Pedret & Quero (1996) mencionado por Monzón A (2015) define como zoocriaderos “al conjunto de áreas e infraestructuras de propiedad pública o privada destinadas al mantenimiento, fomento, y racional aprovechamiento de la fauna silvestre, con fines científicos, comerciales, industriales, de repoblación y turísticos- recreacionales”. 3.9. Constitución de un zoocriadero Es importante indicar que todo zoocriaderos o establecimiento debe cumplir con parámetros regidos por las instituciones gubernamentales. En Nicaragua debe ser fiscalizado por el Ministerio del ambiente y recursos Naturales “MARENA” Refiriendo a la “Norma técnica obligatoria nicaragüense de crianza en cautiverio”. NTON 05 020-02 en su apartado de requerimientos generales. Es de necesidad mínima un sitio para la ubicación, diseño y seguridad de los establecimientos de crianza en cautiverio. Indica una serie de recomendaciones que se deben establecer para declarar un establecimiento acto para la crianza, manejo y reproducción de iguanas verde en cautiverio. Todos los establecimientos destinados a esta actividad deberán estar ubicados, a un kilómetro de distancia mínima del límite de desarrollo urbano las estructuras para el manejo de fauna silvestre en cautiverio, deberá ser diseñada o edificada con materiales de construcción que no exponga la salud y bienestar de los animales en cautiverio. 3.10. Materiales de construcción El reglamento institucional señala que los tipos de material con que deben ser construidas las infraestructuras son los siguientes: ➢ Encierro de bloques, zinc con esqueleto rígido, de tubo de hierro o perlín. ➢ Encierro de zinc y malla ciclón, con esqueleto rígido, tubo de hierro o perlín. ➢ Encierros de sarán, cedazo u otro material similar, con esqueleto rígido, tubo de hierro o plástico. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 10 3.11. Necesidad de un zoocriadero. Todos los establecimiento deberán contar un desnivel en el piso de 3% para facilitar el escurrimiento y drenaje, y así poder mantener un ambiente optimo y prevenir múltiples enfermedades a causas de empozamientos de aguas residuales en los encierros , también el establecimiento general deberá mantener medidas de bioseguridad para evitar la entrada de cualquier patógeno al local el cual se construirán piscinas y pediluvio de desinfección de calzado y llantas de vehículos automotores en las entradas de cada instalación. Otro aspecto muy importante que deben tomar en cuenta en estos lugares son las áreas de cuarentena, enfermería, socialización, reproducción, alojamiento de crías. Esto con el fin de asegurar y preservar la salud y bienestar animal. Para la manutención de los reptiles en cautiverio según Soto (2018) define que el diseño y espacio para que vivan las iguanas deben ser los propicios o asemejarse como seria su hábitat en la naturaleza, para ello se recomienda que las áreas deben ser grandes y expuestas con árboles en donde puedan subir y tomar el sol, así también se le deben de proporcionar objetos donde ellos descansen, posan y le sirvan de refugios hasta para tomar el sol, como objetos que van desde troncos hasta bloques de construcción. 3.12. Reproducción en cautiverio 3.12.1. Manejo de la hembra Cuando las hembras han sido fertilizadas se debe separar del macho y vigilar cuando empiecen a poner se recolectarán los huevos inmediatamente, para evitar que otras hembras los rompan con sus unas al escarbar para poner o que las hormigas lo devoren. (MARENA) 3.12.2. Desove Una vez la iguana desove se recolectaninmediatamente los huevos para ser acomodados en los contenedores de incubación artificial, que pueden ser cubetas de plástico, cajas de unicel, pero tienen que ser acondicionadas (Roblero D, 2005). Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 11 Apolinario, C. (2011) menciona que “la iguana hembra después del apareamiento, hace un agujero de más o menos 20 cm de profundidad, donde deposita hasta 60 huevos del tamaño de una pelota de ping-pong cada uno”. Para que las crías nazcan la temperatura ha de ser de unos 30 °C aproximadamente. Es por eso que Roblero, D. (2005) asegura que durante la recolección asegurar que los huevos no alcancen temperaturas por arriba de los 33 grados, se corre el riesgo de tener una alta mortalidad por lo que siempre se aconseja medir la temperatura del nido”. Así mismo recalca que el ambiente de incubación es de gran importancia, ya que influye en el desarrollo embrionario, en el crecimiento, la edad y eclosión y en la mortalidad embrionaria. Asegurando que las variables más importantes del ambiente de incubación son: la temperatura, humedad e intercambio gaseoso. Esquivel, F. (1999) obtuvo algunos datos recopilados durante su estudio realizado en Nicaragua afirmando que en el país la época de apareamiento de esta especie se da entre la tercera semana de octubre y la tercera semana de diciembre, y la ovoposición empieza entre la segunda semana de enero y la última semana de marzo, y el nacimiento o eclosiones de sus crías se da desde la primera de mayo hasta la segunda semana de junio. Es por eso que la ovoposición e incubación de los huevos, coincide con la estación seca y los nacimientos de las crías se dan con la llegada de la estación lluviosa momento en que existe abúndate alimento. 3.12.3. Manejo de las crías Las "iguanas" recién nacidas deben ser atendidas inmediatamente y con más frecuencia que las adultas. Para que se acostumbren a ver a las personas y pierdan el instinto de huir y de ocultarse; (Gonzales 2003). De acuerdo a Esquivel, F. (1999) las crías recién nacidas deben ser introducidas en un encierro aparte de los adultos, el cual debe estar debidamente acondicionado con bebederos, comederos, refugios y escondites. Después de los 5 días de nacidas estas comienzan a buscar alimentos de hojas tiernas y suaves. El mismo autor describe que las primeras semanas y meses de vida son decisivo para que las crías se adapten al cautiverio. En cinco años de ejecución llego a la conclusión que se alcanza una taza de sobrevivencia del 78% y 88% de las crías entre 0 – 1 año Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 12 de edad. La mortalidad en juveniles se determina teniendo en cuentas muchas causas, la mayoría de las muertes de las crías se dieron al cumplir 6-10 meses por causas no naturales; prensadas en la puerta de acceso, pisoteadas por las personas, quedar prensadas en los bloques y tubos de cemento y en las ramadas cuando buscan escondites por las lluvias siendo así las causas más comunes de muertes en los zoocriaderos. 3.12.4. Alimentación en cautiverio Apolinario C, (2011) menciona que la forma correcta de alimentar a una iguana es hacer diariamente una ensalada con 3 o 4 verduras diferentes bien picadas (dependiendo del tamaño de la iguana es el tamaño del picado) y ofrecérsela en un molde plano para su fácil alimentación. Se pueden añadir vitaminas y calcio extra a la alimentación. Roblero, D. (2015) considera que los comederos más recomendables son las charolas, platos de plástico y deben de lavarse todos los días mientras sean utilizados. Además, se recomienda no proporcionar alimentos en charolas o platos mojados o húmedos, de colocarse en lugares visibles y bajo la sombra para mantener fresco los alimentos, deben de estar bien distribuido o separados entre unos comederos y otros para evitar el amontonamiento. El agua es fundamental, aunque sean mínimas las cantidades que requieren, proporcionando agua limpia, ni caliente ni fría, más bien fresca y debe estar a una temperatura de 27 grados. Pueden utilizase platos de plástico pequeños o cazuelas, la colocación dentro de las jaulas sea de fácil acceso y deben cambiarse todos los días. 3.13. Implicación económica de los zoocriaderos En Nicaragua se destaca el Proyecto de Apoyo al Desarrollo de Zoo granja que surge como una iniciativa de aprovechamiento sustentable de la biodiversidad, apostando a la protección del medio ambiente, la supervivencia de las especies en peligro de extinción y el desarrollo rural, generando alternativas de ingresos viables que contribuyan a la erradicación de la pobreza. Es así que Soto (2018) en trabajo detallado sobre el manejo de la iguana verde (Iguana iguana) en cautiverio enfatiza que “la crianza en cautiverio es una nueva perspectiva a Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 13 desarrollar actividades que permitan el aprovechamiento de los recursos naturales”. También cataloga esta actividad como “ganadería alternativa que vendrá a satisfacer la las necesidades alimenticias de la población y también viene a diversificar el sector pecuario. Concluyendo que el resultado del producto final de esta actividad es la producción de carne para el consumo humano, que en muchos casos es buscada por las proteínas que aporta sus creencias afrodisíacas, medicinales y por su exquisito sabor”. 3.14. Parasitología en iguanas En la naturaleza la mayoría de los reptiles presentan algún parasito, pero normalmente no sufren graves infestaciones, esto se debe que en libertad los animales no están confinado a un espacio reducido por lo que la concentración ambiental de los parásitos es baja, por el contrario en cautiverios las condiciones higiénicas-sanitarias en ocasiones no son adecuadas por ende la concentración parasitaria es mayor, considerando el estrés como factor adicional favoreciendo la colonización parasitaria (Oros 2008). Borchert (1981) designa como parásito aquel organismo que con el fin de alimentarse reproducirse y cumplir su ciclo vital, se aloja en otro ser vivo, animal o vegetal de modo permanente o temporal, produciendo en ciertas reacciones. El coste del hospedador a la hora de mantener a sus parásitos puede ser trivial, o, por el contrario, ser sustancial o incluso ser insostenible (Bowman 2011). Los parásitos de interés tanto en medicina humana como en medicina veterinaria están en un grupo de organismo que pertenecen a cinco clases: trematodos, nematodos, cestodos, artrópodos y protozoos. En función a su relación con los hospedadores caben muy diversas situaciones, según su localización, son ectoparásitos o parásitos externos los situados sobre la piel, pluma etc. Y endoparásitos los situados en el interior del organismo. (Cordero & Rojo 1999). Todos los reptiles de vida silvestre tienen parásitos, Lane y Mader, (1996) mencionado por Aparicio (2009). Apolinario (2011) describe que los parásitos que más se Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 14 encuentran en reptiles son los: Flagelados, Amebas, coccidios, Ciliados, Opalinos, Cestodos adultos, Nematodos adultos (vermes filiformes), Trematodos y Acantocéfalo. 3.14.1. Parásitos internos. 3.14.1.1. Nematelmintos. Los nematelmintos son animales no segmentados, generalmente alargados y vermiformes, cuyo cuerpo está revestido por una cutícula. La mesénquima corporal es muy reducida por lo tanto existe un espacio entre la capa musculocutánea y el intestino. Los órganos genitales tienen una estructura sencilla y carecen de sistema hemático (Borchet 1981). 3.14.1.2. Clase nematoda Son vermes cilíndricos con los dos extremos normalmente algo puntiagudo (soulsby 1982); además menciona que presentan distintos tipos de ciclos vitales dependiendo del grado de adaptación a la vida parasitaria que hayan alcanzado. Tienen simetríabilateral, en forma de gusanos redondos con extremos que se adelgazan, son incoloros, blanquecinos o rosados dependiendo de la alimentación o del órgano que se encuentran (Cordero & Rojo 1999) Dentro de este grupo de parásitos destacan por su frecuencia en saurios los nematodos oxiuridos, que son organismos de ciclo directo y muy comunes en iguánidos. Sus fases larvarias se desarrollan en el intestino anterior y después migran y se establecen en el intestino grueso, principalmente en el colon; (Oros 2008). El mismo autor menciona que otro grupo de nematodos frecuentes son los filáridos que generalmente cursan de manera subclínica pero que en infestaciones graves puede haber necrosis de áreas pequeñas como consecuencia de trombosis parasitarias. En la gran mayoría de investigaciones de parásitos en iguanas destacan por encontrarse una alta carga parasitaria de nematodos, generalmente del género trichostrongylus y del género oxyuris (Martínez, M. 2014; Martínez J s.f). Así también se han descrito nematodos del género Ozolaimus megatyphlon (oxyuris) y Macracis prolixa en Guatemala (Aparicio, A. 2009) y en el salvador (Catillo J s.f), el mismo autor reporta Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 15 haber encontrado parásitos del género Toxocara, parásitos que generalmente se localizan a nivel colónico. Por otro lado, Rodríguez M (2015) reporta haber encontrado parásitos de la clase Nematoda en un 66.67% de reptiles muestreados en un centro de cautiverio en ecuador siendo Strongyloides y necátor spp. Los géneros más representativos. 3.14.1.3. Oxyuroidae Los Oxyuroideos adultos se localizan en el intestino grueso y se caracteriza por la cola puntiaguda de las hembras. Tiene un doble bulbo esofágico y un ciclo biológico directo. Los vermes adultos se localizan en la luz del colon. Después de la fertilización, la hembra grávida migra al ano y depositas sus huevos en montones, que parecen rayas gelatinosas blanco-amarillentas en la piel perineal. El desarrollo es rápido de 4-5 días el huevo contiene L3 infectantes. La infección es por ingestión de huevos y las larvas se liberan en el intestino delgado, van hacia el intestino grueso y migran a las criptas de las mucosas del ciego y del colon, donde se desarrolla hasta L4 en 10 días, luego la L4 emerge y se alimenta de la mucosa antes de madurar al estadio adulto y alimentarse del contenido intestinal. (Urquhart, G.M. et al; 2001). Castillo Martínez J. et.al (s.f) describe en su artículo que la alta concentración de especies de oxiuros (Ozolaimus megatyphlon) encontradas sugiere, que, en condiciones de cautiverio, las iguanas entran en contacto directo con sus heces, favoreciendo la ingestión de fases infectivas de estos parásitos. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 16 3.14.1.4. Ascaridoidea 3.14.1.4.1. Clasificación Taxonómica Descripción Denominación Reyno Animalia Phylum Nematoda Clase Nematoda Subclase Secernentea Orden Ascaridida Familia Ascaridae Género Ascaris Especie Ascaris spp 3.14.1.4.2. Generalidades Los ascáridos están entre los nematodos más grandes y se encuentran en su mayoría en animales domésticos, siendo de importancias veterinaria tanto en los estadios larvario como adultos. Generalmente son de color gris-rojizo o amarillento, relativamente grande y cilíndrico con grosor similar a un lapicero (Borchert 1981). Así mismo se encuentra ampliamente distribuido en las regiones tropicales de todo el mundo Los huevos de Áscaris spp se excretan en las heces de los humanos u otros animales infectados. En condiciones ambientales adecuadas, el huevo se convierte en larva en aproximadamente 2 a 3 semanas y se vuelve infeccioso para el huésped al ingerirlo. Los huevos de Áscaris spp son de forma redonda a elíptica, estos miden 56–84 μm × 50–59 μm. La membrana del huevo consta de cuatro capas: La capa uterina mamilada externa que consta de mucopolisacárido y un complejo proteico y se deriva del útero del gusano. Las otras tres capas se derivan del huevo. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 17 3.14.1.4.3. Ciclo biológico. Dentro de las características comunes se observan que son más grande, de color blanco opaco y se localiza en el intestino delgado. No tienen capsula bucal, la boca consiste simplemente en una pequeña abertura rodeada por tres labios, el ciclo es directo. Los huevos infectantes llegan al duodeno, donde los jugos gástricos dejan en libertad a las larvas. Estas larvas (que poseen gran movilidad) penetran la mucosa duodenal, llegando a la circulación portal y dirigiéndose de allí al hígado, donde permanecen de 72 a 96 h. Posteriormente continúan su migración hacia el corazón derecho, pasando a los pulmones a través de la circulación pulmonar, hasta llegar a los capilares pulmonares, donde quedan atrapadas. Allí, las larvas rompen el endotelio capilar y penetran en los alvéolos, ascendiendo por bronquiolos y bronquios a la faringe. Una vez franqueada la epiglotis las larvas son deglutidas, volviendo nuevamente al duodeno, donde terminan su proceso madurativo y no es infectante hasta un mínimo de 4 semanas después de haber sido eliminado. (Urquhart, G.M. et al 2001). 3.14.1.5. Strongyloides 3.14.1.5.1. Clasificación Taxonómica Descripción Denominación Reyno Animalia Phylum Nematoda Clase Nematoda Subclase Secernentea Orden Rhabditida Familia Strongyloididae Género Strongyloides Especie Strongyloides spp Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 18 3.14.1.5.2. Generalidades CDC, (2015) hace referencia al género Strongyloides el cual incluye parásitos del intestino delgado de humanos, reptiles, anfibios, aves, mamíferos domésticos y silvestres. Tienen amplia distribución principalmente en zonas tropicales, sub tropicales y de clima templado cálido. La mayoría se caracterizan por poseer una gran capsula bucal que a menudo contiene dientes o placas cortantes y algunos tienen coronas radiadas que rodean la abertura bucal. (Urquhart. G.M. et.al 2001). 3.14.1.5.3. Ciclo Biológico En cuanto a su ciclo de vida de Strongyloides es más complejo que el de la mayoría de los nematodos con su alternancia entre ciclos de vida libre y parasitaria, y su potencial de autoinfección y multiplicación dentro del huésped. (CDC, 2015). También Urquhart. G.M. et.al (2001) hace mención en su libro que son parásitos que viven en el ciego y en el colon, así mismo menciona que los huevos son eliminados en las heces y su evolución hasta la L3 durante el verano en países templados requiere dos semanas. 3.14.1.6. Trichostrongyloide 3.14.1.6.1. Clasificación Taxonómica Descripción Denominación Reyno Animalia Phylum Nematoda Clase Nematoda Subclase Secernentea Orden Strongylida Familia Trichostrongylidae Género Trichostrongylus Especie Trichostrongylus spp Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 19 3.14.1.6.2. Generalidades Los Trichostrongylus, son parásitos muy difundidos, de carácter endémicos que afectan a rumiantes domésticos y silvestres, especialmente jóvenes. También pueden estar afectadas otras especies animales, Como équidos, suinos, lepóridos y aves, e incluso el hombre Los adultos son esbeltos, de color pardo rojizo y alcanzan 7 mm de longitud. Los huevos miden unas 40 x 80 micras y su membrana es fina 3.14.1.6.3. Ciclo biológico El ciclo evolutivo es directo con unos estadios de vida libre en el medio ambiente externo y otros de vida parasitaria. La fase exógena se inicia cuando los animales parasitados eliminan junto con las heces huevos de cascara fina. En el medio ambiente y en un periodo de tiempo más o menos largo, dependiendo de las condiciones ambientales, se forma el primer estadio larvario (L1) con características rhabditiformes,que eclosiona y sale del huevo. En el exterior la L1 muda a L2, mediante una nueva muda se transforma en L3 o estadio infestante. La L3 posee esófago de tipo Strongiliforme y se caracteriza por estar rodeada por la vaina de la L2 lo que facilita su diferenciación de otros nematodos y les confiere una mayor resistencia a los factores ambientales adversos que la que tenían los estadios anteriores. Esta larva abandona las heces y migra hacia la hierba situándose sobre ella en esperar de ser ingerida por el hospedador definitivo para poder proseguir con el ciclo evolutivo. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 20 4. Diseño metodológico 4.1. Tipo de estudio: Estudio descriptivo de corte transversal 4.2. Área de estudio: El trabajo de investigación se realizó en tres zoocriaderos de los municipios de Télica y León, del departamento de León, Nicaragua. Dos de ellos se encuentran en la comarca “Pueblo Redondo” del municipio de Télica: zoocriadero “San Luis” y Zoocriadero “San Nicolás”. El municipio de Télica se encuentra ubicado entre las coordenadas 12° 31' de latitud Norte y 86° 51' de longitud Oeste. Se caracteriza por tener un clima tropical seco y cálido; con lluvias aleatorias de verano, que favorecen una vegetación Semixeofil, registra temperaturas medias de 27.0 º C, con máximos de 28.9 º C y la mínima de 26.1ºC. La comarca “Pueblo Redondo” se encuentra localizada en las coordenadas 12° 32' 18'' latitud norte y 86° 51' 15'' latitud Este con una altitud de 161 metros sobre el nivel del mar (msnm). Cabe resaltar que las principales actividades económicas del municipio son la agricultura y la ganadería y en menor escala el sector servicio e industrial. Por otro lado, el siguiente punto de estudio se ubicó en el zoocriadero de la cooperativa eco-albergue “El Pilar” que se localiza en las coordenadas 12° 29' 37'' latitud norte y 86° 42' 10'' latitud este, en la comarca los “Lechecuagos” en las faldas de los volcanes “Cerro Negro” y volcán “Las Pilas” a 23 km al oeste de la ciudad de León. Los habitantes de las faldas del volcán se dedican a la agricultura y el cultivo de ajonjolí, frutales, yuca y ayotes, es parte también del sustento económico, le extracción de leña de los bosques, los cuales se han venido disminuyendo a la extracción indiscriminada, los incendios forestales y las severas sequias. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 21 4.3. Población de estudio Este estudio comprendió un total de 210 iguanas entre adultas y juveniles, las cuales están distribuidas en zoocriaderos de la siguiente manera: ➢ Zoocriadero “San Luis”: 115 iguanas entre adultas y juveniles. ➢ Zoocriadero “San Nicolás”: 74 iguanas entre adultas y juveniles. ➢ Zoocriadero eco-albergue “El Pilar”: 21 iguanas entre adultas y juveniles. 4.4. Tipo de muestreo Muestreo probabilístico estratificado. 4.5. Tamaño de la muestra Para determinar el tamaño de la muestra de una población finita conocida (210) en los tres zoocriaderos, se planteó lo siguiente: 𝑛 = 𝑁 ∗ 𝑍 2 ∗ 𝑝 ∗ (1 − 𝑝) (𝑁 − 1) ∗ 𝑒 2 + 𝑧 2 ∗ 𝑝 ∗ (1 − 𝑝) Lo que equivale a; 𝑛 = 210 ∗ 1.962 ∗ 0.5 ∗ 0.5 (210 − 1) ∗ 0.052 + 1.962 ∗ 0.5 ∗ 0.5 𝑛 = 201.68 1.48 = 136.2 Por lo tanto, se muestrearon un total de 136 iguanas Para conocer el tamaño de muestras a recolectar en cada zoocriadero se utilizó la ecuación de tamaño de muestra por estrato: ni = 𝑛 ∗ 𝑁𝑖 𝑁 ➢ zoocriadero “eco-albergue”: 𝑛1 = 136 ∗ 21 210 = 13.6 ➢ zoocriadero “San Luis”: 𝑛2 = 136 115 210 = 74.4 Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 22 ➢ zoocriadero “San Nicolás”: 𝑛3 = 136 74 210 = 47.9 Donde: α: nivel de confianza (95%) N: población total (210) z: valor de una normal (1.96) e: error (0.05) p: probabilidad (0.5) n: tamaño de la muestra (136) Ni: tamaño de cada estrato ni: tamaño de muestra del estrato 4.6. Instrumentos de recolección de los datos Estratos Tamaño del estrato (Ni) Tamaño de muestreo del estrato (ni) n1= zoocriadero “eco- albergue” 21 14 n2= zoocriadero “San Luis” 115 74 n3= zoocriadero “San Nicolás” 74 48 Total 210 136 Materiales de campo Materiales de laboratorio Soluciones Hisopos aplicadores Placas cubre objetos Solución salina Guantes de exploración Placas porta objetos Agua Lubricantes Microscopio Azúcar Marcadores Cámara McMaster Sal Hoja de registro Pipetas Pasteur Bascula digital Termo Vasos cafeteros Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 23 4.7. Procedimiento de recolección de las muestras Para la toma de las muestras se procedió a capturar a las iguanas dentro de los terrarios. Para realizar esta operación se utilizó la técnica de lazada de cuerda delgada sujeta al extremo de una vara que se pasa alrededor del cuello de la iguana y luego se sujeta y levanta en el aire para inmovilizarlo. Otros animales se capturaron en las cuevas con ayuda de una barra, evitando lesionar la cola. Una vez sujetada se le aplico un poco de presión en los globos oculares con el objetivo de estimular la respuesta óculo-vaso-vagal la cual se ha descrito como una técnica de inmovilización muy eficaz en Iguana a como menciona Soto (2018) Se procedió a introducir a cada iguana en un saco masen de 45 kg; con el objetivo de identificar a cada iguana. Cada saco fue atado en su parte superior para evitar el escape de los reptiles. Se colocaron en un lugar seguro dentro del terrario evitando lugares muy soleados o del límite de la cerca. Cabe recalcar que todas estas operaciones se realizaron en el atardecer y las iguanas se dejaron entre 24 horas para obtener las muestras. La recolección de las muestras fecales se realizó de la siguiente manera: ➢ Se abrió cada uno de los sacos para constatar que esta había defecado. ➢ Las iguanas que habían defecados se procedieron a ser sujetadas con precaución y liberadas de los sacos. Bolsas para helado Palillos de chobanano Alcohol desinfectante Bascula digital Papel toalla Gasas sacos Papel filtro Lazada de cuerda Papel toalla Marking tape Desinfectantes Recipiente para basura Bolsas de basuras Marcador para ganado Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 24 ➢ Se introdujo en la cloaca un hisopo aplicador de 10 centímetros previamente lubricado para evitar posibles lesiones. Una vez introducido el hisopo se realizó movimientos de izquierda a derecha y en círculos para así obtener una cantidad suficiente de heces. ➢ Las heces depositadas en el saco se extrajeron y se depositaron en bolsas para helados rotuladas con los siguientes datos: código único del animal, sexo, edad, fecha de recolección. ➢ Posteriormente fueron marcadas en la zona dorsal con un marcador para ganado (para evitar recapturas) y liberadas al terrario. ➢ Las iguanas que no defecaron fueron dejadas nuevamente en los sacos y analizadas al día siguiente para recolectar la muestra Las muestras recolectadas fueron depositadas en un termo para su traslado al laboratorio de parasitología de la Escuela de Ciencias Agrarias y Veterinarias para su posterior procesamiento. 4.8. Procedimiento de análisis de las muestras recolectada Las muestras recolectadas fueron trasladadas al laboratorio de parasitología de la Escuela de Ciencias Agrarias y Veterinarias de la UNAN-León y procesadas al día siguiente de la recolección. Para el procesamiento se utilizaron dos técnicas de diagnósticos: una cualitativa (frotis directo) para identificar las especies de parásitos, y una técnica cuantitativa (conteo en cámara de McMaster) para conocer la carga parasitaria. 4.8.1. Técnica McMaster 4.8.1.1. Materiales de laboratorio. ➢ Dos vasos o recipientes de plástico. ➢ Una báscula. ➢ Un colador de té, estopilla o servilletas dentales. ➢ Probetagraduada. ➢ Instrumento para mezclar (tenedor, espátula, abate lenguas). ➢ Pipetas Pasteur y goteros de hule. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 25 ➢ Fluido de flotación (la solución a escoger dependerá de la especie que se espera esté presente y la disponibilidad de reactivos). ➢ Cámara de conteo McMaster. ➢ Microscopio. 4.8.1.2 Método McMaster. ➢ Se Pesaron 4 gramos de heces colocándose dentro de un recipiente. ➢ Se Añadió 56 ml de solución de cloruro de sodio saturado. ➢ Luego se mezclaron cuidadosamente los contenidos de los recipientes con un palillo de chocobananos. ➢ La suspensión fecal fue filtrada utilizando gasas. ➢ El filtrado resultante fue mezclado en otro recipiente con una pipeta Pasteur. ➢ Utilizando la pipeta, se retiró una sub-muestra mientras el filtrado era mezclado. ➢ Se procedió a llenar el primer compartimiento de la cámara de conteo McMaster con la sub-muestra. ➢ Se mezcló de nuevo el fluido y se llenó el segundo compartimiento con otra sub- muestra. ➢ Acto seguido se dejó reposar la cámara de conteo por 5 minutos con el objetivo que los huevos de parásitos flotaran hacia la superficie y que los detritos se fueran al fondo de la cámara. ➢ Examen 1: se examinó la sub-muestra del filtrado bajo el microscopio con aumento de 10X. ➢ Examen 2: se Identificó y conto todos los huevos dentro del área gravada de ambas cámaras. Para el cálculo del resultado del número de huevos por gramo de heces se realizó de la siguiente manera: ➢ Se hizo el conteo del número de huevos dentro de la rejilla de cada cámara, ignorando aquellos fuera de los cuadros. ➢ Se procedió a multiplicar el total por 50; dando como resultado la cantidad de huevos por gramo de heces (h.p.g.) 4.8.1.2. Interpretación del resultado https://www.rvc.ac.uk/review/parasitology_spanish/Flotation/Flotation_fluids/General.htm https://www.rvc.ac.uk/review/parasitology_spanish/Faeces/Purpose.htm Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 26 Para conocer la abundancia promedio se aplicó la siguiente técnica: abundancia promedio = total de huevos encontrados total de animales examinados ∗ 50 la intensidad promedio se calculó de la siguiente manera: 𝐼𝑛𝑡𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 = 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 ℎ𝑢𝑒𝑣𝑜𝑠 𝑒𝑛𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑎𝑛𝑖𝑚𝑎𝑙𝑒𝑠 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑜𝑠 ∗ 50 4.8.2. Frotis directo Hendrix (1999) describe este método como el más sencillo para detectar parásitos en heces con el microscopio es mediante el frotis directo, que consiste en colocar una pequeña cantidad de material fecal directamente sobre el porta objetos y observar Procedimiento ➢ En un porta objetos se colocó una gota de solución salina. ➢ Con palillos de madera se tomó una muestra de 1-4 mg de heces aproximadamente o bien de la muestra del hisopo, mezclándose con la solución salina, haciendo una suspensión homogénea. ➢ Con el mismo aplicador o hisopo se retiraron las fibras y otros fragmentos gruesos ➢ Se colocó el cubre objetos ➢ Luego se colocó en el microscopio para su posterior observación. 4.9. Análisis de las Variables Los gráficos se realizaron haciendo uso del Software Microsoft Excel 2013 y para los cálculos estadísticos se utilizó una base de datos en el software IBM SPSS statistic 22.0 elaborada previamente. En la base de datos se incluyeron las variables más representativas del estudio. La información completa se obtuvo realizando preguntas directas a los dueños de cada zoocriadero. Se calcularon los siguientes índices parasitológicos: Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 27 ➢ Prevalencia (P): número de hospedadores infectados por una especie parásita parti cular, dividido por el número de total de hospedadores examinados; se expresa en porcentaje. ➢ Intensidad: número de individuos de una especie parásita particular en un hospedador individual infectado. ➢ Intensidad media (IM): Intensidad promedio de una especie particular de parásito entre los hospedadores infectados. Se calcula como número total de parásitos/ número de hospedadores infectados. ➢ Abundancia: número de parásitos de una especie particular en o sobre un hospedador sin tener en cuenta si el hospedador está o no infectado. ➢ Abundancia media (AM): número promedio de parásitos por hospedador examinado en una muestra (incluye a los no infectados). Se calcula como número total de parásitos/ número total de hospedadores examinados Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 28 5. Resultados y Discusión Las infecciones se producen por diversos parásitos gastrointestinales siendo comunes en animales en cautiverio debido a distintos factores que suelen presentarse en los terrarios ya sea por las condiciones propias de las instalaciones, el clima, temperatura, humedad, condiciones biológicas de los animales, condiciones de alojamiento y medidas higiénicas implementadas en cada zoocriadero. Como afirma Arrojo L (2002) y Kanh (2007) que “los animales en cautiverios generalmente conservan sus parásitos los que bajo ciertas condiciones pueden volverse patógenos y ocasionar la muerte del huésped”. De un total de 136 muestras recolectadas en tres zoocriaderos del departamento de León, 106 iguanas se detectaron con presencia de parásitos representando 77.95% de la población total analizada y 30 no parasitados (22.06%), El estudio reporta menor número de casos positivos de parásitos comparado con lo reportado por Chávez, L et al:, (2005) que encontró una frecuencia de parásitos del 100% respectivamente y Aparicio, A. L. (2009) destaca los mismos resultados tanto en exámenes coproparasitológico como en necropsias de estos especímenes, utilizando una muestra de 67 y 102 iguanas para el estudio. 77.94%, 22.06%, 0 20 40 60 80 100 120 N ù m e ro d e i g u a n a s in fe c ta d a s Gráfico 1. Número de casos positivos de parásitos gastrointestinales en iguanas verdes Parasitado No parasitado Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 29 Zoocriadero No parasitado Parasitado Total Porcentaje Eco albergue 1 13 14 9.55% San Luis 18 56 74 41.17% San Nicolás 11 37 48 27.20% Total 30 106 136 77.92% En el grafico 2 se observa que el zoocriadero “San Luis” reporta un mayor porcentaje de animales positivos a parásitos gastrointestinales. Dentro de los animales parasitados se encontraron tres géneros de parásitos: Trichostrongylus, Strongyloides, Ascaris; lo que se contrasta con las especies encontradas y descritas por Esquivel et al;. (1996) quien analizó 37 muestras de diversos lugares del país encontrando un 84.6% de presencia de huevos de parásitos del género Strongyloides , por otro lado Arcos J (2010) en un estudio en iguanas criadas en una unidad de manejo intensivo en la costa de Oaxaca, México, menciona Tabla N° 1: animales parasitados por zoocriadero 9,56 41,18 27,21 0,74 13,24 8,09 0 10 20 30 40 50 Eco Albergue San Luis San Nicolás zoocriaderos Gráfico 2. Porcentaje de iguanas parasitadas y no parasitadas según zoocriaderos Parasitado No Parasitado Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 30 haber encontrado endoparásitos nemátodos del género Trichostrongylus y del género Oxyuris en iguanas adultas y jóvenes, contrastándose con lo encontrado por Rosales, C (2011) en una investigación de 300 especímenes del parque histórico de Guayaquil, Ecuador y Martínez (2014) que encontraron huevos parasitarios de Strongyloides spp y Trichostrongylus spp. El gráfico 3 representa la intensidad y la abundancia de la carga parasitaria del total de animales muestreados en los tres zoocriaderos. Aplicándose los índices parasitológicos se obtuvo una abundanciapromedio de 560.29 huevos de parásito por hospedador examinado en un gramo de heces, recalcando que se incluyen a los no infectados. Del mismo modo se encontró una intensidad promedio de 718.87 huevos parasitarios por gramo de heces entre los especímenes positivos. Demostrando en este estudio que las iguanas presentaron infestación parasitaria severa. 560 719 0 150 300 450 600 750 900 H u e vo s p o r g ra m o s d e h e c e s Gráfico 3. Promedios de abundancia e intensidad de carga parasitaria Abundancia Intensidad Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 31 En la gráfica 4 se observa la carga parasitaria de los géneros de parásitos, donde Strongyloides spp mostró una abundancia de 340.44 hpgh y una intensidad de 436.79 hpgh; mientras que Trichostrongylus spp una intensidad de 204.79 hpgh y una abundancia de 262.74 hpgh. Cabe recalcar que en los tres zoocriaderos muestreados Strongyloides spp fue mayormente encontrado. Ascaris spp mostró una abundancia y una intensidad menor, siendo la abundancia de 15.07 hpgh y una intensidad de 19.34 hpgh respectivamente; Aunque no existe un estudio previo que nos muestre la carga parasitaria por géneros parasitarios, el estudio demostró que las infestaciones individuales o combinadas de Strongyloides spp y Trichostrongylus spp son los que mayormente afectan a las iguanas verdes de los zoocriaderos; del mismo modo la presencia de Ascaris spp se ha considerado como una infestación accidental ya que las cantidades de huevos presentes en las muestras eran mínimas y se encontraron en pocos especímenes examinados, además la mayor cantidad de animales infestados con este género parasitario procedieron del zoocriadero “San Luis” donde se encontraban gallinas de patio (Gallus gallus domesticus) dentro de los terrarios como un método de control natural de ectoparásitos en las iguanas, del mismo modo se encontraban cerca del terrario diversos animales domésticos como caballos, cerdos y bovinos. 340 205 15 437 263 19 0 100 200 300 400 500 Strongyloides spp Trichostrongylus spp Ascaris spp H u e vo s p o r g ra m o s d e h e c e s Especie parasitaria Gráfico 4. Promedios de abundancia e intensidad por especie parasitaria. Abundancia Intensidad Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 32 Esta representación gráfica demuestra una comparación de la abundancia y la intensidad de la carga parasitaria en los tres zoocriaderos analizados. Se refleja una alta carga parasitaria en el zoocriadero Eco albergue “El Pilar” con una abundancia e intensidad de 743 y 800 hpgh respectivamente, del mismo modo se evidencia una menor carga parasitaria en el zoocriadero “San Nicolás”. Se considera que las diferencias en los niveles de infestación podrían radicar en el manejo y la alimentación que las iguanas reciben en cada zoocriadero, la cual variaba en cada uno de ellos. La alimentación en el zoocriadero “San Nicolás” era muy variada y de calidad ya que incluía concentrados comerciales de alta calidad, verduras y frutas; en cambio en el zoocriadero con mayor carga parasitaria la alimentación estaba basada principalmente en hojas de árboles (marango) y en ocasiones frutas como sandia, mango o bananos. A este factor se le suma el espacio y el manejo, ya que los zoocriaderos “San Nicolas” y “San Luis” contaban con terrarios más grandes, divididos en dos áreas para reducir la cantidad de iguanas en cada uno de ellos, además de mayor cantidad de árboles dentro de los terrarios. 743 594 455 800 785 591 0 200 400 600 800 Eco-albergue San Luis San Nicolás H u e vo s p o r g ra m o d e h e c e s Zoocriaderos Grafico 5: Promedios de abundancia e intensidad de la carga parasitaria por zoocriadero Abundancia Intensidad Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 33 La gráfica 6, refleja la abundancia y la intensidad parasitaria según el sexo de los especímenes examinados. La abundancia promedio es mayor en iguanas machos con 585 huevos por gramo de heces comparado con las iguanas hembras (550) respectivamente. En cambio, la intensidad es mayor en las hembras (728) huevos parasitarios por gramos de heces en un animal positivo frente a 702 de intensidad en macho. Es importante mencionar que las iguanas hembras se encontraban en periodo post-postura lo que influye en el sistema inmunológico, las cuales se vuelven sensibles a adquirir infección parasitaria debido al estrés al que están sometidas. 585 550 702 728 0 200 400 600 800 Macho Hembra H u e vo s p o r g ra m o s d e h e c e s Sexo Gráfico 6. Promedio de abundancia e intensidad según sexo Abundancia Intensidad Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 34 La mayor carga parasitaria se presenta en la etapa adulta, donde se observó 639 hpgh de abundancia y 836 de intensidad lo que se considera como una carga parasitaria severa. Esto se debe principalmente a la respuesta del sistema inmunológico y a la etapa reproductiva en que se encontraba la mayoría de las iguanas (específicamente hembras), ya que estaba terminando su periodo de postura, lo cual es una etapa crítica para el animal, siendo más susceptible a la acción de las parasitosis. El resultado es contrario a lo que suponíamos encontrar ya que deberían ser los animales de menor edad los mayormente afectados ya sea porque el sistema inmunológico aun no haya alcanzado su total desarrollo, o bien por no poseer experiencias de contactos con altas cargas parasitarias. El estudio demuestra que se debe dar un cuidado especial (manejo, sanidad) a para hembras en periodo de post- postura para evitar muertes por altas cargas de infestación parasitaria. 639 836 430 534 100 300 500 700 900 Abundancia Intensidad H u e vo s p o r g ra m o s d e h e c e s Gráfico 7. Promedios de abundancia e intensidad según edad Adulto Juvenil Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 35 6. Conclusión En base a los resultados obtenidos nos llevan a concluir que: ➢ Se encontraron huevos de tres (03) géneros parasitarios: Ascaris spp, Strongyloide spp y Trichostrongylus spp, siendo estos dos últimos los de mayor índice de presentación en los tres establecimientos. ➢ Se observó un 77.94% de animales positivos del total de la población en estudio. El 41.18% (56) corresponde al zoocriadero “San Luis”, 27.21% (37) zoocriadero “San Nicolás” y 9.56% (13) al zoocriadero Eco Albergue “El Pilar”. ➢ Se evidencia una abundancia parasitaria de 560 huevos por gramo de heces en cada animal muestreado y una intensidad de 719 hpgh en cada animal positivo del estudio. Resultando el género Strongyloide spp el de mayor abundancia e intensidad con 340 y 437 respectivamente. ➢ Los zoocriaderos con mayor carga parasitaria gastrointestinal son: Eco Albergue “El Pilar” con 800 huevos hpgh por animal, seguido de zoocriadero “San Luis” con 594 huevos parasitarios por animal muestreado (abundancia) y 785 hpgh en cada animal positivo. ➢ En relación al sexo los machos presentan mayor abundancia parasitaria (585) comparado con las hembras (545) pero menor intensidad (702) frente a 728 de las hembras. ➢ El estudio demuestra una alta carga parasitaria en machos, hembras, adultos y juveniles de todos los zoocriaderos incluidos en el estudio. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 36 7. Recomendaciones ➢ Se recomienda establecer protocolos de sanidad y manejo más estrictos para evitar altas cargas parasitarias en los terrarios. ➢ Implementar protocolos de desparasitación basados en los resultados obtenidos en las evaluaciones coproparasitológicas. ➢ Seguimiento y capacitación continua de alimentación,nutrición y manejo productivo y reproductivo de la especie para garantizar y preservar la calidad de vida de los animales en cautiverio. ➢ Realizar otros estudios o dar seguimiento a esta investigación con el fin de ampliar los conocimientos que permitan mejorar la vida y seguridad, tanto de animales en cautiverio como de las personas que tienen contacto con ellos. ➢ Realizar necropsias de iguanas verdes adultas y juveniles para identificar parásitos gastrointestinales en estadío larvario o adulto facilitando la identificación de especies parasitarias específicas. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN - León 37 8. 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