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La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 1 La aplicación de carbohidratos como una opción para mejorar la vitalidad y crecimiento del arbolado urbano Tomás Martínez-Trinidad Profesor Investigador Adjunto Arboricultura y Dasonomía Urbana Postgrado en Ciencias Forestales tomtz@colpos.mx Annual ISA International Conference Fotosíntesis: fuente de energía (carbohidratos) 6CO2 + 6H20 C6H1206 +6O2 INTRODUCCIÓN La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 2 RELACIÓN FUENTE-DEMANDA • Fuente - Producción (hojas), o liberación (raíz, tallo) • Demanda - Almacén, o Uso http://online.moraine.cc.il.us /WebSupported/BIO112/sourcetos ink.jpg Introducción DISTRIBUCIÓN DE RECURSOS • Defensa • Mantenimiento • Crecimiento • Reproducción Introducción • Exudados raíz • Almacenamiento Shigo, A. L. 1991. Modern Arboriculture La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 3 Arbolado urbano experimenta diferentes condiciones de estrés Reservas de Energía Crecimiento Defensa Reproducción Almacenamiento Declinación Introducción Introducción * Apariencia visual - Crecimiento - Tamaño de hoja, color - Densidad de follaje * Contenido de carbohidratos - Laboratorio (glucosa y almidón) - Tinción de tejidos - almidón - Medidores de glucosa • Espectrómetro de fluorescencia (Fv/Fm) * Ohmímetro (Resistencia eléctrica) MÉTODOS PARA DETERMINAR VITALIDAD La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 4 � ¿Se pueden aplicar carbohidratos de manera exógena para mejorar el crecimiento y vitalidad de los árboles? Pregunta Principal EXPERIMENTO 1 • Estudiar la distribución espacial y estacional de glucosa y almidón en árboles de Quercus virginiana. (Larcher, 1980) La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 5 MATERIALES AND MÉTODOS - Árboles (10 cm diam.) Quercus virginiana - 5 m - espaciamiento Muestras: N,S,E,O * Raíces (soporte) * Tronco (1 m altura) * Hojas (media de copa) * Ramillas (1 año) N S E � Hielo, secado, molido, y almacenado (viales) Determinación de glucosa y almidón Sigma GAGO-20 � Extracción glucosa � Determinación (650 nm) � Almidón –muestra remanente – enzima amiloglucosidasa � Colorimétricamente: a 540 nm � Muestreo: cada estación Materiales y Métodos La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 6 Materiales y Métodos � Análisis de datos - Punto cardinal, tipo tejido, época de año N-S, E-O (entre árboles y filas) - Procedimiento GLM - SPSS v.13 R E S U L T A D O S � El contenido de carbohidratos no fue afectado por punto cardinal. 0 20 40 60 80 100 March July September January Time G lu co se c on ce nt ra tio n m g g -1 D W Root Trunk Twigs Leaves Contenido de glucosa en Quercus virginiana en cuatro fechas diferentes. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 7 0 20 40 60 80 March July September January Time S ta rc h c o n ce n tr at io n m g gl uc os e g -1 D W Root Trunk Twigs Leaves Resultados Contenido de almidón en Quercus virginiana en cuatro fechas diferentes. � La raíz y tronco presentaron altos contenidos de almidón durante el periodo de dormancia. � El contenido de glucosa: hojas > ramillas > tronco y raíz, mientras que el almidón tuvo un patrón inverso. EXPERIMENTO 2 � Suelo bajo condiciones controladas y en campo MATERIALES Y MÉTODOS • Evaluar los efectos de aplicaciones de carbohidratos en el suelo sobre la actividad microbiana bajo condiciones de laboratorio y en campo. Carbohidrato Concentración (g L-1) Testigo 0 Glucosa 40, 80, 120 Almidón 40, 80, 120 Mezcla (50% cu) 40, 80, 120 � 3 rep/ tratamiento La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 8 * Laboratorio - Contenedores Incubados a 27oC * Campo - Soluciones radio 0.5 m - Ambos casos: Distribución aleatoria - Muestreo semanal Materiales y Métodos �Método de disoluciones -Bacteria - (N.A) -Actinomicetes - (A) -Hongo - (PDA+RB) Materiales y Métodos La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 9 �Respiración: Titulación �30 g of suelo (frasco) �3 mL NaOH (vaso) � Incubó 48 hrs. �2,3 gotas fenolftaleína +1 mL BaCl2 * HCl Materiales y Métodos (Dr. Zuberer) � Análisis de datos - Completamente al azar - Procedimiento GLM - SPSS v.13 - Prueba de Dunnett La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 10 Microbio Campo UFC g-1 suelo Laboratorio UFC g-1 suelo Hongo 9.8 x 103 (�4.0)† 13 x 103 (�3.1) Actinomicetes 10.7 x 104 (�5.3) 8 x 104 (�3.5) Bacteria 8.5 x 106 (�3.7) 15 x 106 (�4.8) Medias de UFC para hongo, actinomicetes, bacterias en suelo tratado con carbohidratos a diferentes concentraciones. RESULTADOS † Desviación estandar � La técnica de disoluciones no funcionó para encontrar diferencias en la enumeración de poblaciones microbianas del suelo. Respiración en muestras de suelo tratadas con glucosa, almidón o mezclas 50:50 en concentraciones diferentes (0, 40, 80, and 120 gL-1) baj o condiciones de laboratorio. *Significativamente diferente con P�0.05 usando la prueba de Dunnett. Resultados 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Weeks Control Starch 120 Starch 80 Starch 40 * * * * 0 200 400 600 800 1000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Weeks C O 2 Ev o lv ed (µ g .g -1 s o il) Control Glucose 120 Glucose 80 Glucose 40 * * * * * * * * * 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 We eks Control Mi x 120 Mi x 80 Mi x 40* * * * * * * * * � La respiración en el suelo no fue afectada hasta después de varias semanas de la aplicación de altas concentraciones de almidón. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 11 0 100 200 300 400 500 600 700 0 1 2 3 4 5 6 W eeks C O 2 E vo lv ed (µ g. g- 1 s oi l) C ontrol Glucos e 120 Glucos e 80 Glucos e 40* * * * * * * 0 1 2 3 4 5 6 Weeks Control S tarch 120 S tarch 80 S tarch 40 * * * ** 0 1 2 3 4 5 6 Weeks Cont rol Mix 120 Mix 80 Mix 40 * * * * * Respiración en muestras de suelo tratadas con glucosa, almi dón o mezclas 50:50 en diferentes concentraciones (0, 40, 80, and 120 gL-1) baj o condiciones de campo. * Significativamente diferente con P�0.05 usando la prueba de Dunnett. Resultados � La respiración en el suelo se incrementó significativamente con la aplicación de carbohidratos bajo condiciones de campo y laboratorio. Evaluar los efectos de aplicaciones de carbohidratos en el suelo en el crecimiento y vitalidad de Quercus virginiana. EXPERIMENTO 3 • Absorción x raíz (azúcares) • Disponibilidad Nutriente - microorganismos - suelo • Secuestro de Nutrientes - temporal http://www.organicare.com/howyardworks .html ������ � �� �� ����� � ���� � ���� La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 12 * Tratamiento: soluciones al suelo � Árboles -10 cm MATERIALES Y MÉTODOS Aplicaciones: Cada 4 meses (1.5 años) •10 L por árbol – alrededor – radio de 0.5 m � Completamente azar Carbohidrato Concentración (g L-1) Glucosa 0, 40, 80, 120 Almidón 0, 40, 80, 120 Mezcla (50% cu) 0, 40, 80, 120 Materiales y Métodos La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 13 • Crecimiento de raíz: * 4 muestras (6 cm x 15 cm) * a 0.5 m del tronco * Longitud y diámetro Programa WinRhizo * Peso seco Materiales y Métodos � Crecimiento: - Diámetro, - Área de copavertical, Programa ImageJ - Índice de crecimiento 1 12 medición mediciónmedición IC − = � Análisis de carbohidratos en ramillas - Muestras raíz (final) � Fotosíntesis: - LiCor 6200 - 3 hojas Materiales y Métodos La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 14 • Fluorescencia clorofila 10 hojas de 1/3 bajo de la copa �Composición isotópica de carbono - ramillas y raíces – 18 meses * Laboratorio de Isótopos Estables en UC Davis * �13C (estándar PDB). Materiales y Métodos • Valores de �13C - Isótopos estables 12C, 13C azúcar Planta C3 Pee Dee Belemnite * Plantas C3: -20 a -34‰ * Plantas C4: -9 a -16.8‰ OPCION POTENCIAL PARA DETERMINAR LA ABSORCIÓN DE AZÚCARES Azúcares de C4 � � �� � La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 15 �Respiración en suelo - 25 mm diam. x 150 mm largo muestras de suelo (4 meses) - 0.5 m del tronco * Muestras bolsas de plástico * Hielo Azul �Análisis de nutrientes (año) - Suelo - Hojas Materiales y Métodos � Análisis de datos - Completamente al azar - Estructura factorial (concentraciones y carbohidratos) 4x3 aumentada por el control - Procedimiento GLM - SPSS v.13 * Datos de composición isotópica de carbono * Prueba de Dunnett Materiales y Métodos La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 16 0.65 0.67 0.69 0.71 0.73 0.75 0.77 0.79 0.81 0.83 0.85 Aug '04 Dec '04 Apr '05 Aug '05 Dec '05 Jun '06 Time C h lo ro p h yl l fl u o re sc en ce (F m /F v) Glucose Starch Mixture Efecto general de la aplicación de glucosa, almidón y mezclas 50:50 en fluorescencia de clorofila (Fv /Fm) de Quercus virginiana en diferentes fechas. A RESULTADOS � La aplicación de soluciones en el suelo no tuvieron un impacto significativo en el crecimiento. 0.65 0.67 0.69 0.71 0.73 0.75 0.77 0.79 0.81 0.83 0.85 Aug '04 Dec '04 Apr '05 Aug '05 Dec '05 Jun '06 Time C h lo ro ph y ll flu o re sc e nc e (F m /F v ) 0 40 80 120 Resultados Efecto general de la aplicación de diferentes c oncentraciones de carbohidratos (0, 40, 80 and 120 g L-1) en la fluorescencia de clorofila (Fv /Fm) de Quercus virginiana en diferentes fechas. 0 � El uso de la composición de isótopos de carbono no funcionó para determinar si los azúcares fueron absorbidos por las raíces de los árboles. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 17 Efecto general de diferentes concentraciones de carbohi dratos en el conteni do de glucosa en ramillas de Quercus virginiana. 25 28 31 34 0 40 80 120 Concentration (g L-1) G lu co se (m g g- 1 D W ) Resultados � La aplicación de altas concentraciones de carbohidratos causó un alto contenido de glucosa en ramillas y variación en la fluorescencia de clorofila, aunque las diferencias fueron pequeñas. 0 20 40 60 80 100 120 140 0 40 80 1 20 Conce ntration (g L -1) C O 2 E vo lv ed ( µg g -1 s o il) Glucose Starch Mixture Efecto general de carbohidratos (glucosa, almi dón y mezcla 50:50) en diferentes concentraciones sobre la respiración en suelo (µg CO2 g-1 s uelo) cuatro meses después de la aplicación de tratamientos. Resultados � Altas concentraciones de almidón tuvieron un impacto en la actividad microbiana cuatro meses después del tratamiento, aunque no produjeron un efecto significativo en vitalidad y crecimiento. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 18 MATERIALES Y MÉTODOS • Determinar el efecto de inyecciones con carbohidratos en el crecimiento y vitalidad de Quercus virginiana. EXPERIMENTO 4 � Árboles (20 cm ) cerca de College Station � Tratamiento: Inyecciones al tronco - macroinfusión * Micro o macro * Baja o alta presión INYECCIONES EN LOS ÁRBOLES • Solución - al sistema vascular (Xilema) La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 19 Carbohidrato Concentración (g L-1) Glucosa 0, 40, 80, 120 Sacarosa 0, 40, 80, 120 Mezcla (50% cu) 0, 40, 80, 120 Materiales y Métodos � 10 L por árbol base de la raíz � Aplicaciones: enero año1, año2 � Diámetro � Crecimiento de raíz * � Contenido de carbohidratos � Fotosíntesis � Fluorescencia de clorofila � Composición isotópica de C * Materiales y Métodos * Medido a un año de la aplicación La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 20 � Análisis de datos - Completamente al azar -Estructura factorial (concentraciones y carbohidratos) 4x3 aumentada por el control - Procedimiento GLM - SPSS v.13 * Datos de composición isotópica de carbono * Prueba de Dunnett Materiales y Métodos RESULTADOS 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 control glucose mixture 50:50 sucrose Type of sugar Di am et er G ro w th In de x (c m .c m -1 ) Índices de crecimiento en diámetro (cm cm-1) de Quercus virginiana inyectado con 3 tipos de azúcares (glucosa, sacarosa,y mezcla 50:50). La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 21 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 0 40 80 120 Carbohydrate Concentration (g L-1) Tr u nk in cr em en t (c m ) Media general del incremento en diámetro (cm) de Quercus virginiana inyectado c on diferentes concentraciones de carbohidratos (0, 40, 80 y 120 gL-1). Resultados � La mezcla 50:50 (glucosa y sacarosa) causó un mayor incremento de los índices de crecimiento en diámetro. 0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 0 40 80 12 0 Ca rbohydra te Conce nt ra tion (g.L -1) G lu co se c o nt en t (m g .g -1 D W ) 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 0 40 80 12 0 Ca rbohydra te Conce nt ra tion (g.L -1) S ta rc h co n te nt (m g g lu co se .g -1 D W ) Efecto general de inyecciones con diferentes concentraciones de carbohidratos en el contenido de glucosa para ramillas y almidón en raíces de Quercus virginiana. Resultados Ramillas Raíces � El contenido de glucosa en ramillas y de almidón en raíces mostraron un incremento en árboles tratados con las altas concentraciones de carbohidratos. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 22 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8 0 40 80 120 Carbohydrate Concentration (g.L-1) C hl or op hy ll flu or es ce nc e (F v/ Fm ) Efecto general de aplicación de carbohidratos por inyecciones al tronco en cuatro concentraciones (0, 40, 80, y 120 g L-1) sobre la fluorescencia de clorofila (Fv /Fm) en Quercus virginiana. Resultados 0 � La fluorescencia de clorofila Fv/Fm se incrementó significativamente en árboles tratados con altas concentraciones de carbohidratos. Tratamiento Raíces Ramillas Testigo -26.823 -30.530 Glucosa 40 -26.437 -30.430 Glucosa 120 -26.823 -30.037 Sacarosa 40 -26.697 -29.973 Sacarosa 120 -26.697 -29.157* Composición isotópica de carbono (�13C) en ramillas y raíces de Quercus virginiana tratados con glucosa y sacarosa a 40 y 120 g L-1. Resultados * Significativamente diferentes P�0.05 usando la prueba de Dunnett. � La composición isotópica de carbono (�13C) no mostró una tendencia clara para corroborar la distribución de fuentes exógenas de carbohidratos. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 23 CONCLUSIONES GENERALES � Las diferencias en la concentración de carbohidratos entre los tejidos durante el año remarcan la necesidad de los órganos del árbol entre los periodos de crecimiento ydormancia. � Aunque el método de disoluciones no funcionó para determinar el efecto de carbohidratos en la actividad microbiana del suelo, los resultados con la técnica de titulación sugieren que la aplicación de carbohidratos puede funcionar como unmétodo efectivo y práctico para incrementar la actividad microbiana en el suelo. � La inyección con carbohidratos puede mejorar el crecimiento y vitalidad de Quercus virginiana. Desafortunadamente, los valores de �13C no demostraron una tendencia que corroborara la absorción y distribución de fuentes exógenas de carbohidratos. CONCLUSIONES GENERALES � La aplicación de carbohidratos al suelo no produjo un efecto notable en el crecimiento de los árboles. Aunque la aplicación de altas concentraciones mostró cambios en el contenido de glucosa en ramillas y la fluorescencia de clorofila en hojas, dichas diferencias fueron pequeñas yno mostraron una tendencia clara. La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano ISA annual international conference - tomtz@colpos.mx 24 AGRADECIMIENTOS � Dr. W. Todd Watson (Consejero) � Dr. Michael Arnold � Dr. Leonardo Lombardini � Dr. David Appel Dudley Bernard, Russell Book, Corey Stover, Tim Rogers, Alejandro Alarcon, Lisbet Islas-Rodríguez � Environmental Design Inc. � Texas Forest Service � USDA Forest Service � Colegio de Postgraduados � Conacyt � SEP ¿Preguntas? ���� tomtz@colpos.mx
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