CEMA-MN-LA-1

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CENTRO DE EXCELENCIA MEDICA EN ALTURA AVALADO POR FIFA 
 
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS DEL CEMA 
Laboratorio de análisis clínicos 
Vigente a partir de: Enero 2016 Clave:CEMA-MN-LAC-MPLAC-01 
Versión: 1.2 
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Elaboró 
 
 
 
 
Noel Ramos Islas 
Técnico Laboratorista 
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MCD. Vicente Moreno Calva 
Director de Calidad 
Autorizo 
 
 
 
 
Dr. José María Busto Villarreal 
Director Quirúrgico CEMA 
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Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
Directora General de CEMA 
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INDICE DE CONTENIDOS Página 
 
1. Objetivo...................................................................................................................................................3 
 
2. Alcance...................................................................................................................................................3 
 
3. Receptor del servicio...............................................................................................................................3 
 
4. Responsables.........................................................................................................................................3 
 
5. Áreas involucradas.................................................................................................................................4 
 
6. Protocolos de operación en el laboratorio clínico....................................................................................5 
 
6.1 Recepción y registro de pacientes que ingresan al laboratorio de análisis clínicos..................................5 
6.2 Restricciones en la realización de los estudios........................................................................................5 
6.3 Presentación y explicación del procedimiento.........................................................................................5 
6.4 Corroboración del cumplimiento de las condiciones para los estudios.....................................................6 
6.5 Preparación psicológica. ........................................................................................................................6 
6.6 Consideración de los factores que influyen en los resultados..................................................................6 
6.7 Procedimiento específico de toma de muestras sanguíneas a pacientes hospitalizados para procedimiento 
quirúrgico.....................................................................................................................................................7 
6.8 Hematología..........................................................................................................................................8 
 6.8.1 Composición de la sangre..................................................................................................................8 
 6.8.2 Glóbulos rojos o eritrocitos.................................................................................................................9 
 6.8.3 Glóbulos blancos o leucocitos............................................................................................................9 
 6.8.4 Plaquetas..........................................................................................................................................9 
 6.8.5 Plasma y sus constituyentes..............................................................................................................9 
 6.8.6 Recolección de especímenes sanguíneos.......................................................................................10 
 6.8.7 Punción cutánea o capilar................................................................................................................11 
 6.8.8 Técnica de punción cutánea o capilar..............................................................................................11 
 6.8.9 Punción venosa...............................................................................................................................12 
 6.8.10 Punción arterial..............................................................................................................................13 
6.9 Manejo y transporte de las muestras sanguíneas obtenidas.................................................................13 
6.10 Procedimientos específicos para el procesamiento de muestras sanguíneas......................................13 
6.11 Hematocrito (Hto), volumen celular compacto (VCC) ó volumen del paquete celular (VPC)..................14 
 6.11.1 Fundamento...................................................................................................................................14 
 6.11.2 Micrométodo...................................................................................................................................14 
 
 
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 6.11.3 Macrométodo de Wintrobre.....................................................................................................................15 
6.12 Conteo de glóbulos rojos.............................................................................................................................16 
 6.12.1 Valores de referencia...............................................................................................................................20 
6.13 Determinación de leucocitos........................................................................................................................21 
6.14 Plaquetas......................................................................................................................................................28 
6.15 Factor de crecimiento plaquetario................................................................................................................33 
6.16 Grupo sanguíneo..........................................................................................................................................35 
6.17 Determinación del tiempo de protrombina....................................................................................................37 
6.18 Determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada......................................................................37 
6.19 Determinación de Proteína C reactiva..........................................................................................................38 
6.20 Determinación de HCG (prueba de tira) en suero y orina............................................................................39 
6.21 Muestras urinarias........................................................................................................................................40 
6.21.1 Indicaciones de recolección de muestras urinarias...................................................................................40 
6.22 Manejo y transporte de muestras urinarias..................................................................................................41 
6.23 Procedimiento específico para el procesamiento de muestras urinarias.....................................................41 
6.24 Procedimiento específico de registro, identificación y foliado de muestras.................................................42 
6.25 Identificación y rotulo de muestras obtenidas..............................................................................................436.26 Manejo de derrames en el laboratorio de análisis clínicos..........................................................................43 
 
7.- Lavado y desinfección..................................................................................................................................44 
 
8.- Almacenaje de muestras biológicas.............................................................................................................44 
 
9.- Manejo de red de frio....................................................................................................................................45 
 
10.- Desecho de muestras biológicas..................................................................................................................46 
 
11.- Diagrama de flujo..........................................................................................................................................47 
 
12.- Resultado deseado.......................................................................................................................................48 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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1. Objetivo 
 
Proporcionar al personal del área de laboratorio clínico así como a todos los profesionales de la salud del CEMA, 
un instrumento que facilite el desarrollo adecuado, sistematizado y estandarizado de los procedimientos que se 
realizan dentro del laboratorio de análisis clínicos. 
2. Alcance 
 
El presente manual debe aplicarse dentro de todas las actividades que se desarrollen en el laboratorio de 
análisis clínicos, y está al alcance de todo el personal profesional de la salud y/o administrativo ligado al CEMA. 
3. Receptor del servicio 
 
El CEMA by FIFA integra el servicio de Laboratorio de análisis clínicos, con la finalidad de proporcionar un 
servicio completo e íntegro para los deportistas, alumnos, colaboradores del Grupo Pachuca, otros clubes, 
organizaciones deportivas y a la población en general, todo ello sujeto a principios científicos y éticos 
enmarcados en las Normas Oficiales Mexicanas (NOM) y los estatus básicos del CEMA by FIFA. 
 
4. Responsables 
 
NOMBRE PUESTO 
I.Q Claudia Elena Saavedra Sandoval Responsable sanitario del laboratorio de análisis clínicos 
T.L.Q. Noel Osmar Ramos Islas Jefe del laboratorio de análisis clínicos 
L. N. Alejandra Chávez Oropeza Laboratorista clínico (turno vespertino) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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5 Áreas Involucradas: 
 
AREA RESPONSABLE FIRMA 
ADMINISTRACION L.C. SANTA VALENCIA 
ADMISION L.C. SANTA VALENCIA 
ENFERMERIA L.E AMAURY REVOREDA MONTES 
FLEBOTOMIA T.L.Q. NOEL OSMAR RAMOS 
ISLAS 
L.N. ALEJANDRA CHAVEZ 
OROPEZA 
 
HEMATOLOGIA 
QUIMICA CLINICA 
UROANALISIS 
CALIDAD 
VALIDACIÓN DE 
RESULTADOS 
I.Q. CLAUDIA SAAVEDRA 
SANDOVAL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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6. PROTOCOLO DE OPERACIONES A REALIZAR DENTRO DEL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS 
 
 
6.1.- RECEPCIÓN Y REGISTRO DE PACIENTES QUE INGRESAN AL LABORATORIO DE ANÁLISIS 
CLÍNICOS 
Personal de recepción 
 
 Debe asegurarse que los datos generales del paciente sean correctos, así como el rotulo de las muestras a 
obtener o a ingresar 
 Personal de recepción y flebotomista (si así procede) 
Corroboran y aseguran que los datos generales del paciente y los estudios solicitados coincidan con los datos 
presentes en la hoja de requisición. 
El flebotomista explica el procedimiento a realizar para la obtención de muestra y pide de manera atenta firme de 
consentimiento informado en la bitácora de registro de pacientes y resultados. 
 
6.2- RESTRICCIONES EN LA REALIZACIÓN DE ESTUDIOS 
Flebotomista 
El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos a pacientes que no cumplan con las condiciones 
previamente explicadas por el personal de salud. 
El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos en muestras que no cumplan con los 
requerimientos necesarios por el laboratorio. 
El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos a pacientes que no permitan el procedimiento 
adecuado para la obtención de muestras, mediante consentimiento informado dentro de la bitácora de resultados 
con su respectiva firma así como las razones por las cuales rechazan de manera parcial o total la toma de 
muestra. 
NOTA: En caso de detectar alguna de estas restricciones, se deberá reprogramar el estudio a la brevedad 
posible. 
 
 
 
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6.3- PRESENTACIÓN Y EXPLICACIÓN DEL PROCEDIMIENTO A REALIZAR CON EL PACIENTE 
 Flebotomista 
 El flebotomista deberá presentarse con el paciente, mencionando su nombre y cargo dentro del laboratorio 
 Deberá llamar al paciente por su nombre completo. 
 Corroborar los datos del paciente, con los presentes en la hoja de requisición, de manera verbal y escrita. 
 Explicar brevemente el procedimiento a realizar. Respondiendo a las posibles dudas que el paciente presente, 
esto con ética y profesionalismo. 
6.4 CORROBORACIÓN DEL CUMPLIMIENTO DE LAS CONDICIONES PARA LOS ESTUDIOS 
Flebotomista 
Cuestionar gentilmente al paciente sobre el cumplimiento de las condiciones de ayuno y/o condiciones 
especiales con las que se presenta a la toma. 
Explicar al paciente de las posibles implicaciones que tendría el realizar el estudio en condiciones inadecuadas 
En caso de detectar condiciones inadecuadas para la realización de los estudios se deberá reprogramar el 
estudio a la brevedad posible. 
6.5- PREPARACIÓN PSICOLÓGICADEL PACIENTE. 
Flebotomista 
La preparación psicológica deberá ser la que se brinda para cualquier examen o procedimiento dependiendo de 
la edad, intereses, cultura y experiencias previas, con el objetivo de disminuir la tensión y angustia. 
Preparar a la madre en caso de pacientes pediátricos, que la toma de muestra se hará en una zona confortable, 
con los instrumentos necesarios de laboratorio para la toma de muestra y con el cuidado pertinente para su 
paciente. 
6.6-CONSIDERACIÓN DE LOS FACTORES QUE INFLUYEN EN LOS RESULTADOS DE ANÁLISIS 
 
 
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CLÍNICOS 
Flebotomista 
 Es de importancia tomar en cuenta los factores que afectan algunas magnitudes biológicas humanas con interés 
clínico: 
a) VARIACIONES FISIOLÓGICAS 
b) VARIACIONES IATROGÉNICAS 
c) VARIACIONES PATOLÓGICAS 
d) DEPORTISTA DE ALTO RENDIMIENTO 
e) EMBARAZO 
f) RITMO CIRCADIANO 
g) DIETAS 
h) INTERFERENCIAS POR MEDICAMENTOS. 
6.6.1 TIPOS DE AYUNO: 
a) TOTAL: Se considerara después de pasadas 12 horas de la última comida. 
b) PARCIAL: Se considera pasada de 8 horas después de la última comida 
c) MINIMO: se considera pasado de 3 horas después de la última comida. 
6.7 PROCEDIMIENTO ESPECIFICO DE TOMA DE MUESTRAS SANGUINEAS A PACIENTES 
HOSPITALIZADOS PARA PORCEDIMEINTO QUIRURGICO. 
Flebotomista, Enfermero de hospitalización 
El profesional de laboratorio hará mención al enfermero(a) de hospitalización en turno, sobre los estudios 
pertinentes a realizar antes de someter a un paciente a un procedimiento quirúrgico (estudios pre quirúrgicos) 
como está establecido en las normas oficiales y en los estatus básicos del CEMA. 
 
 
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El profesional de laboratorio proporcionara el material e insumos necesarios al enfermero(a) de hospitalización 
en turno para la adecuada toma de muestras, también le hará saber las especificaciones de toma de acuerdo a 
los estudios programados y a los requerimientos de las muestras. 
El profesional de laboratorio junto con el enfermero(a) de hospitalización en turno harán presencia en la 
habitación del paciente presentándose por su nombre completo y el puesto que ocupan en el hospital, 
posteriormente le darán una breve explicación al paciente sobre el procedimiento de canalización y toma de 
muestras para estudios pre quirúrgicos. 
El enfermero(a) de hospitalización en turno realizara las labores pertinentes para la inserción de catéter 
intravenoso periférico para canalización, con la observación de tomar la muestra de sangre en los tubos 
proporcionados por el laboratorio, esto antes de conectar al paciente al equipo de venoclisis 
Una vez obtenida la muestra sanguínea se debe conectar al paciente al equipo de venoclicis y el profesional de 
laboratorio debe homogenizar las muestras de sangre con el anticoagulante del tubo (si fuera el caso) 
Se rotularan las muestras con el estándar ya mencionado en los apartados anteriores, se hará el transporte 
hacia el laboratorio clínico para su posterior proceso. 
 
6.8- HEMATOLOGÍA 
 
La Hematología se dedica al estudio de las células sanguíneas y de la coagulación. Comprendidos en su campo 
se encuentran los análisis de concentración, la estructura y función de las células de la sangre, los precursores 
de la médula ósea, los componentes químicos del plasma o suero íntimamente unidos con la estructura y 
función de la célula sanguínea y la función de las plaquetas y proteínas que intervienen en la coagulación de la 
sangre. Las técnicas de biología molecular, de uso cada vez más generalizado, facilitan la detección de las 
mutaciones genéticas subyacentes a la alteración de la estructura y función de las células y proteínas que 
producen trastornos hematológicos. 
 
6.8.1 COMPOSICIÓN DE LA SANGRE 
 
 Células: 
 
a)Glóbulos rojos o eritrocitos 
 
 
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b)Glóbulos blancos o leucocitos 
c)Plaquetas o trombocitos 
 Plasma: 
 
a) Agua (91 -92 %) 
b) Elementos (8-9%) 
Proteínas (7%), seroalbúminas, seroglobulinas y fibrinógeno. 
Sustancias inorgánicas (0.9 %): sodio, potasio, calcio, fósforo, etc. 
Sustancias orgánicas que no son proteínas. Urea, ácido úrico, xantina, hipoxantina, creatina, creatinina, 
amoniaco y aminoácidos, además grasas neutras, fosfolípidos, colesterol y glucosa. 
Secreciones internas de las glándulas y varias enzimas como amilasa, proteasa y lipasa. 
 
El plasma, al cual se le ha extraído el fibrinógeno después de haberse formado el coágulo, se conoce con el 
nombre de suero. 
 
6.8.2 GLOBULOS ROJOS O ERITROCITOS 
 
Son producidos principalmente en la médula ósea roja de los huesos, en el bazo y en el hígado. Tienen forma 
discoidal, son anucleados, miden de 7.2 micras de diámetro 2.2 micras de espesor. Tienen alrededor una 
membrana compuesta de proteínas, lípidos simples y colesterol. El cuerpo del eritrocito tiene una malla de tejido 
de igual constitución en el que se encuentra el pigmento rojo llamado hemoglobina. La hemoglobina es una 
proteína conjugada formada por el grupo prostético HEM y la proteína GLOBINA que se encuentra dentro del 
eritrocito dando el color rojo característico al eritrocito. La característica más importante de la hemoglobina es su 
capacidad de combinarse con el oxígeno de las células; en los tejidos, la hemoglobina se combina con CO2, 
formando la carboaminohemoglobina, que a nivel de los pulmones libera CO2 que sale al exterior. 
Número de eritrocitos.- En la especie humana la cantidad normal es de 5-6 millones en la mujer. Su disminución 
es causa de anemia. 
 
 
6.8.3 GLOBULOS BLANCOS O LEUCOCITOS 
 
Tienen mayor tamaño que los eritrocitos y sí contienen núcleo. La cantidad normal de leucos es de 5,000 a 
10,000 por milímetro cúbico. Hay varios tipos de leucos: Basófilos, eosinófilos, monocitos, linfocitos, neutrófilos y 
todos ellos tienen la función de combatir las infecciones bacterianas. 
 
 
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6.8.4 PLAQUETAS O TROMBOCITOS 
 
Son de menor tamaño que los eritrocitos y no tienen núcleo. La cantidad normal de las plaquetas es de 150,000 
a 450,000 por milímetro cúbico de sangre. Tienen una función muy importante en la coagulación sanguínea. 
En resumen: las células de la sangre tienen las siguientes funciones: a) Respiración, b) Defensa del organismo y 
c) Coagulación. 
 
6.8.5 PLASMA Y SUS CONSTITUYENTES: 
 Agua: es el medio principal en el cual se llevan a cabo todas las reacciones químicas de la célula. Las 
funciones de este líquido son: hidratante, regulación de la temperatura corporal y balance hídrico. 
Elementos sólidos: 
a) Proteínas; las seroalbúminas, las seroglobulinas y el fibrinógeno mantienen la presión oncótica. Esas 
mismas proteínas (en especial las primeras) confieren la viscosidad a la sangre y, por lo tanto, 
intervienen en el equilibrio ácido-básico. Las seroglobulinas tienen actividad como anticuerpos 
(mecanismo de defensa). El fibrinógeno participa en la coagulación de la sangre. 
b) Sustancias inorgánicas: Las sales (sodio, potasio, calcio, etc.) son llevadas a las células por el plasma 
para mantener el equilibrio del medio interno. 
c) Sustancias orgánicas que no son proteínas: son producto del metabolismo celular, substancias con 
poder alimenticio. El plasma recoge los desechos metabólicos y los lleva a los riñones, la piel, y al 
intestino para su eliminación. 
d) Secreciones internas de las glándulas: El plasma se encarga de transportar las hormonas secretadas 
por las glándulas. 
 
6.8.6 RECOLECCIÓN DE ESPECÍMENES SANGUÍNEOS 
 
Recolección de muestra sanguínea: 
 
La sangre es el fluído corporal más utilizado con fines analíticos. Los tres procedimientos habituales para 
obtener la sangre son: 
 Punción cutánea 
 Punción venosa 
 Punción arterial 
 
La técnica utilizada para la obtención de muestras de sangre es fundamental para realizar correctamente el 
estudio clínico que se desea realizar. En cualquier caso; la sangre arterial y la sangre venosa se diferencían en 
 
 
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algunos aspectos que deben ser tenidos en cuenta. 
La sangre que ha sido oxigenada por el pulmón, es bombeada por el corazón hacia los órganos y tejidos para 
cubrir las necesidades metabólicas. Esta sangre arterial tiene una composición prácticamente uniforme en todo 
el organismo. Por el contrario; la composición de la sangre venosa varía según la actividad de metabólica del 
órgano o tejido per fundido por lo que la composición de la sangre venosa es diferente según el punto en que se 
extrae. La sangre venosa tiene mucho menos oxígeno que la arterial, además varía en ésta el factor pH, su 
concentración de CO2 y su hematocrito (concentración de eritrocitos en relación con el plasma). Varía también 
en ocasiones la concentración de glucosa, ácido láctico, cloro y amonio. 
La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se denomina incorrectamente sangre capilar, es una 
mezcla de sangre procedente de arteriolas, vénulas y capilares, por lo tanto, es en parte arterial y en parte 
venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace que la muestra sea más rica en sangre arterial, La sangre 
de punción cutánea también contiene sangre intersticial y líquido intracelular. 
 
 
6.8.7 PUNCIÓN CUTANEA O CAPILAR 
 
Flebotomista 
 
Es el método más utilizado en los pacientes pediátricos especialmente en los lactantes. La excesiva cantidad de 
sangre extraída mediante venopunción puede provocar anemia especialmente en niños prematuros. Por otra 
parte la punción de venas profundas en pacientes pediátricos también puede condicionar, ocasionalmente: paro 
cardiaco, hemorragia, trombosis, gangrena por constricción venosa, lesión de tejidos e infección. 
La punción cutánea resulta útil en adultos aquejados de obesidad extrema, quemaduras graves, y tendencia 
trombótica, también ese tipo de punción suele utilizarse en pacientes geriátricos. 
 
6.8.8 TECNICA DE PUNCION CUTANEA O CAPILAR 
 
Flebotomista 
 
I. Seleccionar un punto adecuado para la punción. 
En lactantes se elige por lo general la superficie plantar externa del talón. En niños de mayor edad puede 
utilizarse la superficie palmar de la última falange del segundo, tercero o cuarto dedo de la mano. Otro punto es 
el lóbulo de la oreja. La zona de punción no debe presentar edema ni haberse puncionado previamente. 
II. Calentar la zona de la punción con una compresa húmeda a temperatura no superior a los 42 C° 
Con ello se aumenta el flujo de sangre a través de arteriolas y capilares. 
III. Limpiar la zona de punción con una solución acuosa de isopropanol al 70 % 
Realizar la punción únicamente con la lanceta con cuchilla de menos de 2.4 mm de longitud para no lesionar el 
calcáneo. 
IV. Desechar la primera gota de sangre enjuagándola con una gasa estéril, regular el flujo de sangre con el 
 
 
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pulgar. No hay que realizar maniobras de “ordeñador” ya que se puede hemolizar la muestra e inducir un 
exceso de tejido hístico. 
V. Recoger la muestra en un recipiente adecuado para volúmenes comprendidos entre 1-200 microlitros. 
 Suelen utilizarse micropipetas desechables de vidrio y de extremo abierto. Existen pipetas heparinizadas. 
VI. Sellar el recipiente de una muestra introduciendo un fragmento de arcilla en cada uno de los extremos de 
la micropipeta. 
VII. Etiquetar el recipiente con la fecha, hora de extracción y datos del paciente. 
 
 
6.8.9 PUNCIÓN VENOSA 
 
Flebotomista 
 
Es el principal método de extracción sanguínea para realizar análisis clínicos. A partir de sangre sin 
anticoagulante se obtiene SUERO, si la sangre contiene anticoagulante se obtiene PLASMA, del plasma forma 
parte el fibrinógeno, sustancia de la que carece el suero. Por otra parte la separación inmediata del plasma o 
suero de las células es importante para obtener resultados óptimos en el análisis clínico. 
 
I. Identificación del paciente 
Se verifica con el paciente la real correspondencia entre éste y la etiqueta del tubo. No hay que extraer ninguna 
muestra sin identificar adecuadamente al paciente. Si el análisis que solicita requiere estado de ayuno, hay que 
verificar que el paciente se encuentre en dicho estado. 
II. Eliminar en lo posible la tensión psicológica del paciente. 
III. Selección de la vena para punción. 
Se solicita al paciente cierre el puño para que las venas resulten más palpables, seleccionando la vena más 
adecuada. Se prefieren las venas de la fosa antecubital y en particular la vena cubital interna y cefálica. También 
pueden utilizarse las venas del tobillo, de la muñeca y de lamano, si existiera un catéter intravenoso en un brazo 
se utilizará el brazo contrario para la extracción. 
IV. Hacer asepsia en el lugar de la punción 
Con una torunda embebida de una solución de alcohol isopropílico al 70% 
V. Se coloca el torniquete 
El torniquete debe aplicarse varios centímetros por encima de la zona de punción, no más de 2 minutos. 
VI. Se realiza la venopunción 
Se penetra a través de la piel con la aguja vacutainer, jeringa o mariposa según sea el caso, formando un ángulo 
de 15 grados con el brazo del paciente y con el bizel de la aguja hacia arriba. 
Hay que introducir la aguja con suavidad pero con la suficiente rapidez para evitar molestias al paciente. 
Si se utiliza jeringa, hay que tirar el émbolo hacia atrás en la medida de la sangre va fluyendo. No deben 
realizarse movimientos con rapidez excesiva ya que la sangre puede hemolizarse o colapsarse la vena. 
VII. Cuando la sangre comienza a fluir se puede retirar el torniquete. 
 
 
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VIII. Una vez que se ha extraído la muestra hay que indicar al paciente que relaje su puño, colocando 
suavemente sobre el punto de punción una torunda embebida en alcohol isopropílico al 70 % y retirar la 
aguja. Es de suma importancia retirar la aguja de la jeringa antes de vaciar la sangre a los tubos para 
evitar hemólisis. 
 
 
 
 
6.8.10 PUNCIÓN ARTERIAL 
 
Flebotomista 
 
La sangre arterial se utiliza para medir la tensión del oxígeno y dióxido de carbono, así como para establecer el 
pH. Las determinaciones de gases en la sangre (gasometría) son fundamentales para el estudio de los 
problemas de oxigenación que se producen en las enfermedades como la neumonía, la neumonitis, la 
insuficiencia respiratoria y la embolia pulmonar. 
Las punciones arteriales son técnicamente más difíciles y de mayor riesgo clínico que las punciones venosas, en 
este manual no se menciona el procedimiento ya que el servicio de laboratorio clínico no lleva a cabo dicho 
preoceso. 
 
6.9 MANEJO Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS SANGUINEAS OBTENIDAS 
Flebotomista 
Toda muestra de sangre debe manipularse con guantes y transportarse en contenedores con tapa, 
especialmente diseñados y destinados sólo para ese propósito. Jamás debe transportarse una muestra dentro 
de un bolsillo o en la mano. 
Los frascos (tubos) de sangre, para Hemograma, pruebas Bioquímicas, Inmunológicas y otras deben venir 
correctamente tapados con su tapón de goma o plástico, y dispuestas en gradilla, de modo de mantenerse 
vertical. 
En el caso de muestras de origen cutáneo (capilares) deberán ser depositadas en el recipiente adecuado (micro 
placas), para su inmediato procesamiento. 
Una vez obtenidas las muestras que se han considerado dentro de los parámetros correspondientes, se 
efectuará el proceso de las mismas. 
 
 
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6.10- PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO PARA EL PROCESAMIENTO DE MUESTRAS SANGUINEAS 
LABORATORISTA 
 Se utilizará el método de centrifugación para la obtención de suero o plasma. 
 Separar el suero o plasma en alícuotas previamente identificadas con los datos correspondientes. 
 Las técnicas a seguir para el procesamiento y obtención de resultados se establece en los MANUALES 
DE OPERATIVOS proporcionados por el proveedor de equipos con clave: 
TZS5+1-MO-VDT6011-DTSCII-DTSE (manual de operaciones equipo VITROS DT60II) 
TZS5+1-MO-SKX-21N. (manual de operaciones equipo SYSMEX KX-21N) 
TZS5+1-MT-GS-FCP-001 
 
6.11 HEMATOCRITO (Hto) O VOLUMEN CELULAR COMPACTO (VCC) O VOLUMEN DEL PAQUETE 
CELULAR (VPC) 
 
6.11.1 FUNDAMENTO: 
Se basa en la centrifugación de la sangre total para medir el espacio que los eritrocitos ocupan con el de sangre 
total para medir el espacio que los eritrocitos ocupan, es decir que el hematocrito de una muestra de sangre es 
la relación del volumen de eritrocitos con el de sangre total. Indica la masa total de rojos. 
 
MUESTRA: Sangre total con (EDTA) o sangre capilar. 
 
 
 
6.11.2 MICROMÉTODO 
 
Técnico laboratorista 
 
MATERIALES: 
a). Sangre con anticoagulante 
b). capilares 
c). Encendedor o mechero 
 
 
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d). centrífuga para capilares 
e). Regla o equipo para lectura de micro hematocrito. 
 
 PROCEDIMIENTO: 
a). Homogeneizar la muestra 
b) llenar el capilar (3/4 partes de la capacidad del capilar).Se sella el extremo vacío. Los tubos llenos se colocan 
en los canales o surcos radiales del aparato de centrifugación con el extremo cerrado dirigido hacia afuera. 
c). limpiar con gasa o papel 
d) centrifugar a 12,000 r.p.m. durante 5 min, a menos que el hematocrito exceda del 50%, en este caso se 
centrifuga durante 5 min adicionales, con el objeto de asegurar que se ha reducido al mínimo la cantidad de 
plasma atrapado 
e). leer inmediatamente. Los tubos capilares no están graduados. La longitud de toda la columna de eritrocitos 
solo debe medirse en cada caso con una regla milimetrada 
f). el resultado se expresa en % 
 
NOTA: para hacer la medición se coloca con el extremo inferior de la columna de sangre en la línea 
correspondiente al 100 y el plasma a 0. 
 
6.11.3 MACROMÉTODO DE WINTROBE 
 
 Técnico laboratorista 
 
MATERIALES: 
a). Sangre con anticoagulante 
b). tubo de wintrobe 
c). pipeta Pasteur 
d). centrífuga 
 
 PROCEDIMIENTO 
a). Se homogeneiza la muestra 
b) Se llena el tubo de wintrobe. A medida que se va llenando el tubo, eleve la punta de la pipeta, pero 
manténgala por debajo del menisco de sangre con el objeto de evitar la formación de burbujas. 
C. Se centrifuga 30 min a 3000 r.p.m. 
d). Se mide la escala de la derecha 
e). se multiplica por 12 
 
 
 
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: 
 
 
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AUMENTADO: anemia que puede ser originada por destruccióncelular, pérdidas directas, cirrosis, insuficiencias 
cardiacas. 
DISMINUIDO: Policitemia o poliglobulia. Puede estar causada por un aumento de la producción medular en 
forma primaria (policitemia vera) o secundaria a enfermedades sistémicas (altura, enfermedades pulmonares, 
enfermedades cardiovasculares), deshidratación, quemaduras, insuficiencia respiratoria crónica. 
 
CAUSAS DE ERROR 
 Tiempo y velocidad alteran los resultados 
 Fugas al no tapar bien 
 Hemoconcentración de muestra por extracción dificultosa, compresión excesiva, deshidratación y/o 
pérdida de líquidos 
 Hemolisis de la muestra 
 No homogeneización de la muestra 
 Inclusión en la lectura de la capa de blancos 
 
6.12 CONTEO DE GLÓBULOS ROJOS 
 
FUNDAMENTO 
 
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos 
manuales. 
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: 
 Dilución de la sangre 
 Muestreo de la sangre diluida en un volumen 
 Recuento de células en ese volumen 
 
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un 
fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el 
porcentaje de éstas que son viables. 
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple 
cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que utiliza la cámara de 
Neubauer 
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en una proporción exacta. 
Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña colocada en la cámara de Neubauer, contando 
el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el 
número total. 
 
 
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Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de recuento, una pipeta 
diluidora y un microscopio. 
 
Técnico laboratorista 
 
 MATERIAL 
 Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja) 
 Equipo para venopunción (Tubo lila) 
 Boquilla roja 
 Tubo de plástico 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 Gasas 
 
SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Liquido de Hayem 
 
PROCEDIMIENTO 
 
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es 
recogida en un tubo lila con EDTA 
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta 
 
 
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3. Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/200, y si se 
carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la 
marca, se puede absorber con gasa el excedente 
 
4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (Hayem) y llenar de líquido de dilución hasta 
la marca de 101 
 
 
 
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5. Se tapa la punta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-3 
minutos 
 
6. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la 
cámara para que por capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten 
 
 
7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. Luego con el objetivo de 40x contar sobre el 
cuadro grande central de la cámara solo en 5 cuadrados pequeños: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos 
del total) 
 
 
8. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e 
izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho. 
 
 
 
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 Cámara de Neubauer, 10x 
 
El rayado de la cámara de Neubauer cubierta de miles de eritrocitos, que destacan por su forma redonda y gran 
cantidad. 
 
Cámara de Neubauer, 40x 
 
Enfocando el cuadro central de los cuadros pequeños, se aprecian claramente los 16 cuadritos pequeños donde 
se tienen que contar los eritrocitos que hay en ellos. 
 
 RESULTADOS 
 
Los recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso serían número de células por 
unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar los hematíes de los 5 cuadrados pequeños, se suman y con dicha cantidad de hace el 
siguiente cálculo: 
 
N° de hematíes x mm3 = altura x dilución x área 
N° de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000 
N° de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000 
 
En el análisis hecho, el número de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000 daba como resultado 4 
910 000/mm3, lo que indica un índice normal pues el paciente era una mujer de 11 años de edad. 
 
6.12.1 Valores de referencia 
 
 
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(Millones de células/mm3) 
Hombres:………………………………..4 500 000-5 500 000 
Mujeres:…………………………...…….4000 000-5 000 000 
Niños (4 años):……….........................4 200 000-5 200 000 
Lactantes (1-6 meses):....…………….3 800 000-5 200 000 
Recién nacidos:………………………..5 000 000-6 000 000 
 
 
El líquido de dilución no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles, sino que también permita 
identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no son de interés en este momento. En general se 
puede usar cualquier solución isotónica como diluyente y pueden ser: 
 
 Soluciones de Gower 
 Soluciones de Dace 
 Solución salina de NaCl al 0.9% 
Liquido de Hayem, el cual está formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada para 
un litro. Este último es el más usado.Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de 
recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. 
Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en 
las áreas coloreadas de azul. 
 
 
Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central con el condensador bajo y 
luz débil. 
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo, 
contando las células en cada cuadro, en barrido o fila. 
 
 
 
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6.13 DETERMINACIÓN DE LEUCOCITOS 
 
FUNDAMENTO 
 
Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos 
manuales. 
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: 
Dilución de la sangre 
Muestreo de la sangre diluida en un volumen 
Recuento de células en ese volumen 
 
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que corresponden a los campos 1, 3,7 
y 9. 
Para su dilución, se hace lo mismo que para los hematíes pero empleando la pipeta de blancos, de modo que la 
solución que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el líquido de Turk. El líquido de Turk es hipotónico 
de modo que se destruyen los hematíes y así no entorpecen en el recuento. 
El líquido de Turk consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana disolución de 1% 1ml y agua destilada 
en cantidad suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse a menudo para evitar levaduras y hongos. 
En un principio es un poco difícil distinguir los leucocitos de los restos de membranas de los hematíes 
hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son más refringentes (más brillantes) al moverlo con el 
microscopio que los restos de hematíes. Se debe observar la presencia de la membrana citoplasmática y de la 
membrana nuclear (a veces más) como líneas finas y brillantes. Esto se observa fácilmente moviendo el 
microscopio hacia delante y hacia atrás 
 
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MATERIAL 
 Pipeta de Thoma para glóbulos blancos (perla blanca) 
 Equipo para venopunción (Tubo lila) 
 Boquilla blanca 
 Tubo de goma 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 
 
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 Gasas 
 
SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Liquido de Turk 
 
PROCEDIMIENTO 
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es 
recogida en un tubo lila con EDTA 
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta 
 
3. Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpiar la 
punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente 
 
4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk) y absorber hasta la marca 
11, no deben quedar burbujas. 
 
 
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5. Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar 
manualmente de 2-3 minutos 
 
6. Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca. 
7. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la 
cámara para que por capilaridad se llene exactamente. 
 
8. Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten 
 
 
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Dr. José María Busto Villarreal 
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Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
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9. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. Y contar en los 4 cuadrados angulares. 
10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e 
izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho. 
 
 
 RESULTADOS 
Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como concentraciones, que en este caso 
serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total de ellos y con dicha 
cantidad de hace el siguiente cálculo: 
N° de leucocitos x mm3 = altura x dilución x área 
N° de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000 
N° de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50 
N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50 
 
En el análisis hecho, los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla: 
 
 
El número de leucocitos fue de 111, que al multiplicarse por 50 daba como resultado 5 550/mm3, lo que indica 
un índice normal, sin embargo apenas y supera el mínimo, pues el paciente era un hombre, de 41 años de edad. 
 
 
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Valores de referencia 
 
(Millones de células/mm3) 
Hombres y Mujeres:………………………………..5 000-10 000 
 
 
 
 
 
Existen dos grandes tipos de estos glóbulos: 
Polimorfonucleares: 
· Basófilos 
· Eosinófilos 
· Neutrófilos 
Mononucleares: 
· Linfocitos (células T y células B) 
· Monocitos 
El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre completa. La cuantificación o 
recuento de leucocitos es muy importante para el diagnóstico de enfermedades. 
Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a: 
· Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización anormal). 
· Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico). 
· Enfermedad del hígado o el bazo. 
· Radioterapia o exposición a la radiación. 
Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a: 
 Anemia. 
 Tumores de la médula ósea. 
 Enfermedades infecciosas. 
 Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia). 
 Leucemia. 
 Estrés emocional o físico intensos. 
 Daño tisular (por ejemplo, quemaduras). 
 
 
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Es muy importante comentarle al médico acerca de cualquier medicamento que se esté tomando, incluyendo 
productos de venta libre. Ciertos fármacos pueden interferir con los resultados del examen, como Sulfonamidas, 
Alopurinol, Ácido acetilsalicílico (aspirina), cloroformo, corticosteroides, epinefrina, heparina, quinina o 
triamtereno 
 
La cámara de Neubauer o hemocitómetro es una lámina portaobjeto gruesa, en cuyo centro se hayan dos 
superficies cuadriculadas iguales, separadas del resto de la lámina por surcos y dos barras transversales algo 
más elevadas. 
Una laminilla cubreobjetos ópticamente plan, que al colocarse sobre las barras elevadas de la lámina forma una 
cámara entre el cubreobjetos y la superficie cuadriculada, teniendo una altura de 0.1mm 
 
En la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y leucocitos son diferentes, como se muestra en 
la imagen. 
. 
 
 
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6.14 PLAQUETAS 
 
FUNDAMENTO 
 
Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son 
cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero pueden tener forma esférica u 
ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de 
diámetro llamada megacariocito. 
 
Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia 
(Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguíneos lesionados, 
para formar así el trombo plaquetario o tapón hemostático. 
El líquido diluyente puede ser una solución estéril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar) y 
cloruro de sodio (31 milimolar). Este líquido se provee listo para usar y su conservación es indefinida en 
refrigerador (2 - 10° C) o puede ser también oxalato de amonio al 1%. El fundamento del método consiste en la 
producción de hemólisis por la utilización de un líquido hipotónico, y el mantenimiento de las plaquetas intactas y 
sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo. 
 
 
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MATERIAL 
 Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja) 
 Equipo para venopuncion (Tubo lila) 
 Boquilla roja 
 Tubo de goma 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 Gasas 
 Caja de Petri 
 Papel filtro 
SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Diluyente de plaquetas 
 PROCEDIMIENTO 
 
I Obtener 10 ml de sangre venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA 
II Agitar la sangre de manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante 
III Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa 
 
 
 
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IV Aforar con liquido diluyente de plaquetas hasta la marca 101 de la pipeta (Dilución 1:100) 
V Tapar los extremos con papel parafilm y mezclar durante 1 minuto 
 
VI Colocar la Cámara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematímetro sobre las 
mesetas 
VII Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cámara, depositándola entre la 
meseta y el cubrehematímetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen burbujas 
o se derrame el líquido hacia los surcos 
 
VIII Colocar la cámara de Neubauer ya cargada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro humedecido 
en agua para evitar la evaporación, dejar en reposo de 10 a 15 minutos 
 
IX Observar al microscopio contando en la cuadricula central (para glóbulos rojos) las plaquetas que aparecen 
mucho más pequeñas que los hematíes, redondas, alargadas u ovales, altamente refringentes 
X El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y está dividido en 16 cuadritos más pequeños, de tal 
 
 
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manera que el número total de estos últimos es de 400, mismos en los que se lleva a cabo el recuento de 
plaquetas. 
 
 RESULTADOS 
Los recuentos de plaquetas, al igual que los eritrocitos y leucocitos, se expresan como concentraciones, que en 
este caso serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar las plaquetas presentes en los 400 cuadritos centrales, el número obtenido se multiplica por 
el factor de dilución de la siguiente manera: 
N° de plaquetas x mm3 = No. De plaquetas contadas X dilución X 10 
Dilución: 1:100 
Este factor corresponde, para obtener los resultados por mm3 ya que el volumen de la cámara es de 0.1 mm3 
El número de plaquetas fue de 535, por lo que al realizar los cálculos quedaron así: 
No. de plaquetas = 535 X 100 X 10= 535 000 plaquetas por mm3, lo que indica un índice elevado de plaquetas. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
 
(Millones de células/mm3) 
 
Hombres y Mujeres:………………………………..150 000 - 450 000 
 
 
 
CONCLUSIÓN 
 
El recuento de plaquetas es de suma importancia y es parte del recuento celular de la sangre como prueba de 
rutina. 
El paciente con un trastorno hemorrágico, clínicamente significativo, acude al médico con algunos tipos de 
síntomas hemorrágicos, con lo que se puede indicar la parte defectuosa del mecanismo de coagulación, y dentro 
de estas causas pueden estar la cantidad inadecuada de plaquetas. 
La hemorragia de vasos sanguíneos subcutáneos en piel intacta se puede ver como petequias o equimosis. 
Cuando se encuentran equimosis en gran cantidad y sin traumatismo aparente, el trastorno se conoce como 
Diátesis Hemorrágica y puede ser producida por anormalidades en los vasos sanguíneos, por la disminución en 
el número de plaquetas o por el mal funcionamiento. 
 
La disminución de plaquetas se denomina Trombopenia o púrpura trombocitopénica y se debe a lo 
siguiente: 
· Enfermedades autoinmunitarias (el organismo produce anticuerpos contra sus propias plaquetas) 
· Aplasia medular 
· Radioterapia y quimioterapia por cáncer 
 
 
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· Leucemia aguda 
· Coagulación intravascular diseminada 
· Anemia hemolítica microangiopática 
· Hiperesplenismo 
· Púrpura trombocitopénica idiopática 
· Prótesis de válvula coronaria 
· Transfusión de sangre 
· Choque anafiláctico 
· Algunas infecciones víricas 
· Algunos fármacos 
Y el aumento se denomina trombocitosis: 
· Anemia por déficit de hierro 
· Traumatismos 
· Tumores 
· Trombocitosis esencial 
· Policitemia vera 
· Leucemia mieloide crónica 
· Tras esplenectomía 
· Enfermedad de Kawasaki 
 
 
 
6.15 FACTOR DE CRECIMIENTO PLAQUETARIO 
FUNDAMENTO 
Los F.C.P. actúan como señales celulares que se unen a receptores de membrana para activar las funciones 
celulares; son mediadores biológicos que regulan funciones esenciales en la regeneración y reparación tisular 
tisular: quimiotaxis, mitosis. 
El objetivo de la técnica que presentamos es acelerar la cicatrización y reducir el tiempo de recuperación de la 
regeneración ósea y tisular, la síntesis de hueso nuevo y la reparación de otros tejidos blandos, en las áreas en 
 
 
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las que se lleva a cabo la cirugía; mediante la infiltración de factor de crecimiento plaquetario activado. 
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 MATERIAL Y EQUIPO 
 Tubos de vacío estériles de 4.5 cc que contengan anticoagulante (citrato de sodio al 3.2%) 
 Tubo seco estéril 
 Jeringa estéril 
 Jeringa de 1 mL 
 Jeringa de 10 mL 
 Cloruro de calcio al 10% 
 Centrifuga 
 
TÉCNICA 
I. Se realiza la extracción de sangre, preferentemente con el método de vacutainer o palomita y tubos de 
vacío con citrato de sodio al 3.2%. La cantidad de sangre necesaria dependerá de las áreas a tratar; 
generalmente ésta cantidad oscila entre 6 y 8 tubos. 
Estos tubos con la sangre extraída se agitan ligeramente para formar una buena mezcla con el citrato sódico y 
evitar la coagulación sanguínea. 
II. Posteriormente se colocan los tubos en número par y simétricamente en la centrífuga durante 10 min. A 
1200 rpm a temperatura ambiente. 
III. Una vez finalizada la centrifugación, podemos observar en estos tubos, una separación de porciones que 
quedan organizadas de la siguiente manera: 
A) Una porción clara superior, que corresponde a las plaquetas. Su cantidad es variable de unos individuos a 
otros y suele ser la mitad del contenido aproximadamente. 
B) Una porción estrecha intermedia que corresponda a la serie blanca, de 1 mm de grosor aproximadamente. 
C) Una porción roja, inferior, que corresponde a la serie roja y que corresponde a un 45% del total 
 
 
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aproximadamente. 
Es importante destacar que todos aquellos tubos que después de centrifugados presentan un aspecto turbio 
deben ser desechados, ya que en ellos se ha producido una hemólisis debido a una extracción defectuosa de la 
sangre por lesión del vaso sanguíneo, lo que produce una liberación excesiva de tromboplastina tisular. 
 
Utilizaremos la porción superior, correspondiente a la serie plaquetaria, la cual dividiremos en 3 fracciones 
iguales que numeramos de 1 a 3 comenzando por la parte superior, es decir por lo más lejana a la serie roja. 
Cada una de estas fracciones suele suponer un total de 0.5 a 1 cc. 
Fracción 1: fracción superior: Es las más pobre en plaquetas y por consiguiente también pobre en factores de 
crecimiento; los definimos como P.P.G.F.(plasma pobre en plaquetas) 
Fracción 2: tercio intermedio: Presenta una porción de plaquetas muy similar a la que existe en la sangre 
periférica y la definimos como P.G.F.(plasma con factores de crecimiento) 
Fracción 3: tercio inferior: Se encuentra intermediamente por encima de la serie blanca. Corresponde la 
porción más rica en plaquetas y por tanto enfactores de crecimiento plaquetario, y lo definimos como P.R.G.F 
(plasma rico en factores de crecimiento). 
IV. A continuación separaremos el plasma obtenido en estas tres fracciones; con una jeringa estéril 
extraemos la primera fracción o tercio superior (fracción 1), de aproximadamente cc. Esta porción es rica 
en plaquetas y factores de crecimiento, por lo cual, no la utilizaremos. 
V. Posteriormente tomaremos la fracción 2 y con la pipeta la pasamos a un tubo estéril y a continuación la 
fracción 3, que es la parte más rica en plaquetas y factores de crecimiento que pasamos también al tubo 
estéril. 
VI. Una vez obtenidas las fracciones 2 y 3 (P.G.F. Y P.R.G.F) se produce a la activación de fibrinógeno. Por 
ello se añaden en la jeringa de 1 mL 0.05cc de Cloruro de Calcio al 10% por cada 1 cc de plasma rico en 
plaquetas y factores de crecimiento. 
VII. Se procede a juntar ambos componentes en la jeringa de 10 mL. 
 
 
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VIII. El médico realiza la infiltración, con una asepsia previa a la zona afectada 
 
6.16 GRUPO SANGUÍNEO 
FUNDAMENTO 
 El sistema de grupo sanguíneo ABO, descubierto y descrito por primera vez por Landsteiner, von De Castello y 
Esturli en 1901, consta de cuatro grupos principales: A, B, AB Y O. El grupo ABO de un individuo esta en gran 
parte determinado por la herencia de los genes. 
Un individuo adulto normal cuyos glóbulos rojos carezcan de antígenos A, B, tiene los anticuerpos 
correspondientes en el suero. 
Estos anticuerpos pueden ocasionar reacciones hemolíticas postransfusionales grave, por lo que se requiere 
que tanto los glóbulos rojos del receptor de la transfusión como del donante sean debidamente analizadas en lo 
que se refiere a la presencia de antígenos A y B. 
Técnico laboratorista 
 
MATERIAL 
 Porta objetos limpio 
 Aplicadores de madera 
 Muestra: suspensión de hematíes en suero, plasma o sangre capilar, en este caso se utilizará lanceta 
estéril para su obtención 
 Reactivos de grupo sanguíneo a temperatura ambiente: Anti-A, Anti_B, Anti_AB y Anti_D (RH) 
 
TÉCNICA 
Laboratorista 
 
I. Preparar la suspensión de hematíes (muestra con anticoagulante EDTA) u obtenerla por punción 
cutánea con lanceta estéril. 
II. Depositar la muestra en un portaobjetos identificado 4 gotas separadas 
 
 
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III. Depositar el reactivo a un lado de la gota de muestra: Anti-A, Anti_B, Anti_AB y Anti_D (RH) 
respectivamente 
IV. Mezclar con el aplicador la muestra y el reactivo cuidando no mezclar entre gota y gota. 
V. Dejar agitar y leer macroscópicamente después de 4 min sobre una luz difusa y no confundir las 
fibras de fibrina con aglutinación. 
 
 
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS 
 
Positivo: La aglutinación constituye un resultado positivo y dentro de las limitaciones aceptadas para el 
procedimiento de la técnica, indica la presencia apropiada de antígeno ABO en los hematíes. 
Negativo: La ausencia de aglutinación de hematíes constituye un resultado negativo y dentro de las limitaciones 
aceptadas para el procedimiento de la técnica, indica la ausencia del antígeno apropiado en los hematíes. 
 
GRUPO DIRECTO FENOTIPO 
 
A B AB ABO 
+ 0 + A 
0 + + B 
+ + + AB 
0 0 0 O 
 
6.17 DETERMINACION DEL TIEMPO DE PROTROMBINA 
FUNDAMENTO 
El proceso de coagulación se desencadena mediante la incubación del plasma con cantidades óptimas de 
tromboplastina y calcio; se mide el tiempo trascurrido hasta la formación del coágulo de fibrina. El reactivo 
Thromborel se utiliza para la determinación del tiempo de protrombina (Tp) según Quick y junto con los 
correspondientes plasmas deficientes, para la determinación de los factores de coagulació II, V,VII, Y X 
Procedimiento: 
 
 
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Pipetear en un tubo de ensayo precalentado a 37 o C 
Plasma citratado100 µL 
Incubar 1 min a 37 o C 
Reactivo de thromborel (precalentado a 37 o C) 200 µL 
Simultáneamente con la adición del reactivo poner en marcha el cronómetro o reloj del coagulómetro y 
determinar el tiempo de coagulación. 
 
 
6.18 DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA 
 
La determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada (TPT) es una prueba que se utiliza básicamente 
para la evaluación del sistema endógeno de la coagulación. 
 
Principio del método: la incubación del plasma con una cantidad óptima de fosfolípidos y un activador de 
superficie conduce a la activación de los factores del sistema endógeno de la coagulación. Al añadir los iones de 
calcio se desencadena el proceso de coagulación. A continuación se mide el tiempo trascurrido hasta la 
formación del coágulo. 
 
Técnico laboratorista 
 
Procedimiento: 
Precalentar la solución de cloruro de calcio a 37 o C 
Precalentar a 37o C 0.1 mL de Actin Reactivo durante 1 min (mezclar antes de usar) 
Precalentar 0.1 mL a 37 o C 
Mezclar e incubar durante 3 min. 
Después del tiempo incubado se agrega el cloruro de calcio se acciona el cronómetro 
 
6.19 DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA (PCR) 
 
Principio del método: La proteína C reactiva fue descrita por Tillet y Francis en 1930. Concluyeron que el 
suero de los pacientes que sufrían de alguna infección aguda precipita con un extracto no protéico de 
pneumococo llamado polisacárido C en presencia de iones calcio. 
 
 
 
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Elaboró 
 
 
 
 
Noel Ramos Islas 
Técnico Laboratorista 
Revisó 
 
 
 
 
MCD. Vicente Moreno Calva 
Director de Calidad 
Autorizo 
 
 
 
 
Dr. José María Busto Villarreal 
Director Quirúrgico CEMA 
Libero 
 
 
 
 
Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
Directora General de CEMA 
Este documento es propiedad de CEMA 
 
Técnico laboratorista 
 
Material: 
 Cronómetro