Citopatologia

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Prólogo 
 
 El presente EBOOK titulado 
“Histotecnologia Tomo I” en su 
volumen 01 es un material 
educativo que tiene como propósito 
el poder reforzar los conocimientos 
de los estudiantes participantes del 
Programa “HISTOTECNOLOGIA” 
impartido bajo modalidad a 
distancia. Es creado por la Msc. 
Daiglys García CEO de CITORUSHTC 
|Citotecnólogo Venezolana el día 16 
de mayo de 2023, con mi propio 
método de aprendizaje 
constructivista. Es importante destacar que el presente material didáctico 
se realizó utilizando como soporte la “Neurociencia Educativa” que sin 
lugar a dudas forma parte de todo el ecosistema instruccional creado para 
fomentar un aprendizaje idóneo en los estudiantes participantes del 
presente curso virtual. 
Msc. Daiglys Carolina García Carreño 
CEO|FUNDADORA CITORUSHTC 
Lima, Perú 2023. 
 
 
 
 
www.citorushtc.com 
Introducción 
La histopatología es la rama de la patología que trata el 
diagnóstico de enfermedades a través del estudio 
de los tejidos. Es el estudio de las estructuras 
tisulares para detectar posibles anomalías y en su 
caso emitir un diagnóstico. 
La histotecnología es la ciencia que estudia los 
fundamentos técnicos y el proceso de 
manipulación de los tejidos de los seres vivos 
para su análisis. Tiene como finalidad la 
preparación de tejidos para su observación en el microscopio. 
Según de donde procedan los tejidos y la finalidad se distingue entre: 
Material histológico: toda muestra de tejidos obtenidas de un individuo 
sano con el objetivo de investigar su estructura y composición 
anatomopatológica. 
Material anatomopatológico: toda muestra procedente de un individuo 
enfermo con el objetivo de investigar la etiología de la enfermedad y dar 
un diagnóstico. 
Estudios citohistológicos vitales, supravitales postvitales 
Estudios citohistológicos vitales: se realizan sobre células o tejidos vivos 
sin que hayan sido separados del ser que los contiene. 
Estudios citohistológicos supravitales: los realizados sobre células o 
tejidos vivos pero separados del organismo del que proceden. Para teñir 
las células se utilizan colorantes con cierto grado de compatibilidad con el 
metabolismo celular, como el azul de metileno y el azul tripán. 
Estudios citohistológicos postvitales: los realizados sobre células muertas 
en estado natural. 
Concepto de biopsia y de pieza quirúrgica 
Una biopsia es la extracción de una pequeña porción de tejido vivo para 
su examen microscópico o cultivo con la finalidad de llegar a un 
diagnóstico. 
 
Biopsia convencional 
Es el estudio de una porción de tejido que antecede temporalmente al 
tratamiento quirúrgico de resección definitiva de una lesión, esto permite 
realizar un estudio con medios menos rápidos y aplicar todas las técnicas 
específicas que sean necesarias según el tipo de tejido. 
 
Se distinguen dos tipos de biopsias: 
Biopsia diagnóstica: son piezas de pequeño tamaño que no suelen 
contener la totalidad de la lesión, requieren un procesamiento rápido ya 
que su diagnóstico depende el tratamiento a seguir por el clínico. 
Piezas quirúrgicas: son de mayor tamaño y suelen contener la totalidad 
de la lesión e incluso órganos enteros en ocasiones. Son obtenidas por 
cirugía, aunque se hace esencial su estudio para confirmar el presunto 
diagnóstico, establecer su pronóstico y posterior tratamiento. 
Estudio macroscópico de biopsias y piezas quirúrgicas 
Comprenden un conjunto de métodos estructurados y sistemáticos para 
cada muestra. El técnico debe conocer los aspectos generales del proceso. 
Describir exactamente el tipo de material remitido para estudio, incluidas 
las dimensiones y las lesiones, morfológicas, aspecto, cloración y sus 
relaciones con las estructuras vecinas en caso de piezas quirúrgicas. 
Seleccionar detalladamente las áreas sobre las que va a realizarse el 
estudio microscópico. Este proceso se denomina muestreo o tallado del 
material y lo realiza el facultativo. 
Biopsias extemporáneas o intraoperatorias 
Son las que vienen directamente de la operación y a las que hay que dar 
una respuesta inmediata. No tenemos que fijar la pieza y la tenemos que 
mantener en ciertas condiciones para tener todas sus estructuras en una 
situación lo más parecida a su estado normal. Estas piezas se congelan 
rápidamente y se cortan en el criostato a -20o por congelación. Esto se 
hace para dar a la pieza una consistencia susceptible de ser cortada en 
secciones de orden de 10-15 micras. 
Tras la obtención del corte se fija rápidamente en metanol y se procede 
a una tinción rápida con hematoxilina-eosina, para ser observada por el 
patólogo al microscopio y emitir un diagnóstico. 
Métodos de extracción del tejido 
Biopsia de aguja: la muestra se obtiene mediante una jeringa, 
introduciendo la aguja en el tejido a estudiar y extrayendo las células para 
investigarlas. 
Dependiendo de la ubicación de la lesión, esta biopsia por punción se 
puede llevar a cabo gracias a la orientación por tomografía 
computarizada. 
Biopsia de cielo abierto: se realiza una incisión en la piel para que el 
órgano quede expuesto y a continuación se extrae la muestra del tejido. 
Biopsia cerrada: se realiza una incisión más pequeña que en la biopsia de 
cielo abierto, con la finalidad de insertar un dispositivo de visualización 
para guiar a la toma de muestras. 
 
Concepto de preparación histológica, extensión citológica e impronta 
Preparación histológica: consiste en una muestra de tejido dispuesta para 
su observación microscópica. Es una muestra de pequeño calibre de 3 o 
4 micras, que ha sido seccionada mediante el micrótomo de un bloque o 
masade tejido incluido en un medio homogeneizado y teñido. Esta lámina 
de tejido se adhiere mediante un pegamento especial a un portaobjeto y 
se cubre. 
Extensión citológica: es un conjunto de células procedentes de un tejido 
y extendidas sobre un portaobjetos en forma de capa unicelular que 
permita su observación microscópica. Si el material corresponde a sangre 
se denomina frotis sanguíneo. 
Impronta: cuando de un órgano podemos obtener una capa unicelular 
sobre el portaobjetos por contacto directo de este con la superficie de 
sección de un órgano. 
 
 
Petición de la muestra y transporte Petición de estudio histopatológico 
El proceso de estudio histopatológico comienza con la petición de dicho 
estudio. La petición requiere la identificación correcta de la muestra, 
asociándola con el paciente correcto. Desde el servicio donde se pide la 
petición, se imprimen etiquetas de identificación del paciente con código 
de barra con el número de historia clínica. Desde el quirófano se generan 
muestras para envío a Anatomía Patológica, cada envase va asociado a 
una petición electrónica. La muestra bien etiquetada será transportada 
desde el quirófano o la consulta hasta el Servicio de Anatomía Patológica, 
esta muestra irá acompañada del papel de petición del estudio 
histopatológico. 
La falta de identificación de la muestra será motivo suficiente para que 
no sea aceptada en el Servicio de Anatomía Patológica. En casos 
excepcionales se puede identificar el recipiente directamente con 
rotulador de tinta indeleble, con los siguientes datos como mínimo: 
• Filiación del paciente. 
• Nombre y apellidos del paciente. 
• No de historia clínica. 
Si se va remitir más de un recipiente del mismo paciente, se indicará el 
órgano o tipo de muestra que contenga en el lateral de cada recipiente. 
Si el recipiente con la muestra contiene formol, se aconseja indicar en el 
recipiente y/o en la hoja de petición, la hora en que se introdujo la 
muestra en el fijador. 
 
Recomendaciones para evitar errores en la identificación del recipiente: 
En el caso de enviarse la muestra con fijador, la etiqueta se aplicará en 
el recipiente una vez esté este rellenado con formol y antes de introducir 
la muestra en su interior. 
No se pondrá lasetiquetas a los recipientes ni en las hojas de petición 
hasta que se hayan retirado las correspondientes al paciente. 
 
 
Para la preparación de la muestra para el envío al Servicio de Anatomía 
Patológica se tienen en cuenta los siguientes aspectos: 
Las muestras de tejidos para biopsias no deben superar los 2cm de 
diámetro, ya que el formol no penetra en las muestras de mayor tamaño 
y en el centro de la lesión se autolisa durante el mismo transporte. 
No se envía la totalidad de la muestra para realizar un estudio 
histopatológico correcto. Si la muestra es de un diámetro superior a los 4 
cm se recomienda realizar múltiples secciones de un máximo de 2 cm de 
grosor que sean representativos de la lesión e incluyan márgenes de 
extirpación. 
Se recomiendan envases de plásticos para muestras de orina para el 
envío, cuando tenga que contener formol. 
No se introducirá las muestras a presión dentro del envase. El tejido 
pasará holgadamente por la boca del envase, pues cuando llegue al 
laboratorio ya fijado, la biopsia habrá endurecido y habrá aumentado su 
volumen entre un 10 y un 20%, y será imposible su extracción del envase. 
• Las biopsias intraoperatorias se enviarán en un frasco dentro de 
una gasa humedecida con suero salino fisiológico. La utilización de 
cualquier fijador impide la realización del estudio. 
• Otras biopsias que se envían en frasco utilizando una gasa 
humedecida en suero salino fisiológico son: 
- Ganglios y bazo con sospecha de patología primaria. 
- Biopsias con sospecha de enfermedad infecciosa. 
- Biopsias de patología funcional del riñón, se tomarán dos 
cilindros y se enviarán urgentemente para poder realizar 
estudios de inmunofluorescencia y estudio ultraestructural. 
- Biopsias de enfermedades ampollosas cutáneas, se toman 
dos punch de periferia de la lesión. Uno se envía en formol y 
otro en frasco para estudio de inmunofluorescencia. 
- Nervios y músculo con sospecha de patología primaria. 
- Biopsias con sospecha de enfermedades por depósito o déficit 
enzimático. 
Otras recomendaciones: 
Las piezas grandes se deterioran incluso con formol, esto es debido a que 
el formol solo penetra medio centímetro y para ello necesita casi una hora. 
Por tanto, las zonas más profundas e incluso las superficies revestidas por 
tejido como mesotelio, cápsulas y piel se lisan y quedan inutilizadas. Para 
evitar esto se debe: 
Reenviar sin fijar a Anatomía Patológica antes de media hora. 
Si no puede enviarse dentro de dicho plazo, pero sí en el plazo de 1 o 
2horas, se mantienen sin fijar envuelta en una gasa humedecida con 
suero salino fisiológico dentro del frigorífico. 
Si no puede enviarse en plazo de más de 4 horas, se introduce en 
abundante formol, que debe cubrir toda la pieza y dejar el recipiente 
dentro del frigorífico hasta su envío al servicio de Anatomía Patológica. 
Las normas básicas para el envío de biopsia al laboratorio AP son: 
• Según el tipo de estudio 
- Las muestras para estudio óptico rutinario se fijan en formalina al 10% 
en proporción 1:20 en el interior de un frasco herméticamente cerrado 
identificado mediante etiqueta identificada. 
- Las muestras para estudio intraoperatorio, remitir en frasco cubierta con 
una gasa empapada en suero fisiológico. En el laboratorio se fija y 
secciona para congelación. 
- Las muestras para estudio inmunohistoquímico, se remiten en frasco y 
en el laboratorio se congelarán con isopentano (-50oC). 
- Las muestras para estudio ultraestructural se remiten en fragmentos 
cuboidales de 3 a 5 mm en Glutaraldehído al 2.5% a 4oC. 
Según la sustancia que se vaya a preservar o identificar 
 
 
 
 
 
 
 
Transporte de la muestra 
Si es desde el quirófano el transporte lo realiza el auxiliar de 
enfermería o el celador. En caso que se manejen varias muestras o los 
recipientes sean de tamaños grandes se utilizará el carro de transporte, 
nunca se utilizará el tubo neumático para enviar las muestras de biopsias 
al Servicio de Anatomía Patológica. 
La persona encargada del transporte de las muestras biológicas 
debe conocer el riesgo del transporte de dichas muestras y observar las 
siguientes recomendaciones: 
• Toda muestra debe transportarse en contenedor cerrado y 
hermético, que no permita la salida de su contenido y también 
irrompible. 
• El contenedor de la muestra debe estar completamente limpio 
por fuera e íntegro, sin signos de roturas o fisuras. 
• Los contenedores de las muestras se transportarán siempre 
en posición vertical y debidamente protegidos. 
Las boletas deben ir aparte de las muestras biológicas. Criterios de 
rechazo de muestras: 
 Muestras sin solicitud de estudio. 
 Mala rotulación de lasmuestras. 
 Muestras no fijadas y/o en proceso de autólisis o descomposición. 
 Fijador no adecuado y/o en proporciones diferentes a lo 
establecido. 
 
 
Procesamiento de muestras, técnicas y metodología Recepción de la 
muestra en el Servicio de Anatomía Patológica 
Las peticiones deben llegar al Servicio de Anatomía Patológica 
debidamente cumplimentadas tanto de datos clínicos como de datos del 
paciente. Una vez comprobados los datos de la petición que a su vez 
correspondan con los de la muestra, se procederá a su registro o 
transcripción de datos a un libro a fin de adjudicarle un número. Este 
número acompañara a la muestra y al protocolo en todo el proceso hasta 
la emisión de su diagnóstico. 
Si se recibe una muestra se registra con los siguientes datos: 
 Nombre, apellidos, fecha de nacimiento y sexo del paciente. 
 No de la tarjeta de salud o carnet del centro. 
 No de la historia clínica. 
 Planta o servicio de procedencia. 
 Médico que la solicita. 
 Material que se remite. 
 Tipo de estudio solicitado. 
 Datos clínicos. 
 Fecha que se recibe. 
Los datos serán registrados en el ordenador y el libro de registro y 
serán impresos por duplicados en etiquetas que se adhieran al formulario 
de solicitud del examen y al recipiente de la muestra. 
La numeración debe respetar un orden secuencial. Se recomienda 
comenzar con la numeración 001 desde el 1 de enero y añadir un guion 
seguido de los dos últimos dígitos del año en curso. 
Si es para una biopsia en el informe se escribe B de biopsia, las dos 
últimas cifras del año y el número que corresponda al paciente, ej. B23-
5005. 
 En una necropsia o autopsia se pondría la A, ej: A23-505. 
 En citología se pondría la C, ej; C23-45. 
Este número será la identificación para los bloques de parafina, 
laminillas, informes, fotografías, archivos y almacenamiento de datos 
para todos los exámenes. Para el caso de pruebas especiales se pondrán 
anteponer las siguientes siglas: 
 H: histoquímica. 
 IHQ: inmunohistoquímica. 
 IC: inmunocitoquímica. 
 IF: inmunofluorescencia. 
 ME:microscopía electrónica. 
En biopsias, al recibirlo y una vez registrado se lleva a la sala de 
tallado o macroscopia. 
Si no se va a procesar la muestra remitida de inmediato, se mete 
en el frigorífico. 
Antes del tallado o descripcion macroscopica, en la hoja de trabajo 
se escribe el nombre del patólogo y el número de inscripción. 
Las peticiones vienen acompañadas del material. Los líquidos y 
aspirados se reciben en tubitos de diferentes tamaños, habitualmente en 
fresco. Las piezas quirúrgicas se reciben en frascos de diferentes tamaños 
sumergidas en fijador, salvo en casos específicos que vienen en fresco. 
En necropsia se eviscera, cada trocito de órgano se mete en un frasco con 
su correspondiente fijador. 
 
Sala de estudio de Descripción Macroscópica 
Las tareas de estudio macroscópico y tallado de biopsias se realizan 
en una sala habilitada para este fin. Esta sala cuenta con las siguientes 
infraestructuras mínima: 
• Área de disección y muestreo: 
• Campana de extarccion 
• Estantería para almacenar los recipientes que contienen el 
material. 
• Material quirúrgico; bisturíes, cuchillo, tijeras y pinzasde 
diferentes tamaños, sondas metálicas y plásticas, etc. 
• Cinta métrica y balanza para medir y pesar el material. 
• Numerosas cestillas metálicas o de plástico con tapa para el 
procesamiento del material. 
• Sistema para la numeración automática de los cassettes o 
cestillas de inclusión, en su defecto, material para el 
etiquetado o marcaje de las muestras. 
• Sistema de dispensación de formalina neutra o tamponada al 
10% a ser posible conectado a los puestos de prosección. 
• Soluciones de otros fijadores como B5, líquido Carnoy, líquido 
de Bouin,etc. 
• Sistema de fotografía macroscópica y radiografías. 
• Sistema de refrigeración a 4oC y congeladores. 
 
 
Preparación de la muestra 
Muchas de las muestras son enviadas a este servicio en fresco para 
su posterior fijación, siendo tarea del técnico en colaboración con el 
patólogo responsable de la sala de estudio macroscópico, realizar la 
limpieza y aperturas de piezas grandes o huecas, e indicar el fijador a 
emplear y otras técnicas especiales. Si la muestra recibida ya se 
encuentra en líquido fijador, es necesario que el técnico compruebe que 
es el adecuado. 
Cuando se reciban piezas quirúrgicas grandes, que se requieren 
disección, fotografías, etc., se procede a tomar muestras representativas 
para la fijación inmediata y guardar en fundas plásticas en refrigeración 
a 4oC no más de 24 horas. 
Cuando se diseca una pieza quirúrgica se pueden dar estas 
situaciones: 
• Necesidad de separar cada uno de losprincipales 
componentes. 
• Remover solo algunos componentes y dejar el resto del 
espécimen como una sola pieza. 
• Fijar en bloque de pieza entera. 
Se utilizan diferentes formas, dependiendo de la forma, tamaño y 
presencia o ausencia de una cavidad en la pieza. Las vísceras huecas 
pueden abrirse en fresco o bien ser fijadas simultáneamente desde afuera 
hacia dentro mediante la inyección de formol buffer al 10% en su interior 
o llenando la cavidad con gasas y algodón empapados en fijador. En las 
lesiones quísticas, una vez extraído el contenido, se inyecta el fijador. En 
el globo ocular se confecciona una pequeña ventana para extraer el 
contenido e inyectar el fijador. 
Para el estudio macroscópico es función del técnico organizar la 
campana de tallado, distribuirá el material quirúrgico, los recipientes con 
las piezas quirúrgicas y sus peticiones, los cassettes numerados 
adecuadamente, sus tapaderas y todos los utensilios necesarios para este 
proceso: tinta china, regla, balanza, dictáfono, lupa material fotográfico, 
etc. 
Se debe procesar los cortes suficientes de las lesiones más 
representativas. La toma de los cortes se facilita cuando las piezas han 
tenido un tiempo suficiente de fijación, teniendo en cuenta lo siguiente: 
El tamaño de la muestra y el volumen del fijador. 
El espesor de la muestra y la penetración del fijador. 
El contacto del fijador con la superficie de lamuestra. 
El tipo de fijador y el tiempo de fijación. 
En la toma de muestras se incluye parte del tejido sano vecino de 
la lesión, para la búsqueda de infiltración en caso de tumores malignos. 
El tamaño de los bloques tisulares no debe exceder de 3 mm de espesor, 
3 cm de largo y 2 cm de ancho. 
En cada cassette debe colocarse los cortes tomados o muestras, 
identificados con una tira de papel. Debe escribirse con lápiz de grafito el 
número de identificación correspondiente junto con las iniciales del 
paciente y con letras y/o números los diferentes cortes que se describen 
en el protocolo macroscópico como: borde, resección, regiones 
anatómicas, etc. 
Fotografías 
Cuando el patólogo lo considere oportuno se realizarán fotografías 
de la pieza recibida. 
 Número de registro siempre con la pieza. 
 Fotografía, debe ser rápida debiendo tener preparados ya los 
focos de iluminación para que el tiempo de autólisis y putrefacción no 
llegue a darse. 
La realización de fotografías de las piezas se realiza porque: 
• Es necesario para una correcta interpretación del caso, 
disponer de una imagen en la que se observe la estructura 
completa de la pieza y sus relaciones, así como los lugares 
muestreados. 
• Complementa documentalmente lapieza, ya sea por sus 
características o con finalidad didáctica o educativa. 
El estudio radiológico de las piezas quirúrgicas proporciona 
información sobre la estructura y componentes de los tejidos en estudio. 
Los tejidos más apropiados son: hueso, masas de tejidos blandos 
calcificados, mama, válvulas cardíacas y grupo ganglionares en los que 
se realizó linfografía previa. 
 
Fundamentos generales sobre procesamiento histológico de los tejidos 
En las biopsias quirúrgica de pequeño tamaño, extensiones o 
preparaciones por frotis y piezas quirúrgicas extirpadas se ha de realizar 
un diagnóstico histológico cuyo resultado establecerá una terapéutica 
consecuente. Es por ello que la rapidez de la ejecución es más importante 
que la calidad de la preparación microscópica. 
El estudio microscópico de los órganos de cadáveres es 
indispensable para establecer un diagnóstico anatomopatológico de la 
enfermedad; en este caso las preparaciones han de ser duraderas y 
ejecutadas con una técnica impecable. 
Cuando se cortan trozos pequeños de órganos voluminosos se 
tendrá en cuenta su configuración anatómica. Los órganos que son huecos 
como el intestino, esófago, vesícula biliar, etc., conservarán unas paredes 
lisas si se rellenan con líquido. Es necesario trabajar con precaución y 
cuidado para evitar que las piezas quirúrgicas o el material a estudiar se 
sequen para ello se rociarán con suero fisiológico o se conservarán en 
nevera. 
Cuando se realiza la toma de tejido se orientarán para evitar 
cualquier equivocación. Se recomienda hacer una señal para indicar 
dónde ha de hacerse los cortes. Si la pieza se tuviera que dividir en varios 
trozos consecutivos, es recomendable hacer un dibujo o hacer marcas en 
una fotografía tomada con anterioridad. Para enumerar las piezas se 
utiliza papel apergaminado escrito con lápiz. Si queremos que los trozos 
de tejido conserven una superficie plana se colocarán sobre una placa de 
corcho fijándolas con alfileres o púas de erizo. 
En el caso de los órganos pares las muestras se cortan para su 
distinción de distintas formas: lado derecho forma rectangular, lado 
izquierdo forma triangular. Los trozos tomados de distintas regiones de 
un mismo órgano se reconocen si se cortan de distinto tamaño. 
Los cortes se hacen sobre una placa de corcho y el instrumental a 
utilizar puede ser una cuchilla de afeitar montada en un mango o un 
cuchillo afilado; de esta manera evitaremos aplastar los tejidos. 
Continuará… 
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