Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
524 Endocrinología de la reproducción, esterilidad y menopausia SECCIÓ N 2 los nucleótidos marcados para intercalarse en las roturas del DNA para posteriores cuantifi caciones. Hoy día, estas pruebas están limitadas por la falta de consenso en relación con valores de corte apropiados y por los datos confl ictivos con respecto a su capacidad para predecir embarazos exitosos. Como resultado, esta prueba está probablemente más allá de la perspectiva de la generalización, en este momento. Sin embargo, el concepto de que la integridad del DNA espermático puede verse afectada de manera adversa a través de múltiples mecanismos, brinda información útil en una causa de esterilidad masculina previamente menospreciada. Análisis de la función espermática En los últimos decenios, se ha diseñado una gran variedad de análi- sis para probar la función de los espermatozoides. Sin embargo, su valor predictivo es cuestionable, puesto que se basan en situaciones no fi siológicas y los resultados varían de manera importante entre los diversos centros de esterilidad. La mayor parte ya no se utiliza o se emplea sólo de forma intermitente. Estas pruebas se descri- ben de manera breve sólo con propósitos informativos, pero no se deben considerar como una parte importante de la valoración de la esterilidad. Análisis de fluorescencia de la manosa. Para que el esper- matozoide pueda reconocer la zona pelúcida de un ovocito, ésta debe de contener diversas proteínas y carbohidratos, incluida la manosa. Se ha demostrado que la actividad de los receptores del ligando de manosa se correlaciona con las tasas de embarazo por IVF (Benoff , 1993). Para este análisis, se modifi can los residuos de manosa en la albúmina sérica de bovino para que liberen fl uorescencia. Una mezcla de espermatozoides capacitados del paciente se combina con esta preparación fl uorescente. En un experimento paralelo, los espermatozoides de otro donador fértil se mezclan con la misma preparación fl uorescente en otra muestra. A continuación, se com- para el patrón de fi jación con el patrón obtenido en la muestra del varón fértil. Análisis de la hemizona. Este análisis es una técnica utilizada con el objeto de valorar el potencial de una muestra de esperma- tozoides para unirse a la zona pelúcida. Los ovocitos humanos se diseccionan (para evitar la fertilización) y se mezclan con esper- matozoides de la pareja o con espermatozoides de un donador fértil. El índice de la hemizona se calcula al dividir el número de espermatozoides del paciente estudiado entre el número de esper- matozoides testigos unidos y al multiplicar el resultado por 100 (Burkman, 1988). Análisis de la penetración espermática. Esta prueba se lleva a cabo mezclando espermatozoides capacitados con ovocitos de hámster. De forma típica, la zona pelúcida evita la unión entre óvulos y espermatozoides de diferente especie, por lo cual debe ser eliminada de estos ovocitos. Enseguida, se calcula el número de ovocitos penetrados por los espermatozoides. Supuestamente los es - permatozoides de un varón fértil penetran más ovocitos que los de un varón infértil (Smith, 1987b). Reacción acrosómica. Para la penetración de un ovocito es necesario que el espermatozoide sufra una reacción acrosómica, durante la cual el contenido enzimático del acrosoma es liberado mientras interactúa con la membrana del ovocito. Se pueden utilizar diversos métodos para inducir la reacción acrosómica en Estas esferas se unen a anticuerpos presentes en la muestra de espermas y la mezcla puede ser visualizada bajo un microscopio estándar. En los individuos afectados, las esferas se unen a los anticuerpos que se han unido a los espermas (fig. 19-13). Por lo común, el tratamiento incluye corticoesteroides, pero no se sabe si en realidad este método mejora la fecundidad. Además, se han noti- fi cado varios efectos adversos, como necrosis aséptica de la cadera. La información actual indica que no es necesario buscar anti- cuerpos antiespermatozoides en la valoración de un caso de esterili- dad de manera sistemática, a menos que el varón posea algún factor de riesgo específi co. Una excepción es el paciente que se someterá a IVF. En una población afectada positiva a anticuerpos, las tasas de fertilización han mejorado al utilizar inyección intracitoplásmica de esperma. Fragmentación del DNA Durante los últimos 10 años, ha aumentado el interés en relación con el aumento de la fragmentación del DNA espermático como causa de esterilidad del factor masculino (Sakkas, 2010; Zini, 2009). Aunque probablemente algún grado de daño al DNA es reparado durante la embriogénesis, la localización y la extensión de éste afecta de forma negativa las tasas de fertilización e incrementa las tasas de aborto. Los niveles aumentados del daño al DNA se asocian con edad paterna avanzada y factores externos, como taba- quismo, quimioterapia, radiación, toxinas ambientales, varicocele e infecciones del aparato genital. Los estudios han observado nive- les aumentados de especies reactivas de oxígeno en muestras de esperma con tasas anormales de fragmentación del DNA. En res- puesta a esta observación, se ha propuesto que la complementación dietética con los antioxidantes vitamina C y E puede ser benéfi ca. Sin embargo, no hay datos sobre la efi cacia de esta estrategia. Hoy día, se cuenta con una matriz amplia de estudios para ana- lizar la integridad del DNA e incluye el análisis de estructura de cromatina espermática (SCSA, Sperm Chromatin Structure Assay) y al análisis terminal de desoxitransferasa mediado por marcado de dUTP de extremo terminal (TUNEL, dUTP nick-end labeling). El SCSA se basa en la susceptibilidad aumentada del DNA con roturas de cadena sencilla o de doble cadena al desnaturalizarse en ácidos débiles. El análisis de TUNEL explota la capacidad de Esfera Esfera Esfera Espermatozoide móvil Anticuerpo contra IgA humana Anticuerpo unido al espermatozoide Reacción de las inmunoesferas FIGURA 19-13. Las esferas inmunorreactivas se unen a los esperma- tozoides que llevan anticuerpos. 19_Chapter_19_Hoffman_4R.indd 52419_Chapter_19_Hoffman_4R.indd 524 06/09/13 21:1406/09/13 21:14 GINECOLOGÍA������������������������������������������������� SECCIÓN 2 ENDOCRINOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN (...)������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 19. VALORACIÓN DE LA PAREJA ESTÉRIL������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� VALORACIÓN DE CIERTAS CAUSAS DE ESTERILIDAD������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� CAUSAS DE ESTERILIDAD EN EL VARÓN������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ANÁLISIS DE LA FUNCIÓN ESPERMÁTICA����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������
Compartir