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236 ESTUDIO Y CARACTERIZACIÓN MICROSCÓPICA DE LA LÁMINA UNGUEAL EN RELACIÓN CON SU CONSISTENCIA Mingorance Álvarez, Esther Este trabajo se enmarca en el Departamento de Anatomía, Biología Celular y Zoología y se ha desarrollado en el seno del grupo de investigación Desarrollo Embrionario, Diagnóstico Molecular y Afecciones del Pie DEDAP (CTS020) siguiendo la línea de investigación: “conocimiento y patología de la uña”. 1. Introducción Se define la lámina ungueal o comúnmente uña, como una placa de células queratinizadas, duras y densamente empaquetadas que se encuentra en la parte distal de los dedos de las manos y de los pies a los cuales protege (de-Berker, 2013). Es una de las estructuras que componen el aparato ungueal. Surge de la matriz ungueal, que es la zona germinativa de la uña y que se encuentra debajo de la porción proximal de la lámina ungueal. Esta lámina se asienta sobre el lecho ungueal y está rodeada de unos pliegues de la piel: repliegues proximal y laterales. La piel que subyace bajo el borde libre de la uña se denomina hiponiquio y es contigua a la piel de la yema del dedo (Alonso, 2007). Entre las funciones propias de la lámina ungueal se describen: la protección de los dedos frente a traumatismos, facilitar la regulación de la circulación periférica (McCarthy, 2004) y favorecer la sensación propioceptiva a través de la contrapresión. Las uñas de los pies son especialmente importantes porque protegen las estructuras neurovasculares del dedo y amplían la superficie de apoyo de los dedos durante la marcha (Samman, 1978). Estas funciones están íntimamente determinadas por la composición química y las propiedades físicas de la lámina ungueal. Químicamente, la uña se compone de queratina que es una proteína filamentosa almacenada en el citoplasma de los onicocitos (Gniadecka, Nielsen, Christensen y Wulf, 1998). El contenido en agua de la lámina ungueal es de aproximadamente el 18%. Sin embargo, este porcentaje puede variar de manera significativa debido a su alta porosidad. Así, si el contenido en agua desciende por debajo del 18%, la uña se vuelve quebradiza, y si supera el 30%, se torna opaca y blanda. El contenido lipídico es inferior al 5%, 237 el de azufre está en torno al 4% y también se han detectado trazas de calcio, magnesio, zinc, hierro y cobre (Runne y Orfanos, 1981). La lámina ungueal se caracteriza físicamente por ser dura, resistente y flexible (Goldmith et al., 2014). La dureza y la resistencia se deben a su alto contenido en queratinas duras o tricoqueratinas capaces de entrelazarse entre sí mediante puentes disulfuro (Gniadecka et al., 1998), a la disposición y la adhesión de los onicocitos en las diferentes porciones de la lámina ungueal (Runne y Orfanos, 1981), así como a la orientación de los filamentos de queratina en cada capa: dorsal, intermedia y ventral (Farren, Shayler y Ennos, 2004). Su flexibilidad depende de su contenido acuoso y aumenta con la hidratación de la lámina ungueal (Finlay, Frost, Keith y Snipes, 1980). El objetivo principal del presente trabajo es realizar una prueba para analizar la utilidad de la Microscopía Electrónica de Barrido (MEB) y de la técnica de espectroscopía de energía dispersiva de rayos X (EDS) en el estudio de la ultraestructura y composición de la lámina ungueal atendiendo a su consistencia. 2. Metodología Este trabajo cuenta con el registro del Comité de Bioética de la Universidad de Extremadura (Reg. 116/2016) además del consentimiento informado de todos los participantes. La prueba se realizó sobre una muestra de 10 individuos (6 hombres y 4 mujeres) pertenecientes a tres franjas de edad distintas: adultos (55±1.2), jóvenes (22±2.6) y adolescentes (15±1.5). El 40% de los participantes presentó uñas de consistencia dura, el otro 40% uñas de consistencia blanda y el 20% restante uñas inmaduras. La determinación de la consistencia ungueal se realizó in vivo, presionando manualmente sobre los bordes de la lámina en el eje lateral-medial y dorso-ventral, tras haber atemperado el pie durante 15 minutos, según la metodología previamente descrita (Pérez-Pico, Verjano y Mayordomo, 2017). Las muestras de láminas ungueales se tomaron con la misma herramienta de corte preservando la integridad de la banda onicodérmica. Posteriormente, se procedió a su lavado por inmersión en baño de ultrasonido para eliminar las células de piel adheridas, fibras y otros restos bajo la lámina. Las muestras se almacenaron hasta su posterior análisis. El análisis ultraestructural se realizó a MEB y en condiciones de alto vacío, observando la superficie dorsal de las muestras. El análisis elemental se realizó mediante una técnica analítica semicuantitativa basada en la captación de electrones dispersados, en condiciones de bajo vacío MEB-EDS. La superficie analizada fue la opuesta al borde libre de cada muestra, es decir, el análisis se llevó a cabo 238 sobre la superficie obtenida mediante la herramienta de corte, y consistió en un triple análisis: en la capa dorsal, intermedia y ventral de cada lámina ungueal. 3. Resultados preliminares En lo referente a la ultraestructura, las células del dorso de las láminas ungueales de consistencia dura mostraron abundantes interdigitaciones y pocos poros y canalículos en comparación con las láminas de consistencia blanda, en las que se aprecian células menos interdigitadas y con mayor presencia de poros y canalículos (Imagen 1 A y B). La superficie dorsal de las láminas inmaduras pertenecientes a adolescentes presentó características más próximas a las láminas de consistencia blanda que a las de consistencia dura. Imagen 1. SEM y MEB-EDS. Fuente: Elaboración propia. A: microfotografía electrónica de barrido de lámina de consistencia dura; B: microfotografía electrónica de barrido de lámina de consistencia blanda; C: espectro EDS y cuantificación del microanálisis. En cuanto al análisis elemental realizado sobre cada una de las tres capas de la lámina ungueal, se identificaron un total de 12 elementos: carbono, nitrógeno, oxígeno, sodio, magnesio, aluminio, silicio, fósforo, azufre, cloro, potasio y calcio (Imagen 1 C). Los más abundantes tanto en porcentaje en peso como en porcentaje atómico fueron: el carbono, el oxígeno, el nitrógeno y el azufre, con independencia de la consistencia ungueal. El resto de los elementos, de estar presentes en la muestra, se encontraron con porcentajes inferiores al 0.6%. 4. Conclusiones Pese al bajo número de muestras procesadas, la técnica MEB permite observar diferencias ultraestructurales en función de la consistencia ungueal. A B C 239 La técnica MEB-EDS permite identificar, además de los 4 elementos mayoritarios, hasta 8 elementos minoritarios en todas las capas analizadas. Tanto la técnica MEB como la MEB-EDS son herramientas útiles en el estudio de la ultraestructura y composición elemental de las láminas ungueales y podrían ayudar en la determinación y caracterización de la consistencia ungueal. REFERENCIAS Alonso, D. (2007). Atlas de dermatología del pie. Madrid, España: Editorial Médica Panamericana. de-Berker, D. (2013). Nail anatomy. Clinics in Dermatology, 31(5), 509–515. Farren, L., Shayler, S. y Ennos, A. R. (2004). The fracture properties and mechanical design of human fingernails. Journal of Experimental Biology, 207(5), 735–741. Finlay, A. Y., Frost, P., Keith, A. D. y Snipes, W. (1980). An assessment of factors influencing flexibility of human fingernails. British Journal of Dermatology, 103, 357-365. Gniadecka, M., Nielsen, O. F., Christensen, D. H. y Wulf, H. C. (1998). Structure of water, proteins, and lipids in intact human skin, hair, and nail. The Journal of Investigative Dermatology, 110(4), 393–398. Goldmith, L. A., Katz, S. I., Gilchrest, B. A., Paller, A. S., Leffell, D. J. y Wolff, K. (2014). Fitzpatrick. Dermatología en MedicinaGeneral. Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica Panamericana. McCarthy, D. J. (2004). Anatomic considerations of the human nail. Clinics in Podiatric Medicine and Surgery, 21(4), 477–491. Pérez-Pico, A. M., Verjano, E. y Mayordomo, R. (2017). Relation between nail consistency and incidence of ingrown toenails in young male runners. Journal of the American Podiatric Medical Association, 107(2), 137–143. Runne, U. y Orfanos, C. E. (1981). The Human Nail- Structure, Growth and Pathological Changes. Current Problems in Dermatology, 9, 102–149. Samman, P. D. (1978). The Nails in Disease. Londres, Reino Unido: Butterworth-Heinemann Ltd. APUNTES BIOGRÁFICOS Esther Mingorance Álvarez (Martorell, 9 de abril de 1979). Es Licenciada de Grado en Biología por la Universidad de Málaga y miembro del grupo de investigación DEDAP (CTS020). Desde hace cuatro años reside en Plasencia donde compagina el trabajo de Tesis Doctoral (Programa Modelización y Experimentación en Ciencia y Tecnología) en el Centro Universitario de Plasencia con docencia en el Grado de Podología. Contacto: emingorance@unex.es Índice: >>: >|: |<: <<:
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