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Microbiología: Introducción Bios= vida. Logos= conocimiento. Mickos= pequeño. Estudio de bacterias , hongos y virus. IMPORTANCIA DE LA MICROBIOLOGÍA: En medicina: control de las infecciones, genética, inmunología, producción de sueros y vacunas. En la agroindustria: producción de alcohol, acetona, pan y vinos. En la investigación espacial. En la guerra: (en las guerras hay mayor probabilidad de brote epidemiológicos). Marca la historia o la humanidad. La microbiología es el estudio de los microorganismos, grupo grande y diverso de organismos microscópicos que viven en forma de células aisladas o grupos de células; también comprende a los virus, que son microscópicos pero no son celulares. Los microorganismos influyen extensamente en la vida y constitución tanto física como química de nuestro planeta. Son los encargados de los ciclos de los elementos químicos indispensables para la vida, incluidos carbono, nitrógeno, azufre, hidrógeno y oxígeno; además, los microorganismos realizan más fotosíntesis que las plantas verdes. HÁBITAT DE LOS MICROORGANISMOS: En el universo externo: Suelo, aire, alimentos, en las cumbres de las montañas, en el fondo de los mares, en las aguas termales. En el universo interno: En la superficie de piel y mucosas. ORIGEN: La microbiología nace por la invención del microscopio (microbiología = microscopio). Microscopía de luz o de transiluminación: Leewenhöeck: fue el primero en observar semen en el siglo 17. Es considerado creador del microscopio. 1. Hooke: crea mejor microscopio que Leewenhöeck.2. Jensen: siglos 18 - 19.3. Malphighi.4. Stanley: en 1938 cambia el haz de luz por un haz de electrones creando el microscopio electrónico. 5. Desde 1938 a 1950 se desarrolló el primer microscopio de barrido. En microscopio normal se ve mediante oculares, en cambio, en microscopio electrónico se ve por una pantalla, para imágenes de microscopio electrónico se necesita mucha imaginación. TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA: Se decía que los animal/insectos se generaban de manera espontanea porque si se dejaba carne al aire, salían moscas espontáneamente. Readi (siglo 17): carne envuelta no genera moscas. Spallanzani (siglo 18): líquidos de fácil descomposición se mantienen incorruptos si se hervían y tapaban bien. Schwan (siglo 19): se podía hacer pasar aire pero por un tubo calentado al rojo. Pasteur (siglo 19): estabilidad de los líquidos en matraces con cuello de cigüeña. HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA: Semmelsweiss: descubre en forma empírica la importancia de la asepsia en el trabajo clínico. Postuló y logro que su equipo médico se lavara las manos y cambien la ropa antes de cada cirugía para disminuir la presencia de microorganismos durante esta. Pasteur: padre de la microbiología moderna, relacionó las bacterias con las enfermedades, vacuna de la rabia. Koch: desarrolla los medios de cultivo sólidos, descubrió el agente de la tuberculosis. Gram desarrolló la tinción que lleva su nombre. Jenner: Primera vacuna, vacuna contra la viruela. Ehrlich: teoría inmunitaria humoral. Metchnikoff: teoría inmunitaria celular. Lister: desarrolla la antisepsia en la cirugía (usaba fenol, crea suturas). Fleming descubre el primer antibiótico (penicilina). CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS: Reinos de la naturaleza. Clasificación de Wittacker ( 5 reinos): Procariota o monera: Eubacterias y arqueobacterias.1. Protista: bacterias, protozoos, algunas algas, mohos del cieno.2. Hongo: Levaduras, hongos multicelulares.3. Plantae: algunas algas, musgos, coníferas, helechos, plantas con flor.4. Animalia: esponjas, insectos, gusanos, vertebrados.5. VIRUS: Los virus carecen de muchos de los atributos de las células, incluida la capacidad de multiplicarse. Sólo cuando infectan una célula adquieren el atributo clave de un sistema viviente: la reproducción. Se sabe que los virus infectan cualquier célula, incluidas las células microbianas. Una partícula viral consta de una molécula de ácido nucleico, ya sea DNA o RNA, cubierta por una capa proteínica o cápside (en ocasiones también cubierta por una capa de lípidos, proteínas y carbohidratos). HONGOS: Son organismos eucarióticos. Núcleo definido: con DNA ligado a histonas con varios cromosomas, nucléolo y división por mitosis y meiosis. Organelos: retículo endoplasmismo, mitocondrias. Membrana celular: con esteroles del tipo del ergosterol. MORFOLOGÍA BACTERIANA MICROSCOPÍA: Sin el microscopio no hay microbiología. De luz: -Transiluminación. -Campo oscuro. -Fase contrastada. Electrónica: -Transmisión (Stanley) -Barrido (objetos observados se ven 3D). Microscopia de barrido: Este tipo de microscopia es en blanco y negro por lo que las muestras se deben teñir. TAXONOMÍA: Clase: Esquizomicetes.1. Orden: Eubacteriales.2. Familia: Lactobacteriaceae.3. Género: Diplococcus.4. Especie: pneumoniae.5. El nombre de la bacteria siempre va ser el género y la especie, y siempre se escribe en cursiva, el género en mayúscula y la especie en minúscula. Es una imagen de microscopia electrónica coloreada. Observamos una bacteria más larga que ancha, donde vemos el material genético en cada uno de sus bordes y que esta bacteria se esta dividiendo. Observamos bacterias pequeñas en forma de bolitas agrupadas en cadenas. Efecto Tyndall: en una pieza oscura las partículas comienzan a brillar. Microscopía de fluorescencia: Si ve en microscopio de Luz UV y se utiliza cuando hay bacterias que no se pueden teñir con ninguna técnica como es el caso del Treporema pallidum. Se colocan anticuerpos que estén marcados. Observación al fresco Entre porta y cubre objeto Gota colgante Observación de las bacterias fijadas o teñidas Monocromáticas Policromáticastinción de Gram Tinciones especiales Microscopía de transiluminación: Observación al frasco, lo cual se hace entre el porta y cubre objeto. Esto nos va a permitir ver las bacterias vivas, movilidad y como estas bacterias están fijadas y teñidas. En la imagen vemos bacterias teñidas de manera monocromática (1 color) o de manera policromática como la tinción de Gram. También existen otras técnicas y tinciones especiales según lo que queramos ver. FORMA DE LAS BACTERIAS: Cocos o esferas.1. Diplo.2. Cadenas estreptococos.3. Racimos estafilococos.4. Sarcina (son como moras).5. Tétrada.6. Las bacterias son esféricas, pero en el microscopio las vemos planas. Bacilos o bastones: 7. Cocobacilos. 8. Diplobacilos. 9. Estreptobacilos. 10. Fusiforme. 11. Espirilos . 12. Vibrios. 13. Formas filamentosas . ESTRUCTURAS BACTERIANAS: Citoplasma bacteriano. Nucleoide. Ribosomas. Inclusiones granulares. Membrana Citoplasmática. Pared celular. Cápsula. Flagelos. Fimbrias o pilis. Esporas. Citoplasma: Gel semilíquido compuesto por un 80% de agua, con gran cantidad de iones inorgánicos con una alta presión osmótica. En el se encuentran inmersos el DNA bacteriano, ribosomas, gránulos de inclusión y plásmidos. DNA bacteriano: Ocupa alrededor del 10 % del cuerpo bacteriano. Presencia de proteínas semejantes a histonas. Mide alrededor de 1 mm. de largo. Está adherido a un punto de la membrana citoplasmática, mesosoma. Ribosomas: Organelos ultramicroscópicos. Síntesis de proteínas. Dos sub unidades: 30 S. y 50 S. Total 70 S. Las bacterias no tienen mitocondrias. Inclusiones citoplasmáticas: Volutinas: poli fosfatos, g. meta cromáticos (otorgan energía). Si queremos nutrientes: Gránulos de glucógeno- amilo pectina. Gránulos de ácido de Beta-hidroxibutírico. Membrana citoplasmática: Es considerada un mosaico fluido, ya que es una bicapa de fosfolípidos con inclusión de proteínas. No pose esteroles. Van haber mesosomas que son invaginaciones presentes en la membrana que permiten aumentar la superficie. Sus funciones son permeabilidad y transporte por: Difusión facilitada.1. Transporte dependiente de unión a proteínas.2. Trasporte quimiostático.3. Traslocación de grupo.4. Difusión: La difusión simple explica la entrada de muy pocos nutrientes,lo que incluye el oxígeno disuelto, dióxido de carbono y el agua misma; no proporciona velocidad ni selectividad. La difusión facilitada no utiliza energía, de forma que el soluto nunca alcanza una concentración interna mayor que la que existe fuera de la célula. Sin embargo, esta difusión es selectiva. Los conductos de proteínas forman conductos selectivos que facilitan el paso de moléculas específicas. Transporte activo: Dentro de la célula hay muchos nutrientes, que se concentran más de 1000 veces como consecuencia del transporte activo. Hay dos tipos de mecanismos de transporte activo, lo que depende de la fuente de energía utilizada transporte acoplado a iones y transporte asociado a ATP. Traslocación de grupo: Además del transporte verdadero, en el cual un soluto se desplaza a través de la membrana sin cambio en su estructura, las bacterias utilizan un proceso denominado translocación del grupo para llevar a cabo la captación neta de ciertos carbohidratos (p. ej., glucosa y manosa) el sustrato sufre fosforilación durante el proceso de transporte. En un sentido estricto, la translocación de grupo no es un transporte activo porque no participa una gradiente de concentración. Este proceso no ocupa energía. La fosforilación oxidativa en el primer paso para que las bacterias obtengan energía al entrar al ciclo de Krebs. Las funciones de la membrana citoplasmática son: Transporte de electrones y fosforilación oxidativa, equivalente a respiración celular, cumpliendo con la función de la mitocondria. Excreción de enzimas y proteínas. Funciones biosintéticas de la pared y de todas las estructuras de la membrana. Las bacterias no poseen citoesqueleto, mitocondrias (la función de mitocondria la hace la membrana celular). Síntesis: La membrana celular es el sitio de los lípidos transportadores sobre los cuales se ensamblan las subunidades de la pared celular así como de la biosíntesis de las enzimas de la pared celular. Las enzimas para la síntesis de fosfolípidos también se ubican en la membrana celular. Recordar que hay 2 tipos de proteínas, las estructurales y las funcionales que son la enzimas. Pared celular: No confundir la pared celular con la membrana plasmática, ya que la pared celular va por fuera de de la membrana plasmática. Tiene como función: Forma bacteria.1. Resistencia a los cambios osmóticos.2. Determinantes antigénicos, que permiten crear elementos que permiten neutralizar o destruir bacterias. 3. La pared celular se divide en grandes grupos: Gram positivas.1. Gram negativas.2. No todas la bacterias tienen pared celular. La presión osmótica interna de la mayor parte de las bacterias varía de 5 a 20 atm como consecuencia de la concentración de solutos por medio del transporte activo. En la mayor parte de los entornos, esta presión sería suficiente para hacer estallar la célula si no se contara con la presencia de una pared celular con fuerza tensil elevada . La pared celular bacteriana debe su resistencia a una capa compuesta de diversas sustancias conocidas como mureína, mucopéptidos o peptidoglicano (todos son sinónimos). Pared celular Gram positivas: La pared celular en Gram(+) es grande, entre 100 a 800 amstrongs. Fundamentalmente se compone por peptidoglucano que están formados por N-acetil glucosamina y ácido N- acetil murámico de manera alternada otorgando rigidez, entre ellos hay enlaces glucosídicos. También tienen cadenas tetrapéptidicas que se componen por D isoglutamina; L lisina; (ácido diamino pimélico);L alanina, uniéndose en diagonal hacia al lado y hacia abajo, dando una gran resistencia. Entre el tetrapéptido 4 y 3 hay una pentaglicina. Inmerso en esto hay ácidos teicoicos (proteínas) y ácidos lipoiteicoicos unidos a la membrana. Estos dan carga negativa a la bacteria, son reserva de hierro y son considerados determinantes antigénicos. Parte del complejo peptidoglucano y, ácidos teicoicos actúan como factor exógeno en el proceso de inflamación. L-Ala Alanina D-Glu Isoglutamina L-Lys Lisina (Ácido diaminopimélico) D-Ala Alanina Cadena tetrapeptídica Enlace glucosídico Pared celular Gram negativo: Membrana interna. Peptidoglucano Espacio periplásmico. Membrana externa. LPS (liposacárido). La pared de las gram negativas tiene un sistema de doble membrana, donde vemos que el peptidoglucano tiene 1, 2, máximo 3 capas. La capa interna incluye la membrana citoplasmática y la capa externa la membrana externa. Entre ambas membranas tenemos un espacio periplásmico, el cual es un espacio funcional donde encontramos enzimas y se realiza la fosforilación oxidativa. Hay proteínas de anclaje que van a unir la membrana con el peptidoglucano y con la membrana interna. También tenemos en la membrana externa una proteína quimérica que forman las porinas o las proteínas de canal, dependiendo de la especificidad que tenga el canal proteico. La diferencia entre la membrana interna y externa es que en la externa el fosfolípido está enlazado con un polisacárido o LPS o endotoxina bacteriana. La endotoxina bacteriana ejerce su efecto tóxico cuando se desprende de la membrana externa o se rompe la célula. Las lipoproteínas sirven para amarrar la membrana externa con el peptidoglucano con 57 aminoácidos. El espacio periplásmico está ubicado entre ambas membranas y contiene el peptidoglucano, enzimas y polímeros de glucosa. La membrana externa es similar a la interna en su hoja interior, la hoja exterior difieren que los fosfolípidos son reemplazados por el LPS. Las porinas son proteínas trimétricas o proteínas de canal dependiendo de la especificidad del canal proteico. + proteínas de amarre Fosfolípidos Proteína estructural P o ri n as o membrana citoplasmática Proteína de canal o LPS (Fracciones rígidas o vertebrales) LPS (Lipopolisacárido): Tenemos una fracción rígida o vertebral que está compuesta por 4 ácidos grasos (Lípido A) y KDO 2A deoxitectónico, y una Heptosa. Tienen una fracción central de 4 o 5 azúcares y algunos tienen una cadena lateral, la cual se compone de UDP uridin di fosfato y galactosa. Muy poca bacterias tiene LPS como la Escherichia coli. Funciones del LPS bacteriano: En forma indirecta producen neutropenia al activar células que liberan mediadores, los cuales estimulan moléculas de adherencia leucocitaria y endoteliales. La neutropenia es la disminución de la cantidad de glóbulos blancos en la sangre. Pueden agregar plaquetas y producir coagulación intravascular. Activan el complemento por la vía alterna, el cual es un sistema de proteínas que se activa de forma inespecífica que puede ser por la vía clásica de antígeno-anticuerpo o por la vía alterna que puede ser por la presencia de LPS. Organizan el fenómeno de Schuartzman localizado, consecuencia de dos o más exposiciones al LPS y que determinan necrosis tisular. Tienen efecto citotóxico sobre los fibroblastos, alterando la producción de colágeno. Inhiben el crecimiento de los fibroblastos. Inducen la resorción ósea (sobre todo en los dientes) por acción sobre los osteoclastos del hueso alveolar. Determinan la liberación procolagenasa, prostaglandinas (PGE2), los cuales son un factor importante para la inflamación, la interleuquina 1 y factor de necrosis tumoral α (TNF α). Activan de forma policlonal los linfocitos B. Ejercen una acción tóxica sobre los macrófagos. Tienen capacidad para penetrar a través del epitelio. Cápsula o glicocáliz: Formación laxa y sin estructura definida que rodea a la bacteria Se considera generalmente un polisacárido. Dificulta la fagocitosis, permite la adherencia de dichas células a los tejidos, y son antigénicas. Técnica de tinción de tinta china Las bacterias que tienen cápsula son más agresivas que otras. Cuerpo bacteriano Capsula Flagelo bacteriano: Es distinto a los flagelos comunes que conocemos: Está compuesto por la proteína flagelina. Tiene un cuerpo basal (gira por transporte deprotones). Un par de anillos en los Gram positivas y dos pares en los Gram negativas (más rápidas) anclados a la membrana. Tienen un gancho que permite que gire como hélice. Filamento. Los tipos de flagelos bacterianos son: Monotriquios: un solo flagelo a un extremo. Lofotriquios: un manojo de flagelos en un extremo. Anfitriquios: un manojo de flagelos en ambos polos. Peritriquios: flagelos alrededor del cuerpo bacteriano. El movimiento de los flagelos es generalmente por quimiotactismo, ya sea (+) donde hay nutrientes o (-) para escapar de algún agente dañino. Esporas o endoesporas: No son reproductivas, tienen como función mantener un estado de vida latente (criptobiosis). Los geneross Bacillus y Clostridium son los principales junto con los cocos G+ Sporosarcina y el agente de la fiebre Q Coxiellaburnetii. Composición química: Tiene un citoplasma concentrado en la porción central de la célula. La pared de la espora contiene peptidoglicano y se transforma en la pared de la célula vegetativa formando parte de la bacteria. Por fuera de la espora está la corteza la cual es la capa más gruesa de la espora y contiene un péptidoglucano poco común con menos enlaces cruzados, es muy sensible a la lizozima. Fuera de la corteza, hay una capa que está compuesta por una proteína semejante a la queratina y está compuesta especialmente de cisteína, aminoácido en que abundan los enlaces di-sulfuros, lo que otorga mayor resistencia. Fuera de la capa está el exosporio, el cual es una lipoproteína que contiene algunos carbohidratos y que puede resistir durante mucho tiempo, incluso años. Germinación de la espora: Letargia. Activación. Germinación Crecimiento. Forma vegetativa. Pilis o fimbrias: En la parte más externa encontramos las pilis o fimbrias, que son más cortas que los flagelos y están formados por una proteína llamada pilina. •Pilis comunes o de adherencia. •Pilis sexuales: transmiten información genética mediante plásmidos entre una célula y otra. Las pilis no dan movilidad.
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