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GRAM NEGATIVAS BACTERIAS INTRODUCCIÓN La clasificación de las bacterias es favorecida por la tinción de Gram, técnica rápida, sencilla y potente, cuya reacción es diferente según el microorganismo. De esta forma, las bacterias consideradas Gram positivas se tiñen de color azul/violeta y las bacterias Gram negativas de color rosado/rojo. Esta técnica permite al clínico diferenciar entre dos clases importantes de bacterias, establecer un diagnóstico inicial e iniciar el tratamiento basándose en las diferencias inherentes entre ellas. TÉCNICA DE TINCIÓN DE GRAM PASO 1 Cristal violeta PASO 2 Lugol PASO 3 Decolorante para Gram PASO 4 Safranina Entre cada paso se debe lavar el portaobjetos GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO COMPARACIÓN ENTRE G+ Y G- Los ácidos teicoicos son su factor de virulencia. Contienen mayor cantidad de peptidoglicano. No contiene ácidos teicoicos ni lipoteicoicos. Cuentan con una membrana externa. Los LPS son un factor de virulencia. Contienen menor cantidad de peptidoglicanos. MORFOLOGÍA DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS ESTRUCTURAS FUNDAMENTALES: La pared celular de las bacterias gram negativas está constituida por tres estructuras, primero está la membrana citoplasmática, seguida por el espacio periplasmático el cual se encuentra separando dos membranas, este espacio presenta una delgada y fina capa de peptidoglicanos, y por fuera se ubica la membrana externa. Membrana citoplasmática.1. Espacio periplásmico.2. Membrana externa:3. -Presencia de porinas. -Lipoproteínas. -Lipopolisacáridos (LPS). Flagelo Fimbrias o pilis Espora MORFOLOGÍA DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS ESTRUCTURAS FACULTATIVAS: Cápsula o glicocáliz Cápsulas MECANISMOS DE RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS Modificación enzimática: β-lactamasas. Carbapenemasas. Aminoglucósidos. Bombas de salida: Su mecanismo de acción consiste en tomar el antibiótico del espacio periplasmático y expulsarlo al exterior, evitando que llegue a su sitio de acción. Para ello, utilizan la hidrólisis de ATP o un mecanismo de contra transporte iónico como sustrato energético. Cambios en la permeabilidad de la membrana externa: Porinas. Alteraciones en el sitio de acción: Este tipo de mecanismo es el menos utilizado por las bacterias Gram negativas. CONCLUSIÓN La correcta ejecución de la técnica de tinción de Gram es crucial para una correcta interpretación de los resultados, ya que tiene implicaciones importantes en el campo farmacéutico y a nivel clínico en el manejo de las infecciones bacterianas. Las bacterias Gram negativas tienen una capa más fina de peptidoglicanos en su pared celular, y una membrana externa de lipopolisacáridos, lipoproteínas y lípidos. La capacidad patógena de las bacterias Gram negativas radica en los lipopolisacáridos o también denominados endotoxinas, que desencadenan una respuesta inmune innata. La resistencia microbiana es un proceso constante presente en muchas especies de bacterias, lo cual complica las alternativas terapéuticas, encareciendo los costos de tratamiento. En bacterias Gram negativas, el principal mecanismo de resistencia es la modificación enzimática mediante β-lactamasas y enzimas modificadores aminoglucósidos.
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