01- INTRODUCCIÓN A MICRO

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01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Microbiología y Parasitología 
Ramas de las ciencias médicas dedicadas al estudio de los agentes biológicos que viven a 
expensas del hombre y producen enfermedad en él. 
 
AGENTES BIOLÓGICOS 
 
1. Organización subcelular: Priones y Virus 
2. Procariotas: Bacterias 
3. Eucariotas: Hongos, Protozoos, Helmintos, Artrópodos. 
 
VIRUS BACTERIAS MYCOPLASMA 
 Poseen un solo tipo de 
ácido nucleico (ADN o 
ARN) 
 Parásitos intracelulares 
estrictos. Se multiplican 
sólo dentro de una célula 
viva específica, por lo que 
tienen dependencia de un 
hospedero para su 
replicación. 
 En el medio extracelular 
son partículas inertes. 
 Resistentes a los 
antibióticos. 
 
 Microorganismos procariotas. 
 Unicelulares. 
 Reproducción asexual (fisión binaria) 
 Ambos tipos de Ácido Nucleico (ADN y 
ARN) 
 Pared celular compleja. 
 Pueden poseer flagelos 
 Morfología: Cocos, Bacilos y Espirilos. 
 
 Unicelulares 
 Altamente 
pleomorfos, pues 
carecen de una 
pared celular. 
 No tienen 
morfología 
definida. 
 Poseen ambos 
tipos de Ácido 
Nucleico. 
 
RICKETTSIA CHLAMYDIA HONGOS 
 Unicelulares. 
 Poseen ambos tipos de 
Ácidos Nucleicos. 
 Parásitos intracelulares 
obligados. 
 Se transmiten por 
artrópodos. 
 
 Unicelulares 
 Parásitos 
intracelulares 
obligados 
 Ambos tipos de ácidos 
nucleicos 
 No se transmiten por 
artrópodos 
 Microorganismos eucarióticos. 
 Microscópicos. 
 Pared celular quitinosa. 
 No fotosintéticos 
 Se dividen en filamentosos 
(pluricelulares), levaduriformes 
(unicelulares) o dimorfos. 
 Micosis superficiales, cutáneas, 
subcutáneas o profundas. 
 
PROTOZOOS: 
 Eucariotas 
 Unicelulares 
 Microscópicos 
 
COCO 
ESPIRILOS 
BACILOS 
Pueden ser 
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Helmintos 
 Eucariotas. Pluricelulares. 
 Vermes o gusanos parásitos multicelulares. 
– Nematelmintos: Cuerpo cilíndrico, alargados, de color blanquecino o rosado. 
– Platelmintos: Gusanos aplanados. 
 Cestodos: aplanados, acintados y segmentados. 
 Trematodos: Aplanados en forma de hojas y no segmentados. 
 
Artrópodos 
 Organismos que de una forma u otra están involucrados en la transmisión de agentes 
patógenos responsables de importantes enfermedades. 
 Vectores biológicos o vectores mecánicos. 
 Ectoparásitos. 
____________________________________________________________________________ 
CONCEPTOS BÁSICOS: 
1. Ecología: Es la ciencia que estudia la relación existente entre el medio ambiente y los seres 
vivos. 
2. Biomasa: Cantidad de materia viva producida en un área determinada de la superficie 
terrestre. Es decir, es la masa total de materia viva de una parte de un organismo, población 
o ecosistema y tiende a mantenerse más o menos constante. 
3. Biosfera: Conjunto de ecosistemas del planeta tierra. 
4. Biotopo: lugar o sitio donde hay una biomasa 
5. Biocenosis: conjunto de seres vivos, que están en equilibrio en un sitio definido. 
6. Hábitat: Lugar o sitio donde vive una especie. 
7. Sistema: conjunto de elementos que siguen una determinada función. 
8. Nicho ecológico: Es la función que un organismo tiene dentro de un ecosistema. 
9. Medio Ambiente: Suma de todas las condiciones o influencias que afectan el desarrollo y 
la vida de los organismos (elementos físicos, químicos, biológicos, así como factores sociales 
y culturales que interactúan recíprocamente con los seres humanos y otros seres vivos). 
10. Ecosistema: Es una biocenosis en un biotipo determinado. Sistema dinámico relativamente 
autónomo, formado por una comunidad natural y su ambiente físico. Tiene en cuenta las 
complejas interacciones entre los organismos que forman la comunidad y los flujos de energía 
y materiales que la atraviesan. Entre los distintos TIPOS DE ECOSISTEMAS están: 
 Acuáticos 
 Terrestres 
 Aéreos 
 
Las relaciones entre los seres vivos pueden ser: 
 
 Intraespecíficas: Cuando se relacionan individuos de una misma especie. 
 Interespecíficas: Cuando la relación se establece entre individuos de especies diferentes. 
 
 Depredación: un organismo llamado depredador se alimenta de otro animal nombrada presa. 
 Comensalismo: Relación interespecífica donde un organismo (Comensal), vive en otro 
(Hospedero) sin causarle daño ni beneficio. 
 Mutualismo: Relación interespecífica que es favorable y conveniente para ambas especies. 
 Simbiosis: Relación interespecífica que es favorable e indispensable para ambas especies. 
Se establece una relación tan íntima que una especie no puede vivir sin la otra. 
 Antibiosis: relación interespecífica en la que un organismo produce, libera o genera una 
sustancia, producto o elemento que inhibe la vida de otros organismos. 
 Parasitismo: relación interespecífica en la cual un organismo vive a expensas de otro durante 
toda su vida o parte de ella provocándole daño o no, aparente o inaparente. 
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SEGÚN LA UBICACIÓN EN LA CADENA ALIMENTARIA 
Relaciones positivas Relaciones negativas 
1. Comensalismo 
2. Mutualismo 
3. Simbiosis 
1- Parasitismo 
2- Depredación 
3- Antibiosis 
 
Parásito: 
Organismo (animal, vegetal, protista u otro) que pasa parte de su vida o toda ella, en el interior o 
exterior de otro u otros seres vivos más potentes que el, a expensas del cual o de los cuales se 
nutre produciendo o no lesiones aparentes o inaparentes. 
 
Hospedero: 
Organismo que alberga u hospeda al parásito, brindándole apoyo y nutrición. 
 
Saprofito: 
Organismo de vida libre que se nutre de materia inorgánica u orgánica. No interfieren en el 
funcionamiento normal de su hospedero o que no habitan sobre animales o vegetales vivos. Viven 
normalmente, sobre materias inanimadas o en sustancias orgánicas muertas y en 
descomposición. 
 
Vector: 
Artrópodo o invertebrado que transmite el parásito al hospedero 
____________________________________________________________________________ 
Conceptos importantes 
Enfermedad transmisible: 
Producida por un agente infeccioso 
específico o por sus productos tóxicos. 
Capaz de transmitirse desde un enfermo o 
portador hasta un hospedero susceptible 
 
 
PASOS EN EL PROCESO 
INFECCIOSOS 
 
Colonización: 
Penetración y multiplicación de un agente infeccioso, sin respuesta inmune ni signos ni síntomas 
de la enfermedad que ellos producen. 
 
Infección: 
Penetración, multiplicación e invasión de un agente infeccioso, con respuesta inmune, pero sin 
signos ni síntomas de la enfermedad que ellos producen. (Individuos portadores) 
 
Enfermedad Infecciosa: 
Penetración, multiplicación e invasión de un agente infeccioso en el cuerpo, con respuesta 
inmune y con signos y síntomas de la enfermedad que ellos producen. 
 
PUEDE HABER INFECCIÓN SIN ENFERMEDAD INFECCIOSA PERO NO EXISTE ENFERMADAD 
INFECCIOSA SIN INFECCIÓN. 
 
Contaminación: 
Microorganismos presentes en objetos inanimados. 
 
Infestación: 
Presencia, alojamiento, desarrollo y reproducción de macroparásitos (artrópodos ectoparásitos) 
en el organismo (en la superficie del cuerpo) o en las ropas (Aplicamos también el término a 
cualquier artículo o local que albergue o sirva de alojamiento a artrópodos, roedores u otros 
animales) 
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ETAPAS DEL PROCESO INFECCIOSO 
 
1. Período de incubación: Tiempo que transcurre desde que el agente biológico penetra en el 
hospedero susceptible, hasta la aparición de los primeros síntomas y signos de la 
enfermedad. 
 Corto: Menos de 7 días(Difteria, cólera) 
 Mediano: Entre 7 y 14 días (Dengue, Paludismo) 
 Largo: Más de 15 días (TB, Sífilis) 
 
2. Período prodrómico: Es el tiempo durante el cual el paciente sufre de algunos síntomas 
generales o inespecíficos. 
El paciente se siente enfermo, pero no tiene síntomas ni signos propios de la enfermedad en 
cuestión. 
 
3. Período de estado: Desde que aparecen los signos y síntomas típicos de la enfermedad, 
hasta que estos desaparecen por la curación clínica. 
 
4. Período terminal: Es cuando la enfermedad entra en su etapa final, el enfermo puede 
evolucionar hacia la agravación de su cuadro y puede fallecer por esta causa. 
 
5. Período de transmisibilidad: Tiempo durante el cual las personas que padecen la 
enfermedad infecciosa se mantienen eliminando agentes infecciosos al medio ambiente. 
(tiempo en que el individuo es contagioso o infectante). 
 
Incidencia: 
Número de individuos nuevos de una determinada enfermedad en una población dada. 
 
Prevalencia: 
Por ciento de individuos con la enfermedad al mismo tiempo. Número de individuos totales con 
determinada enfermedad en una población dada. 
 
Variabilidad del proceso infección–enfermedad o Formas de Manifestación 
colectiva del proceso infección - enfermedad 
 
Son las formas de presentarse el proceso infección enfermedad en una comunidad humana, y 
que constituyen la variabilidad de la respuesta de las comunidades humanas a la agresión de los 
agentes causales de las enfermedades. 
 Casos esporádicos o aislados: Aparición de enfermos aislados de una afección, sin 
relación aparente entre sí o con otro caso conocido. Lugar determinado y tiempo definido. 
 
 Endemia: Número de casos habituales de una enfermedad, que no se apartan de la cifra 
esperada, en un lugar determinado y durante un tiempo definido. (Incidencia baja) 
 
 Epidemia: Número elevado de casos de una enfermedad, muy por encima de lo esperado 
en un lugar determinado y en un tiempo definido. (Incidencia alta) 
 
 Pandemia: Número elevado de casos de una enfermedad, muy por encima de lo 
esperado, en crecimiento continuo, que ocurre en un tiempo relativamente limitado 
(pueden ser años) y abarca una gran extensión territorial. Espacio indeterminado y en un 
tiempo determinado. (SIDA, Cólera, Influenza) 
 
Enfermedades Emergentes: 
Enfermedades recién descubiertas que causan serios problemas de salud y aquellas cuya 
incidencia en humanos se ha incrementado desde las décadas pasadas o tienden a aumentar en 
el futuro cercano. (Infecciones nuevas aparecidas en los últimos 30 años) 
Ejemplos: VIH, fiebre hemorrágica producida por el virus Ébola, el síndrome pulmonar por 
hantavirus. 
 
 
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Enfermedades Reemergentes 
Enfermedades supuestamente controladas o prácticamente desaparecidas, que vuelven a 
constituir una amenaza sanitaria. 
Ej: Tuberculosis, dengue, difteria, la peste, la fiebre amarilla. 
 
Factores que facilitan la reaparición de enfermedades reemergentes 
1. Cambios genéticos 
2. Resistencia microbiana 
3. Condiciones ecológicas variables 
4. Resquebrajamiento en las medidas sanitarias 
 
Triada Ecológica 
1. Agente Causal: MO, agentes físicos (calor, frío, electricidad), agentes químicos (Tóxicos) 
es decir, Cualquier elemento que actúe como causa determinante y sea capaz de producir 
una desviación de la salud. 
 
2. Hospedero susceptible: Estado nutricional, defensa inmunológica, edad, sexo, entre 
otros. 
 
3. Vía de transmisión: Temperatura, humedad, alimentos, agua, vectores, luz solar. 
 
Usos de la Cadena epidemiológica 
 Esquematiza la transmisión de la enfermedad infecciosa. 
 Permite analizar el o los eslabones más débiles de la cadena. 
 Permite dirigir las acciones preventivas y de control en el lugar donde sea más fácil, 
rápido y económico actuar. 
 
Reservorios: 
Ser vivo o materia inanimada que hospedan naturalmente a un agente biológico y que sean fuente 
de infección para un hospedero susceptible. 
 Con otras palabras: Guarida o hábitat natural donde habita el agente causal y de la cual 
depende su supervivencia, multiplicación y reproducción, está representado por el hombre, 
animal, y excepcionalmente por un elemento inanimado, a partir del que puede ser transmitido 
a un hospedero susceptible (humano, animal o mixto) 
1. Reservorio humano: Resulta el más importante y abarca todas las formas en que se 
manifiesta el fenómeno infección enfermedad, es decir todas las formas que 
constituyen el espectro clínico de la infección enfermedad: el iceberg epidemiológico. 
(Polio, TB, varicela) 
2. Reservorio animal: Después del humano es el más importante, aquellos animales 
que tengan mayor contacto con el hombre, tienen mayor importancia. Por lo general, 
existe cierta especificidad de la especie con el animal que es reservorio bajo 
condiciones naturales. (Leptospirosis, rabia, brucelosis) 
3. Reservorio mixto: Existen algunos agentes biológicos, cuyos reservorios pueden ser 
humanos o animales. Ej. Clostridium tetani, Arbovirus B de la fiebre amarilla. 
 
Fuente de Infección: 
Generalmente un elemento inanimado del cual los agentes biológicos pasan 
inmediatamente al hospedero susceptible, es decir es el elemento directamente infectante 
para el hombre. Ej: Agua contaminada, alimentos contaminados 
 
Fuente de Contaminación: 
Elemento del ecosistema que contamina a la fuente de infección. Ej: el agua albañal 
contaminando al agua de tomar. 
 
 
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Puerta de Salida 
Es el sitio del reservorio por donde salen al medio ambiente los agentes causales de las 
enfermedades transmisibles. 
o Digestiva: Vibrio cholerae 
o Respiratoria: Neisseria meningitidis. 
o Urinaria: Leptospirosis. 
o Piel y mucosas lesionadas: Neisseria gonorrhoeae. 
o Mecánica: Dengue, VIH. 
 
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TRANSMISIÓN POR VÍA DIRECTA: TRANSMISIÓN POR VÍA INDIRECTA: 
1. Inmediata o por contacto físico 
 Sin solución de continuidad o con solución 
de continuidad 
2. Mediata o por contacto personal 
 Es una forma de relación muy sutil entre el 
reservorio y el hospedero. Requiere la 
presencia de ambos aun cuando no sea 
por contacto físico. 
3. Transmisión vertical o congénita 
4. Exposición directa de un tejido susceptible 
al hábitat de un agente infeccioso de vida 
saprófita 
1. Vehículos inanimados (agua, 
alimentos, tierra, objetos) 
2. Vehículos aéreos (inhalación, depósitos 
en piel y mucosas, depósitos en 
heridas) 
3. Vehículos vectoriales (mecánico-
biológico) 
 
Clasificación de las enfermedades transmisibles basada en su vía de transmisión: 
1. Enfermedades de transmisión digestiva. (Shigelosis, Fiebre Tifoidea, Giardiosis) 
2. Enfermedades de transmisión respiratoria. (Influenza A H1N1, Tuberculosis) 
3. Enfermedades que se transmiten por contacto (piel y mucosas). (Sífilis, Blenorragia, 
Tétanos) 
4. Enfermedades que se transmiten por vectores. (Dengue, Leishmaniosis) 
5. Enfermedades de transmisión desconocida (Lepra). 
 
Puerta de Entrada: 
LUGAR O LOCALIZACIÓN EXACTA DEL CUERPO POR DONDE PENETRAN LOS AGENTES 
CAUSALES DE LAS ENFERMEDADES TRANSMISIBLES. 
 RESPIRATORIA 
 PIEL 
 DIGESTIVA 
 MUCOSAS 
 
Hospedero Susceptible: 
Cualquier hombre o animal vivo que, en circunstancias naturales, permite la subsistencia o el 
alojamiento de un agente infeccioso. 
____________________________________________________________________________ 
La célula es la unidad estructural y funcional de todos los organismos vivos y posee una 
organización molecular que le permite desempeñar las funciones vitales: crecer, reproducirse y 
adaptarse al medio ambiente. 
 
CÉLULAPROCARIOTA: 
1. Membrana celular rodeada de una pared celular. 
2. Hacia el interior de la célula un citoplasma con ribosomas y una región nuclear (nucleoide). 
3. Presencia en algunos casos, de gránulos, vesículas o ambos. 
4. Flagelos, fimbrias y cápsula. 
 
Estructuras externas: 
Pared celular 
Compleja, rígida, cuyas funciones son: 
 Protección osmótica. 
 Responsable del mantenimiento de la forma de las bacterias y del comportamiento de las 
mismas frente a la coloración de Gram. 
 Desempeña un papel importante en la división celular. 
 Interviene en su propia biosíntesis. 
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 Diferentes capas de la pared celular son sitios de determinantes antigénicos de la 
superficie bacteriana. 
 Las paredes de las bacterias Gram+ y Gram- son diferentes químicas y ultraestructuralmente. 
o Gram positivas: Tienen más peptidoglucanos, grandes cantidades de ácido 
teicoico y otras proteínas. Es menos compleja que la de las bacterias Gram 
negativas 
 
o Gram negativas: Tienen menor cantidad de petidoglucanos delgada, y su 
pared es más fina pero más compleja con la presencia de lipopolisacáridos, 
membrana exterior y lipoproteínas. 
 
Membrana citoplasmática 
1. Se considera una barrera entre el exterior y el interior de la célula. 
2. Está constituida por una doble capa de fosfolípidos donde se insertan proteínas y se asocian 
proteínas periféricas. 
3. Posee una estructura lipídica de doble capa semejante a la observada en las membranas de 
los eucariotas, pero no contiene esteroles (colesterol). 
 
4. Funciones: 
 Regula el movimiento de material hacia el interior y el exterior de la célula 
 Interviene en la biosíntesis (síntesis de la pared celular). 
 Sus zonas de adhesión constituyen receptores de los fagos y una vía de entrada de 
compuestos que la célula bacteriana utilizará en su metabolismo. 
 Transporte de electrones y fosforilación oxidativa. (Citocromos y otras enzimas de la 
cadena respiratoria localizados en la MC) 
 
Mesosomas: 
Son invaginaciones de la membrana citoplasmática, que intervienen en la división celular 
(Mesosomas de tabique) y en el transporte de electrones y fosforilación oxidativa (Mesosomas 
laterales) 
 
Flagelos: 
Apéndices filiformes, de origen endocelular, que se proyectan hacia el exterior de la célula. 
Estos le confieren movilidad a la bacteria. 
 
Cápsula: 
1. Envoltura mucoide casi siempre de naturaleza polisacárida, que rodea la pared celular. 
2. Las bacterias encapsuladas son a menudo más virulentas para el hombre. 
3. Propiedades antifagocitarias y antigénicas. 
4. Protección contra la desecación. 
5. Cuando los polímeros forman una maraña de fibra que se extiende fuera de la célula, se 
denomina glicocálix y tiene un papel importante en la adherencia de la bacteria. 
 
Pili o fimbrias: 
Apéndices rígidos de la superficie bacteriana, más cortos y finos que los flagelos bacterianos. 
Están formadas por unas subunidades proteicas (pilina). 
Las fimbrias se diferencian morfológicamente de los flagelos por su menor diámetro y carecer de 
una estructura helicoidal. 
Se diferencian dos tipos de pili: 
1. pili sexual: Permite durante el proceso de Conjugación, la aproximación de dos células, 
donde se trasmite material genético. 
2. pili (adhesinas) que interviene en la adherencia de la célula bacteriana a las células del 
hospedero, facilitando la colonización e infección de las mucosas y epitelios. 
 
Estructuras internas: 
Citoplasma: 
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 Contiene ADN cromosómico, ARNm, ribosomas, proteínas y metabolitos. 
 Ocurren diferentes reacciones químicas, anabólicas y metabólicas. 
 
Nucleoide: 
1. La célula procariota carece de núcleo verdadero, en cuyo lugar se encuentra el nucleoide o 
región nuclear, que es donde se encuentra el material genético. 
2. Cromosoma bacteriano: Única molécula circular de doble cadena (ADN) 
3. Es característica la ausencia de membrana nuclear y de aparato mitótico. 
 
Ribosomas: 
Son estructuras compuestas de ácido ribonucleico (ARN) y proteínas, muy abundantes y 
dispersas por el citoplasma celular. Son centros activos para la síntesis de proteínas. 
Consta de dos subunidades de 3OS y 5OS que forman un ribosoma 70S. 
 
Gránulos citoplasmáticos: 
Almacenan material de reserva (gránulos metacromáticos, de azufre, de glucógeno y lipídicos). 
 
Gránulo basal: 
A través de ésta se inserta el flagelo que es una estructura externa. 
 
Endosporas: 
 Se forman en respuesta a condiciones desfavorables del medio (depauperación nutricional, 
desecación, agentes físicos y químicos con acción antibacteriana). Pasan de un estado 
vegetativo a un estado de latencia o espora. 
 Presentan estructuras muy complejas y son capaces de sobrevivir largos períodos en 
condiciones adversas. 
 Son una forma de resistencia de las bacterias y no una reproducción bacteriana. 
 
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Microscopía y coloraciones 
Microscopía: 
Es la ciencia que se ocupa de los usos y aplicaciones interpretativas de los microscopios, los 
cuales hacen posible que partículas muy pequeñas sean percibidas por el ojo humano. 
Se utiliza en microbiología con dos propósitos básicos: 
 Detección inicial de microorganismos 
 Identificación preliminar o definitiva de los mismos. 
 
Tipos de Microscopios: 
1. Microscopios luminosos: Es el más usado para la observación de frotis coloreados, pero 
puede también emplearse para examinar características morfológicas y la movilidad de los microorganismos. 
Pueden ser: 
o Simples: Compuestos por una sola lente de aumento. Son útiles para la disección, las 
mediciones y el examen de reacciones de aglutinación. Se utilizan en los contadores de colonias. 
o Compuestos: Constan por lo menos de 2 sistemas de lentes. Son útiles para examinar las 
características de las colonias de bacterias, hongos, cultivos de tejidos y otros organismos parásitos. 
 
2. Microscopía de Contraste de Fase: Las ondas luminosas pasan a través de objetos 
transparentes como las células, emergiendo en fases diferentes dependiendo de las 
propiedades de los materiales que atraviesan. Por medio del uso de anillos en el 
condensador y las lentes del objetivo, las diferencias de fase se amplifican de manera que 
la luz en fase se ve más brillante que la luz fuera de fase. Permiten diferenciar las estructuras 
internas en células vivas. 
 
3. Microscopía en Campo Oscuro: Se utiliza un microscopio luminoso, empleando un 
condensador que bloquea los rayos de luz directos, creando un campo oscuro que produce 
contraste contra los bordes destacados de los microorganismos, lo que nos permite observar 
su morfología. Es útil para visualizar flagelos bacterianos, y bacterias espirilares mal definidas 
en otros tipos de microscopías. Mejora significativa del poder de resolución en comparación con el microscopio 
luminoso, lo que permite detectar bacterias extremadamente delgadas. (espirilares). Imposibilidad de estudiar la estructura 
interna de los microorganismos debido a que la luz pasa alrededor en lugar de a través de ellos. 
 
4. Microscopía por fluorescencia: Los Fluorocromos (compuestos capaces de absorber luz de 
una determinada longitud de onda y de emitir luz de mayor longitud de onda), pueden ser 
conjugados a anticuerpos empleándose en técnicas como la Inmunofluorescencia, que nos 
permite localizar antígenos en una muestra dada. 
 
Inmunofluorescencia (IF) 
Técnica que emplea anticuerpos conjugados a fluorocromos. Puede ser: Directa e Indirecta 
 
1. Directa: Ocurre cuando un Ac marcado conocido interactúa de forma directa con el Ag 
desconocido. 
2. Indirecta:Se produce cuando el proceso se lleva a cabo en 2 etapas: 
 Ag conocido se adhiere a un portaobjetos. 
 Se agrega el suero desconocido y la preparación se lava; si el Ac del suero 
desconocido es compatible con el Ag, se fijará al portaobjetos. 
 Puede identificarse agregando un Ac antiglobulina marcado con fluoresceína, 
examinándolo al microscopio. 
 
Microscopio electrónico: Permite el detalle celular a nivel molecular. Ha permitido, además, la 
observación e identificación de virus. 
o Microscopio electrónico de transmisión: tiene gran poder de resolución, lo que permite la 
observación de micropartículas. 
o Microscopio electrónico de barrido: resulta muy útil para la observación tridimensional de 
objetos microscópicos, aunque tiene menor poder de resolución. los electrones rebotan en 
la superficie de la muestra con un cierto ángulo para generar una figura tridimensional. 
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Coloraciones: 
un colorante biológico es una molécula que es capaz de unirse a una estructura de la célula y 
darle color. 
 
Objetivos de las coloraciones: 
 Demostrar los microorganismos y algunas otras células. 
 Poner de manifiesto algunas características morfológicas y estructuras microbianas tales 
como esporas, flagelos, gránulos, cápsulas, etc. 
 Diferenciar los microorganismos según su comportamiento tintorial. 
 
Pueden ser: 
 Simples: usan un solo colorante. 
 Compuestas: usan más de un colorante. 
 
COLORACIÓN DE GRAM: 
La estructura de la pared bacteriana es la base de la reacción diferencial frente a la coloración de 
Gram. 
Las bacterias teñidas de azul-violeta serán Gram positivas y las teñidas de rojo serán Gram 
negativas. 
 
Se usan 4 reactivos diferentes: 
1. Solución de cristal violeta que tiñe todas las células de azul-violeta. Se utiliza 
generalmente la violeta genciana. 
2. Solución de Lugol: actúa como fijador. 
3. Decolorante (acetona o etanol) remueve el colorante de las células gamnegativas. 
4. Colorante de contraste (safranina): hace visible las células gramnegativas al teñirlas de 
color rojo. (la carbolfucsina se utiliza como variante para la coloración de bacilos 
anaerobios gramnegativos y especies de Legionella). 
 
Coloraciones de microorganismos acidorresistentes: 
Se utilizan en especies del género Micobacterium, Nocardias, algunos actinomicetos y coccidias 
que retienen los colorantes aún después de los procesos de decoloración con ácidos o soluciones 
de ácido-alcohol o ácido-acetona. 
Este carácter se atribuye a un componente lipídico en las paredes bacterianas. 
 
Tipos: 
1. Coloración de Ziehl-Neelsen 
2. Coloración de Kinyoun 
 
Coloración de Ziehl-Neelsen 
1. Cubrir frotis con carbolfucsina 
2. Se calienta hasta que emita vapores 
3. Se decolora con alcohol-ácido (ácido clorhídrico al 3% en etanol) 
4. Aplicar colorante de contraste (azul de metileno o verde de malaquita) 
o Microorganismos ácido-alcohol-resistentes (retienen el color rojo del primer 
colorante) 
o Microorganismos no ácido-alcohol-resistentes (toman el color del colorante de 
contraste) 
 
Coloraciones negativas: 
Son coloraciones que se emplean fundamentalmente para la observación de estructuras 
bacterianas que se tiñen con dificultad con otros métodos. Se fundamenta en hacer resaltar las 
células sin teñir, sobre un fondo teñido; para lo cual se usa tinta china o colorantes ácidos. 
 
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Coloraciones para demostrar estructuras de los microorganismos: 
• Coloraciones de cápsulas, flagelos, esporas, gránulos metacromáticos, núcleo. 
 
Otras coloraciones en bacteriología: 
• Naranja de acridina: se utiliza para la tinción de Mycoplasma sp. Y de algunos parásitos. 
• Coloración de Giemsa, Machiavello y Castañeda: Permite la detección de ricketttsias con 
el empleo del microscopio luminoso. Las clamidias, son detectadas mediante las 
coloraciones de Giemsa y Machiavello. 
____________________________________________________________________________ 
Metabolismo 
 Todas las transformaciones químicas que ocurren en la célula. 
 Para sobrevivir, todas las células precisan de un aporte constante de energía. Esta 
energía, habitualmente en forma de ATP, se obtiene a partir de la degradación controlada 
de diversos sustratos orgánicos (hidratos de carbono, lípidos y proteínas). 
 
ANABOLISMO: Formación o síntesis de componentes celulares (paredes celulares, proteínas, 
ácidos grasos y ácidos nucleicos), que requiere de un aporte de energía. 
 
CATABOLISMO: Degradación o descomposición de compuestos que aporta energía, 
generalmente en forma de ATP. 
 
Metabolismo Degradativo 
 
COMPUESTOS RICOS EN ENERGÍA 
• Adenosín trifosfato (ATP) 
• Guanina trifosfato (GTP) 
• Uridina trifosfato (UTP) 
• Citidina trifosfato (CTP) 
• Ácetil coenzima A (Acetil CoA) 
 
Generación de ATP 
Es generado por los siguientes mecanismos 
a nivel de membranas: 
 Fosforilación a nivel de sustrato 
 Transporte de electrones 
 
 
FERMENTACIÓN 
Proceso metabólico generador de ATP en el que compuestos orgánicos sirven tanto de 
donadores (oxidación) como de aceptores de electrones (reducción). 
 
Principales sustratos: 
 Carbohidratos 
 Ácidos orgánicos 
 Aminoácidos 
 Purinas y pirimidinas 
 
 
 
RESPIRACIÓN: 
Proceso metabólico generador de ATP en el que los donantes de electrones son compuestos 
orgánicos e inorgánicos y los aceptores, son compuestos inorgánicos. 
Esta puede ser aeróbica (donde el último aceptor de los electrones es el O2 /mecanismo más 
eficiente/) o anaeróbica (donde el último aceptor de los electrones es un compuesto inorgánico) 
 
Metabolismo Generador de ATP 
1. Oxidación Biológica 
 Fermentación: exclusiva de 
bacterias 
 Respiración 
2. Fotosíntesis 
 
La fosforilación a nivel del sustrato es el único modo posible de 
formación de ATP como resultado de una fermentación. Es realizada 
por: 
 Anaerobios estrictos 
 Facultativos 
 Anaerobios aerotolerantes 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Vías Biosintéticas 
1. Síntesis de los componentes de la Pared Celular: 
 Síntesis de Peptidoglucano 
 Síntesis del Lipopolisacárido 
2. Síntesis de los polímeros capsulares extracelulares. 
3. Síntesis de Gránulos Alimenticios de Reserva 
____________________________________________________________________________ 
CULTIVO: 
• Proceso mediante el cual se promueve el crecimiento de los microorganismos, 
proporcionándoles las condiciones ambientales (Nutricionales y Físicas) adecuadas, con fines 
diagnósticos, investigativos y productivos. Es un método confirmativo. 
• Durante el crecimiento se deben regular los factores nutricionales y los factores físicos. 
 
FUENTES DE ENERGÍA METABÓLICA: 
Las principales son: Fermentación, respiración y fotosíntesis. 
 
NUTRICIÓN: 
Es la provisión de nutrientes para el crecimiento de un organismo. 
 
1. Factores Nutricionales: 
 Fuente de Carbono: utilizada como fuente de energía y para la síntesis de elementos 
celulares. 
 Fuente de Nitrógeno: Síntesis de enzimas, proteínas y ácidos nucleicos. 
 Azufre: Elaboración de proteínas, coenzimas y otros componentes celulares. 
 Fósforo: Síntesis de ATP, fosfolípidos y ácidos nucleicos. 
 Elementos trazas: Na, CL, K, Zn, Ca, Fe, entre otros. 
 Vitaminas: Ácido fólico, B12, vitamina K 
 
2. Factores Físicos 
 Concentración de iones hidrógeno (pH): Generalmente el pH óptimo es neutro (pH 7). 
• Acidófilas: pH 1.0 hasta 5.0 
• Neutrófilas: pH 5.5 hasta 8.5 
• Alcalinófilas: pH 9.0 hasta 11.0 
 
 Temperatura: Generalmente por encima de 30oC 
• Psicrófilas: entre 15 y 20OC 
• Mesófilas: entre 30 y 37OC 
• Termófilas: entre 50 y 60OC Concentración de oxígeno: 
• Aerobios Obligados: Se desarrollan en presencia de oxígeno libre. 
• Anaerobios Obligados: No necesitan oxígeno para su crecimiento, mueren en 
presencia de este. 
• Microaerofílicos: Se desarrollan en presencia de poca cantidad de oxígeno libre. 
• Anaerobios facultativos: Se desarrollan en presencia y ausencia de oxígeno. 
 
 Humedad: 
• Generalmente todas las células con un metabolismo activo requieren agua del 
ambiente. 
• Presión hidrostática (presión atmosférica) 
• Presión osmótica (si la concentración fuera de la célula se torna demasiado alta, la 
pérdida de agua puede inhibir o detener el crecimiento celular) 
• Radiación: La energía radiante puede causar mutaciones y eventualmente ocasionar 
la muerte de los organismos. 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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El CULTIVO puede ser mixto o puro. El Cultivo Puro: Es el cultivo donde todas las células 
formadoras de colonias son de igual género y especie (un solo tipo de microorganismo). 
 
Colonia: 
Agrupación de células de una misma especie de Microorganismo (MO) que se obtiene en un 
cultivo. Esta colonia desarrollada en un medio sólido y con características propias para cada 
especie, generalmente se puede ver a simple vista. 
 
Se logran cultivos puros por: 
1. Siembra en placa por agotamiento del inóculo. 
2. Por dilución 
 
Medios de Cultivo 
Es un medio utilizado para proporcionar condiciones nutricionales óptimas y controladas 
a los microorganismos, con el fin de lograr su crecimiento y multiplicación en el 
laboratorio. 
 Se clasifica atendiendo a su: 
• Origen. 
• Composición química. 
• Consistencia. 
• Uso. 
 
Según su origen: 
 Vivos: modelos animales o cultivos celulares) 
 Inanimados: soluciones (compuestos químicos, bases nutritivas) 
 
Según su composición química: 
 Naturales o no sintéticos: 
– No es posible conocer la proporción exacta de sus componentes nutricionales. 
(Composición química indefinida) 
– Se utilizan en su forma natural, tal y como se encuentran en la naturaleza. 
– Suplementados con extractos nutritivos (peptonas, extracto de carne, extracto de 
levadura, etc), suero, sangre, etc 
 Sintéticos: Compuestos por un conjunto de nutrientes definidos cuyas proporciones son 
constantes, lo que permite reproducir el mismo medio de cualquier otro lote con exactitud. 
 
Según su consistencia: 
 Líquidos: Ausencia de Agar (Caldos). 
 Semilíquidos: 0,05-0,2 % de Agar. 
 Semisólidos: 0.3-0,5 % de Agar. 
 Sólidos: 1-1,7 % de Agar, cantidad suficiente para la gelificación del medio. 
 
Según sus usos: 
 Universales o generales 
 Medios de enriquecimiento 
 
Métodos de Cultivo 
Es la forma de obtención de un cultivo microbiano. 
 
1. Inóculo: Una cantidad de microorganismos o de material infeccioso. 
2. Siembra: Acto de colocar un inóculo en el medio de cultivo. 
3. Resiembra: Traslado de microorganismos de un medio de cultivo a un nuevo medio 
estéril. 
 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Formas de sembrar 
1. Con asa por estrías en superficie de agar 
2. Con aguja por punción en profundidad 
3. Con pipetas 
4. Con hisopo 
 
Cultivo de virus: 
– Cultivo primarios 
– Líneas celulares diploides (cultivos secundarios) 
– Líneas celulares continuas 
 
Cultivo de Hongos: 
– Juego de pares: uno se incuba entre 25 y 30OC y otro entre 35 y 37OC 
 
Crecimiento 
Aumento ordenado de todos los componentes químicos de un organismo. 
 
Fase I: Fase lag o de retraso Vc=0 
Adaptación a un medio ambiente de 
células empobrecidas del arsenal 
metabólico. Cese parcial de las 
funciones metabólicas. Formación de 
enzimas y metabolitos para la 
reanimación del crecimiento. 
 
Fase II: Fase de aceleración positiva 
Vc=creciente. 
Se forman enzimas y metabolitos 
intermedios que se acumulan hasta 
alcanzar concentraciones que 
permiten que el crecimiento se reinicie. 
 
Fase III: Fase exponencial o de crecimiento logarítmico. Vc=constante. 
Aumento en forma exponencial de la masa bacteriana. 
Equilibrio de flujo de material. 
En esta fase las células se encuentran en un estado de crecimiento sostenido. 
Se sintetiza material celular a una tasa constante y la masa aumenta de manera exponencial 
hasta que los nutrientes del medio se agoten o se acumulen sustancias tóxicas que inhiban el 
crecimiento. 
 
Fase IV: Fase de desaceleración o retardo. Vc=decreciente. 
Las células viven del metabolismo endógeno, disminuye la velocidad de crecimiento. 
 
Fase V: Fase estacionaria máxima. Vc=0 
Cese completo del crecimiento por agotamiento de nutrientes y acumulación de sustancias 
tóxicas. 
 
Fase VI: Fase de declinación o muerte. VC=negativa. 
La célula pierde toda la capacidad para los procesos degradativos. 
 
Aplicación de la curva de crecimiento: 
 Son fuente constante de células en fase exponencial. 
 Permiten crecimiento continuo a una concentración muy baja de sustrato. 
– Medida de frecuencia de mutaciones en las bacterias. 
– Cambios evolutivos en poblaciones bacterianas. 
– Medir cinética de inducción en enzimas inducible a concentraciones bajas del inductor. 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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GENÉTICA MICROBIANA 
GEN: 
Segmento de ADN que contiene en su secuencia de nucleótidos, la información para determinado 
carácter (fisiológico, bioquímico, morfológico). Constituye la unidad de la herencia. 
 
Funciones del material genético 
1. Replicación Proceso mediante el cual la progenie hereda todos los determinantes 
genéticos específicos (Genotipo) de los progenitores. 
2. Expresión: Determina las características estructurales y fisiológicas observables (fenotipo) 
de una célula 
 
Genotipo: Conjunto de genes 
 
Fenotipo: 
expresión del material genético, bajo determinadas condiciones de crecimiento, determina los 
caracteres observables. Con otras palabras: Está constituido por las Propiedades estructurales 
y fisiológicas colectivas de una célula o de un organismo 
 
Organización del genoma 
1. Genoma Eucariótico: Está contenido en dos cromosomas lineales, separados del citoplasma 
por la membrana nuclear. 
Replicación del cromosoma eucariótico 
La secuencia de iniciación de la replicación se encuentra en varios puntos a lo largo del 
cromosoma lineal 
Maquinaria especializada: Huso, Mitosis, Meiosis. 
 
2. Genoma Viral 
Puede contener ADN o ARN como material genético. 
La replicación del genoma viral depende de la energía metabólica y de la maquinaria 
sintetizadora de macromoléculas del hospedero. (Parásito intracelular obligado) 
 
3. Genoma Procariótico 
DNA circular. Elemento genético autorreplicable (replicón) 
 
Replicación del cromosoma bacteriano 
Durante la replicación cada banda helicoidal del ADN sirve como un molde para la síntesis de 
una nueva banda complementaria. 
Cada molécula de doble cadena de ADN hija contiene una banda de polinucleótido vieja y una 
banda nueva sintetizada. Este tipo de replicación del ADN se denomina semiconservativo 
 
MUTACIONES: 
Cambios en la secuencia de nucleótidos de un gen, traen variaciones fenotípicas y genotípicas. 
 
Las mutaciones pueden ser: 
1. Puntuales: Cambios en un par de bases 
2. Múltiples: Cambios en dos o más pares 
de bases 
 
La mutación puede ser: 
1. Espontáneas: Alteración en la replicación, son raras en las bacterias individuales. Baja 
frecuencia 
2. Inducidas: 
• Agentes mutagénicos físicos: rayos gamma, rayos X, luz UV. 
• Agentes mutagénicos químicos: pigmentos de cridina, agentes alquilantes. 
 
La mutación puede ocurrir por: 
1. Sustitución de un par de bases por otro 
2. Pérdida de un par de bases(supresiones) 
3. Inserción de un par de bases 
4. Reordenamiento de bases 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍARANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Transposones 
Segmentos de ADN que pueden moverse de un sitio a otro en una molécula de ADN o a una 
molécula diferente de ADN. (Proceso de Transposición). 
Causan mutaciones y no son elementos genéticos autorreplicables. 
 
Plásmidos 
1. Pequeñas moléculas de doble cadena y circulares de ADN extracromosómico en las 
bacterias 
2. Autorreplicables (independientes de la replicación del cromosoma) 
3. Determinan rasgos genéticos adicionales (que no son esenciales para la viabilidad 
bacteriana). Ej: Resistencia antimicrobiana (Bacterias) y Mecanismos de patogenicidad 
(protozoos) 
Controlan la resistencia a uno o varios antibióticos, producción de toxinas y síntesis de estructuras 
de la superficie celular requeridas para la adherencia o colonización. 
 
Plásmidos más frecuentes: 
1. Plásmidos F (fertilidad, confiere la capacidad de transferencia de genes) 
2. Plásmidos col (información para la producción de colicinas) 
3. Plásmidos que codifican toxinas 
4. Plásmidos R (confieren resistencia a antibióticos) 
a. Factor de transferencia de resistencia. 
b. Determinante de resistencia. 
 
Los plásmidos son los elementos genéticos que con mayor frecuencia se transmiten por 
conjugación. 
 
Bacteriófago: (virus bacterianos, fagos) 
Son agentes infecciosos que se replican como parásitos obligados intracelulares en las bacterias. 
 
Recombinación genética de las bacterias: 
Transferencia de material genético. Proceso en el que coexisten una célula donadora y una 
aceptora, la cual adquiere características nuevas provenientes de la primera. 
• Mecanismos 
– Transformación 
– Transducción (mediada por fagos) 
– Conjugación (mediada por plásmidos) 
 
Mecanismos de RECOMBINACIÓN GENÉTICA: 
1.Transformación: Transferencia de un fragmento de ADN desnudo libre en el medio, de un 
genoma donador a través de la membrana celular receptora y la incorporación de este fragmento 
en el genoma de esta célula. 
 
2.Conjugación: Transferencia de material genético en una sola dirección, desde una célula 
donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos (Ej: Plásmido F, 
de fertilidad) y que requiere contactos directos entre ambas, con intervención de estructuras 
superficiales especializadas (Ej: Fimbrias o Pili sexual). 
 De manera resumida: Es el paso de material genético desde una célula donante a una 
receptora a través de un puente de conjugación (Pili F) 
 
3.Transducción: Transferencia de genes entre una célula donadora y una aceptora mediada por 
fagos o bacteriófago. 
 
Aplicación en la biotecnología 
1. Recombinación in vitro de moléculas de ADN no homologas 
2. Creación de organismos nuevos desde el punto de vista genético que conservan las 
características propias 
3. Ingeniería genética o ADN recombinante 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Técnicas de ADN recombinante: permiten seleccionar región de ADN que contenga gen que se 
quiere estudiar su secuencia y construir un híbrido con un sistema génico que confiera estabilidad 
y capacidad de replicación en el interior de una célula viva. 
Perspectivas del uso de recombinantes: 
1. Permite conocer los sistemas de regulación, secuencias y regiones clonadas en los genes. 
2. Obtención de proteínas biológicas con propiedades específicas a una alta concentración 
y bajo costo. 
3. Obtención de antígenos víricos o bacterianos para elaborar vacunas, enzimas, hormonas 
en grandes cantidades mediante cultivos industriales. 
____________________________________________________________________________ 
EFECTO DE LOS AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS SOBRE LOS 
MICROORGANISMOS 
 
Agentes antimicrobianos: Son aquellos utilizados para destruir o impedir el crecimiento de los 
microorganismos. 
 Por su estado: 
 Líquidos, sólidos o gases. 
 Por su naturaleza: 
 Físicos: calor (húmedo y seco), filtración y radiaciones. 
 Químicos. 
 
Modos de acción 
1. Desnaturalización de las proteínas 
2. Rompimiento de la membrana o de la pared celular 
3. Remoción de grupos sulfhidrilo libres 
4. Interferencia con reacciones enzimáticas 
5. de los MO y acción sobre el ADN. 
 
CONCEPTOS BÁSICOS 
1. Bacteriostático: Agente que inhibe el crecimiento de la bacteria; este se reanuda cuando 
se retira el agente. Acción reversible 
2. Bactericida: Agente que mata las bacterias. La mayoría no mata a las esporas bacterianas. 
Acción irreversible 
3. Germicida: Agente capaz de matar MO rápidamente. Algunos actúan matando ciertos MO, 
e inhiben el crecimiento de otros 
4. Virucida: Agente que inactiva a los virus 
5. Fungicida: Agente que mata a los hongos 
6. Esporicida: Agente que mata a las esporas bacterianas o micóticas 
7. Estéril: Libre de vida de cualquier clase 
8. Séptico: Presencia de MO perjudiciales en tejido vivo 
9. Aséptico: Ausencia de MO patógenos. 
 
Toxicidad Selectiva 
Capacidad del antimicrobiano para inhibir procesos metabólicos en el MO a concentraciones 
toleradas por el hospedero, resultando nocivo para el parásito e inocuo para el hospedero. 
 
Desinfectante 
Agente químico usado para matar MO sobre objetos inanimados. Resulta tóxico para ser 
aplicado directamente a los tejidos, por no tener toxicidad selectiva. 
 
Antisépticos 
Agente químico usado para matar MO sobre la piel y en casos especiales, sobre las mucosas. 
 
Esterilización 
Proceso de destrucción o remoción de todas las formas de vida, patógenas o no, de un material 
u objeto 
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Desinfección 
Remoción de determinado objeto o de su superficie, de la totalidad o parte de los MO 
patógenos de manera que no constituyan una amenaza de enfermedad 
 
Antisepsia 
Concepto de desinfección aplicada a los tejidos 
 
Muerte Bacteriana 
Pérdida irreversible de la capacidad de reproducirse (crecer y multiplicarse). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. Calor: Método muy eficaz en la destrucción de MO. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Calor húmedo: (generalidad) 
• Desnaturalización y coagulación de las 
proteínas que constituyen las células 
microbianas. 
• Altera la estabilidad de la membrana 
citoplasmática bacteriana. 
• Salida de los constituyentes 
intracelulares como los iones potasio, 
aminoácidos y otros. 
 
Calor húmedo bajo presión: 
 Equipos de esterilización 
(Autoclaves). 
 Temperatura de 1210C y una presión 
de 15 lb/pulg2, en 15 minutos. 
 Esterilización del material quirúrgico, 
ropas y medios de cultivos. 
 
Calor húmedo a temperatura inferior a 
1000C: 
 Pasteurización. 
 Muy utilizado en la industria 
alimentaria. 
 
Calor húmedo a temperatura de 100 C: 
 Agua en ebullición y Vapor fluente.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Calor seco: 
 Oxidación de los componentes de las 
células y la coagulación de sus 
proteínas. 
 Estufas de aire caliente (hornos tipo 
Pasteur) 
 Temperaturas de 160-1800C, por 1-2 
horas. 
 Materiales de vidrio, objetos de 
metal, aceites, grasas sólidas y 
líquidas, entre otras. 
 
Incineración: 
 Mata por carbonización todos los MO 
presentes en el material o 
preparación. 
 Para esterilizar los instrumentos de 
siembra (asas y agujas de platino), 
destrucción de residuos hospitalarios 
y de laboratorios. 
 
Filtración 
 Ideal para la remoción de MO de 
líquidos y gases termolábiles y del 
propio aire atmosférico. 
 Paso de un líquido o gas a través de un 
filtro capaz de retener los 
microorganismos presentes. 
 Elimina debido a su talla bacterias, 
hongos y moléculas 
 
Radiaciones: 
杲 Ionizantes (rayos X, gamma, y 
catódicos): Acción sobre los 
constituyentes de las células, el ADN 
y las proteínas celulares. 
杲 No Ionizantes (rayos UV): Deben su 
efecto microbicida a su absorción por 
diferentes componentescelulares y 
alteración estructural del ADN. 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Clasificación de los agentes químicos 
según el mecanismo de acción: 
1.- Agentes Químicos que desnaturalizan las 
proteínas: 
 Iones de metales pesados a altas 
concentraciones 
 Fenol 
 Alcohol 
 
2.- Agentes que alteran las funciones de la 
membrana celular: 
 Detergentes 
 Fenoles 
 Alcoholes 
 
3.- Agentes que modifican los grupos sulfhidrilo 
 Agentes Oxidantes: Halógenos (Yodo y Cloro), Agua Oxigenada, Permanganato de 
Potasio, Ácido Peracético (Es un fuerte agente oxidante. En forma de vapor se usa en la 
esterilización de cámaras de cría de animales libres de gérmenes). 
 Metales pesados: Derivados de Hg, Ag y Zn. 
 Agentes alquilantes: Formaldehído y Óxido de Etileno. 
 
Fenoles 
Alteran la estructura y los mecanismos de permeabilidad selectiva de la membrana celular. 
Desnaturalizan las proteínas. 
 
Alcoholes 
(Etílico e Isopropílico) 
Acción pobre o nula sobre las esporas 
[70%] óptima: 
 Solubilizar los lípidos de las membranas celulares 
 Alterar y precipitar las proteínas. 
 
Halógenos 
Yodo y Cloro 
Destruyen act. proteínas celulares por oxidación de sus grupos sulfhidrilos. 
Empleo: TTO H2O, desinfección de objetos y superficies no metálicas, y cristalería de laboratorio. 
 
Aldehídos 
(Formaldehído, óxido de etileno y glutaraldehído) 
Agentes alquilantes, 
Inactivan enzimas y proteínas, mediante la sustitución de átomos lábiles de H+, por radicales 
alquilo. 
 
Metales Pesados 
Sales de Hg, Ag y Cu: 
[altas] Desnaturalizan las proteínas y son perjudiciales tejidos humanos. 
[bajas] Se combinan con los grupos sulfhidrilo. 
 
Detergentes Catiónicos 
(Cloruro de benzalconio, cetavlón y cetrimida) 
Actúan alterando la función de la membrana celular bacteriana. 
____________________________________________________________________________ 
QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA. RESISTENCIA BACTERIANA. 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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Para que un agente 
quimioterápico sea efectivo en el 
tratamiento de una enfermedad 
infecciosa no sólo debe de matar 
o inhibir al microorganismo 
causante de la infección, sino que 
además debe ser relativamente 
inocuo para las células humanas 
al exhibir 
 
Toxicidad Selectiva 
Capacidad del antimicrobiano 
para inhibir procesos 
metabólicos en el MO a 
concentraciones toleradas por 
el hospedero. 
 
Agentes Antimicrobianos 
 Bactericidas: β-lactámicos, 
aminoglucósidos, rifampicina, 
vancomicina, polimixinas, 
fosfomicina, quinolonas y 
nitrofurantoínas. 
 Bacteriostáticos: Tetraciclinas, 
cloranfenicol, macrólidos, 
lincosaminas, sulfamidas y 
trimetoprima. 
 
 
INHIBICIÓN FUNCIONES MEMBRANA CELULAR 
 
Polienos: 
Anfotericina B, 
nistatina. 
 
Azoles: 
Miconazol, 
ketoconazol, 
Fluconazol, 
Clotrimazol 
 
Alilaminas: 
Terbinafina 
Inhibición de la síntesis proteica 
La inhibición selectiva de la síntesis proteica es posible gracias a las diferencias estructurales 
entre los ribosomas bacterianos y eucariotas. 
Ribosomas bacterianos: 
 Subunidad 30S: ARNr 16S y diversas proteínas llamadas S (small o pequeña) 
 Subunidad 50S: ARNr 5S y ARNr 23S y proteínas L (large o grande) 
 Se inhibe la transducción del material genético. 
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Inhibición de la síntesis de ácidos nucleicos 
 
 Inhibición de la síntesis de ADN por bloqueo de la ADN girasa (Quinolonas) 
 Inhibición de la síntesis bacteriana del ARN por bloqueo de la subunidad beta de la ARN 
polimerasa ADN-dependiente bacteriana. (Rifampicina) 
 Liberación de radicales nitritos que dañan el ADN por oxidación. (Nitroimidazoles) 
 Nitrofurantoína (Se reducen en el citoplasma bacteriano para generar derivados tóxicos que 
dañan el ADN). 
 
Bloqueo de la síntesis de factores metabólicos 
 
Política para el uso de los antimicrobianos 
 No indicar antibióticos innecesariamente. 
 Educar a pacientes y familiares en el uso apropiado. 
 Identificar a los MO patógenos a través de los estudios microbiológicos. 
 Completar totalmente el tratamiento. 
 Uso prudente del tratamiento profiláctico. 
 Velar estrictamente por el cumplimiento de los procedimientos de higiene. 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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 Establecer sistemas de vigilancia para el control de la resistencia. 
 Uso juicioso de los antibióticos en animales y plantas. 
 
¿CÓMO ELEGIR EL ANTIMICROBIANO ADECUADO? 
1. Conocer la sensibilidad 
 Antimicrobiano más activo 
 A ser posible que sea bactericida 
 Espectro reducido 
 
Consecuencias del uso inadecuado de los Antibióticos 
 Sensibilización de la población. 
 Cambios en la Microbiota normal. 
 Enmascaramiento de infecciones graves y sus síntomas. 
 Toxicidad directa del medicamento. 
 Desarrollo de Resistencia Microbiana. 
 
RESISTENCIA ANTIMICROBIANA 
 
 
Origen de la resistencia de las bacterias a los antibióticos 
 
1. Origen no genético 
 Bacterias metabólicamente inactivas, pueden resultar fenotípicamente resistentes a la 
droga. 
 Pérdida de la estructura de blanco específico para ciertos medicamentos. Puede 
ocurrir por varias generaciones y volverse de esta forma resistente. 
 Ejemplo: Formas L bacterianas, Micobacterias persistentes, Microorganismos dentro 
de macrófagos. 
 
2. Origen genético 
 Resistencia cromosómica 
– Cuando en un locus que controla la susceptibilidad a un antimicrobiano se 
desarrolla una mutación espontánea.(al azar) 
– Ejemplos: 
 Transformación de una Betalactamasa en una Betalactamasa de espectro 
extendido. 
 Mutaciones de los genes que codifican las porinas con el consecuente 
bloqueo del ingreso del antibiótico al interior del microorganismo. 
 
 
2. Valorar estado del huésped 
 Poco tóxico 
 Características farmacológicas adecuadas 
 A la igual eficacia al más barato 
 
01- GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGÍA RANDY MEJÍAS GONZÁLEZ 
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 Resistencia extracromosómica 
– Proceso más común a través del cual la resistencia antibiótica es diseminada. Se 
logra principalmente a través de tres mecanismos: transformación, transducción o 
conjugación. 
Transformación: Las bacterias pueden incorporar ADN del medio ambiente y si éste 
posee genes que codifican la resistencia a uno o más antimicrobianos, la bacteria se 
convierte en resistente a estos 
 
Conjugación 
Importante entre bacterias gram (-), sobre todo en Enterobacterias como: E. coli, Salmonella 
y Shigella 
Resistencia a: Tetraciclinas, cloramfenicol, sulfonamidas, penicilinas y aminoglucósidos 
 
Transducción 
El bacteriófago transfiere ADN extracromosomal (Plásmido R) o una porción del cromosoma, 
desde una bacteria resistente a una sensible, de esta forma la bacteria sensible adquiere la 
resistencia y la capacidad de transferirla a su descendencia. 
Se observa en: Staphylococcus aureus que adquieren resistencia a las penicilinas. 
 
Resistencia cruzada: 
 Es aquella que se condiciona en la bacteria de forma simultánea para antibióticos que 
comparten total o parcialmente un mismo mecanismo de acción. 
 Esta relación existe de modo principal entre estructuras químicas análogas 
(Aminoglucósidos) o que tienen un modo semejante de acción o fijación (Macrólidos y 
Lincomicina) 
 
Mecanismos de resistencia bacterianos 
1. Inactivación enzimática 
La ß-lactamasa rompe la unión amida del anillo ß-lactámico. Genera un compuesto inactivo. 
(Ac.peniciloico) 
 
2. Cambios en la permeabilidad(de la membrana externa) al fármaco. 
La modificación de las porinas disminuye la permeabilidad a los ß-lactámicos, por lo que no 
pueden interactuar con las proteínas "blanco", localizadas en la membrana interior. 
 
3. Modificación estructural del blanco o sitio de acción de la droga. 
El mecanismo de resistencia es el cambio en la estructura terciaria del sitio donde el AB efectúa 
su acción. 
Ejemplos: 
 Alteración de las PBP (β-lactámicos) 
 Alteración del receptor sobre la subunidad 50S (Eritromicina) 
 Alteración de la subunidad A de la ADN girasa. (Quinolonas) 
 Alteración de la subunidad B de la ARN polimerasa. (Rifampicina) 
 
4. Desarrollo de bombas de eflujo activo. 
La bacteria expulsa el antibiótico, mediante un mecanismo de transporte activo. 
(Las porinas son orificios constituidos por proteínas, que forman canales destinados a la difusión 
libre de líquido del exterior hacia su interior) 
 
5. Desarrollo de una vía metabólica diferente que pasa por alto la reacción inhibida por el 
antibiótico. 
 Sulfonamidas: Los Mo resistentes no requieren PABA extracelular y utilizan el 
ácido fólico preformado. 
 
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6. Desarrollo de una enzima diferente, que todavía puede efectuar su acción metabólica, 
pero es mucho menos afectada por el fármaco. 
 Sulfaprim: En MO resistentes la dihidrofolato-reductasa, se inhibe menos que en 
una cepa sensible. 
 
Los mecanismos de resistencia bacterianos pueden ponerse en evidencia en el laboratorio a 
través de pruebas conocidas como: Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana y se conocen 
con el nombre genérico de ANTIBIOGRAMA 
 
Antibiograma 
Consiste en enfrentar un MO (a una [x] predeterminada) a una [x] conocida del medicamento, 
para apreciar y medir el comportamiento del crecimiento del MO en un tiempo y a una temperatura 
dados, y compararlos con un patrón estándar conocido. 
 
Difusión (Bauer-Kirby) 
Es el internacionalmente 
recomendado para la práctica 
hospitalaria de rutina por su 
gran sencillez y bajo costo. 
 
Macrodilución: 
Es un método bastante 
exacto, pero de gran 
complejidad de realización y 
elevado costo. Nos da la CMI, 
que es la [x] más baja que es 
capaz de inhibir el crecimiento 
del MO. 
 
____________________________________________________________________________ 
QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA. MÉTODOS DE RESPALDO AL TRATAMIENTO 
ANTIMICROBIANO. 
 
Los mecanismos de resistencia bacterianos pueden ponerse en evidencia en el laboratorio a 
través de pruebas conocidas como: Pruebas de Susceptibilidad 
 
NOTAS: 
 En la actualidad existen más de un centenar de drogas antimicrobianas con capacidad 
variada para inhibir y matar microorganismos. 
 Han sido clasificadas en grupos de acuerdo a diferentes características, una de ellas es 
precisamente su mecanismo de acción, o lo que es lo mismo, el modo o ruta biológica que 
siguen a través de la célula para lograr su efecto. 
 Los mecanismos de resistencia de las bacterias de tipo genético constituyen la respuesta 
a los mecanismos por los que los antibióticos actúan. 
 Los mecanismos de resistencia genéticos tienen un carácter heredable y transmisible. 
 los mecanismos de resistencia bacterianos, no actúan por separado, por lo general se 
ponen de manifiesto de forma conjunta, aunque alguno en particular sea el que 
prevalezca. A este detalle precisamente se debe que los mecanismos de resistencia 
bacterianos sean tan eficientes. 
 
Las pruebas que miden la susceptibilidad a los antimicrobianos se conocen con el nombre 
genérico de ANTIBIOGRAMA. 
Un Antibiograma consiste en enfrentar un microorganismo a una concentración conocida de una 
droga antimicrobiana para evaluar su efecto midiendo el crecimiento microbiano a una 
temperatura y tiempos dados y comparándolos con un estándar de referencia 
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Todos los métodos de laboratorio conocidos se basan en diluir o hacer difundir el antibiótico que 
se va evaluar en un medio de cultivo específico donde posteriormente se cultiva el 
microorganismo de prueba. 
Algunos métodos combinan ambos principios (difusión y dilución) como el E-test. 
Otros, son métodos automatizados de fundamento variable en dependencia del sistema 
empleado. 
En todos los casos los resultados se interpretan a través de las denominadas categorías de 
susceptibilidad. 
 
Las categorías de susceptibilidad son... 
SUSCEPTIBLE: (S) 
Significa que el microorganismo causante del proceso infeccioso debe responder exitosamente 
al tratamiento con ese antibiótico a las dosis habituales recomendadas y por una vía apropiada. 
 
MEDIANAMENTE SUSCEPTIBLE O INTERMEDIO: (MS o I) 
Significa que el microorganismo solo se inhibirá por la droga, si ésta se aplica en una dosis 
máxima y utilizando una vía parenteral. 
Salvo excepciones, estos medicamentos no deben seleccionarse para el tratamiento, sobre todo 
aquellos casos en los que la dosis terapéutica está muy cercana a los rangos de toxicidad. 
 
RESISTENTE: (R) 
Significa que el microorganismo no se inhibirá a las concentraciones séricas habitualmente 
alcanzadas por la droga cuando ésta se administra a la dosis y por la vía recomendadas. 
 
los resultados que se obtienen en el laboratorio a través de una prueba de susceptibilidad por 
cualquiera de los métodos que se emplee, lejos de ser un resultado frío cualitativo y/o cuantitativo, 
constituye el fiel reflejo de los procesos moleculares que se producen en la célula. 
 
EL MÉTODO DE MACRODILUCIÓN EN CALDO: 
 Fue el primero que se diseñó y constituye el método de referencia. 
 Se realiza en tubos que contienen un caldo de cultivo apropiado (Caldo de Mueller-Hinton). 
 En ellos se realizan diluciones sucesivas del antibiótico partiendo de una concentración 
conocida del mismo 
 Luego, los tubos se inoculan con igual cantidad de inóculo del microorganismo de prueba 
y se incuban durante 18 – 24 horas a 37o C, tiempo al cabo del cual se realiza la lectura. 
 
Lectura: Se realiza a simple vista, identificando el tubo con la menor concentración del 
antibiótico en la cual hay total ausencia de turbidez indicadora de no crecimiento bacteriano. 
Observa la siguiente imagen: 
 
De derecha a izquierda: el tubo número 3 sería 
en la serie el identificado con la menor 
concentración en la cual no existe crecimiento 
microbiano visible. 
 
La menor concentración del antibiótico identificada 
en la cual no se observa crecimiento microbiano, 
se conoce como la concentración mínima 
inhibidora y se identifica por las siglas CMI que se 
expresa en µg/ml. 
 
Este resultado se compara con estándares de referencia creados al efecto internacionalmente 
por el que se determina entonces, que categoría de susceptibilidad se corresponde con esta 
concentración para ese antibiótico en específico. 
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Informe del Laboratorio 
El laboratorio informará el nombre del antibiótico y a continuación el valor de la CMI obtenido 
seguido entre paréntesis de la categoría de susceptibilidad correspondiente. 
Ejemplo: Penicilina: 32 µg/ml (R) 
 
Ventajas del método: Bastante exacto 
Desventajas: Gran complejidad de realización y elevado costo 
 
 
MÉTODO DE MICRODILUCIÓN EN CALDO: 
 Es el mismo método llevado a microténica. 
 Se realiza en placas de microtitulación de fondo plano. 
 Tiene como ventajas que emplea una pequeña cantidad de recursos y mayor factibilidad de 
realización. 
 Se considera el ideal para monitorear el tratamiento antimicrobiano en el paciente grave. 
 Muchos métodos automatizados tienen actualmente como base esta variante. 
 
MÉTODO DE DIFUSIÓN DE BAUER-KIRBY: 
Es el internacionalmente recomendado parala práctica hospitalaria de rutina por su gran sencillez 
y bajo costo, aunque es necesario señalar que puede estar sujeto a múltiples errores técnicos 
por lo que debe ser seguido a través de un exhaustivo control de la calidad. 
1. Se realiza en placas de cultivo conteniendo Agar de Mueller-Hinton sobre las que se extiende 
el microorganismo de prueba con un hisopo de algodón estéril. 
2. Sobre la placa inoculada se colocan, ayudados por una pinza y bajo condiciones estériles, 
pequeños discos de papel de filtro preparados comercialmente que contienen cantidades 
específicas de cada antibiótico. 
3. Las placas se incuban por 18-24 horas tiempo al cabo del cual se realiza la lectura. 
 
Observa el siguiente diagrama 
Aquí de una forma muy simple se esquematizan los pasos de que 
consta el montaje de un antibiograma por el método de difusión 
de Bauer-Kirby, llamado así precisamente en honor a sus 
diseñadores 
Al concluir este paso se realiza la incubación y posteriormente la 
lectura... 
 
LECTURA: 
El antibiótico impregnado en el disco, al hacer contacto con la 
superficie húmeda de la placa difunde en el medio impidiendo el 
crecimiento del microorganismo de prueba. 
En correspondencia con el grado de susceptibilidad, como 
resultado se producirá un halo de transparencia (halo de 
inhibición del crecimiento) alrededor de cada disco de antibiótico. 
 
En este momento se procederá a medir con una regla plana el 
diámetro de cada uno de estos halos en milímetros. 
Cada resultado se anotará para luego compararlo con los datos 
de las tablas con los valores de referencia creados al efecto 
para así determinar las categorías de susceptibilidad. 
 
El laboratorio informará 
El nombre del antibiótico y seguidamente la categoría de 
suceptibilidad correspondiente. 
Ejemplo: Penicilina: R 
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OTROS CONCEPTOS BÁSICOS: 
Patógeno: 
Organismo que tiene la potencialidad de causar enfermedad, la que dependerá de la dosis 
infecciosa del parásito, la puerta de entrada y del hospedero. 
 
Microorganismos Virulentos: 
Tienen la capacidad de causar enfermedad cuando se introducen en el hospedero en cantidades 
pequeñas. 
 
Microorganismos Oportunistas: 
Solamente inducen enfermedad cuando los mecanismos de defensa del hospedero están 
comprometidos o debilitados 
 
Proceso Infeccioso depende de: 
1. Dosis infecciosa del microorganismo 
2. Puerta de Entrada 
3. Hospedero