M-04-013-LAB-Hematología-Coagulación

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MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
1. INTRODUCCIÓN 
 
El laboratorio clínico es un ambiente dinámico que está continuamente cambiando para satisfacer las 
necesidades de salud pública, el aspecto valioso de la información es que tiene un enfoque actual de los 
procesos habituales de laboratorio como la tendencia tecnológica de la automatización, lo que permite enfrentar 
el reto de manejar pruebas más sensibles, específicas y efectivas en el monitoreo de la salud y la enfermedad. 
Además, la posibilidad de obtener resultados a tiempo y el costo-beneficio que representa. 
 
La función de las áreas de Hematología y Coagulación es realizar análisis cuantitativos en diferentes muestras 
biológicas. Para que los resultados de dichos análisis sean útiles a los médicos en el diagnóstico, tratamiento 
y seguimiento de una patología, éstos deberán realizarse bajo un estricto control de calidad logrando niveles 
óptimos de precisión y exactitud, características deseables en cualquier resultado de diagnóstico, para 
garantizar dicha calidad el laboratorio cuenta con tecnología de punta con equipos automatizados que 
minimizan el posible error. 
 
2. OBJETIVOS 
 
GENERAL: Estandarizar los procedimientos de las secciones de hematología y coagulación como guía al 
bacteriólogo en los procedimientos que se llevan a cabo en estas áreas, generando resultados confiables y de 
calidad que contribuyan a un diagnóstico seguro 
 
ESPECIFICOS: 
 
 Proporcionar una guía práctica y de fácil manejo para la estandarización y ejecución de las técnicas que 
se realizan en esta área. 
 Analizar las muestras de cada una de las áreas bajo un estricto control de calidad, con el fin de generar 
resultados confiables que contribuyan con el diagnóstico, seguimiento y control de los pacientes 
 Llevar a cabo un programa riguroso de control de calidad para garantizar resultados confiables. 
 Interpretar cada uno de los resultados obtenidos y su correlación diagnostica garantizando una continua 
comunicación del laboratorio con médicos y pacientes. 
 
3. ALCANCE 
 
Este manual está dirigido a los profesionales de Laboratorio Clínico PROMEDAN (Bacteriólogos y 
microbiólogos). Inicia con la definición de procedimientos y finaliza con el reporte de resultados confiables y 
seguros. 
 
4. CONCEPTOS GENERALES 
 
Coagulación: Se denomina coagulación al proceso por el cual la sangre pierde su liquidez, tornándose similar 
a un gel en primera instancia y luego sólida, sin experimentar un verdadero cambio de estado. Cuando una 
lesión afecta la integridad de las paredes de los vasos sanguíneos se ponen en marcha una serie de 
mecanismos que tienden a limitar la pérdida de sangre. Estos mecanismos llamados de "hemostasia" 
comprenden la vasoconstricción local del vaso, el depósito y agregación de plaquetas y la coagulación de la 
sangre. 
 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
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Hematología: La hematología es la rama de la ciencia médica que se encarga del estudio de los elementos 
formes de la sangre y sus precursores, así como de los trastornos estructurales y bioquímicos de estos 
elementos que puedan conducir a una enfermedad. 
 
5. CONTENIDO 
 
ANALIZADOR AUTOMATIZADO AREA HEMATOLOGIA 
 
 XN-1000 
 
 
 
Características del analizador XN-1000 
 
Capaz de procesar hasta 100 muestras por hora y de reanalizar, de forma automática a través de la función 
rerun y reflex, las muestras consideradas patológicas basadas en criterios y reglas de decisión clínica a bordo, 
el XN-1000 es el analizador de hematología compacto de alto rendimiento equipado con todos los parámetros 
de aplicación clínica disponibles como eritroblastos (NRBC), granulocitos inmaduros (IG), reticulocitos (RET), 
la fracción de reticulocitos inmaduros (IRF), el contenido de hemoglobina en los reticulocitos (RET-He) y la 
fracción de plaquetas inmaduras (IPF). 
 
Tecnología: Citometría de flujo con fluorescencia en todos los modos 
 
Volumen de aspiración: 88 μl en todos los modos 
 
Productividad: A partir de 100 muestras/hora 
 
Control de calidad: XN Check y XN Check BF 
 
 
 
 
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Parámetros 
 
 28 parámetros de diagnóstico, siempre estandarizados 
 XN-CBC = siempre con eritrocitos nucleados 
 XN-DIFF = eficacia del XE-5000 
 16 parámetros de diagnóstico opcionales 
 
Actividades 
 
Procedimiento Descripción Responsable Registro 
Hemograma 
automatizado – 
Hb/Hto 
 
Muestra: Sangre total con EDTA. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y v pediátrico 2 ml. 
 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperatura de 4 a 8°C. 
Tiene como contraindicaciones la hemólisis, 
presencia de coágulos, presencia de fibrina, 
relación muestra/anticoagulante inadecuada. 
 
Procesamiento: los tubos se ubican en los racks 
del equipo XN 1000, y estos se ponen en la 
bandeja de entrada del analizador. 
 
Resultados y Validación: El equipo arroja 
resultados numéricos y gráficas con histograma 
y dispersograma, en él se revisan inicialmente, 
tanto los datos como las gráficas. 
Automáticamente los resultados son transmitidos 
al programa ENTERPRISE, allí se revisan 
nuevamente al momento de ser validados, 
correlacionándolos con la clínica de cada 
paciente, el diagnóstico y los resultados 
anteriores 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Recuento de 
plaquetas 
Muestra: Sangre total con EDTA y sangre total 
con Citrado de Sodio. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico. 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperatura de 4 a 8°C. 
Tiene como contraindicaciones la hemólisis, 
presencia de coágulos, presencia de fibrina, 
relación muestra/anticoagulante inadecuada. 
 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
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Procesamiento: los tubos se ubican en los racks 
del equipo XN 1000, y estos se ponen en la 
bandeja de entrada del analizador. 
 
Se sugiere tomar la muestra en tubo con citrato 
de sodio cuando se observan agregados 
plaquetarios en el ESP en muestras tomadas con 
EDTA, ya que algunos pacientes presentan Acs 
que reaccionan frente al EDTA. 
 
Resultados y Validación: El equipo arroja 
resultados numéricos y gráficas con histograma 
y dispersograma, en él se revisan inicialmente, 
tanto los datos como las gráficas. 
Automáticamente los resultados son transmitidos 
al programa ENTERPRISE, allí se revisan 
nuevamente al momento de ser validados, 
correlacionándolos con la clínica de cada 
paciente, el diagnóstico y los resultados 
anteriores. Si es el caso, se hace claridad en el 
resultado que la muestra ha sido tomada en tubo 
con anticoagulante citrato de sodio por solicitud 
médica. 
Extendido de 
Sangre 
Periférica 
(ESP) 
Extendido de sangre periférica en lámina porta 
objeto, la placa se puede guardar el tiempo que 
sea necesario, tener la precaución de guardarla 
libre de polvo limpiando el aceite de inmersión o 
guardarla en cajas para porta objetos. 
 
Procedimiento: Uno de los métodos más 
empleados es el de los dos láminas porta 
objetos: Extensión de una gota de sangre sobre 
un portaobjetos mediante otro portaobjetos. 
 
 Rotular lámina portaobjeto. 
 Depositar una pequeña gota de sangre 
capilar a 1 cm del extremo del portaobjetos. 
(La muestra ideal es sangre capilar, no es 
recomendable realizar las placas a partir de 
sangre en tubo). 
 Con el borde de otro portaobjetos a 45°, 
tocar la gota, esperar a que la sangre se 
distribuya por capilaridad y después deslizar 
suave y continuamente un portaobjetos 
sobre el otro en sentido longitudinal hasta 
que la gota quede bien extendida sobre la 
Auxiliar de 
Laboratorio y 
Bacteriólogos/ 
MicrobiólogosBacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
 
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superficie del primer portaobjetos. La placa 
debe ser teñida con Wright. 
 
 
 
Resultados y Validación: Luego de evaluar 
cuantitativa y cualitativamente las 3 líneas 
celulares en sus diferentes estadios de 
maduración, se procede a registrar el resultado 
en el sistema, correlacionándolo con el resultado 
de hemograma, la clínica del paciente, el 
diagnóstico y resultados anteriores. 
 
La porción ideal para leer la placa y tener un 
resultado confiable es el CUERPO de la placa 
donde la celularidad no está acumulada (cabeza) 
ni dispersa (cola). 
Velocidad de 
eritrosediment
ación Globular 
(VSG) 
Muestra: Sangre total con EDTA. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico. 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperatura de 4 a 8°C. 
Tiene como contraindicaciones la hemólisis y 
presencia de coágulos. 
 
Montaje: 
 
 Materiales: Pipeta para sedimentación -, 
Propipeteador – Gradilla - Cronómetro. 
 Mezclar muy bien la muestra invirtiéndola 6 
veces. 
 Llenar la pipeta de sedimentación hasta la 
marca de 0, utilizando el propipeteador, 
Auxiliar de 
Laboratorio y 
Bacteriólogo/ 
Microbiólogos 
 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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asegurándose que la columna de sangre 
sea continua y sin burbujas de aire. 
 Poner la pipeta en la gradilla en posición 
vertical y perfectamente nivelado a 
temperatura ambiente durante una hora. 
 Al cumplir la hora, se debe realizar la lectura 
de la pipeta de sedimentación contando 
desde el menisco del plasma hasta la parte 
superior de los eritrocitos sedimentados; 
cada línea del tubo representa 1 mm. 
 
Resultados y Validación: Los resultados se 
expresan como mm/hora. Valores normales para 
niños 0-15 mm, hombre adulto 0-15 mm y mujer 
adulta 0-20 mm. Se debe registrar el resultado 
en el sistema, correlacionándolo con la clínica del 
paciente, el diagnóstico y resultados anteriores. 
Coombs 
Directo 
Muestra: Sangre total con EDTA. Volumen: 
Adultos 5 ml y pediátrico. La muestra es estable 
8 horas a temperatura ambiente y 24 horas a 
temperatura de 4 a 8°C. Tiene como 
contraindicaciones la hemólisis y presencia de 
coágulos. 
 
Materiales: 
 
 Tubos de ensayo - Suspensión de glóbulos 
rojos lavados - Reactivo de Coombs - Baño 
serológico - Centrifuga - Solución salina 
0.85%- cronometro - Células Control de 
Coombs. 
 Preparar suspensión de glóbulos rojos del 
paciente al 4% en solución salina de 0.85% 
 Depositar 2 gotas de suspensión de glóbulos 
rojos y adicionar 2 gotas de reactivo de 
Coombs 
 Agitar y centrifugar a 2500 revoluciones por 
minuto por 3 minutos 
 Mezclar suavemente el tubo para 
desprender el sedimento, examinar 
macroscópicamente la presencia o ausencia 
de aglutinación. 
 Interpretar y registrar los resultados. 
 
 
 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
 
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Resultados y Validación: 
 
 Establecer la presencia de aglutinación o 
hemólisis (Resultado Positivo). 
 Evidenciar la ausencia de aglutinación o 
hemólisis (Resultado Negativo). 
 Registrar el resultado en el sistema, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, 
el diagnóstico y resultados anteriores. 
Coombs 
Indirecto 
Muestra: Suero. Las muestras son estables 
durante 8 horas a temperatura ambiente, 2 días 
a 2 – 8 °C. Para un almacenamiento más 
prolongado, pueden congelarse a -20 °C o 
menos. 
 
Materiales: 
 
 Tubos de ensayo - Células O positivas 
lavadas al 5% - Suero del paciente - 
Albumina bovina - Anti D - Reactivo de 
Coombs - Baño serológico - Centrifuga - 
Solución salina 0.85% - Microscopio - 
Células Control de Coombs. 
 Centrifugar las muestras a 3500 rpm por 15 
min y separar el suero. 
 Disponer de células O+ y preparar una 
suspensión al 5% de células lavadas con 
solución salina. 
 Marcar dos tubos P (paciente) C (control 
positivo). 
 Colocar en ambos tubos 2 gotas de la 
muestra de suero del paciente, 1 gota de 
células O+ lavadas y 1 gota de albúmina. 
 Incubar ambos tubos a 37 ºC (baño 
serológico) por 15 minutos 
 Lavar ambos tubos 3 veces con solución 
salina, realizando centrifugación de 60 
segundos entre cada lavada y descartar 
sobrenadante. 
 Resuspender el botón de células rojas 
agitando un poco cada tubo. 
 Agregar al tubo P, una gota del reactivo de 
Coombs y al tubo marcado C, una gota de 
solución salina 0.85 %. 
 Mezclar. 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
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Vigencia: Febrero de 2018 
 
 Centrifugar a 2500 rpm / 60 segundos. 
 Mezclar suavemente el tubo para 
desprender el sedimento, examinar 
macroscópicamente la presencia o ausencia 
de aglutinación. 
 
Resultados y Validación: Establecer la 
presencia de aglutinación (Resultado Positivo) 
Evidenciar la ausencia de aglutinación 
(Resultado Negativo). Registrar el resultado en el 
sistema, correlacionándolo con la clínica del 
paciente, el diagnóstico y resultados anteriores. 
Prueba de 
Ciclaje o 
Células 
Falciformes 
Muestra: Sangre total con EDTA. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico. 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperatura de 4 a 8°C. 
Almacenamiento: Estable 7 días refrigerado de 
2-8°C. Tiene como contraindicaciones la 
hemólisis y presencia de coágulos. 
 
Materiales: 
 
 Lámina porta objetos – Laminillas – Vaselina 
o esmalte de uñas - Baja lenguas (en caso 
de emplear vaselina) - Metabisulfito de sodio 
al 2% - Cámara húmeda (recipiente plástico 
con servilleta húmeda en el fondo) – 
Micropipeta y puntas desechables – 
Microscopio. 
 Marcar la placa con datos del paciente, día y 
hora de montaje. 
 Preparar la solución al 2% de metabisulfito 
como lo indica el inserto. 2 mL de solución 
salina más una pisca del reactivo = 40mg 
 Sobre una lámina porta objetos colocar 6 ul 
de sangre total y 8 ul de metabisulfito de 
sodio al 2%, se homogeniza y se coloca una 
laminilla encima. 
 Sellar los bordes se la laminilla con la 
vaselina o el esmalte de uñas. 
 Llevar el porta objetos a una cámara húmeda 
a temperatura ambiente (28°C) 
 Debe realizarse una lectura preliminar a los 
60 minutos de incubación y reporte final a las 
24 horas. 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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 La lectura microscópica se inicia en el 
objetivo de menor aumento (10X) 
confirmando los hallazgos en mayor 
aumento (40X) 
 
Resultados y Validación: Evidenciar la 
presencia de células falciformes a las 24 horas 
de incubación lo cual indica que la prueba es 
POSITIVA, cuantificar en porcentaje la cantidad 
de células falciformes halladas. Registrar el 
resultado en el sistema, correlacionándolo con la 
clínica del paciente, el diagnóstico y resultados 
anteriores. 
Crioglobulinas 
Muestra: Suero. Las muestras son estables 
durante 8 horas a temperatura ambiente, 2 días 
a 2 – 8 °C, para un almacenamiento más 
prolongado, pueden congelarse a -20 °C o 
menos. 
 
Contraindicaciones: No mantener la muestra a 
37°C mientras coagula. 
 
Procedimiento 
 
 Separar el suero 
 Realizar diluciones del suero en múltiplos de 
dos con solución salina a 37°C iniciando en 
½ 
 Incubar los tubos a 4°C durante seis días 
(muestra diluida y sin diluir), realizando 
lectura cada día. 
 Luego del tiempo de incubación, Centrifugar 
a 3000 rpm por 10 minutos y observar la 
formación de precipitado. 
 Incubar los tubos a 37°C durante cuatro 
horas. Repetir lectura. 
 
Resultados y Validación: 
 
 Establecer la presencia deprecipitado luego 
de la incubación a 4°C y que debe 
desaparecer luego de la incubación a 37°C 
(Resultado Positivo) 
 Evidenciar la ausencia de precipitado luego 
de la incubación a 4ºC (Resultado Negativo) 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
 Registrar el resultado en el sistema, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, 
el diagnóstico y resultados anteriores. 
Directo para 
Leishmania 
Muestra: Exudado - material del borde activo de 
la lesión, La placa se puede guardar el tiempo 
que sea necesario, tener la precaución de 
guardarla libre de polvo y ya coloreada, limpiar el 
aceite de inmersión y guardarla en cajas para 
lámina porta objetos. Si la ulcera presenta signos 
de sobreinfección bacteriana, se debe 
administrar tratamiento antibiótico previo a la 
realización del examen directo. 
 
Materiales: 
 
 Solución salina - jabón quirúrgico - Gasa 
estéril – Algodón - Lámina porta objetos - 
Hojas de bisturí - Colorante de Wright – 
Microscopio - Aceite de inmersión. 
 Con las manos enguantadas realizar 
limpieza del sitio de la lesión utilizando gasas 
o algodón impregnado con solución salina y 
jabón quirúrgico. Si hay costra removerla 
cuidadosamente. 
 Realizar hemostasia sobre el lugar de la 
toma, esto se logra haciendo presión en 
forma de pinza con los dedos índice y pulgar. 
 Sobre la cara interna del borde de la úlcera 
realizar una pequeña incisión de 3mm de 
larga por 3mm de profundidad con una hoja 
de bisturí. Asegurarse de que no sangre 
mucho. 
 Extender el material obtenido suavemente 
en pequeña forma circular sobre una lámina 
porta objeto previamente limpiado, 
desengrasado y debidamente rotulado (3 
muestras en una misma placa). 
 Si los 3 extendidos anteriores son negativos, 
se cita nuevamente al paciente y se le toma 
6 extendidos más según criterio del médico 
tratante. 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
 
 Fijar la lámina dejando secar las muestras a 
temperatura ambiente 
 Colorear con tinción de Wright 
 Observar al microscopio para buscar los 
amastigotes de Leishmania 
 
Resultados y Validación: Presencia de 
amastigotes de Leishmania (Resultado Positivo). 
No se observan amastigotes de Leishmania 
(Resultado Negativo). Registrar el resultado en el 
sistema, correlacionándolo con la clínica del 
paciente, el diagnóstico y resultados anteriores. 
Hemoparásitos 
(GOTA 
GRUESA) 
Muestra: gota gruesa y/o extendida de sangre 
periférica. La placa se puede guardar el tiempo 
que sea necesario, tener la precaución de 
guardarla libre de polvo y ya coloreada, limpiar el 
aceite de inmersión y guardarla en cajas para 
lámina porta objetos. 
 
Materiales: 
 
 Alcohol – Algodón - Lámina porta objetos - 
Lanceta - Coloración de FIELD -Microscopio 
- Aceite de inmersión. 
 Desinfectar con alcohol antiséptico, secar 
con un algodón y hacer presión. 
 Puncionar con la lanceta en la parte externa 
de la yema del dedo (sangre capilar). 
 Hacer presión hasta obtener una gota de 
sangre globosa. 
 Colocar la lámina por encima de la gota de 
sangre, tomar dos gotas en la lámina. 
 Realizar con otra lámina portaobjetos el 
extendido de la gota gruesa. 
 La muestra de sangre capilar debe 
extenderse en forma de N ocupando 2 
terceras partes de la lámina, separadas una 
muestra de la otra y a su vez de los bordes 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
por 0.5 cm. Bien centrada. Dejar secar a 
temperatura ambiente. 
 
 
 Colorear la lámina de acuerdo a la coloración 
de FIELD 
 Observar la placa en 10x y 40x, ubicarse 
donde se encuentre la mayor concentración 
de leucocitos, observar con el objetivo de 
100x y realizar el recuento en los campos 
donde se encuentren de 10 a 20 leucocitos. 
 Contar los leucocitos y los parásitos en cada 
campo hasta llegar a 200 leucocitos. Si hay 
10 o menos de 10 parásitos hacer el 
recuento hasta completar 500 leucocitos. 
 
8000 leucocitos, recuento leucocitario promedio 
de una población normal. 
 
Resultados y Validación: Observar formas 
sexuadas y asexuadas del parásito, hacer 
identificación de la especie y recuento de todas 
las formas observadas en el caso de Plasmodium 
vivax, y solo recuento de las formas asexuadas y 
registro de la presencia o ausencia de las formas 
sexuadas en el caso de Plasmodium falciparum 
(Resultado Positivo). 
 
Evidenciar ausencia de formas sexuadas y 
asexuadas del parásito (Resultado Negativo), 
Gota Gruesa negativa, observar 300 campos. Se 
debe registrar el resultado en el sistema, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, el 
diagnóstico y resultados anteriores. 
Recuento de 
Reticulocitos 
Muestra: Sangre total con EDTA. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperatura de 4 a 8°C. 
Tiene como contraindicaciones la hemólisis, 
presencia de coágulos, presencia de fibrina, 
relación muestra/anticoagulante inadecuada. 
 
Materiales: 
 
 Sangre venosa con EDTA - Tubos de ensayo 
- Colorante de azul de cresil brillante - 
Lámina porta objetos - Pipetas Pasteur - 
Baño serológico – Microscopio - Aceite de 
inmersión. 
 Poner en un tubo de ensayo con una pipeta 
pasteur 2 gotas de sangre total 
homogenizada. 
 Agregar 2 gotas de colorante con una pipeta 
Pasteur y mezclar. 
 Incubar el tubo de ensayo a 37° C durante 
15 minutos en el baño serológico. 
 Mezclar la suspensión y realizar un 
extendido en una lámina porta objetos 
 Dejarlo secar a temperatura ambiente, 
agregarle una gota de aceite de inmersión y 
observar al microscopio con el objetivo 100 
X. 
 
Resultados y Validación: Realizar el conteo de 
los reticulocitos por 500 glóbulos rojos y realizar 
la siguiente fórmula para obtener el porcentaje. 
Resultado: Numero de reticulocitos observados 
X 100 
______________________________ 
Número eritrocitos (500 una constante) 
Se debe registrar el resultado en el sistema, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, el 
diagnóstico y resultados anteriores. 
Conteo de 
eosinófilos en 
moco nasal 
 
Muestra: Secreción nasal. 
 
Materiales: 
 
 Lámina porta objeto – Aplicadores - 
Colorante de Wright – Microscopio – aceite 
de inmersión. 
 Marcar 2 láminas porta objetos, una como 
fosa nasal derecha y la otra como fosa nasal 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
izquierda o identificar ambas muestras en 1 
misma placa 
 Introducir un aplicador al fondo de cada fosa 
nasal, realizar movimientos rotatorios para 
tomar la muestra y realizar un extendido en 
forma circular en la placa marcada 
inicialmente. 
 Dejar secar y proceder a colorear con la 
tinción de Wright. 
 Agregar una gota de aceite de inmersión y 
observar al microscopio con el objetivo 100 
X. 
 Identificar campos con presencia de 
leucocitos y realizar el conteo de los 
eosinófilos. 
 
Resultados y Validación: Debe realizarse la 
diferenciación de eosinófilos en un total de 100 
leucocitos observados. De esta forma el número 
de eosinófilos dará un valor en porcentaje. 
 
Registrar el resultado en el sistema, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, el 
diagnóstico y resultados anteriores. 
Hemoclasificac
ión 
Muestra: Sangre total con EDTA. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico 
La muestra es estable 8 horas a temperatura 
ambiente y 24 horas a temperaturade 4 a 8°C. 
Tiene como contraindicaciones la hemólisis, 
presencia de coágulos, presencia de fibrina, 
relación muestra/anticoagulante inadecuada. 
 
Materiales: 
 
 Muestras con anticoagulante EDTA - 
Reactivos anti A, anti B, anti D (antisueros) - 
Solución salina 0.85% - Placa o tubos de 
ensayo - Pipetas Pasteur – Palillos – 
Centrifuga. 
 Marcar las placas de vidrio en el orden 
correspondiente. 
 Adicionar con pipetas Pasteur una gota de 
sangre en 3 posiciones diferentes. 
 Agregar una gota de anti A, anti B, anti D 
sobre cada una de las gotas de sangre 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
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HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
 Mezclar bien con palillo de madera. 
 Mezclar manualmente por 1 minuto. 
 Observar macroscópicamente la 
aglutinación. 
 Algunos resultados débiles se deben repetir 
con técnica de tubo en especial los RH de 
maternas. 
 Poner 3 gotas de sangre total en un tubo de 
ensayo, adicionar Solución salina 0.85% y 
centrifugar por 3 minutos a 2500 rpm. 
Repetir este proceso 3 veces (Lavar los 
glóbulos rojos) 
 Finalmente preparar suspensión de glóbulos 
rojos del paciente al 4% en solución salina al 
0.85% 
 Marcar 3 tubos de ensayo con la 
identificación del paciente como anti A, anti 
B y anti D respectivamente y depositar 1 gota 
de suspensión de glóbulos rojos en cada uno 
y 1 gota de cada uno de los antisueros. 
 Agitar y centrifugar a 2500 revoluciones por 
minuto por 3 minutos 
 Mezclar suavemente el tubo para 
despresnder el sedimento, examinar 
macroscópicamente la presencia o ausencia 
de aglutinación. 
 Registrar el resultado en el sistema 
correlacionándolo con la clínica del paciente, 
el diagnóstico y resultados anteriores. 
Preparación de 
Células Control 
de Coombs. 
Muestra: Sangre total con EDTA previamente 
clasificada O+ 
 
Materiales: Anti D, Glóbulos rojos O Rh+ 
lavados y suspendidos al 3-5 % en solución 
salina 0.85% 
 
Procedimiento: 
 
 Colocar 8-10 gotas de suspensión de 
glóbulos rojos O positivos. 
 Colocar la misma cantidad de Anti D al tubo. 
 Incubar a 37 °C por 30 minutos. Lavar de 5 
a 6 veces en solución salina 0.85%. 
 Re suspender al 3-5 % en solución salina. 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
 Probar estos glóbulos con una gota de suero 
de Coombs y buscar aglutinación. 
 Este control dura de 4-5 días a 4°C. 
 La lectura con las células control de Coombs 
deben dar positivas, no mayor de 2 cruces. 
 Es importante recordar que una prueba de la 
antiglobulina negativa, sin control, puede 
interpretarse como una prueba negativa 
falsa. 
 
NOTA IMPORTANTE: Cada equipo automatizado usado en el Laboratorio Clínico tiene un manual de usuario y 
guía rápida realizados directamente por el fabricante. 
 
El laboratorio clínico adopta las prácticas de mantenimiento, control de calidad, calibración y manejo, contenidas 
en dichos documentos para garantizar el desempeño confiable y seguro de los equipos 
 
Analizador automatizado área coagulación 
 
Sysmex CS-2100i 
 
 
 Características del analizador Sysmex CS-2100i 
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
 Detección de HIL. 
 Comprobación de volumen de muestra en tubo primario. 
 Lectura simultánea a diferentes longitudes de onda 
 Cap piercing de tercera generación. 
 Software proporciona información detallada sobre errores. 
 Mínimo mantenimiento 
 Mejor estabilidad a bordo de los reactivos. 
 Posición inclinada de los viales que reducen volumen muerto. 
 Introducción de valores asignados mediante codigo de barras 
 Diseño robusto (40 reactivos). 
 
Las siguientes son todas las pruebas que pueden procesarse en el analizador Sysmex CS-2100i, pero 
actualmente solo montamos PT, APTT Y Anticoagulante lúpico screening y Anticoagulante lúpico confirmación. 
 
 
 
PT análisis simple: Aprox. 180 test/hora 
APTT análisis simple: Aprox. 115 test/hora 
PT/APTT análisis simultáneos: Aprox. 115 test/hora 
PT/APTT/AT III análisis simultáneos : Aprox. 100 test/hora 
PT/APTT/AT III/DD análisis simultáneos : Aprox. 80 test/hora 
 
Procedimiento Descripción Responsable Registro 
Tiempo de 
Protrombina – 
INR - 
Tiempo de 
Tromboplastina 
Parcial 
Activado 
Muestra: Plasma con Citrato de Sodio. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico 2 ml. La 
muestra es estable a temperatura ambiente 8 
horas, refrigerado 24 horas y congelado por 1 
semana. Tiene como contraindicaciones Suero, 
plasma hemolizado, lipémico, ictérico, muestra 
con presencia de coágulos, cantidad de muestra 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
insuficiente, relación muestra- anticoagulante 
alterada y muestras tomadas antes de 2 horas de 
administración de anticoagulantes (coumadin, 
heparina, warfarina) Algunos alimentos en exceso 
como: Queso y espinacas aumentan el TP ya que 
potencian el efecto de algunos anticoagulantes. 
 
Proceso: Los tubos se ubican en los racks del 
equipo Sysmex CS-2100i y se ponen en la 
bandeja de entrada del analizador. 
 
Resultados y Validación: El equipo arroja 
resultados numéricos y automáticamente son 
transmitidos al programa Enterprise, allí se 
revisan al momento de ser validados, 
correlacionándolos con la clínica de cada 
paciente, los medicamentos que toma, el 
diagnóstico y los resultados anteriores. 
Diluciones de 
Tiempo de 
Protrombina 
Muestra: Plasma con Citrato de Sodio. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico 2 ml. La 
muestra es estable a temperatura ambiente 8 
horas, refrigerado 24 horas y congelado por 1 
semana. Tiene como contraindicaciones Suero, 
plasma hemolizado, lipémico, ictérico, muestra 
con presencia de coágulos, cantidad de muestra 
insuficiente y relación muestra- anticoagulante 
alterada. 
 
Proceso: 
 
 Generalmente la prueba de diluciones es solicitada 
a pacientes con resultados de las pruebas de 
coagulación alterados (Prolongados), con el fin de 
verificar si corrige al mezclarse con una muestra 
normal (deficiencia de alguno de los factores de 
coagulación). 
 Tomar 200 ul de la muestra y mezclarla con 200 ul 
de plasma de un paciente normal. 
 Registrar manualmente al equipo la prueba y 
correr la nueva muestra. 
 Revisar resultados 
 
Resultados y Validación: Cuando el TP está 
prolongado se realiza prueba de corrección con 
plasma normal Si la prolongación es debida a un 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
déficit de uno o más factores que intervine en la 
prueba, la nueva determinación del TP de la 
mezcla estará dentro del rango normal de 
referencia. Es decir la prueba corrige porque el 
plasma normal aporta los factores parcial o total 
ausentes en el plasma del paciente. Si la prueba 
de corrección da tiempos prolongados, la prueba 
no corrige y sugiere presencia de un inhibidor. 
 
El equipo no reconoce la prueba ni transmite los 
datos arrojados, por esto debe ser ingresado 
manualmente y pasar el resultado en el programa 
Enterprise, correlacionándolo con la clínica del 
paciente, los medicamentos que toma, el 
diagnóstico y los resultados anteriores. 
Anticoagulante 
Lúpico 
Screening – 
Anticoagulante 
Lúpico 
confirmatorio. 
Muestra: Plasma con Citrato de Sodio. 
 
Volumen: Adultos 5 ml y pediátrico 2 ml. La 
muestra es estable a temperatura ambiente 8 
horas, refrigerado 24 horas y congelado por 1 
semana. Tiene como contraindicaciones Suero, 
plasma hemolizado, lipémico, ictérico, muestra 
con presencia de coágulos, cantidad de muestra 
insuficiente y relaciónmuestra- anticoagulante 
alterada. 
 
Proceso: 
 
 Se hace 1 o 2 veces a la semana 
 Las muestras deben ser descongeladas y 
atemperadas 
 Registrar manualmente en el equipo las pruebas, 
ubicar las muestras en los racks del equipo Sysmex 
CS-2100i y ponerlos en la bandeja de entrada 
 Revisar resultados y establecer si debe 
confirmarse o no. 
 La confirmación del Anticoagulante lúpico debe 
realizarse a muestras con resultado de screening > 
a 45.6 
 
Resultados y Validación: , Registrar los 
resultados y pasarlos al programa Enterprise, 
correlacionándolo con la clínica del paciente, los 
medicamentos que toma, el diagnóstico y los 
resultados anteriores 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
Bacteriólogos/ 
Microbiólogos 
 
https://www.google.com.co/search?q=screening&spell=1&sa=X&ved=0ahUKEwi3m-OSnY7WAhVD5iYKHVTNAssQvwUIIigA
 
MANUAL Código: M-04-013-LAB 
HEMATOLOGIA Y COAGULACIÓN 
Versión: 1 
Vigencia: Febrero de 2018 
 
NOTA IMPORTANTE: Cada equipo automatizado usado en el Laboratorio Clínico tiene un manual de usuario y 
guía rápida realizados directamente por el fabricante. 
 
El laboratorio clínico adopta las prácticas de mantenimiento, control de calidad, calibración y manejo, contenidas 
en dichos documentos para garantizar el desempeño confiable y seguro de los equipos 
 
6. DOCUMENTOS DE REFERENCIA Y REGISTROS. 
 
 Manual para la lectura de gota gruesa para Malaria, Gobernación de Antioquia. Tercera edición, 2004. 
 Inserto Prueba de Ciclaje, Novalab SAS. 
 Guía para la vigilancia por laboratorio de las Leishmaniasis, Instituto nacional de salud. Bogotá 2015. 
 Manual de Hematología de Victoria E Gonzalez. 
 https://www.sysmex.com/la/es/Products/Hematology/XNSeries/Pages/XN-1000-Hematology-
Analyzer.aspx 
 https://www.healthcare.siemens.com.co/hemostasis/systems/sysmex-cs-2000i/technical-specifications 
 
7. ANEXOS 
 
N/A 
 
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 
 
N/A 
 
9. CONTROL DE CAMBIOS 
 
Versión Fecha Descripción del cambio Elaboró Revisó y aprobó 
1 Febrero de 2018 Creación del documento 
Coordinación de 
Laboratorio Clínico 
Dirección de atención 
primaria 
 
https://www.sysmex.com/la/es/Products/Hematology/XNSeries/Pages/XN-1000-Hematology-Analyzer.aspx
https://www.sysmex.com/la/es/Products/Hematology/XNSeries/Pages/XN-1000-Hematology-Analyzer.aspx
https://www.healthcare.siemens.com.co/hemostasis/systems/sysmex-cs-2000i/technical-specifications