CEMA-MN-LAC-MPLAC-01 V 1 3 Manual de procedimientos de laboratorio

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CENTRO DE EXCELENCIA MEDICA EN ALTURA AVALADO POR FIFA 
 
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS DEL CEMA 
Laboratorio de análisis clínicos 
Vigente a partir de: Enero 2016 Clave:CEMA-MN-LAC-MPLAC-01 
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE 
 
 
LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS 
 
 
CENTRO DE EXCELENCIA MÉDICA EN ALTURA BY FIFA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS DEL CEMA 
Laboratorio de análisis clínicos 
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Dr. José María Busto Villarreal 
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INDICE DE CONTENIDOS Página 
 
1. Objetivo..................................................................................................................................................4 
 
2. Alcance..................................................................................................................................................4 
 
3. Receptor del servicio.............................................................................................................................4 
 
4. Responsables........................................................................................................................................4 
 
5. Áreas involucradas................................................................................................................................5 
 
6. Protocolos de operación en el laboratorio clínico..................................................................................6 
 
6.1 Recepción y registro de pacientes que ingresan al laboratorio de análisis clínicos..............................6 
6.2 Restricciones en la realización de los estudios......................................................................................7 
6.3 Presentación, corroboración de las condiciones por estudio y explicación del procedimiento a realizar con el 
paciente.......................................................................................................................................................8 
6.4 Consideración de los factores que influyen en los resultados...............................................................9 
6.5 Preparación psicológica. .......................................................................................................................9 
6.6 Procedimiento específico de toma de muestras sanguíneas a pacientes hospitalizados para procedimiento 
quirúrgico....................................................................................................................................................10 
6.7 Registro de pacientes en bitácora de laboratorio clínico......................................................................11 
6.8 Identificación y rotulo de muestras.......................................................................................................12 
6.9 Técnica de recolección de especímenes sanguíneos..........................................................................13 
 a) Técnica de punción cutánea o capilar..................................................................................................13 
 b) Punción venosa....................................................................................................................................14 
 c) Punción arterial.....................................................................................................................................15 
6.10 Manejo y transporte de las muestras sanguíneas obtenidas..............................................................16 
6.11 Protocolo de técnicas de análisis clínicos del laboratorio del CEMA................................................ 17 
6.12 Hematología........................................................................................................................................17 
 A) Composición de la sangre..................................................................................................................17 
 B) Glóbulos rojos o eritrocitos.................................................................................................................18 
 C) Glóbulos blancos o leucocitos............................................................................................................19 
 D) Plaquetas...........................................................................................................................................19 
 E) Plasma y sus constituyentes..............................................................................................................19 
6.13 Procedimiento específico para el análisis del área de hematología................................................19 
6.14 Métodos manuales de hematología.................................................................................................20 
 
 
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Dr. José María Busto Villarreal 
Director Quirúrgico CEMA 
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 A) Hematocrito (Hto), volumen celular compacto (VCC) ó volumen del paquete celular (VPC).........20 
 B) Micrométodo.....................................................................................................................................20 
 C) Macrométodo de Wintrobre..............................................................................................................21 
 D) Conteo de glóbulos rojos..................................................................................................................22 
 E) Determinación de leucocitos.............................................................................................................28 
 F) Plaquetas...........................................................................................................................................34 
 G) Factor de crecimiento plaquetario.....................................................................................................39 
 H) Grupo sanguíneo...............................................................................................................................41 
6.15 Coagulación.......................................................................................................................................43 
 A) Determinación del tiempo de protrombina.........................................................................................43 
 B) Determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada...........................................................43 
6.16 Serología e inmunología....................................................................................................................44 
 A) Determinaciónde Proteína C reactiva...............................................................................................44 
 B) Determinación de HCG (prueba de tira) en suero y orina.................................................................45 
 C) Prueba presuntiva VIH.......................................................................................................................46 
6.17 Parasitología y coproanálisis.............................................................................................................47 
 A) Determinación de sangre oculta en heces.........................................................................................47 
 B) Examen Coproparasitoscopico...........................................................................................................48 
6.18 Uroanálisis..........................................................................................................................................50 
 A) Tipos de muestras para análisis de orina...........................................................................................50 
 B) Indicaciones de recolección de muestras urinarias............................................................................51 
 C) Manejo y transporte de muestras urinarias........................................................................................51 
 D) Examen general de orina...................................................................................................................52 
6.19 Manejo de derrames en el laboratorio de análisis clínicos................................................................55 
6.20 Lavado y desinfección........................................................................................................................56 
6.21 Almacenaje de muestras biológicas...................................................................................................56 
6.22 Manejo de red de frio.........................................................................................................................57 
6.23 Desecho de muestras biológicas.......................................................................................................58 
7. Control de calidad en el laboratorio clínico del CEMA...........................................................................59 
 7.1 Etapas del control de calidad en el laboratorio clínico del CEMA.......................................................60 
 A) Fase preanalítica................................................................................................................................60 
 B) Fase analítica.....................................................................................................................................65 
 C) Fase postanalítica...............................................................................................................................66 
 7.2 Métodos de control de calidad interno del laboratorio del CEMA........................................................67 
8 Resultados...............................................................................................................................................68 
 8.1 Informe de resultados..........................................................................................................................70 
9. Resultado deseado..............................................................................................................................71 
10. Diagrama de flujo...............................................................................................................................72 
 
 
 
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Dr. José María Busto Villarreal 
Director Quirúrgico CEMA 
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1. Objetivo 
 
Proporcionar al personal del área de laboratorio clínico así como a todos los profesionales de la salud del CEMA, 
un instrumento que facilite el desarrollo adecuado, sistematizado y estandarizado de los procedimientos que se 
realizan dentro del laboratorio de análisis clínicos. 
2. Alcance 
 
El presente manual debe aplicarse dentro de todas las actividades que se desarrollen en el laboratorio de 
análisis clínicos, y está al alcance de todo el personal profesional de la salud y/o administrativo ligado al CEMA. 
3. Receptor del servicio 
 
El CEMA by FIFA integra el servicio de Laboratorio de análisis clínicos, con la finalidad de proporcionar un 
servicio completo e íntegro para los deportistas, alumnos, colaboradores del Grupo Pachuca, otros clubes, 
organizaciones deportivas y a la población en general, todo ello sujeto a principios científicos y éticos 
enmarcados en las Normas Oficiales Mexicanas (NOM) y los estatus básicos del CEMA by FIFA. 
 
4. Responsables 
 
NOMBRE PUESTO 
I.Q Claudia Elena Saavedra Sandoval Responsable sanitario del laboratorio de análisis clínicos 
T.L.Q. Noel Osmar Ramos Islas Jefe del laboratorio de análisis clínicos 
L. N. Alejandra Chávez Oropeza Laboratorista clínico (turno vespertino) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
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5 Áreas Involucradas: 
 
AREA RESPONSABLE FIRMA 
ADMINISTRACION Y 
ADMISIÓN 
L.C. SANTA VALENCIA 
ENFERMERIA L.E NANCY MONTIEL ESPINOZA 
FLEBOTOMIA T.L.Q. NOEL OSMAR RAMOS 
ISLAS 
L.N. ALEJANDRA CHAVEZ 
OROPEZA 
 
HEMATOLOGIA 
QUIMICA CLINICA 
UROANALISIS 
CALIDAD 
VALIDACIÓN DE 
RESULTADOS 
I.Q. CLAUDIA SAAVEDRA 
SANDOVAL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
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6 OPERACIONES A REALIZAR DENTRO DEL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS 
 
IMPORTANTE: EN CUMPLIMIENTO CON LAS METAS INTERNACIONALES DE SEGURIDAD DEL PACIENTE 
EN ESPECIFICO LA MISP 5 (CON RESPECTO A LA PREVENCION DE INFECCIONES) QUEDA 
ESTRICTAMENTE PROHIBIDO TOMAR CUALQUIER TIPO DE MUESTRA SIN LA PRECAUCION DEL USO 
DE BATA DE LABORATORIO, GUANTES Y EN CASOS NECESARIOS CUBREBOCA Y GAFAS DE 
PROTECCION. POSTERIOR A LA TOMA DE MUESTRAS SE DEBE DESCARTAR EL MATERIAL 
DESECHABLE Y REALIZAR UN LAVADO EXAUSTIVO DE MANOS SIGUIENDO LOS 8 PASOS DE LAVADO. 
ADEMAS DE LO ANTERIOR SE DEBEC ONSIDERAR LO ESTIPULADO EN EL PROGRAMA DE SEGURIDAD 
E HIGIENE DEL LABORATORIOCLINICO DEL CEMA 
 
DE IGUAL MANERA SE DEBE DAR EL CUMPLIMIENTO A LA META MISP 6(PREVENCION DEL RIESGO DE 
CAIDAS), ESTO ES, QUE EN CASO DE QUE UN PACIENTE NO SE PUEDA TRASLADAR POR SUS 
PROPIOS MEDIOS SE PEDIRA EL APOYO AL AREA DE CAMILLERRIA O ENFERMERIA PARA EL DEBIDO 
TRASLADO DEL PACIENTE EN SILLA DE RUEDAS DESDE LA ENTRADA DEL CEMA AL LABORATORIO 
CLINICO Y VISCEVERSA, EN CASO DE OCURRIR UN ACCIDENTE RELACIONADO CO CAIDAS DEL 
PACIENTE SE DEBE LLEVAR A CABO UN REGISTRO EN EL FORMATO CORRESPO0NDIENTE Y LAS 
ACCIONES A TOMAR PARA EVITAR QUE SE REPITA UN SUCESO SIMILAR. 
 
6.1.- RECEPCIÓN Y REGISTRO EN EL SISTEMA DE PACIENTES/MUESTRAS QUE INGRESAN AL 
LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS 
 
PACIENTE EXTERNO ESPONTANEO 
 
Personal de admisión 
 
A. El personal de admisión atiende de primera instancia a los pacientes espontáneos del servicio externo 
que deseen realizar uno o varios estudios de análisis clínicos en nuestro laboratorio, por ello mismo debe 
tener tacto y diplomacia al momento de dirigirse a nuestros pacientes. 
B. El personal de admisión debe preguntar de la manera más amable si el paciente cuenta con una orden 
médica para realización de estudios de laboratorio, de ser así admisión debe asegurarse que realmente 
los estudios de la orden sean de laboratorio de análisis clínicos. 
C. El personal de admisión debe asegurarse de que el paciente cumpla con las condiciones para la 
realización de los estudios solicitados, para facilitar dicha operación se buscan en el sistema informático 
hospitalario HISTOCLIN los estudios solicitados por el médico o el mismo paciente, esto con la finalidad 
de encontrar las indicaciones por estudio capturadas con anterioridad por el personal de laboratorio. 
 
 
 
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Dr. José María Busto Villarreal 
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Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
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6.2 Restricciones en la realización de estudios 
 El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos a pacientes que no cumplan con las 
condiciones previamente explicadas por el personal de admisión 
 El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos en muestras que no cumplan con los 
requerimientos necesarios por el laboratorio. 
 El laboratorio se reserva el derecho a realizar análisis clínicos a pacientes que no permitan el 
procedimiento adecuado para la obtención de muestras, mediante consentimiento informado con su 
respectiva firma en el apartado rechazo de la intervención así como las razones por las cuales rechazan 
de manera parcial o total la toma de muestra. 
 En caso de tener alguna duda sobre las condiciones para algún estudio, el personal de admisión deberá 
realizar un llamado telefónico al laboratorio (extensión 692) 
 En caso de detectar alguna de las restricciones descritas, de ser posible se deberá reprogramar el 
estudio a la brevedad. 
D. El personal de admisión captura en el sistema HISTOCLIN de CEMA los datos generales del paciente, 
corrobora y asegura que los datos y los estudios solicitados coincidan con los datos presentes en la hoja 
de solicitud (en caso de presentar solicitud). De manera estrictamente protocolizada se deben capturar 
siempre 2 datos esenciales de los pacientes que deseen ser admitidos en el laboratorio clínico del CEMA 
los cuales son NOMBRE COMPLETO Y FECHA DE NACIMIENTO. 
 
E. Una vez capturados los datos de identificación del paciente y corroboradas las condiciones por estudio de 
cada paciente el personal de admisión traslada al paciente hasta el área de toma de muestras del 
laboratorio de análisis clínicos y se concatena con el personal flebotomista de laboratorio clínico, 
brindado al, el ticket generado por el sistema informático en el que se incluyen los dos datos básicos de 
identificación del paciente (NOMBRE COMPLETO Y FECHA DE NACIMIENTO) y los estudios a realizar. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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PACIENTE EXTERNO PROGRAMADO 
Personal de admisión 
 
A. El personal de admisión o cal centre atiende de manera amable y respetuosa la llamada en la que se 
solicite algún servicio de laboratorio clínico, el mismo personal de admisión debe brindar los costos y las 
condiciones por cada estudio solicitado por el paciente, en caso de tener duda en alguna condición por 
estudio debe canalizar la llamada al personal de laboratorio clínico (extensión 692), en caso de tener 
alguna duda en cuanto a costo por estudio debe coordinarse con al personal de administración y de 
laboratorio de ser necesario. 
B. El personal de admisión debe capturar los datos generales del paciente siendo estrictamente 
protocolizado dos principales (NOMBRE COMPLETO Y FECHA DE NACIMIENTO), una vez capturados 
se le debe indicar al paciente las condiciones en las que debe presentarse para la realización de sus 
estudios clínicos, así como la fecha y el horario para realizar los análisis. 
C. Una vez que el paciente ingresa a CEMA para la realización de sus estudios clínicos (previa cita) se 
deben de seguir los pasos indicados del punto 6.1.1 al 6.1.4. 
 
 
6.3 PRESENTACIÓN,CORROBORACION DE LAS CONDICIONES POR ESTUDIO Y EXPLICACIÓN DEL 
PROCEDIMIENTO A REALIZAR CON EL PACIENTE 
Flebotomista 
A. El flebotomista deberá presentarse con el paciente, mencionando su nombre y cargo dentro del 
laboratorio 
B. Deberá llamar al paciente por su nombre completo, corroborar los datos del paciente, con los presentes 
en la hoja de solicitud (de ser el caso), de manera verbal y escrita. 
C. Cuestionar gentilmente al paciente sobre el cumplimiento de las condiciones de ayuno y/o condiciones 
especiales con las que se presenta a la toma. 
D. Explicar al paciente de las posibles implicaciones que tendría el realizar el estudio en condiciones 
inadecuadas 
E. En caso de detectar condiciones inadecuadas para la realización de los estudios se deberá reprogramar 
el estudio a la brevedad posible. De lo contrario; 
 
 
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F. Explicar brevemente el procedimiento a realizar. Respondiendo a las posibles dudas que el paciente 
presente, esto con ética y profesionalismo. 
G. El flebotomista pide de la manera más atenta firme de consentimiento informado para toma y proceso de 
muestras para análisis clínicos , el cual se encuentra en el sistema SIMART con clave CEMA-RG-LAC-
APCI-09 / V.1.0 
6.4 CONSIDERACIÓN DE LOS FACTORES QUE INFLUYEN EN LOS RESULTADOS DEANÁLISIS 
CLÍNICOS 
Flebotomista 
 Es de importancia tomar en cuenta los factores que afectan algunas magnitudes biológicas humanas con interés 
clínico: 
A. VARIACIONES FISIOLÓGICAS 
B. VARIACIONES IATROGÉNICAS 
C. VARIACIONES PATOLÓGICAS 
D. DEPORTISTA DE ALTO RENDIMIENTO 
E. EMBARAZO 
F. RITMO CIRCADIANO 
G. DIETAS 
H. INTERFERENCIAS POR MEDICAMENTOS. 
TIPOS DE AYUNO: 
 TOTAL: Se considerara después de pasadas 12 horas de la última comida. 
 PARCIAL: Se considera pasada de 8 horas después de la última comida 
 MINIMO: se considera pasado de 3 horas después de la última comida. 
 
 
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6.5 PREPARACIÓN PSICOLÓGICA DEL PACIENTE 
A. La preparación psicológica deberá ser la que se brinda para cualquier examen o procedimiento 
dependiendo de la edad, intereses, cultura y experiencias previas, con el objetivo de disminuir la tensión 
y angustia. 
B. Preparar a la madre en caso de pacientes pediátricos, que la toma de muestra se hará en una zona 
confortable, con los instrumentos necesarios de laboratorio para la toma de muestra y con el cuidado 
pertinente para su paciente. 
 
6..6 PACIENTE PROGRAMADO PARA HOSPITALIZACION O URGENCIAS 
Personal de administración 
A. A través del sistema informático HISTOCLIN el personal administrativo genera un evento en el cual se 
capturan los datos generales del paciente siendo 2 de estos estrictamente protocolarios (NOMBRE 
COMPLETO Y FECHA DE NACIMIENTO), además en el evento se describe el procedimiento a realizar 
con el paciente su diagnostico y la fecha a realizar la intervención quirúrgica 
Personal de laboratorio 
B. Una vez que el área administrativa ha generado el evento, el personal de laboratorio se encarga de 
solicitar a través del sistema informático HISTOCLIN los insumos necesarios para la realización de los 
estudios al paciente que generalmente un cirujano solicita antes de la intervención en quirófano (estudios 
pre-quirúrgicos) 
Medico de hospitalización/urgencias en turno 
C. Ya ingresado el paciente al área de hospitalización o urgencias, el médico responsable en turno deberá 
generar una solicitud interna de estudios de laboratorio a través del sistema informático hospitalario 
HISTOCLIN. 
Flebotomista/enfermera de hospitalización 
 
 
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D. El profesional de laboratorio hará mención al enfermero(a) de hospitalización en turno, sobre los estudios 
solicitados por el médico en turno y de ser posible se tomaran las muestras necesarias en conjunto con el 
proceso de colocación de equipo de venoclisis del paciente 
E. El profesional de laboratorio junto con el enfermero(a) de hospitalización en turno harán presencia en la 
habitación del paciente presentándose por su nombre completo y el puesto que ocupan en el hospital, 
posteriormente le darán una breve explicación al paciente sobre el procedimiento de canalización y toma 
de muestras para estudios pre quirúrgicos. 
F. El enfermero(a) de hospitalización en turno realizara las labores pertinentes para la inserción de catéter 
intravenoso periférico para canalización, con la observación de tomar la muestra de sangre en los tubos 
proporcionados por el laboratorio, esto antes de conectar al paciente al equipo de venoclisis 
G. Una vez obtenida la muestra sanguínea se debe conectar al paciente al equipo de venoclicis y el 
profesional de laboratorio debe homogenizar las muestras de sangre con el anticoagulante del tubo (si 
fuera el caso) 
H. Se rotularan las muestras con los dos datos estrictamente protocolizados los cuales son NOMBRE 
COMPLETO Y FECHA DE NACIMIENTO 
6.7 REGISTRO DE PACIENTES EN BITÁCORA DEL LABORATORIO CLINICO 
Flebotomista 
 Serán debidamente registrados en la bitácora del laboratorio de análisis clínicos con los siguientes datos: 
 Nombre completo del paciente: nombre(s) y apellidos completos del paciente, se hará una corroboración 
de la ortografía del mismo 
 Fecha de nacimiento completa en el orden, día, mes y año 
 Número de folio: correspondiente en orden progresivo. 
 Fecha: correspondiente al día de la toma de muestra. 
 Edad. 
 
 
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6.8 IDENTIFICACION Y ROTULO DE MUESTRAS OBTENIDAS 
Flebotomista 
 
Se rotularán con tinta indeleble en los tubos, laminillas, y/o frascos; 
a) Nombre completo del paciente 
b) Fecha de nacimiento completa en el orden dia, mes y año 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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6.9 TECNICAS DE RECOLECCIÓN DE ESPECÍMENES SANGUÍNEOS 
Fundamentos 
 
La sangre es el fluido corporal más utilizado con fines analíticos. Los tres procedimientos habituales para 
obtener la sangre son: 
 Punción cutánea 
 Punción venosa 
 Punción arterial 
 
La técnica utilizada para la obtención de muestras de sangre es fundamental para realizar correctamente el 
estudio clínico que se desea realizar. En cualquier caso; la sangre arterial y la sangre venosa se diferencían en 
algunos aspectos que deben ser tenidos en cuenta. 
 
La sangre que ha sido oxigenada por el pulmón, es bombeada por el corazón hacia los órganos y tejidos para 
cubrir las necesidades metabólicas. Esta sangre arterial tiene una composición prácticamente uniforme en todo 
el organismo. Por el contrario; la composición de la sangre venosa varía según la actividad de metabólica del 
órgano o tejido per fundido por lo que la composición de la sangre venosa es diferente según el punto en que se 
extrae. La sangre venosa tiene mucho menos oxígeno que la arterial, además varía en ésta el factor pH, su 
concentración de CO2 y su hematocrito (concentración de eritrocitos en relación con el plasma). Varía también 
en ocasiones la concentraciónde glucosa, ácido láctico, cloro y amonio. 
 
La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se denomina incorrectamente sangre capilar, es una 
mezcla de sangre procedente de arteriolas, vénulas y capilares, por lo tanto, es en parte arterial y en parte 
venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace que la muestra sea más rica en sangre arterial, La sangre 
de punción cutánea también contiene sangre intersticial y líquido intracelular. 
 
NOTA: EN CUMPLIMIENTO CON LA MISP 5 COLOCAR GUANTES ANTES DE LA TOMA DE MUESTRA Y 
LAVARSE LAS MANOS DESPUES 
 
A. Punción cutánea o capilar 
 
Es el método más utilizado en los pacientes pediátricos especialmente en los lactantes. La excesiva cantidad de 
sangre extraída mediante venopunción puede provocar anemia especialmente en niños prematuros. Por otra 
parte la punción de venas profundas en pacientes pediátricos también puede condicionar, ocasionalmente: paro 
cardiaco, hemorragia, trombosis, gangrena por constricción venosa, lesión de tejidos e infección. 
La punción cutánea resulta útil en adultos aquejados de obesidad extrema, quemaduras graves, y tendencia 
trombótica, también ese tipo de punción suele utilizarse en pacientes geriátricos. 
 
 
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS DEL CEMA 
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MCD. Vicente Moreno Calva 
Director de Calidad 
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Dr. José María Busto Villarreal 
Director Quirúrgico CEMA 
Libero 
 
 
 
 
Dra. Gabriela Murguia Cánovas 
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TECNICA DE PUNCION CUTANEA O CAPILAR 
 
Flebotomista 
 
1. Seleccionar un punto adecuado para la punción. 
En lactantes se elige por lo general la superficie plantar externa del talón. En niños de mayor edad puede 
utilizarse la superficie palmar de la última falange del segundo, tercero o cuarto dedo de la mano. Otro punto es 
el lóbulo de la oreja. La zona de punción no debe presentar edema ni haberse puncionado previamente. 
2. Calentar la zona de la punción con una compresa húmeda a temperatura no superior a los 42 C° 
Con ello se aumenta el flujo de sangre a través de arteriolas y capilares. 
3. Limpiar la zona de punción con una solución acuosa de isopropanol al 70 % 
Realizar la punción únicamente con la lanceta con cuchilla de menos de 2.4 mm de longitud para no lesionar el 
calcáneo. 
4. Desechar la primera gota de sangre enjuagándola con una gasa estéril, regular el flujo de sangre con el 
pulgar. No hay que realizar maniobras de “ordeñador” ya que se puede hemolizar la muestra e inducir un 
exceso de tejido hístico. 
5. Recoger la muestra en un recipiente adecuado para volúmenes comprendidos entre 1-200 microlitros. 
 Suelen utilizarse micropipetas desechables de vidrio y de extremo abierto. Existen pipetas heparinizadas. 
6. Sellar el recipiente de una muestra introduciendo un fragmento de arcilla en cada uno de los extremos de 
la micropipeta. 
7. Etiquetar el recipiente con la fecha, hora de extracción y datos del paciente. 
 
B. Punción venosa 
 
Es el principal método de extracción sanguínea para realizar análisis clínicos. A partir de sangre sin 
anticoagulante se obtiene SUERO, si la sangre contiene anticoagulante se obtiene PLASMA, del plasma forma 
parte el fibrinógeno, sustancia de la que carece el suero. Por otra parte la separación inmediata del plasma o 
suero de las células es importante para obtener resultados óptimos en el análisis clínico. 
 
TECNICA DE PUNCION VENOSA 
 
Flebotomista 
 
1. Selección de la vena para punción. 
Se solicita al paciente cierre el puño para que las venas resulten más palpables, seleccionando la vena más 
adecuada. Se prefieren las venas de la fosa antecubital y en particular la vena cubital interna y cefálica. También 
pueden utilizarse las venas del tobillo, de la muñeca y de la mano, si existiera un catéter intravenoso en un brazo 
se utilizará el brazo contrario para la extracción. 
 
 
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2. Hacer asepsia en el lugar de la punción con una torunda embebida de una solución de alcohol 
 
3. Se coloca torniquete el cual debe aplicarse varios centímetros por encima de la zona de punción, no más 
de 2 minutos. 
 
4. Se realiza la venopunción se penetra a través de la piel con la aguja vacutainer, jeringa o mariposa según 
sea el caso, formando un ángulo de 15 grados con el brazo del paciente y con el bizel de la aguja hacia 
arriba. Hay que introducir la aguja con suavidad pero con la suficiente rapidez para evitar molestias al 
paciente. 
Si se utiliza jeringa, hay que tirar el émbolo hacia atrás en la medida de la sangre va fluyendo. No deben 
realizarse movimientos con rapidez excesiva ya que la sangre puede hemolizarse o colapsarse la vena. 
 
5. Cuando la sangre comienza a fluir se puede retirar el torniquete. 
 
6. Una vez que se ha extraído la muestra hay que indicar al paciente que relaje su puño, colocando 
suavemente sobre el punto de punción una torunda embebida en alcohol y retirar la aguja. Es de suma 
importancia retirar la aguja de la jeringa antes de vaciar la sangre a los tubos para evitar hemólisis. 
 
C. Punción arterial 
 
La sangre arterial se utiliza para medir la tensión del oxígeno y dióxido de carbono, así como para establecer el 
pH. Las determinaciones de gases en la sangre (gasometría) son fundamentales para el estudio de los 
problemas de oxigenación que se producen en las enfermedades como la neumonía, la neumonitis, la 
insuficiencia respiratoria y la embolia pulmonar. 
Las punciones arteriales son técnicamente más difíciles y de mayor riesgo clínico que las punciones venosas, en 
este manual no se menciona el procedimiento ya que el servicio de laboratorio clínico no lleva a cabo dicho 
proceso. 
 
TECNICA DE PUNCION ARTERIAL 
 
Flebotomista 
 
1. Lavado de manos y colocación de guantes. 
2. Palpar el sitio elegido con la punta de los dedos, y fijar la arteria mediante una ligera hiperextensión de la 
muñeca. 
3. Limpiar el área a puncionar con la torunda realizando un movimiento circular. 
4. Mantener la punta del dedo sobre la arteria, justo por encima del sitio elegido para la punción. 
5. Con el bisel de la aguja hacia arriba, introducirla en la arteria formando un ángulo de 45º. 
6. Detener el avance de la aguja cuando se observe el retorno de la sangre hacia la jeringa y dejar que el 
 
 
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mismo pulso arterial envíe 2-3ml de sangre. 
7. Cuando se tenga toda la muestra, se ha de mantener una torunda de algodón sobre el sitio de punción y 
retirar la aguja. 
8. Aplicar presión sobre el punto de punción y sobreel área proximal con la torunda. Mantener la presión 
durante al menos 5 minutos y luego dejar gasa estéril con cinta adhesiva en el sitio de punción. 
9. Expulsar las burbujas de aire de la jeringa. 
 
6.10 MANEJO Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS SANGUINEAS OBTENIDAS 
Flebotomista 
A. Toda muestra de sangre debe manipularse con guantes y transportarse en contenedores rigidos con 
tapa, especialmente diseñados y destinados sólo para ese propósito. Jamás debe transportarse una 
muestra dentro de un bolsillo o en la mano. 
B. Los frascos (tubos) de sangre, para Hemograma, pruebas Bioquímicas, Inmunológicas y otras deben 
venir correctamente tapados con su tapón de goma o plástico, y dispuestas en gradilla, de modo de 
mantenerse vertical. 
C. En el caso de muestras de origen cutáneo (capilares) deberán ser depositadas en el recipiente adecuado 
(micro placas), para su inmediato procesamiento. 
D. Una vez obtenidas las muestras que se han considerado dentro de los parámetros correspondientes, se 
efectuará el proceso de las mismas. 
E. Según el análisis a practicar,considerar las condiciones de temperatura de conservación y transporte de 
las muestras 
 
 
 
 
 
 
 
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6.11 PROTOCOLO DE TECNICAS DE ANALISIS CLINCOS DEL LABORATORIO DEL CEMA 
 
FUNDAMENTOS 
 
Para el adecuado tratamiento de cualquier padecimiento o enfermedad es imprescindible contar con un 
diagnóstico clínico acertado. Actualmente, las pruebas de laboratorio, mediante el análisis de los componentes 
de los fluidos o excreciones corporales (sangre, orina, heces), los profesionales de la salud pueden obtener una 
idea muy acertada sobre el estado de salud del sujeto, y también puede orientarnos a determinar qué región u 
órgano del cuerpo es el afectado o causante del padecimiento o enfermedad. 
 
La utilidad de los análisis clínicos no está restringida únicamente para las personas enfermas que deben ser 
diagnosticadas, ya que una revisión periódica, en las personas sanas (cada 6 meses a 1 año) a manera de 
check-up, ayuda a detectar varios padecimientos, sobre todo los del tipo crónico como la diabetes, la 
hipertensión y el cáncer entre muchos otros, de manera temprana, permitiendo prevenir su evolución 
manteniendo el buen estado de salud. 
 En el CEMA el laboratorio clínico cuenta con equipos automatizados que nos permiten realizar análisis clínicos 
cumpliendo siempre con los más altos estándares internacionales de calidad, así mismo cuenta con 
profesionales en la rama de análisis clínicos altamente capacitados para la operación de los equipos y análisis 
de muestras de los componentes, fluidos o excreciones corporales. 
 
NOTA: PARA EL LABORATORIO CLINICO DEL CEMA ES DE SUMA IMPORTANCIA CUMPLIR CON LAS 
METAS INTERNACIONALES DE SEGURIDAD DEL PACIENTE POR ELLO NO OLVIDE COLOCAR EL 
EQUIPO DE SEGURIDAD CORRESPONDIENTE PARA LOS PROCEDIMIENTOS DE ANALISIS CLINCOS 
PRIMORDIALMENTE BATA,GUANTES,CUBREBOCA Y GAFAS DE PROTECCION SI FUERA NECESARIO. 
NO OLVIDE LAVAR CORRECTAMENTE SUS MANOS ANTES DE SALIR DEL LABORATORIO CLINICO 
 
6.12 HEMATOLOGÍA 
 
La Hematología se dedica al estudio de las células sanguíneas y de la coagulación. Comprendidos en su campo 
se encuentran los análisis de concentración, la estructura y función de las células de la sangre, los precursores 
de la médula ósea, los componentes químicos del plasma o suero íntimamente unidos con la estructura y función 
de la célula sanguínea y la función de las plaquetas y proteínas que intervienen en la coagulación de la sangre. 
Las técnicas de biología molecular, de uso cada vez más generalizado, facilitan la detección de las mutaciones 
genéticas subyacentes a la alteración de la estructura y función de las células y proteínas que producen 
trastornos hematológicos. 
 
A. COMPOSICIÓN DE LA SANGRE 
 
 
 
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 Células: 
 
 Glóbulos rojos o eritrocitos 
 Glóbulos blancos o leucocitos 
 Plaquetas o trombocitos 
 Plasma: 
Agua (91 -92 %) 
Elementos (8-9%) 
 Proteínas (7%), seroalbúminas, seroglobulinas y fibrinógeno 
 Sustancias inorgánicas (0.9 %): sodio, potasio, calcio, fósforo, etc. 
 Sustancias orgánicas que no son proteínas. Urea, ácido úrico, xantina, hipoxantina, creatina, creatinina, 
amoniaco y aminoácidos, además grasas neutras, fosfolípidos, colesterol y glucosa. 
 Secreciones internas de las glándulas y varias enzimas como amilasa, proteasa y lipasa. 
 
 El plasma, al cual se le ha extraído el fibrinógeno después de haberse formado el coágulo, se conoce con 
el nombre de suero. 
 
 
B) GLOBULOS ROJOS O ERITROCITOS 
 
Son producidos principalmente en la médula ósea roja de los huesos, en el bazo y en el hígado. Tienen forma 
discoidal, son anucleados, miden de 7.2 micras de diámetro 2.2 micras de espesor. Tienen alrededor una 
membrana compuesta de proteínas, lípidos simples y colesterol. El cuerpo del eritrocito tiene una malla de tejido 
de igual constitución en el que se encuentra el pigmento rojo llamado hemoglobina. La hemoglobina es una 
proteína conjugada formada por el grupo prostético HEM y la proteína GLOBINA que se encuentra dentro del 
eritrocito dando el color rojo característico al eritrocito. La característica más importante de la hemoglobina es su 
capacidad de combinarse con el oxígeno de las células; en los tejidos, la hemoglobina se combina con CO2, 
formando la carboaminohemoglobina, que a nivel de los pulmones libera CO2 que sale al exterior. 
Número de eritrocitos.- En la especie humana la cantidad normal es de 5-6 millones en la mujer. Su disminución 
 
 
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es causa de anemia. 
 
 
C) GLOBULOS BLANCOS O LEUCOCITOS 
 
Tienen mayor tamaño que los eritrocitos y sí contienen núcleo. La cantidad normal de leucos es de 5,000 a 
10,000 por milímetro cúbico. Hay varios tipos de leucos: Basófilos, eosinófilos, monocitos, linfocitos, neutrófilos y 
todos ellos tienen la función de combatir las infecciones bacterianas. 
 
 
D) PLAQUETAS O TROMBOCITOS 
 
Son de menor tamaño que los eritrocitos y no tienen núcleo. La cantidad normal de las plaquetas es de 150,000 
a 450,000 por milímetro cúbico de sangre. Tienen una función muy importante en la coagulación sanguínea. 
En resumen: las células de la sangre tienen las siguientes funciones: B) Respiración,C) Defensa del organismo 
y D) Coagulación. 
 
E) PLASMA Y SUS CONSTITUYENTES: 
 Agua: es el medio principal en el cual se llevan a cabo todas las reacciones químicas de la célula. Las 
funciones de este líquido son: hidratante, regulación de la temperatura corporal y balance hídrico. 
Elementos sólidos: 
 Proteínas; las seroalbúminas, las seroglobulinas y el fibrinógeno mantienen la presión oncótica. Esas 
mismas proteínas (en especial las primeras) confieren la viscosidad a la sangre y, por lo tanto, 
intervienen en el equilibrio ácido-básico. Las seroglobulinas tienen actividad como anticuerpos 
(mecanismo de defensa). El fibrinógeno participa en la coagulación de la sangre. 
 Sustancias inorgánicas: Las sales (sodio, potasio, calcio, etc.) son llevadas a las células por el 
plasma para mantener el equilibrio del medio interno. 
 Sustancias orgánicas que no son proteínas: son producto del metabolismo celular, substancias con 
poder alimenticio. El plasma recoge los desechos metabólicos y los lleva a los riñones, la piel, y al 
intestino para su eliminación. 
 Secreciones internas de las glándulas: El plasma se encarga de transportar las hormonas secretadas 
por las glándulas. 
 
 
6.13 PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO PARA ANALISIS DEL AREA DE HEMATOLOGIA 
 
 
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Técnico laboratorista 
A. Se utilizará el método de centrifugación para la obtención de suero o plasma. 
B. Separar el suero o plasma en alícuotas previamente identificadas con los datos correspondientes. 
C. Las técnicas a seguir para el procesamiento y obtención de resultados de hematologia se establece en 
los MANUALES DE OPERATIVOS proporcionados por el proveedor de equipos con clave: 
TZS5+1-MO-SKX-21N. (manual de operaciones equipo de hematología SYSMEX KX-21N) 
 
6.14 METODOS MANUALES DE HEMATOLGIA 
 
A. HEMATOCRITO (Hto) O VOLUMEN CELULAR COMPACTO (VCC) O VOLUMEN DEL PAQUETE 
CELULAR (VPC) 
 
 
Fundamento: 
Se basa en la centrifugación de la sangre total para medir el espacio que los eritrocitos ocupan con el de sangre 
total para medir el espacio que los eritrocitos ocupan, es decir que el hematocrito de una muestra de sangre es 
la relación del volumen de eritrocitos con el de sangre total. Indica la masa total de rojos. 
 
MUESTRA: Sangre total con (EDTA) o sangre capilar. 
 
 
B. MICROMÉTODO 
 
Técnico laboratorista 
 
MATERIALES: 
 Sangre con anticoagulante 
 Capilares 
 Encendedor o mechero 
 Centrífuga para capilares 
 Regla o equipo para lectura de micro hematocrito. 
 
 PROCEDIMIENTO: 
 
 
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1. Homogeneizar la muestra 
2. Llenar el capilar (3/4 partes de la capacidad del capilar).Se sella el extremo vacío. Los tubos llenos se 
colocan en los canales o surcos radiales del aparato de centrifugación con el extremo cerrado dirigido 
hacia afuera. 
3. Limpiar con gasa o papel 
4. Centrifugar a 12,000 r.p.m. durante 5 min, a menos que el hematocrito exceda del 50%, en este caso se 
centrifuga durante 5 min adicionales, con el objeto de asegurar que se ha reducido al mínimo la cantidad 
de plasma atrapado 
5. Leer inmediatamente. Los tubos capilares no están graduados. La longitud de toda la columna de 
eritrocitos solo debe medirse en cada caso con una regla milimetrada 
6. El resultado se expresa en % 
 
NOTA: para hacer la medición se coloca con el extremo inferior de la columna de sangre en la línea 
correspondiente al 100 y el plasma a 0. 
 
C. MACROMÉTODO DE WINTROBE 
 
 Técnico laboratorista 
 
MATERIALES: 
 Sangre con anticoagulante 
 Tubo de Wintrobe 
 Pipeta Pasteur 
 Centrífuga 
 
 PROCEDIMIENTO 
1. Se homogeneiza la muestra 
2. Se llena el tubo de wintrobe. A medida que se va llenando el tubo, eleve la punta de la pipeta, pero 
manténgala por debajo del menisco de sangre con el objeto de evitar la formación de burbujas. 
3. Se centrifuga 30 min a 3000 r.p.m. 
4. Se mide la escala de la derecha 
5. Se multiplica por 12 
 
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: 
 
 
 
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AUMENTADO: anemia que puede ser originada por destrucción celular, pérdidas directas, cirrosis, insuficiencias 
cardiacas. 
DISMINUIDO: Policitemia o poliglobulia. Puede estar causada por un aumento de la producción medular en 
forma primaria (policitemia vera) o secundaria a enfermedades sistémicas (altura, enfermedades pulmonares, 
enfermedades cardiovasculares), deshidratación, quemaduras, insuficiencia respiratoria crónica. 
 
CAUSAS DE ERROR 
 Tiempo y velocidad alteran los resultados 
 Fugas al no tapar bien 
 Hemoconcentración de muestra por extracción dificultosa, compresión excesiva, deshidratación y/o 
pérdida de líquidos 
 Hemolisis de la muestra 
 No homogeneización de la muestra 
 Inclusión en la lectura de la capa de blancos 
 
D. CONTEO DE GLÓBULOS ROJOS 
 
Fundamento 
 
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos 
manuales. 
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: 
 Dilución de la sangre 
 Muestreo de la sangre diluida en un volumen 
 Recuento de células en ese volumen 
 
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un 
fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el 
porcentaje de éstas que son viables. 
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple 
cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que utiliza la cámara de 
Neubauer 
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en una proporción exacta. 
Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña colocada en la cámara de Neubauer, contando 
 
 
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el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el 
número total. 
Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de recuento, una pipeta 
diluidora y un microscopio. 
 
Técnico laboratorista 
 
 MATERIALES 
 Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja) 
 Equipo para venopunción (Tubo lila) 
 Boquilla roja 
 Tubo de plástico 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 Gasas 
 
SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Liquido de Hayem 
 
PROCEDIMIENTO 
 
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es 
recogida en un tubo lila con EDTA 
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta 
 
 
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3. Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/200, y si se 
carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de 
la marca, se puede absorber con gasa el excedente 
 
4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (Hayem) y llenar de líquido de dilución 
hasta la marca de 101 
 
 
 
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5. Se tapa la punta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-
3 minutos 
 
6. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de 
la cámara para que por capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten 
 
 
7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. Luego con el objetivo de 40x contar sobre 
el cuadro grande central de la cámara solo en 5 cuadrados pequeños: uno central y cuatro angulares (80 
cuadritos del total) 
 
 
8. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e 
izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho. 
 
 
 
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 Cámara de Neubauer, 10x 
 
El rayado de la cámara de Neubauer cubierta de miles de eritrocitos, que destacan por su forma redonda y gran 
cantidad. 
 
Cámara de Neubauer, 40x 
 
8. Enfocando el cuadro central de los cuadros pequeños, se aprecian claramente los 16 cuadritos pequeños 
donde se tienen que contar los eritrocitos que hay en ellos. 
 
 
RESULTADOS 
 
Los recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso serían número de células por 
unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar los hematíes de los 5 cuadrados pequeños, se suman y con dicha cantidad de hace el 
siguiente cálculo: 
 
N° de hematíes x mm3 = altura x dilución x área 
N° de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000 
N° de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000 
 
En el análisis hecho, el número de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000 daba como resultado 4 
910 000/mm3, lo que indica un índice normal pues el paciente era una mujer de 11 años de edad. 
 
 
 
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El líquido de dilución no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles, sino que también permita 
identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no son de interés en este momento. En general se 
puede usar cualquier solución isotónica como diluyente y pueden ser: 
 
 Soluciones de Gower 
 Soluciones de Dace 
 Solución salina de NaCl al 0.9% 
Liquido de Hayem, el cual está formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada para un 
litro. Este último es el más usado.Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de 
recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. 
Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en 
las áreas coloreadas de azul. 
 
 
Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central con el condensador bajo y 
luz débil. 
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo, 
contando las células en cada cuadro, en barrido o fila. 
 
E. DETERMINACIÓN DE LEUCOCITOS 
 
Fundamento 
 
Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos 
manuales. 
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: 
Dilución de la sangre 
 
 
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Muestreo de la sangre diluida en un volumen 
Recuento de células en ese volumen 
 
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que corresponden a los campos 1, 3,7 
y 9. 
Para su dilución, se hace lo mismo que para los hematíes pero empleando la pipeta de blancos, de modo que la 
solución que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el líquidode Turk. El líquido de Turk es hipotónico 
de modo que se destruyen los hematíes y así no entorpecen en el recuento. 
El líquido de Turk consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana disolución de 1% 1ml y agua destilada 
en cantidad suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse a menudo para evitar levaduras y hongos. 
En un principio es un poco difícil distinguir los leucocitos de los restos de membranas de los hematíes 
hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son más refringentes (más brillantes) al moverlo con el 
microscopio que los restos de hematíes. Se debe observar la presencia de la membrana citoplasmática y de la 
membrana nuclear (a veces más) como líneas finas y brillantes. Esto se observa fácilmente moviendo el 
microscopio hacia delante y hacia atrás 
 
 
 
 
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MATERIAL 
 Pipeta de Thoma para glóbulos blancos (perla blanca) 
 Equipo para venopunción (Tubo lila) 
 Boquilla blanca 
 Tubo de goma 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 Gasas 
 
 
 
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SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Liquido de Turk 
 
PROCEDIMIENTO 
1.Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es 
recogida en un tubo lila con EDTA 
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta 
 
2.Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpiar 
la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el 
excedente 
 
3 Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk) y absorber hasta la marca 
11, no deben quedar burbujas. 
 
 
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4. Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace 
rotar manualmente de 2-3 minutos 
 
5. Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca. 
7. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la 
cámara para que por capilaridad se llene exactamente. 
 
6.Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten 
 
 
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7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. Y contar en los 4 cuadrados angulares. 
10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e 
izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho. 
 
 
 RESULTADOS 
Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como concentraciones, que en este caso 
serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total de ellos y con dicha 
cantidad de hace el siguiente cálculo: 
N° de leucocitos x mm3 = altura x dilución x área 
N° de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000 
N° de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50 
N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50 
 
En el análisis hecho, los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla: 
 
 
 
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El número de leucocitos fue de 111, que al multiplicarse por 50 daba como resultado 5 550/mm3, lo que indica 
un índice normal, sin embargo apenas y supera el mínimo, pues el paciente era un hombre, de 41 años de edad. 
 
Existen dos grandes tipos de estos glóbulos: 
Polimorfonucleares: 
· Basófilos 
· Eosinófilos 
· Neutrófilos 
Mononucleares: 
· Linfocitos (células T y células B) 
· Monocitos 
El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre completa. La cuantificación o 
recuento de leucocitos es muy importante para el diagnóstico de enfermedades. 
Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a: 
· Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización anormal). 
· Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico). 
· Enfermedad del hígado o el bazo. 
· Radioterapia o exposición a la radiación. 
Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a: 
 Anemia. 
 Tumores de la médula ósea. 
 Enfermedades infecciosas. 
 Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia). 
 Leucemia. 
 Estrés emocional o físico intensos. 
 Daño tisular (por ejemplo, quemaduras). 
Es muy importante comentarle al médico acerca de cualquier medicamento que se esté tomando, incluyendo 
productos de venta libre. Ciertos fármacos pueden interferir con los resultados del examen, como Sulfonamidas, 
Alopurinol, Ácido acetilsalicílico (aspirina), cloroformo, corticosteroides, epinefrina, heparina, quinina o 
triamtereno 
 
 
 
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La cámara de Neubauer o hemocitómetro es una lámina portaobjeto gruesa, en cuyo centro sehayan dos 
superficies cuadriculadas iguales, separadas del resto de la lámina por surcos y dos barras transversales algo 
más elevadas. 
Una laminilla cubreobjetos ópticamente plan, que al colocarse sobre las barras elevadas de la lámina forma una 
cámara entre el cubreobjetos y la superficie cuadriculada, teniendo una altura de 0.1mm 
 
En la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y leucocitos son diferentes, como se muestra en 
la imagen. 
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F. PLAQUETAS 
 
Fundamento 
 
Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son 
cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero pueden tener forma esférica u 
ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de 
diámetro llamada megacariocito. 
 
Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia 
(Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguíneos lesionados, 
para formar así el trombo plaquetario o tapón hemostático. 
El líquido diluyente puede ser una solución estéril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar) y cloruro 
de sodio (31 milimolar). Este líquido se provee listo para usar y su conservación es indefinida en refrigerador (2 - 
10° C) o puede ser también oxalato de amonio al 1%. El fundamento del método consiste en la producción de 
hemólisis por la utilización de un líquido hipotónico, y el mantenimiento de las plaquetas intactas y sin agrumar 
por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo. 
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MATERIAL 
 Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja) 
 Equipo para venopuncion (Tubo lila) 
 Boquilla roja 
 Tubo de goma 
 Tubos de ensayo 
 Papel parafilm 
 Cámara de Neubauer 
 Cubrehematimetro 
 Microscopio 
 Gasas 
 Caja de Petri 
 Papel filtro 
 
 
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SUSTANCIAS 
 Alcohol al 70% 
 Sangre venosa 
 Diluyente de plaquetas 
 PROCEDIMIENTO 
 
1. Obtener 10 ml de sangre venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA 
2. Agitar la sangre de manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante 
3. Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa 
 
4. Aforar con liquido diluyente de plaquetas hasta la marca 101 de la pipeta (Dilución 1:100) 
5. Tapar los extremos con papel parafilm y mezclar durante 1 minuto 
 
6. Colocar la Cámara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematímetro sobre las 
mesetas 
7. Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cámara, depositándola entre la 
meseta y el cubrehematímetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen 
burbujas o se derrame el líquido hacia los surcos 
 
 
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8. Colocar la cámara de Neubauer ya cargada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro humedecido 
en agua para evitar la evaporación, dejar en reposo de 10 a 15 minutos 
 
9. Observar al microscopio contando en la cuadricula central (para glóbulos rojos) las plaquetas que aparecen 
mucho más pequeñas que los hematíes, redondas, alargadas u ovales, altamente refringentes 
10. El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y está dividido en 16 cuadritos más pequeños, de tal 
manera que el número total de estos últimos es de 400, mismos en los que se lleva a cabo el recuento de 
plaquetas. 
 
RESULTADOS 
Los recuentos de plaquetas, al igual que los eritrocitos y leucocitos, se expresan como concentraciones, que en 
este caso serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 
Después de contar las plaquetas presentes en los 400 cuadritos centrales, el número obtenido se multiplica por 
el factor de dilución de la siguiente manera: 
N° de plaquetas x mm3 = No. De plaquetas contadas X dilución X 10 
Dilución: 1:100 
Este factor corresponde, para obtener los resultados por mm3 ya que el volumen de la cámara es de 0.1 mm3 
El número de plaquetas fue de 535, por lo que al realizar los cálculos quedaron así: 
No. de plaquetas = 535 X 100 X 10= 535 000 plaquetas por mm3, lo que indica un índice elevado de plaquetas. 
 
 
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CONCLUSIÓN 
 
El recuento de plaquetas es de suma importancia y es parte del recuento celular de la sangre como prueba de 
rutina. 
El paciente con un trastorno hemorrágico, clínicamente significativo, acude al médico con algunos tipos de 
síntomas hemorrágicos, con lo que se puede indicar la parte defectuosa del mecanismo de coagulación, y dentro 
de estas causas pueden estar la cantidad inadecuada de plaquetas. 
La hemorragia de vasos sanguíneos subcutáneos en piel intacta se puede ver como petequias o equimosis. 
Cuando se encuentran equimosis en gran cantidad y sin traumatismo aparente, el trastorno se conoce como 
Diátesis Hemorrágica y puede ser producida por anormalidades en los vasos sanguíneos, por la disminución en 
el número de plaquetas o por el mal funcionamiento. 
 
La disminución de plaquetas se denomina Trombopenia o púrpura trombocitopénica y se debe a lo siguiente: 
· Enfermedades autoinmunitarias (el organismo produce anticuerpos contra sus propias plaquetas) 
· Aplasia medular 
· Radioterapia y quimioterapia por cáncer 
· Leucemia aguda 
· Coagulación intravascular diseminada 
· Anemia hemolítica microangiopática 
· Hiperesplenismo 
· Púrpura trombocitopénica idiopática 
· Prótesis de válvula coronaria 
· Transfusión de sangre 
· Choque anafiláctico