Evaluación de un protocolo de pre-sincronización e inseminación a

•

SIN SIGLA

Juan Soto

2/5/2024

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Medicina

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Universidad de La Salle Universidad de La Salle
Ciencia Unisalle Ciencia Unisalle
Maestría en Ciencias Veterinarias Facultad de Ciencias Agropecuarias
1-1-2013
Evaluación de un protocolo de pre-sincronización e inseminación Evaluación de un protocolo de pre-sincronización e inseminación
artificial a tiempo fijo (IATF) con variación en la dosis y el día de artificial a tiempo fijo (IATF) con variación en la dosis y el día de
aplicación de la prostaglandina, en novillas cebú comercial en dos aplicación de la prostaglandina, en novillas cebú comercial en dos
fincas del municipio de Puerto Salgar (Cundinamarca) fincas del municipio de Puerto Salgar (Cundinamarca)
Leonardo Ramos Rodríguez
Universidad de La Salle, Bogotá
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Ramos Rodríguez, L. (2013). Evaluación de un protocolo de pre-sincronización e inseminación artificial a
tiempo fijo (IATF) con variación en la dosis y el día de aplicación de la prostaglandina, en novillas cebú
comercial en dos fincas del municipio de Puerto Salgar (Cundinamarca). Retrieved from
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UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
MAESTRÍA EN CIENCIAS VETERINARIAS

EVALUACIÓN DE UN PROTOCOLO DE PRE-SINCRONIZACIÓN E
INSEMINACIÓN ARTIFICIAL A TIEMPO FIJO (IATF) CON VARIACIÓN EN LA
DOSIS Y EL DÍA DE APLICACIÓN DE LA PROSTAGLANDINA, EN NOVILLAS
CEBU COMERCIAL EN DOS FINCAS DEL MUNICIPIO DE PUERTO SALGAR
(CUNDINAMARCA)

Trabajo de grado
Leonardo Ramos Rodríguez. M.V.Z., Esp.

Trabajo de grado como requisito para optar el título de:
Magister en Ciencias Veterinarias

Bogotá, Colombia
2013
ii

UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
MAESTRÍA EN CIENCIAS VETERINARIAS

Trabajo de grado
Leonardo Ramos Rodríguez.
76101203

Director:
Liliana Chacón Jaramillo M.V., M.Sc., Ph.D.

Bogotá, Colombia
2013
iii

APROBACIÓN

DIRECTORA

________________________________
Liliana Chacón Jaramillo

JURADO

________________________________

JURADO

________________________________

JURADO

________________________________

DIRECTIVAS DE LA UNIVERSIDAD DE LA SALLE

RECTOR Hno. Carlos Gabriel Gómez Restrepo

VICERRECTOR ACADÉMICO Hno. Fabio Coronado Padilla

VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN
Y TRANSFERENCIA Hno. Manuel Cancelado Jiménez

VICERRECTOR DE PROMOCIÓN Y
DESARROLLO HUMANO
Hno. Frank Leonardo Ramos Baquero

VICERRECTOR ADMINISTRATIVO Dr. Eduardo Ángel Reyes

DECANO Dra. Claudia Aixa Mutis

SECRETARIO ACADÉMICO Dr. Alejandro Tobón

DIRECTOR DE POSGRADOS Dr. Germán Rodríguez Martínez
v

COMPROMISO

Los trabajos de grado no contienen ideas que sean contrarias a la doctrina católica
en asuntos de dogma y moral.
Ni la Universidad, ni el director, ni el jurado calificador son responsables de las ideas
expuestas por el graduando.

AGRADECIMIENTOS
A Jesús por darme la oportunidad de conocerlo de cerca
A mi hijo Josué Daniel por ser la continuación de mis genes, la personita que siempre
ha confiado y creído en mí y el motor que me mueve aquí en la tierra
A mi madre Carmen Emilia Rodríguez, por esas noches de insomnio y cuidado en mi
infancia y por esas oraciones en mi adolescencia, pidiendo sabiduría a Dios para que
fuera profesional
A mi amor Diana Garzón Ruiz, por ser mi vara y cayado en la última etapa de la
Maestría.
A la Dra. Liliana Chacón, quien con su sabiduría, conocimientos y carácter me guío y
orientó durante esta Maestría
Al Hno. Ariosto Ardila Silva, codirector de este proyecto, quien siempre mostró su
apoyo incondicional.
Al Dr. Harvey Lozano, por sus conocimientos en el aula de clase, por su interés en la
academia y por su apoyo como persona y como profesional
A algunos de mis estudiantes del SENA que con sus críticas y consejos, me
ayudaron a formar no solo profesionalmente, sino como persona.
A todos los profesionales que se involucraron en mi formación profesional
A mis compañeros de maestría por su apoyo incondicional y por su compañerismo
A mis amigos Oscar Maldonado, Stella tique, Elizabeth Gallo, Ángela Gómez, Jenny
Vásquez, Yeison Acero, Arlinton Moreno, Norby Leal,…
A todos los que han creído en mí, porque fueron un constante apoyo
A todos los que nunca creyeron que llegaría hasta aquí, porque me impulsaron a
demostrarles que en la vida nada es imposible y que la fe vence cualquier obstáculo
A todos ustedes mil gracias de todo corazón, que Jesús los bendiga porque han sido
una bendición en mi vida

vii

RESUMEN
En el presente trabajo se evaluo si la variación en la dosis y día de aplicación de
prostaglandina en un protocolo de inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) puede
afectar la concentración de progesterona en las novillas en el momento de la IATF y
por lo tanto alterar la ovulación y el proceso de fertilización, que se verá reflejado en
la tasa de preñez. Este estudio se llevó a cabo en el municipio de Puerto Salgar -
Cundinamarca, en donde se utilizaron 58 novillas Cebú comercial. El protocolo se
inició con una pre sincronización de 12 días antes de iniciar el protocolo de IATF (d -
12) luego en el día 0 (d0; inició el protocolo de IATF) se dividieron al azar las novillas
en dos tratamientos (T1 y T2), con el fin de evaluar el efecto del día y la dosis de la
aplicación de prostaglandina (PGF2) sobre los porcentajes de preñez. El T1 (n=30)
consistió en la instauración en el d0 de un dispositivo intravaginal de 1 g de
progesterona (DIB 1 g®, Syntex, Buenos Aires, Argentina) y la aplicación de 2 mg
benzoato de estradiol (Estradiol, Over, Santa Fe, Argentina) y 75 g de
PGF2Prostal®, Over, Santa Fe, Argentina) el d5 se aplicó otra dosis de 75 g de
PGF2Prostal®, Over, Santa Fe, Argentina). En el T2, ídem al T1, con la salvedad
que la prostaglandina se aplicó en una sola dosis de 150 g el d8, en el momento del
retiro del dispositivo intravaginal. En los dos tratamientos, se aplicó en el momento
del retiro de los dispositivos de progesterona gonadotropina corionica equina
(Novormon® Syntex, Buenos Aires, Argentina) y realizó la IATF con semen de dos
toros de la misma raza de probadafertilidad. a las 48 horas luego de retirado el
dispositivo intravaginal y se aplicó una dosis de GnRH (Gestar®, Over, Santa Fe,
Argentina). Se realizó toma de muestras de sangre para determinar la concentración
viii

de progesterona sérica el d0 y el d10 mediante la técnica de ELISA, ,(DSI-EIA-
Steroid-Progesterone, Saronno (Italia). Igualmente en los días d0 y d10 se determinó
la presencia y el tamaño de de los cuerpos lúteos y folículos, al inicio del protocolo se
encontraron cuerpos lúteos de mayor tamaño en el T1 (71.43%) que en el T2
(60.00%), al momento de la IATF se encontró una tendencia similar, pero con los
folículos de mayor tamaño (T1 = 40.00% vs T2 = 42.86%). Al comparar las tazas de
preñez de los dos tratamientos se encontraron diferencias significativas (p=0.05)
entre los dos tratamientos con relación a las tazas de preñez (T1 43.33 vs T2 39.29).
En conclusión la administración de dos dosis de D-Cloprostenol (d0) y al (d5) en
novillas comerciales Cebú bajo las condiciones de este estudio aumentaron el
porcentaje de preñez comparado con la aplicación de una sola dosis, al retiro del
dispositivo (d8).
Palabras claves: Inseminación, Inseminación artificial a tiempo fijo (IATF),
Prostaglandina (PGF2

ABSTRACT

In this study we evaluated whether variation in the dose and day of prostaglandin
application protocol timed artificial insemination (TAI) can affect progesterone
concentration in heifers at the time of the IATF and therefore alter ovulation and the
fertilization process, which will be reflected in the pregnancy rate. This study was
conducted in the municipality of Puerto Salgar - Manila, where we used 58
commercial Zebu heifers. The protocol began with a 12-day pre synchronization
before starting the TAI protocol (d -12) then on day 0 (d0; began TAI protocol) were
randomly divided into two treatments heifers (T1 and T2 ), in order to evaluate the
effect of day and the dose of the application of prostaglandin (PGF2) on pregnancy
rates. The T1 (n = 30) consisted in the establishment of an intravaginal device d0 1 g
of progesterone (1 g ® DIB, Syntex, Buenos Aires, Argentina) and the application of 2
mg estradiol benzoate (Estradiol, Over, Santa Fe, Argentina) and 75 g of PGF2
Prostal ®, Over, Santa Fe, Argentina) In the d5 applied another dose of 75 g of
PGF2 Prostal ®, Over, Santa Fe, Argentina ). In T2, the T1 ditto, except that
prostaglandin was applied in a single dose of 150 g the d8, when intravaginal device
removal. In the two treatments was applied at the time of withdrawal of progesterone
devices equine chorionic gonadotropin (Novormon ® Syntex, Buenos Aires,
Argentina) and TAI performed with semen from two bulls of the same breed of proven
fertility. at 48 hours after intravaginal device removed and applied a dose of GnRH
(Gestar ®, Over, Santa Fe, Argentina). We performed blood sampling to determine
serum progesterone concentration on d0 and d10 by ELISA technique (DSI-EIA-
x

Steroid-Progesterone, Saronno (Italy). Likewise in the days d0 and d10 was
determined presence and size of corpora lutea and follicles at the beginning of the
protocol is found larger corpora lutea in T1 (71.43%) than in T2 (60.00%), at the time
of TAI found a similar trend but with larger follicles (T1 = T2 = 40.00% vs. 42.86%).
Comparing pregnancy cups of the two treatments were significant differences (p =
0.05) between the two treatments regarding pregnancy cups ( T1 T2 43.33 vs 39.29).
In conclusion, the administration of two doses of D-cloprostenol (d0) and (d5) in Cebu
commercial heifers under the conditions of this study increased pregnancy rate
compared with the application of a single dose, the removal of the device (d8).
Keywords: Insemination, fixed-time artificial insemination (TAI), prostaglandin
(PGF2
Xiii
TABLA DE CONTENIDO
Página
1. INTRODUCCIÓN………………….............................................................. 1
1.1. Objetivo general….…………………………….……………………………….3
1.1.2. Objetivos específicos…….……………………………………………….....3
2. MARCO TEÓRICO…………………………..…………………………………...5
2.1. Sincronización de celos y ovulación en bovinos………………..…………..6
2.1.1. Prostaglandina F2…………………………………………………………..6
2.1.2. Progestágenos y estrógenos……………….………………………………8
2.1.3. Gonadotropinas…………………………………………………….……….11
3. MATERIALES Y MÉTODOS….……………………………………….……...13
3.1. Localización……..……………………………………………………………..13
3.2. Población y muestra ………………………………………………….……....13
3.2.1. Seguimiento reproductivo previo a los tratamientos..........……….…….14
3.2.2. Sincronización IATF y re-sincronización……………..………….….…....14
3.2.3. Re-sincronización y re-inseminación a tiempo fijo…..………….….…...15
3.2.4. Determinación sérica de progesterona………………........………….….16
3.3. Análisis estadístico………………………..……………..…………………...19
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN…………………………………….………….21
5. CONCLUSIONES………………………………………..……………………..31
LISTA DE REFERENCIAS……………………………………………….……….33

xii

LISTA DE TABLAS
Página
Tabla 1. Porcentajes de cuerpos lúteos (CL) y sus diámetros en los ovarios
en el día del inicio del protocolo……………..……………………………..……… 22
Tabla 2. Porcentajes de cuerpos lúteos (CL) y folículos (F) de mayor
diámetro en el momento de la IATF………….……………………………...……. 22
Tabla 3. Concentración de la progesterona en los tratamientos 1 y 2, al
momento del inicio del protocolo y en el momento de la IATF…...……..……… 23

Tabla 4. Porcentaje de preñez al día 28 posterior a la IATF con variación en
la dosis y el día de aplicación de la PGF2 …...…………………………………. 24

Tabla 5. Relación de % de F3, % de CL, P4 y % de preñez, con variación en la dosis y
el día de aplicación de la PGF2…..……………….……………..……… 25

Tabla 6. Porcentajes de preñez obtenidos en la inseminación de la re sincronización,
de las novillas…………………………………………………………………………. 27
Xiii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Protocolo de IATF con DIB ….………………………………………… 2

Figura 2. Línea del tiempo de la aplicación hormonal, IATF y Re-Sincronización
(a)T1 utilizando (DIB 1 g®, Syntex, Buenos Aires, Argentina), GnRH sintética
(Gestar®, Over, Santa Fe, Argentina), PGF2 (Prostal®, Over, Santa Fe,
Argentina) d0 y d5, eCG (Novormon® Syntex, Buenos Aires, Argentina)(b)T2
utilizando (DIB 1 g®, Syntex, Buenos Aires, Argentina), GnRH sintética
(Gestar®, Over, Santa Fe, Argentina), PGF2α (Prostal®, Over, Santa Fe,
Argentina) d8, eCG (Novormon® Syntex, Buenos Aires,
Argentina)………………..………………………………………………………………
……….

1. INTRODUCCIÓN

La reproducción tiene una alta representatividad en la explotación pecuaria y si
se habla específicamente de la ganadería bovina, se puede encontrar limitantes. Una
de esas limitantes es poder obtener una cría por vaca al año y para lograr este
parámetro es necesario que las vacas queden preñadas antes de los primeros cien
(100) días después de parir. Por lo tanto, las hembras deben llegar al parto en
condiciones corporales óptimas para un adecuado reinicio de la actividad ovárica,
además de contar con un eficiente sistema de detección de celos (Galina y Maquivar,
2005) bien sea para una monta natural o para una eficaz inseminación artificial.
De los inconvenientes mencionados anteriormente, la detección del celo es el
aspecto más importante y por lo tanto, más estudiado de la reproducción bovina,
pero no por esto se solucionan los problemas y menos en el ganado de carne en
donde el estro muestra una menor duración, e intensidad (Krininger et al., 2003)
además de la predisposición de presentar estros silenciosos y las características del
desarrollo folicular, lo queocasiona baja fertilidad (Bó et al., 2003). Una de las
alternativas que se ha implementado para hacer a un lado las dificultades en la
detección de celos es la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) (Morales, 2005)
La aplicación y el perfeccionamiento de la IATF ha incrementado tanto la
eficiencia reproductiva como el mejoramiento genético (Baruselli, 2005).
2

Se han realizado trabajos de sincronización en donde se ajustaron varios
protocolos de acuerdo con el estado de los ovarios de las hembras por tratar. Dentro
de estos protocolos se tiene los que utilizan GnRH y PGF2 (Baruselli et al., 2002).El
protocolo de IATF que utiliza el dispositivo intravaginal liberador de progesterona (P4)
asociado a la aplicación de una dosis de benzoato de estradiol, es uno de los más
utilizados en la actualidad en América latina (Bó et al., 2003, Molina, 2008), este
protocolo consiste en la aplicación de 2,0 mg de benzoato de estradiol, vía
intramuscular, al momento de la colocación del dispositivo liberador de P4, el cual se
remueve bien sea al día 7 u 8 y se aplica una dosis de PGF2 24 horas más tarde
se aplica 1 mg de benzoato de estradiol, para realizar la IATF de 28 a 32 horas
después de la última aplicación del benzoato de estradiol. Este protocolo que utiliza
Progesterona, Estrógenos, Prostaglandina y Estrógenos, ha tenido algunas
modificaciones como la aplicación de una inyección de eCG al momento en que se
retira el dispositivo, esto con el fin de mejorar el crecimiento folicular y la
sincronización de la ovulación, especialmente en animales en anestro o baja
condición corporal (Baruselli et al., 2004a).
Aunque el protocolo de sincronización de celos que utiliza un dispositivo
impregnado de progesterona es el más utilizado en América Latina (Bó et al., 2003)
se han encontrado porcentajes de preñez en novillas cebuinas de un 15 a 35% (Bó et
al., 2003). Esta fertilidad se puede ver afectada por la acción negativa de la
concentración de progesterona en sangre de los animales tratados, llegando a
bloquear la producción de hormonas en el eje hipotálamo – hipófisis, especialmente
3

la producción de la hormona luteinizante disminuyendo las tazas de preñez (Carvalho
et al., 2008).
Los niveles altos de progesterona se pueden deber a la presencia de cuerpos
lúteos en el momento de la inseminación o al bajo metabolismo de la aportada por el
dispositivo. Por lo anterior es importante aclarar, si al aplicar la dosis de
PGF2antes del retiro del dispositivo, los niveles de progesterona endógenos de las
novillas disminuirán, de tal manera que al momento de la IATF estén por debajo de
1ng/ml y de esta manera incrementar la liberación de gonadotropinas endógenas,
pulsos pre-ovulatorios de LH, aumentando los porcentajes de preñez (Peres et al.,
2009).

1.1. Objetivo General
Determinar diferencias en la respuesta de una pre-sincronización y de un protocolo
de inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) en novillas cebú comercial, con
variaciones en la dosis y el día de aplicación de la prostaglandina (PGF2α) y su
relación con los porcentajes de preñez
1.1.2. Objetivos Específicos
 Identificar el efecto de la pre-sincronización con benzoato de estradiol y
progesterona en la fisiología ovárica de las novillas del tratamiento.
 Monitorear por medio de ecografía el desarrollo ovárico de las hembras
expuestas al tratamiento y relacionarlas con el ciclo estral y la ovulación
4

 Identificar el efecto de la dosis y el día de aplicación de la de prostaglandina
F2en el protocolo de sincronización sobre la concentración de progesterona
en el momento de la inseminación.
 Evaluar el efecto de la variación en la dosis y el día de aplicación de la
prostaglandina (PGF2α) sobre el porcentaje de preñez.

2. MARCO TEÓRICO

El estudio de la dinámica folicular en la especie bovina ha permitido determinar
que se presentan ondas de desarrollo folicular, por ultrasonografía se demostró que
las vacas pueden presentar dos, tres y hasta cuatro ondas de crecimiento folicular
(Sirois et al., 1990; Sartori et al., 2004).
Por acción de hormonas hipofisiarias y de otras sustancias como algunos
factores de crecimiento se produce el reclutamiento folicular, que es el desarrollo de
un grupo de folículos (Crowe et al., 2008), luego el folículo designado como
dominante comienza a sintetizar mRNA de receptores FSH y por esta razón este
crece más que el resto del grupo, ocasionando en los demás la subordinación y
atresia (Lopez et al., 2005). Solo el folículo dominante de la última onda folicular llega
a la ovulación (Gonzalez et al., 2001). El folículo dominante igualmente incrementa la
síntesis de receptores LH, convirtiéndose en un folículo ovulatorio, además
contribuye a la intensificación en la secreción de estrógenos durante el estro (Webb
et al., 2004).

2.1. Sincronización de celo y ovulación en bovinos
Comercialmente se ofertan hormonas que permiten manipular el ciclo estral,
para acortar o alargar la fase lútea, al igual que sincronizar la ovulación o
simplemente restablecer la actividad ovárica (Henricks et al., 1974; Bó et al., 2003).
La manipulación del ciclo estral, se realiza mediante protocolos hormonales que
adicionalmente permiten la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF), por medio de la
sincronización del reclutamiento de una nueva onda folicular, utilizando la aplicación
de estrógenos y progestágenos (Meneghetti et al.,2009), además de inducir la
luteólisis con la aplicación de prostaglandina (PGF2) una vez retirado el implante
liberador de progesterona y sincronizar e inducir la ovulación mediante la
administración de estrógenos, acetato de buserelina o de gonadorelina (Baruselli et
al., 2004).

2.1.1. Prostaglandina F2α 
La vida media de la prostaglandina después de alcanzar el torrente sanguíneo,
por la oxidación que sufre en los pulmones es corta, , esta logra el pico en las
concentraciones plasmáticas a los diez minutos de su aplicación y disminuye sus
valores al cabo de 90 minutos pos inyección (Kindahl, 1980).
Sin embargo, el tratamiento más utilizado para la sincronización del celo en los
bovinos ha sido la aplicación de prostaglandina F2α(Odde, 1990), algunos estudios
han demostrado que su eficiencia está influenciada por el estado de madurez del
cuerpo lúteo en el momento de iniciar el tratamiento con esta hormona, es así como
durante los primeros 5 o 6 días después de la ovulación la prostaglandina no induce
7

a la luteolísis de manera efectiva (Momont y Seguin, 1984), incluso se ha encontrado
que algunas vacas solo responden a la acción de la prostaglandina a los 8 días
después de haber presentado síntomas de celo (Bó et al., 2000).
Además en los animales que se producía la luteolísis, el intervalo de tiempo
entre la aplicación de la prostaglandina F2 las manifestaciones de celo y la
posterior ovulación no era igual en todos los animales, puesto que la aparición de
celo depende del grado de desarrollo del folículo presente en el momento del inicio
del tratamiento (Kastelic y Ginther, 1991). Si se aplica la prostaglandina F2 cuando
el folículo dominante de la siguiente onda folicular se encuentra en su última fase de
desarrollo, la ovulación se presentará entre 3 y 4 días después (Wiltbank et al.,
1996); por el contrario, si el folículo dominante se encuentra en la fase estática media
o tardía, es decir, que ya no es viable, la ovulación se tardará el tiempo necesario
para el crecimiento, desarrollo y diferenciación de un folículo de la siguiente onda,
hasta un tamaño preovulatorio; este tiempo es de aproximadamente de 5 a 7 días
(Kastelic y Ginther, 1991).
El uso de solo prostaglandinas para la sincronización de celos no es la más
adecuada porqué exige una eficaztasa de detección de celo para lograr unas
buenas tasas de preñez (Bo et al., 2009). Por lo anterior no es posible llegar a
realizar una IATF con la sola aplicación de esta hormona y es necesario aplicarla
junto con otras hormonas, como es el caso de la GnRH o los dispositivos liberadores
de progesterona (Mendanha et al., 2012).
La aplicación de la prostaglandina el día que se retira el dispositivo liberador
de progestágenos, ocasiona la lisis del cuerpo lúteo, pero su aplicación, no tiene
8

efecto sobre el diámetro del folículo, tasa de ovulación o la sincronización de la
ovulación (Ferreira et al., 2006), tal vez por la presencia de P4 en la sangre, no sólo
del dispositivo, sino también por la proveniente del cuerpo lúteo; por esta razón, se
recomienda la aplicación de la PGF2dos días antes de la retirada del dispositivo
(Menegetti et al., 2009).
En novillas Nellore, cuando se utiliza una inyección de PGF2α al inicio de un
protocolo con implante para la sincronización de IATF, disminuyen las
concentraciones de progesterona en suero durante el protocolo, probablemente por
la destrucción del cuerpo lúteo, productor endógeno de esta hormona, lo que ayuda
al aumento del diámetro del folículo ovulatorio, pero no mejora la tasa ni de preñez,
ni de ovulación (Figueira et al., 2010).

2.1.2. Progestágenos y estrógenos
La concentración sérica de progesterona parece ser un prerrequisito para que
las células de la granulosa se diferencien de forma normal, además de presentar una
normal expresión del celo y el desarrollo de un cuerpo lúteo producto de una
ovulación (Bo, 1998).
Dentro de las funciones de la progesterona está ayudar a disminuir la acción
inflamatoria que se presentó en el folículo preovulatorio (Espey et al., 1994), actuar
sobre el útero permitiendo un ambiente uterino adecuado para una posible preñez y
favorecer el desarrollo embrionario temprano (Bridges et al., 2000), además activa el
endometrio para la producción de prostaglandinas, aunque este también cumple la
función de evitar la presentación de celo y por consiguiente, de una ovulación, esta
9

función es aprovechada para, junto con los estrógenos séricos, provocar la regresión
del folículo dominante y que la siguiente onda folicular pueda surgir, mejorando la
ciclicidad de las hembras y, por lo tanto, las tasas de preñez (Mcdowell et al., 1998).
El protocolo que utiliza el dispositivo intravaginal liberador de progesterona
asociado a la aplicación de una dosis de benzoato de estradiol (Figura 1), es uno de
los más usados en la actualidad (Bó et al., 2003). Esta combinación hormonal, ha
dado mejores resultados que la combinación de GnRH y prostaglandina (Baruselli et
al., 2004).

Figura 1. Protocolo de IATF con DIB.

Los protocolos que utilizan los implantes de progesterona, consisten en la
aplicación de 2,0 mg de benzoato de estradiol, vía intramuscular, al momento de la
colocación del dispositivo liberador de progesterona, el cual se remueve bien sea al
día 7 u 8 y se aplica una dosis de PGF2y 24 horas más tarde 1 mg de benzoato de
estradiol, para estar realizando la IATF de 28 a 32 horas después de la última
aplicación del benzoato de estradiol. Este protocolo ha tenido algunas modificaciones
como la aplicación de una inyección de eCG al momento en que se retira el
dispositivo, esto con el fin de mejorar el crecimiento folicular y la sincronización de la
Día 0
DIB
2 mg de BE

Día 8
Retiro
DIB
PGF2


Día 10
I.A.T.F.

DIB
Día 9
BE 1mg



10

ovulación, especialmente en animales en anestro o baja condición corporal (Baruselli
et al., 2004ª; Carvalho, 2004; Sá Filho et al., 2010).
Cuando se administra a bovinos estradiol y progesterona al mismo tiempo, se
ha comprobado que la respuesta es el surgimiento de una nueva onda folicular en el
ovario de 3 a 5 días después (Bo et al., 1995, 2003). Este efecto solo se presenta
cuando se utiliza estradiol a bovinos tratados con implantes de progesterona
permanente, porque cuando es usado solo estradiol y con prostaglandina para que
induzca luteólisis, se producen diferentes efectos sobre el crecimiento folicular y por
lo general, la aparición de la siguiente onda folicular se retrasa (Burke et al., 1997).
En las hembras bovinas que ciclan correctamente en promedio cada 21 días,
la presencia de los altos niveles de P4 en suero es debida a la presencia de un
cuerpo lúteo funcional e indica un buen estado reproductivo del animal, es decir que
es un animal que se encuentra ciclando correctamente (Perara y Abeyratne, 1979).
Aunque las concentraciones de progesterona en suero, producto de un cuerpo
lúteo en una vaca vacía, aumentan después de la ovulación y luego disminuyen para
permitir la continuación del ciclo estral, en las hembras preñadas no ocurre esta
disminución, los niveles en suero de esta hormona son muy parecidos en ambos
casos durante los primeros 14 días (Bulman y Lammings, 1979).
El uso del dispositivo intravaginal nuevo liberador de progestágeno CIDR en
novillas, aumenta las concentraciones plasmáticas de P4, comprometiendo el
crecimiento folicular y una reducción de la tasa de ovulación, quizá por la disminución
en la frecuencia de la liberación de LH (Carvalho, 2004).
La utilización de protocolos con base en dispositivos de 1 gr que liberan
progesterona para la sincronización de la ovulación en novillas con presencia de
11

cuerpo lúteo, producen niveles de progesterona altos que interfieren con la secreción
de FSH y LH, por lo tanto el desarrollo folicular y la ovulación no ocurre durante las
siguientes 24 horas después de retirado el implante (Cipriano et al., 2011).
Una de las ventajas de este dispositivo liberador de progestágeno, CIDR es
que se puede utilizar hasta 3 veces sin que se presenten diferencias significativas en
cuanto al desarrollo del folículo dominante, tasa de ovulación y preñez, disminuyendo
los costos en la aplicación de esta biotecnología reproductiva (Meneghetti et al.,
2009).

2.1.3. Gonadotropinas.
La gonadotropina coríonica de yegua preñada o gonadotropina coríonica
equina (PMSG o eCG) se produce en los cálices endometriales de la yegua preñada
y al ser aplicada a las vacas presenta un promedio de vida de aproximadamente 3
días (Murphy y Martinuk, 1991) y se une a los receptores de FSH y de LH en las
células foliculares, además de los receptores de LH en las células del cuerpo lúteo.
La eCG en otras especies diferente a la equina, induce el crecimiento folicular
y la ocurrencia de la ovulación al estimular las células de la granulosa, especialmente
en rebaños con bajas tasas de ciclicidad, en animales recién paridos y en animales
con una baja condición corporal (Baruselli et al., 2004).
En trabajos de sincronización de celos para IA, la eCG tiene un mayor efecto
positivo sobre la tasa de preñez, cuando se aplica a animales anéstricos en el
momento de retirar el dispositivo intravaginal, mientras que cuando se aplica a vacas
cíclicas no presentan ningún efecto significativo (Baruselli et al., 2003).
12

Baruselli et al., en el 2004, utilizó un protocolo con dispositivo intravaginal y
encontró una relación directa en la tasa de preñez de vacas Nelore, con una
condición corporal menor o igual a 3, cuando se aplicaba eCG al momento de
retirado el dispositivo, con lo cual se puede concluir que la eCG funciona muy bien en
vacas con baja condición corporal porque está relacionada con la ciclicidadovárica
(Baruselli et al., 2004b).
Cuando se aplica aleatoriamente una dosis de GnRH (acetato de buserelina o
acetato de gonadorelina) en el ciclo estral, ésta ocasiona la ovulación del folículo
dominante, induciendo la emergencia de una nueva onda folicular, aproximadamente
2 a 3 días después de la aplicación (Pursley et al., 1995) y de 6 a 7 días después la
mayoría de los animales tratados presentarán un cuerpo lúteo funcional sensible a la
prostaglandina, causando una mejor sincronización de la ovulación (Wiltbank et al.,
1996). La administración de una segunda dosis de GnRH, bien sea uno o dos días
después de la prostaglandina, puede sincronizar el momento de la ovulación entre 16
a 24 horas más tarde y así llevar a cabo una IATF de 16 a 24 horas después de
haber aplicado la segunda dosis de GnRH (Pursley et al., 2001). Se ha realizado
variaciones de este protocolo, como es la aplicación de un benzoato de estradiol en
reemplazo de la segunda aplicación de GnRH. El benzoato de estradiol causa un
pico pre ovulatorio de LH, 40 a 44 horas después de su aplicación, lo que quiere
decir que se demora un poco más que si se aplicara GnRH, realizándose la
inseminación artificial a tiempo fijo de 30 a 36 horas después de la aplicación del
benzoato de estradiol (Barros et al., 2000). Este protocolo denominado Ovsynch,
proporciona muy buenos resultados en vacas que están ciclando y no funciona en
animales en anestro o en novillas prepuberes (Fernándes et al., 2001).
13

3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. Localización
El proyecto se realizó en dos fincas del municipio de Puerto Salgar –
Cundinamarca, ubicadas desde los 177 m.s.n.m. hasta los 500 m.s.n.m. El municipio
presenta una temperatura promedio de 32ºC, una precipitación de 2.152,1 mm/año,
una humedad relativa de 75 a 80% y una evaporación de 2000 a 2100 horas/sol/año.
Está ubicado sobre el borde derecho del rio Magdalena.

3.2. Población, muestra y tratamientos
Se seleccionaron para el estudio 64 novillas cebú comercial, de 35 a 38 meses
de edad, con un promedio de 37,2 meses y pesos desde 395 y 430 kg, con un
promedio de 415 kg de peso, con una evaluación reproductiva normal y sin
alteraciones evidentes a la palpación rectal o por examen por ultrasonografía en su
aparato reproductor. La condición corporal de los animales estaba en el rango de 2.5
a 3.5 según la escala de 1 a 5.
Los animales se encontraban en dos fincas, se distribuyeron al azar en dos
tratamientos (T1 y T2) con igual número de animales para cada tratamiento y finca.
Se realizó un protocolo de presincronización, sincronización e inseminación artificial
a tiempo fijo (IATF) en todos los animales y se inseminaron nuevamente los animales
que repitieron celo (figura 1). Los tratamientos correspondieron a la diferencia en la
14

dosis y el día de aplicación de la prostaglandina F2. En el T1 se aplicó la mitad de la
dosis de la prostaglandina F2 el día cero del protocolo de IATF (d0) y la otra mitad
el día 5 (d5). En el T2, la prostaglandina F2 se aplicó el día 8 del protocolo de IATF
(d8) (Figura 2).

3.2.1 Seguimiento reproductivo previo a los tratamientos. Se verifico que todas las
novillas estuvieran vacunadas tres y un mes antes de iniciado el protocolo contra
Leptospirosis, Diarrea viral bovina, Rinotraqueitis infecciosa bovina y Brucellosis
bovina. Se realizó un seguimiento reproductivo por examen rectal con ultrasonografía
aproximadamente 21 días previos a iniciar la pre-sincronización, siguiendo por lo
menos un ciclo estral, para determinar el estado del ciclo estral de cada animal antes
de la pre-sincronización.
En este examen se tuvo en cuenta la presencia de folículos y cuerpos lúteos
observados con un ecógrafo Aquila Pro® de Pie Medical, con un transductor de 5
MHz. Los hallazgos encontrados se clasificaron de acuerdo al tamaño de la siguiente
forma: F1: folículos menores o iguales de 6 mm de diámetro, F2: folículos de más de
6 mm, hasta 12 mm, F3, folículos con diámetro mayor a 12 mm, CL1: menores de 10
mm de diámetro y CL2, cuerpos lúteos mayores a 10 mm.
3.2.2. Sincronización IATF y re-sincronización. Todas las novillas, se inseminaron
con semen de dos toros, previa prueba de fertilidad, se utilizaron pajillas de una
concentración de 20 millones de espermatozoides vivos post descongelamiento, el
cual fue previamente analizado por una empresa de la región, para verificar su
calidad y se utilizó el mismo protocolo tanto de descongelación de pajillas como de
15

inseminación en todas las hembras. Las inseminaciones artificiales a tiempo fijo se
realizaron sin importar si mostraron o no signos de celo y practicadas por un solo
operario con experiencia en inseminación artificial.
Las hembras en estudio fueron re-sincronizadas con el mismo dispositivo de
progesterona usado para la sincronización y se verificaron las gestaciones antes de
la última aplicación de prostaglandina. La verificación de la preñez se realizó por
palpación rectal y por ultrasonografía al día 28 posterior a la IATF y al día 40 de la
última inseminación artificial en las hembras que repitieron celo luego de la re-
sincronización.
En el T1 cada novilla recibió doce días antes de iniciar el protocolo de IATF, es
decir el día menos doce (d-12; inicio de la presincronización) una inyección de 50 mg
de progesterona (Gestavec® 25, VECOL, Bogotá, Colombia) y 2 mg de benzoato de
estradiol (Estradiol, Over, Santa Fe, Argentina), en el d0 (inicio del protocolo de IATF)
se introdujo un dispositivo intravaginal de liberación de 1 g de progesterona
(DIB®,Syntex, Buenos Aires, Argentina), e inmediatamente se aplicó vía
intramuscular 2 mg de benzoato de estradiol (Estradiol, Over, Santa Fe, Argentina),
al igual que 0,075 mg de D+cloprostenol (PF2 Prostal, Over, Santa Fe, Argentina).
Al d5 de iniciado el tratamiento se aplicó vía intramuscular 0,075 mg de D-
Cloprostenol (PF2Prostal, Over, Argentina). En el T2 a las novillas se les modifico
únicamente en el protocolo descrito anteriormente, la dosis y el día de aplicación de
la prostaglandina. Se aplicó una sola dosis de PF2el día de retiro del dispositivo (el
d8 del protocolo de IATF), se aplicó una dosis única de 0,150 mg de D-Cloprostenol.
Posteriormente en los dos tratamientos en el d8 se retiró el dispositivo y se aplicó vía
16

intramuscular 200 UI de Gonadotropina corionica equina (eCG; Novormon®, Syntex,
Buenos Aires, Argentina). El d9 se aplicó 1 mg de benzoato de estradiol (Estradiol,
Over, Santa Fe, Argentina). El d10 a las 48 horas después de retirado el implante, se
aplicó 0,01 mg de acetato de Buserelina (Gestar®, Over, Santa Fe, Argentina) y se
inseminó a tiempo fijo.
3.2.3. Re-sincronización y Re-inseminación a tiempo fijo. Quince días después de
realizada la inseminación artificial a tiempo fijo, a todos los animales del estudio se
les colocó nuevamente el mismo implante retirado el d8 para empezar la re-
sincronización que duró hasta el día 40 del protocolo. Siete días después de
colocado nuevamente el dispositivo, es decir el día 32, se retiró el dispositivo y se
aplicó 0,01 mg de acetato de Buserelina (Gestar®, Over, Santa Fe, Argentina). El
d38 se realizó el diagnostico de preñez por medio de ultrasonografía y las vacas que
resultaron positivas a la gestación fueron apartadas del protocolo y las que resultaron
vacías al día siguiente, es decir al d39 se les aplicó 0,075 mg de prostaglandina
(Prostal, Over, Santa Fe, Argentina) y al día siguiente, es decir el d40 del protocolo
se les aplicó 1 mg de benzoato de estradiol (Estradiol, Over, Santa Fe, Argentina).
Luego se realizó la inseminación artificial a tiempo fijo de 28 a 32 horas después de
aplicado el benzoato de estradiol, se diagnosticaron las preñeces 30 días después.
3.2.4. Determinación de concentración sérica de progesterona. Las muestras de
sangrese colectaron en la vena coccígea caudal en tubos al vacío, sin
anticoagulante de 10 ml. Las muestras se tomaron; el día 0 (es decir el día que se
inició el protocolo de sincronización) y el d10 del protocolo o día de la inseminación a
tiempo fijo. Las muestras se centrifugaron a 6 x g y el plasma se conservó en tubos
17

plásticos estériles de 1.5 mL a -20 ºC hasta su análisis. Posteriormente las
concentraciones plasmáticas de progesterona se determinaron mediante la técnica
de ELISA, con un paquete comercial, DSI-EIA-STEROID-PROGESTERONE,
Saronno (Italia) para muestras en sueros humanos y se le realizó una curva de
regresión lineal para adaptar las diferentes concentraciones entre especies. Se
utilizó un equipo de marca Amersham, y para la interpretación de las lecturas se
utilizó el programa Gen 5 versión 2.00.18.

Figura 2. Línea del tiempo de la aplicación hormonal, IATF y Re-Sincronización.
(a) T1 utilizando (DIB 1 g®, Syntex, Buenos Aires, Argentina), GnRH sintética (Gestar®, Over, Santa Fe, Argentina),
PGF2α (Prostal®, Over, Santa Fe, Argentina) Aplicada el d0 y el d5 del tratamiento, eCG (Novormon® Syntex, Buenos
Aires, Argentina). (b) T2 utilizando (DIB 1 g®, Syntex, Buenos Aires, Argentina), GnRH sintética (Gestar®, Over, Santa
Fe, Argentina), PGF2α (Prostal®, Over, Santa Fe, Argentina) Aplicada el d8 del tratamiento, eCG (Novormon® Syntex,
Buenos Aires, Argentina).

b)
Día -12
P4
Estradiol

a)
Día 8
eCG



Día 5
PGF2




Día 0
Muestra de sangre
B. Estradiol
PGF2


Día 25
DIB usado

Día 32
DIB usado
GnRH Día 41
28 a 32
horas IATF

DIB
DIB
Día 9
estradiol


Día 10
M. sangre
I.A.T.F.
GnRH

Día 38
U.S

Día 39
0,075 mg
PGF2

Día 40
BE

Pre-sincronización
Pre-sincronización
Día -12
P4
Estradiol

Día 0
M.
SangreEstradi
ol


Día 8
eCG
PGF2

Día 25
DIB usado

Día 32
DIB usado
GnRH
Día 41
28 a 32
horas
IATF

DIB
Día 9
estradiol


Día 10
M. sangre
I.A.T.F. GnRH

Día 38
U.S

Día 39
0,075 mg
de
PGF2


Día 40
BE

Re-sincronización

DIB
Re-sincronización
19

3.3. Análisis estadístico
Los datos se sometieron a la comprobación de supuestos con el fin de evaluar
la normalidad y la homogeneidad entre los mismos. Los supuestos que se probaron
fueron: distribución normal, homogeneidad de varianzas e independencia de error.
Una vez sometidos los datos a los supuestos, se analizaron con el paquete
estadístico Stat Graphics Pluss Centurion V.16.1.
Cuando se encontraron diferencias estadísticamente significativas, las medias
de las variables se compararon con la prueba Tukey, con un nivel de confianza
(p<0.05) del 95% para los dos tratamientos (T1 y T2), teniendo en cuenta las 30
replicas por tratamiento.
El modelo matemático llevado a cabo entre los tratamientos fue el siguiente:

Y sus respectivas hipótesis fueron las siguientes
Ho = µ1 - µ2 = 0
HA= µ1 - µ2 ≠ 0
Variables analizadas:
Tasa de preñez delas novillas evaluadas a los 28 días y los 40 días.
Concentración sérica de progesterona al Inicio de la sincronización y al momento de
la IATF
Diámetro de los folículos y cuerpos lúteos encontrados al inicio (d0) y al momento de
la IATF (D10).
20

Se realizó adicionalmente una correlación de los niveles de progesterona con tasa de
preñez dentro de tratamiento.
21

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Se seleccionaron 61 novillas cebú comercial de 37,17 ± 1.18 meses de edad y
413 ± 11.23 kg de peso en promedio para el protocolo de pre sincronización el día
menos 12 (d-12) a todas las hembras. En el día cero se dividieron al azar en dos
tratamientos, con 30 animales para el tratamiento 1 (T1) y 31 animales en el
tratamiento 2 (T2). Al día 8 del protocolo en el T2, dos novillas perdieron el
dispositivo, se redujo el grupo a 29 animales y el T1 continuo con 30 novillas. El día
de la inseminación por motivos de manejo se redujo a 28 el número de animales del
T2. El trabajo se culminó finalmente con 58 novillas.
Las características del ovario determinadas mediante el seguimiento
reproductivo por medio de la ultrasonografía el día del inicio del tratamiento (d0) y el
día de la IATF (d10) se resumen en las tablas 1 y 2.
Tabla 1. Porcentaje de cuerpos lúteos (CL) y sus diámetros en los ovarios en el día
de inicio del protocolo.
Tratamientos Novillas
n
CL1 (≤10 mm)
%
CL2 (≥ 10 mm)
%
Ausencia de CL
%
T1 30 20.00 (6/30) 60.00 (18/30) 20.00 (6/30)
T2 31 19.35 (6/31) 64.52 (20/31) 16.12 (5/31)
Total 61 19.67 (12/61) 62.30 (38/61) 18.03 (11/61)
22

En los protocolos de sincronización, la aplicación de progesterona y estrógenos
al mismo tiempo, inducen la regresión del folículo dominante, generando de 2 a 5
días más tarde, el reclutamiento de una nueva onda folicular (Moreno et al., 2001; Bó
et al., 2002). En el 86.21% de las novillas estudiadas, se observó por ultrasonografía
cuerpos lúteos al momento de iniciar el protocolo de IATF, la mayoría de estos
(65.72%) superiores a 10 mm de diámetro. Lo anterior confirma que en este estudio
la aplicación de 50 mg de P4 y 2 mg de benzoato de estradiol el d-12, sincronizó la
dinámica folicular en el 86.21% de las novillas (50 novillas), las que presentaron CL
en el d0. Las otras novillas que no presentaron CL, bien pudo haber sido por
presentar respuestas individuales a estas hormonas o sus ciclos estrales son de
ondas foliculares más cortas (Roa et al., 2006; Sartori and Barros 2011).
Aunque Rodríguez et al. (2007) concluyeron que la presencia de estructuras
ováricas, cuerpos lúteos o folículos en novillas cebú al momento de iniciar el
protocolo de sincronización con dispositivo intravaginal liberador de progesterona, no
afectan los porcentajesde preñez, sin embargo, la presencia de los CL en las
novillas es de importancia debido a los hallazgos encontrados por algunos
investigadores como Bo et al. (2007) quien realizó la aplicación de un protocolo de
sincronización con 300 novillas cebú de 26 meses de edad, Callejas et al. (2007) en
268 novillas Braford de 18 meses de edad, Gonzalez et al. (2007b) 288 novillas
angus de 15 meses de edad, entre otros que afirman que la presencia de un cuerpo
lúteo en el momento de iniciar protocolo de IATF, con dispositivo liberador de
progesterona, es importante para garantizar ciclicidad ovárica de las hembras en
general, En otro estudio en Argentina, con 294 novillas cebú, de 24 meses de edad,
se probó el efecto de la concentración de un dispositivo intravaginal liberador de
23

progesterona, resaltando la importancia de que todas las novillas estaban ciclando y
presentaban cuero lúteo al inicio del estudio (Phillips et al., 2010).

Tabla 2. Porcentaje de cuerpos lúteos (CL) y Folículos (F) de mayor diámetro en el
momento de la IATF.
Tratamiento Novilla
n
% F 1
(≤ 6 mm)
% F 2
(6.1 – 12mm)
% F 3
(≥ 12 mm)
CL
%
T1 30 26.67 33.33 40.00 6.67a
T2 28 25.00 32.14 42.86 10.71b
Total 58 25.84% 32.74% 41.42% 8.69%
Letras diferentes en la misma columna expresan diferencias estadísticamente
significativas, según prueba de Tukey con un 95% de confianza, α : 0,05

Al examen de ultrasonografía el día de la IATF (d10), 5 novillas (8.69%)
presentaron un cuerpo lúteo (Tabla 2) y se encontraron diferencias significativas
(p<0.05) entre los dos tratamientos, T1, 6.67% vs T2, 10.71%, mientras que en la
distribución del tamaño de los folículos no presentaron diferencias significativas entre
los dos tratamientos y los folículos mayores de 12 mm de diámetro se encontraron en
mayor porcentaje (41.42%) en el momento de la inseminación artificial.
En estudios realizados previamente se concluyó que la aplicación de la
prostaglandina días antes del retiro del dispositivo impregnado con progestágenos,
aumentan el tamaño del folículo preovulatorio, adelantando la ovulación y la tasa de
preñez (Ambrose et al., 2008; Peres et al., 2009). Sin embargo en este trabajo, el
24

tamaño de los folículos en el día de la inseminación (d10) no tuvo diferencia
significativa entre los tratamientos, es decir que el efecto de la administración de la
dosis de prostaglandina en una o dos inyecciones no afecto el tamaño folicular, a
diferencia del porcentaje de cuerpos lúteos presentes, en los que sí se presentaron
diferencias significativas.
El día de la inseminación se encontró en el total de las hembras, solo 5 novillas
que presentaron cuerpo lúteo; 2 del T1 y 3 del T2, aun después de haber aplicado las
dosis de prostaglandina. Este hallazgo sugiere que la aplicación de media dosis de
prostaglandina es suficiente para causar la apoptosis del cuerpo lúteo (Bo et al.,
2007), pero que hay novillas que presentan respuestas individuales y que por esta
razón los porcentajes de preñez no llegan a un 100%.
La concentración media de progesterona en suero de las muestras en el d0
fue de 4.74±1.75 ng/ml y como se observa en la tabla 3, estadísticamente fueron
similares en los dos tratamientos. Sin embargo, en el d10, o día de la inseminación
se encontraron diferencias significativas (p<0.05) entre los tratamientos 1 y 2 de
0.84±0.19 y 1.41±0.76, respectivamente (Tabla 3). Estos porcentajes indican que las
estructuras encontradas a la ultrasonografía el día de la IATF, eran CL no
funcionales, con baja producción de progesterona.
Por otra parte, el T2, en donde se aplicó la dosis completa de prostaglandina
el día del retiro del dispositivo (d10), presentó niveles más altos de progesterona en
suero que cuando se dividió la dosis y se vario el día de aplicación, debido a la
presencia de más cantidad (3) de cuerpos lúteos, aun cuando no fueran funcionales.
En un trabajo realizado en Brasil con 44 novillas Hereford de 24 a 26 meses de
edad, con pesos promedios de 320 kg, en donde se buscaba estudiar el efecto de las
25

concentraciones de progesterona en suero al inicio de un protocolo de sincronización
utilizando dispositivos liberadores de P4, sobre la tasa de preñez, se encontró, que
no existen estadísticamente, diferencias significativas entre las concentraciones de
P4 al inicio del tratamiento y tasas de preñez (Azeredo et al., 2007).

Tabla 3. Concentración de progesterona en los tratamientos 1 y 2 al momento de
inicio del protocolo y en el momento de la IATF
Tratamiento n Concentración de
P4 (ng/ml) d0
Concentración P4
(ng/ml) d10 o IATF

4.06 ± 1.77

0.84 ± 0.19a

4.25 ± 1.73

1.41 ± 0.76b

P<α

0.00325

Promedio ± D.S: el promedio es el resultados de 58 muestras independientes por
tratamiento, a,b,: letras distintas en sentido vertical expresan diferencias
estadísticamente significativas según Tukey con un 95% de confianza.
La tasa de preñez en inseminación artificial se aumenta, cuando se suministra
concentraciones bajas de progesterona (dispositivos de 0.53 g, frente a 1.06 g)
exógena (Dias et al., 2009), además el estado fisiológico y corporal del animal influye
en los resultados, es así como en vacas cíclicas se observan mejores resultados,
26

cuando se aplica la prostaglandina dos días antes del retiro del dispositivo, mientras
que en animales en anestro es indiferente el tiempo de aplicación de la misma,
debido a que los animales cíclicos contienen progesterona endógena proveniente de
la presencia del cuerpo lúteo de ciclos anteriores (Meneghetti et al., 2009). Las altas
concentraciones de progesterona en suero, afectan negativamente el tamaño del
folículo ovulatorio, la detección de celo y las tasas de preñez (Peres et al., 2011) y
se deben disminuir las concentraciones de P4 del CL y el dispositivo del tal forma
que se logre el pico de secreción de LH que lleva a la ovulación.
Otros estudios similares con 268 novillas de 18 meses de edad, de raza Braford
(Callejas et al., 2007b) y 288 novillas de 15 meses de la raza Angus (Gonzalez et al.,
2007b) también dividieron la dosis de prostaglandina en dos aplicaciones, la mitad el
día cero y la otra mitad el día de retiro del dispositivo, encontraron que no había,
diferencias significativas en los porcentajes de preñez. En otro estudio con 451
novillas Girolando, en donde se evaluó la dosis y el día de aplicación de la
prostaglandina, se concluyó que el tiempo de la aplicación de la prostaglandina no
afectaba la respuesta ovárica, ni los porcentajes de preñez (Mendanha et a., 2012).
En la tabla 4 se observan los resultados de la tasa de preñez obtenidos en las
novillas mediante el protocolo de IATF, teniendo en cuenta la dosis y el día de
aplicación de la prostaglandina. La dosis de prostaglandina aplicada en las novillas el
día 8 del protocolo de sincronización para la IATF, presentó diferencia significativa
(p< 0.05) en la tasa de preñez (39,29%), comparada con la distribuida entre el día 0 y
el día 6 del protocolo de sincronización (43,33%).

Tabla 4. Porcentaje de preñez al día 28 posterior a la IATF con variación en la dosis
y el día de aplicación de la PGF2
Tratamientos Número de
novillas por grupo
Porcentaje de
novillas preñadas
Porcentaje de
novillas vacías

43.33 (13/30)a

56.67 (17/30)a

39.29 (11/28)b

60.71 (17/28)b

p<α

0.0421

0.0394
Letras diferentes en la misma columna expresan diferencias estadísticamente
significativas, según prueba de Tukey con un 95% de confianza, α : 0,05

El promedio del diámetro folicular de las hembras que quedaron preñadas en
la primera inseminación fue de 12.85 mm en el T1 y de 12.91 en el T2, resultadossimilares fueron encontrados por Perry et al. (2007), quienes sincronizaron un grupo
de novillas para inseminar a tiempo fijo y encontraron diámetros foliculares
preovulatorios de 12.2 ± 02 mm, aunque también se halló que vacas que ovularon
folículos de diámetros menores, fueron menos propensas a sostener una preñez.
Al comparar los porcentajes de folículos de mayor tamaño en el momento de
la inseminación artificial y los porcentajes de preñez, se observa que hay un margen
muy estrecho (41.42 vs 41.38), lo que indica que las novillas que presentaron un
folículo grande y ovularon, quedaron preñadas a la primera inseminación y que los
resultados, no dependieron de la destreza del inseminador, ni del semen, ni del
28

protocolo de descongelación, sino de respuestas de las novillas al protocolo de
sincronización.
El promedio del diámetro folicular de las novillas preñadas en los dos
tratamientos es de 12.88 mm, mientras que el promedio de los diámetros foliculares
de las novillas vacías es de 7.44 mm, este hallazgo confirma que a mayor tamaño
folicular, mayor probabilidad de preñez en una IATF (Gonzalez et al., 2007, Sá Filho
et al., 2010). Otro estudio realizado en Brasil con 2388 vacas entre cebuinas y
mestizas demostró que la preñez está influenciada por el diámetro del folículo
ovulatorio (Sá Filho et al., 2010). Sá Filho et al. (2011), en un estudio con 702
novillas cíclicas para determinar el diámetro crítico del folículo ovulatorio en
protocolos de IATF, encontró que la ovulación de folículos de más de 9 mm resultan
en preñeces efectivas, confirmando los resultados obtenidos en este trabajo.

Tabla 5. Relación entre el porcentaje de Folículos 3 (≥ 12 mm), el porcentaje de la
presencia de cuerpos lúteos CL, la concentración sérica de progesterona y el
porcentaje de preñez, con variación en los dos tratamientos
Tratamiento Novilla
n
% F 3
(≥ 12 mm)
CL
%
P4 (ng/ml)
momento de la
IATF
Porcentaje
preñez
T1 30 40.00% 6.67a 0.84 ± 0.19a 43.33 (13/30)a
T2 28 42.86% 10.71b 1.41 ± 0.76b 39.29 (11/28)b
Total 58 41.42% 8.69% 0.00325 0.0421
29

Letras diferentes en la misma columna expresan diferencias estadísticamente
significativas, según prueba de Tukey con un 95% de confianza, α : 0,05

En el análisis de los datos sobre el tamaño de los folículos al examen de
ultrasonografía el día de la IATF y comparados con los resultados de preñez, se
observó que ninguna de las vacas que presentó F1, o menores de 6 mm, quedaron
preñadas, mientras las que presentaban F2, 5 quedaron preñadas. Respecto a lo
anterior, solo una novilla que presentaba F3 o mayor a 12 mm, con una
concentración de progesterona de 2.4 ng/ml, no quedó preñada, probablemente por
la cantidad de P4 no se produjo la ovulación, el resto de este último grupo respondió
satisfactoriamente al tratamiento. De acuerdo a lo anterior, las novillas preñadas
presentaron un folículo de mínimo 12 mm de diámetro el d10.
En cuanto a la presencia de los cuerpos lúteos el día de la inseminación, se
presentaron diferencias significativas entre los tratamientos T1 y T2 (6.67% vs
10.71%, respectivamente), aunque al comparar estos hallazgos con los niveles
séricos de P4 para los dos tratamientos (0,84 ± 0,19 y 1,41 ± 0,76 respectivamente,
se observa que los CL observados, no producen la cantidad de hormona de una
estructura funcional, es decir, pueden ser CL en regresión o no funcionales.
En la tabla 6 se presentan los resultados de la taza de preñez obtenida
después de la resincronización, en donde al igual que en la primera inseminación, se
encontraron diferencias significativas entre los porcentajes de preñez de los dos
tratamientos (p 0˂.005), T1 y T2 (38.80% y 47.36%, respectivamente), pero a
diferencia de la primera inseminación en el T2 se presentó la mayor tasa de preñez.
30

Tabla 6. Porcentajes de preñez obtenidos en la inseminación de la re sincronización,
de las novillas
Tratamientos Número de
novillas por grupo
Porcentaje de
novillas preñadas
Porcentaje de
novillas vacías

38.8 (7/18)a

61.11 (11/18)a

47.36 (9/19)b

52.63 (10/19)b

p<α

0.00134

0.00024
α:0,05 (95%).
Letras diferentes en la misma columna expresan estadísticamente diferencias no
significativas, según Tukey con un 95% de confianza.
A diferencia de la primera inseminación, en donde los porcentajes de preñez
fueron más altos en el T1, en la resincronización se obtuvo un porcentaje mayor en el
T2, con una diferencia significativa, el anterior resultado puede deberse a efectos
residuales de las hormonas de la sincronización, en donde las novillas que quedaron
preñadas en la resincronización, no hubieran respondido a la primer ovulación, pero
si a la siguiente.

5. CONCLUSIONES

Teniendo en cuenta las condiciones de este estudio, La aplicación de la
prostaglandina antes del retiro del dispositivo, dentro de un protocolo de
sincronización afecta significativamente las tasas de preñez en novillas cebuinas en
el Magdalena medio.
Se requiere continuar con más investigaciones en este tema, puesto que los
porcentajes siguen siendo aún bajos, para la inversión de tiempo y dinero que se
invierte en estos tratamientos.

También se demuestra que la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) en novillas
es una técnica viable, que busca el mejoramiento genético del hato ganadero
Colombiano, además de aprovechar al máximo el momento del inicio de la pubertad
en las hembras bovinas lo cual represente un aporte positivo para las ganaderías de
la región.
El este trabajo se utilizaron 58 Novillas, se invirtió en hormonas $2.631.500,oo
en los protocolos y 92 pajillas a un costo de $25.000,oo cada una, para un total de
$4.931.500,oo. Se lograron 33 preñeces, con un costo por preñez de $79.742,oo sin
incluir el semen, e incluyendo un semen de este valor, el valor por preñez es de
$149.439,oo. En estos cálculos en la inversión no se considero los costos de la mano
de obra, que para el control de estos tratamientos es alto. Es un punto muy
32

importante a analizar estos costos en el momento de instaurar un programa
reproductivo en la finca.
También se puede concluir la importancia de los niveles de progesterona en
suero en el animal que se va a someter a un protocolo de IATF, es decir que esto
garantiza que esa novilla está ciclando y por lo tanto se puede sincronizar para una
IATF.

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Evaluación de un protocolo de pre-sincronización e inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) con variación en la dosis y el día de aplicación de la prostaglandina, en novillas cebú comercial en dos fincas del municipio de Puerto Salgar (Cundinamarca)
Citación recomendada
tmp.1559755405.pdf.DCL07