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Staphylococcus aureus Características Macroscópicas Se trata de cocos Gram positivos que poseen tendencia a agruparse en racimos, colonias lisas, brillantes y convexas. Fermenta glucosa, lactosa y maltosa. El crecimiento ocurre en un amplio rango de temperatura 6,5 a 50º C, siendo optimo 30-40º C. En los medios de cultivo tradicionales la mayoría de las especies crecen después de incubarse durante 18-24 horas, formando colonias de 0.5-1.5 mm de diámetro. Las colonias de S. aureus se observan lisas, elevadas, brillantes y de bordes enteros, presentan consistencia cremosa y pigmentación que va del amarillo a dorado debido a la producción de carotenoides, la mayoría de las cepas producen β-hemólisis o hemólisis total alrededor de las colonias cuando se cultivan en agar sangre. S. aureus se diferencia de las demás especies por producir coagulasa que se manifiesta por su capacidad para coagular el plasma es resistente al calor, a la desecación y puede crecer en medios con grandes cantidades de NaCl (7.5%). Domino Bacteria Filo Firmicutes Clase Bacilli Orden Bacillales Familia: Staphylococcaceae Género Staphylococcus Especie: S. aureus Taxonomía S. aureus visto bajo un microscopio con aceite de inmersión. https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Firmicutes Medios de cultivo S. aureus crece bien en medios de cultivos no selectivos, como el agar sangre, agar chocolate y medios líquidos para hemocultivo donde se recupera fácilmente. El medio recomendable y usado por la mayoría de los laboratorios es el agar sal manitol o medio de Chapman por su elevado contenido de sal que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram negativas. Este medio permite realizar la identificación presuntiva de S. aureus por la pigmentación amarilla característica de S. aureus. Debido a que esta bacteria fermenta el manitol se genera un cambio de color en el medio que vira de rojo pálido a amarillo. Otros medios utilizados para el aislamiento de S. aureus son el agar sangre suplementado con colistina y el ácido nalidíxico y agar feniletanol que también inhibe el crecimiento de las bacterias Gram negativas. En la actualidad se han desarrollado medios de cultivo que contiene agar base cromogénico específico para la detección de S. aureus resistentes a la meticilina de muestras clínicas; en presencia de enzimas específicas, los sustratos son modificados y los cromógenos tiñen específicamente las colonias, permitiendo realizar la identificación directa de S. aureus. Su temperatura óptima de crecimiento va de 35 a 40 °C y el pH óptimo oscila entre 7,0 y 7,5 aunque soportan pH mucho más extremos. Soportan tasas elevadas de cloruro sódico, hasta un 15%. Pruebas Bioquímicas La identificación de S. aureus se realiza con el empleo de pruebas bioquímicas como: prueba de la catalasa, fermentación de glucosa, que permite diferenciar al género Staphylococcus del género Micrococcus, que también se considera una catalasa positiva pero no fermenta la glucosa. Sin duda, la prueba de la coagulasa sigue siendo la más utilizada. Se basa en la capacidad de S. aureus para producir la enzima extracelular que coagula el plasma. La detección de la coagulasa permite diferenciar S. aureus coagulasa positivo de las demás especies de estafilococos coagulasa negativos. Coagulasa La prueba de la coagulasa es sencilla y tiene una especificidad muy alta. La prueba se puede realizar con un cultivo o en tubo y consiste en la búsqueda del factor de aglutinación. Se lleva a cabo con la administración de S. aureus a plasma de conejo con EDTA, al cabo de unas horas podrá verse la formación de un coagulo (prueba positiva). Puede usarse la https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Factor_de_aglutinaci%C3%B3n&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/wiki/EDTA aglutinación en látex y la Hemaglutinación pasiva como medio alternativo para detectar el factor de agregación. Desoxirribonucleasa (DNasa) Como se mencionó, S. aureus produce DNasa termoestable que es detectable en el medio de prueba del mismo nombre. Su uso es principalmente como confirmación diagnóstica. Catalasa Los estafilococos y los micrococos se diferencian de los estreptococos y los enterococos por esta prueba. Esta prueba detecta la presencia de enzimas-Catalasa o Peroxidasa. La prueba se realiza agregando una gota de peróxido de hidrógeno (3% vol) sobre la muestra en un portaobjetos de vidrio. Es positiva si se observa un burbujeo intenso. Entre la causa más frecuente de falsos positivos se encuentra el realizarla en un medio que contenga sangre (los eritrocitos pueden causar burbujeo) y la presencia de pseudocatalasa en algunas cepas estafilocócicas. Sensibilidad a la lisostafina Esta prueba mide la facilidad con la que los microorganismos estafilocócicos se lisan en presencia de lisostafina. Lisostafina es una endopeptidasa que rompe los puentes de entrecruzamiento de glicina en el peptidoglucano. Entre las bacterias de lisis rápida y marcada encontramos: S. aureus, S. simulans, S.cohnii y S. xylosus; y las de lisis lenta o insensibles: S. hominis, S. saprophyticus y S. haemoliticus. Oxidasa Esta prueba es rápida, se usan discos de papel filtro con tetrametil-p-fenilendiamina como reactivo y DMSO para hacer permeables a las bacterias al reactivo. La prueba se basa en que evidenciar la reacción de óxido-reducción y se torna violeta a los 30 segundos cuando es positiva. Staphylococcus aureus, y la mayoría de las especies del mismo género son oxidasa-negativos. Enzimoinmunoanálisis Estas pruebas buscan la presencia de proteínas específicas de S. aureus, la mayoría de ellas busca a la proteína A y la β-N-acetilglucosaminidasa. La sensibilidad y especificidad de este estudio, en cultivos no contaminados es cercana al 100%. https://es.wikipedia.org/wiki/L%C3%A1tex https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Catalasa_o_Peroxidasa&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocitos https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Lisostafina&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/wiki/Endopeptidasa https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S._simulans&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S.cohnii&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S._xylosus&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S._hominis&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S._saprophyticus&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=S._haemoliticus&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/wiki/DMSO https://es.wikipedia.org/wiki/Oxidasa-negativo Corynebacterium diphtheriae Características microscópicas Bacilo delgado en forma de clava, mide 1,5-5 μm de ancho y 0,5-1 μm de largo; es Gram positivo, no esporulado e inmóvil y forman en cultivos agrupaciones ramificadas con la apariencia de ideogramas chinos. Bacilo pleomorfo, no encapsulado, no formador de esporas, Catalasa +, inmóvil, se agrupan en L o V, toman formas características de letras chinas. Gram + y al teñirse con azul de metileno se pueden observar gránulos metacromáticos, no son acido-alcohol resistentes. dentro de los bacilos no esporulados C. diphtheriae es uno de los más resistentes a la luz, desecación y congelamiento. Pero son susceptibles a los desinfectantes de uso habitual. Medios de cultivo Dominio Bacteria Filo Actinobacteria Orden Actinomycetales Familia Corynebacteriaceae Género Corynebacterium Especie: C. diphtheriae Taxonomia Corynebacterium diphtheriae de un medio de Pai teñido con azul de metileno. Es característico que tengan un diámetro de 0.5 a 1 × 3 a 4 μm. Algunas de las bacterias tienen extremos en palillo de tambor (amplifi cación original × 1 000). https://es.wikipedia.org/wiki/IdeogramaSe deben inocular tanto en una placa de agar sangre enriquecido no selectivo como en un medio selectivo como el agar sangre con telurito de potasio AST, medio de cultivo de Tinsdale, agar colistina-nalidixico CNA. La identificación de sospecha de C. diphtheriae se puede realizar por la presencia de cisteinasa y la ausencia de piracinamidasa, que son dos reacciones enzimáticas que se realizan con rapidez. Es necesario incubar 48hrs, su crecimiento se mejora mediante la adición de sangre o suero en los medios. Crece en un rango de temperatura de 15 ° C-40 ° C y la temperatura óptima para su crecimiento es de 36 ° C. El pH neutro es óptimo para su crecimiento. Corynebacteria diphtheriae puede ser de naturaleza aeróbica o anaeróbica facultativa. Son organismos de rápido crecimiento. Otros medios que se pueden utilizar para su identificación son: Agar cistina-telurito; Medio utilizado para el aislamiento de Corynebacterium diphtheriae. Sobre la base de agar infusión se agrega 5% de sangre de oveja. La reducción del telurito de potasio por C. diphtheriae produce colonias negras. Agar inclinado de Loeffler; Medio de cultivo que contiene glucosa y suero, Agar Tinsdale: Contiene cistina y telurito. Se manifiestan en colonias negras con halo marrón. Pruebas bioquímicas Prueba de Pirazinamidasa. Negativa Prueba de producción de Ureasa: Negativa Prueba de reducción de Nitratos: Positiva Prueba de fermentación de carbohidratos: positiva (glucosa y maltosa), Negativa (sacarosa) Listeria monocytogenes Características microscópicas Listeria crece bien en medios como agar sangre de cordero al 5% en el cual muestra la pequeña zona característica de hemólisis alrededor de las colonias y por debajo de las mismas. El microorganismo es un anaerobio facultativo y produce catalasa, hidrólisis de esculina y es móvil. Las colonias son suaves, ligeramente convexas, con bordes regulares, traslúcidos y una pequeña zona de β hemólisis. Con transiluminación oblicua podemos apreciar un color azul. En hemocultivo, encontramos bacilos pequeños, rectos (unos pocos pueden ser curvados) con extremos redondeados. Se presentan aislados, en grupos en V o en L, en empalizada, y algunas veces en cortas cadenas. La Listeria aislada de muestras clínicas a menudo muestran variación en la longitud y también por lo general en la forma. Es característico que tengan un diámetro de 0.4 a 0.5 μm y una longitud de 0.5 a 2 μm. Dominio Bacteria Filo Firmicutes Clase Bacilli Orden Bacillales Familia Lactobacilaceae Género Listeria Especie: L. monocytogenes Taxonomía Tinción de Gram del bacilo grampositivo Listeria monocytogenes en un hemocultivo. Amplificación original × 1 000. Los eritrocitos están presentes en el fondo. (Cortesía de H. Tran.) Medios de cultivo L. monocytogenes crece con facilidad en medios nutritivos como TSA y agar sangre. La temperatura optima de crecimiento es entre 30 y 37ºC, pero su crecimiento es posible en temperaturas entre 1 y 45ºC. Es capaz de crecer y sobrevivir en una amplia gama de condiciones ambientales. Puede sobrevivir a temperaturas de refrigerador (4°C), bajo condiciones de pH bajo y condiciones de alto contenido de sal. Por tanto, puede superar la preservación de alimentos y las barreras de seguridad de manera que es un microorganismo patógeno importante transmitido en los alimentos. Pruebas Bioquímicas Reacción de catalasa: Positiva Oxidasa: Negativa Ureasa: Negativa Prueba Indol: Negativa Hidrólisis de esculina: positiva, que puede demostrarse en el agar bilis esculina, dado que es capaz de crecer en bilis al 40%, Fermentación de glucosa y maltosa, motilidad (+) a 25 °C que en medio semisólido se observa en forma de paraguas cercano a la superficie. La prueba de CAMP es (+). Prueba de reducción nitratos a nitritos: se observará la formación anillo rojo, reacción positiva. Si no se forma anillo rojo-violeta agregar polvos de zinc y mantener durante una hora, si se forma anillo rojo-violeta, la reacción es negativa y si no se forma color la reacción es positiva. Listeria monocytogenes no reduce nitratos a nitritos. Fermentación de carbohidratos: en la prueba de esculina se observa una pigmentación inequívoca, puede omitir la prueba de esculina en caldo. Listeria monocytogenes es manitol negativo, ramnosa positiva y xilosa negativa. Listeria monocytogenes tiene un patrón de susceptibilidad estable, generalmente es sensible a penicilina, ampicilina, amino-glucósidos, eritromicina, rifampicina, tetraciclina, cotrimoxazol, vancomicina e imipenemcilastatina. CLOSTRIDIUM BOTULINUM Características Microscópicas Las esporas de C. Botolinum tienen un diámetro mayor al de los bastoncillos en los cuales se forman. Son móviles y poseen flagelos periticos. Pueden producir colonias grandes, elevadas con bordes enteros, producen hemolisis en agar sangre. Las colonias pueden presentar un aspecto pleomórfico dando la impresión de un cultivo mixto. En los medios solidos, las colonias a menudo son de color blanco grisáceo con un borde irregular. Medios de cultivo C. Botolinum, puede diferenciarse en grupos según sus características de cultivo, bioquímicas y fisiológicas. Todos los cultivos del tipo A y algunos del tipo B y F son poteoliticos, cuando se cultivan en un medio con clara de huevo coagulada o carne. Todos los de características del metabolismo de los carbohidratos que los diferencian de los grupos no-proteoliticos de los tipos E y D. Dominio Bacteria División: Firmicutes Clase: Clostridia Orden: Clostridiales Familia: Clostridiaceae Género: Clostridium Especie: C. botulinum Tinción de gram. Microscopía óptica. Aumentos 1000x. Podemos encontrar bacilos gram positivos, rectos, anchos y cortos o delgados y largos. dd La temperatura óptima para los tipos A y B es de 35-40°C y un pH mínimo de 4.8 tomando 5 minutos a 100°C para matar estos subtipos. La temperatura óptima para el tipo E es 18- 25°C y un pH mínimo de 5.0 tomando a.1minutops a 100°C para matar este subtipo. Medio carne cocida (CMM) Caldo tripticasa peptona glucosa extracto de levadura (TPGY). Medio selectivo Caldo tripticasa peptona glucosa extracto de levadura adicionado con tripsina (TPGYT). Medio selectivo Agar hígado de ternera Agar para asilamiento de C. botulinum (CBI). Agar McClung Toabe Pruebas Bioquímicas Glucosa: positiva Maltosa: positiva H2S: positiva L de Gelatina: positiva STREPTOCOCCUS PYOGENES Características microscópicas Las cepas de S. pyogenes son cocos esféricos de diámetro comprendido entre 1 y 2 µm que forman cadenas cortas en las muestras clínicas y cadenas de mayor longitud cuando crecen en medios de cultivo. Su crecimiento se ve favorecido en el agar sangre enriquecido pero se ve inhibido cuando contiene una concentración elevada de glucosa. Después de 24 horas de crecimiento se observa β-hemólisis. A las 24 horas de incubación las colonias aparecerán en forma de cúpula, de color grisaceo. Los cocos individuales son esféricos u ovoides y están dispuestos en cadenas. Los cocos se dividen en un plano perpendicular al eje longitudinal de la cadena. Los miembros de la cadena a menudo tienen un aspecto diplococico llamativo y esporádicamente se observan formas semejantes a un bastón. Las longitudes de las cadenas son muy variables y están condicionadas por factores ambientales. Dominio Bacteria Filo: Firmicutes Clase: Bacilli Orden: Lactobacillales Familia: Streptococcaceae Género: Streptococcus Especie: S. pyogenes Taxonomía Estreptococos hemolíticos β del grupo A (Streptococcus pyogenes) después del cultivo durantela noche en una placa de 10 cm con agar sangre de carnero al 5%. Las colonias blancas pequeñas (0.5 a 1 mm de diámetro) están rodeadas por zonas difusas de hemólisis β de 7 a 10 mm de diámetro. (Cortesía de H. Reyes.) https://es.wikipedia.org/wiki/Coco_(bacteria) https://es.wikipedia.org/wiki/Esfera https://es.wikipedia.org/wiki/Di%C3%A1metro https://es.wikipedia.org/wiki/Micr%C3%B3metro_(unidad_de_longitud) https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_sangre https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa Medios de Cultivo S. pyogenes en agar sangre presenta colonias beta hemolíticas circulares, translúcidas o transparentes y de superficie lisa o mate, con borde entero y un diámetro variable de 0.3 a 0.5 mm. El tamaño de la zona de hemólisis es de dos a tres veces el diámetro de la colonia, en algunas cepas fue de menor tamaño. El medio de cultivo agar sangre no debe de contener alto porcentaje de carbohidratos por ejemplo dextrosa ya que la bacteria lo fermentaría produciendo ácidos que inactiva a la estreptolisina S (hemolítica), el medio de cultivo que se emplee debe de estar en un pH neutro entre 6.8 y 7.5. Pruebas Bioquímicas PyR: positivo Bacitracina: S (sensible) Catalasa: negativa LAP: positivo Hidrolisis de la esculina: positivo Crecimiento en NaCL al 6.5%: negativo Vancomicin: S (sensible) PSEUDOMONAS AERUGINOSA (gram negativa) Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gamma Proteobacteria Orden: Pseudomonadales Familia: Pseudomonadaceae Género: Pseudomonas Especie: P. aeruginosa Características microscópicas P. aeruginosa es móvil, tiene forma de bastón, mide casi 0.6 × 2 μm. Es gramnegativo y muestra una disposición en bacterias individuales, en pares y a veces en cadenas cortas móviles, procedentes de un cultivo con olor a frutas y fluorescencia bajo luz ultravioleta. Morfología típica de las colonias. A menudo generan microorganismos de P. aeruginosa que forman colonias mucoides como resultado de la producción excesiva de alginato, un exopolisacárido. Medios de cultivo Crece con facilidad en los medios de cultivo, donde forma colonias pigmentadas de color verdoso, hemolíticas. Entre los pigmentos producidos por la Ps. Aeruginosa están la piocianica, una substancia azul, soluble en agua y en cloroformo, y la fluoresceína, una substancia verdosa, fluorescente, soluble en agua, pero no en cloroformo. La Ps. Aeruginosa es aerobia y posee citocromo - oxidasa. Taxonomía Pseudomonas aeruginosa. Detalle ampliado de las colonias, grandes, β hemolíticas y con brillo metálico. Fuente: ASM MicrobeLibrary.org © https://es.wikipedia.org/wiki/Dominio_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Gamma_Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonadales https://es.wikipedia.org/wiki/Familia_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonadaceae https://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonas https://es.wikipedia.org/wiki/Especie Cultivo en placa de agar sangre en atmosfera aeróbica. A las 24-48 horas crecen en medios convencionales (AS, ACH, Mac Conkey), con una temperatura óptima de crecimiento entre 30ºC y 37ºC. De las especies del género Pseudomonas, solo P. aeruginosa crece a 42ºC. Pruebas Bioquímicas Es oxidasa positiva. No fermenta carbohidratos, pero muchas cepas oxidan glucosa. La identificación suele basarse en la morfología de la colonia, la positividad para oxidasa, la presencia de pigmentos característicos y su multiplicación a una temperatura de 42°C. Para la diferenciación de P. aeruginosa de otras pseudomonas basándose en la actividad bioquímica son necesarios análisis con un gran grupo de sustratos Otras pruebas bioquímicas: Coagulasa: positivo Catalasa: positivo Nitrato: positivo Brucella abortus Características Microscópicas Son Gram-negativas en forma de vara de bacterias que no tienen flagelos o pili. Al microscopio electrónico se distinguen, de fuera hacia dentro: la envoltura celular, integrada por la membrana externa, el espacio periplásmico y la membrana citoplasmática que rodea al citoplasma. son cocobacilos de 0,5 a 0,7 µm de diámetro por 0.6-1.5 µm de largo. Medios de cultivo La bacteria crece lentamente, necesitando un mínimo de 3 días hasta 2 semanas. La temperatura óptima de incubación del cultivo es de 35ºC. Son aerobios estrictos, aunque algunas cepas requieren suplemento de CO2. puesto que son organismos de crecimiento lento, pero sobre las máquinas automáticas modernas, los cultivos a menudo pueden ser positivos en siete días. Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Proteobacteria alfa Orden: Rhizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella Taxonomía Cultivo en agar sangre de caballo https://es.wikipedia.org/wiki/Cocobacilo https://es.wikipedia.org/wiki/Dominio_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Rhizobiales https://es.wikipedia.org/wiki/Familia_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Brucellaceae https://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) Pruebas Bioquímicas Reacción de; Catalasa: positivo Oxidasa: positivo Ureasa: positivo Reacción de Indol: negativo Vogues Proskauer: negativo Neisseria gonorrhoeae Características Microscópicas N. gonorrhoeae es un diplococo Gram negativo de tamaño que fluctúa entre 0,6 y 1 um de diámetro, siendo el tamaño promedio de 0,8 µm de diámetro. Los microorganismos se visualizan al microscopio de luz como diplococos intracelulares, dentro de los neutrófilos. Los gonococos son bacterias frágiles, de crecimiento lento y con requerimientos nutricionales estrictos. Las colonias son pequeñas, brillantes y elevadas. Medios de cultivo Uno de los medios de cultivo empleado con mayor frecuencia es el Thayer Martin modificado, suplementado con agar chocolate y que contiene vancomicina (3 µg/ml), colistina (7,5 µg/ml), y nistatina (12,5 µg/ml) y lactato de trimetropima (5 µg/ml). Estas Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Beta Proteobacteria Orden: Neisseriales Familia: Neisseriaceae Género: Neisseria Especie: N. gonorrhoeae Taxonomía Detalle ampliado de las colonias de N. gonorrhoeae. A las 24 horas son pequeñas, brillantes y elevadas. A partir de las 48 horas presentan una coloración marrón debida a la autolisis de las células. Fuente: CDC © https://es.wikipedia.org/wiki/Neutr%C3%B3filo https://es.wikipedia.org/wiki/Vancomicina https://es.wikipedia.org/wiki/Colistina https://es.wikipedia.org/wiki/Nistatina https://es.wikipedia.org/wiki/Dominio_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Beta_Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Neisseriales https://es.wikipedia.org/wiki/Familia_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Neisseriaceae https://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Neisseria https://es.wikipedia.org/wiki/Especie sustancias antimicrobianas se agregan para inhibir aún máslos microorganismos que pudiesen crecer como contaminantes del medio. Los cultivos se incuban a 35 °C en una atmósfera de 3-5% de CO2. El nivel de CO2 es importante porque concentraciones menores pueden no permitir el crecimiento del microorganismo, en tanto que concentraciones mayores inhiben el crecimiento de líneas de siembra, para de esta manera, facilitar la detección de colonias de N. gonorrhoeae y de Neisseria meningitidis. Pruebas Bioquímicas Oxidasa: positivo Glucosa: positivo Catalasa: positivo Superoxol: positivo TM: positivo AN: negativo Pigmento: negativo TSI: SD DNasa: ND Haemophilus influenzae Características Microscópicas Es un pequeño bacilo gram negativo inmóvil, que no forma esporas, con requerimientos nutricionales exigentes, crece aeróbica o anaeróbicamente. Mide 0,2-0,3 por 0,5-0,8 μm, inmóvil, no formador de esporas. Las colonias tienen una forma convexa, circular, granular o transparente, levemente opaca; de 0,5-0,8 mm a las 24 h y 1-1,5 mm a las 48 h. Las colonias de las cepas capsuladas son de mayor tamaño y de aspecto más mucoide, alcanzado los 3 mm. Presenta un olor característico. Medios de cultivo Los cultivos bacterianos de H. influenzae se realizan en placas de agar, de preferencia agar chocolate, con adición de X (Hematina) y V (NAD), a 37 ° C en un incubador con CO2- enriquecido. El crecimiento de agar sangre es sólo un fenómeno satélite alrededor de otras bacterias. Las colonias de H. influenzae aparecen como colonias convexas, lisas, pálidas, grises o transparentes. En las pruebas serológicas es necesario distinguir el polisacárido Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Pasteurellales Familia: Pasteurellaceae Género: Haemophilus Especie: H. influenzae Taxonomía H. influenzae sobre una placa de agar-sangre. https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_chocolate https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_chocolate https://es.wikipedia.org/wiki/Dominio_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Pasteurellaceae https://es.wikipedia.org/wiki/Familia_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Pasteurellaceae https://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Haemophilus https://es.wikipedia.org/wiki/Especie capsular y diferenciar entre la cepa b de H. influenzae y las cepas no encapsuladas. Aunque muy específicos, los cultivos bacterianos de H. influenzae carecen de la sensibilidad. La H. influenzae crece en la zona hemolítica de Staphylococcus aureus en placas de agar sangre pues la hemólisis de las células de S. aureus libera nutrientes vitales para su crecimiento. Su pH óptimo de 7,6 en condiciones aeróbicas o con 5% CO2. Pruebas Bioquímicas Se puede realizar biotipificación por la producción de indol, ureasa y actividad de la ornitina descarboxilasa. Fermenta glucosa y deoxiribosa, con producción de ácido, pero no gas, también lo hace con xilosa, pero no sucrosa, lactosa o manitol. Son catalasa y oxidasa positiva. Posee fosfatasa alcalina y son H2S y esterasa negativa. Todas las cepas son α (PNPG) y β glucosidasa positiva, así como β galactosidasa (ONPG) positiva Hemolisis: negativo Lactosa: negativo Manosa: negativo Catalasa: positivo Oxidasa: positivo https://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus Escherichia coli Características Microscópicas Bacilo Gram negativo, no forma esporas, móviles (flagelos perítricos). Miden 0.5 μ de ancho por 3 μ de largo. Las colonias de esta bacteria varían según el medio de cultivo donde crezcan, en este caso el medio de cultivo es Agar Eosina Azul de Metlileno abreviado EMB, podemos observar en la imagen que las colonias tienen en demasía una coloración verde-metalico, lo cual es característico de E. coli, aunque hay otras bacterias que logran producir este color es muy tenue y escaso. Se logran ver colonias aisladas, son colonias medianas, circulares, convexas, moradas, contorno verde-metalico, bordes redondeados. Medios de Cultivo Para el aislamiento e identificación de la E. coli, se debe tomar una muestra a 37 ºC en un medio selectivo en condiciones aeróbicas, ya sea en agar MacConkey o eosina azul de Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Enterobacteriales Familia: Enterobacteriaceae Género: Escherichia Especie: E. coli Taxonomía E. Coli, bacteria habitante del tracto intestinal. https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_MacConkey https://es.wikipedia.org/wiki/Eosina_azul_de_metileno https://es.wikipedia.org/wiki/Dominio_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Filo https://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteria https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriales https://es.wikipedia.org/wiki/Familia_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriaceae https://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Escherichia https://es.wikipedia.org/wiki/Especie metileno. Además de la temperatura, el pH y la actividad de agua pueden influir en la proliferación de E. coli. Las condiciones óptimas de desarrollo para estos parámetros son de 7,2 y 0,99 respectivamente. El desarrollo de E. coli se detiene a pH extremos (inferiores a 3,8, o superiores a 9,5), y valores de aw inferiores a 0,94. Por ello, el grado de acidez de un alimento puede constituir un factor de protección y garantizar su seguridad. Color verde metálico en las colonias característico de Escherichia coli en medio de cultivo. EMB En agar Mac Conkey. Se logran ver colonias aisladas, son colonias medianas, circulares, convexas, bordes redondeados, lactosa positiva lo que les da coloración rosada. Pruebas Bioquímicas Prueba gelatinasa: negativo Reduccion de nitratos: negativo Urea: negativo TSI: A/A Indol: positivo H2S: negativo Movilidad: positivo https://es.wikipedia.org/wiki/Eosina_azul_de_metileno