Aula 12 Staphylococcus y Enterobacterias (1)

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COCOS GRAM POSITIVOS
Aerobios y anaerobios facultativos
Familia Streptococcaceae
- Género Streptococcus
Familia Micrococcaceae
- Género Staphylococcus 
COCOS GRAM NEGATIVOS
Familia Neisseriaceae
- Género Neisseria
El género Staphylococcus es el más importante de la familia Micrococcaceae por ser patógeno tanto para el humano como para los animales.
Los estafilococos habitan naturalmente en la piel y en las mucosas de los mamíferos, teniendo una agresividad latente, que se manifiesta rápidamente cuando el microorganismo invaden el organismo.
Es el microorganismo que ha persistido hasta ahora como un agente patógeno de mayor importancia médica y estando como microorganismo causal de las infecciones nosocomiales.
Género Staphylococcus
Se describen 3 especies principales:
Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus saprophyticus.
Staphylococcus aureus, también llamado estafilococo patógeno o dorado, es el más patógeno de su género.
Género Staphylococcus
COLORACIÓN DE GRAM
Son cocos gram positivos agrupadas en racimos de uva irregulares, inmóviles.
CULTIVO
El cultivo de todos los miembros del género Staphylococcus es sumamente fácil. Para el efecto se usan medios de cultivo comunes en los que crecen exuberantemente en 24 horas produciendo enturbiamiento uniforme en los medios.
El Sthaphylococcus aureus produce habitualmente pigmento amarillo dorado.
Género Staphylococcus
Staphylococcus aureus
INFECCIONES PURULENTAS
Microbiología práctica 
Son muchos los microorganismos que producen infecciones purulentas.
El pus, motivo de estudio bacteriológico puede hallarse en un absceso abierto, como una herida supurante, una fistula o en un absceso cerrado.
El pus constituido por una mezcla de espesa de piocitos, leucocitos, fibrina, partículas grasa y principalmente microorganismos.
HERIDAS Y ABSCESOS
Acumulación de pus
Enrojecimiento, dolor e hinchazón
Asociadas con infecciones oculares (conjuntivitis purulenta), cutáneas (foliculitis, forunculos, celulitis), respiratoria (pericarditis), articulaciones (osteomelitis) entre otros. 
Infecciones purulentas
CONTAMINANTES
Estreptococos alfa-hemolíticos
Estafilococos coagulasa negativas
PATOGENOS
Staphylococcus aureus
Estreptococos beta-hemolíticos
Enterococos
Muestra: Secreción Purulenta
Recolección de muestras:
Absceso abierto, heridas, fistula: hisopado
Absceso cerrado: aspirado
Medio de transporte: Stuart
Infecciones purulentas
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA
Examen en fresco
Coloración de gram
Cultivo: Siembra en medio de aislamiento: 
Rutinariamente en Agar sangre, Agar Chocolate, Agar Mac Conkey 
Pruebas bioquímicas: Identificación bacteriana 
En casos de presencia de cocos gram positivos realizar las pruebas de:
Catalasa
Coagulasa (prueba de confirmación de especie del género Staphylococcus)
RESULTADOS en el Laboratorio
Examen en fresco: Presencia de leucocitos, hematíes, bacterias.
Coloración de gram: Cocos gram Positivos
Cultivo: Crecimiento de colonias amarillas, doradas.
Pruebas bioquímicas:
Catalasa: +
Coagulasa: +
- Cultivo: Se aísla Staphylococcus aureus
BACILOS GRAM NEGATIVOS
BACILOS GRAM NEGATIVOS
Familia Enterobacteriaceae
La familia Enterobacteriaceae está constituída por Bacilos Gram negativos biologicamente relacionados entre sí, habitantes del intestino del humano.
Entre sus miembros se encuentran agentes patógenos obligados y oportunistas.
En medios de cultivo comunes, las características coloniales son muy parecidas en todos los miembros de esta familia, por lo que debe recurrirse a los medios selectivos para detectar diferencias.
ENTEROBACTERIAS
Género Escherichia
Género Proteus
Género Salmonella
Género Shigella
El género Escherichia comprende la especie más frecuente en el intestino humano, la Escherichia coli.
Son patógenos del tipo oportunistas.
COLORACIÓN DE GRAM. Son Bacilos Gram negativos.
CULTIVO. Crecen bien en medios comunes, por lo que es recomendable su aislamiento en medio selectivo como el Agar MacConkey o diferencial como el Agar CLED, las colonias en medios sólidos son habitualmente lisas. 
Pruebas bioquímicas: Observar la capacidad de los bacilos gram negativos de fermentar carbohidratos, de producir H2S y producir gas, su movilidad, determinación de enzimas con capacidad de desaminar , descarboxilar o hidrolizar, entre otros.
Género Escherichia
El género Proteus conserva solamente dos de las especies primitivas que son Proteus mirabilis y Proteus vulgaris.
COLORACIÓN DE GRAM. Son Bacilos Gram negativos.
CULTIVO. De crecimiento fácil en medios comunes, por lo que es recomendable su aislamiento en medio diferencial. Desarrollan colonias que se extienden muy rápidamente a distancia, desarrollándose en sucesivas ondas de crecimiento.
Pruebas bioquímicas: El citrato y la ureasa es producida por los Proteus. 
Género Proteus
INFECCIONES DEL 
TRACTO URINARIO
INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO
ESTUDIO: UROCULTIVO
TOMA DE MUESTRA: ORINA
FORMAS DE RECOLECCIÓN
INDICACIONES PREVIAS
INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO
ITU 
INFECCIONES DEL 
TRACTO URINARIO
VIAS URNARIAS 
ALTAS
(ASCENDENTE)
VIAS URNARIAS 
BAJAS
(DESCENDENTE)
Riñones 		Pielonefritis
Pelvis renal		Sx Uretral 				agudo
Uréteres		
Vejiga		 Cistitis 		 
Uretra		Uretritis
INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO
SIGNOS SINTOMAS
INFECCIONES DE LAS VIAS URINARIAS ALTAS
	- Dolor lumbar
	- Fiebre
	- Nauseas 
	- Vómitos
	- Posibilidad de bacteriemia
INFECCIONES DE LAS VIAS URINARIAS BAJAS
	- Disuria
	- Orina turbia y con mal olor
	- Hematuria recurrente
	- Casos asintomáticos
INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO
FLORA COMENSAL
(contaminantes)
Estafilococos coagulasa negativas
Lactobacillus sp
Estreptococos alfa-hemoliticos
PATOGENOS POTENCIALES
Escherichia coli
Proteus mirabilis
Serratia
Klebsiella sp
Pseudomonas aeruginosa
Neisseria gonorrhoeae
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ETIOLOGÍA
Los gérmenes aislados con más frecuencia son Bacilos Gram Negativos.
80 – 95% E. coli en infecciones en la comunidad y 50 – 80% de las hospitalarias.
En las hospitalarias: Pseudomonas, Serratia, Acinetobacter, Klebsiella 
Procesamiento en el laboratorio:
Examen en fresco: Sedimento urinario
Coloración de Gram: Se observan Bacilos gram negativos
Cultivo: 
Siembra para aislamiento en agar Agar Mac Conkey medio selectivo para BGN, o de preferencia en un medio diferencial exclusivo para crecimiento de patógenos urinarios, el Agar CLED (Cistina Lactosa Electrolitos Deficiente) en donde se determinara las bacterias fermentadoras de la lactosa.
Siembra para Recuento de colonias en Agar sangre. Incubar por 48hs.
Pruebas bioquímicas. A las 24 horas realizar las pruebas de TSI, INDOL, MIO, Urea, Lisina, Citrato, Ornitina. 
Antibiograma
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Resultados en el laboratorio
EXAMEN EN FRESCO (Sedimento): Presencia de leucocitos (respuesta inflamatoria), hematíes, células epiteliales, bacterias.
COLORACIÓN DE GRAM: Bacilos gram Negativos
CULTIVO
En Agar MacConkey y Agar CLED para observar el aislamiento y la fermentación de lactosa de la bacteria.
En Agar sangre calcular el Recuento de colonias	 n x f = UFC/ml
Los resultados observados en el recuento de colonias puede clasificarse de la siguiente forma:
	- Menor a 104 (10.000) UFC/ml: probable contaminación y 											 ausencia de infección
	- Mayor a 105 (100.000) UFC/ml: sugestivo a infección urinaria
Las pruebas bioquímicas y el antibiograma se realizarán luego de considerar el recuento de colonias.:
Pruebas bioquímicas:
	TSI: Acido/Acido Gas (+)			
	H2S (-) 	
	Indol: (+)					
	Movilidad (SIM-MIO): (+)		
	Ornitina: +/-									
	Citrato: (-)
	Urea: (-)
		LDA (Lisina desaminasa): (-) 			
	
Cultivo: Se aisla Escherichia coli.
Antibiograma
Las pruebas bioquímicas y el antibiograma se realizarán luego de considerar el recuento de colonias.:
Pruebas bioquímicas:
	TSI: 	Alcalino/Acido Gas (+)		
	H2S (+) 	
	Indol: (-)							
	Movilidad (SIM-MIO): (+)Ornitina: (+)						
	Citrato: (+) 		
		Urea: (+) 
	LDA (Lisina desaminasa): (+)
				
Cultivo: Se aisla Proteus mirabilis.
Antibiograma
Agar MacConkey
La Escherichia coli bacterias fermentadoras de lactosa  produce colonias rosadas y el Proteus sp bacterias no fermemtadoras de lactosa colonias transparentes.
Agar CLED
La Escherichia coli fermentadores de lactosa producen colonias amarillas;
Proteus sp las NO fermentadoras de lactosa dan colonias azules.
E. coli en Agar sangre para Recuento de colonias