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COCOS GRAM POSITIVOS Aerobios y anaerobios facultativos Familia Streptococcaceae - Género Streptococcus Familia Micrococcaceae - Género Staphylococcus COCOS GRAM NEGATIVOS Familia Neisseriaceae - Género Neisseria Estreptococo del grupo B Streptococcus agalactiae Los estreptococos del grupo B constituyen una causa importante de infección en los periodos neonatal y perinatal; siendo responsable en muchos casos de abortos, además, han sido señalados en diversos procesos infecciosos en niños recién nacidos. Las mujeres son colonizadas por el microorganismo en la vagina y el recto, se observa colonización vaginal en el 10-35% de las embarazadas. Género Streptococcus Cocos Gram negativos, en pares, que adoptan la forma de granos de café. Son diplococos inmóviles que se encuentran adosados por sus lados aplanados. Neisseria patogenas: N. gonorrhoeae y N. meningitidis Género Neisseria Neisseria gonorrhoeae COLORACIÓN DE GRAM En los materiales purulentos agudos se presentan como diplococos Gram negativos intracelulares, los que por su gran abundancia llenan el citoplasma de neutrófilos, existiendo también un buen número de microorganismos libres. Género Neisseria Neisseria gonorrhoeae CULTIVO El Genero Neisseria son de cultivo algo difícil, aerobios. Las especies patógenas necesitan medios especiales. Necesitan para su crecimiento medios de cultivos que contengan proteínas animales y presencia de CO2. El medio de cultivo selectivo utilizado es el Thayer-Martin. Género Neisseria Neisseria gonorrhoeae En los humanos es el agente de la enfermedad conocida con el nombre de gonorrea o blenorragia. Los cuadros determinados por N. gonorrhoeae son los siguientes: Infección aguda de las vías urinarias. En el hombre se manifiesta como una uretritis aguda, que aparece entre los 5 y 8 días después del contacto sexual infectante. Conjuntivitis del recién nacido. Se realiza por contagio en el canal materno durante el nacimiento. Puede ocasionar ceguera. Faringitis. Se produce por el contagio orogenital. Rectitis. Es producido por el contacto genito-rectal. Género Neisseria INFECCIONES DEL TRACTO GENITAL Infecciones y agentes etiológicos del tracto genital Endógenas (microbiota): Candidiasis Vaginosis bacteriana debida al complejo GAMM Vaginitis bacteriana por Streptococcus agalactiae (St. del grupo B) Exógenas Enfermedades de transmisión sexual (ETS): Clamidia Gonorrea Tricomoniasis Infecciones y agentes etiológicos del tracto genital Toma de muestra: SECRECIÓN VAGINAL SECRECIÓN URETRAL Signos y sintomas compatibles: Mujeres: Exudado vaginal homogéneo grisáceo (flujo vaginal) abundantes, Sensación de quemadura Irritación Mal olor Prurito Disuria Dolor en región pelvica Hombres: Síntomas inespecíficos, discreto prurito, molestias en la micción Que estudio solicitar? Estudio de rutina: (sin Cultivo) BACOVA (Balance del Contenido Vaginal) Estudio especifico: - CULTIVO DE SECRECIÓN VAGINAL Investigación de: Lactobacillus, Gardnerella vaginalis, Mobiluncus sp (complejo GAMM), Esporos micóticos, Trichomonas vaginalis Investigación de: Streptococcus agalactiae Neisseria gonorrhoeae Lactobacillus spp Bacilo inmóvil, no encapsulado, mediano recto, uniformemente gram-positivo, puede formar cadenas a veces corto y cocobacilar. Flora normal vaginal. Gardnerella Vaginalis Bacilo inmóvil, no encapsulado, corto, pared gram-positivo, además pueden ser coco-bacilo y se tiñe de gram negativo o gram-variable. Mobiluncus sp Bacilo delgados gram-variable, anaerobios estrictos, móviles y curvados, no esporulados, incurvados en forma de coma, semejante a vibrios. Lactobacillus spp Gardnerella Vaginalis Mobiluncus sp Vaginosis Bacteriana Es una patología endógena fruto del desequilibrio que se produce en la flora vaginal. Es un síndrome clínico de origen polimicrobiana que resulta de la sustitución de la flora vaginal normal Lactobacillus productora de HO2 por altas concentración de Gardnerella Vaginalis, bacterias anaerobias, Mobiluncus sp y Micoplasma hominis. Conocido por complejo GAMM. 13 Gardnerella vaginalis Procesamiento en el laboratorio: Examen en fresco: Presencia de leucocitos, hematíes, células epiteliales, esporos micóticos, Trichomonas vaginalis. Se caracteriza por la presencia de células clave (clue cells). Prueba de aminas: se agrega KOH a la muestra y desprende olor a pescado. 14 Gardnerella vaginalis Procesamiento en el laboratorio: Coloración de GRAM: Presencia de células clave (células epiteliales desprendidas y cubiertas por bacilos gram positivos delgados y cocobacilos gram variable). 15 Gardnerella vaginalis Procesamiento en el laboratorio: CULTIVO. Proliferan en agar sangre a 37ºC con o sin CO2. Son anaerobios facultativos y exigen medios especiales para su cultivo. 16 Vaginitis bacteriana Producida por Streptococcus del grupo B. No es una enfermedad de transmisión sexual. Factor de riesgo en embarazadas. Puede provocar aborto. Principal causa de morbilidad y mortalidad en neonatos. Se realiza la busqueda en todos los casos de parto prematuro, ruptura de membrana. Vaginitis bacteriana Toma de muestra: Secreción vaginal El protocolo de cultivos recomendado por el CDC y FDA comprende la recolección de muestras de hisopados vaginales en embarazadas durante las semanas 35 y 37 de gestación. Medio de transporte Stuart (sin refrigerar). Procesamiento y Resultados en el laboratorio: Examen en fresco: Presencia de leucocitos, hematies, células epiteliales, esporos micóticos, Trichomonas vaginalis. Coloración de Gram: Se observan Cocos gram positivos Cultivo: - Siembra en agar sangre para búsqueda de estreptococo beta-hemolíticos. Se incuban por 48 hs. A las 24 hs de incubación se observa colonias beta-hemolíticas y se procede a realizar prueba de catalasa y realizar una estría de cultivo de Reacción de CAMP. La Prueba de CAMP (Prueba de Christian Atkins Munch Petersen) consiste en el agrandamiento de la zona de hemólisis de una beta-lisina de Staphylococcus aureus, debido a la acción del factor CAMP secretado por el estreptococo del grupo B. 19 Procesamiento y Resultados en el laboratorio: Cultivo: Colonias beta-hemolíticas Catalasa (-) (Negativa) Prueba de CAMP: Positivo Microorganismo aislado: Streptococcus agalactiae 21 Gonorrea Es una enfermedad de transmisión sexual. Es causada por la bacteria gonococo Neisseria gonorrhoeae y adquirida por vía oral, anal o vaginal. La bacteria responsable se localiza en el cuello del útero o en la uretra en las mujeres, y uretra en los hombres. Procesamiento y Resultados en el laboratorio: Examen en fresco: Presencia de leucocitos, hematies, células epiteliales, esporos micóticos, Trichomonas vaginalis. Coloración de Gram: Se observan diplococos gram negativos Cultivo: Siembra en agar Thayer Martin (selectivo). Las colonias se forman mejor a las 48 horas de la siembra, siendo lisas mucoides, incoloras, o algunos casos blanco-grisáceas. Pruebas Bioquímicas: Se realiza la Prueba de Oxidasa, las colonias desarrollan un color púrpura, en contacto con una solución de tetrametil para-fenilendiamina. Oxidasa (+) (Positivo). N. gonorrhoeae fermenta solamente glucosa. (Las pruebas de fermentación de azúcares establecen las diferencias entre las dos especies patógenas). 23 Clamidia Es causada por la bacteria llamada Chlamydia trachomatis. Es transmitida por relaciones sexuales, también de madre a hijo durante el parto vaginal. Causa lesiones irreversibles en los órganos genitales. Presenta sintomas 1 a 3 semanas después del contagio. Clamidia Otro mecanismo de contagio, como el conjuntival. Es una enfermedad que tiene distribución mundial. La exposición permanente de la conjuntiva lleva a la contaminación y supuración crónica de la misma por microorganismos comunes, causando la enfermedad Tracoma. La Conjuntivitis de inclusión el cuadro puede verse en niños recién nacidos, caracterizándose por conjuntivitis papilar. Clamidia Diagnóstico laboratorial: Para el diagnóstico los métodos directos tales como los frotis coloreados con Giemsa y la inoculación en ratones son poco utilizados. Más utilizados son los procedimientos indirectos entre los que se destacan la inmunofluorescencia directa (IFD) e inmunofluorescencia indirecta (IFI) y el ELISA. Cultivo muy poco utilizado. No crecen en medios sin células vivas. Infecciones causada por otros agentes TRICOMONIASIS - La produce un protozoo Trichomonas vaginalis. Diagnóstico laboratorial: - Examen en fresco: se detecta Trichomonas vaginalis (por su gran movilidad) CANDIDIASIS Candida spp es un tipo común de hongo que pertenece a la flora (no patógena), pero en desequilibrios en ciertas circunstancias produce infecciones. Candida albicans, la mas frecuente causante de la Candidiasis vaginal. Diagnóstico laboratorial: Examen directo Frotis (GRAM): se observan levaduras y/o micelios Cultivo: se siembra en medio Saboraud, a las 48 o 72 hs aparecen colonias blancas.
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