1 -BIOSEGURIDAD Y BUENAS PRACTICAS

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LABORATORIO BIOLOGÍA I 
Práctica 1 
BIOSEGURIDAD Y BUENAS PRÁCTICAS DE 
LABORATORIO 
(L. Spencer, E. Zacarías, M. Pérez, V. Sandoya) 
1. INTRODUCCIÓN 
El personal que labora dentro de cualquier área de trabajo está expuesto a 
numerosos riesgos potenciales, ya sea por un accidente o una enfermedad laboral. Por 
muchos años, la OHSA (Occupational Health and Safety Administration) ha promulgado 
y publicado normativas para prevenir y/o disminuir los riesgos en todas las actividades 
laborales. Estos protocolos se encuentran resumidos en señalética especializada, 
establecida según las actividades que se realicen dentro de un lugar de trabajo. 
Los laboratorios de Biología, ya sean de investigación, clínicos o de docencia, no 
están exentos de cumplir con esta normativa de seguridad y salud ocupacional, ya que la 
mayoría de sus actividades se desarrollan en un ambiente que presenta algún tipo de 
riesgo para la integridad física de docentes, alumnos, funcionarios y usuarios en general. 
La señalética especializada básica y obligada que debe incluirse dentro de un laboratorio, 
según la normativa OHSA, se encuentra resumida en el Anexo 1. 
 Adicional a esta normativa, todos los laboratorios biológicos necesariamente deben 
implementar un conjunto de medidas y protocolos de BIOSEGURIDAD dentro de estas 
áreas de trabajo. El enfoque principal de bioseguridad está relacionado con “la 
contención de agentes biológicos potencialmente nocivos”, objetivo establecido por el 
Centro de Control y Prevención de Enfermedades de USA, orientado a facilitar los 
métodos seguros para manejar adecuadamente material biológico en el laboratorio, y 
prevenir la exposición a potenciales riesgos biológicos. 
Los protocolos para bioseguridad se basan en los siguientes principios fundamentales: 
a.- Universalidad.- Todas las áreas o departamentos de una institución deben cumplir con 
las medidas de bioseguridad. El personal debe seguir los protocolos estándares 
rutinariamente para evitar accidentes. 
b.- Uso de barreras. Evitar la exposición directa a todo tipo de muestras potencialmente 
contaminantes (sangre u otros fluidos orgánicos), a través del uso de materiales, equipos 
o barreras adecuadas que se interpongan al contacto con las mismas. 
c.- Medios de eliminación del material contaminado. Utilizar dispositivos y 
procedimientos para eliminar muestras biológicas sin que signifiquen un riesgo para todo 
el personal. 
d.- Evaluación de riesgos. El personal de laboratorio debe realizar una evaluación de 
posible ocurrencia de daños, heridas o infecciones en el área, por presencia de agentes de 
riesgo, el uso del equipamiento, insumos, etc. 
 
 
Basados en estos principios de bioseguridad, y según las actividades que se 
realicen dentro de los laboratorios biológicos, existen cuatro niveles de bioseguridad, con 
diferentes normas y protocolos para proteger al personal, al medio ambiente y a la 
comunidad en general, de agentes biológicos dañinos (Tabla 1). 
 
Tabla 1.- Niveles de bioseguridad asignados a laboratorios con diferente grado de 
riesgo para grupos humanos, prácticas y equipación básica. 
GRUPO DE 
RIESGO 
NIVEL DE 
BIOSEGURIDAD 
TIPO DE 
LABORATORIO 
PRÁCTICAS DE 
LABORATORIO 
EQUIPO DE 
SEGURIDAD 
1 
(Riesgo individual 
o poblacional 
escaso/inexistente
) 
Básico 
Nivel 1 
Enseñanza básica, 
investigación 
TMA Ninguno. Trabajo 
en mesa de 
laboratorio al 
descubierto 
2 
(Riesgo individual 
moderado. Riesgo 
poblacional bajo) 
Básico 
Nivel 2 
Servicios de 
atención primaria; 
diagnóstico, 
investigación 
TMA y ropa 
protectora; señal de 
riesgo biológico 
Trabajo en mesa 
al descubierto y 
CBS para posibles 
aerosoles 
3 
(Riesgo individual 
elevado. Riesgo 
poblacional bajo) 
Contención 
Nivel 3 
Diagnóstico 
especial; 
investigación 
Prácticas de nivel 2 
más ropa especial, 
acceso controlado 
y flujo direccional 
del aire 
CBS además de 
otros medios de 
contención 
primaria para 
todas las 
actividades 
4 
(Riesgo individual 
o poblacional 
elevado) 
Contención 
máxima 
Nivel 4 
Unidades de 
patógenos 
peligrosos 
Prácticas de nivel 3 
más cámara de 
entrada con cierre 
hermético, salida 
con ducha y 
eliminación 
especial de 
residuos 
CBS de clase III o 
trajes presurizados 
junto con CBS de 
clase II, autoclave 
de doble puerta (a 
través de la 
pared), aire 
filtrado 
TMA: técnicas microbiológicas apropiadas. CBS: cámara de seguridad biológica o flujo laminar. 
(Organización Mundial de la Salud, 2005) 
 
1.1. Normas de bioseguridad básicas para trabajar en un laboratorio 
 
1.1.1 ATUENDO 
 Usar bata o mandil para ingresar y trabajar en el laboratorio (retirarla al salir). 
 Usar guantes cuando se necesite una barrera entre microorganismo (y/o reactivos) 
y las manos (desecharlos luego de su uso). 
 Usar zapatos cerrados que cubran COMPLETAMENTE el pie. 
 Usar ropa que cubra la piel (no holgada ni suelta), sin considerar la protección 
de la bata o mandil. 
 Usar gafas de seguridad cuando se trabaje con productos químicos o calor. 
 No usar lentes de contacto en el laboratorio. 
 Usar de equipo de protección personal dependiendo de las actividades que vaya 
a realizar (i.e uso de objetos cortopunzantes, calor intenso, pesticidas, químicos o 
materiales infecciosos). 
 
 
 Trabajar con el cabello recogido. 
 No usar joyas ni artículos colgantes. 
 Lavar las manos antes y después de salir del laboratorio. 
 
1.1.2 COMPORTAMIENTO DEL PERSONAL 
 Mantenga un ambiente de orden y responsabilidad durante todas las 
actividades que se realicen dentro del laboratorio. 
 Siga todas las instrucciones escritas y verbales (dadas por el instructor). 
 Realice todas las preguntas necesarias sobre usos y procedimientos de la 
actividad que esté realizando. 
 Comparta responsabilidades si el trabajo que está realizando es grupal. 
 Al ingresar al laboratorio, no toque ningún equipo, reactivo o cualquier 
material hasta que se le facilite las respectivas indicaciones. 
 Realice solamente las actividades indicadas por el instructor (no se permite 
realizar experimentos no autorizados). 
 Revise previamente las guías y/o procedimientos antes de entrar a realizar las 
actividades. 
 Monitoreé sus actividades dentro del laboratorio. 
 Proceda con precaución dentro del laboratorio. Notifique al instructor 
inmediatamente si observa cualquier condición insegura o peligrosa. 
 NO interfiera en las actividades del resto del personal. 
 NO corra, pasee o realice actividades lúdicas dentro del laboratorio. 
 NO lleve, consuma o mantenga comida, bebida o utensilios relacionados con 
alimentos humanos. 
 NO utilice teléfono celular, y mucho menos para redes sociales, QUEDA 
ESTRICTAMENTE PROHIBIDO! 
 NO ingrese con mascotas. 
 NO fume. 
 
1.1.3 ÁREAS DE TRABAJO 
 La regla de oro en los laboratorios es siempre dejar todo en ORDEN y 
LIMPIO. 
 Trabajar en áreas bien ventiladas. 
 Las instalaciones únicamente pueden ser utilizadas por el personal debidamente 
autorizado. 
 El laboratorio debe permanecer cerrado cuando no esté siendo utilizado. 
 Mantener las salidas rutinarias y de emergencia libres de obstáculos. 
 Conocer los procedimientos básicos a seguir en caso de emergencia, rutas de 
evacuación, alarmas, y lugares asignados para protección. Así como, la ubicación 
y uso de los equipos de seguridad y emergencias (estaciones de emergencia para 
lavados de ojos, baños de emergencia, teléfonos de emergencia, extintores, 
equipos de primeros auxilios, kit contra derrames, etc). 
 
 
 NUNCA asumir que una alarma contra incendios es falsa. En caso de fuego, 
apagar el equipo que se esté usando. Usar un paño húmedo si es posible, para 
cubrir la nariz y boca. En caso de humo agacharse lo más que se pueda. Cerrar las 
puertas para ayudar a contener elfuego. NO usar elevador. NO reingresar al 
inmueble hasta que sea seguro. 
 Los extintores y llaves de agua deben estar en óptimo funcionamiento. 
 Identificar posibles peligros y riegos dentro del laboratorio y tomar las 
precauciones pertinentes. Estos pueden ser de tipo: Físico: ruidos fuertes, 
vibraciones, radiación, temperaturas extremas, superficies mojadas o inestables, 
etc. Químico: reactivos tóxicos, ácidos, corrosivos, etc. Biológico: bacterias, 
virus, hongos, parásitos, fluidos corporales, que afecten a la salud humana, etc. 
 En caso de temblor, la mayoría de lesiones ocurren por caída de escombros. Cubrir 
la cabeza y cuello con los brazos. Alejarse de vidrios y lámparas del techo que 
pudieran caer. NO usar fuego. NO usar elevador. NO correr. Cuando le sea posible 
diríjase al punto de encuentro más cercano. 
 
1.1.4 ACCIDENTES Y/O HERIDAS 
 Informar al instructor, INMEDIATAMENTE, cualquier accidente que 
ocurra, ya sea: derrame de reactivos, rotura de equipos, lesiones por corte, 
quemaduras, etc.; por más leve o ligero que parezca es importante reportarlo. 
 Notificar al instructor, de forma calmada pero rápida (y en voz alta), si usted 
o su compañero de laboratorio está herido. 
 Cualquier accidente y/o herida, por trivial que sea, debe ser tomada con mucha 
seriedad. 
 Nunca maneje vidrios rotos con las manos desnudas. Use un cepillo y un 
recogedor para limpiar los vidrios rotos y colóquelos en el recipiente especial 
designado. 
 
 
1.2. Prácticas de buen uso de equipos, materiales y reactivos 
1.2.1 EQUIPOS 
 Los manuales, instrucciones de uso y etiquetas de los equipos, deben ser leídas 
atentamente antes de su uso. Utilice equipos según las indicaciones del instructor. 
 Verificar el voltaje con el que trabaja cada equipo antes de su uso (110V o 220V). 
 En equipos conectados a reguladores de voltaje o fuentes de poder, primero se 
tiene que apagar el equipo y luego desconectar los electrodos de la unidad. 
 Los equipos de uso delicado como: centrífugas, autoclaves, tanques de gas deben 
ser utilizados por personal con experiencia. 
 En caso de chispa, humo, u olor procedente del enchufe o equipo, avisar 
inmediatamente al profesor. 
 Los procedimientos que involucren la liberación de materiales inflamables, 
volátiles o tóxicos, deben ser realizados UNICAMENTE en las campanas de 
extracción. 
 
 
 Al terminar de usar una cabina de flujo laminar, cerrar la cámara, apagar la 
lámpara UV y el flujo laminar. 
 No dejar encendida la luz del microscopio, dejar siempre con el lente de menor 
aumento y limpiar los lentes objetivos. 
 Manipular con mucho cuidado las micropipetas (aunque no es un equipo, es 
considerado material delicado, de costo elevado y no fácil de conseguir). 
Asegúrese de conocer su funcionamiento antes de usarlas. 
 Pida explicación al instructor si no sabe cómo usar un equipo! 
 
1.2.2 MATERIALES 
 Examine la cristalería antes de cada uso. Nunca use material de vidrio astillado, 
agrietado o sucio. 
 No sumerja la cristalería caliente en agua fría ya que puede romperse. 
 No guarde material de vidrio en el congelador porque puede romperse. 
 Tenga mucho cuidado con los materiales cortantes como escarpelos, bisturís, 
lancetas y agujas, los cuales deben ser descartados en contenedores especiales. 
 Asegúrese de apagar el mechero en cualquier superficie donde esté realizando 
su trabajo (NO utilice el mechero al máximo cuando la campana de flujo laminar 
tiene mayor flujo). NO colocar combustibles cerca de la llama o de superficies 
calientes. 
 
1.2.3 QUÍMICOS Y REACTIVOS 
 Todos los reactivos químicos en el laboratorio deben ser considerados peligrosos. 
Evite manipularlos con los dedos. Si está observando directamente al reactivo, 
colóquese a prudente distancia de la muestra (30 cm). 
 No pruebe ni huela reactivos químicos. 
 Revisar dos veces la etiqueta de cualquier recipiente conteniendo reactivos, antes 
de usarlos. 
 Recuerde manipular el recipiente conteniendo el reactivo únicamente si lo 
necesita. 
 NUNCA regresar los sobrantes de reactivos a su recipiente original. 
 NUNCA sacar reactivos fuera del área del laboratorio. 
 Los materiales químicos tienen contenedores especiales para descarte. Existen 
reglas y rutinas especiales para manejo y disposición de isótopos radioactivos. 
 Conocer el SISTEMA DE IDENTIFICACIÓN DE RIESGOS POR SUSTANCIAS 
QUÍMICAS, para identificar los materiales peligrosos y tratarlos con cuidado 
(Anexo 2). Los mayores daños están asociados con algunos compuestos que son 
utilizados en grandes cantidades sin considerar su efecto adverso, i.e: acrilamida 
líquida (es extremadamente tóxica y debe evitarse su contacto con la piel), 
metanol, fenol, formaldehído, acetonitrilo, cloroformo, bromuro de etidio 
(considerados químicos carcinogénicos). 
 Los químicos que se utilizan son usualmente del mayor grado de pureza 
disponible; por este motivo, nunca debe introducir material directamente en 
 
 
el recipiente para extraer la cantidad que necesite, sino que se debe colocar la 
cantidad necesaria en un vaso de precipitación (El TEMED y el bromuro de etidio 
son algunas de las excepciones a esta regla). 
 Comprobar las condiciones de almacenamiento de las soluciones madre (e.g. 
pH). Si una solución madre no está en buen estado, ninguno de los experimentos 
realizados tendrá éxito. 
 Rotular los tubos y botellas de trabajo con todos los datos posibles: iniciales de 
quién está realizando muestra, nombre del preparado o reactivo, fecha, 
concentración, pH, tiempo de expedición, toxicidad, etc. Cuando se prepare 
soluciones madre de uso común se debe guardar en alícuotas. Nunca se debe 
introducir una punta usada dentro el frasco. 
 Asegurarse de que los recipientes empleados fueron correctamente sellados y 
nunca colocarlos en la nevera de forma horizontal. 
 Asegurarse de saber las características de los compuestos con los que se trabaja, 
por ejemplo, si deben ser guardados en hielo o en oscuridad, si pueden ser 
congelados y descongelados repetidas veces (usualmente no). 
 Notificar si alguno de los reactivos está por terminar, para que se realice un nuevo 
pedido, y de esa forma no ocurran retrasos por falta de material. 
 
1.2.4 MANEJO DE MUESTRAS BIOLÓGICAS 
 Tratar con mucho cuidado todas las muestras biológicas. 
 Si va a trabajar con DNA (de plantas, animales o microorganismos), cultivos 
bacterianos o virales, líneas celulares humanas, sangre, o material potencialmente 
infeccioso, deberá recibir la capacitación específica necesaria para su manejo, 
transporte, almacenamiento, descontaminación e eliminación. 
 Si se derrama cualquier fluido corporal en la mesa de trabajo, deberá limpiar 
inmediatamente con abundante alcohol al 70 %, seguido de una solución de 
hipoclorito de sodio, de preferencia al 5%. 
 Las batas de laboratorio contaminadas con fluidos corporales deberán colocarse 
en cloro durante 30 minutos. 
 
2. OBJETIVOS 
 
 Educar y orientar al estudiante sobre las normas de seguridad, salud 
ocupacional y bioseguridad implementados dentro un laborh7m jatorio. 
 Conocer la señalética básica referente a seguridad, salud ocupacional y 
bioseguridad. 
 
3. MATERIALES 
 
 Equipos y señalética para seguridad, salud ocupacional y bioseguridad. 
 
 
 
 
4. PROCEDIMIENTOS 
 
 Cada grupo de estudiantes deberá realizar un recorrido de reconocimiento del 
laboratorio, constatando los equipos y señalética presente referente a 
bioseguridad. 
 Realizar el trabajo grupal indicado en el Anexo 3. 
 
5. BIBLIOGRAFÍA 
 
 Laboratory Safety Guidance Occupational Safety and Health Administration U.S. 
Department of Labor OSHA 3404-11R, 2011. Enlace: 
https://www.osha.gov/Publications/laboratory/OSHA3404laboratory-safety-
guidance.pdf 
 Biosafety in Microbiological and BiomedicalLaboratories 5th Edition U.S. 
Department of Health and Human Services Public Health Service Centers for 
Disease Control and Prevention National Institutes of Health HHS Publication 
No. (CDC) 21-1112 Revised December, 2009. Enlace: 
https://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/bmbl.pdf 
 Guía práctica de Biología Celular de la Universidad Simón Bolívar, Venezuela, 
2002. Enlace: http://www.uib.cat/digitalAssets/195/195210_cdc_bmbl_4.pdf 
 Manual de bioseguridad en el laboratorio (2005). Organización mundial de la 
salud. Traducción al español 3ra Edición. Ginebra. 
Enlace:http://www.who.int/topics/medical_waste/manual_bioseguridad_laborato
rio.pdf 
 
 
https://www.osha.gov/Publications/laboratory/OSHA3404laboratory-safety-guidance.pdf
https://www.osha.gov/Publications/laboratory/OSHA3404laboratory-safety-guidance.pdf
https://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/bmbl.pdf
http://www.uib.cat/digitalAssets/195/195210_cdc_bmbl_4.pdf
 
 
6. ANEXOS 
1.- Señalética implementada dentro de la normativa para seguridad, salud 
ocupacional y bioseguridad (imágenes proporcionadas por M.Sc. Andrés Herrera). 
 Colores establecidos para señalética de seguridad. 
 
 Equipo de protección personal y colectiva. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Señales de advertencia 
 
 
 Señales de prohibición 
 
 
 
 
 
 
 Señales de Obligación. 
 
 
 Señales de salvamento o socorro 
 
 
2.- Identificación de riesgos y peligros de sustancias químicas por medio del sistema 
de identificación de riesgos por sustancias químicas, para identificar los materiales 
peligrosos. 
 
Figura 1.- Rombo de seguridad NFPA 704 (establecido por la National Fire 
Protection Association) para materiales peligrosos. 
 
 
 
3.- ACTIVIDAD GRUPAL 
Fecha: Paralelo: 
Nombres: 
1. 
2. 
3. 
4. 
5. 
Desarrolle: 
1.- Según lo que ha aprendido, qué normas de seguridad considera usted que no se 
han implementado en el laboratorio de docencia de Biología 1? 
2.- Describa que es lo que pasaría si usted infringe cinco señales de prohibición 
(señales de libre elección) 
3.- Escoge UNO de los siguientes casos de accidentes y escriba detalladamente (de 
principio a fin) que pasos seguirías estando en el laboratorio. 
a) Fuego en la mesa de trabajo por derrame de alcohol del mechero; b) derrame 
de sustancia ácida en la bata; c) corte en la mano con una hoja de bisturí; d) 
quebrar un vaso grande de vidrio en el piso del laboratorio. 
4.- Usando el SISTEMA DE IDENTIFICACIÓN DE RIESGOS POR SUSTANCIAS 
QUÍMICAS, describa cada uno de los niveles de riesgo de los reactivos que le sean 
proporcionados por su profesor. 
A 
 
 
 
 
 
 
B