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CAPÍTULO 7 Genética microbiana 125 si los patógenos han sufrido relativamente pocas modifi ca- ciones genéticas. Éstas deben ser investigadas en laboratorios diseñados especialmente para controlar a los microorganis- mos. La necesidad de contención disminuye después que los genes para las funciones específi cas, como cubiertas proteíni- cas, son separados de los genes relacionados con la replicación o toxicidad de un patógeno. Sobre todo, deben observarse las precauciones estándar relacionadas con laboratorios de micro- biología, principalmente porque fomentan hábitos que son de utilidad si un patógeno potencial entra al laboratorio. Excepciones interesantes a esta regla general son los microorganismos creados por ingeniería genética que pue- den proporcionar benefi cios sociales si se introducen al medio ambiente. Muchos microorganismos se derivan de bacterias no patógenas que se presentan naturalmente con frecuencia de hasta 105/g de tierra. La evidencia disponible sugiere que la depredación y competencia eliminan con rapidez a las cepas de bacterias creadas por ingeniería genética después que se introducen al medio ambiente. El reto primario sería mantener los benefi cios biológicos en el medio ambiente de los microor- ganismos modifi cados por ingeniería genética, más que eli- minarlos. Sin embargo, esto no está exento de consecuencias sociales. Entre los ejemplos de microorganismos modifi cados por ingeniería genética se encuentran las cepas de Pseudomo- nas que producen una proteína que favorece la formación de cristales de hielo. La utilidad de estos organismos naturales es apreciada por propietarios dependientes utilizados para el esquí, quienes de manera deliberada introducen las bacterias en el ambiente sin despertar preocupaciones del público en gene- ral. Un efecto secundario desafortunado de la introducción de estos microorganismos es que los cristales de hielo favorecen el daño de cultivos, por ejemplo de la lechuga, durante la tempo- rada en la cual es probable que se presenten heladas leves. Las bacterias mutantes que no forman cristales de hielo se diseña- ron por microbiólogos quienes esperan que el microorganismo mutante pueda proteger los cultivos de lechuga al ocupar tem- poralmente el nicho que normalmente no es habitado por cepas formadoras de hielo; sin embargo, los intentos para utilizar microorganismos mutantes en estudios de campo se acompa- ñaron de protestas sustanciales y los estudios se realizaron sólo después de procesos judiciales prolongados y costosos. Los pre- cedentes legales que han surgido de lo anterior, además de otras aplicaciones similares recientes, establecerán las guías respecto al uso progresivo y benefi cioso de las técnicas de bioingeniería genética y facilitarán el conocimiento de situaciones en que está justifi cada la cautela extrema. OBJETIVOS 1. Describir la estructura de un nucleótido, un par de bases y la estructura líneal y tridimensional de DNA bicatenario. 2. Conocer las diferencias entre RNA y DNA en lo referente a estructura, complejidad y tamaños relativos. 3. Identifi car las funciones de formas de RNA, por ejemplo, mRNA, rRNA, tRNA y ribozimas. 4. Detallar las diferencias básicas entre un cromosoma pro- cariótico y otro eucariótico. 5. Explicar específi camente los términos que se han apli- cado a la recombinación bacteriana y la transferencia genética: transposones, conjugación, transformación y transducción. 6. Describir los mecanismos de mutación bacteriana y redis- posición génica. 7. Articular los medios fundamentales por los cuales son transcritos los genes bacterianos que incluyan los con- ceptos de transcripción y traducción acopladas, activador, represor y atenuación. 8. Señalar las diferencias entre ribosomas eucarióticos y los procarióticos y describir las fases en la traducción ribosó- mica procariótica 9. Comprender el concepto de bioingeniería genética y comentar los instrumentos importantes que intervienen en tal proceso (como enzimas restrictivas, ligadura, clona- ción y expresión). 10. Describir los instrumentos que permiten la identifi cación del DNA: restricción, mapeo, secuenciación, mutagénesis, hibridación y otros métodos de detección. 11. Apreciar los benefi cios y posibles aspectos negativos de bacterias recombinantes (obtenidas por bioingeniería) en el entorno. PREGUNTAS DE REVISIÓN 1. ¿Cuál es el mecanismo por el que pueden surgir mutaciones en las bacterias? (A) Sustitución de bases (B) Deleciones (C) Inserciones (D) Reordenamiento (E) Todas las anteriores 2. La forma de intercambio genético en el cual el DNA donador se introduce en el receptor por medio de un virus bacteriano es: (A) Transformación (B) Conjugación (C) Transfección (D) Transducción (E) Transferencia horizontal 3. La enzima DNAsa degrada el DNA desnudo. Si dos cepas de bac- terias de la misma especie se mezclaron en presencia de DNAsa, ¿cuál método de transferencia génica sería inhibido con mayor probabilidad? (A) Conjugación (B) Transducción (C) Transformación (D) Transposición (E) Todos los anteriores 4. La replicación, ¿de cuál de los siguientes requiere la integración física con el replicón bacteriano? (A) Bacteriófago con DNA monocatenario (B) Bacteriófago con DNA bicatenario (C) Bacteriófago con RNA monocatenario (D) Plásmido (E) Transposón 5. La transformación de un par de bacterias durante el proceso de conjugación en la Escherichia coli requiere: (A) Lisis del donador (B) Una pilosidad sexual 07 Chapter 07_Carroll_4R.indd 12507 Chapter 07_Carroll_4R.indd 125 14/04/16 18:0714/04/16 18:07 126 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología (C) Transferencia de DNA bicatenario (D) Una endonucleasa de restricción (E) Integración de un transposón 6. ¿Por qué las bacterias contienen enzimas de restricción? (A) Para fi surar el RNA con la fi nalidad de que se incorpore a los ribosomas (B) Para aumentar la longitud de cromosomas bacterianos (C) Para evitar que DNA extraño se incorpore al genoma bacteriano (D) Para procesar los exones de mRNA procariótico (E) Para fracturar proteolíticamente promotores nucleares 7. Si la secuencia de bases en una hebra de DNA codifi cador es 5′CATTAG3′, entonces ¿cuál de las secuencias de mRNA siguien- tes sería su complemento en la otra cadena? (A) 5′GTAATC3′ (B) 5′CUAAUG3′ (C) 5′CTAATG3′ (D) 5′GUAAUC3′ (E) 5′CATTAG3′ Bushman F: Lateral DNA Transfer. Mechanisms and Consequences. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2002. Condon C: RNA processing and degradation in Bacillus subtilis. Microbiol Mol Biol Rev 2003;67:157. Fraser CM, Read TD, Nelson KE (editors): Microbial Genomes. Humana Press, 2004. Grohmann E, Muuth G, Espinosa M: Conjugative plasmid transfer in gram-positive bacteria. Microbiol Mol Biol Rev 2003;67:277. Hatfull GF: Bacteriophage genomics. Curr Opin Microbiol 2008;5:447. Kornberg A, Baker T: DNA Replication, 2a. ed. Freeman, 1992. Lengler JW, Drews G, Schlegel HG (editors): Biology of the Prokaryotes. Blackwell Science, 1999. Liebert CA, Hall RM, Summers AO: Transposon Tn21, fl agship of the fl oating genome. Microbiol Mol Biol Rev 1999;63:507. Murray NE: Type I restriction systems: Sophisticated molecular machines (a legacy of Bertani and Weigle). Microbiol Mol Biol Rev 2000;64:412. 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B BIBLIOGRAFÍA Alberts B, et al.: Molecular Biology of the Cell, 4a. ed. Garland, 2002. Avery O, Mcleod C, McCarty M: Studies on the chemical nature of the substance inducing transformation of pneumococcal types: Induction of transformation by a deoxyribonucleic acid fraction isolated from pneumococcus type III. J Exp Med 1944;79(2):137. Barlow M: What antimicrobial resistance has taught us about hori- zontal gene transfer. Methods Mol Biol 2009;532:397-411. 07 Chapter 07_Carroll_4R.indd 12607 Chapter 07_Carroll_4R.indd 126 14/04/16 18:0714/04/16 18:07 Botón2:
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