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Recuperación mejorada de petróleo en sistemas porosos haciendo uso del surfactante producido por Pseudomonas aeruginosa Pb18 Santiago Hernández Villamizar, Martha Vives Flórez, Andrés González Barrios Universidad de los Andes, Facultad de Ingeniería, Departamento de Ingeniería Química Resumen: Gran parte del petróleo mundial es producido por la inyección de agua para mantener la presión del yacimiento y barrer el petróleo de los pozos de producción[1]. Sin embargo no se logra recuperar el 100% del petróleo existente en los pozos, dada las limitaciones fisicoquímicas, como lo es la alta tensión superficial en el sistema agua-petróleo que puede resultar en altas fuerzas capilares que retienen el petróleo a rocas del yacimiento, por tanto esto es un gran inconveniente en las zonas porosas del pozo [2]. En este trabajo se evalúa el uso del surfactante producido con la bacteria Pseudomonas aeruginosa Pb18 como solución a esta problemática mediante la recuperación mejorada del petróleo sustentado por un modelo a escala. Para realizar el modelo a escala se utiliza el test de columna de arena que simula las zonas porosas de los pozos petroleros. Los resultados obtenidos muestran que el surfactante producido por la bacteria utilizada en este trabajo permite una recuperación mejorada del petróleo un 10% por encima que el control negativo (sin surfactante). 1. Introducción 1.1 MEOR (Microbial Enhanced Oil Recovery) La mayoría de la energía del mundo proviene de fuentes no renovables de combustibles fósiles. El petróleo crudo obtenido a partir de estos recursos por parte de los métodos utilizados actualmente conduce a la recuperación sólo del 8-30% del total de crudo presente en el depósito[4]. Por esta razón la recuperación de petróleo es un reto, dado que el resto del crudo a menudo se encuentra en las regiones de la reserva que son de difícil acceso, por ejemplo el petróleo que se mantiene en los poros de las rocas o arena del pozo por la presión capilar[3]. MEOR es el uso de microorganismos para recuperar petróleo adicional presente en las zonas porosas de los pozos, aumentando así la producción de petróleo de un yacimiento. En esta técnica se seleccionan microorganismos que se introducen en los pozos de petróleo para producir productos metabólicos inclu- yendo surfactantes o polímeros que se consideran útiles para la liberación de petróleo atrapado[4]. De las diferentes técnicas de recuperación de petróleo que existen MEOR tiene el potencial de ser rentable[3]. La técnica MEOR logra mejorar la recuperación de petróleo por los siguientes métodos[4]. Reducción de la viscosidad del aceite: El aceite es un líquido espeso que no fluye con facilidad, los microorganismos ayudan a romper la estructura molecular del petróleo, por lo que es más fluido y más fácil recuperarse del pozo[4]. http://www.uniandes.edu.co/ La producción de gas de dióxido de carbono: Como un subproducto del metabolismo los microorganismos producen gas de dióxido de carbono. Con el tiempo, este gas se acumula y desplaza el aceite en el pozo, al conducirlo hasta y fuera de la tierra[4]. La producción de biomasa: Cuando los microorganismos metabolizan los nutrientes que necesitan para la supervivencia, se da la producción de biomasa orgánica como un subproducto. Esta biomasa se acumula entre el petróleo y la superficie de la roca, desplazando el petróleo de los poros por lo que es más fácil recuperarlo del pozo[4]. Selectividad de taponamiento: Algunos microorganismos segregan sustancias viscosas llamadas exopolisacáridos para protegerse de la desecación o ser presa de otros organismos. Esta sustancia ayuda a las bacterias a tapar los poros en las rocas del pozo para que el aceite se pueda mover en las superficies de roca pasando con más facilidad[4]. La producción de surfactantes: Los microorganismos producen compuestos bioactivos llamados biosurfactantes por la descomposición del aceite. Estos biosurfactantes actúan como detergentes, ayudando al petróleo a tener mayor libertad de movimiento fuera de las rocas y grietas para que pueda viajar con más facilidad fuera del pozo[4]. En un proceso de MEOR, las condiciones para el metabolismo microbiano se apoyan a través de la inyección de nutrientes. En algunos procesos, esto consiste en inyectar carbohidratos fermentables como la melaza. Algunos embalses también requieren nutrientes inorgánicos como sustratos para el crecimiento celular o para servir como receptores alternativos de electrones en lugar de oxígeno[3]. MEOR, para ser económicamente viable, exige el uso de cepas microbianas y que los compuestos producidos por ellas sigan siendo viables en condiciones del yacimiento como temperaturas de hasta 85°C, presión sobre 17.23MPa, extremos de pH y 1.3–2.5% de salinidad [3] [5]. De acuerdo con una evaluación estadística (1995 en EE.UU.), 81% de todos los proyectos MEOR demostraron un aumento incremental positivo en la producción de petróleo y sin disminución de la producción de petróleo como resul- tado de los procesos de MEOR. Los efectos de la actividad bacteriana en el depósito se magnifican por su crecimiento conjunto, mientras que en las otras tecnologías de recuperación los efectos de los aditivos tienden a disminuir con el tiempo y la distancia[6]. Ecológicamente la técnica MEOR no presenta mayor riesgo ya que los productos son biodegradables y no se acumula en el medio ambiente[6]. La técnica MEOR se puede aplicar de tres estrategias diferentes; Ex situ que consta de producir los biosurfactantes y luego inyectarlos en el pozo. In situ el cual busca la multiplicación de los microorganismos en las rocas del pozo previamente inyectados. Inyección de nutrientes seleccionados en el pozo para la estimulación de microorganismos nativos en la reserva petrolera[8]. 1.2 Compuestos utilizados en MEOR Surfactante Los surfactantes son moléculas anfi- páticos de bajo peso molecular que reducen la tensión superficial entre el petróleo y el agua, y entre el petróleo y la http://www.uniandes.edu.co/ roca donde se encuentra reposado el petróleo, por tanto tienen acción emulsificante facilitando de esta manera el desplazamiento del crudo atrapado en los poros de las rocas por el aumento de la capilaridad. Asimismo por su biodegradabilidad y baja toxicidad tienen aceptación ecológica y por esto en años recientes han tenido gran atención. [3, 9]. El tipo, calidad y cantidad de producción del surfactante en las bacterias se ve influido por los elementos traza y por el origen del carbono[10]. Se ha demostrado que la adición de iones metálicos (Mg2, Ca2, elementos traza y Fe2) aumenta el rendimiento dos veces del surfactante cuando se suman, en lugar de aportarlos de forma individual [4]. Aminoácidos como el ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, valina y lisina también muestran aumento en el rendimiento de surfactante en un 60% [4]. Los surfac- tantes más utilizados en MEOR son glicolípidos, lipopeptidos y ramno- lipidos, entre los que se destacan los lipopeptidos surfactina y lichenysin[3]. Biopolímeros Los biopolímeros o expolisacaridos aumentan la viscosidad del agua y cambian la permeabilidad al tapar los poros en las rocas dentro del pozo con el fin de facilitar el barrido de las áreas de la reserva al tener un mayor control sobre la movilidad del agua[3, 6]. La acción de los biopolímeros tiene un mejor resultado cuando el radio medio del poro es inferior a dos veces al diámetro de las bacterias. En conclusión el papel de los biopolímeros microbianos en la recuperación mejorada de petróleo es mejorar la eficiencia volumétrica de barrido de inyección de agua por taponamiento selectivo de zonas de altapermeabilidad [11]. Es decir los polímeros reducen la movilidad de la fase acuosa y por tanto aumentan la eficiencia de barrido[5]. Gas, ácidos y solventes Gases, ácidos y solventes producidos por los microorganismos son útiles para aumentar la permeabilidad a través de la redes porosas y para presurizar el depósito de petróleo[3]. Las bacterias pueden fermentar los hidratos de carbono para producir gases como el CH4, CO2 y H2. Tales gases producidos in situ pueden contribuir a la acumulación de presión en un depósito de presión baja. Además estos gases pueden disolverse en el petróleo y reducir su viscosidad[3]. Se producen solventes tales como acetona, etanol, 1-butanol y butanona que también pueden disolver y eliminar los hidrocarburos pesados y están involucrados en la estabilización y reducción de la tensión interfasial lo cual promueve la emulsificación [6]. Biomasa Cuando los microorganismos metabolizan los nutrientes que necesitan para sobrevivir, la producción de biomasa orgánica se da como un subproducto. Esta biomasa se acumula entre el aceite y la superficie de la roca, físicamente desplazando el aceite por lo que es más fácil de recuperar el petróleo del pozo[4] 1.3 Microorganismos en MEOR Existen un gran número de microorganismos capaces de producir surfactantes, polímeros, solventes, ácidos y gases, útiles en la recuperación mejorada de petróleo. A continuación se muestran en las tablas 1, 2 y 3 los microorganismos más reportados capaces de producir estos compuestos. http://www.uniandes.edu.co/ Tabla 1. Microorganismos productores de Surfactantes Microorganismo Surfactante Ref. Aeromonas sp. Gl [4] Pantoea Gl [4] Ps.aeruginosa Gl [4, 8, 12] Ps.fluorescens Gl [4, 8] Str. thermophilus Gl [4] Rhodococcus sp. Gl [13] B. subtilis L [4, 8, 14] Arthtobacter sp. L [2, 15] B. licheniformis L [2, 8, 16] Ps.fluorescens L [2] Ps.aeruginosa R [4, 14] Pseudomonas sp. R [4] Bacillus sp. R [13] Kl. oxitoca Lo [4] Bacillus sp. Lo [4] Rhodococcus sp. Lo [2] GL:Glicolipidos, L:Lipopeptidos, R:Ramnolipidos, Lo: Lopipolisacaridos Tabla 2. Microorganismos productores de biopolímeros Microorganismo Biopolímero Ref. Xanthomonas sp. Xanthan gum [3] Aureobasidium so. Pullulan [3] Bacillus sp. Levan [3] Alcaligeness sp. Curdlan [3] Leuconostoc sp. Dextran [3] Sclerotium sp. Scleroglucan [3] Tabla 3. Microorganismos productores de gas, ácido y solventes Microorganismo Comp. Tipo Ref. Clostridium Gas M, H [3] Enterobacter Gas M,H [3] Methanobacterium Gas M,H [3] Clostridium Ácido P, B [3] Enterobacter Ácido P, B [3] Clostridium Solvente A, Bt [3] Zymomonas Solvente A, Bt [3] Klebsiella Solvente A, Bt [3] M:Metano, H:Hidrogeno, P:Propionico, B:Butirico, A:Acetona, Bt:Butanol 1.4 Modelo de zona porosa En los pozos de petróleos el movimiento de los sustratos, microorganismos, nutrientes y demás productos biológicos en la fase acuosa es controlado principalmente por el transporte advectivo-dispersivo y por procesos de tensoactivos que ocurren en la interface agua-petróleo [17]. Cuando se utiliza la modalidad in situ en la técnica MEOR la deposición de bacterias en la matriz solidas es afectada por las propiedades físicas y químicas del fluido y los poros de las rocas como los son la fuerza iónica, el pH y carga superficial, también por las características de la superficie de las bacterias tales como la carga de la superficie celular y la hidrofobicidad [17]. Varios parámetros son necesarios a tener en cuenta para poder realizar un modelo de la recuperación mejorada de petróleo. La porosidad es uno de los parámetros más importantes en el modelo de zona porosa por tal razón debe estar presente en los balances de masa y en las ecuaciones de transporte, como lo muestra el trabajo realizado por Li y colaboradores en 2008 [17] en las ecuaciones que presenta para el modelo matemático de la técnica MEOR. Dado que la modalidad de la técnica MEOR que se utilizó en el presente trabajo es ex situ y en especial por el uso de surfactantes, el parámetro de la tensión superficial es de gran valor para el modelo de zona porosa. Bang y Caudle en 1984 desarrollaron un modelo que http://www.uniandes.edu.co/ describe la relación entre la tensión superficial y la concentración de surfactante de tal forma que se expone que la tensión superficial depende de la concentración del surfactante en la forma de una función exponencial [17]. Por otro lado se tiene que el mejor modelo que describe el desplazamiento del agua que desplaza el petróleo a través de la zona porosa está regido por la ley de Darcy [17]. 1.5 Problemática en Colombia Colombia produce 785.000 barriles diarios de petróleo situándose entre los 30 países de mayor producción en el mundo. El petróleo es una de las mayores fuentes de ingreso a la economía del país, en consecuencia es de gran interés nacional el desarrollo científico en el área petrolera ya que si se logra obtener más petróleo de los yacimientos ya encontrados y de los que están por descubrirse la economía nacional se verá altamente favorecida. El uso de la técnica MEOR utilizando como herramienta la aplicación directa del surfactante o la producción in vivo mediante la aplicación de microor- ganismos en el pozo, es una posibilidad a la problemática energética y económica. Este trabajo tiene como fin evaluar la recuperación mejorada de petróleo haciendo uso del ramnolípido producido por Pseudomonas aeruginosa Pb18, sustentado mediante un modelo a escala. 2. Metodología 2.1 Muestra de petróleo, surfactante, microorganismo y medios de cultivo La muestra de petróleo es proveniente de los pozos de Puerto Boyacá, municipio del Departamento de Boyacá, Colombia. El petróleo tiene un grado API de 14.2, y el pozo de donde se obtuvo el petróleo tiene una temperatura de 34°C, una presión de 80 psi y un porcentaje de solidos menor al 0.1%. Esta información es proporcionada por ingenieros que trabajan en el pozo. El microorganismo que se utilizó para la producción del surfactante fue Pseudomonas aeruginosa Pb18 cepa otorgada por el Centro de Investi- gaciones Microbiológicas, CIMIC de la Universidad de los Andes. Esta cepa ha sido fuente de investigación en el CIMIC en la producción y caracterización de surfactantes, por esta razón fue escogida para el presente trabajo. El surfactante producido por Pseudomonas aeruginosa Pb18 según los resultados presentados en el trabajo realizado por Clavijo en 2008 es un surfactante del tipo ramnolípido y en consecuencia es un emulsificante aceite en agua (O/W), asimismo se comprobó que la mejor fuente de carbono para la producción del surfactante es aceite vegetal [29]. Los medios de cultivo utilizados fueron medio LB y Medio Mínimo de Sales (MMS). El medio LB consta de NaCl 10 g/L, triptona 10 g/L y extracto de levadura 5 g/L, para medio solido se agrega agar 15 g/L. Y el MMS está compuesto por KH2PO4 1.5 g/L, K2HPO4-3H2O 4.8 g/L, extracto de levadura, 0.1 g/L, Na3(C6H5O7)-2H2O 0.5 g/L, (NH4)2SO4 1 g/L, MgSO4-7H2O 0.2 g/L, 5 mL de solución elementos traza, con un pH ajustado a 7.2. La solución elementos traza contiene CaCl2.2H2O 0.4 g/L, MnCl2.-4H2O 0.08 g/L, NiCl2.6H2O 0.08 g/L, ZnSO4.7H2O, http://www.uniandes.edu.co/ 0.08 g/L, FeCl3.-6H2O 0.1 g/L, Na2MoO4-2H2O, 0.04 g/L. 2.2 Extracción y producción del surfactante La extracción y producción del surfactante se realizó con el fin de obtener el compuesto útil para la recuperación mejorada del petróleo. Para producirlo se sembró la bacteria Pseudomonas aeruginosa Pb18 en tubos con 3 mL de medio LB y se incubó por18 horas a 30 °C y 150 rpm. Luego se tomó 1 mL del cultivo LB overnight y se añadió a 9 mL de medio MMS (cantidades por tubo) el cual se incubó por 24 horas a 30°C y 150 rpm. Para el montaje del fermentador se preparó medio MMS, se le añadió 2% V/V del medio MMS overnight y 2% V/V de aceite vegetal estéril. Seguido se montó el fermentador con la mezcla anterior y se puso por 6 días a 30°C y 150 rpm. Para extraer el surfactante fue necesario dividir las muestras obtenidas del fermentador en falcons con un volumen igual a 45 mL y se centrifugaron a 5000 g por 15 minutos. Finalmente se recolectó el sobrenadante, se ajustó el pH a 2 con HCl 1 M y se adicionó el mismo volumen de la muestra de una mezcla cloroformo- metanol relación 2:1. Se dejó reposar por un día y la fase no acuosa se llevó a un rotaevaporador para evaporar el cloroformo con vacío a 40°C [28]. El procedimiento anterior también se llevó a cabo reemplazando el fermentador por 6 elermeyers de 250 mL, cada uno con 200 mL de medio de cultivo. Esto se realizó con el fin de evaluar si era posible obtener una cantidad similar de surfactante comparada con la cantidad obtenida con el fermentador para determinar si es posible utilizar un sistema simple de agitación para la producción del surfactante. 2.3 Medición de la concentración del ramnolípido(surfactante) Para evaluar la concentración del ramnolípido en la muestra se utilizó el método de orcinol. En primera instancia fue necesario construir la curva de calibración, para esto se utilizó una serie de concentraciones consecutivas de ramnosa en el intervalo de 5 a 60 μg/mL, 100 μL de cada una de las concentraciones de ramnosa mezcladas con 900 μL de solución de orcinol al 0.19% en ácido sulfúrico al 53% se llevaron a un baño seco por 30 minutos a 80°C. Por último se midió la absorbancia a 421 nm utilizando como blanco agua destilada en vez de ramnosa. Luego de obtener la curva de calibración se realizó el mismo procedimiento con las muestras de surfactante utilizando la muestra concentrada y diluida a 10 -1 y 10 -2 . El valor de concentración dado por la curva se debe multiplicar por 3.4 que equivale a la relación entre la ramnosa y el ramnolípido [29]. 2.4 Test de columna de arena El test de columna de arena permite evaluar si la técnica MEOR logra recuperar más petróleo de los pozos. Consta de una columna de acrílico vertical con 17.5 cm de largo, diámetro externo de 4.4 cm y diámetro interno de 3.8 cm con un tamiz de 0.22μm de tamaño de poro en uno de los extremos. Con la tapa fija en la parte inferior (donde está el filtro de 0.22μm) se llenó la columna con 259 g de arena de 180- 250μm de tamaño de partícula. La arena se vertió en la columna en pequeñas cantidades con suaves golpes para asegurar empaquetamiento uniforme. Ver Ilustración 1. http://www.uniandes.edu.co/ Luego de empacar la arena se fijó la tapa superior. Las dos tapas de los extremos cuentan con agujeros 1,2 cm en el centro para la inserción de las jeringas que inyectaran los fluidos. Un anillo de caucho rodea las tapas herméticas para evitar fugas de la columna. Se debe evaluar el volumen de poro que se define como el volumen de vacío del modelo ocupado por agua que es inyectada antes de agregar el petróleo [13]. Para hallar el volumen de poro se saturó la columna con solución salina y luego se adicionó petróleo, la diferencia entre el volumen de solución salina adicionado y el recuperado al agregar el petróleo equivale al volumen de poro. Con el fin de eliminar todos los gases de la columna se llevó a cabo vacío por 2 minutos en el extremo donde se encuentra el filtro de 0.22 μm. Luego se inyectó el petróleo en la columna a presión constante por la parte superior y se incubó a 34°C por 5 días. Pasados los 5 días se inyectó el surfactante en concentración 100 mg/L en una solución salina que estaba a una concentración 20 g/L y por último se utilizó la ecuación 1 para evaluar el porcentaje de recuperación del petróleo ( ) [13]. (1) 3 Resultado y discusión 3.1 Extracción del surfactante Se llevó a cabo la producción del surfactante en el fermentador (bioreactor) y en 6 elermeyers de 250 mL, cada uno con 200 mL de medio y el fermentador se montó con 1200 mL de medio, de los cuales se recolectaron del fermentador 1080 mL y de los elermeyers 225 mL. Parte de las muestras obtenidas de los elermeyers (575 mL) no fue tenido en cuenta ya que al realizar la centrifugación no se observó pellet que indicaría la presencia de la bacteria. Se realizó la purificación del surfactante, es decir separar el cloroformo, obteniendo un surfactante mucho más concentrado a partir del fermentador comparado con el obtenido de los elermeyers. Lo anterior se deduce a partir de una prueba cualitativa que consiste en la adición de 10μL de surfactante a una mezcla de 20 mL de agua destilada y 0.5 mL de petróleo. Al 17 .5 c m Diámetro 1.2 cm 4.4 cm 3.8 cm Ilustración 1. Modelo columna de arena http://www.uniandes.edu.co/ utilizar el surfactante proveniente del fermentador la tensión superficial de la mezcla agua-petróleo disminuyó más que al utilizar el surfactante de los elermeyers, Ilustración 2 y 3. Ilustración 2. Mezcla agua destilada-petróleo Ilustración 3. Disminución de la tensión superficial al agregar el surfactante. Izquierda comportamiento con surfactante de los elermeyers. Derecha comportamiento con surfactante proveniente del fermentador 3.2 Evaluación de la concentración del surfactante La deducción obtenida a partir de la prueba cualitativa fue confirmada al utilizar el método de orcinol para cuantificar la concentración del surfactante, del cual se obtuvo como curva de calibración la ecuación 2 con un índice de correlación de 0.9959. La concentración de surfactante de la muestra del fermentador fue de 21.5016 g/L correspondiente a una alta concentración del compuesto de interés, esto quiere decir que a partir de pequeños volúmenes de medio de cultivo es posible obtener cantidades suficientes de surfactante para recuperar volúmenes mayores de petróleo. (2) Si se comparan los resultados obtenidos entre la producción de surfactante en fermentador y elermeyers se observa que la producción del compuesto se ve favorecida en el fermentador seguramente por la condiciones de aireación y agitación donde con la ayuda de los bafles la concentración es mucho más homogénea que la concentración en los elermeyers y además con los filtros se mantiene un flujo de aire estéril en el fermentador. 3.3 Recuperación mejorada El porcentaje de recuperación fue calculado haciendo uso de la ecuación (1) y los resultados son mostrados en la Grafica 4. Se observa que el porcentaje promedio de recuperación usando el surfactante (30.84%) es mayor comparado con el porcentaje de recuperación al usar la solución salina al NaCl 20 g/L sin surfactante (20.88%), con una diferencia aproximadamente del 10%. Es decir, que los resultados apoyan la hipótesis de que el surfactante permite una recuperación mejorada del petróleo. Se han realizado otros trabajos sobre la recuperación mejorada de petróleo haciendo uso del surfactante producido por cepas de Pseudomonas aeruginosa y todos han mostrado efectividad del surfactante, sin embargo, no es posible comparar los resultados de estos estudios con los obtenidos en este trabajo dado que las condiciones experimentales son diferentes, por supuesto no es la misma arena, la temperatura de incubación es distinta y el grado API del petróleo que es un factorfundamental en los resultados http://www.uniandes.edu.co/ http://www.uniandes.edu.co/ http://www.uniandes.edu.co/ no es igual. Estas condiciones experimentales pueden influir en la fluidez del petróleo dentro de la columna y en la cantidad de petróleo que queda atrapado en las zonas porosas. Se piensa que el porcentaje de recuperación obtenido puede aumentarse partiendo del hecho que no se establecieron las condiciones que mejoren la eficiencia del surfactante, como lo son la concentración de NaCl, el pH y la Concentración Micelar Critica (CMC) adecuada. La CMC que es la concentración en la cual los surfactantes comienzan a formar las micelas en la fase acuosa es la más importante ya que es posible que la concentración de surfactante utilizada, 100 mg/L esté por debajo de la CMC del surfactante producido por Ps. aeruginosa Pb18, es decir, que sería necesaria una concentración más alta para lograr una mayor disminución de la tensión superficial. Para surfactantes producidos por Pseudomonas aeruginosa se han reportado concentraciones desde 60 mg/L hasta 120 mg/L [8, 14, 16, 21] por lo que existe la posibilidad que efectivamente la concentración que se utilizó esté por debajo de la CMC. Aunque posiblemente no es preocupante la concentración de NaCl donde se diluye el surfactante ni el pH de la solución resultante según los estudios realizados por Amani en 2010 [14] donde se reporta una tolerancia del surfactante producido por una cepa de Pseudomanas aeruginosa a pH en el rango de 4- 10 y NaCl en concentraciones por encima de 25 g/L. Las condiciones del presente trabajo son pH de 4.094 y concentración de NaCl de 20 g/L, están dentro y por debajo de los límites reportados, sin embargo, si se utilizan los parámetros en el valor adecuado la eficiencia evidentemente aumentará. Grafica 1. Porcentaje de recuperación utilizando el surfactante y utilizando únicamente solución salina en concentración 20 g/L. La media y desviación estándar fue calculada a partir de 5 repeticiones Ahora bien, también se pensaría que la temperatura y la presión podrían ser otro factor influyente en la eficiencia del surfactante, sin embargo, para el caso de la temperatura, ha sido reportado en varias ocasiones que no presenta mayor influencia sobre la reducción de la tensión superficial producida por el surfactante, lo que es de gran importancia ya que significa que la técnica puede ser utilizada a temperaturas incluso cercanas a 120 °C según lo reportado [8, 14, 21] permitiendo un amplio rango de temperaturas para su aplicación. Aunque por supuesto al aumentar la temperatura el petróleo podrá fluir más fácilmente lo que resultaría en una mayor recuperación del petróleo evidentemente. Con respecto a la presión no se encuentran reportes al respecto, posiblemente debido a que la presión no influye en el fenómeno físico que se lleva a cabo en el proceso en estudio, pues la presión no afecta el funcionamiento de las moléculas 0 5 10 15 20 25 30 35 Surfactante Sln salina % Recuperación http://www.uniandes.edu.co/ http://www.uniandes.edu.co/ orgánicas a menos que exista fricción, lo cual no ocurre en la interacción entre el surfactante y la roca o el surfactante y el petróleo. Por otro lado es necesario examinar la relación de volúmenes utilizada para la recuperación de petróleo, es decir, entre la cantidad de volumen inyectado de petróleo y la cantidad de solución con surfactante o solución salina. Para 80 mL de petróleo se usaron 150 mL de surfactante a concentración de 100 mg/L o solución salina a concentración de 20 g/L. Se utilizó el mismo volumen tanto para el surfactante como para la solución salina para evitar ruido en los resultados, sin embargo, esta relación de volúmenes es muy alta compara con la utilizada en la industria petrolera. El test columna de arena tiene como objetivo simular únicamente las zonas porosas de los pozos petroleros en consecuencia los volúmenes utilizados en la experimentación no son extrapolables a la escala industrial. Para eliminar la posibilidad que la alta relación de volúmenes este influyendo en los resultados se proponen dos soluciones. La primera, la cual ya ha sido reportada, es escalar la recuperación mejorada de petróleo a pozos pequeños donde no será necesaria la producción de grandes cantidades de surfactante. También puede modificarse el test de columna de arena, intentando replicar no solo las zonas porosas de los pozos sino todo el pozo en su totalidad. De esta forma se podría escalar las relaciones de volúmenes utilizadas en la industria a la magnitud del modelo experimental. 4 Conclusiones Esta trabajo tenía como finalidad evaluar el surfactante producido por Pseudomonas aeruginosa Pb18 en la recuperación mejorada de petróleo y los resultados fueron los esperados al obtener una recuperación de petróleo 10% más al utilizar el surfactante. Además es posible que se pueda recuperar más del 30% de petróleo luego de establecer las condiciones que mejoren la eficiencia del proceso por lo que se recomienda para futuras investigaciones estandarizar previamente la concentración de NaCl a utilizar, el pH adecuado y determinar la CMC. Además de dar respuesta a la pregunta de investigación planteada en este trabajo fue posible concluir que la producción del surfactante es preferible realizarla en el fermentador ya que se ve favorecida en cantidad, se tiene un mayor volumen y más concentrado lo que daría la idea que para un proceso de escalado no es eficiente utilizar un sistema de agitación básico para reemplazar un sistema más complejo como lo es un fermentador. Es decir que en conclusión el surfactante producido por Pseudomonas aerugiosa Pb18 sí permite una recuperación mejorada de petróleo y ahora la ingeniería biológica y molecular pueden jugar un papel importante en este proceso con el fin de optimizar los procesos de producción del surfactante y mejorar la eficiencia del surfactante. 5 Agradecimientos Agradezco a Dios por las oportunidades dadas, a mis padres y hermana por su paciencia y apoyo, así como a mis asesores Andrés González y Martha Vives también a Guillermo Rangel y Viviana Ferreira por su amplia colaboración totalmente desinteresada. 6 Bibliografía [1] G. Voordouw, "Production-related petroleum microbiology: progress and http://www.uniandes.edu.co/ prospects," Current Opinion in Biotechnology, vol. 22, pp. 401-405, Jun 2011. [2] I. M. Banat, A. Franzetti, I. Gandolfi, G. Bestetti, M. G. Martinotti, L. Fracchia, T. J. Smyth, and R. 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