Espectrofotómetros: Funcionamiento y Tipos

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Introducción 
Un espectrofotómetro es un instrumento que compara la intensidad de la luz de una fuente regulada o estándar con la intensidad de longitudes de onda en un espectro particular de luz. En otras palabras, es un dispositivo para medir el brillo de diversas porciones de un espectro
 Historia del espectrofotómetro 
Historia de la espectrofotometría El espectrofotómetro se inventó en 1940, por Arnold J. Beckman y sus colegas en los Laboratorios National Technologies, la empresa que Beckman había comenzado en 1935. Fueron conducidos por el líder de proyecto Howard H. Cary. El espectrofotómetro fue el mayor descubrimiento de la compañía. En la década de 1950 se comienza a utilizar el espectrofotómetro en E.U. éste eliminó el comparador de color logrando así que los análisis fuesen más cuantitativos, confiables, e incrementando la y la exactitud.
Al principio, hubo problemas de rendimiento con el espectrofotómetro. Estos problemas llevaron a cambios en el diseño. Utilizó un prisma de cuarzo en lugar de un prisma de cristal Elevaron la resolución de la longitud de onda en el ultravioleta Producido con una lámpara de hidrógeno y otras mejoras
El primer uso industrial de la tuvo lugar en la industria de la pintura. El objetivo principal era mantener la partidas de pintura lo más similarmente posibles entre ellas y así reducir al mínimo las diferencias cuando de debía retocar de nuevo la pintura.
Espectrofotómetro de absorción atómica. Espectrofotómetro de absorción molecular (se conoce como espectrofotómetro UV-VIS). 
En 1940 estaban disponibles en el mercado varios espectrofotómetros, pero los primeros modelos no podían trabajar en el ultravioleta. Arnold O. Beckman desarrolló una versión mejorada en el National Technical Laboratorios Company, más tarde la empresa Beckman Instrument y en última instancia Beckman Coulter. Se desarrollaron los modelos A, B, y C (se produjeron tres unidades del modelo C), y luego el modelo D, que se convirtió en el DU. Toda la electrónica estaba contenida dentro de la caja del instrumento y tenía una nueva lámpara de hidrógeno con continuum ultravioleta, y un mejor monocromador. Este instrumento fue producido desde 1941 hasta 1976 con esencialmente el mismo diseño; más de 30 000 unidades fueron vendidas. El precio en 1941 fue de US$723. El laureado con el Nobel de química Bruce Merrifield dijo que era «probablemente el instrumento más importante que se ha desarrollado para favorecer la realización de la biociencia».
Tipos de espectrofotómetro 
Los espectrofotómetros de laboratorio miden la intensidad de la luz absorbida en una sustancia después de pasar por una solución muestra. Por ello, de acuerdo al rango de la longitud de onda que son capaces de medir, se clasifican en:
Espectrofotómetros de Laboratorio UV-Vis
Son equipos basados en el proceso de absorción de la radiación ultravioletavisible. Los espectrofotómetros ultravioleta-visible pueden detectar radiación con longitud de onda entre los 160 y 1100 nm (puede varíar el rango según el equipo).
Espectrofotómetros de Laboratorio Infrarrojos (NIR)
Los espectrofotómetros de laboratorio infrarrojos son equipos basados en la absorción de radiación de longitudes de onda entre 800 y 2700nm. Su proceso de absorción se debe a la presencia de sobretonos y bandas de combinación. El uso de los espectrofotómetros de laboratorio infrarrojos se restringe a muestras sólidas y líquidas para análisis medioambiental, farmacéutico, polímeros y alimentos.
Espectrofotómetros de Laboratorio
de Absorción Atómica
Determinan la concentración de metales y otros elementos en soluciones. Los espectrofotómetros de absorción atómica se emplean para el análisis de aguas, suelos, bioquímica, farmacéutica, petroquímica, etc.
Espectrofotómetros de Laboratorio de Plasma Acoplados a Masas
Analizan todos los elementos de la tabla periódica. Son ideales para analizar metales que se encuentran en concentraciones de partes por billón. Los espectrofotómetros de plasma acoplados a masas se utilizan para análisis del medio ambiente, química, electrónica, biomedicina, etc.
 
Ley de Lambert Beer
El enunciado de la Ley de Beer dice: "La intensidad de un haz de luz monocromática, que incide perpendicular sobre una muestra, decrece exponencialmente con la concentración de la muestra", según esta ley: A = K.C. usada, de la sustancia que se analiza y del espesor de la celda usada. C = Concentración de la muestra.