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PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. PRACTICA DE LABORATORIO Nº 2 RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE BIOMOLÉCULAS INORGÁNICAS Y ORGÁNICAS I. INTRODUCCION Las biomoléculas son los compuestos químicos que forman los seres vivos. Se forman de la unión básicamente covalente de los bioelementos, principalmente C, H, O, N, P y S. Las biomoléculas inorgánicas son características de la materia inerte, pero se encuentran también entre los seres vivos. No poseen átomos de carbono o este, si aparece, no forma cadenas con otros carbonos y con hidrógenos, es decir, no polimerizan. Comprenden el agua (H2O), las sales minerales y algunos gases que pueden desprenderse o utilizarse en el transcurso del metabolismo celular como el oxígeno (O2), el dióxido de carbono (CO2), el amoniaco (NH3). El agua es la biomolécula más abundante en la materia viva. En el humano adulto representa el 63% de su peso, en el embrión humano el 94%; el 8% de su peso en agua circulante, el 15% de agua intersticial y el 40% de agua intracelular. Dado que las reacciones químicas de las células tienen lugar en medio acuoso existe una relación directa entre contenido en agua y la actividad fisiológica de un organismo. Así, los seres con vida latente (como semillas o virus) presentan los menores porcentajes. El agua es una sustancia muy reactiva y con propiedades físicas y químicas que la diferencian de la mayoría de los líquidos más corrientes. Por ser una molécula dipolo y por ende formar puentes de hidrógeno es líquida a temperatura ambiente, al contrario de lo que cabría esperar, si se considera que otras moléculas de parecido peso molecular son gases. Las sales minerales se encuentran en las células y los líquidos extracelulares de las plantas ( p.e. la savia) y animales (p.e. la sangre) ya sea en forma combinada entre sí o con compuestos orgánicos y como sales disueltas (iones en solución). Un individuo de 70 Kg presenta 2.8 Kg de minerales, lo cual constituye cerca del 4 a 5% del peso corporal total, estando concentrados abundantemente en el esqueleto. Los iones son esenciales tanto para el equilibrio hídrico como para el equilibrio ácido-base y, en el caso de los animales, para el funcionamiento de nervios y músculos, la coagulación de la sangre, la formación de huesos y muchos otros aspectos del funcionamiento del cuerpo. Entre los principales cationes están el sodio, potasio, calcio y magnesio. Entre los aniones más importantes son los cloruros (Cl–), bicarbonato (HCO3–), fosfato (PO4 3–) y sulfato (SO4 2–). Las biomoléculas orgánicas están constituidas, principalmente, por C, H y O, y, con frecuencia N, P y S. Pueden agruparse principalmente en glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, y, en general son sintetizadas principalmente por los seres vivos, salvo el caso del metano (CH4) que puede tener un origen no biológico. M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. También se encuentran moléculas con algunos metales de transición llamados oligoelementos (Fe, Co, Ni, etc.). Los glúcidos (impropiamente llamados hidratos de carbono, carbohidratos o azúcares) son químicamente definidos como polialcoholes con un grupo aldehído o cetona. Presentan fundamentalmente dos funciones biológicas: energética (son la fuente de energía primaria que utilizan los seres vivos para realizar sus funciones vitales) y estructural. Comprenden a los monosacáridos (ribosa, glucosa, fructosa, etc.), disacáridos (lactosa, sacarosa, etc.) y polisacáridos (almidón, glucógeno, etc.). Los lípidos constituyen un grupo químicamente muy heterogéneo; suelen incluir a sustancias que presentan como características físicas las siguientes: ser insolubles en agua (disolvente polar) y solubles en disolventes orgánicos (apolares: benceno, éter, alcohol, acetona, gasolina, etc.), suelen ser untuosos al tacto y menos densos que el agua. Sus funciones son variadas, destacando entre ellas la energética, la estructural, la hormonal y vitamínica. Se clasifican en lípidos saponificables (principalmente los triglicéridos o grasas, ceras, fosfolípidos) y lípidos insaponificables (de función reguladora, destacan los isoprenoides o terpenos y los esteroides). Las proteínas o prótidos se componen de aminoácidos que se enlazan unos con otros mediante el enlace peptídico. Una cadena de unos pocos aminoácidos se denomina péptido (oligopéptido si contiene muy pocos y polipéptido si son más). A partir de un cierto número pasa a llamarse proteína (no hay un número determinado; en general los péptidos son fragmentos de proteínas). Presentan la mayor diversidad de funciones; prácticamente todos los procesos biológicos dependen de su presencia y/o actividad. Son proteínas casi todas las enzimas (catalizadores de reacciones metabólicas); muchas hormonas (reguladores de actividades celulares); la hemoglobina y otras moléculas (con función de transporte en la sangre); anticuerpos (encargados de la defensa natural contra infecciones o agentes extraños); los receptores de las células (a los que se fijan moléculas capaces de desencadenar una respuesta determinada); la actina y la miosina (responsables finales de la contracción muscular), etc. Los ácidos nucleicos (ADN y ARN) son polinucleótidos, es decir, polímeros de monómeros llamados nucleótidos (moléculas formadas por una base nitrogenada, un monosacárido y una molécula de ácido fosfórico). Desempeñan, tal vez, la función más importante para la vida: contener, de manera codificada, las instrucciones necesarias para el desarrollo y funcionamiento de la célula. El ADN se localiza en el núcleo (en las células eucariotas) y tiene la capacidad de replicarse transmitiendo así sus instrucciones a las células hijas que heredarán la información, por tanto, su función es contener la información genética de la célula. Esta información, previamente transcrita a ARN, puede ser traducida en proteínas. Presenta cuatro bases nitrogenadas (A, T, C, G; nunca uracilo), desoxirribosa y una molécula de ácido fosfórico. La molécula de ADN suele ser muy larga, con un gran peso molecular y está formada por una doble cadena de nucleótidos M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. El ARN es una molécula de cadena sencilla y mucho más corta que el ADN. Presenta ribosa, ácido fosfórico y cuatro bases (A, U, C, G; nunca timina). Según sus funciones se distinguen al ARN mensajero (ARNm: lleva la información desde el ADN a los ribosomas donde se traducirá a proteínas), al ARN de transferencia (ARNt: lleva los aminoácidos a los ribosomas para la síntesis de proteínas siguiendo la información del ARNm) y al ARN ribosómico (ARNr: constituye en una gran proporción a los ribosomas, orgánulos encargados de la síntesis de las proteínas). II. COMPETENCIAS • Reconocer las principales biomoléculas inorgánicas, utilizando con responsabilidad métodos y técnicas cualitativas para identificar y explicar las propiedades químicas y físicas del agua, y la presencia de sales minerales. • Reconocer las principales biomoléculas orgánicas, utilizando con responsabilidad métodos y técnicas cualitativaspara identificar glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. III. MATERIALES 1. Manual de práctica de Biología Celular. 2. Materiales y equipos de laboratorio. 3. Laboratorio virtual de Biología Celular del Programa de Estomatología-Piura. IV. PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS A) DETERMINACION DE LA TENSION SUPERFICIAL DEL AGUA: • Colocar en dos vasos de precipitación 50 ml de agua. En uno de los vasos espolvorear polvo de azufre en la superficie, en el otro colocar un clip. • Luego, en los vasos de precipitación colocar unas gotas de detergente diluido. • Observar, esquematizar e interpretar los resultados. SIN DETERGENTE CON DETERGENTE Interpretar: ..…………………… ……………………… ….…………………… ……………………… …………………….. …………………….... .......................... Interpretar: ..…………………… ……………………… ….…………………… ……………………… …………………….. …………………….... .......................... Interpretar: ..…………………… ……………………… ….…………………… ……………………… …………………….. …………………….... .......................... Interpretar: ..…………………… ……………………… ….…………………… ……………………… …………………….. …………………….... .......................... M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. B) CAPILARIDAD: • Colocar un extremo de un tubo capilar en un vaso con agua con colorante. • Observar, esquematizar e interpretar los resultados: El agua asciende por el tubo capilar. Interpretación: ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------- C) RECONOCIMIENTO DE SALES MINERALES: 1) DETERMINACIÓN DE CLORUROS: COMPONENTES T1 T2 Agua destilada 3ml ― Agua corriente ― 3 ml Nitrato de plata al 3% 4 gotas 4 gotas Observar, esquematizar e interpretar los resultados. Anotar las reacciones químicas: T1: …………………………………………………………………... …..…………………………..………………………………………. ………………..……………………………………………………… ……………………………………………………………………….. ………………..……………………………………………………… ……………………………………………………………………….. T2: …………………………………………………………………... …..…………………………..………………………………………. ………………..……………………………………………………… ……………………………………………………………………….. ………………..……………………………………………………… ……………………………………………………………………….. M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. T1 T2 T3 D) RECONOCIMIENTO/DETERMINACION CUALITATIVA DE GLÚCIDOS: 1) DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALMIDÓN: • Colocar en una placa Petri las siguientes muestras: trozos de papa, pan, galleta, queso, arroz. Luego agregar a todas las muestras 1 a 2 gotas de lugol. • Observar, esquematizar e interpretar los resultados: Interpretación: -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- 2) DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE GLUCOSA: COMPONENTES T1 T2 T3 Glucosa 3 ml ― ― Orina normal ― 3 ml ― Orina de diabético ― ― 3 ml Fehling A y B 3 ml 3 ml 3 ml Observar, esquematizar e interpretar los resultados: M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. T1 T2 T3 Interpretación: -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- E) RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS 1) Solubilidad: COMPONENTES T1 T2 T3 Aceite 3ml 3 ml 3 ml Agua 3 ml. ― Cloroformo ― 3 ml ― Benceno ― ― 3 ml Observar, esquematizar e interpretar los resultados: Interpretación: -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. T1 T2 T3 F) RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS: 1) Desnaturalización: COMPONENTES T1 T2 T3 Albúmina de huevo 3 ml 3 ml 3 ml Nitrato de plata 3 ml ― ― HCl concentrado ― 1 gota ― Calentar ― ― 1 min Observar, esquematizar e interpretar los resultados: Interpretación: -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- G) RECONOCIMIENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS: • Identificar en la figura de la izquierda los componentes estructurales de los nucleótidos (desoxirribosa o ribosa, base nitrogenada y fosfato), las bases nitrogenadas (pirimidinas y purinas) y la estructura química polinucleotídica del ADN y del ARN. • Completar en la figura de la izquierda según corresponda. M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. (1) ………………………………… (2) ………………………………… (3) ………………………………… (4) ………………………………… (5) ………………………………… (6) ………………………………… (7) ………………………………… V. DISCUSIÓN -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- VI. CONCLUSIONES -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- VII. CUESTIONARIO 1. Describir brevemente otros métodos y/o técnicas empleadas para reconocer las biomoléculas inorgánicas y/u orgánicas de nuestro organismo: ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2. ¿Qué importancia tiene para el médico el reconocer debidamente a las biomoléculas inorgánicas y orgánicas? ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 3. Mencionar algunas de las biomoléculas inorgánicas u orgánicas de interés clínico/diagnóstico en el área de la medicina ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 4. ¿Cuál es la importancia del líquido tensoactivo o surfactante en el mecanismo de respiración pulmonar (hematosis)? ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 5. Explique muy brevemente respecto a la importancia de los glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos para nuestro organismo? ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 3. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- M. de P. de Biología Celular, 2021 Programa de Medicina Prof.: Blgo. Marino Olivares de la Cruz, Blgo. Ronald Vilchez S., M.C. Edward Ipanaque B., Blga. Carmen Alburqueque A., M.C. Claudia Larrea V., M.C. Martha Gómez P., Blga. Katherine Medina V., Blgo. Eduardo Requelme L. Instrumento de Evaluación de Sesiones Prácticas PRÁCTICA N° ___ Asignatura : Biología Celular Semestre : 2021-1 Ciclo: I Sección: ………… Tema : ………………………………………………………………… Fecha: / / Alumno : ………………………………………………………………… ITEM CRITERIO INDICADORES Y PUNTUACIÓN NOTA A Asistencia y puntualidad. 0 No asistió a práctica. 1 Asistió dentro de los 15 minutos de tolerancia. 2 Asistió puntualmente. B Correctamente vestido – Bioseguridad. 0 No portó guardapolvo – no ingresó a práctica. 1 Cumple parcialmente las medidas de bioseguridad en relación a vestimenta. 2 Cumple completamente las medidas de bioseguridad en relación a vestimenta. C Estudio y revisión previa del protocolo. 0 No contestó preguntas propuestas. 2 Contestó parcialmente preguntas. 4 Contestó correctamente preguntas. D Orden en el trabajo de laboratorio. 0 No trabajó, mostró desinterés por el trabajo en su mesa. 1 Trabajó en su mesa de manera desordenada. 2 Trabajó en su mesa de manera ordenada. 3 Trabajó ordenadamente y dejó material y ambiente limpio. E Manejo de materiales, reactivos y equipos. 0 No reconoce material ni equipos de laboratorio. 1 Identifica el material y equipo de laboratorio pero manipula con dificultad. 2 Identifica y manipula adecuadamente el material y equipo de laboratorio. 3 Manipula adecuadamente el material de laboratorio observando en todo momento normas de bioseguridad. F Presentación del informe de trabajo práctico. Fundamentación e interpretación de resultados. 0 No presentó informe. 2 Presentó parcialmente informe. Interpretó parcialmente los resultados. 4 Presentó totalmente informe. Interpretó correctamente los resultados. 6 Presentó totalmente y correctamente informe. Interpretó correctamente los resultados. Aportó información relevante. Nota La suma de puntos acumulados corresponde a la nota final de la sesión práctica ……………………………………………………. Docente Evaluador Grupo
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