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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE BIOTECNOLOGIA INTEGRANTES: Álvarez Huaytan Katherine Aracely Herrera Perez Delfina Karen Otiniano Jiménez Patricia Alexandra Palacios Pascual Ainnie Mackenzy Rodríguez Espejo Manuel Isaías DOCENTE: Mg. William Capa CURSO: Ingeniería Genetics TEMA: Práctica N° 5 CICLO: VI Nuevo Chimbote-Perú 2021 PRACTICA N°5 METODOLOGIA Para determinar el tamaño de fragmentos en el gel de agarosa, una regla es colocada en la fotografía del gel a lo largo de marcador de peso molecular o ladder (fig. 1), o con más precisión, se trabaja con programas que analizan y procesan imágenes. La distancia del fondo del gel hasta cada banda revelada fue medida y registrada (tabla 1). Las distancias obtenidas de cada banda son ploteadas en un papel semilogarítmico y se construye una línea de tendencia que une la mayoría de puntos posibles (fig. 2). Fig. 1. Medida de la distancia de migración de cada banda del ladder de 100 bp Tabla 2. Distancias de migración de los fragmentos del ladder de 100 bp Fig. 2. Ploteo de la distancia de cada banda del ladder de 100 bp en un papel semilog. Cual es el tamaño del inserto mostrado en el carril 4 del gel de la fig. 1. Determinar el tamaño del fragmento: a) Usando un papel semilogaritmico b) Por regresión lineal usando Microsoft Excel También, cual es el tamaño del inserto mostrado en los carriles 5, 6 y 7 del gel de la fig. 1. Se debe trabajar con medidas aproximadas. III. RESULTADOS: III.1. GRÁFICA LINEAL Gráfica 1. Relación entre el tamaño de fragmentos en pares de bases y la distancia en cm en los datos obtenidos de los diferentes carriles, por regresión lineal. ECUACION DE LA RECTA La ecuación de la recta obtenida en el gráfico 1 es la siguiente: y = -0.0029x + 6.0424 Sin embargo, se busca hallar el tamaño de los fragmentos por ello despejamos en función a x: Una vez obtenida la función, pasamos a reemplazar los datos de la variable y (distancia en cm) · En el carril 4: Medida 4.1 cm: X=670 bp · En el carril 5: Medida 5.3 cm: X=256 bp · En el carril 6: Medida 6.4 cm: X= -123 bp · En el carril 7: Medida 4.4 cm: X=566 bp III.2. GRÁFICA LOGARITMICA Gráfica 2. Relación entre el tamaño de fragmentos en pares de bases y la distancia en cm en los datos obtenidos de los diferentes carriles, por método logarítmico. ECUACION DE LA RECTA La ecuación de la recta obtenida en el gráfico 1 es la siguiente: y = -1.794ln(x) + 15.295 Sin embargo, se busca hallar el tamaño de los fragmentos por ello despejamos en función a x: Una vez obtenida la función, pasamos a reemplazar los datos de la variable y (distancia en cm) · En el carril 4: Medida 4.1 cm: X=513 bp · En el carril 5: Medida 5.3 cm: X=263 bp · En el carril 6: Medida 6.4 cm: X=142 bp · En el carril 7: Medida 4.4 cm: ( INGENIERÍA GENÉTICA ) X=434 bp 1. Diaz Granados D., Cristina, & Chaparro-Giraldo, Alejandro (2012). Métodos y usos agrícolas de la ingeniería genética aplicada al cultivo del arroz. Revista Colombiana de Biotecnología, XIV(2),179-195.[fecha de Consulta 7 de Noviembre de 2021]. ISSN: 0123- 3475. Disponible en: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77625401018 2. Bustillo-Avendaño, E; Ibáñez, S; Sanz, O; Sousa Barros, JA; Gude, I; Perianez-Rodriguez, J; Micol, JL; Del Pozo, JC; Moreno-Risueno, MA; Pérez-Pérez, JM. (2018). "Regulation of Hormonal Control, Cell Reprogramming, and Patterning during De Novo Root Organogenesis". Plant Physiology. DOI: 10.1104/pp.17.00980". 3. Ferrini, A. (2021). Introducción a la PCR. Investigación en genómica. http://www.news- courier.com/genomics/articles/an-introduction-to-pcr-345445 4. Bolívar Zapata, F. G. (2017, 3 diciembre). La doble hélice del ADN, la molécula de la vida y sus revolucionarias implicaciones | Tiempos de revoluciones | 2o Encuentro \’Libertad por el Saber\’ - Actividad. El Colegio Nacional. https://colnal.mx/agenda/la-doble-helice-del- adn-la-molecula-de-la-vida-y-sus-revolucionarias-implicaciones-tiempo-de-revoluciones/ 5. Rueda Chacón N. (2019). Actualización de los conceptos asociados con la regeneración celular en plantas. [Monografía presentada para optar al título profesional como Microbióloga Industrial] Universidad de Santander. Tamaños de fragmentos vs Distancia cm y = -0.0029x + 6.0424 R² = 0.872 1500 1400 1300 1200 1100 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 2.2999999999999998 2.35 2.4500000000000002 2.5499999999999998 2.7 2.85 3 3.2 3.5 3.9 4.1500000000000004 4.55 5.0999999999999996 5.85 7 Tamaños de fragmentos (bp) Distancia (cm) Tamaños de fragmentos vs Distancia cm y = -1.794ln(x) + 15.295 R² = 0.998 1500 1400 1300 1200 1100 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 2.2999999999999998 2.35 2.4500000000000002 2.5499999999999998 2.7 2.85 3 3.2 3.5 3.9 4.1500000000000004 4.55 5.0999999999999996 5.85 7 Tamaños de fragmentos (bp) Distancia (cm)
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