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1 DUPLICACION DEL ADN 2 CARACTERÍSTICAS DE LA DUPLICACIÓN DEL ADN 1) SEMICONSERVATIVA: � Este mecanismo fue confirmado por Meselson y Stahl en 1957. � Hasta entonces se proponían 3 mecanismos posibles de replicación: � CONSERVATIVO: Una molécula de ADN hija con dos cadenas nuevas y otra molécula de ADN hija con las dos cadenas originales. � SEMICONSERVATIVO: Cada molécula hija de ADN contiene una cadena original y una cadena nueva recién sintetizada. � DISPERSIVO: Cada molécula hija de ADN contiene dos cadenas que conservan segmentos originales y segmentos nuevos recién sintetizados 3 CARACTERÍSTICAS DE LA DUPLICACIÓN DEL ADN 2) COMIENZA EN LOS ORIGENES DE REPLICACION: - Los Ori (orígenes de replicación) son secuencias específicas del ADN reconocidas por proteinas iniciadoras. - Un solo origen de replicación en el cromosoma procariota. - Varios orígenes de replicación en cada cromosoma eucariota. 3) SEPARACION DE LAS DOS CADENAS DE ADN. - Se separan por ruptura de los puentes de H. - Se forma la burbuja de replicación que contiene dos horquillas de replicación. 4) BIDIRECCIONAL TANTO EN PROCARIOTAS COMO EN EUCARIOTAS 4 MULTIPLES ORIGENES DE REPLICACION EN EUCARIOTAS 5 ENZIMAS QUE PARTICIPAN EN LA DUPLICACION DEL ADN HELICASA: Separa las dos cadenas del ADN rompiendo los puentes de H entre las bases complementarias. Esto produce “tensiones”. TOPOISOMERASAS I y II (girasas) Eliminan las tensiones creadas por la helicasa. Hacen un corte o dos respectivamente (por delante de la helicasa) para liberar las tensiones del ADN. SSBP (proteínas de unión a simple cadena): Evitan que las cadenas separadas por la helicasa se vuelvan a unir antes de ser copiadas. 6 ENZIMAS QUE PARTICIPAN EN LA DUPLICACION DEL ADN ADN POLIMERASA: � Es la enzima clave del proceso. � Polimeriza en dirección 5’ a 3’. � Lee las cadenas molde de ADN en dirección 3’ a 5’. � Las cadenas nuevas de ADN son complementarias y antiparalelas respecto a las cadenas molde � Sustratos: dATP, dGTP, dCTP, dTTP Los sustratos aportan la energía para el proceso 7 ADN POLIMERASA En procariontes: ADN pol I: elimina los cebadores y rellena con ADN ADN pol II: reparación del ADN ADN pol III: verdadera polimerasa � La ADN pol no puede “iniciar síntesis” (puede “continuar síntesis”). � Necesita un cebador o primer desde donde continuar la síntesis. � La enzima PRIMASA (ARN polimerasa) sintetiza cortos segmentos de ARN que serán utilizados como cebadores por la ADN polimerasa En eucariontes: ADN pol α: sintetiza la cadena retrasada ADN pol ɗ: sintetiza la cadena contínua ADN pol β: reparación del ADN 8 PROCESO DE DUPLICACION DEL ADN � Union de la proteína iniciadora al Ori � La helicasa abre la horquilla � SSBP mantienen separadas las cadenas � Primasa sintetiza los cebadores � ADN pol sintetiza las nuevas cadenas de ADN a partir de los cebadores � Una cadena se sintetiza en forma continua (cadena conductora, lider, adelantada) � Otra cadena se sintetiza en forma discontinua (cadena retrasada) � Eliminación de los cebadores y reemplazo por ADN � Ligasa une segmentos de ADN en la cadena retrasada � Topoisomerasas eliminan tensiones � Fragmentos de Okazaki: segmentos de ADN discontínuos sobre la cadena retrasada PI H H H H PI SSBPSS BP 9 TELOMERASA � Cuando finaliza la duplicación del ADN, la remoción de los cebadores en los extremos del cromosoma producen un acortamiento del telómero. � La TELOMERASA previene el acortamiento cromosómico. � La telomerasa es una ribonucleoproteína que hace transcripción reversa. � Alarga el extremo 3’ de la cadena de ADN a partir de un molde de ARN. � Luego el extremo alargado se pliega y aporta un extremo 3’ OH a partir del cual se completa el telómero.
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