MICRO bolillero resuelto

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FINALES DE MICRO
A) 1- Espora bacteriana. Composición y esquema. Tinción.
Cuando las bacterias se hallan en condiciones desfavorables de nutrición (especialmente N y o carbono) comienzan a morir, pero hay un grupo de microorganismos que en iguales circunstancias pueden continuar viviendo en estado latente debido a la formación de la espora o endospora que constituye una verdadera forma de resistencia bacteriana.
No poseen actividad metabólica alguna, son muy refractivas y extraordinariamente deshidratadas (10-30% de agua de una célula vegetativa), muy resistentes al calor, condiciones ambientales adversas y agentes químicos.
Los miembros de 3 géneros son capaces de formar endoesporas: Bacillus, Clostridium y sporosarcina (Gram + todas)
La resistencia al calor se debe en parte a su estado deshidratado y al dipicolinato de calcio. 
Se inicia la formación con la migración de una región nuclear condensada hacia uno de los extremos de la célula, se forma un núcleo terminal mediante el crecimiento invaginante de la membrana celular, la que lleva a producir una estructura membranosa doble que van a formar las capas especiales que constituirán la envoltura celular:
· Núcleo o centro: es el protopasto de la espora, contiene un cromosoma, el aparato sintetizador de proteínas y un sistema generador de energía basado en degradación de la glucosa
· Envoltura:
 - Pared de la espora: la capa más interna que rodea la membrana interna. Contiene mureina normal y se transforma en la pared celular de la célula vegetativa germinante
 - Corteza: entre la pared de la espora y la capa o cubierta. Formada por un tipo especial de péptido glucano laxo en forma de anillos concéntricos.
 - Cubierta o capa o cutícula: compuesta de una proteína semejante a la queratina que contiene enlaces disulfuros. Debido a su impermeabilidad es responsable de la resistencia a agentes químicos y colorantes
· Exosporio: cubierta fina y delicada que es una proteína de la membrana que contiene algo de glúcidos.
Tinciones: 
· Wirtz: las esporas se observan color verde (colorante primario verde malaquita) y la célula vegetativa rosada (2dario fucsina fenicada)
 2- Virus: definición. Replicación viral. Lisogénesis.
Los virus se encuentran en el borde mismo de la vida, entre la vida y la materia inorgánica dependiendo del momento en el que se los estudie, por ello es son difíciles de definir. Son partículas infecciosas de muy pequeño tamaño (20-350 nm) constituidas por una estructura química bastante simple que se caracteriza porque se multipican exclusivamente en células vivas, lo que los convierte en parasitos intracelulares obligados. Para ser considerados virus en su constitución deben tener solamente un tipo de ácido nucleico ARN o ADN.
La estructura es un ácido nucleico recubierto por una capside de naturaleza proteica. Pueden poseer una envolutra o no. En conjunto el acido nucleico mas la capside se denominan nucleocapside, mientras que el conjunto de acido nucleico y proteínas íntimamente relacionadas (transcriptasa por ej) se denomina core.
La replicación varia según se trate de virus ADN o ARN de cadena simple o doble y su polaridad, pero los pasos son similares:
· Adsorción o fijación: es cuando toma contacto con la celula blanco. El virion por medio de una proteína o glicoproteína denominada antirreceptor (ej hemaglutinina) se adsorbe a la membrana de la celula blanco en un sitio denominado receptor. Depende de las fuerzas ionicas, el pH, la naturaleza del medio y la temperatura. La ausencia de receptores para el virus impide la adsorción y habrá resistencia a la infección. El mantenimiento de la adsorción se debe a uniones químicas como puentes de hidrogeno, fuerzas de Van der Waals y fuerzas electroestáticas. Son necesarias pues los virus y las células tienen cargas negativas y se repelen. La presencia de Ca o Mg favorecen la adsorción
· Penetracion: puede producirse por uno de los siguientes mecanismos: viropexis o englobamiento en donde los viriones son englobados como vacuolas fagociticas (es el modo mas común); fusión de membranas de la celula y el virion (por ejemplo herpes); y penetración directa que es menos frecuente y se produce en algunos picornavirus, adenovirus y reovirus.
· Escape o decapsidación: cuando libera el acido nucleico infeccioso de la capside a efectos de lograr su expresión. Es distinto según el tipo de virus. El acido nucleico puede o no liberarse totalmente, y la liberación puede tener lugar: en la misma membrana (ej virus de la influenza que se funde con la m citoplasmática), en el citoplasma (ej picornavirus) ,en los poros de la membrana nuclear (ej adenovirus que pierde parte en citoplasma y parte en el nucleo) o en los lisosomas (ej reovirus )
· Eclipse: luego de que ha liberado total o parcilamente pierde su infectividad a otras células por eso se denomina eclipse y dura hasta que sea posible hallar nuevas partículas virales dentro de la celula. Se pueden describir momentos como : transcripción, traducción, (dos periodos, temprano produciendo ARNm precoz que llevan a los ribosomas de la celula hospedadora la info para síntesis de proteínas tempranas virales inhibiendo la síntesis de proteínas y AN de la celula parasitada, luego la replicación del ac nucleico ubicado entre el peridoo temprano y tardío y el periodo tardío durante el cual finaliza la sintiesis de acido nucleico viral y comienza el resto de los componentes virales de la capside enzimas,etc) y, replicación (en citoplasma utilizando arn viral como plantilla, y se lleva a cabo mediante ez replicasa ) 
· ensamble y maduración viral: etapa en la que el acido nucleico viral entra en contacto con su capside. En la mayoría de los ADN ocurre en el nucleo (exepto poxvirus) en cambio en los ARN ocurre en el citoplasma (exepto orthomixovirus)
· Liberación:se produce por lisis celular en los virus sin envoltura ADN. En los ADN con envoltura por brotacion a nivel de la membrana citoplasmática o de la membrana nuclear. Los virus ARN se liberan primariamento por extrusión, o los desnudos por citolisis y los que poseen envoltura por gemación.
La LISOGENESIS es un proceso que se produce en ciertos fagos denominados lisogenicos o atemperados, en los cuales el ADN viral en lugar de producir los pasos vistos anteriormente, se integra en el genoma celular (estado de profago). La bacteria hospedadora no es afectada por este fago pero se hace resistente a la infección adicional por un fago afin. Por algún mecanismo el fago es reactivado en un proceso denominado inducción y el estado lisogenico es transformado a lítico. Se llama virogenia cuando es referente a virus animales.
 3- Bacillus anthracis: morfología, cultural, diagnóstico, factores de virulencia.
· Morfologia:
· Es un bacilo recto grande (1-3 x 2-8 micras) con extremos truncados
· Gram positivo
· Inmóvil 
· Presenta capsula polipeptidica formada por polímeros de acido poliglutamico y solo se desarrolla en el hospedador o in vitro en medios con agregado de suero, bicarbonato y anhídrido carbonico.
· Forma esporas elipsoidales de ubicación central no deformante, que no se detectan en el individuo infectado y se desarrollan en contacto con oxigeno en condiciones mencionadas en punto 1. Se produce la esporulación al final de la fase de crecimiento exponencial y el protoplasma residual del bacilo se desintegra una vez que las esporas están formadas.
· Cultural:
Es una bacteria aerobia y anaerobia facultativa. No es exigente y se desarrolla en medios de cultivo simples entre las 24-36hs a 37C con un limite de T de 12-44C. 
Se puede sembrar en agar cerebro corazón formando colonias rugosas, grandes opacas.con bordes irregulares que tienen el aspecto a ´´cabellera de medusa´´. En los extendidos a partir de ella se observan cadenas largas de bacilos con esporas centrales no deformandes dando aspecto a ´´caña de bambu´´, en agar sangre (no son hemolíticos), en agar suero con HCO3 y CO2 para expresar capsula, aquí las colonias son mucoides y blanquecinas. 
En medios liquidos produceturbidez con floculos finos y sedimento en el fondo. 
En tubos de gelatina crece desde la superficie hacia el fondo semejando un pino invertido y no la licua o lo hace muy lento.
Produce catalasa y fermenta varios hidratos de carbono con producción de acido.
Los medios de cultivo con agrecado de 0,5 UIml de penincilina inducen la transformación de los bacilos en estructuras esféricas redondeadas similares a ´´collar de perlas´´
Presenta sensibilidad a un bacteriófago denominado fago gamma
· Diagnostico:
Bacteriologico: incluye la demostración de bacilos grampositivos capsulados en extendidos de sangre o tejidos y en desarrollo de medios de cultivos simples, la ausencia de hemolisis sobre agar sangre, las características de las colonias antes mencionadas y la ausencia de movilidad. La prueba del collar de perlas y la sensibilidad al fago gamma completan la identificación. Se puede por PCr confirmar la presencia de los genes codificnates para la toxina y la capsula.
Serologico: la metodología de aplicación y validez internacional es la de ascoli-valente. Consiste en una prueba de termoprecipitacion en medio liquido para detectar b anthracis como antígeno a partir de un tejido. La muestra procedente del individuo sospechoso se coloca en solución salina y se calienta en baño maria a 100C 5min. Se filtra por una gasa. Se enfrenta en un tubo de ensayo con suero inmuno, conocido, que posee anticuerpos capaces de formar un precipitado al unirse con el antígeno especifico. La aparición de un anillo blanco en la zona de interfase en un lapso de 15min indica unión antígeno anticuerpo y es positiva.
Experimental: no se acoseja el empleo de animales de lab en forma indiscriminada por eso no se utiliza. Se puede inocular ratones o cobayos por via subcutánea. Los ratones mueren entre las 12-24hs y los cobayos a no mas de 72hs según la virulencia de la cepa inoculada. La muerte es por falla respiratoria y se presenta exudado sanguinolento por las aberturas naturales, la sangre sin coagular. En la necropsia se detecta un edema gelatinoso subcutáneo generalizado sin hemorragias. El bazo se encuentra infartado con barro esplénico. Luego se realizan improntas de bazo y de hígado y se observan bacilos capsulados y sin esporas.
-Factores de virulencia: depende principalmente de dos factores la capsula y la toxina. La capsula contribuye a que la bacteria evada las defensas del hospedador evitando la fagocitosis y produciendo una septicemia. Es delgada, no antigénica compuesto por polímero de acido glutámico.
La toxina de Banthracis se caracteriza por poseer 3 componentes
1. Antígeno protector (PA)
2. Factor letal (LF)
3. Factor edema (EF)
Se secretan separados al medio pero no presentan acción toxica si se inoculan por separado, y su asociación de a dos conduce a la formación de un complejo llamado toxina binaria (tipo A B).
PA+LF: por via endovenosa produce la muerte
PA+EF:por via intradermica produce edema de piel
La acción de las toxinas implica un reconocimiento de las células blanco mediado por PA y seguido de la endocitosis con el pasaje de LF y EF al citoplasma. La PA es una proteína con varios dominios funcionales en su interior. La región C terminal es responsable de la unión al receptor de membrana que cuando se une se produce una proteólisis limitada de la molecula liberando PA20 y quedando unido PA63 que es mas afin por EF y LF al cual se unen y se produce la endocitosis. 
EF es una enzima con función adenilato ciclasa que aumenta el AMPc intracelular y produce una actividad descontrolada de las quinasas lo cual desencadena el cuadro de edema tisular. La enzima es dependiente de calmodulina y Ca
LF es responsable de los síntomas de shock séptico que se produce en la infección sistémica. La actividad intracelular produce un aumento y actividad descontrolada de las citoquinas de alarma IL 1, IL8 y TNalfa. Es una enzima metaloproteasa vasculotoxica. En el citoplasma se encuentra asociada a vesículas.
 4- Tuberculina. Composición y tipos.
Koch cultivó M.tuberculosis en caldo biliado glicerinado durante 4-6 semanas. Luego lo somete a vapor (ebullición) hasta concentrarlo 10 veces, es decir reducirlo en un 10% su volumen. Lo filtra y obtiene la OT o vieja tuberculina que posee es un antígeno proteico compuesto por: productos de cultivo, metabólicos, restos de pared celular y de proteínas.
A partir de esta OT otro investigador precipito el filtrado agregando acido tricloracetico para purificar el extracto y conseguir el antígeno proteico purificado. PPD
 5- Togavirus: géneros, clasificación, especie de importancia, ciclo viral, 
 diagnóstico.
:
· Alphavirus: trasnmitidos solo por picaduras de vectores artrópodos virus de las encefalitis equina del este EEE, del oeste EEO y de Venezuela EEV
· Rubivirus: virus de la rubeola humana
Es un virus ARN de cadena simple +. 
70-80nm
Esférico de simetría icosaedrica
Envuelto que deriva de la membrana plasmática de la celula hospedadora y fuertemente unido a la capside.
Sensibles a éter, cloroformo, solventes organicos y detergentes. Son estables a 4C pero no estables a 56C y ph acidos.
El genero de importancia son los alphavirus debido a que las encefalomielitis equinas son zoonosis en sudamerica la EEO es de predominio en argentina. La replicación se realiza en el citosol de las células infectadas.
el modo primario de transimision de los alphavirus a las aves y mamíferos es a través de la picadura de mosquitos. Los mosquitos a su vez se infectan de un hospedador viremico y entre 4-10 dias después el virus se localiza en las glándulas salivales y permanece persistentemente infectado. Posteriormente a la picadura, el virus se introduce en los capilares y replica en el endotelio vascular y en los monocitos para luego diseminarse por via sanguínea y replicar en los musculos, articualciones, piel o cerebro.
El diagnostico presu tivo puede realizarse en base a los signos clínicos neurológicos coincidiendo con épocas calurosas. Las técnicas serológicas recomendadas son la seroproteccion en ratones o huevos embrionados o la virus neutralización en cultivos celulares, inhibición de la hemaglutinación inmunofluoresencia y neutralización en placa. Monocapas de cultivos primarios de embriones de pollo patos o riñon de hámster o líneas vero hela. Nivel de bioseguridad 3
B) 1- Diferencias estructurales y fisiológicas entre eubacterias, micoplasmas, 
 clamidias y rickettsias.
	
	Estructura
	Fisiologia
	Eubacterias
	Celulas procariotas con pared celular. La celula esta compuesta por citoplasma, ribosomas, inclusiones granulares, región nclear que carece de membrana y formado por una molecula de doble cadena ciruclar de ADN. Plasmidos que poseen moléculas de ADN extracromosomales que se duplican autónomamente. Membrana citoplasmática. Y la pared celular que puede ser de 3 tipos: gram positvio compuesta principalmente por péptidoglicano que esta compuesto por Nacetilmuramico y Nacetil glucosamina unidos por enlaces beta 1-4 y a su vez cadenas de aminoácidos que se unen por enlaces peptididos.Gram negativas que tienen el péptido glicano mas pequeño y una membrana extera compuesta por fosfolípidos, LPS y proteínas. El LPS tiene una estructura de lípido A que es la porción toxica sumado a un nucleo polisacárido y el polisacárido o. y luego las acido alcohol resistentes que presentan una composición con ceras y acido micolico y trhealosa.
	
Pueden poseer capsula, endosporas, flagelos, pilis.
	Micoplasmas
	Son células procariotas de vida libre pero de menor tamaño. Se caracterizan por carecer del material genético para formar la pared celular, están rodeados por una membrana citoplasmática integrada por lípidos proteínas y colesterol. Forman colonias en forma de huevos fitos y son formas filtrables por su naturaleza felxible y pequeño tamaño.
	Se dividen por fision binaria. Se tiñen con coloraciones especiales, giemsa y romanowsky. Incorporan esteroles a partir del medo de cultivo con suero equino y extracto de levaduras. La presencia de esteroles les confiereresistencia a las variaciones osmóticas. Son resistente a los antibióticos que tienen acción sobre la PC y también a la lisozima. Son sensibles a sustnancias que disminuyen la tensión superficial el yodo y compuestos fenolicos
	Clamidias
	Son bacterias muy pequeñas de aspecto cocoide con cuerpos elementales. Poseen una pared celular típica de células procariotas, ambos acidos nucleicos (ADN y ARN) 
	Son parasitos intracelulares. Tienen un ciclo de desarrollo característico con dos tipos celulares, morfológica y funcionalmente distintos: el cuerpo elemental que es denso y resiste las condiciones de vida libre por lo que su función es la propagación o diseminación denominándose forma infectante. El otro es el cuerpo reticular que es de mayor tamaño menos denso y labil en condiciones de vida libre y es el que se divide en la celula infectante por fision binaria hasta formar una inclusión en la celula infectada que se rompe y libera los cueropos elementales nuevos.
	Rickettsias
	Son delgados y dimiutos. De forma bacilar, cocoide, cocobacilar y algunas con gran pleomorfisimo. Son inmóviles no forman esporas. Tienen ;C y Pc esta ultima contiene acido muramico. Poseen ADN y ARN un sistema metabolico complejo ya que tienen citocromo completo, pueden realizar fosforilacion y trasnporte de electrones y sintetizar su propio ATP sin embargo los nutrientes son obtenidos a partir del huésped por lo que tienen una MC mas laxa que las bacterias de vida libre
	Se tiñen con giemsa, macchiavelo y Castañeda. Son parasitos intracelulares por lo que se cultiva en saco vitelino y en cultivos celulares. Son muy sensibles al calor y desecación y a los productos químicos y la transmisión se realiza mediante vectores artrópodos hematófagos. Son sensibles a tetraciclinas.
 2- Radiaciones a) tipos y mecanismos de acción b) aplicaciones de c/u.
Las radiaciones se dividen en ionizantes y no ionizantes.
Las ionizantes comprenden a los rayos alfa, beta, gamma y rontgen (x). todos ellos poseen suficiente energía para empujar los electroes fuera de las moléculas y ionizarlos, mediante una reacción en cadena. Cuando estas radiaciones pasan a través de las células se produce hidrogeno libre, radicales hidroxilo y algunos peróxidos que ocasionan diferentes tipos de daño intracelular. Como el daño recae en una gran variedad de constituyentes celulares, las radiaciones ionizantes son poco especificas en sus efectos pero con alto poder de penetración.
Solo los rayos gamma son esterilizantes en el laboratorio y se usan para materiales y sustancias termolabilas, alimentos y vacunas. Son emitidos por ciertos isotopos radiactivos como el cobalto 60.se debe contar con una fuente de radiaciones adecuada y controlada que no afecte al operador y al ambiente.
Los rayos X son letales para los microorganismos pero no son practicos para esterilizar por su elevado costo de producción en cantidades suficientes y por ser difíciles de manejar. Solo se emplean para producir mutaciones.
Las radiaciones no ionizantes comprenden a las radiaciones ultravioletas e infrarrojos. La porción uv incluye radiaciones desde 150 a 3900 amstrong pero las de mayor eficacia bactericida son las de 2650 a. Es absorbida por muchos materiales pero es en los acidos nucleicos donde causa el mayor daño. Esta absorción se efectua sobre todo en sus bases pirimidicas donde pueden formar un dimero entre dos bases vecinas que a menos que sea desdoblado por enzimas intracelulares especificas inhibe la replicación del ADN. Puede ser reversible el daño del adn (foto reactivación, reparación en la oscuridad y reparación por recombinación). Se utilizan para aire y superficies, salas de quirófanos y ambientes y cabinas de seguridad.
 3- B. anthracis: morfología, tamaño, coloración, cultivo, mecanismos de 
 agresión, diagnostico de laboratorio, otras especies de interés.
Otras especies de interés son Bacullus subtilis que es la especie tipo, o Bacillus cereus que produce ETA. Las diferencias morfológicas con B anthracis son, que los demás bacillus no poseen capsula, son móviles, hemolíticos, la prueba ascoli Valente es débil, licuan la gelatina completamente y no responden al fago gamma.
 4- Mecanismos de agresión de Streptoccus spp, Clostridium perfringens, 
 Mycobacterium tuberculosis.
Streptococcus:
· Hemolisinas: estreptolisina O que se inactiva en presencia de O2. Estreptolisina S, estable en presecia de o2
· Proteina M: con propiedades antifagociticas, interfiere en el deposito del C3 del sistema del complemento sobre la sup de la bacteria
· Acidio lipoteicoico; media la adhesión de las bact a las células epiteliales
· Capsula: propiedades antifagociticas
· Fibrolisina: estptocinasa, sustancia que transforma el plasminogeno en plasmina 
· Hialuronidasa: permite la propagación de los microorganismos
· EStreptodornasa: despolimeriza el adn y origina la viscosidad del pus
· Toxina eritrogena: exotoxinas pirógenas A, B y C
Clostridium perfringens:
· Lecetinasa
· Fosfolipasa
· Gelatinasa
· Colagenasa
· ADNasa
· PRoteasa
· Hemolisina
· Toxinotipos A, B, C, D y E: según las toxinas mayores alfa, beta, épsilon e iota.
· Capsula
· Enterotoxina CPE
Mycobacterium tuberculosis:
· Parasito intracelular facultativo
· Componentes de la pared celular: dimicolato de trhealosa, sulfatidos evitan la unión del fagosoma con el lisosoma. Provocan una rtta inmune exacerbada que forma granulomas en el propio huésped
 5- Virus rábico: características, cultivo, tipos, transmisión, diagnóstico de 
 laboratorio.
Caracteristicas
· Virus ARN simple polaridad negativa
· Polimerasa asociada al ARN
· Simetria helicoidal
· Forma de bala, con dos extremos redondeados y los otros rectos
· Envueltos con una doble membrana de composición glucoproteica, con espiculas
· Medida 80x180 nm
· Los viriones replican en citoplasma y salen por gemación y entran por fusión
· Sensibles al éter, cloroformo, ebullicino, desinfectantes, detergentes
· Forman cuerpos de negri (cuerpos de inclusión intracitoplasmaticos)
· Proteínas estructurales: G, M (en las espiculas o peplomeros), N y NS ligadas al core del virus o nucleocapside, y L (ARN plimerasa íntimamente ligada al ARN del virus)
· Es ZOONOSIS
Cultivo:
Linea celular BHK 21, VERO
Tipos biológicos y transmisión:
Virus urbano o calle: causante de casas clínicos naturles de rabia. Es patógeno por via periférica, provoca la aparición de cuerpos de inclusión de negri en las neuronas infectadas, provoca encefalitis rábica mortal y si se lo inocula a ratones adultos entre los 7 y 21 dias los mata.
Virus selvático: produce cuerpos de inclusión de negri, y se da por mordedura del murciélago hematófago. Es el que da la rabia parisiante o muda paralitica de los bovinos.
 
Virus fijo: es la cepa vacunal. Se denomina fijo porque se fijo el período de incubación en 7 dias. Es logrado por pasteur en el laboratorio mediante pasajes intracerebrales del virus calle en conejos. Paralelamente el virus en los pasajes perdió la capacidad de ser pateogeno por via perifierica, no alcanzando el SNC lo que es muy importante en vacunas ya que no enferma pero conserva sus propiedades inmunizantes. No produce cuerpos de inclusión de Negri,e inoculado a ratones por via IC los mata en 7 dias.
Diagnóstico de laboratorio:
 Diagnostico posmortem, se realiza para determinar la rabia luego de la muerte, se emplean muestras de encéfalo de animales muertos cons síntomas compatibles a la enfermedad
Se toman porciones de ambos cuertos de Ammon, corteza cerebral de ambos lados, cerebelo y bulbo raquídeo. También puede procesarse glándulas salivales, ganglios nerviosos, ojos y anexos, folículos pilosos.
Para diagnostico intra vitam, se toman imporntas corneales, biopsias de piel y folículos pilosos del cuello, muestras de saliva e hisopado faríngeo para investigar presencia de virus y sus antígenos, muestra de sangre para aparición o aumento de titulo de anticuerpos antirrábicos en suero.
Para la investigación de los corpúsculos de negri se toman las porcionesde astas de ammon se hacen improntas y se tiñen con colorante Seller. La presencia de cuerpos de inclusión intracitoplasmaticos, elipsoidales color violáceo rojizo con pequeñas granulaciones mas azuladas, confirman el diagnostico, pero la ausencia no permite excluirla.
Luego se realiza la Inmunofluoresencia directa, donde se fijan en acetona fría. Si da positiva confirma rabia pero si da negativa no permite descartarla.
Entonces se realiza la prueba de inoculación intracerebral a ratones o test Wester:
 Se inocula intracerebralmente porciones de las muestras obtenidas y tratadas, a 10 ratones lactantes. A partir del dia 5 pero sobre todo del dia 7 alguna animal puede aparecer con síntomas o morir ( si muere del 1 al 5 no lo considero). Si no aparecieran síntomas después del dia 7, sacrifico un raton por dia y proceso la muestra con tinción de Seller y si da negativa con IFdirecta. 
B) 1- Radiaciones. Mecanismo de acción. Utilidad.
La energía se trasnmite a través del espacio en una gran variedad de formas, una de las cuales son las radiaciones. Dentro de estas se encuentran las electromagnéticas de alta energía o ionizantes y otras de baja energía o no ionizantes.
Radiaciones ionizantes: cuando estas radiaciones pasan a través de las células producen hidrogeno libre, radicales hidroxilo y algunos peróxidos que ocasionan diferentes tipos de daño intracelular.. son poco especificas en sus efectos pero con alto poder de penetración. Las únicas que esterilizan son los rayos gamma y se usan para objetos sensibles al calor,como jeringas de plástico, alimentos, vacunas.
Radiaciones no ionizantes:causan daño en los acidos nucleicos. Esta absorción se efectua sobre todo en sus bases pirimidicas donde puede fromar un dimero entre dos bases vecinas que , a menos que sea desdoblado paor enzomas intracellares especificas, inhibe la replicación del ADN. Se utilizan para aire y superficies, salas quirófanos y ambientes.
 2- Estructura y composición de los virus animales.
Una particula viral puede tener un solo acido nucleico, recubierto por una capside de naturaleza proteica. Algunos pueden además poseer exteriormente otra estructura de naturaleza lipoproteica denominada envoltura, separando virus envueltos de virus desnudos. El termino virion se utiliza cuando el virus es completo e infectante. Como el acido nucleico es pequeño y tiene poca info genética para codificar la capside interviene solo uno o dos tipos proteicos (protomeros) que al unirse se las denominan capsomeros o unidades morfológicas. El conjunto de acido nucleico mas capside se denomina nucleocapside, mientras que el acido nucleico y las proteínas íntimamente relacionadas como transcriptasas, se denominan core.
La envoltura es de naturaleza lipoproteica. Existen proteínas de envoltura como hemaglutininas que tienen importantes funciones biológicas como aglutinar GR. La simetría del virus esta determinada por la capside, esta puede ser icosaedrica o helicoidal o compleja. La morfología en cambio esta determinada por la envoltura.
 3- Coloraciones diferenciales. Métodos. Fundamentos. 
Dentro de las coloraciones diferenciales encontramos a la tinción de Gram y ziehl neelsen principalmente. También esta la tinción de koster o stamp, que es acido alcohol resistente modificada.
GRAM:
1. Extender
2. Secar
3. Fijar
4. Cristal violeta 1 min (colorante primario)
5. Lavar
6. Lugol 1 min (mordiente)
7. Lavar
8. Alcohol 30 seg (decoloración)
9. Lavar
10. Safranina 1 min (colorante secundario)
11. Lavar, secar, observar con objetivo de inmersión.
El fundamento no esta claro pero la teoría mas valida es la de la permeabilidad, la cual se explica por la distinta composición y grosor de la PC. La pared de las gram negativas posee una gran cantidad de lípidos para los cuales el alcohol es solvente y cuanto mayor sea la cantidad de lípidos en pares, mas fácil es la decoloración pues el tamaño de los poros es mayor y el complejo iodo colorante escapa. En las gram positivas el alcohol deshidrata la pared glucopeptidica reteniendo el complejo iodo colorante.
ZIEHL NEELSEN:
1. Extender
2. Secar
3. Fijar
4. Fucsina fenicada de ziehl 10 min (colorante primario)
5. Aplicar calor hasta que desprenda vapores blancos (mordiente)
6. Lavar
7. Decolorar alcohol ac clorhídrico
8. Lavar
9. Azul de metileno 3 min
10. Lavar secar observar con objetivo de inmersión
Algunas bacterias contienen alta concentración de lípidos complejos y ceras que son muy difíciles de colorear, pero cuando se colorean resisten la decoloración con acido-alcohol. (ej micobacteriaceae) las bacterias AAR poseen en la fracción cerea, acido micolico, el colorante fenol es mas soluble en los lípidos de las bacterias que en el agente decolorante por eso toman la fucsina.
 4- Defina Staphylococcus. Taxonomía. Mecanismo de patogenicidad. 
 Importancia en Veterinaria.
Son cocos esféricos, grampositivos, generalmente dispuestos en forma irregular como racimo de uvas. Son catalasa positivo, inmóviles, aerobios o anaerobios facultativos. Fermentan hidratos de carbono y producen pigmentos que van desde amarillo hasta dorado. El taxón básico es la coagulasa?????
Factores de patogenicidad
· Coagulasa: ez que coagula el plasma oxalatado o citratado del hombre, por acción de una sustancia parecida a la protrombina. La coagulasa puede depositar fibrina sobre la sup de los estafilococos alterando la capacidad fagocitica de los macrófagos
· Catalasa:convierte peróxido de hidrogeno toxico en agua y oxigeno
· Hialuronidasa: hidroliza el ac hialuronico facilitando la diseminación 
· Lipasa: de ayuda en colonización en áreas sebáceas
· Nucleasa: adnasa para la invasión
· Fibrinolisina
· Betalactamasas: codificadas por plasmidos transmisibles por mecanismos de transducción y conjugación. Dan resistencia a betalactamicos.
· Parasito intracelular facultativo
· Exotoxinas: enterotoxinas (solo en S aureus), hemolisinas (actúan en membrana celular).toxinas alfa, beta, delta, gamma., y toxinas exfoliativas.
· Componentes celulares: capsula polisacarida, proteínas superficiales( clumping factor, proteína a, proteína de unión al colágeno), slime y biofilm
 5- Virus rábico. Virus fijo. Obtención de virus fijo. Diagnóstico virológico.
La mordedura coloca al virus presente en la saliva del animal eliminador en el tejido celular subcutáneo y en los musculos. Este permanece un lapso variable en el lugar de entrada y luego siguiendo la trayectoria de los nervios periféricos que inervan la región avanza rápidamente en forma centrípeta hacia el SNC. Desde allí se produce una diseminación centrifuga. Al tiempo que el virus alcanza el SN también llega a las glándulas salivales multiplicándose en sectores de las mismas y apareciendo hipersalivacion. Se produce la infección de estructuras del ojo también, por lo que se encuentra en improntas de cornea.
El virus rábico no es lítico, pero su multiplicación altera las neuronas y produce disturbios en su actividad, con los clásicos fenómenos exitativos y alteraciones nerviosas características de la enfermedad, aunque también puede observar animales decaídos. Luego de algunos ciclos de replicación, las células nerviosas mueren ocasionando paralisis de la zona o función que comandaba. La paralisis de los nervios laríngeos hace la espuma característica de animales afectados.
Virus fijo: es la cepa vacunal. Se denomina fijo porque se fijo el período de incubación en 7 dias. Es logrado por pasteur en el laboratorio mediante pasajes intracerebrales del virus calle en conejos. Paralelamente el virus en los pasajes perdió la capacidad de ser pateogeno por via perifierica, no alcanzando el SNC lo que es muy importante en vacunas ya que no enferma pero conserva sus propiedades inmunizantes. No produce cuerpos de inclusión de Negri,e inoculado a ratones por via IC los mata en 7 dias.
(diag virológico mas arriba)
D) 1- Antibiograma. Definición. Métodos. Usos.
Es el estudio de sensibilidad de las bacterias a los antibióticos y quimioterapicos in vitro de un germen aislado decultivo. El objetivo es medicar con quimioterapicos a lso que el gemen sea sensible aunque se sabe que in vivo otras interrelaciones con el huésped pueden modificar los resultados.
Según como se agreguen los quimioterapicos al sistema de determinación se habla de pruebas de:
1. Dilucion sucesiva del agente quimico en el medio
2. Difusion radial en el medio solido a partir de su aplicación localizada.
 Método de dilución:
Se efectua haciendo diluciones sucesivas (en base 2) del quimioterapico en volúmenes conocidos de Caldo Mueller Hinton. A todas y cada una de las diluciones del quimioterapico se le agrega el mismo volumen del inoculo (estandarizado según el tipo de M. O)
La lectura se realiza por presencia o no de desarrollo, y la interpretación es que si hay desarrollo microbiano (caract de la cepa en estudio, por ej turbidez) nos señala que la conocentracion del quimioterapico presente en ese tubo no es suficiente para inhibir al M.O. por lo tanto la CIM esta en el ultimo tubo de las diluciones que no presente desarrollo visible.
La CIM esta afectada por la calidad del medio, naturaleza del MO, tamaño del inoculo, temperatura y atmosfera de incubación, y caracterisiticas del quimioterapico
A partir de las diluciones de la CIM puede determinarse la concentración bactericida minima CBM subcultivando los tubos sin desarrollo visible a placas con medios libres de atb, con ansa calibrada de 10ml. La CBM es la máxima dilución del atb expresada en microgramos por mililitro de un quimioterapico que produce 99,9% de muerte del inoculo inicial usado para la CIM
Metodo de difusión
Permite ver la presencia o ausencia de mo y medir los halos de inhibición provocados por la difusión radial del ATB, en medios solidos que fueron sembrados con la cepa bacteriana, cuya sensibilidad se quiere determinar.
Se siembra con hisopo en por lo menos 3 direcciones diferentes,en placa de Mueller Hinton de 4mm de espesor con concentración estandarizada del inoculo (en pureza con una concentración de la mitad del tubo numero 1 de Mc farland). A continuación se aplican los discos de quimioterapicos, debidamente separados unos de otros.
Se incuban 18-20hs a 35-37C. A medida que el atb difunde en el medio produce un gradiente de concentración, alcanzando la CIM a determinada disancia del disco, a medida que pasa el tiempo y según su facilidad de dispersión. Al crecer el mo forma una capa de desarrollo visible en toda la superficie del agar sembrada excepto la región donde la concentración del antimicrobiano es mayor o igual a la CIM quedando un halo d einhibicion que indica que el mo fue inhibido. 
La lectura no debe efectuarse solo por presencia o ausencia del halo, sino que deben mdirse los mismos expresando el diámetro en mm. Por otro lado debe verificarse la ausencia de colonias dentro de ellos.
La interpretación es según los diámetros y de acuerdo con los valores expresados en las tablas correspondientes se dice que el mo es sensible, sensibilidd intermedia o resistente.
La determinación de la CIM se considera el gold estándar por lo tanto evaluando la correlacion entre el diámetro del halo y los valores cim de cada antibiótico frente a cientos de cepas de la misma especie se establecen las líneas de cote, osea los valores de diámetros para el método de difusión.
Factores que influyen en el tamaño de los halos:
· Del mo: su suceptibilidad, cantidad y fase de crecimiento
· Del medio: su calidad y cantidad
· De la técnica; su modo de siembra, practicas correctas
· Dela incubación: temperatua y tiempo
· De los quimioterapicos: su velocidad de difusión, concentración en el disco y los factores inherentes a la estructura molecular propiamente dicha.
Es decir que el tamaño de la zona de inhibiciln se correlaciona con la suceptibilidad del mo, siempre que se respeten todas las condiciones normatizadas.
 2- Pasteurización. Tipos. Usos. Importancia.
Es un método de higienización mediante el cual se reduce la carga bacteriana en ciertos productos. No esteriliza ya que se eliminan solamente las formas vegetativas de los mo. Se aplica a sustancias que no toleran la temperatura de esterilización sin perder sus caracteres organolépticos. 
Tipos:
-Baja: 62C 30min
-Alta: 72C 15seg
-Uperizacion o UTH: 100C 2 seg
Se utiliza para leche y derivados, vino y cervezas. Y la importancia es que permite reducir la carga bacteriana sin modificar las características organolépticas del producto.
 3- Género Mycobacterium. Definición. Clasificación del género. 
 Características. Tuberculina: Qué es, tipos, usos. BCG.
Son bacilos acidorresistentes. Son aerobicos o microeareofilos.Son bacilos y se agrupan en letra china. Se identifican en base a propiedades metabólicas y bioquímicas, hay especies de desarrollo lento (generalmente patógenas) o de desarrollo rápido.
Genero catalasa positivo, clasificación de ruyon
Tipos y que es esta mas arriba. Usos: se usa para la prueba de tuberculina, reacción de hipersensibilidad tipo 4. Se inocula la PPD subcutánea y se espera 72 hs a que salga la pustula. Luego se mide y si es mayor a 4cm el diámetro la reacción es positiva ismimnuyo su virulencia. Es una cepa de virulencia atenuada. No se utiliza en animales porque modificaria la prueba de tuberculina dando positiva si están vacunados.
 
 4- Leptospiras. Definición. Características. Clasificación. Diagnóstico.
Las especies del genero leptospira son agentes causales de la leptospirosis, enfermedad zoonotica. La infección puede ser transmitida mediante la orina al humano, causando la enfermedad aguda y sistémica que cursa con cefaleas, fiebre elevada meningitis e ictericia. Tiene una amplia distribución.
Las leptospiras pertenecen al orden Spirochetales, familia Leptospiraceae, genero Leptospira que comprende especies patógenas (L. interrogans, kirschneri, noguchi) y no patógenas (L.biflexa, meyeri). Serologicamente las patógenas se subdividen en 223 serovares (subespecies) que se agrupan por compartir determinantes antigénicos en 25 serogrupos. Las pruebas de aglutinación microscópica y el test de absorción y aglutinación cruzada son usados para clasificación de leptospiras a nivel de serovariedad.
Las leptospiras son MO de forma helicoidal, cada celula posee un cilindro protoplasmático con 18 o mas giros, que forma una espral apretada. Son flexibles, miden 0,1x 6-20 micrometros. En uno o ambos extremos presentan forma de gancho y sus movimientos son rotación alternada alrededor del axis y traslocacion. Una membrana o envoltura eterna recubre al MO. El cilindro protoplasmático contiene los componentes celulares. Este CP tiene una capa de glucopeptido y una membraa citoplasmática que envuelve los contenidos citoplasmáticos. Dos flagelos periplasmicos también llamados endoflagelos o filamentos axiales, ubicados entre la envoltura exterior y el CP insertados subterminalmente uno en cada polo diriiendose hacia el centro y raramente sobrepasando la región central por lo que no se superponen.
No pueden visualizarse al microscopio óptico y se tiñen mal con colorantes de anilina. Para verlos es necesario un microscopio de campo oscuro. Tambien se tiñen con impregnación argentica.
La motilidad sin igual combinada con su pequeño diámetro y fexibilidad les permite pasar a través de filtros de membrana con poros de 0,1micrometros y migrar atraves de medios solidificados hasta con 1%agar. Son destruidas por el calor, desinfectantes, desecación y acidez.
Son parasitos de animales domesticos y silvestres. Los roedores son sus reservorios mas importantes. Por su contacto con el hombre los porcinos, bovinos, equinos y caninos también generan brotes de leptospirosis. Existe una relación simbiótica entre la leptosipra y su hospedador que es de gran importancia para la perpetuación de la enfermedad en la población animal. La transmisión del animal al hombre ocurre por contacto directo con orina, sangre u órganos de animales infectados y de forma indirecta por exposición al medio ambiente contaminado. Los deportes acuáticos y el contagio al caminardescalzo en agua contaminada.
Su metabolismo es aerobio estricto. Cuando son cultivadas en un medio aireado a 30C su tiempo generacional varia entre 7 y 12 hs. Sus requerimientos nutricionales son B1, B12 y acidos grasos de cadena larga que son su fuente mas importante de energía y carbono. Las sales de amonio poroveen nitrógeno celular. El nutriente no esencial piruvato de sodio reduce el tiempo de crecimiento de las patógenas. Como incorporan bases externas de purina y no de pirimidina son resistentes a la actividad de 5 fluoracilo y se usa en medios selectivos para el aislamiento en muestras contaminadas. Los medios mas utilizados son EJH que puede enriquecerse con suero de conejo. También fletcher y Stuart. 
No se realizan pruebas bioquímicas. 
Analisis serológicos
· MAT: la evidencia de anticuerpos por serología no indica infección presente sino solo su presencia. Para tederminar infección debe realizarse un muestreo pareado de sueros con por lo menos 7-10 dias de intervalo. Una diferencia de titulo mayor en dos diluciones indicara infección. La prueba consiste en enfrentar el suero diluido del paciente con cada uno de los antígenos representativos de los serogrupos de leptospiras o de las cepas aisladeas en el país. Se parte de diluciones 1/50 a 1/100. Luego de un periodo de incubación de 90 a 120 minutos se observa con fondo oscuro en búsqueda de algutinacion. Se considera reavtivo un suero que aglutina 50% o mas d elas leptospiras en comparación con el contro.
· Antigeno TR: genero especifica
· ELISA
 5- Aftosa. Tipos. Características de la familia a la que pertenece.
Son virus pequeños y responsables de enfermedades como poliomielitis en humanos y la fiebre aftosa en biungulados.
Tiene un diámetro de 18-30nm. Simetría icosaedrica y ARN de cadena positiva. No posee envoltura por lo que es resistente al éter alcohol y cloroformo. La radiación ionica, el fenol y el formaldehido lo inactivan rápidamente. VP1, 2 y 3 son proteínas externas mientras que VP4 es interna y relacionada con el acido nucleico. A su vez VP1 y VP3 son sitios principales de unión a los anticuerpos. Esastas proteínas son las que determinan los distintos serotipos y la diversidad.
El virus de la aftosa posee 7 serotipos
· A
· O
· C
· Salt 1
· Salt 2
· Salt3
· Asia1
E) 1- Colonización microbiana: mencione los factores que intervienen y cite 
 ejemplos de cada uno
 La colonización es el primer paso para una infección. La piel intacta es una buena barrera de defensa y casi ningún MO puede invadir fácilmente. Los sitios de entrada reconocidos son las mucosas. Los MO que infectan estas regiones tienen desarrollados mecanismos de adherencia a los tejidos y habilidades para vencer la constante presión de las defensas del hospedador.
1. Adherencia: es la propiedad de adherirse a los epitelios superficiales y se basa en un fenómeno de afinidad y posterior interaccion de los MO con la superficie de las células eucariotas. Se encuentran implicadas ciertas estructuras bacterianas como los pilis o fimbrias ( enterobacterias como Bortedella pertussis). Entonces decimos que se requieren dos factores, un receptor ubicado en la superficie de la celula hospedadora y un ligando llamado adhesina presente en la superficie del MO invasor. Los receptores suelen ser moléculas d eHde C o residuos peptídicos específicos ubicados en la superficie celular. Por ejemplo la fibronectina, el colágeno y la laminina proteínas de tejido conectivo subepitelial pueden funcionar como receptor para adherencia de Staphylococcus aureus, pyogenes y tereponema pallidum. Las adhesinas bacterianas son residuos peptídicos o de carbohidratos que se hallan en la superficie del MO en la pared (como antígeno Vi de salmonella) o en pequeñas regiones de las fimbrias. La adhesión se ve facilitada por : fimbrias, glucocalix y capsula. La adherencia implica dos pasos: 1. Unión reversible de la bacteria a la superficie eucariota, denominado docking y 2. Unión irreverisible y permanente del MO a la superfcie denominado anchoring. Cuando se cumplen estos dos pasos la adherencia es especifica. Cuando solo se cumple el docking la adherencia es inespecífica. Ejemplos: esterichia coli posee pili de adhesión o fimbrias. Tiene una diversidad génica que le permite expresar varios tipos diferentes de fimbrias codificados por distintas regiones de adn y permite adaptarse a cmabios ambientales y aprovechar las nuecas oportunidades de distintos hospedadores.
ESTA PARTE NO VA.
2. Invasión propiamente dicha: esta determinada por su capacidad de producir sustancias extracelulares conocidas como invasinas que poseen actividad enzimática y bloquean las defensas primarias inespecíficas del cuerpo, dañando a las células presentes en el putno de colonización y facilitando la reproducción focal y la disminacion posterir del patógeno. Las invasinas son:
· Hialuronidasa: por generos streptococcus staphylococus y clpstridium. Disuelve el cemento intersticial de tejido conectivo mediante la despolimerización del acido hialuronico
· Colagenasa: producida por staphylo y strepto, disuelve el colágeno que esta en el tejido conectivo facilitando la invasión de tejidos mas profundos.
· Neuraminidasa: producido por shigella, corta el acido neuraminico.
· Estreptoquinasa y estafiloquinasa 
· Fosfolipasa: clostridium perfringens (alfatoxina)
· Lecitinasas: por crlostridium perfringens y botulinum
· Hemolisinas: staphylo strepto y varios clostridium
· Leucolisinas: strepto que producen estreptolisina O.
 2- Pasteurización. Definición. Fundamentos y tipos. Importancia en salud 
 pública. ¿Qué microorganismos patógenos se eliminan con este proceso?
Es un método de higenizacion mediante el cual se reduce la carga bacteriana en ciertos productos. No es una técnica de esteriliacion ya que se eliminan solo las formas vegetativas. Se aplica a sustancias que no toleran la temperatura de esterilizaicon sin perder sus caracteres organolépticos. Por ello su importancia en salud publica es la utilización en alimentos de consumo normal como ser la leche y sus derivados, el vino y la cerveza, proporcionando seguridad sin modificar sus caracteres organolépticos. 
Para establecer la temperatur a y tiempo adecuados se tiene en cuenta la resistencia d elos patógenos que con mayor frecuencia se encuentran en el producto (xej en la leche la mycobacterium tuberculosis y coxiella brunetti)
Hay 3 tipos de pasteurización
· Baja: 62C 30 minutos
· Alta: 72C 15 segundos
· UTH: 100C 2 segundos.
Como las medidas solo reducen la carga de MO no se deben descuidar las medidas de higiene en el proceso de elaboracion que buscan evitar la contaminación previa o posterior a la pasteurización.
 
 3- Mencione mecanismos de agresión de Salmonella spp, Staphylococcus 
 aureus y Clostridium botulinum.
Salmonella spp:
· Parasito intracelular
· Tolerancia a acidos
· Antigeno somatico O
· Ag capsular K llamado Vi que protégé a la bacteria dandole Resistencia antifagocitica
· Ag Flagelar H proteico.
· Fimbrias 
· Endotoxina
· Capsula
Staphylococcus aureus:
· Capsula
· Slime y Biofilm
· Proteinas superficiales: clumping factor, proteina a, proteina de union al colageno
· Enzimas extracelulares: coagulasa, hialuronidasa, lipasa, betalactamasa, fibrinolisina, catalasa
· Supervivencia intracelular
· Exotoxinas: se dividen en toxina con actividad sobre membranas y toxinas on actividad de superantigenos.
Sobre membrana: hemolisina, toxina alfa, toxina beta, toxina delta, toxina gama
Con actividad de superantigeno: enterotoxina, toxina exfoliativa Ay B y la toxina del sindrome choque toxico
Clostridium botulinum
Tiene cuatro grupos
· Grupo I: proteolíticas productoras de toxinas A, B y F
· Grupo II: sacaroliticas sin actividad proteolíticas que sintetizan toxinas B, E o F
· Grupo III: cepas no porteoliticas que producen toxinas C o D. 
· Grupo IV: cepas proteolíticas no productoras de lipasa que elaboran toxina G
Las toxinas se sintetizan como precursor inactivo es necesaria la lisis bacteriana para que seliberen. Una vez liberados se fragmentan por proteasas o enzimas digestivas dadno lugar a cadena pesada y liviana. Se asocian a proteínas no toxicas para formar complejos de mayor tamaño. La porción C terminal es la responsable d ela unión a un receptor de membrana celular de las neuronas, la región N regula la penetración y la cadena liviana es la resposable del bloqueo de la liberación del neurotransmisor. Las vesículas que contienen al neurotoxina botulínica se ubican en la extremidad presinaptica de la neurona. Cuando se produce la endocitosis de la toxina ya no se puede neutralizar con anticuerpos. Dentro del citosol inhibe la liberación de acetilcolina. El musculo no se contrae dando como resultado paralisis fláccida 
 4- Género Escherichia. Definición. Especies de importancia. Tipificación. 
 Diagnóstico.
E coli es conocida como habitante saprofito del intestino. Sin embargo otros serotipos se identifican como un agente causal de la diarrea en animales neonatos, adultos y el hombre. Se clasifican en patotipos: enteropatogenicas, enteroinvasiva, enterotoxigenicas, enteroagregativas y verotoxigenicas, dependiendo de los factores de virulencia. Las verotoxigenicas causan el síndrome urémico ehemolitico por lo que se designan enterohemorragicas.
Son bacilos rectos, gramnegativos que miden 1x 2-6micrometros. Pueden aparecer aislados o enpares.
Se destacan los pili o fimbrias, la capsula y los flagelos peritricos, y la membrana externa. Solo algunas cepas presentan capsula y hay cepas sin movilidad y por consiguiente sin flagelos.
La capsula origina antígenos K
El antígeno somatico O esta determinado por la naturaleza de los azucares de las cadenas laterales del LPS.
Diagnostico:
 Los medios de cultivo selectivos para el aislamiento son :
· Agar mac conkey: es adecuado para el aislamiento a partir de materias fecales, las sales biliares y el cristal violeta ejercen unainhibicion significativa e las gram positivas. La lactosa y el indicador rojo neutro permiten comporbar la degradación de este disacárido. Las colonias lactosas positivas aparecen rojas con halo turbio y las lactosanegativas incoloras. E coli es fermentador de lactosa
· Agar EMB: los componentes de lactosa y sacarosa permiten distinguir entre distintas enterobacterias de acuerdo con su capacidad de fermentarlos y por el aspecto y el color de uss colonias. Los colorantes inhiben el desarrollo de grapositivos.
Los medios de cultivo para la identificación:
· Caldo MRVP 
· Agua de triptona
· Agar citratado de Simmons
Identificacion bioquímica:
IMViC ⁺⁺--
 
Genero: catalasa positivo, oxidadsa negativo, OF reduce nitritos a nitratos. Lactosa positivo
Especies: imvic y biovar
Serologia: ag O, H, K
 
 5- Familia Parvoviridae. Características. Especies de importancia y su 
 diagnóstico.
Acido ADN de cadena simple y lineal
Capside icosedrica
Simetría cubica
Noo posee envoltura
Diámetro 18-26nm
Son resistente a solventes como éter y cloroformo y estables a altas temperaturas y ph entre 3-9.
Solo sse puede replicar en células en plena división, en fase S. Tanto los procesos replicativos como los madurativos ocurren ene el nucleo de la celula hospedadora donde dejan cuerpos de inclusión que desplazan la cromatina.
Virus de importancia veterinaria:
· Parvovirus canino: causante de gastroenteritis y miocarditis letales en cachorros, con presentación subclínica en adultos. El virus replica en el nucleo de células en división activa en estas de 12-25hs post infección se puede apreciar una gran concentración en el nucleo detectable por inmunofluorescencia o inmuno peroxidasa. El vuirus produce cuerpos de inclusión intranucleares y se libera de la celula provocando un efecto citopatico lítico. El virus hemaglutina los glaobulos rojos de cerdo, lo que permite implementar la técnica de inhibición de la hemaglutinación para rastreos serológicos. El diag de laboratorio se basa en la detección de antígenos virales por IF, histopatología y microscopia electrónica de muestras de mf clarificadas y concentradas. La hemaglutinación de GR es una técnica rápida pero sujeta a muchos factores de error.
· Panleucopenia felina
· Parvovirus porcino 
F) 1- Patogenicidad y virulencia: definición y ejemplos. Modificación de la 
 virulencia: concepto, ejemplos con bacterias y virus.
La patogenicidad es la capacidad potencial de producir daño (enfermedad) en el hospedador y es un atributo propio de cada especie de MO
La virulencia es la forma de ´´cuantificar´´ el grado de patogenicidad, y es un atributo de la cepa. Por lo que en una misma especie puede haber cepas altamente virulentas y cepas muy poco virulentas. Por ejemplo Eschericha Coli
Cuando a los microorganismos patógenos se los inocula en especies animales suceptibles pero diferentes a sus hospedadores naturales su virulencia disminuye para el hospedador natural al tiempo que se exalta para el nuevo hospedador. Un claro ejemplo es la experiencia de Pasteur con el virus rábico, que obtuvo muestras con virus de la rabia altamente virulento para humanos y la inoculo intracerebralmente en conejos. Cuando estos morían, obtenia muestas del tejido nervioso central y las volvia a inocular en conejos sanos. A partir de los pasajes sucesivos observo que el perido de incubación para el conejo era cada vez menor a medida que realizaba los pasajes. La conclusión que hoy podemos sacar es que los conejos funcionaban ejerciendo una presión de selección sobre la población viral que se replicaba en su sistema nervioso facilitando la multiplicación de viriones aptos para el tejido de conejo y dificultando de alguna manera la multiplicación para otros hospedadores. Al cabo de unos 25 pasajes el periodo de incubación alcanzo un minimo de 7 dias fijándose allí a pesar de seguir los pasajes. Al virus se lo llamo virus fijo. Al aplicarlo al perro y al humano subcutaneo se confirmo la atenuacon de la virulencia porque fue incapaz de desencadenar la enfermedad y sirvió como vacuna.
 Cuando se modifica la virulencia de un mo, esta se exalta o se atenua. Los mo atenuados deben poseer ciertos atributos para ser utilizados inocuamente como vacunas: estabilidad o fijeza genética es el mas importante ya que no debe revertir a su forma virulenta original. También se logra mediante la acción del hombre cultivando al MO en ambientes que ejercen presiones selevtivas negativas sonre los descendientes virulentos para el hospedador en estudio
 2- Reproducción de hongos.
Hay dos tipos de reproducción en los hongos. La reproducción sexual o perfecta sirve para clasificación o taxonomía. En cambio la reproducción asexual sirve para el diagnostico y reconocimiento. Las levaduras no poseen reproducción sexual.
Ambos tipos de reproducción se llevan a cabo mediante las esporas.
· Reproduccion sexual: se puede dar de manera homotalica o heterotalica. La homotalica es la unión de dos hifas del mismo hongo, en cambio la heterotalica son dos hifas de distitno hongo, uno macho y la otra hembra.
Ascomycetes: se trata de un saco o asca que contiene el resultado de la meiosis en fomra de 4 a 8 esporas.
Bacidiomycetes: las esporas se desarrollan en la parte terminal de una estructura en forma de palo de tambor llamado basidio.
Zigomycetes: los extremos de dos hifas, masculina y femenina, se juntas y funden su contenido determinando la formación de una única espora, zigoespora.
Deuteromycetes: cuando no se ha podido poner de manifiesto el modo de reproducción sexual
· Reproduccion asexual:
· A partir de estructuras especializadas y diferenciadas: ESPOROFOROS
-Esporangióforo: tiene forma de saco con esporas en su interior. Si estas poseen movilidad se denominan zoosporangiosporas, en cambio si son inmóviles se denominan esporangiosporas.
-Conidióforo: tienes esporas en su exterior y las libera a medida que se reproducen. Según la forma y disposición de las conidiosporas podemos diferenciar los generos Aspergillus y penicilum.
· A partir de estructuras nos especializadas : TALOSPORAS
.Blastosporas: el brote o gemanace de una hifa y se separa por estrangulamiento. Puede ser en mohos o levaduras. 
Ej: M. Canis, Candida albicans y malassezia pachidermatis
-Artrosoporas: se forman por fragmentación de la celula mediante tabicamiento sin estrangulamiento. La artrospora puede ser endotrix o ectotrix según este dentro o fuera del pelo
Ej: M.canis
-Clamidiosporas: son esféricas de paredes gruesas que se producen en los extremos o intercaladas en la hifa o pseudohifa. 
Ej:Candida albicans
- Macroconidias:
 En el genero microsporum son importantes para identificar ya que son la forma predominante. 
M.canis: son de pared rugosa y posee un mamelón en el extremo libre. Lleva en su interior de 6 a 12 celulas en su interior
M.Nanum: de pared finas y con dos células en su interior
M.Gyepsum: pared fina y con 3-6 celulas.
En el genero Trichopytum no es la forma predominante y no es importante para su identificación ya que son todas similares
-Microconidias: 
Son formas no importantes para identificar en Microsporum. En cambio son importante en Trichophytum ya que caria en cada especice del genero
En el genero Microsporum en el animal poseo atrosporas en cambio en el laboratorio las cultivo y obtengo macro y microconideas.
 3- Género Bacillus: definición, especies de importancia y su diagnóstico.
Son bacilos Gram positivos, móviles por flagelos peritricos e inmóviles. Son todos acapsulados menos anthracis que tiene capsula polipeptidica.Son esporulados con espora central no deformante.Son aerobios o anaerobios facultativos no exigentes. Se cultivan en medios simples y en 24hs a 37. En agar sangre son todos beta hemolíticos menos anthracis.
Especies de importancia:
B. anthracis: carbunclo
B. subtilis: patógeno oportunista
B. cereus: síndrome diarreico y síndrome hemetico. Es ETA. 
 Mecanismos de patogenicidad.
 4- Familia Poxviridae. Características, taxonomía, virus de importancia y 
 diagnóstico.
Virus ADN de cadena doble lineal
Simetria compleja
Forma de ladrillo
Es envuelto por lo que es sensible a compuestos organicos pero a diferencia del resto envuelto es resistente al calor
300-400 x 200 x 200 nm
Replica en citoplasma
Los efectos citopaticos son: cuerpos de inclusión intracitopasmaticos de Guarnier, lisis celular y redondeamiento
Se transmite por vectores artrópodos.
Se cultiva en BK. La enfermedad mas importante es el mixoma o fibroma del conejo.
IF, HA, Seroneutralizacion, PCR, Clinico, Experimental y con Microscopio electronico
G) 1- Definir Línea Celular y Cultivo primario y dar dos ejemplos de cada uno.
El cultivo primario es obtenido a partir de una muestra de tejido de animal sano, por lo que las células son heterogéneas y se reproducen con duración limitada. Luego de un cierto numero ya no se reproducen mas. Poseen inhibición por contacto y son exigentes en el desarrollo. Son mas cercanos a la celula normal.
Ejemplos: cultivo primario de macrófagos de cerdos y cultivo epitelio lingual bovino, riñon de feto, testiculo
La línea celular es obtenido a partir de un único tipo celular y una sola celula por lo que son siempre homogéneas. Se reproducen indefinidamente conservando sus características morfológicas y fisiológicas. No se inhiben por contacto. Son mas alejados del hábitat del virus en el hospedador.
PK (riñon porcino)
BHK (riñon de hámster lactante)
VERO (riñon se mono verde africano)
McCoy (células de origen desconocido tipo fibroblasticas utilizadas por clamydias)
HELA (carcinoma de cuello uterino)
 2- Mecanismo de resistencia frente a los Antimicrobianos.
Resistencia Cromosomica:
Puede ser natural o intrínseca y estar codificada en el cromosma de la especia o adquirida que es por mutacion. Es estable y hereditariamente transmisible y puede ser revertida por mutacion invertida.
Puede darse en un solo escalon, modificando la CIM para la bacteria de manera abrupta, o en varios escalones con un aumento gradual de la resistencia a medida que se van seleccionando poblaciones sucesivamente resistentes.
Resistencia extracromosomica
Se encuentra en los elementos genéticos extracromosomales, los que se pueden transmitir entre poblaciones bacterianas del mismo o distinto género por los mecanismos de conjugación, transformación y transducción.
Mecanismos:
· Modificacion del sitio diana molecular, que se modifica a consecuencia de una mutacion e impide la acción del ATB (streptococcus, enterobacterias)
· Modificacion de la permeabilidad al antibiótico, dado que el ingreso del mismo a la bacteria es un proceso activo (pseudomona)
· Produccion de una enzima capaz de degradar al antibiótico. Es el mas frecuente de resistencia en la clínica y en su mayoría corresponde a resistencia extracromosomica. (pseudomona staphylococcus y escherichia coli)
· Bomba de eflujo (pseudomona, mycobacterium, enterobacteria)
 3- Mycobacterium, Definición, clasificación. Aislamiento. Tuberculina. BCG.
Son bacilos delgados o ligeramente curvos de 0,2/0,7 x 1/10 micras, AAR, aerobios o microaerófilos, con agrupación en letras chinas. Inmóviles, no tienen cápsula, no forman esporas, no presentan fimbrias de adhesión. Tienen lento período generacional, metabolismo oxidativo sobre HdC y son exigentes en su desarrollo. 
La pared celular está formada por el péptido glicano N-glucolilmurámico, luego una capa de arabinogalactano - arabinomanano, y cada 10 de estos residuos se une un ácido micólico (le da resistencia a la decoloración) Luego, unidos a estos están los glicolípidos: dimicolato de trehalosa (factor cuerda), cera D y sulfátidos.
La micobactina es una molécula lipofílica que transporta el Fe a través de la pared celular. Está ausente en M. avium, por lo cual hay que agregarla en el medio de cultivo.
Factores de patogenicidad:
· Factor cuerda: (dimicolato de trehalosa) La colonia se ve encordada, inhibe la migración de leucocitos polimorfonucleares, inhibe la formación del fagolisosoma, e inactiva enzimas del lisosoma. Hipersensibilidad tipo IV (retardada)
· Sulfátidos: potencian la toxicidad del factor cuerda y también inhiben la formación del fagolisosoma en el macrófago.
· Parásito Intracelular
Hay dos complejos de los patógenos: 
· Complejo de M. tuberculosis (M. bovis y M. tuberculosis) 
· Complejo de M. avium (M. avium subspp avium y M. avium paratuberculosis). 
Cada complejo es genéticamente diferente entre sí, pero antigénicamente igual, y entre ambos complejos son antigénicamente diferentes.
Para los no patógenos existe la Clasificación de Runyon:
 
· Fotocromógenos; de crecimiento lento y en presencia de luz da pigmentos amarillos
· Escotocromógenos; de crecimiento lento y produce pigmentos en la oscuridad
· No cromógeno; de crecimiento lento y no produce pigmentos
· De crecimiento rápido; se desarrollan en 7 días y pueden ser cromógenos o no.
NB: 3 
Medios de cultivo:
Lowenstein Jensen (glicerol) eugónico para M. tuberculosis
Stonebrink (piruvato) eugónico para M. bovis
Para decontaminar la muestra se trata con álcalis (NaOH al 4%), y luego con ácido sulfúrico u oxálico 3% (Método de Petroff) Se hacen lavados sucesivos con sol fisiológica, y se centrifuga obteniendo un precipitado, con el que se hace una suspensión la cual se siembra en el medio de cultivo. Este método se basa en que son más resistentes que las demás bacterias a soluciones ácidas y alcalinas. (*también a la desecación)
Los cultivos se realizan a 37°C para la mayoría de las especies, excepto M. avium que se realiza a 42°C.
ViejaTuberculina (OT): Fue descubierta por Koch y es un extracto antigénicamente crudo, preparado a partir de caldo de cultivo de 6 semanas de incubación (biliado y glicerinado) hervido y luego filtrado y concentrado 10 veces por evaporación. El componente activado de este preparado es una proteína termoestable, aunque también está compuesto por restos de cultivo, metabólicos y restos de pared.
PPD (derivado proteico purificado): Es el tratamiento de la OT con ácido tricloracético y sulfato de amonio.
Fenómeno de Koch: 
Koch observó que al inocular microorganismos subcutáneamentea un cobayo, en el sitio de inoculación se desarrollaba en 10 a 14 días un nódulo, los ganglios aumentaban de tamaño y la enfermedad se generalizaba. En 15 semanas el animal moría. Si a las 4 a 6 semanas de la primera inoculación, lo inyectaba intradérmicamente, el sitio de inoculación formaba una úlcera con eritrema y necrosis en 24 a 48hs, pero la enfermedad no se generalizaba como en los animales que no eran sometidos a esta segunda inoculación. El animal moría de todas maneras como consecuencia del primer inóculo.
Este fenómeno demostró que es posible inducir en la piel de animales y personas tuberculosas una respuesta alérgica localizada similar, por medio de inyección de filtrados de cultivo de bacilos.
BCG: Se obtuvo a partir de una cepa de M. bovis producto de 230 pasajes sucesivos en caldo biliado y glicerinado (disgónico, durante 13 años), reduciendo así la virulencia y fijándola relativamente. Este mo atenuado se emplea para vacunar a las personas. Los animales de rodeo no se vacunan, ya que sino presentarían un resultado positivo en la prueba de la tuberculina, no pudiendo diferenciarlos de los realmente infectados.
 4- Togavirus. Definición, especies de interés veterinario.
Virus ARN cadena simple polaridad positiva. Simetría icosaédrica, forma esférica con espículas de glicoproteínas E1 E2 y E3 que le dan aspecto liso. Envuelto (gemación). Sensible a solventes orgánicos, y a PH 4-5. Tamaño 70 nm. Replica en citoplasma. 
ECP: Lisis (la envoltura la saca de las organelas)
Diagnóstico: seroprotección, seroneutralización, fijación del complemento. 
Transmisión por vectores (Arbovirus), esto aumenta la transmisión en climas cálidos.
Reservorios aves y roedores.
Gro. Alphavirus: Encefalomielitis Equina del Este, del Oeste, y de Venezuela. En Argentina es más común la EEO. EEE tiene dos variantes virales, una en EEUU y otra en Sudamérica. 
Gro. Rubivirus: V. de la rubeola
Se vacuna a los equinos en primavera porque hay mayor incidencia de vectores
Diagnostico:
· Cultivo primario de fibroblasto
· Líneas BHK 21, VERO, HELA
· Intracerebral en animales de animales de experimentación 
H) 1- Describir la reproducción de las bacterias. Tipos e importancia.
Fisión Binaria: duplicación del cromosoma, se forma un tabicamiento perpendicular al eje mayor por mesosomas laminares, y finalmente los tabiques se desplazan hacia adentro de la pared y se produce un estrangulamiento y separación de las células hijas.
Gemación: Se forma una protuberancia en la superficie de la célula madre que aumenta de volumen y se desprende formando un nuevo individuo.
Ramificación: formación de una yema que crece en el sentido longitudinal a la célula y no se separa. Por ej: M. tuberculosis.
Gonidias: gránulos que se forman en las células que al salir se transforman en células adultas.
Rep. de Micoplasmas: La replicación es básicamente por fisión binaria, pero la replicación del genoma no necesariamente está sincronizada con la división celular, y es responsable de las formas con brotes y cadenas en rosario que se observan con frecuencia.
Rep. de Clamidias: El cuerpo elemental es la forma infectante, y es resistente al medio externo. Cuando ingresa a la célula por fagocitosis, se convierte en cuerpo reticular, el cual se multiplica hasta convertirse en cuerpos elementales que se liberan por lisis. 
 2- Dar las características de pared celular de bacterias y hongos.
Bacterias Gram Positivas
La pared celular es gruesa, densa y uniforme. Está compuesta por un peptidoglicano formado por ácido n-acetil-murámico y n-acetil-glucosamina unidos por enlaces glucosidicos B1,4, y un tetrapéptido formado por residuos alternos de aminoácidos como lisina y alanina. Estos están unidos entre sí por enlaces peptídicos que le confieren rigidez al peptidoglicano. A su vez, la pared posee ácido teicoico y lipoteicoco, que son polímeros de glicerol o ribitol, unidos al peptidoglicano por enlaces fosfodiéster. Su función es importante porque contribuyen a la captación de Mg, regulan la autólisis y constituyen un antígeno de superficie con capacidad inmunogénica. 
Bacterias Gram Negativas
Presentan tres envolturas: una membrana externa, una capa intermedia densa de peptidoglicano, y la membrana citoplasmática. La membrana externa está compuesta por fosfolípidos, lipopólisacáridos y proteínas, formando una doble capa. El LPS está constituido por: lípido A que es un lípido complejo y tóxico y es el más cercano a los fosfolípido; polisacárido central que es constante en todas las spp de un mismo género pero es diferente entre distintos generos; y la región más externa compuesta por unidades repetitivas de oligosacáridos, responsable de la antigenicidad , el Antígeno O que define una spp o subspp de bacterias gram negativas.
Bacterias Acido Alcohol Resistentes (Mycobacterias)
La pared celular está formada por el péptido glicano N-glucolilmurámico, luego una capa de arabinogalactano - arabinomanano, y cada 10 de estos residuos se une un ácido micólico (le da resistencia a la decoloración) Luego, unidos a estos están los glicolípidos: dimicolato de trehalosa (factor cuerda), cera D, y sulfátidos.
Hongos
Posee polisacáridos de alto peso molecular como la quitina y/o la celulosa que le otorgan rigidez. Es altamente inmunogénica, y en algunos casos responsable de la hipersensibilidad. Algunos hongos se caracterizan por una cápsula por fuera de la pared celular compuesta por polisacáridos, algunos de los cuales poseen características adherentes adhiriendo células fúngicas entre si y formando racimos. Constituye un factor de agresión al ser antifagocítica.
 3- Definir Género Clostridium.
Bacilos Gram positivos grandes de 2 x 10 micras. Acapsulados (excepto C. perfringens). Espora terminal deformante que les da forma de palillo de tambor (excepto C. perfringens). Móviles por flagelos peritricos (menos C. perfringens). Habitat: ubicuo, resistente. En pasturas suelos, vegetales, tracto digestivo de animales. ETA (C. botulinum). NB 2.
Son muy exigentes (excepto C. perfringens), se cultivan a PH 7 a 37°C por 48 a 72 hs. C.botulinum desarrolla a 4C y C.termofilus a 60C. Las colonias de 3 a 4 mm son blanco grisáceas, lisas, redondas, convexas y regulares. Son anaerobios estrictos y necesitan ambiente con con 85%N2 – 10%H2 – 5%CO2 (C. perfringens es aerotolerante por superoxido dismutasa) Se cultivan en jarra de anaerobiosis o en caldo tioglicolato, caldo Tarozzi, caldo Hibber.
Cultivo en:
· Agar Sangre: pueden ser B-hemolíticos, C. perfringens da doble halo de hemólisis.
· Agar Brucella
· Agar yema de huevo: por la lecitinasa dan una opalescencia alrededor de la colonia, y por la lipasa la colonia queda como encerada (menos C. perfringens).
· Selectivo con neomicina
· Smith (con cisteína)
A todos los agar se les puede agregar suplementos como hemina, vitamina K, sangre entera, sangre lacada, cistina. Todos los medios de cultivo deben ser reducidos por hervor y enfriados rápidamente para que no quede O2.
Oxidan y fermentan HdC con producción de gas y ácido y también pueden utilizar proteínas. Catalasa y Oxidasa negativas. Ureasa positiva. Indol positivo. Producción de SH2.
Las toxinas se clasifican en mayores y menores por importancia en la patogenia. Por su activación si salen activas o protoxina y necesita de proteólisis por una tripsina.
Exotoxinas: Son proteínas biológicamente activas, naturalmente antigénicas y cuya actividad se puede neutralizar con el antisuero adecuado.
· Enterotóxica: C. perfringens
· Histotóxica: C. chauvei
· Neurotóxica: C. botulinum
Según ubicación:
Protoplasmáticas: son neurotóxicas que se generan en el mo y se liberan por lisis (tox. Botulínica)
De Esporulación: enterotoxinas adheridas a la pared que se liberan en la esporulación.
Extracelulares: proteínas con actividad enzimática (invasinas, lipasa, lecitinasa, hialuronidasa, hemolisina, ADNasa)
Según su codificación: cromosoma, plasmido o por fago.
Las toxinas son especificas de especie.
Resisten al calor, desinfectantes, radiaciones, uvy variaciones de presión. La resistencia a los ATB son : quinolonas, aminoglucosidos y sulfamidas. Sensible a penicilina.
La muestra debe ser esteril, refrigerada, medio de transporte caryblair.
Hay que decontaminar la muestra:
Calentando a 70 C por 10min o sumergiendo en alcohol etílico 96 45min en proporción 1:1
En paralelo se cultiva en aerobiosis con técnica la vela y no tiene que desarrollarse.
CAMP reversa para diagnostico presuntivo de perfringens porque potencia a hemolisis del streptococcus agalactiae
In vitro:
· Elisa
· Aglutinación en latex
· Seroneutralizción en cultivo celular
In vivo:
· En raton o cobayo se usa seroneutralizcion con C.botulinum
 4- Familia Paramyxoviridae.   
Virus ARN simple continua lineal polaridad negativa.
Simetría helicoidal y forma pleomorfica
150-300nm.
Envueltos
Replica en citoplasma
Posee proteínas virales estructurales NP (nucleocapside) y LyP (transcriptasa)
Glicoproteinas de las proyecciones: F (fusión) y Ha (hemaglutinina y neuraminidasa)
Entra por fusión y sale por gemación
Estrategia V
Forma cuerpos de inclusión intracitoplasmaticos o IN y sincitios (gracias a la proteína F). 
Las enfermedades:
Morbilivirus: Moquillo canino (no posee hemaglutininas) y virus de la peste bovina
Rubulavirus: virus de la enfermedad de new castle
Diagnostico: PCR
I) 1- Antiséptico, desinfectante y quimioterápico. Definición y ejemplos de cada uno.
· Antiseptico: una sustancia química que se emplea para prevenir la sepsis que es la degradación de los tejidos vivos por microorganismos. Se aplica sobre superficies vivas pero no son completamente inocuos. Algunos antisépticos en altas concentraciones se puede usar como desinfectante. Ejemplos: metales pesados como mercuriales (merthiolate), halógeno iodado (yodopovidona), alcohol etílico.
· Desinfectante: es una sustancia química que destruye mo patógenos que se encuentran en estado vegetativo sobre objetos inanimados ya que son muy toxicos y en tejidos vivos producen daños. Elimina la infectividad de un material sin que necesariamente se eliminen todas las células viables. Ejemplos: lavandina (hipoclorito de sodio halógeno clorado), cal viva, formaldehido
· Quimioterapico: son sustancias químicas que se usan para el tratamiento de enfermedades infecciosas o causadas por la proliferación de células malignas y que atacan selectivamente a estos sin dañar, o con daños leves, a las células huésped (toxicidad selectiva). Ej: penicilina, aminoglucosidos, rifampicina, enrofloxacina, quinolonas, imidazoles.
· Antibiótico: de origen natural generado por un Mo y tiene la capacidad de eliminar o inhibir otro MO. Y los sintéticos se llaman antimicrobianos.
 2- Replicación virus ADN. Etapas y ejemplos con virus estudiados.
Se multiplican solo en células vivas y para que esto ocurra es necesario que replique el ADN y la expresión de su información, formando una proteína por medio de un ARNm. La celula infectada desvia su metabolismo para sintetizar partículas virales.
a) Unión o fijación: es una interaccion físico química entre los receptores entre la superficie viral y los de las celula huésped. Depende de fuerzas ionicas, pH y naturaleza del medio.
b) Penetración: puede ser por
· Viropexis: es la invaginación de la membrana celular en la zona de adhesión con el virus (endocitosis). Se da generalmente en virus ADN envueltos, como papillomaviridae
· Fusión: ocurre en virus envueltos generalmente. Por ejempo herpesviridae y asfaviridae
· Penetracion directa: es rara pero ocurre en algunos virus desnudos, como parvoviride?
c) Decapsidación:es la liberación del ácido nucleico de la cápside viral. Puede ocurrir concomitantemente con la penetración, o poco después de la misma y en algunos casos en el núcleo (herpesvirus, adenovirus). Los poxvirus pierden la cápside en dos etapas, dependiendo la segunda de estas pérdidas de una proteína codificada por el virus durante la transcripción de la primer mitad de su genoma.
d) Eclipse: El virión no puede ser identificado en el interior de la célula. Incluye la transcripción del AN viral a ARNm y la traducción de las proteínas codificadas en el genoma viral. La estrategia de la replicación depende de si el ADN es doble cadena, el cual no necesita intermediarios para replicarse; o si es simple cadena, el cual requiere para su replicación la formación de un intermediario de doble de cadena, a partir del cual se transcribe un ARNm.
e) Ensamblaje y Maduración: Corresponde a la unión del AN viral con el resto de los componentes del virión . En la mayoría de los ADN ocurre en el núcleo.
f) Liberación: Se produce en los virus ADN por citólisis en las familias sin envoltura; por brotación en la membrana citoplasmática en envueltos como Asfaviridae o de la membrana nuclear en Herpesviridae.
 3- Familia Enterobacteriaceae: definición. Géneros Salmonella y Escherichia: 
 características diferenciales y tipificación.
· Bacilos rectos Gram negativos de 0.5 a 2 micras.
· No esporulan. 
· Móviles por flagelos peritricos o inmóviles.
· Cápsula variable
· Sin agrupación
· Fimbrias o adhesinas variables
Pared: en el espacio periplásmico poseen enzimas bacterianas (sideróforos)
Metabolismo: hay cuatro pruebas metabólicas que definen la familia
Catalasa positivo, Oxidasa negativo, OF positivo y Reducción de No3 a No2.
Características culturales:
· Anaerobios facultativos
· No exigentes
· ACC 24/48 hs a 37°C
· Algunos producen pigmentos (Serratia)
· Dan turbidez en medios líquidos
· Colonias lisas o rugosas en medios sólidos (Según el Atg O)
· CLED )evita el swarming q produce Proteus)
· Agar Mc Conckey
· 
Habitat: amplia distribución, agua suelo plantas TGI de animales y hombre, microbiota normal. Son indicadores sanitarios, su presencia o ausencia en agua o alimentos indica contaminación fecal.
Factores de virulencia:
· LPS
· Exotoxinas proteicas
· Cápsula
· Fimbrias de adhesión
· Invasinas
· Sideróforos
· Atg de membrana
· Bacteriocinas
Alta incidencia en contaminación de alimentos, septicemias e infecciones urinarias.
Escherichia coli
Poseen pili o fimbrias, capsula (ag K) variable, flagelos peritricos (ag H). Son ETA. Tienen fimbria tipo I y II. Las FI son adhesinas universales, se adhieren a la superficie de eritrocitos produciendo hemaglutinación y son manosa sensibles. Las FII son factores de colonización que se unen a células epiteliales intestinales de determinadas especies (hospedador especifico), son manosa resistentes
Enterotoxinas: termolábil y termoestable. 
Verotoxinas: VT1 y VT2
Sideroforo, aerobactina, hemolisinas y factor necrotizante citotóxico.
Se clasifica en patotipos:
Enteropatogena: no producen enterotoxinas ni enteroinvasinas. Poseen adhesinas y codifican a una proteína que a adhiere y borra las microvellosidades y condensa la actina del citoesqueleto formando un pedestal en forma de copa sobre el que descanza la bacteria.
Enterotoxigenica: posee las toxinas LT y ST, ingresa por agua y alimentos contaminados y debe ingerirse alta carga para producir diarreas. Causan salida de h2o y electrolitos a nivel intestinal
Enteroinvasivas: penetran al enterocito por endocitosis, lisis de esta vacuola y multiplicación. Luego se diseminan a células adyacentes, pasan a sangre y evade macrófagos.
Enteroagregativas:presentan fimbrias que le permiten adherirse de forma agregativa al epitelio. Aumentan la secreción de moco. Producen formación de biopelicula donde quedan atrapadas generando síndrome de malabsorción.
Verotoxigenicas: se unen al epitelio por fimbrias y borran las microvellosidades. Inoculan un receptor que polimeriza la actina y forma un pedestal. Tienen potentes citotoxinas shiga-like. VT1 y VT2
De adherencia difusa: malabsorción y alarga microvellosidades
Pruebas metabólicas:
IMViC + + - -
Sh2 –
Ureasa –
Lactosa + 
Salmonella
El taxón básico es el Serovar. Pueden ser especie entérica o bongori
Bacilos gram -, móvil por flagelo peritrico menos gallinarum y pollorum. son parasitos intracelulares de los macrófagos. Toleran temperatura de 4 a 48 C. pH de 4