2-Virologia-Estrategias replicativas (ingreso-replicacion-traduccion-salida)

Vista previa del material en texto

A- INGRESO 
INTRODUCCION 
 
1-Fase de eclipse: etapa en donde son detectado muy pocos virus 
luego de la infección, esto es debido a que en esta etapa los virus 
estan adhiriendose y penetrando las celulas. 
2- Fase de maduración y liberación: etapa de crecimiento por 
aumento de la progenie viral. Acumulación de grandes cantidad de 
virus 
3- Fase de decaimiento: la cantidad viral empieza a decrecer esto 
es debido a que las células empiezan a morir. 
 
No todos los virus son líticos ni todas las infecciones productivas. 
Existen virus con muchos huéspedes mientras que otros son 
específicos de especie. 
 
Susceptibilidad: 
La capacidad de un tipo celular (o especie animal) de ser infectado 
por un virus. 
La definición puede ser aplicada a nivel celular o animal. Por 
ejemplo las células epiteliales del tracto respiratorio son 
susceptibles al virus de la influenza porque tiene los receptores para 
su adhesión o por ejemplo un ratón no es susceptible al herpesvirus 
bovino. 
 
Permisividad: 
La capacidad de un tipo celular de garantizar la multiplicación 
completa del virus. 
La infección de células susceptibles con un virus puede ser 
1- infección productiva 
Ocurre en células permisivas donde el virus tiene lo que necesita 
para replicar. 
2- Infeccion abortiva 
Célula susceptible pero no permisiva. No puede replicar. A veces 
estos virus esperan un momento donde la celula es permisiva 
momentáneamente a esto lo llamamos infección restrictiva. 
3- Infeccion Latente. 
El virus ingresa y no replica (herpes). Algunas veces tienen genes 
que producen oncogénesis. 
 
ETAPA DE CICLO INFECCIOSO: 
1- Adhesion o anclaje interacción del virus con receptores y co 
receptores. 
2- Entrada y penetración componentes del virus atraviesan la 
barrera de la membrana citoplasmática. 
3- Denudamiento (uncoatting) liberación del genoma en el sitio 
de replicación. 
4- Expresion y Replicación producción de nuevas proteínas y AN 
para formar nuevo viriones. 
5- Ensamblaje + encapsidacion reunión y ordenamiento de todos 
los componentes virales neosintetizados para la formación de 
nuevos viriones. 
6- Maduracion reorganización de algunos componentes del 
virion para que se convierta en infectivo. 
7- Egreso liberación de la célula. 
 
 
INGRESO 
Los virus son parasitos intracelulares obligados que necesitan de 
células hueaspedes para poder replicar. 
El inconveniente que tienen es que son demasiados grandes para 
poder difundir por el citoplasma por lo que ingresa por mecanismos 
específicos. 
Los virus localizan las células correctas de modo azaroso y siguen 
movimientos brownianos (difusión-electrostaticas) 
 
Buscando la celula correcta 
Etapa 1: adhesión a superficie celular (interaccion electrostática) no 
es especifico 
Etapa 2- unión a receptores moleculares específicos (interaccion 
especifica) 
Etapa 3- entrada hacia el interior de la celula 
 
Consta de las 3 primeras etapas 
 Adhesión 
 Penetración y transporte 
 Denudamiento 
 
ADHESION (ATTACHEMENT) 
Mediante la interaccion de virus con receptores 
Se debe tener en cuenta: 
 Distintos tipos de moléculas 
 Un virus puede adherirse a mas de un receptor 
 Un receptor puede ser compartido para mas de una 
familia de virus 
 El receptor determina el tropismo: el huésped, el tejido y 
el tipo celular. 
El tropismo de un virus no depende solamente si tiene los 
receptores o no los tiene. Por ejemplo si una celula no tiene 
receptor para picornavirus, podemos decir que la celula no es 
ESTRATEGIAS VIRALES DURANTE EL CICLO 
REPLICATIVO 
susceptible, pero si uno inocula el ARN viral de este, replica igual o 
sea es permisiva. 
 
Receptor: 
Molécula de superficie a la cual se ancla el virus 
Co-Receptor: 
Molécula adicional sobre la superficie cellular que es requerida para 
la entrada del virus a la celula. 
RECEPTORES. 
1- Receptor simple 
Un solo receptor mayor responsable del ingreso a la celula. 
Ac sialico orthomyxoviridae 
Pvr  Poliovirus 
 
(AAV: adeno asociado; HPV: papilomavirus humano; HSV: 
herpesvirus; IAV: influenza; RSV y RV: paramyxos; HCV: hepatitis C 
(flavi); DV: dengue; EBOV: ebola; FMDV: aftosa; etc). 
 
2- Receptor + Co-Receptor 
Hay un receptor principal pero requiere de otra molécula para 
asegurar la entrada. 
Retroviridae: HIV I su proteína gp120 se une al receptor CD4, pero las 
cepas que infectan macrófagos además necesitan de co receptor 
CCr5, mientras que los que infectan LTcd4 necesitan CXCr4 
HIV 2: también ingresa sin necesidad de un correceptor, usando una 
quimioquina, esto podría llevar al aumento del rango de 
hospedadores 
 
3- Receptor alternativo 
Virus usa mas de un receptor. 
Rhabdoviridae se une al receptor de acetilcolina en la placa 
neuromuscular, pero también usa NCAMpara llegar al SNC. 
Hay virus que mutan sus receptores y asi pueden saltar de especie 
por lo que aumentan su afinidad por nuevos receptores. 
 
Tener en cuenta que el encuentro inicial es azar-virus-probabilidad. 
La presencia de su receptor y co-receptor (susceptible) no asegura 
que el virus replique en una celula. 
Para ello debe ser permisiva o sea que tenga componentes 
intracelulares que permita la replicacion. 
 
 
 
PENETRACION 
 
Si los virus (envueltos o desnudos) entran por via endocitica tienen 
diferentes mecanismos para formarse el endosoma luego de la 
adhesión: 
 Mediada por Clatrina 
Adenovirus, papilomavirus, poliomavirus, parvovirus, 
reovirus (orbivirus), erterivirus, coronavirus, flavivirus, 
picornavirus (aphtovirus), bornavirus, bunyavirus, filovirus, 
rabdovirus, paramixovirus, retrovirus. 
 Mediada por Caveolinas 
Papilomavirus, picornavirus (enterovirs), poliomavirus 
(SV40), retrovirus (gamma Retro), hepadnavirus 
 Mediada por mecanismos independiente a esos dos 
Picornavirus (enterovirus); calcivirus, papilomavirus, 
reovirus (rotavirus), circovirus; Ortomyxovirus (influenza 
tipo A) 
 
VIRUS ENVUELTOS 
Todos los virus envueltos deben fusionar sus membranas para poder 
ingresar a la célula. 
Cuando se produce a nivel de la membrana plasmática es 
independiente de pH mientras que si es a nivel endocitico es 
dependiente de pH. 
Los virus tienen proteínas de anclaje que se unen al receptor y 
proteínas de fusión, una porción hidrofóbica capaz de anclarse a 
otra membrana y permitir la fusión de ellas. El péptido fusión solo se 
expone en el momento de unión, sino permanece oculto y cambios 
de conformación ya sea por pH, acción enzimática, interacción con 
otra proteína hace que se exponga. 
 
A- Penetración por fusión en la membrana plasmática. 
A.1- Proteína de anclaje y fusión separadas. 
Paramixoviridae: la proteína HN es la responsable de la unión y la 
proteína F es el péptido fusión. La proteína F tiene dos unidades F1 y 
F2. El péptido fusión esta en F1 pero normalmente esta oculto por 
F2. 
La interaccion de HN con su receptor genera un cambio 
conformacional que hace que se exponga el péptido fusión que es 
clivada por proteasas provocando la unión a la célula (B). 
 
A.2 Proteína de anclaje y fusión juntas. 
Retroviridae: la glicoproteína env está formada por dos 
subunidades. SU (gp 120) y TM (gp41), esta ultima porta el peptido 
fusión. La unión de SU con su receptor generan un cambio de 
conformación que provoca que se exponga el péptido fusión y se 
una al co-receptor (imagen c en grafico anterior) 
 
B- Entrada por via endocitica. 
B.1 Mediada por receptor, fusión a nivel del endosoma pH 
dependiente. 
Orthomixoviridae: la interacción se produce mediante su HA y el 
acido sialico. HA esta formado por un homotrimero (3 proteinas 
idénticas). Unidas por un puente disulfuro. Cada monómero tiene 
dos subunidades HA1 y HA2. HA1 forma una cabeza globular que es 
el sitio de reconocimiento con el receptor, porción genéticamente 
mas variable y sus mutaciones son responsables de la variación 
antigénica. HA2 es fibrilar contiene porción transmembrana y carga 
con el péptido fusión oculta por la HA1. 
Cuando HA1 contacta con el receptor se produce unendosoma. 
El ambiente endocitico se acidifica, este cambio de pH genera 
cambios conformacionales exponiendo el péptido fusión con la 
consiguiente fusión de membranas liberando la ribonucleoproteina 
al citoplasma. 
Al mismo tiempo que se produce esto, por los canales M2 del virus 
hay influjo de protones que provoca el desacople de la 
ribonucleoproteina de las proteínas M1. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
VIRUS DESNUDOS 
A- Via endocitica. 
A.1- Endocitosis y lisis de la membrana endosomal 
Adenoviridae: la capside tiene proteínas de adhesión (fibras o 
proteínas IV) que se ancla a una base pentamerica (proteína III) que 
se une al correceptor. 
Cuando ingresa la disminución del pH genera la disgregación de la 
capside parcial donde se desprenden proteínas (III) que tendrían 
acción lítica sobre el endosoma. 
Otros: papiloma y parvo 
 
 
 
A.2- Endocitosis con Denudamiento lisosomal- permeabilizacion 
Reovirus: En estos casos aprovechan las enzimas producida por los 
lisosomas (pocos virus llegan a este nivel de maduración 
endosomal) ya que tiene proteínas muy resistentes. La acción 
enzimática degrada la capa externa, produciéndose la activación de 
las nucleasas. Las proteínas que resisten la acción de los lisosomas+ 
genoma+ nucleasas forman las famosas particula subviral infecciosa 
(ISVP) capaz de atravesar la membrana del lisosoma. 
 
A.3- Poros en la membrana 
Picornaviridae la proteína VP1 se une al receptor mediante sus 
cañones o loop según genero. Esto genera la perdida de VP4 y la 
exposición de regiones de VP1 que antes estaban ocultas 
provocando poros en la membrana introduciendo asi su genoma 
Poliovirus lo realiza en membrana citoplasmática mientras que 
aphtovirus lo realiza en membrana endosomal. 
 
Mecanismos alternativos. 
A- Fusión de celula sana con Celula infectada: 
De esa forma escapan del Sistema inmune. De esta forma también 
puede pasar de una célula infectada a una celula NO susceptible 
pero permisiva. 
Un ejemplo de ello es la formación de sincicios células infectadas 
exponen en su membrana proteinas virales que “pegan a las células 
vecinas” fusionándose las membranas permitiendo al virus pasar a 
células vecinas no infectadas 
Ej: herpesviridae, paramyxoviridae, poxviridae, reoviridae y 
retroviridae 
 
 
B- Mediada por Ac: 
Formación de Ag-Ac que se une a receptores Fc mediando la 
fagocitosis posterior. Esto por ejemple se da con el virus de Dengue, 
Aftosa y virus Epstein Barr. 
TRANSPORTE CITOPLASMATICO 
 
 
Dentro de la celula el citoplasma esta lleno de organelas por lo que 
la movilidad esta imitada y les lleva tiempo a los virus. En la celula, 
estructuras en exceso de 20 nm requieren movilidad dependiente 
de energía para desplazarse por el citosol. Por ello usan el motor 
celular para moverse. La mayoría lo hace por microtubulos, otros 
usando el citoesqueleto. 
A-Transporte dependiente de actina 
Inducido por proteinas virales que interactúan con la actina 
promoviendo su polimerización-despolarizacion para desplazarse. 
B- Transporte microtubular 
Usan proteinas como dineina y kinesina. Medio usado por casi todos 
los virus que llevan su genoma al nucleo. 
 
PENETRACION DENTRO DEL NUCLEO 
La via de entrada al nucleo ocurre por varias vías: 
 ARN virus, ADNds virus y lentivirus entran via complejo 
poro nuclear mediando el trasporte por importinas 
celulares. 
 ADNss virus cruza a través del poro NPC ya que son 
pequenos 
 La capside de herpesvirus es muy grande que no entra por 
el poro NPC, queda “atascado” en el poro liberando luego 
el ADN viral dentro del nucleo. 
 Los retrovirus simples necesitan que la celula este en 
mitosis para poder ingresar. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
B- EXPRESION Y 
REPLICACION 
 
CONSIDERACIONES GENERALES. 
1- las células carecen de enzimas para producir ARNm a partir de 
ARN 
2- Las células no replican ADN en citoplasma 
3- el aparato de traducción celular solo opera con ARNm 
monocistronicos (codifican para una proteína), de lo contrario 
produce poliproteinas que luego van a tener que ser clivadas. 
4- Los virus tienen que desarrollar una estrategia para apoderarse 
de la maquinaria de traducción para la síntesis de proteínas, ya que 
la celula produce también ARNm 
 
Los virus ARN+ son infectivos por si mismo porque su genoma es 
igual al ARNm 
Los virus ARN - no son infectivos sus genomas porque no pueden 
ser leidos y por ellos todos llevan su polimerasa consigo.. 
SINTESIS DE ARN 
 
Recordar que promotor y transcripción hace referencia a generar 
ARNm a partir de ADN. Por ende está mal decir que un virus ARN 
transcribe ARNm, lo que se dice es que sintetiza ARNm 
 
1- virus ARN (-): su polimerasa es empaquetada dentro de la 
particula viral, lista para iniciar con la síntesis de ARN una vez 
dentro de la celula. 
2- virus ARN (+): sus genomas son desnudos y están listos para ser 
traducido una vez que entran en la célula. Excepciones: retrovirus, 
coronavirus). 
 
 
 
 
 
3- virus con genoma doble cadena: las partículas virales contienen 
ARN polimerasa, sin ella los ARNm no pueden ser sintetizados en la 
celula. 
 
Es característico que los genomas de los virus de ARN estén 
asociado a proteínas (proteína N en rabdoviridae), o que tengan 
estructuras secundarias o terciarias 
 
Reglas que dirigen la síntesis de ARN a partir de ARN 
 La síntesis de ARN inicia y termina en sitios específicos del 
templado 
 La ARN polimerasa dependiente de ARN puede llevar a 
cabo una síntesis de novo sin primer (parecida a una ARN 
polimerasa dependiente de ADN) o bien requerir un 
primer 
 Otra proteína viral o celular puede ser requerida 
 El ARN es sintetizado bajo la incorporación de NTPs 
dirigida por un templado, es elongado en dirección 5’ 3’ 
 Sintesis de ARN sin templado 
 
 
Inicio de novo 
A- iniciación 3’ terminal: la ARN pol inicia en 3’ agregando NTPs sin 
necesidad de un primer. 
B- templados que tienen en el extremo 3’ una estructura similar 
al cap que tiene los ARNm celulares en su extremo 5’. Esa estructura 
es reconocida por la ARN pol iniciando en un sitio intermedio, luego 
el producto recién sintetizado se desplaza un poco hacia atrás para 
que la polimerasa lea los primeros pares de bases. La polimerasa 
inicia en un sitio interno donde la secuencia es repetida. 
 
Inicio dependiente de cap 
A- proteínas asociadas a un cebador 
B- CAP asociado a cebador 
 
Cuando se sintetiza una cadena de ARN al igual que en el ADN se 
necesita para su correcto funcionameinto del ion Mg. Este mantiene 
en su lugar los residuos de aspartato de la ARN pol. Además ayudan 
a llevar a cabo la rn de polimerización interactuando con el oxigeno 
de la ribosa, generando un ataque nucleofilico sobre el grupo 
fosfato permitiendo posteriormente el agregado de una nueva base 
nitrogenada (enlace fosfodiester) 
 
ARN (+) 
 
 
Picornaviridae 
Su genoma liberada en el citoplasma actua como ARNm 
directamente y además se genera el ARN (-) para hacer las copias 
genómicas. 
Esto ocurre en vesículas de membrana generada por la infección 
donde replican. 
Vpg en extremo5’ y cola poli A. se traduce en una poliproteina que 
posteriormente es clivada por 2A y 3C. 2A tiene acción en trans 
sobre otras proteínas igual que 3C. 
 Cloverleaf: 
 Secuencia Cre 
 Pseudonock 
 
 
Los ARNm celulares no pueden copiarse por la polimerasa viral por 
que no tiene el psedonockt que es el ditio de unión de la polimerasa 
viral. 
Cre sirve como punto de nucleación para la adición de base. 
Vpg funciona como primer de la polimerasa viral. 
3D se une a Cre, las proteasas virales cambian la conformación de la 
secuencia cre permitiendo que una tercera ARN pol 3D se una al 
sitio, ahí recién Vpg se asocia al complejo donde la ARN pol adiciona 
nuevas bases a Vpg 
En las vesículas de membrana ocurre la síntesisde ARN: el 
precursos de Vpg (3AB) esta anclada a la vesicula y a la vez unida a 
la proteína PCbp. Esta ultima está unida al cloverleaf junto a la 
proteína 3Cdpro. Este complejo interactúa con la proteína de unión 
a la cola poli A PAbP que se une a su vez al extremo 3’ del genoma 
llevándolo a un sitio intermedio del genoma. La proteasa viral corta 
la unión con la proteína 3AB liberando la VPg. La polimerasa viral 
adiciona nucleótidos sobre la VPg usando la secuencia cre como 
base, esa cadena de nucleótidos es transferida al extremo 3’ del 
genoma siendo usada como primer por la ARN polimerasa. 
 
Coronavirus: 
El ARNm/genoma no se traduce por completo. Lo hace 
parcialmente en extremo 5’ produciendo sus polimerasas y 
proteínas accesorias. Esta ARN pol puede replicar el genoma (+) 
completo para producir su copia antigenomica (-)y es capaz de 
producir pequeños ARNm (usando de molde a la ARN (-) de molde) 
llamado ARNm subgenomicos (para proteínas estructurales). 
 
ARN (-) 
 
 
 
Rabdovirus 
Su genoma es copiado mediante la polimerasa que viene con e 
virion en diferentes tipos de ARNm que traducen a un solo tipo de 
proteína. Algunas de ellas participan en el proceso de replicación del 
templado antigenomico  genómico 
Cada uno de los mensajeros tiene cap y están poliadenizados 
Cuando el virus entra en la celula produce primero los ARNm, luego 
de la traducción hay cambio de función de la polimerasa para las 
copias genómicas. La prooteina N genera el cambio cubriendo el 
ARN genómico en secuencias intergenicas principalmente 
permitiendo que la polimerasa genere la copia antigenomica para 
realizar las copias genómicas luego. 
 
Esta polimerasa no depende de primer se une directamente en 3’, 
genera la copia finalizando en una secuencia intergenica 
(separándose el primer ARNm); la polimerasa inicia otra vez con el 
segundo gen hasta la siguiente secuencia intergenica 
La secuencia intergenica presenta la señales de poliadenilacion y 
cap. 
 
Orthomyxovirus 
El proceso es similar pero se lleva a cabo en el nucleo. Esto es por 
que necesita primer con cap del nucleo y además algunos de sus 
ARNm necesitan splicing generándose un nuevo marco de lectura 
para una proteína diferente. 
Aca también la proteína NP esta relacionado con el cambio de 
síntesis de ARNm y síntesis de ARN genomico 
 
La polimerasa depende de un primer que son los cap ¨robados¨de 
los ARNm de la celula hospedera (por ello debe ir al nucleo). 
En primer lugar la polimerasa sintetiza ARNm para la traducción de 
proteínas. El acumulo de proteína NP recubre el genoma viral 
haciendo que la polimerasa copie todo el genoma sin necesidad de 
primer (antigenomica genómico). La copia antigenomica no tiene 
cap ni cola poli A ya que es el que se va a usar de molde para la 
cadena complementaria genómica. 
Robo de cap 
En la síntesis de ARNm una enzima (endonucleasa) que posee en la 
particula viral se une a los cap de la celula hospedera clivando su 
porción 5’ hasta un tamaño de 13 bases después del cap, los cuales 
luego añade en el extremo 5’ del ARNm sintetizado 
 
Adicion de la poli-A en los ARNm 
La polimeras viral forma un trímero, el templado es leído de 3’5’ y 
se va moviendo por el sitio activo de la enzima mientras se genera el 
ARNm (5’3’). Cuando llega a la señal de poliadenilacion que posee 
el genoma se agrega la cola poli-A liberando el ARNm 
 
ARN DOBLE CADENA 
 
Reovirus 
Posee doble hebra y la cadena positiva posee cap pudiendo actuar 
como ARNm, sin embargo como esta interactuando con su hebra 
complementaria no esta disponible para ser copiada. 
Cuando entra la polimerasa viral que viene con la partícula) se 
encarga de copiar cada segmento para producir los ARNm que 
serán traducidos a proteínas virales. 
En algún punto cuando se ensambla parte de la capside viral, 
algunos de los mensajeros se empaquetan y dentro de la capside 
que tiene ya la ARN pol genera la hebra complementaria. Su 
replicación es conservativa 
 
La particula de reovirus tiene dos capas concéntricas de proteínas 
de característica icosaedrica durante su entrada se elimina una de 
sus capas formando una particula infecciosa subviral (ISVP), luego la 
capa externa se separa liberando la nucleocapside que es 
transcripcionalmente activa. Para degradar sus capas utilizan los 
lisosomas (ver replicación). El genoma es copiado dentro de la 
nucleocapside por lo que nunca se muestre su genoma doble 
cadena. 
REPLICACION DE VIRUS ADN 
La replicación siempre requiere como minimo la expresión de al 
menos una proteína viral, algunas veces de muchas. 
El ADN siempre es sintetizado en dirección 5’3’ (o sea lee de 3’ 
5’) mediante una via de replicación semi conservativa 
La replicación inicia en orígenes definidos (Ori) utilizando un primer 
La célula huésped provee otras proteínas 
 
Pasos para la replicación de ADN 
 Reconocimiento del origen (Ori) para la iniciación 
 Cebado de la síntesis de DNA 
 Elongacion 
 Terminación 
 
Modos de replicación 
1- Horquilla de replicación 
Se produce la separación de las hebras de ADN y se sintetiza la 
cadena complementaria en cada hebra al mismo tiempo 
 Poliomavirus 
 Papilomavirus 
 Herpesvirus 
 Provirus retrovirales 
2- Desplazamiento de cadena (primer) 
Se requiere un primer, se sintetiza una cadena y la otra se desplaza. 
Luego se sintetiza la otra cadena 
 Adenovirus (proteína) 
 Parvovirus (horquilla de ADN) 
 Poxvirus (horquilla de ADN) 
 
 
Los virus pequeños no codifican ADN polimerasa, pero codifican 
proteínas que organizan al anfitrión (papilomavirus, poliomavirus, 
parvovirus) 
Virus de genoma grande codifican la mayoría sus polimerasas 
(herpesvirus, poxvirus y adenovirus) 
 
Proteínas virales necesarias para la replicación 
ADN polimerasas y proteínas accesorias 
Proteinas de unión al origen Ori, helicasas (desenrrolla el ADN) 
Exonucleasas (corrige errores) 
Enzimas del metabolismo del acido nucleico (TK, RR,dUTPasa) 
 
Orígenes del ADN para la replicación 
Segmentos de ADN ricos en A-T reconocidos por proteinas de 
reconocimiento viral 
Algunos virus tienen un Ori, otros mas de tres y son usados para 
diferentes propósitos. 
 
Parvovirus 
Genoma de ADNss. Este tipo de genoma se convierte en ADNds y 
esto es asi por que solo se sintetiza ARNm a partir de ADNds. 
Los extremos forman horquillas y son parcialmente de doble cadena, 
esto es por que los extremos están invertidos y son 
complementarios de esta forma generan estructuras de horquillas 
apareando los extremos y actúan como primers para la síntesis de 
ADN 
De la horquilla 3’ la polimerasa sintetiza la hebra complementaria. 
Para no perder una parte de la secuencia del genoma, la proteína 
Rep78 lo que hace es separar en ADN descubriéndose un extremo 3’ 
usado como primer por la polimerasa. De esa forma una vez 
sintetizado ese extremo vuelve a formar una horquilla para reiniciar 
el ciclo 
 
Resumen: 
El parvovirus se autoceba un primer con su templado 
Solo utiliza una proteína viral Rep 78/68 
La infección no tiene efecto en la síntesis de ADN. 
Los parvovirus replican en celulas en división celular. 
 
Poliomavirus 
ADN ds circulares. La replicación en el Ori teneindo una replicación 
bidireccional generándose dos horquillas de replicación. La proteína 
LT tiene muchas funciones. Se une al origen de replicación en 2 
hexameros de LT generando un cambio conformacional de ADN 
donde se este se separa gracias a la función de helicasa de la misma 
proteína. 
 
La cadena líder es iniciada por un primer de ARN y la polimerasa 
simplemente avanza en direccion5’3’ 
Del otro lado del Ori esta la cadena retrasada donde se sintetiza de 
a porciones con muchos primer de ARN (segmentos de Okazaki) 
Los primer son removidos y posteriormente se rellena los huecos y 
ligadas. 
 
Resolución: mientras se replica se va torciendo las 2 cadenas, allí las 
topoisomerasas rompe una de las cadenas para liberar la tensión y 
lograr la liberación de ambas cadenas Otra función de LT esel de 
mantener a la celula replicándose asi tiene proteinas necesarias 
para replicar. 
 
Adenovirus 
Genoma ADNds lineal. Presenta una proteína en el extremo 5´unido 
covalentemente llamada TP, actua como primer. 
Cebado o priming: la polimerasa se une a la proteína TP 
inicialmente covalentemente pero luego una proteasa rompe esa 
unión pero sigen juntas, una citosina se une (primera base) a un 
residuo de serina en TP de esa forma funciona de primer por 
interacción de esa citosina con la guanina de la hebra 
Elongacion: la polimerasa copia la cadena desplazando la otra hebra. 
Cuando termina de sintetizar la hebra una proteasa viral corta TP 
de la hebra. La cadena desplazada se une a una proteína del virus 
llamada DBP (proteína de unión a ADN de cadena sencilla. 
La cadena desplazada sintetiza su otra hebra de forma 
independiente circularizando cubierta de la proteína DBP (menos 
en los extemos que hibridizan) ya que presenta extremos 
complementarios entre si para repetir el ciclo antes visto 
Resumiendo 
 Es un ejemplo de síntesis por desplazamiento de cadenas 
 Utiliza una proteína como primer 
 El origen se encuentra en dos sitios terminales 
 La ADN pol es viral 
 
 
Herpesvirus 
Presenta genoma ADN ds linear. Presenta 3 Ori: 2 Oris idénticos y 
un OriL media la transición de latencia a ciclo lítico único que es 
activo en neuronas diferenciadas terminales 
El ADN entra como molécula lineal y se convierte en circular 
Replicación por circulo rodante 
Cuando replica primero circulariza, luego se produce un corte en 
una de las hebras que sirve de punto de origen para que la ADN 
polimerasa viral para sintetizar una nueva cadena de ADN al copiar 
el circulo interno (síntesis de ADN continua). La otra cadena se va 
desplazando de alguna manera pudiendo ser copiada por otra 
enzima (síntesis de ADN discontinua). La cadena desplazada se 
separa del circulo a medida que se genera la ora cadena mediante 
circulo rodante, esto forma los concatameros 
Proteinas relacionadas con la replicación 
 UL5,8 y 52: forma la primasa, helicasa 
 UL 42: proteína de posesividad: requerida para que la 
polimerasa se mueva por el templado 
 UL 9: proteína de unión al origen 
 UL29: proteína de unión a cadena sencilla 
 UL 30: ADN polimerasa 
 5 enzimas de metabolismo de acido nucleico diferente 
como TK 
 
Inhibición de la síntesis de ADN celular 
Cuando la replicación de ADN viral se lleva a cabo en mayoría por 
proteinas virales, la síntesis de ADN celular es generalmente 
inhibida. El virus quiere aumentar la disponibilidad de sustrato 
para el. 
Herpesvirus, adenovirus usan esta estragias 
TRANSCRIPCION DE ARN A 
PARTIR DE ADN 
Etapas genéricas de la transcripción 
 
1- Reconocimiento del promotor 
2- Formación del complejo pre-inicio 
3- Inicio 
4- Elongación 
5- Terminación 
 
Sucesos que le ocurren a los transcriptos de ARN 
1- Adición de cap (“capping’) 
El ARNm generado es “encapuchado” en su extremo 5’ . el capped 
es la unión de una guanosina trifosfato al último nucleótido del 
extremo 5’ mediante unión 5’-5’ (lo normal es 5’-3’). 
El cap está involucrado en: 
 
 Transporte del ARNm del núcleo al citoplasma 
 Protección del ARNm de las exonucleasas. 
 Iniciación de la transcripción 
 
Los virus que replican en el nucleo usan la enzima de la célula para 
hacer el capping. Orthomixoviridae que replica también en el núcleo 
lo que hace es “ robar” los caps de otro ARNm de la celula. 
Los virus que replican en citoplasma tienen sus propias enzimas en 
general para el capping (reovirus, coronavirus), otros también 
“roban “los Caps y otros como picornaviridae no usa caps (aca la 
transcripción no depende de caps) 
 
2- Poliadenilacion 
Agregado de una serie de residuos de adenosina en el extremo 3’ . 
su función es estabilizar más el ARNm . 
No todos los virus lo realizan. 
Cuando se genera el ARNm hay una señal que indica que ahí se debe 
cortar el ARNm y colocar su cola poliA. 
 
3- Procesamiento (Splicing) 
Utilizado en los virus. Dos exones que poseen información relevante 
para la traducción de alguna proteína están separadas por un intron 
el cual es removido por exonucleasas. Se realiza en núcleo por lo 
que solo los virus ADN, retrovirus y otomyxovirus pueden hacerlo. 
 
4- Transporte 
Recién cuando sale del nucleo es ARNm 
 
5- Silenciamiento 
 Degradación 
 Inhibición de la traducción 
 
ARN Polimerasa celular 
En el núcleo podemos encontrar las siguientes polimerasas: 
 Pol I- pre ARNr (no la usa el virus) 
 Pol II- Sintetiza ARNm y algunos ARNmi 
 Pol III- Adenovirus VA ARN, EBV, EBERs y algunos ARNmi 
 
El aparato de transcripción solo trabaja con ADN ds. Por ello 
parvovirus necesita en primer lugar sintetizar su cadena 
complementaria 
Los virus ADN y retrovirus necesitan una ARN polimerasa 
dependiente de ADN para poder trascribir a ARNm (ARN pol II 
celular en el nucleo). Los virus ADN que replican en citoplasma 
llevan su propia ARN polimerasa. 
 
Elementos de un promotor 
Secuencias específicas de ADN 
TATA box- secuencia definida- TFIID reconoce TATA. 
Iniciador-asegura inicios precisos 
 
Enheancers: 
Contiene secuencias de consenso. Son sitios donde comienza la 
transcripción como por ejemplo la TATA box. 
Los Enhancers contiene secuencias donde se une factores de 
transcripción que luego interactúa con los factores de 
transcripción ubicados en el sitio promotor. Esto incrementa la 
transcripción por la ARN polimerasa II. 
 
La polimerasa II reconoce el promotor, pero necesita algo que le 
ayude a especificar un inicio preciso y viene de proteínas celulares o 
virales. 
Luego de reconocer el promotor se forma el complejo de iniciación 
cerrado (nucleo de proteínas sobre el promotor) posteriormente el 
complejo de iniciación se abre, las helicasas colaboran. Asi la 
polimerasa empieza a transcribir (es fosforilada) 
 
Adenovirus: Los ARN tardíos de adenovirus que codifican para 
proteínas de la capside se descubrió que todos provenían de un 
mismo promotor (ML). Todos ellos estaban compuestos de 4 
partes: un líder tripartita en 5’ terminal y un cuerpo y mediante 
splicing obtiene los diferentes ARNm. 
Toda la transcripción depende de E1a 
MLP-secuencia líder: 
Se transcribe la secuencia completa, ese ARN transcripto es 
procesado  hibridación de ADN con el ARN generado  
formación de tres asas que no hibridan con el ADN (A-B-C), esas son 
zonas de splicing. 
 
De esa forma adenovirus cambiando el patrón de splicing puede 
cambiar la proteína generada. 
 
Retrovirus (lentivirus): Tiene LTR (repetición terminal larga) son 
promotores fuertes leídos por la polimerasa celular 
Rev es una proteína que promueve el splicing en todo el genoma. 
 
Poliomavirus: tiene un enhancer duplicado que trabaja a distancia y 
es independiente de la orientación. Algo característico es que puede 
trabajar el Trans (no tiene que pertenecer a la misma molecula que 
se esta transcribiendo). Varias proteínas interactúan con el 
enhancer interactua con el complejo de inicio aumentando 
resultando en mayores niveles de iniciación de transcripción. 
 
Regulación 
Los virus usan proteínas del huésped y/o proteínas virales 
especializadas para la regulación de la expresión de genes. 
Los virus codifican o llevan consigo moléculas activadoras 
La especificidad al tipo celular puede limitar la expresión 
 
Dominios reguladores en proteínas 
Las moléculas reguladoras están compuestas de multiples dominios 
que contribuyen a la regulación de genes virales 
 Unión a ADN 
 Activación/represión 
 Interactor 
 Multimerizacion 
 
Los virus pueden regular de forma temporal la transcripción de 
ARNm de forma temporal siendo que una proteína traducida 
autoregule su expresión (positiva o negativamente) o regule la 
expresión de otros genes (como sucede en herpes donde los 
productos de genes A estimula la expresión de genes B) esto lo 
llamamos cascada regulatoria. Esto de forma coordinada. 
 
La cascada transcripcional 
 Proteínas inmediatas:es lo primero que transcriben los 
virus 
 Transcripción de genes tardíos 
 Asegura la produccion coordinada de genomas de ADN y 
proteínas estructurales, libera el templado de represores: 
la síntesis de ARN libera represores de la síntesis del 
templado, al producirse la síntesis del ADN llegara un 
momento donde habrá mas moléculas de ADN que 
proteínas regulatorias de la transcripción ppalmente 
silenciadores y eso permite que los promotores complejos 
ahora si sean transcriptos. 
Poliomavirus: lo primero que hace es transcribir para la produccion 
de la proteína LT, esta vuelve al nucleo y reprime su propia 
transcripción y se permite asi la síntesis de ADN viral 
posteriormente. 
LT: se une al oris de polioma como hexámero, promotor temprano 
apagado y tardío activado. 
 
Adenovirus: primero expresa la proteína E1A, esta activa la 
transcripción de los genes E2 para ello interactua con proteínas 
celulares. E2 es un antirepresor libera la obstrucción de la 
promotores de los genes tardíos y permite la expresión de 4E2 
E1a: necesaria para la transcripción de unidades transcripcionales 
tempranas. Reúne los proteínas celulares en varios promotores 
tempranos para permitir la transcripción de los mismos. 
E2 es requerida para la síntesis de ADN y la entrada a la fase tardia 
de transcripción 
IVa2 aumenta la transcripción de genes tardíos 
 
Herpesvirus: Vp16 activa expresión de genes inmediatamente 
tempranos estos estimulan los genes de los tempranos y estos 
últimos de los tardíos 
 
 
 
 
 
TRADUCCION 
Proceso en el cual el ARNm  proteína 
 
Maquinaria de traducción en una celula normal: 
 Ribosomas 
 ARNt 
 Proteínas de inicio (eIF) 
 Proteinas de elongación (eEF) 
 {rpteinas de terminación (eRF) 
 
Mecanismos normales de iniciación en celulas 
Iniciación 5’ dependiente (mayoría de los ARNm) 
Ocurre con la interacción de muchas proteínas de inicio. Las de 
importancia son eIF4E que es la que interacciona con el cap del 
ARNm y el otro factor importante es eIF4G que se una al factor 
anterior con el 40s 
eIF4G es muy grande y es blanco de modificaciones por células 
infectadas 
 
 
 
Luego de formado el complejo de iniciación, este se mueve hasta 
encontrar el codón de inicion (AUG). Una vez encontrado se libera 
los factores de iniciación y se acopla la subunidad 60s del ribosoma, 
allí inicia la traducción. 
Cuando ocurre la traducción el ARNm circulariza mediante la unión 
a la proteína PABP que unida a la vez a eIF4G 
 
Mecanismo normal de elongación 
Los aminoácidos + ARNt se unen a su codón en el sitio aminoacil del 
complejo de elongación, una transferasa liga el aminoácido que se 
encuentra en el sitio peptidil con el recién llegado. Posteriormente 
se produce la trascolcacion del ARNt + péptido naciente de AP y 
el ARNt que quedo sin su péptido en P E para finalmente salir del 
complejo. 
 
 
Cuando la célula es infectada, el SI detecta el genoma viral iniciando 
la rta a INF, este induce la transcripción de los genes estimulados 
por INF como Pkr fosforila iEF2, si Pkr “ve” ARNds NO fosforila a ese 
factor inhibiéndose la traducción celular (ver modulación virus-
celula). 
 
Existen diferentes estrategias para la síntesis de proteínas: 
1- A nivel de la transcripción: 
 Presencia de diferentes promotores 
 Transcripción en dos direcciones 
 Reiniciacion de la transcripción (rhabdoviridae- ARN-) 
 
2- A nivel del procesamiento 
 Presencia de diferentes sitios de poliadenilizacion 
 Splicing alternativo 
3- A nivel de la traducción: 
 Leaky scanning 
 Reiniciacion de la transcripción 
 Supresion de la terminación 
 Ribosomal frameshifting 
 Inicio de la traducción independiente del CAP 
 Ribosomal shunting 
4- A nivel post traduccional 
 Clivaje de la poliproteinas. 
TRADUCCION INDEPENDIENTE DE CAP 
 
Iniciación cap independiente 
IRES (internal ribosome entry site) son estructuras secundarias en el 
ARNm que pueden iniciar la transcripción desde cualquier lugar del 
ARNm 
La subunidad 40 s del ribosoma se une a IRES mediado por eIF4G 
sin necesidad de cap 
El virus de la hepatitis C es particular ya que puede la subunidad 40s 
ribosomal unirse al IRES directamente sin necesidad de ninguna 
proteína de inicio (no requiere cap) luego de unirse la subunidad 4os 
se une eIF3 y comienza la traducción 
 
La proteasa 2A procesa eIF4G inactivandola para la celula pero es 
competente asi clivado por el virus interaccionando con el IRES y 
Subunidad 40s 
 
 
 
RIBOSOMAL FRAMESHIFT 
Mecanismo alternativo de la traducción para fusionar proteínas 
codificadas por superposición de dos marcos de lecturas abieros 
(ORF) 
-1 ribosomal frameshift compuesto por un heptanucleotido o 
secuencia resbaladiza y un pseudoknott (5-8 nucleotidos rio abajo). 
El ribosoma viene leyendo los codones y se topa con estas dos 
estructuras lo que hace que se detenga vaya un nucleótido para 
atrás (-1) corriendo el marco de lectura. Retomando la transcripción 
por cambio del codón terminados al moverse uno para atrás. 
Ej: retroviridae, coronaviridae, picornaviridae, flaviviridae 
 
Retrovirus: el ribosoma viene leyendo y sintetizando la proteina de 
gag hasta que se encuentra con el codon de stop para finalizar gag 
(esto acurre en un 95% de las veces). Ese codon de finalizacion esta 
en un sitio heptanucleotido llamado secuencia resbaladiza, lo que 
hace alli es frenar dirigirse un codon para atrás y continuar 
sintetizando una proteina mas grande (gag-pol) 
 
 coronavirus 
+1 ribosomal frameshift el complejo de traducción va leyando 
hasta que se topa con un codón raro que forma parte de una 
secuancia resbaladiza, frena, se adelanta un nucleótido cambiando 
el marco de lectura del codón y continua. 
Ej orthomixoviridae 
 
 
RIBOSOMAL SKIPPING (“SALTO”) 
En un determinado momento de la translocación la 
peptidiltransferasa es inhibida por lo que el ribosoma salta 3 
codones y comienza de nuevo generando una nueva proteína. 
 
 
 
REINICIACION DE LA TRADUCCIÓN EN OTRO AUG 
 
Son ARNm bicistronicos que poseen 2 ORF. El complejo de 
traducción finaliza la primera proteína, pero corriente arriba había 
un codón de inicio el cual la subunidad 40s se vuelve a unir para 
iniciar la transcripción de la segunda proteína. 
 
Ejemplos de estos casos es Cytomegalovirus humano donde posee 
2 ORF, uno corto corriente arriba y otro mas largo corriente abajo 
separados por una región intersistronica. Otro es influenza donde 
uno de sus genomas tiene dos genes que están solapados el de M1 y 
M2 (2 ORF solapados) 
 
LEAKY SCANING 
Escaneo débil. Es un fenómeno en donde un codón de iniciación del 
ORF 1 en el ARNm es a veces saltado por el ribosoma en la iniciación 
de la traducción. La subunidad 40s continua escaneando hasta 
encontrar otro codón de iniciación (ORF2) iniciando la transcripción. 
Estas secuencias de iniciación débiles están en una zona de 
consenso de Kozak. 
Ej: orthomyxoviridae, herpesviridae, papilomaviridae, 
paramixoviridae, calciviridae, arteriviridae, etc. 
Un ejemplo es Poliomavirus (SV-40) donde sus proteínas VP1-VP2 y 
VP3 las genera por este método. 
 
 
Paramyxoviridae 
En el ejemplo de abajo vemos que el codón de inicion AUG para la 
proteína P es altamente leído por los ribosomas, no asi el codón 
ACG pudiéndolo pasar por algo (solo un 5% iniciara ahí) 
 
 
SUPRESIÓN DE LA TERMINACIÓN 
Existen codones de terminación normalmente como UGA (opalo) y 
UAG (ambar) que son en un 90 % reconocido por el factor liberador 
de la traducción eRF en vez del ARNt, con la consiguiente 
finalización de la traducción. Algunos virus tienen la posibilidad de 
no frenarse en ese codón por Pseudoknots por delante del codón de 
stop lo que impide que el factor se una a dicho codón, pero si 
permite la unión del ARNt continuando la traducción. 
 
Algunos ejemplos son: togavirus (A) y retrovirus (B). 
 
 
Retrovirus: Para gag-pol usa este sistema. Los ribosomas sintetizan 
gag al final encuentra un codón de paro, la mayoría delas veces 
para ahí (importante por que son proteínas que forman la estructura 
y se necesita en cantidad, pero también se necesita la TR, IN y PR, 
estas son generadas por el mecanismo de supresión de la 
terminacion 
RIBOSOMAL SHUNTING 
Llamado también descarrilamiento de ribosomas 
 
Las estructuras secundarias ribosomales deben ser “desarmadas” 
en el momento que el ribosoma con el complejo de iniciación va 
escaneando buscando el codón de inicio. Esto lo lleva a cabo IEF que 
tiene función helicasa, pero este proceso tiene un gasto de energía 
importante. En el caso del ribosomal shunting el ribosoma se 
decarrila sorteando todas las estructuras secundarias 
 
El descarrilamiento disminuye la dependencia de los ARNm por 
eIF4F durante la iniciación por reducir la necesidad de desenrollar el 
ARNm 
 
El ejemplo mas clásico se da en adenovirus: El ARNm recluta la 
subunidad 40 S, se realiza un escaneo muy limitado y rápidamente 
se trasloca al codón de inicio 
 
En la etapa tardia de infección los adenovirus traducen los ARNm y 
en forma simultanea suprime la traducción de ARm celulares. Los 
ARNm tardíos tienen cap y se traducen, a pesar de estar bloqueada 
la traducción celular, ya que poseen la secuencia líder tripartita en el 
extremo 5´ que les da la habilidad de iniciar la traducción por este 
mecanismo. En el mismo el ARNm recluta la subunidad40S, realiza 
el escaneo limitado y rápidamente va al codón de inicio 
 
 
MODIFICACIONES POST-TRADUCCION 
1- GLICOSIDACION. 
Adición de oligosacaridos a la cadena polipeptidica 
O-glicosidacion: grupo –OH en serina o treonina. La proteínas 
glicosidadas por este método se tradujeron en el RER 
N-glicosidacion: grupo –NH2 en asparagina. Las proteínas 
glicosidadas por este método se tradujeron en el RER aparato de 
golgi. (ver en maduración orthomyxoviridae y retroviridae) 
2- ACILACION. 
 Adición de grupo acilo (R-CO-) , el mas común es el ácido miristilo. 
Están asociadas generalmente a proteína de membrana o de 
capside de virus. 
La adicion de lípidos a las proteínas virales permite dirigirlas a la 
membrana independientemente de una secuencia señal. 
Las proteínas virales son sintetizadas en el citoplasma, y 
modificadas con lípidos posttraduccionalmente. 
 
Retroviridae: el precursor Gag, en su termina amino “N” donde esta 
la proteína matriz MA presenta miristato (lípido) que se une 
covalentemente al extremo amino aumentando la afinidad de la 
proteína por la membrana. Además presenta cargas positivas 
mejorando esa afinidad. 
3-FOSFORILACION 
Agregado de grupo fosfato a residuos –OH de tirosina, treonina y 
serina.. la fosforilacion puede alterar la actividad, localización, y la 
estabilidad de la proteína. 
4-CLIVAJE DE POLIPROTEINAS 
Llevada a cabo por proteasas que cortan una proteína. No 
solamente pueden autoclivarse sino que también pueden actuar en 
trans y clivar otras poliproteinas nacientes. Las de picornavirus son 
2A pro y 3C pro 
 
 
ARNmi 
Los micro ARN son pequeñas secuencias de ARN producidas por la 
ARN polimerasa III. Pueden ser celulares o virales y cumplen un rol 
en la regulación post transcripcional de la expresión génica via 
represión de la traducción o degradación de ARNm. 
Su principal blanco es el extremo 3’ UTR del ARN 
los ARNmi funcionan como en un complejo, los miRNPs, 
compuestos como Ago, Dicer y TRBP asi determinamos si los 
degrada a los ARNm 
Se cree que los micro ARN virales estarían involucrados en algunos 
virus en inhibición de apoptosis, modulación de la respuesta inmune 
etc… 
 
 
 
TRANSPORTE DE MOLECULAS 
DENTRO LA CELULA 
Proteinas sin péptido señal: quedan en citoplasma 
Proteina con péptido señal: comienzan sintetizándose en ribosomas 
libres pero luego el complejo se dirige al RER donde finaliza la 
traducción. El producto de traducción es empaquetado por golgi y 
transportado a la membrana celular. 
Las proteínas que una vez sintetizadas tienen que volver al nucleo 
poseen una secuencia de proteínas señal. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C- SALIDA 
Incluye: 
 Ensamblaje 
Formación de unidades estructurales de la capside 
(capsomeros). Armado de la capside 
 Encapsidacion 
Empaquetamiento del genoma viral y otros componentes 
del virion en la capside 
 Egreso 
Adquisición de la envoltura viral con proteinas. Liberación 
de la celula hospedadora 
 Maduración 
Reorganización de los componentes del virion necesario 
para su infectividad 
ENSAMBLAJE 
Las proteínas virales alcanzan altas concentraciones por viarios 
métodos. 
1-La replicación viral y traducción ocurre en un compartimiento 
¨fabrica viral¨ 
2-Produccion localizada de proteínas virales e interacciones 
proteína-proteina permiten la formación de sub-ensambles 
individuales 
3- Concentraciones locales de componentes virales estructurales 
que pueden ser implsados por interacciones laterales entre 
proteinasasociadas a membranas 
 
Las proteínas virales tienen “direccionaes” intrínsecas en su 
envoltura 
1- Proteinas de membrana que dirigen a las membranas correctas 
Secuencia señal, modificación de acidos grasos 
2- Proteinas de membrana se mantienen en las membranas 
correctas 
Proteína de retención 
3- Proteinas nucleares que van a nucleo 
Secuencias de localización nuclear 
4- ARNm viral o complejos ribonucleicos se movilizan al 
citoplasma 
Senal de exportación nuclear 
5- Las capsides y los complejos proteicos exhiben movilidad 
dirigida, no difusa 
Microtubulos y filamentos intermediarios son de transportes: 
dineinas, kinesinas y miosinas motores 
POR PROTEINAS INDIVIDUALES 
Las proteínas se traducen en el citoplasma ensamblándose en 
forma de subunidades. Se da al azar no hay interacción entre las 
proteínas 
Poliomavirus: las proteínas son producidas en el citoplasma 
individualemnte y luego se ensamblan en subunidades llamados 
pentámeros. 
 
Adenovirus: la proteína IV (fibra) y la proteína III (penton) se 
sintetizan por separado, luego la proteína IV forma un trímero y 5 
proteinas III forman un pentámero. Ambos capsomeros se 
encuentran luego para formar la capside del virion 
 
 
A PARTIR DE POLIPROTEINAS 
Cada capsomero se forma a partir de una poliproteina, por lo tanto 
no ocurren al azar, siendo mas eficiente. Es una interaccion 
intramolecular. La poliproteina interacciona consigo mismo en sus 
diferentes dominios y luego es clivada en las distintas proteínas. 
Picornavirus: lo hace con VP1, VP2, VP3, VP4 que luego de plegarse 
son clivada por 3CDpro. 
 
 
A PARTIR DE CHAPERONAS 
Pueden ser celulares o virales. Son proteinas que direccionan a las 
proteinas de la capside para que produzca su correcta reunión. 
Adenovirus: requiere chaperona viral llamada L4 para formar el 
trímero con la proteína II que posteriormente se une a los otros 
componentes de la capside 
 
Algunos virus producen producen proteinas Scaffolding o de 
andamiaje que generan un esqueleto alrededor del cual se van a 
ensamblar las proteinas de capside. Una vez conformado el virion 
estas proteinas son eliminadas. 
 
Herpesvirus: presenta proteinas de andamiajes llamadas VP22 y 
VP21. Una vez formada la procapside son removidas por una 
proteasa viral (VP24) y la capside queda disponible para recibir el 
ADN viral
 
 
ENCAPSIDACION 
Proceso en el cual el acido nucleico es incorporado a la capside. 
Secuencias especificas en el acido nucleico dirigen la señalización 
del proceso (señal de empaquetamiento). 
También importa el tamaño del genoma en relación a la capside. 
En virus ADN: señales cortas y repetidas generalmente cerca del 
ORI, rereconocidas por proteinas virales 
Por ejemplo en SV240 la señal de empaquetamiento esta próximo a 
la región regulatoria del genoma que contiene el sitio de origen de 
replicación, enheancer y sitios promotores. 
 
En el caso de herpesvirus, los nuevos genomas se sintetizan como 
una única molecula de ADN larga que contiene genoma tras 
genoma en forma continua (concatameros). El portal al reconocer la 
señal de empaquetamiento (pac1 y pac 2), el extremo de la 
molecula es ingresada a la capside hasta que reconoce una segunda 
señal de empaquetaminto que indica el comienzo de un segundo 
genoma donde se cliva. 
 
En virus ARN: mediado por nucleoproteínas o estructuras 
secundarios 
Por ejemplo retrovirus presenta una estructura secundaria llamada 
psi que varia en localización y complejidad. En la imagen abajo se ve 
la región psi donde el cuadro naranja (dis) es el sitio de dimerización 
inducida, eso quiere decir que cuando dos genomas del virus 
interaccionan por su región psi forman el complejo “ el beso de las 
asas” permitiendo la dimerización de los gonomas (por que se 
empaquetan dos genomas en retrovirus) 
 
Cuando un genoma interacciona con otro genoma de retrovirus 
ocurre una hibridación entre estos dos, esto genera que se 
expongan secuencias que estaban escondidas en el monómero 
normalmente. Esos sitios son de unión de la proteína de NC 
(nucleocapside) que luego los transporta a la membrana para la 
encapsidacion. (ver esquema a continuación). 
 
Virus ARN segmentados (orthomyxoviridae) 
Toma de 8 segmentos aleatoriamente, si eso ocurre habría 1 
partícula correcta cada 400 ensambladas. 
Hay evidencia de empaquetamiento especifico de secuencia para 
cada segmento de ARN. Cada segmento tiene una secuencia 
especifica que le permite ser incorporada dentro del virion. 
 
 
Coordinada: formación de capside dirigido por el acido nucleico 
Rabdovirus: mecanismo coordinado, la proteína N se asocia al 
genoma dando origen a la nucleocapside. Señal de 
empaquetamiento en extremo 5’ 
Orthomyxovirus: los genomas tienen señales que asegura una 
asociación entre fragmentos para que sus 8 genomas se 
empaqueten de forma coordinada. 
La ribonucleoproteinas generadas se les une M1 y Nep que 
transportan el ARN viral al citoplasma. La ribonucleoproteina 
interacciona con la membrana celular que tiene las glicoproteínas 
virales de membrana. La cara interna de la membrana se cubre de la 
proteína M1 y allí interacciona la ribonucleoproteina para 
finalmente salir por gemación. 
 
Secuencial: primero se genera la capside y luego se incorpora el 
genoma 
Picornavirus: ensamblaje por precursores poliproteicos, 
encapsidacion secuencial en vesículas citoplasmáticas. 
Herpesvirus: uso de proteínas de andamiaje que deben degradarse 
para la entrada del genoma mediante mecanismo secuencial 
Adenovirus: mecanismo secuencial donde los componentes se 
ensamblan uno a uno, aunque hay autores que hablan de 
ensamblaje concertado donde todos los elementos se unen a la vez. 
 
 
Incorporación de enzimas y otras PNE 
En muchas situaciones esas proteínas pueden unirse 
covalentemente al genoma para se transportadas junta a esta al 
momento del empaquetamiento como por citar un ejemplo. 
EGRESO 
 
VIRUS DESNUDOS 
Tienen los siguientes mecanismos: 
 Lisis celular 
Viroporinas 
Apoptosis 
 Exocitosis 
Fusión de vesículas provenientes de organelas 
 
Picornavirus: tienen un mecanismo de salida por lisis celular, aun asi 
se ha propuesto para algunos generos modelos no líticos de 
liberación donde las proteínas 2BC y 3A forman vesículas que 
recuerdan fagosomas que son sitios de replicación y ensamblaje. 
Posteriormente engloban al virus formándose cuerpos 
multivesiculares que liberan los virus por exocitosis. 
 
VIRUS ENVUELTOS 
Mecanismos: 
Envoltura: membrana celular plasmática o de organelas con 
glicoproteínas virales 
 Gemación (budding) 
 Exocitosis 
 
Gemación: 
I- las proteínas de cubierta y de capside son escenciales para la 
gemación de alfavirus 
II- Las proteínas de matriz interna o capside dirigen la gemación en 
retrovirus 
III- las proteínas de cubierta dirigen la gemación en coronavirus 
IV- Las proteínas de matriz dirigen la gemación pero componentes 
adicionales (Glicoproteinas, RNP) son escenciales para la eficiencia 
del proceso. 
Poxvirus: adquiere una doble membrana de Golgi, se lo denomina 
en este estadio como virion inmaduro, luego de sufrir cambios 
conformacionales se transforma en un virion maduro (IMV). Este 
ultimo puede salir de la celula si se destruye la celula pero es 
infectivo. Sin embargo una proporción de losIMV adquieren una 
cuádruple envoltura en un sitio posterior a Golgi. Esta membrana 
mas externa es capaz de fusionarse con la membrana 
citoplasmática liberando un virus con triple envoltura. Ambos tipos 
de viriones liberados tienen membranas diferentes con 
composiciones proteicas distintas permitiendo infectar diferentes 
células.(en ciclo de poxvirus esta la imagen) 
Herpesvirus: adquiere una membrna por budding de la membrana 
interna nuclear (procesos mediados por UL31-UL34), esta 
membrana es posteriormente perdida liberando el virus con las 
proteínas de tegumento a su alrededor. Otras proteínas de 
tegumento (UL11-46 y 49) interaccionan con la futura membrana 
del virion en Golgi, es aquí donde adquiere sus glicoproteínas y 
donde es finalmente liberado por exocitosis al medio externo 
 
Orthomyxoviridae: egresa por gemación (budding). Mecanismo de 
ensamblaje coordinado: 
1- nucleoproteínas 
2- M1 
3- NEP y proteínas de exportación. 
La liberación se produce por clivaje del acido sialico mediante sus 
neuramidinasas, sino quedaría pegada a la celula u a otros virus. 
 
MADURACION 
Consiste en el clivaje de algunas/s proteína/s entructurales del 
virionn ensamblado. Ocurre siempre como un paso posterior al 
ensamblaje. Puede ser antes, durante o después del egreso y 
siempre se lleva a cabo por enzimas virales. 
No todos los virus necesitan paso de maduración 
 
Retrovirus: el ensamblaje coordinado y egreso por gemación. La 
maduración es extracelular por autoclivaje de la poliproteina gag y 
gag-pol 
Cuando retrovirus produce sus copias genómicas, son exportadas al 
citoplasma, las proteínas de NC (que aun es en realidad gag por que 
tiene NC, MA, CA) se unen al genoma y lo dirigen a la membrana 
celular donde estan las glicoproteínas TS-SU. El virion empieza a 
gemar cuando se agregan los genomas junto a todas las proteínas 
de Gag, finalmente se incorporan las proteínas corresponentes de 
Gag-Pol (que además de las proteínas antes nombradas posee las 
proteasa, integrasa y retrotranscriptasa. Finalmente gema 
completamente pero aun no es un virion maduro. Esto se produce 
extracelularmente por parte de la proteasa 
 
 
 
El receptor TM-SU es una glicoproteína que presenta oligosacáridos 
y sitios de clivaje por parte de proteasas virales quedando 
finalmente SU unido con TM mediante puente disulfuro. El péptido 
fusión esta oculto y solo se expone cuando SU reconoce su receptor. 
 
Orthomyxoviridae: la enzima neuramidinasa se encarga de remover 
los residuos de acido sialico presente en las glicoproteínas de 
envoltura 
El extremo de HA presenta el sitio de unión a acido sialico, mientras 
que en extremo opuesto ceraca de la membrana presenta oculto el 
péptido fusión que se expone recién cuando hay cambios de pH 
durante la entrada a una celula la cual va a infectar. 
HA es una glicoproteína transmembrana. Presenta oligoproteinas y 
varios puentes disulfuros que mantienen la estructura de la proteína. 
En el esquema se ve que se necesita de una proteasa que clive en la 
región próxima al péptido de fusión para que exponga su extremo N 
terminal. A pesar del clivaje se puede ver que hay un puente 
disulfuro que mantiene unida HA1 y HA2 
 
La HA es traducida por ribosomas del RER. A medida que se traduce 
la proteína queda anclada en la membrana del RER. Una vez 
finalizada mediante vesículas pasa al Golgi donde a mediada que 
avanza en su trayecto se van agregando los oligosacáridos 
(permiten un correcto plegado). En la parte final de la via secretoria 
ocurre el corte proteolítico del que se comento anteriormente. 
 
Algo importante de aclarar es que el corte proteolítico intracelular 
de HA por proteasas obicuas ocurre solamente en cepas de 
influenza de alta patogenicidad. Las de baja patogenicidad son 
clivadas una vez eliminadas las partículasmediante proteasas 
propias del aparato respiratorio. 
Se sabe también que las sepas patogénicas presentan esa 
característica por: 
 Inserción de aminoácidos básicos en el péptido conector 
entre HA1-HA2. 
 Perdida de un carbohidrato en posición 22 (que sino 
enmascara el sitio de clivaje IC) 
 Sustitución de aminoácidos acidos en P5y P6 dentro del 
loop 
Las vesículas llevan las HA a la membrana 
 
 
Formación de sincicios (ya visto antes): herpesvirus, paramyxovirus, 
reovirus, retrovirus