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Manual de producción de semilla de papa mediante técnicas de multiplicación asexual La experiencia del Centro Nacional de Producción de Semilla de Papa de Honduras (CNPSP-H) MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL2 Autores: Roberto Larios Mejía, José Santos Méndez, Lenin Pineda y Selman Hernández. El contenido de este documento es responsabilidad de los autores y no representa la opinión de la Cooperación Suiza en América Central. Asesoría y revisión técnica: Iván Rodríguez, Francisco Posas, David Oliva, Luis Cárcamo Rivas y Marco Vásquez. Edición, diseño y diagramación: Esther Galeano, Francisco Posas y Marco Vásquez. Para mayor información dirigirse a: Programa PYMERURAL, Lomas del Guijarro, calzada Llama del Bosque, casa No. 602, frente a la Alianza Francesa. Apartado Postal 3336, Tegucigalpa, Honduras. Teléfonos: (504) 2239-3306 y 2232-5855. Correo electrónico: info@swisscontact.org.hn. Página de internet: www.pymerural.org. Fundación para el Desarrollo Empresarial Rural (FUNDER). Colonia Miramontes, calle principal, frente a Santos & Asociados, Tegucigalpa, Honduras. Teléfonos: (504) 2239-4711 y 2235-4996. Correo electrónico: funder@funder.hn. Página de internet: www.funder.hn. Programa PYMERURAL. Manual de Producción de Semilla de Papa Mediante Técnicas de Reproducción Asexual. Tegucigalpa, Honduras. 2013. 39 páginas. Copyright: Derechos Reservados PYMERURAL © 2013. Aclaración El uso de lenguaje que no discrimine ni marque diferencias entre hombres y mujeres es vital para la Cooperación Suiza en América Central y el Programa PYMERURAL. Sin embargo, dado que su uso en español presenta soluciones muy variadas sobre las cuales los lingüistas no se han puesto de acuerdo y con el fin de evitar la sobrecarga gráfica del uso de “o/a” para representar la existencia de ambos sexos, en el presente documento se ha optado por utilizar el genérico masculino bajo el entendido que todas las menciones en dicho género incorporan a hombres y mujeres. Contenido Introducción 5 1. El problema a resolver 6 2. El Centro Nacional de Producción de Semilla de Papa (CNPSP-H) 7 3. Mecanismos de reproducción de semilla de papa 8 3.1 Reproducción de la semilla 8 3.2 Tecnologías utilizadas para la multiplicación de la semilla de papa 9 3.3 Categorías de la semilla-tubérculo 10 4. Producción de plántulas in vitro y plántulas 13 4.1 Importancia 13 4.2 Producción de plántulas in vitro 13 5. Producción de semilla prebásica y básica en invernadero 17 5.1 Preparación del sustrato 17 5.2 Aclimatación y siembra de las plántulas 18 5.3 Prácticas de manejo 19 5.4 Aporque de las plantas 19 5.5 Riego 19 5.6 Labores de saneamiento del cultivo 20 5.7 Control de temperatura en los invernaderos 20 5.8 Defoliación y cosecha 21 5.9 Dormancia y brotación de la semilla (minitubérculos) 21 6. Producción en campo de semilla básica, registrada y certificada 22 6.1 Manejo agronómico del cultivo de papa en lotes de semilla 22 6.2 Plagas de la papa y su control 24 6.3 Enfermedades de la papa y su control 27 6.4 Defoliación y cosecha 28 7. Almacenamiento y manejo de semilla de papa 30 7.1 Saneamiento en almacenes 31 7.2 Condiciones fisiológicas de la semilla-tubérculo durante el almacenamiento (pregerminación) 31 Bibliografía 33 Glosario de términos 34 Anexos 35 Presentación Este manual tiene el propósito principal de orientar a investigadores, técnicos extensionistas, certificadores de semillas, productores de papa (organizados o independientes), catedráticos, estudiantes y otros actores relacionados con este rubro en los aspectos técnicos de la producción de semillas de papa. La producción de semillas en general, y en particular de semillas de papa, responde a las políticas agrícolas definidas por el Estado en el decreto No. 1046, relacionado con la Ley de Semillas, emitida en noviembre de 2001. Su aplicación corresponde a la Secretaría de Agricultura y Ganadería, a través del Departamento de Certificación de Semillas, del Servicio Nacional de Sanidad Agropecuaria (SENASA). La regulación para el cultivo de la papa está definida en la Normativa para la Producción, Importación y Comercialización de Semilla de Papa en Honduras, en concordancia con la Ley General de Semillas, Decreto de Ley Nº 23056, y el Reglamento de la Ley General de Semillas, D.S. Nº 044-82-AG. Los aspectos técnicos de la producción de semillas de papa, están definidos por leyes internacionales y nacionales, que establecen las categorías a producir. En el caso de Honduras existen las siguientes: pre-básica, básica, registrada, certificada y comercial. En otros países se usan los términos: pre-élite, élite 1, élite 2, élite 3, élite 4, fundación y certificada (como el caso de Canadá). Además, las leyes contemplan los mecanismos y técnicas de producción que se relacionan con la infraestructura, entre las que se utilizan: n El cultivo in vitro para producir la semilla prebásica. n Multiplicación masiva de plántulas en laboratorio a través del Sistema Autotrófico Hidropónico (SAH). n Invernaderos para producir semilla prebásica y básica. n Multiplicaciones en campo, para las categorías: básica, registrada y certificada, en lotes establecidos por el CNPSP-H; y con productores de semillas, que cumplan con los estándares establecidos en la Ley de Semillas y la Normativa de la Semilla de la Papa. La cosecha, selección, clasificación, almacenamiento y etiquetado, están regulados por esta ley y su normativa; la comercialización se hace de acuerdo a la libre oferta y demanda de mercado, debiendo competir con las semillas importadas en calidad, tamaño, precio y variedades adaptadas por el mercado consumidor. El propósito final de este manual es promover entre los diferentes actores de la cadena de papa, los conocimientos elementales para la producción de semillas, y con ello estimular su incorporación a los procesos productivos, mejorando los niveles de producción, y especialmente, logrando su adopción por parte de los productores. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL4 5MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL La papa fue introducida a Europa en 1580, procedente de América, siendo después diseminada por todo el mundo. Es uno de los cultivos de mayor importancia mundial, y ocupa el cuarto lugar entre los diez principales. Seleccionada y mejorada por los países desarrollados, la papa regresó a donde se originó, condicionando a muchos países a importar material de siembra (semillas), y en consecuencia, a depender de ellos. Este rubro ha recibido constantemente la influencia de los avances técnicos y científicos, lo que ha permitido mejorarla genéticamente en aspectos de rendimiento, calidad, manejo de cultivo, conservación, industrialización y resistencia a plagas y enfermedades. En Honduras, la producción de papa (Solanum tuberosum var. tuberosum), data de 1960. Su cultivo ha estado condicionado a las importaciones de semillas, inicialmente de Guatemala, con variedades como Atzimba y Tollocan. A partir de 1970 fueron diversificados los países de importación y las variedades. Honduras importa un promedio anual (2006-2012), de 30,681 quintales de semillas de papa, equivalentes a 1.2 millones de dólares estadounidenses. Su precio promedio de importación CIF1 es de 39.42 dólares por quintal y el precio al productor varía entre 1,500 a 1,800 lempiras por quintal. El programa PYMERURAL2 proyecta que a nivel nacional existen 3,620 productores dedicados al cultivo de papa, donde el 75% son pequeños (siembran menos de una manzana), y el 34% son mujeres. También se estimó que Introducción 5MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 1 Precio de importación que incluye costo, flete y seguro en puerto de destino convenido (Cost Insurance and Freight por sus siglasen inglés). 2 Análisis rápido de la cadena de valor de papa en Honduras, 2011 (www.pymerural.org/resumen/papa.pdf). 3 Según información de otros proyectos, la papa con paquete tecnológico completo puede alcanzar rendimientos entre 430 a 750 qq/Ha (EDA- FINTRAC 2010, APRHOFI 2010, CATIE 2011 y APROALCE-ODECO 2011). la producción nacional en 2011 fue de 225,704 quintales y que el rendimiento promedio fue de 199 quintales/ manzana, aunque con un paquete tecnológico completo pueden alcanzar rendimientos entre 430 a 750 quintales por hectárea3. Las variedades e híbridos más cultivados son: Provento, Caesar, Bellini, Desiree, Arnova, Vivaldi, Ajiba, Mondial, Atlantic, Calwhite, IctaFrit, Atzimba y Tollocan. Las épocas fuertes de cosecha ocurren en julio, agosto, febrero y marzo. Los departamentos de mayor producción son Intibucá, La Paz y Ocotepeque, y con menor producción Francisco Morazán y El Paraíso. En general, los costos de producción del cultivo van desde 72,700 Lps/Mz (semilla artesanal y sin riego), hasta 157,800 Lps/Mz (con semilla certificada y riego). Es importante resaltar que cerca del 60% de los costos de producción corresponden a la semilla de papa; su cantidad está ligada al tamaño de los tubérculos, siendo el ideal el de segunda clase o papa mediana (30 a 70 mm). PYMERURAL estimó que en 2011 el consumo nacional aparente fue de 13,440 TM, lo que da un consumo per cápita de 1.47 Kg/persona (vale recalcar que el consumo es mayor ya que hay consumo de papa importada de contrabando, de la cual no hay estadísticas). En el transcurso del tiempo, la papa se ha convertido en un alimento importante de la canasta básica del hondureño y su producción se ha concentrado en manos de pequeños productores con agricultura en laderas, y constituye un eje dinamizador de la economía en las zonas rurales del país. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL6 1. El problema a resolver Uno de los mayores problemas de los productores de papa lo constituye el acceso estacional a la semilla certificada, debido a que su importación ocurre en dos épocas: entre diciembre-marzo y entre agosto-septiembre, lo que condiciona a los productores a utilizar semilla de papa de mala calidad en las épocas donde no hay disponibilidad, con riesgo de contaminarse con enfermedades y plagas; y a veces hasta usan papa de consumo como semilla- tubérculo para la siembra. Agregado a lo anterior, la venta de la semilla ha sido históricamente monopolizada por algunos productores grandes y comerciantes, y su costo en la actualidad es alto, oscilando entre los 1,500 a 1,800 lempiras por quintal de semilla certificada. Esta estacionalidad en la importación provoca que los productores siembren casi al mismo tiempo y por lo tanto, cosechen en un mismo período, provocando la caída de los precios, los cuales llegan a niveles tan bajos como 1.90 L/Lb en mercados mayoristas o 6.00 L/Lb en supermercados. Otro efecto negativo de esta estacionalidad es que evita que los productores puedan escalonar sus siembras, para mantener una oferta permanente del producto y mejorar así la estabilidad de los precios (especialmente para supermercados y agroindustria). El éxito o fracaso de un cultivo depende en gran medida de la categoría de la semilla comprada, su tamaño, variedad y sanidad. La compra de la semilla, además, constituye un riesgo de introducción de plagas y enfermedades exóticas al país, mediante la utilización de semilla-tubérculo de dudosa procedencia, por ejemplo, cuando hay contrabando de Guatemala, o cuando un importador trae semilla que no reúne los requisitos de sanidad y está contaminada con fitopatógenos, como bacterias o virus y, que por desgracia, pasan la inspección de las cuarentenas en las aduanas del país y provocan la contaminación de los suelos. Las principales plagas y enfermedades que han sido introducidas al país a través de la importación de semilla de papa son: la palomilla (Tecia solanivora), y principalmente enfermedades bacterianas, como la pierna negra (Erwinia spp.), y marchitez bacteriana (Ralstonia solanacearum). MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL6 “Empecé a sembrar papa pero lo hacía sin asesoría técnica, tenía problemas con las semillas importadas, habían semillas que venían con bacterias y eso venía a contaminar la tierra y arruinar el suelo, con las semillas importadas apenas lográbamos vender para el gasto, lo más que se cosechaba eran ocho quintales por tarea (437 metros cuadrados)”. Natalio Hernández, productor de papa de Vegetales Lencas. 7MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL La Estación Experimental Santa Cruz fue establecida en 1984, con apoyo de la Cooperación Suiza al Desarrollo (actualmente Cooperación Suiza en América Central), el Programa Regional Cooperativo de Papa (PRECODEPA), y el Programa Nacional de Semillas del Ministerio de Recursos Naturales (MRN), con el propósito de producir la semilla de papa que requerían los grupos de productores beneficiarios del proyecto de desarrollo rural Marcala-Goascorán (MARGOAS). En 1986 se logró producir seis mil quintales de semilla, de las variedades Alpha, Atlantic, Atzimba y Tollocan, la que disminuyó hasta quedar produciendo en el año 2000 sólo semilla para investigación. Esta reducción de la producción se debió a una serie de problemas, como la existencia de pugnas entre proyectos del Estado por coordinar el programa de papa, y el cambio de la política partidista, que provocó inestabilidad del personal técnico y, en consecuencia, el retiro del apoyo de COSUDE. En 2007, con apoyo del programa PASOLAC, de la Cooperación Suiza en América Central, se compraron mini tubérculos e insumos, para iniciar una nueva producción de materiales básicos. Luego, por gestión e iniciativa de las organizaciones de productores de papa, y con apoyo de SAG/DICTA y la Fundación para el Desarrollo Empresarial Rural (FUNDER), se logró la continuidad del Proyecto con fondos de la Cuenta del Desafío del Milenio-MCA/Honduras. Esta inversión permitió la rehabilitación y equipamiento del CNPSP-H, administrado actualmente por FUNDER. El Comité Nacional de la Cadena Hortícola elaboró el Acuerdo Marco de Competitividad (AMC), el cual fue oficializado por el Gobierno mediante Acuerdo No. A-200-2011. El AMC fue hecho de forma participativa con productores, procesadores, comercializadores, entes gubernamentales, cooperantes y proveedores de servicio. En su plan de acción se demandó el fortalecimiento de proyectos de producción de semilla. PYMERURAL y FUNDER firmaron como responsables de apoyar esta iniciativa y dado que el AMC fue oficializado por el gobierno, PYMERURAL proveyó recursos para este proyecto. Por otro lado, en 2011 fue analizada la cadena de valor de papa, siendo la falta de una producción constante (derivada de la carencia de una oferta permanente de semilla), el problema más crítico mencionado por los comercializadores. Los productores también mencionaron, como problema crítico, la semilla de mala calidad en tamaño y consistencia. Estos factores sustentaron la relevancia de un proyecto de semilla. Actualmente, el Centro está produciendo semilla de papa de variedades aceptadas por el mercado. También está observando el comportamiento preliminar de materiales genéticos promisorios, provenientes del CIP (Centro Internacional de la Papa), de Perú, los cuales serán evaluados por DICTA, para identificar los que presenten características de adaptación y comportamiento agronómico superior a las variedades de uso tradicional en Honduras. El proceso de producción de semilla de papa inicia con el cultivo de tejidos vegetales (cultivo in vitro), utilizando el Sistema Autotrófico Hidropónico (SAH)4 y el manejo de plántulas en invernadero, las que serán multiplicadas con alta tecnología en el campo del CNPSP-H.2. El Centro Nacional de Producción de Semilla de Papa (CNPSP-H) 7MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 1. Centro Nacional de Producción de Semilla de Papa de Honduras (CNPSP-H). 4 Sistema Autotrófico Hidropónico (SAH) -técnica desarrollada en el año 2000 por el Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria de Argentina. El proyecto de papa de FONTAGRO capacitó a personal del CNPSP-H sobre este sistema-. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL8 Objetivos del CNPSP-H Objetivo general Beneficiar a pequeños y medianos productores del país dedicados a la producción de papa para consumo, con el abastecimiento de semilla de papa de calidad que les permita mejorar el rendimiento promedio y la calidad de su producto. Objetivos específicos A Aprovechar eficientemente las condiciones de infraestructura existente para la producción constante de semilla prebásica, básica y registrada, aplicando controles fitosanitarios apropiados. B Organizar el sector de productores de semilla para la producción de semilla certificada de papa, mediante convenios de coinversión con los mismos que garantice el suministro de 2,000 qq de semilla certificada por año con un incremento de 35% anual. C Mejorar la capacidad de técnicos y productores mediante un programa de capacitación modular en la producción, manejo de semilla y administración de empresas productoras de semilla. D Elaborar manuales de producción de papa, material didáctico y boletines informativos, que orienten a los técnicos y productores en cómo realizar las buenas prácticas agrícolas del cultivo de semilla de papa en sus diferentes categorías. 3.1 Reproducción de la semilla La producción de la semilla de papa se puede lograr mediante dos mecanismos: reproducción sexual y asexual. A. Reproducción sexual También conocida como semilla verdadera, o botánica. Consiste en la fertilización del ovario de la flor hasta convertirse en un fruto. Por lo general, éste es de forma esférica, pero algunas variedades producen frutos ovoides, o cónicos, de color verde, denominados bayas. Su utilización para la producción de papa comercial es mínima, pero representa una tecnología que podría convertirse en una excelente alternativa para aquellos pequeños productores que no tienen ninguna posibilidad de acceder a semilla certificada (previa validación). El número de semillas por fruto llega a más de 200, según la variedad y otros factores. Las semillas son planas, ovaladas y pequeñas, con un promedio de 1,000 a 1,500 semillas por gramo. Este medio de multiplicación, o siembra de semilla verdadera, es conocido a nivel internacional como TPS (true potatoes seed), es de muy buena aceptación como producción para semilla y en el ámbito comercial, en especial en países asiáticos como Afganistán, India, Corea del Norte, Vietnam, y China, donde se requiere alimentar una gran población, por lo tanto, se usa el tubérculo como alimento y no como semilla. B. Reproducción asexual Esta reproducción se realiza mediante la semilla-tubérculo. Se clonan tubérculos, o secciones suyas (brotes, meristemos, o subdivisiones), y secciones de la planta (esquejes apicales o laterales). Esto puede ser a partir de multiplicación in vitro u otros sistemas de multiplicación, como: aeroponía, hidroponía o SAH, por lo tanto, su patrón genético no se modifica ni altera después de ciclos reproductivos, porque no hay un cruce de dos individuos que modifiquen su identidad genética. Por lo tanto, su categorización como semilla-tubérculo está determinada por factores exógenos que disminuyan su potencial productivo como: agentes bióticos (virus, hongos, bacterias, o micoplasmas), y abióticos (temperatura, humedad o altitud). En el país, la producción de papa para semilla y de consumo (fresco o para agroindustria), se realiza bajo este mecanismo. Para la producción de papa de consumo se utiliza: semilla-tubérculo certificada (importada), semilla producida nacionalmente (CNPSP-H y ESEMAGRO), y semilla artesanal obtenida a partir de semilla certificada. 3. Mecanismos de reproducción de semilla de papa Fotografía 2. Semilla-tubérculo de buena calidad (tres a cuatro brotes vigorosos). 9MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 3.2 Tecnologías utilizadas para la multiplicación de la semilla de papa La necesidad de incrementar las tasas de multiplicación de semillas, o de incrementar el número de tubérculos, ha motivado la creación de los siguientes sistemas de multiplicación: A Multiplicación in vitro mediante técnicas de cultivo de tejidos. B Sistema Autotrófico Hidropónico (SAH). C Multiplicación de plántulas para obtención de semilla- tubérculo a nivel de casas mallas y otros sistemas de multiplicación masiva (aeroponía e hidroponía). D Obtención de semilla artesanal a partir de semilla certificada. E Corte de tubérculos. Cada una de estas técnicas de multiplicación rápida o acelerada, tienen el objetivo de obtener niveles más altos de semilla prebásica, para generar con ella semilla básica, registrada, certificada y artesanal, esta última manejada a nivel de productores. La técnica del cultivo de tejidos consiste, esencialmente, en aislar una porción de una planta (explante), y proporcionarle, de manera artificial, las condiciones físicas y químicas apropiadas, para que las células expresen su potencial intrínseco o inducido. Además, es necesario adoptar procedimientos de asepsia, para mantener los cultivos libres de contaminación microbiana. La ilustración 1 muestra el proceso de producción de vitro plantas con este sistema de multiplicación de tejidos. El cultivo de tejidos ha adquirido gran interés en la propagación asexual de plantas de importancia económica. Las partes empleadas por esta técnica son tan pequeñas que han propiciado el término micropropagación, el cual tiene las siguientes ventajas: n Mayor crecimiento y desarrollo de los explantes. n No se observan desórdenes fisiológicos ni morfológicos. n Crecimiento uniforme dentro de los contenedores. n Se simplifican las etapas de enraizamiento y rustificación. n Se minimiza el uso de reguladores de crecimiento. n Disminuyen los problemas por contaminación. n Se pueden utilizar contenedores de mayor tamaño. n Control del crecimiento (altura y el vigor de la plántula), por medio de factores ambientales. Lo anterior muestra una de las fortalezas del CNPSP-H al contar con un laboratorio de cultivo de tejidos. Una vez que se han obtenido plantas libres de enfermedades, a partir de vitroplantas, se procede a la multiplicación mediante el sistema SAH. Ilustración 1. Proceso de producción de semillas de papa con el método de cultivo de tejidos Otros sistemas rápidos de multiplicación de semilla de papa Para la multiplicación de las semillas de papa son utilizadas otras técnicas. Entre las más utilizadas están: n Sistema aeropónico Basado esencialmente en la multiplicación del tejido, usando como medio el aire y soluciones de fertilizantes para la nutrición de las vitro plantas. n Sistema hidropónico Basado en la multiplicación del tejido, usando como medio de multiplicación el agua y soluciones de fertilizantes para la nutrición de las vitro plantas. n Sistema Autotrófico Hidropónico (SAH) El sistema de multiplicación llamado SAH es el utilizado actualmente por el CNPSP-H. Esta técnica consiste en incrementar considerablemente a nivel de laboratorio el número de plantas que serán multiplicadas en invernadero, las que también serán plantas más robustas, con cierto grado de aclimatización y fotosintéticamente activas. Es indispensable partir de vitroplantas libres de patógenos. Fotografía 3. Vitroplantas obtenidas de plantas madres para proceso de multiplicación (SAH). 3.3 Categorías de la semilla-tubérculo Bajo este esquema de producciónde semilla de papa en forma de clones (donde su patrón genético no se modifica ni altera por un cruce de dos individuos), se puede trabajar con plantas puras, como las obtenidas en cultivos in vitro y con un mínimo de contaminantes en el campo, cuyas exposiciones están reguladas por leyes internacionales y en Honduras están definidas en la Normativa de la Producción, Importación y Comercialización de la Semilla de Papa. Con estas regulaciones, la reproducción asexual se ha dividido en diferentes categorías, dependiendo del grado de contaminantes presentes en cada cultivar, y están descritos en la normativa y la ley de semillas. Estas categorías son las siguientes: n Prebásica: semillas producidas en invernaderos, también denominadas mini tubérculos, provenientes de plántulas, producidas a partir de plántulas in vitro, y generadas en el laboratorio de cultivo de tejidos. n Básica: semilla producida en casa malla y campo, a partir de semilla prebásica. Puede mantener su categoría hasta tres generaciones, si las condiciones de manejo fitosanitario de las plantas en las casas mallas lo permiten. n Registrada: semilla producida a partir de la semilla básica. Por lo general, su multiplicación es en campo abierto. n Certificada: semilla producida a partir de semilla registrada. Su miultilicación es en campo abierto, bajo estrictas condiciones técnicas y con supervisión de un ente regulador, en este caso, SAG/SENASA. n Semilla artesanal: producción de semilla-tubérculo obtenida de una producción comercial y seleccionada por productores a partir de semilla certificada, que haya presentado buenas condiciones fitosanitarias y de rendimiento. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL10 11MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL La producción de semilla certificada, bajo estas condiciones, se puede convertir en una actividad rentable y competitiva. En el CNPSP-H, la producción de semillas de papa se hace mediante el desarrollo de las siguientes fases de multiplicación: A Producción de vitro plantas, que dan origen a plántulas, que deben presentar un mínimo de cuatro nudos y con raíces bien desarrolladas que les permitan soportar el proceso de climatización. B Producción de semilla prebásica y básica, producida a nivel de las casas malla y campo, originada de la producción de plantas in vitro y plántulas producidas en el laboratorio. C Producción de semilla registrada y certificada a nivel de campo, proveniente de semilla básica producida en campo. D Almacenamiento a luz difusa de la semilla-tubérculo (clasificada después de la cosecha), durante el período de dormancia y brotación, hasta alcanzar un número mínimo de 3 a 4 brotes vigorosos. Infraestructura del CNPSP-H El centro tiene un laboratorio de cultivo de tejidos vegetales y cultivo in vitro de plantas de papa, a partir de cultivos de meristemos, con capacidad de generar 31,500 vitro plantas al año, utilizadas para una producción promedio de 216,000 plántulas por año, por medio de esquejes apicales y basales. A B C D Fotografía 5. A) Producción de plántulas SAH en bandejas (laboratorio). B) Multiplicación de semilla prebásica y básica en invernaderos (casa malla). C) Cultivo de semilla registrada a nivel de campo. D) Centro de almacenamiento para materiales multiplicados a nivel de campo por el CNPSP-H. Fotografía 4. Izquierda: mini tubérculos de semilla prebásica de papa de buena calidad. Derecha: mala calidad causada por vejez fisiológica. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL12 A. Organización del laboratorio Debido a que al inicio del proceso de producción de semilla de papa se usan plantas in vitro, se cuenta con un laboratorio de cultivo de tejidos y personal técnico calificado para su multiplicación. Se dispone de las siguientes áreas separadas: n Área de preparación de medios de cultivo y soluciones madres: se utiliza principalmente para preparar los distintos medios de cultivo. Debe disponer de un espacio para almacenamiento de productos químicos, cristalería, materiales de plástico, reactivos, mesa para la elaboración de medios y otros equipos. n Área de lavado y esterilización: incluye un lavadero para cristalería, esterilización de medios de cultivo contaminado, o desechado. Aquí se ubica el desionizador, destilador de agua y autoclave (esterilizador). n Área de transferencia (ambiente aséptico): aquí se realiza el trabajo de escisión, inoculación y transferencia de los explantes al medio de cultivo, así como la trasferencia de cultivos establecidos in vitro y micro propagación, para lo que se cuenta con estereoscopios y cámaras de flujo laminar, las cuales mantienen un área aséptica al pasar aire estéril sobre el espacio de trabajo. n Área de incubación: los cultivos se incuban o se regeneran en un cuarto apropiado. Éste debe tener de 20°C a 28°C de temperatura, de 1,000 a 5,000 lux de iluminación, y entre 70% y 80% de humedad relativa. Aquí están todas las estanterías donde se colocan los tubos, o frascos conteniendo los explantes. Es necesaria una buena distribución de aire en este cuarto, para evitar áreas de recalentamiento por efecto de las luces. El control de temperatura se realiza mediante el uso de aires acondicionados. En climas muy húmedos es necesario usar des-humificadores para reducir la humedad relativa. n Área de crecimiento (multiplicación masiva): las vitroplantas obtenidas en el área de incubación son sometidas al test de ELISA, luego son multiplicadas masivamente dentro del laboratorio bajo el sistema SAH; después son colocadas en estantes donde alcanzan su crecimiento ideal para finalmente ser llevadas al invernadero. n Área de oficina: aquí se ubica el mobiliario de oficina, libros de referencia, archivo, controles del laboratorio, catálogos y otros documentos. n Área de control de calidad: tiene como función evaluar y controlar la calidad genética y fitosanitaria del material vegetal que ingresa al laboratorio, así como la calidad del material producido. Adicionalmente, evalúa y monitorea permanentemente el estado de las plantas producidas, y el porcentaje y tipo de contaminación en el laboratorio. n Bodega: espacio destinado al almacenamiento temporal de productos químicos, reactivos, cristalería, entre otros; preferiblemente en estantes con puertas de vidrio para mantenerla libre del polvo. B. Equipamiento del laboratorio El establecimiento del laboratorio requiere de los siguientes equipos: n En el área de preparación: refrigerador, balanzas analíticas, potenciómetro (pH), estufa eléctrica, agitador magnético, frascos Erlenmeyer de diversos volúmenes, botes y material de vidrio o plástico. n En el área de lavado: autoclave manual o automático, destilador, gradillas para secado, desionizador, bandejas de aluminio, recipientes plásticos y de aluminio (de varios tamaños). n En el área de transferencia: cámaras de flujo laminar, estereoscopio, instrumentos de disección, frascos con alcohol, mecheros, pinzas, tijeras, agujas de disección, bisturís y sus respectivos mangos. n En el área de incubación: cuarto con temperatura, iluminación y humedad relativa controlada; estanterías con iluminación para los cultivos, termómetros y luxómetro. Fotografía 6. Área de lavado y esterilización. Fotografía 7. Área de transferencia aséptica mediante una cámara de flujo laminar. Fotografía 8. El uso del luxómetro es importante para mantener el nivel adecuado de iluminación. 13MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 4.1 Importancia El objetivo primordial de este sistema es producir un material de siembra de alto nivel de calidad fitosanitaria y pureza varietal. Para lograr esto,el cultivo depende de requerimientos tecnológicos, principalmente porque está expuesto al ataque de organismos fitopatógenos, como hongos, bacterias y virus, siendo estos últimos los más críticos, porque se perpetúan en la descendencia de los materiales genéticos. El tubérculo de papa se considera como la semilla unitaria tradicional (asexual), y su calidad refleja las condiciones en que se ha desarrollado el cultivo, incluyendo el estado fitosanitario. La producción de semilla certificada de papa es un proceso que tarda entre 30 y 36 meses, desde la producción de vitro plantas. La semilla prebásica, producida a partir de las plantas obtenidas en laboratorio, bajo condiciones de invernaderos, es el punto de partida del proceso de producción de semilla de papa, por lo tanto, debe producirse libre de enfermedades que afecten o limiten las subsiguientes multiplicaciones de material de siembra. En muchos países, la imposibilidad de producir este material inicial conlleva a realizar importaciones de semilla, lo que en muchos casos trae consigo el riesgo de introducción y establecimiento de plagas y enfermedades que no se encuentran en la región. 4.2 Producción de plántulas in vitro Este proceso de producción es desarrollado mediante la ejecución de las siguientes etapas: A. Selección de material libre de fitopatógenos Para la selección del material inicial se debe considerar el lugar de origen, fenotipo, genotipo, estado fisiológico, y época de cosecha. Además, se debe conocer el historial de la sanidad del cultivo en lo relacionado al ataque de hongos, virus, bacterias y otros fitopatógenos, con el objetivo de seleccionar materiales que realmente provengan de lotes de semilla libres de los mismos. B. Saneamiento de material vegetativo Una vez seleccionadas, las plantas madres, son sometidas a tratamientos, como termoterapia, o quimioterapia, que contribuyen a su saneamiento y, en especial, a la eliminación de virus (cuando se utilizan combinados con el cultivo de tejidos). El éxito de estas técnicas depende del virus que se quiere eliminar y de la variedad de la papa. El término “plantas libres de virus” es válido sólo cuando se especifica el virus o la enfermedad viral que haya sido detectada usando técnicas virológicas efectivas. C. Medios de cultivo para la multiplicación de semilla de papa El medio de cultivo es donde crecen los tejidos de interés. Existen diferentes combinaciones de macroelementos, microelementos, vitaminas, reguladores de crecimiento, fuentes de carbono y otros compuestos, de acuerdo al tipo de medio de cultivo a preparar. D. Soluciones madres Por lo general se elaboran soluciones madres que abastecen al tejido vegetal con macroelementos, microelementos, hierro- EDTA, vitaminas y reguladores de crecimiento. A continuación se presentan los componentes del medio de cultivo utilizado en el CNPSP-H: 4. Producción de plántulas in vitro y plántulas 13MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Componentes Concentración Sales MS5 4.33 g/l Ácido giberélico 0.1 mg/l Myo-inositol 100 mg/l Glicina-HCl 2 mg/l Ácido nicotínico 0.5 mg/l Piridoxina-HCl 0.5 mg/l Tiamina-HCl 0.1 mg/l Sacarosa 25 g/l Agar 6 g/l pH 5.6 5 Sales basales de Murashige y Skoog (1962). Proveedor: CAISSON. E. Establecimiento del cultivo Se extraen de la planta madre pequeños segmentos de explantes (sección de hoja, semillas, meristemos, ápices, estacas o brotes), los que antes de ser introducidos en el medio de cultivo, pasan por un proceso de desinfección, usando compuestos como: alcohol al 70%, Tween 20, cloruro de potasio u otros. Esta desinfección se hace en una cámara de flujo laminar, después de la cual se realizan varios lavados con agua estéril. Luego, se procede a la inoculación en el medio de cultivo. Preparación de las plántulas madres Se inicia con plántulas in vitro a partir de una planta madre. Para acelerar el proceso es conveniente utilizar plántulas seleccionadas por vigor, buen tamaño de las hojas y fitosanitariamente libre de daños ocasionados por enfermedades o insectos. Normalmente, de 100 plántulas in vitro se pueden producir hasta 20,000 plántulas, en un período de 40 días. F. Cultivo de meristemos Se ha demostrado que los puntos de crecimiento de brotes y raíces, procedentes de plantas infectadas con virus, están libres de él, o lo llevan solamente en concentraciones muy bajas. Morel, fue el primero en demostrar que podían obtenerse, mediante el cultivo de meristemos, plantas de papa libres de virus a partir de plantas infectadas. El cultivo de meristemos in vitro puede utilizarse para producir plantas libres de fitopatógenos a partir de una planta infectada. El resultado final de la limpieza de plantas debe comprobarse mediante técnicas precisas de diagnóstico de virus y otros fitopatógenos. De este modo, el proceso de saneamiento incluye cuatro pasos importantes: Identificación del virus En tiempos anteriores, la selección de plantas aparentemente sanas para la producción de semilla se hacía de manera visual a nivel de campo y en pocos casos con técnicas de diagnóstico poco sensibles. La introducción de las técnicas de ELISA (enzyme- linked immunoabsorbent assay) ha mejorado considerablemente la detección y el diagnóstico de enfermedades virales de la papa. Esta técnica es muy precisa y sencilla de aplicar, su eficiencia se basa en la alta especificidad de la preparación de los anticuerpos requeridos. En Honduras, los virus más importantes que se han encontrado en la papa son: PVX, PVY, PVS, PVM y PLRV. A partir de vitroplantas de diferentes variedades se realizan cuatro pasos importantes para certificar que el material genético obtenido está libre de virus. Para ello, se ha demostrado que los puntos de crecimiento de brotes y raíces, procedentes de plantas infectadas con algún virus, están libres de él, o lo llevan en La preparación de un litro de esta solución nutritiva se realiza de la siguiente manera: n Disolver 4.33 gramos de sales MS comerciales en 600 ml de agua desmineralizada (destilada). n Agregar 25 gramos de sucrosa y agitar hasta disolver completamente. n Agregar 1 ml de solución stock MSA-BASE 1 (previamente descongelada) y luego agitar. n Ajustar con agua desmineralizada hasta alcanzar un volumen de 1,000 mililitros de total de solución. n Medir el pH y ajustarlo a 5.6. n Agregar 6 gramos de agar, disolviéndolo en caliente (horno microondas a 100% de intensidad por 10 minutos, haciendo una pausa a los 7 minutos para agitar el medio). n Dispensar el medio en tubos de ensayo o platos petri (previamente esterilizados) y taparlos. n Después se deben colocar los tubos en autoclave por 20 minutos (a 121 °C y 15 PSI de presión). Tapar los recipientes con tapas estériles en la cámara de flujo laminar. n Conservar el medio bajo refrigeración a 4 °C (hasta 1 mes). Fotografía 9. Planta madre de papa. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL14 15MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 10. Meristemo apical de papa (a), primordios foliares (b), meristemo lateral (c), y hoja (d). concentraciones muy bajas y que se pueden obtener mediante el cultivo de meristemos, puntos libres de virus, pero todo este proceso debe comprobarse mediante técnicas precisas de saneamiento que incluyen cuatro pasos importantes. La ejecución del programa de producción de vitro plantas en el laboratorio de tejidos vegetales del CNPSP-H requiere de un sistema de control y verificación de calidad sanitaria de las plantas propagadas, para lo cual es necesario la aplicación de técnicas de diagnóstico,algunas más sensibles que otras. n Termoterapia Consiste en la exposición de plantas infectadas a tratamientos con altas temperaturas (30°C a 52°C), o bajas temperaturas (4°C) durante determinados períodos de tiempo. n Quimioterapia Método mediante el cual se utilizan productos químicos. Esta práctica es muy limitada. Pruebas con plantas regeneradas Después que las plantas fueron sometidas a las técnicas de erradicación, se vuelven a extraer meristemos, para obtener nueva generación de vitroplantas, las que son sometidas a diagnóstico, obteniendo, en promedio, el 80% de plantas libres de virus. Propagación de plantas sanas Esta generación de vitroplantas obtenidas, que fueron diagnosticadas como plantas sanas, son las que servirán para la multiplicación masiva de plántulas bajo el sistema SAH. Para más información sobre el mismo, ver el apartado de bibliografía. n Plantas indicadoras Especialmente para detección de virus. Son plantas que se inoculan con savia de plantas contaminadas, o con el virus purificado, observándose una reacción rápida y evidente en un período entre 4 y 8 días después de la inoculación. n Diagnóstico serológico El uso de anticuerpos hace de estas pruebas una herramienta eficaz en el diagnóstico. Consiste en poner un anticuerpo en contacto con la savia de la planta a diagnosticar. Si ésta contiene el virus para lo cual se obtuvo el anticuerpo, ocurre una precipitación en el punto de equilibrio en la concentración del antígeno (el virus), y el anticuerpo. Esta precipitación es utilizada para detectar la presencia de virus en un tejido vegetal. Este sistema es muy sensitivo y específico. El diagnóstico más usado es la prueba de DAS-ELISA. n Microscopía óptica Las inclusiones virales son una evidencia de infección de virus y pueden ser detectadas a nivel de microscopía de luz en tiras de epidermis. Esta técnica está basada en el teñido diferencial de los ácidos nucleicos con la tinta Azura “A” y las proteínas, con una combinación de calcomina naranja y luxol verde brillante. n Microscopía electrónica Herramienta importante en la investigación y diagnóstico de virus en la savia. n Técnicas moleculares Para detectar fitopatógenos que no pueden ser identificados con otras técnicas. Técnicas de eliminación del virus Si se encuentra que las vitroplantas obtenidas de meristemos están contaminadas con un virus y demostrado a través de cualquier método de diagnóstico, se procede a utilizar técnicas de eliminación de virus mediante las siguientes prácticas: MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL16 MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL16 17MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 5. Producción de semilla prebásica y básica en invernadero 17MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 11. Área de preparación de sustratos para llenado de maceteros. El CNPSP-H dispone de 11 casas mallas para la producción escalonada de minitubérculos prebásicos a partir de plántulas SAH. La siembra se realiza en maceteros, con una capacidad de producción de 30,000 minitubérculos mensuales (considerando el ciclo de producción de tres meses), obtenidos de la siembra de dos casas mallas. Características generales de las casas mallas del CNPSP-H. Las casas mallas disponibles se utilizan para manejo de determinadas condiciones ambientales, y disponen de: n Estructura metálica. n Malla anti-áfidos (60 mesh), con el propósito de evitar la entrada de vectores, y reducir riesgos de contaminación, sobre todo, por plagas como: áfidos, trips, psílidos, mosca blanca, Liryomiza spp., entre otros. n Cobertura móvil de sarán negro con un 60% de paso de luz para reducir temperatura. n Base de concreto y sistema de riego por goteo (fertiriego). n Cada estructura tiene las dimensiones siguientes: altura de 3.20 m (al centro, en su punto más alto), ancho de 6 m (parte frontal) y 26.5 m de largo, lo que da un área útil de 159 m², con capacidad para 900 maceteros. Después del proceso de germinación, la producción de semilla prebásica puede ser multiplicada nuevamente a nivel de casa malla, o a nivel de campo (caso actual del CNPSP-H), para la obtención de materiales básicos, siempre y cuando haya tenido un excelente comportamiento fitosanitario de acuerdo a la normativa existente para la producción de semilla de papa. El trabajo a nivel de casa malla consiste de cuatro etapas: preparación del sustrato, aclimatación de las vitroplantas SAH, manejo agronómico y cosecha. 5.1 Preparación del sustrato La preparación del sustrato se realiza en una instalación destinada para ese uso específico. Los sustratos pueden elaborarse con materiales disponibles en la zona, siempre y cuando reúnan las características requeridas y no alteren negativamente la composición química, física y biológica del mismo. El sustrato debe ser muy suelto, con el fin de facilitar la tuberización. Se puede utilizar aserrín totalmente descompuesto, casulla de arroz, pulpa de café descompuesta o tierra virgen (de montaña). El sustrato se prepara en una proporción del 47.6% de tierra, 21.4% de cascarilla de café, 11.9% de arena, 19.1% de aserrín, y cal según el pH del sustrato. Para preparar el sustrato con los ingredientes anteriores, se colocan en capas en una pileta de desinfección, de la siguiente manera: n Primero se colocan capas de 10 centímetros de los ingredientes en este orden: una capa de suelo, aserrín, suelo, cascarilla de café, suelo, arena y así sucesivamente, cubriendo casi toda la pileta (aproximadamente 3 centímetros antes del borde de la misma). MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL18 n Luego se procede a la desinfección del sustrato, se cubre con una capa delgada de desinfectante de suelo (Basamid 97 MG, Metan Sodio o Buzam), para esta actividad, el sustrato debe tener entre 60% y 70% de humedad. n Después se coloca otra capa de tierra cubriendo completamente la capa anterior de desinfectante, las dosis de los desinfectantes son de acuerdo a las recomendaciones del fabricante y al volumen de sustrato. Para la desinfección también pueden utilizarse otros métodos como la solarización o vaporización. Luego de esto, el sustrato debe ser tapado con plástico o una lona para acelerar su proceso de descomposición y utilización. n Luego se procede a destapar el sustrato y durante dos a tres días antes de siembra deberá voltearse dos veces al día con el fin de liberar los gases que aún están presentes; al mismo tiempo, se logra una aireación del mismo. A los tres días el sustrato está listo para ser utilizado. Una semana antes de la siembra de las plántulas, los invernaderos y maceteros deben lavarse y desinfectarse completamente. Dos días antes de la siembra, los maceteros deberán transportarse y distribuirse en las casas mallas (invernaderos). Una vez trasladados, se inicia el llenado de los mismos, que deben ser de plástico, con capacidad para 4 kilogramos de sustrato. Es necesario hacer una revisión completa del sistema de riego por goteo. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL18 Fotografía 12. Verificación del funcionamiento del sistema de riego. 5.2 Aclimatación y siembra de las plántulas Las plántulas se trasladan al invernadero tres a cinco días antes de siembra, deben estar certificadas como libres de virus; para esto, en el laboratorio se les realiza una prueba inmunológica llamada ELISA. Los virus PVX, PLRV, PVA, PVS y PVM son los que más afectan la papa, provocando disminuciones en el rendimiento y calidad de la semilla. Las plántulas deben presentar un tamaño aproximado de 4 a 8 cm y un sistema radical significativo con el fin de que soporten esta etapa. Una vez trasladadas las bandejas al invernadero se les destapay se colocan durante 3 a 5 días debajo de un techo de sarán con un 60% de paso de luz, con el fin de que este proceso sea gradual y así asegurar la sobrevivencia del material. Después de 3 a 5 días se siembran 5 a 6 plantas por macetero, enterrando más del 50% de la longitud de la planta. Nuevamente se colocan bajo sarán con un 60% de paso de luz durante los primeros días y dependiendo de las temperaturas. También es importante el riego en los primeros días, el cual debe ser suave. Fotografía 13. Plántula aclimatada lista para trasplantarse a macetera. 19MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 5.3 Prácticas de manejo A continuación se presenta una descripción de las principales prácticas de manejo que se deben seguir durante el ciclo de desarrollo de las plantas hasta su cosecha. • Fertilización Es sumamente importante que de acuerdo a los resultados del análisis del suelo, a los tres días de sembradas las plántulas se inicie el plan de fertilización, con el fin de fortalecerlas. Para su aplicación se hace uso del fertiriego. • Manejo fitosanitario Si bien es cierto que las plantas están bajo condiciones protegidas, es necesario realizar controles fitosanitarios, pues es imposible evitar la entrada de insectos, por otro lado, las condiciones de humedad relativa y la radiación, generan un ambiente propicio para el desarrollo de fitopatógenos. Como medida preventiva al ingreso de fitopatógenos a los invernaderos, se debe construir en la entrada una pileta (pediluvio), que siempre contenga una solución de formalina, o iodo, para desinfectar por inmersión la suela de los zapatos, antes de entrar al invernadero. También es importante el uso de la bitácora de registro, para buscar posibles causas, o fuentes de infestación, en caso que se presente un problema fitosanitario. Teniendo en cuenta todos estos factores, es necesario implementar un programa fitosanitario, fundamentado en el manejo integrado de plagas. Por tal razón, se deben realizar muestreos tres veces por semana, y así decidir la medida de control, la cual debe ser preventiva. Además, se realizan labores de saneamiento para eliminar plantas atípicas, o con signos de contaminación. El lavado del invernadero incluye la eliminación de residuos de sustrato y de algas de las mallas, luego se desinfectan usando una solución de cloro a razón de 5 cc/litro de agua, iodo o amonio cuaternario (2 cc/litro de agua). La aplicación se hace utilizando bombas de mochila de aspersión. Se desinfectan paredes (malla), techo y piso. La desinfección de maceteros se realiza en un área especial fuera de los invernaderos, utilizando las soluciones anteriormente mencionadas. Para la eliminación de plantas atípicas es necesario conocer las normas de producción de semilla de papa. Allí se describen los porcentajes de tolerancia permisibles de fitopatógenos (ver cuadro 1 en apartado 6.3 de enfermedades). También se deben realizar los análisis fitopatológicos al momento de los muestreos y después de cosecha, para garantizar que la semilla producida salió libre de enfermedades. Si por alguna razón aparece un problema de bacterias, el macetero contaminado, y los que lo rodean, deben ser retirados. El sustrato debe ser primero desinfectado con una inmersión en formalina, y luego enterrado en una Fotografía 14. La desinfección de invernaderos previo a la introducción de plántulas es clave en el control preventivo. fosa aislada del centro de producción. Además, deben desinfectarse todos los equipos que entraron en contacto, y los materiales vegetativos de las plantas afectadas deberán desecharse por completo, esto con el objetivo de evitar contaminaciones en otras plantas y áreas de los invernaderos. Si el problema fuera generalizado, se descartan todas las plantas del invernadero. Se deben seguir los pasos mencionados, incluir la total desinfección del invernadero, y someterlo a cuarentena. Ésta consiste en la aplicación constante de fungicidas y bactericidas durante 30 días. 5.4 Aporque de las plantas Esta actividad consiste en proporcionar sustrato a las plantas (1 kg/macetero), a medida que éstas lo requieran (generalmente entre los 20 y 30 días), hasta llenar los maceteros. Su función primordial es darle mayor anclaje a la planta, proteger los tubérculos de la radiación solar y evitar el ataque de fitopatógenos. 5.5 Riego El sistema de riego utilizado es el goteo y lo importante es mantener a capacidad de campo la humedad del sustrato. Se hace uso del tensiómetro (manteniendo la capacidad de campo de 10 a 20 centibares). En el CNPSP-H se han definido turnos de riego de diez minutos, preferiblemente en horas de la mañana o por la tarde. El sistema de riego permite aplicar fungicidas e insecticidas y una vez por semana se le aplican 7 a 8 libras de presión, se calibra la descarga de los goteros según especificaciones del fabricante, se limpia la cinta y se cambian accesorios cuando sea necesario. Finalmente, se debe analizar el agua de riego cada tres meses, con el objetivo de vigilar la pureza de la misma y con ello, evitar que sea un medio para el ingreso de agentes fitopatógenos. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL20 Fotografía 15. Las plantas atípicas, con signos de plagas, enfermedades o con floraciones diferentes a las de la variedad deben retirarse del invernadero. 5.6 Labores de saneamiento del cultivo Estas labores son realizadas como mínimo dos veces durante el ciclo del cultivo, una a los 30 días después de siembra y la otra a los 60. Tiene la finalidad de eliminar todas aquellas plantas atípicas, que no presentan las características fenotípicas de la variedad, plantas raquíticas, cloróticas o enfermas, asegurando así la calidad de la semilla. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL20 5.7 Control de temperatura en los invernaderos El cultivo de la papa requiere de temperaturas que van desde 18 oC a 26 oC, las que se ven incrementadas por la alta radiación de la zona, y por el material cobertor. Cuando las temperaturas son altas, afectan negativamente la fotosíntesis y otros procesos metabólicos; por consiguiente, la producción de carbohidratos que son transformados en tubérculos se ve perjudicada, que en este caso es el interés principal. Fotografía 16. El monitoreo de la temperatura ambiental y de la humedad del sustrato de las maceteras son claves para obtener plantas vigorosas. En la medida que se mantenga un equilibrio entre la temperatura y humedad relativa en el interior del invernadero, se obtienen condiciones ideales para la producción de semilla, por lo que se le ha instalado una malla sarán con un paso de 60% de luz, que deberá manejarse de acuerdo a las condiciones climáticas, para evitar la elevación excesiva de temperatura dentro del invernadero. Adicionalmente, se deben manejar nebulizaciones de 1.5 segundos en las horas más calientes, éstas nunca deben tocar las hojas de las plantas pues puede favorecer el desarrollo de fitopatógenos. 21MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL 5.8 Defoliación y cosecha Cuando las plantas llegan a su madurez fisiológica completa (75 a 90 días después de siembra, dependiendo de la variedad), se procede a la defoliación (corte de la parte vegetativa de la planta), y se deja que los tubérculos queden enterrados entre 15 y 21 días para que subericen (que no se desprenda con facilidad la piel externa del tubérculo denominada epidermis), para luego proceder a cosechar los mini tubérculos, que previamente fueron sometidos a análisis fitopatológicos. Luego se deben clasificar los tubérculos según su tamaño (grande, mediano, pequeño y minitubérculo), con el objetivo de estandarizar las densidades de siembra al momento de producir la semilla básica. Es importante mencionar que cualquierade los tamaños obtenidos en la categoría prebásica es sembrado para la obtención de la categoría básica. Fotografía 17. Clasificación de semilla de papa por tamaño durante la cosecha. Fotografía 18. Semilla de papa en proceso de brotación. 5.9 Dormancia y brotación de la semilla (minitubérculos) Las etapas de dormancia y brotación se llevan a cabo en almacenes a luz difusa. Éstos deben estar limpios y desinfectados antes del ingreso de la semilla-tubérculo producida en los invernaderos (o en el campo). Esta semilla permanece almacenada por un período de tres a cuatro meses dependiendo de las condiciones climatológicas y de la variedad. En este tiempo se realizan saneamientos periódicos y eliminaciones de brotes apicales, para estimular una mayor brotación. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL22 6.1 Manejo agronómico del cultivo de papa en lotes de semilla Las variedades a multiplicar están determinadas por la demanda del mercado, su estatus legal (variedad protegida o libre para su propagación), o identificación de una fuente confiable de los materiales iniciales; bajo estos parámetros, las variedades a multiplicar son libres en el mundo; o que fueron creadas por entidades públicas (bienes públicos). Existen otras variedades que se pueden evaluar a nivel investigativo bajo convenios internacionales si el mercado lo requiere. Para la producción de semillas de las categorías básicas, registradas, certificadas y/o comerciales que se realizan en el campo, se recomiendan las siguientes prácticas agrícolas: A. Selección del terreno La selección del terreno que se va utilizar para sembrar la parcela de producción de semilla de papa es parte fundamental para el buen desarrollo del cultivo, por tanto, se deben de tomar en cuenta aspectos fundamentales como: n Aislamiento adecuado de parcelas de papa para consumo o de otras solanáceas, la disponibilidad de agua, y el historial de siembra de cultivos anteriores; en caso de tener antecedentes de siembra de solanáceas que presentaron problemas de bacterias debe excluirse para la producción de semilla de papa. n La disponibilidad de agua (en calidad y cantidad), es básica durante todo el ciclo del cultivo, ya que una sequía produciría una plantación con problemas en su desarrollo, afectando el rendimiento y calidad de la semilla. n El suelo debe ser profundo y con buen contenido de materia orgánica, con textura franca y con pendientes moderadas, preferiblemente inferiores a 30%. 6. Producción en campo de semilla básica, registrada y certificada B. Manejo de fertilidad y preparación del suelo Manejo de fertilidad del suelo Un análisis del suelo es muy importante para determinar sus características físicas (estructura y textura), y químicas La muestra de suelo debe ser representativa del lote, para que los resultados y recomendaciones del laboratorio sean confiables. (pH, capacidad de intercambio catiónico y disponibilidad de nutrientes), con base en sus resultados, se diseñan acciones para el manejo de la fertilidad del suelo, tales como: enmiendas de fertilización, para suplir deficiencias nutricionales; encalado, para corregir acidez (en caso de que el pH sea menor al 5.5), entre otras. El análisis del suelo debe hacerse en cada parcela de producción de semilla, como mínimo dos meses antes de la siembra. Preparación del suelo Después de seleccionar el terreno y conocer sus características físicas y químicas, se realiza su preparación. Esta actividad es una de las más importantes, ya que es la base para un buen desarrollo radicular. Es aconsejable realizarla un mes antes de la siembra. Una buena preparación del terreno consiste en arar y rastrear el suelo con tracción manual, animal o mecánica. Sin una buena producción de raíces es imposible obtener buenos rendimientos. Y además, crear un ambiente propicio para el desarrollo de tubérculos, que al final es lo que interesa como producto. Los implementos agrícolas utilizados para la preparación de suelo (tractores, equipo de arado, rastra, azadones o piochas), deberán estar previamente desinfectados con yodo, cloro u otro bactericida o desinfectante. Estas soluciones también se usan en pediluvios colocados en el campo, para desinfectar los zapatos o botas del personal que ingresa a las parcelas. Las actividades fundamentales en la preparación del suelo son las siguientes: n Si el grado de compactación del suelo es mucho, es necesario subsolarlo. n Luego se ara a una profundidad entre 25 y 30 centímetros. n Después, rastrear las veces que sea necesario, hasta dejar el suelo suelto. Se debe evitar un rastreo excesivo, porque puede producir un efecto contrario. n Evitar preparar el suelo con alto contenido de humedad porque produce compactación. En suelos con pendientes, las curvas a nivel retienen la humedad en las épocas más secas y evitan la erosión en las épocas de lluvia, a la vez que permiten el escurrimiento del exceso de agua. Después de la preparación de suelos se traza una línea madre con curva a nivel para hacer el levantamiento de camas con las siguientes dimensiones: 1.10 metros de ancho y 0.30 metros de alto. Las camas son útiles para brindar mejores condiciones de aireación y drenaje del suelo; además de mejor manejo de riego y del cultivo, así como una mayor captación de luz para el cultivo. 23MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL C. Sistema de siembra de papa en camas Después del levantamiento de camas se hace el surcado a 20 centímetros de profundidad, usando dos surcos por cama (según la experiencia del centro, con la alta densidad de plantas se logra uniformizar el tamaño de semilla, mejorando la relación de semilla/papa de consumo a 80/20), luego se procede a incorporar insecticida al suelo para el control de plagas, específicamente Phyllophaga spp., (gallina ciega). Al mismo tiempo se incorpora la primera fertilización base a razón de 16 quintales por manzana. Es importante considerar la disponibilidad de nutrientes del suelo y el requerimiento del cultivo para hacer el plan de fertilización, basándose en las recomendaciones del laboratorio de análisis de suelos. El fertilizante se aplica a chorro continuo y se cubre con una capa de suelo, posteriormente se realiza la siembra de semilla-tubérculo a una distancia de 20 centímetros entre postura (entre centro y centro de cada tubérculo). Al final se procede a asperjar la semilla con un producto fungicida- bactericida y se cubre con una capa de suelo de tres veces el diámetro de la misma. Fotografía 19. A) Aplicación de insecticida-nematicida. B) Aplicación de fertilizante. C) Tapado de fertilizante e insecticida en el suelo. D) Colocación de semilla-tubérculo. E) Fumigación de semilla-tubérculo. F) Tapado de la semilla. A B C D E F MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL24 Fotografía 20. El riego por goteo es el sistema más adecuado para la producción de semilla. Fotografía 21. Adecuado desarrollo radicular. 6.2 Plagas de la papa y su control A. Plagas comunes del suelo Antes de la siembra del cultivo se inicia el control preventivo de las plagas de suelo, siendo las principales: gallina ciega (Phyllophaga spp.), gusanos cortadores (Agrotis spp.), polilla de la papa (Tecia solanivora), y nematodos, como (Meloidogyne spp.). Una roturación temprana del suelo, de 15 a 30 días antes de la siembra, expone las larvas al sol y a depredadores naturales como los pájaros, bajando los niveles de población de las plagas presentes en el suelo. Cuando los niveles de las plagas superan las normas permisibles según reglamentación, y como última alternativa, se aplica al momento de la siembra un insecticida nematicida o un controlador biológico. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL24 D. Instalación de sistemade riego El riego es fundamental durante todo el ciclo del cultivo para poder obtener una buena producción. Existen diferentes tipos de sistemas de riego, sin embargo, se recomienda la utilización del sistema de riego por goteo, ya que es más eficiente y tiene muchas ventajas para el cultivo como: n Aplicación de fertilizantes solubles en agua. n Reducción del índice de enfermedades. n Aumento en un 30% de la producción en comparación con otros sistemas de riego. n Aprovechamiento racional del agua. En el riego por goteo, se usa cinta con espacio entre goteros de 30 cm y funciona a una presión de 10 PSI; se usan dos cintas por cama (sistema de siembra de doble hilera). Se instala la cinta el día posterior a la siembra, se calibra y se realiza el primer riego, hasta dejar el suelo a capacidad de campo (en época seca) y en época lluviosa se instala riego por goteo para fertilización y aplicación de insecticidas de suelo, controladores biológicos, fungicidas y para riegos complementarios en caso de períodos de sequía. E. Control de malezas y aporque El aporque consiste en aproximar suelo a las plantas, dejando camellones bien formados, se hace cuando las plantas alcanzan una altura de 25 a 30 centímetros (aproximadamente entre los 20 a 30 días después de siembra del cultivo). Durante esta actividad se hace el control manual de malezas, usando azadón. F. Manejo de la fertilización después de la siembra El programa de nutrición incluye una fertilización base y el uso de fertilizantes solubles en el riego (una o dos veces por semana dependiendo de las condiciones de lluvia), con las fuentes siguientes: MAP técnico, nitrato de amonio, sulfato de magnesio, cloruro de potasio, nitrato de calcio y Solubor. Las cantidades de cada una de estas soluciones dependen de los resultados y recomendaciones derivadas del análisis de suelo y requerimientos del cultivo. 25MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 22. Larva de gallina ciega (Phyllophaga spp.). Fotografía 23. Arriba: daño por larva de minador de la hoja. Abajo: adulto de minador de la hoja (Liryomyza spp.). Fotografía 24. Adulto de mosca blanca. Fotografía 25. Larva de lepidópteros. B. Principales plagas del follaje y su control Durante el desarrollo del cultivo se presentan ataques de plagas del follaje. A grandes rasgos se clasifican en: insectos chupadores, como minadores de la hoja (Liryomyza spp.), áfidos, trips, mosca blanca (Bemisia spp.), ácaros, y actualmente la bactericera cockerelli (paratrioza, la que por su importancia se describe con mayor detalle). Entre los insectos masticadores se encuentran las tortuguillas (diabróticas), coleópteros, pulgones, chinches, falso medidor, saltamontes y larvas de lepidópteros, entre otros. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL26 La prevención y control de plagas está enmarcada en un manejo integrado, que incluye prácticas culturales, como: preparación anticipada de suelo, uso de trampas amarillas, manejo de rondas libres de malezas en alrededores del cultivo, y barreras vivas, entre otros. Además de un conocimiento e identificación de plagas y su ciclo de vida, niveles críticos, y sus enemigos naturales, se realiza un muestreo periódico en la plantación y a nivel de trampas amarillas (uno por semana). Por último, se hace un uso adecuado y seguro de plaguicidas. En el caso de los insecticidas, se usan piretroides a partir de los 50 días después de siembra, con una rotación de productos con base en las familias de los agroquímicos (no con base en el ingrediente activo). • El psílido de la papa o paratrioza La paratrioza constituye actualmente la plaga más importante en el cultivo de la papa en Honduras por los daños que ha ocasionado, y especialmente por el desconocimiento del productor de sus síntomas y formas de ataque al cultivo. Este manual hace un énfasis sobre su ciclo biológico, sintomatología en la planta y tubérculos de papa, y manejo integrado de la misma. Esta plaga es nueva en Honduras. Se trata de un insecto que mide 2 milímetros, se parece a un áfído con los segmentos abdominales de color oscuro y el espacio entre segmentos de color amarillo. Es saltador y se alimenta de la savia de la planta, inyectando una toxina que produce una enfermedad conocida como punta morada (psyllid yellows). Descripción general del ciclo biológico de la paratrioza: Adultos: miden 2 mm de largo y se parecen a una chicharra. Huevos: son muy pequeños, de color amarillo o anaranjado, de forma oblonga y se encuentran pegados a la punta de un tallo, usualmente colocados a lo largo de los márgenes de las hojas. Ninfas: son aplanadas, como una escama de color verdoso, con una banda de espinas cortas en el borde y se mueven al tocarlas. Las ninfas y los adultos chupan savia, especialmente las ninfas, inyectando una toxina en las plantas. Fotografía 26. Psílido adulto de Paratrioza. Fotografía 27. Huevos de paratrioza. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL26 Knowlton y Janes (1931), estudiaron el ciclo biológico donde registraron un período de incubación de 3 a 15 días, siendo el desarrollo total de la ninfa de 14 a 17 días; después de la eclosión, la ninfa pasa por cuatro instares, requiriendo de 1 a 5 días, 1 a 4 días, 1 a 5 días y de 3 a 9 días, respectivamente; se necesitan alrededor de 30 días desde la copulación hasta el adulto; además, determinaron el sexo en 127 individuos que completaron su desarrollo, 62 fueron machos y 65 hembras: la proporción fue de 1:1 aproximadamente. Una hembra puede poner entre 500 y 1,000 huevos, y el tiempo entre cada estadio depende de la temperatura, siendo que entre más alta se acortan los ciclos. Síntomas principales del daño de paratrioza Sus síntomas más importantes en el área foliar son: el encrespamiento y coloración púrpura en los bordes de las hojas apicales, y la formación de tubérculos aéreos a nivel de la base del tallo. En cuanto a los tubérculos, se afecta significativamente la calidad de papa para consumo, ya que aumenta la concentración de azúcares, lo que provoca el rayado de color café dentro del tubérculo y un sabor dulce. A este nivel de daño se pueden encontrar huevos, ninfas y adultos en las plantas afectadas. Se detectan en las entradas de los lotes de cultivo y a favor de los vientos. Por lo anterior, su monitoreo es importante para lograr su detección temprana y oportuna. Esta plaga es muy agresiva, pudiendo reducir la producción 27MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Esta plaga es muy agresiva, pudiendo reducir la producción en un 30% a 90 %, en un período de 30 días, por ello es indispensable el uso preventivo de insecticidas, así como el muestreo insectil una vez por semana en el cultivo y alrededores. De la semilla-tubérculo afectada, un 72% no brota y un 28% brota anormalmente con brotes deficientes en forma de hilo. En estudios recientes, se ha determinado que el insecto adquiere la bacteria en menos de media hora e igual tiempo tarda en transmitirlo a una planta, el ataque puede ser tardío, entre 70 y 80 días después de la siembra, y el efecto del manchado del tubérculo se manifiesta, a la posterior cosecha, entre 15 a 20 días después de la infección inicial. El uso de bomba de motor no solamente ha reducido el uso de plaguicidas sino que permite una aplicación efectiva de plaguicidas en el haz y envés de las hojas, lo cual no se puede hacer con una bomba de mochila tradicional. En el envés de las hojas tienden a ocultarse muchas plagas. 27MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 28. Daño causado por la bacteria transmitida por la paratrioza en tubérculos. Fotografía 29. Usode bomba de motor para un control efectivo de las plagas. Fotografía 30. Las arañas son insectos benéficos que ayudan a controlar diversas plagas. 6.3 Enfermedades de la papa y su control En la producción de papa con fines de obtención de semilla sana y de excelente calidad, la presencia de enfermedades en el cultivo y sus niveles de tolerancias están regulados en la normativa presentada en el cuadro 1 y descrita en porcentajes de tolerancias en las diferentes categorías de semilla. Cuadro 1. Porcentaje de tolerancia de enfermedades según categoría de semilla de papa Enfermedades y plagas Categoría de semilla Básica Registrada Certificada Tizón tardío (Phytophtora infestans) 0% 2% 4% Rhizoctonia solani 4% 6% 8% Pierna negra (Erwinia spp.) 0% 1% 2% Marchitez bacteriana (Pseudomonas spp., y Ralstonia solanacearum) 0% 0% 0% Polilla de la papa 0% 0% 1% Fusarium 0% 1% 4% Sarna de la papa 0% 0% 1% Entre las principales enfermedades que afectan el cultivo en las zonas paperas de Honduras están: El tizón tardío (Phytophtora infestans), tizón temprano (Alternaría solani), marchitez bacteriana (Ralstonia solanacearum), marchitez por fusarium (Fusarium spp.), pierna negra (Erwinia spp.), rhizoctoniasis (Rhizotocnia solani), sarna común (Estreptomices spp.), y roña (Espongospora subterránea), las cuales son enfermedades causadas por hongos y bacterias. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL28 En la producción de semilla de papa se usan suelos con historial adecuado, sobre todo, que no hayan sido cultivados con solanáceas. Vale mencionar que en la zona, los productores se dedican al monocultivo del maíz, lo que conlleva a tener baja o nula incidencia de fitopatógenos. El CNPSP-H tiene un plan de manejo integrado, brindando condiciones óptimas al cultivo, como adecuada humedad del suelo (principal causante de enfermedades fúngicas), además de brindar fertilización balanceada, para que el nivel del nitrógeno usado no susceptibilice más a las plantas al ataque de enfermedades bacterianas. En época lluviosa las condiciones son más difíciles de manejar, pero con el trazo a desnivel se evita el encharcamiento, disminuyendo así los problemas de enfermedades. Es importante mencionar que se aplican bactericidas preventivos al follaje; además, contra enfermedades causadas por hongos se inocula el suelo con biocontroladores, y a nivel de follaje se usan agroquímicos específicos, según el hongo. Por ejemplo, para controlar tizón tardío se usan fungicidas para oomicetos y se rotan las familias de los agroquímicos (no del ingrediente activo). Importante: el buen manejo de enfermedades está basado en un excelente monitoreo in situ, que se realiza igual que plagas insectiles una vez por semana y en ocasiones dos veces, esto depende también de las condiciones climáticas. Fotografía 31. Los colores y tipos de flores deben ser uniformes en el lote. Fotografía 32. Muestreo de producción. A. Saneamiento en parcelas de campo Esta actividad, parte importante del ciclo de producción, es realizada por un técnico con conocimientos del cultivo de papa, y bajo lineamientos éticos, definidos en el reglamento de semillas. Esta labor es periódica, y consiste en la eliminación de plantas: n Atípicas. n Con áreas foliares que presenten daño mecánico ocasionado por labores de fumigación o trabajos de aporque. n Que presenten sintomatología de enfermedades (bacterias, hongos, daños de insectos, o problemas tóxicos, por deficiencia o exceso de fertilización). n Dañadas o que presenten dudas en el comportamiento normal del cultivo. n Floraciones diferentes a la variedad. Se deben eliminar los residuos del saneamiento, enterrándolos en hoyos (fosas fitosanitarias), lo más profundo posible y cubrir con cal y tierra. 6.4 Defoliación y cosecha A. Muestreo de producción El muestreo de producción se realiza 70 días después de la siembra del cultivo, para verificar el número de tubérculos por planta, y su tamaño, ya que para semilla sólo se aceptan pesos entre 45 y 110 gramos por tubérculo, sobre todo, para la producción de material certificado. Además, de acuerdo al área cultivada, se toman muestras de tubérculos, para realizar análisis fitopatológicos en los laboratorios acreditados (FHIA, ZAMORANO y SENASA); si el análisis refleja que no hay problemas fitosanitarios a nivel de tubérculo, como bacterias u hongos de transmisión por tubérculo, el lote se destina para semilla, según su categoría y de acuerdo a la normativa existente. También se consideran las inspecciones realizadas en el campo, para determinar la condición fitosanitaria del lote. La defoliación generalmente dependerá del muestreo de producción, ya que la principal limitante es el tamaño de los tubérculos. Se realiza aplicando un herbicida de contacto, específicamente a base de paraquat. En una media general, la defoliación se hace a los 85 días después de la siembra, para las variedades precoces que actualmente produce el CNPSP-H. 29MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL B. Cosecha del cultivo Después de la defoliación, los tubérculos se dejan en el suelo, para que se subericen (fortalecimiento de la epidermis o cáscara), y así evitar daños mecánicos, o raspones durante la cosecha. Este período varía de acuerdo a la época y variedad, pero en promedio se obtiene entre 15 y 20 días después de la defoliación del cultivo. Luego de esto, los tubérculos están listos para ser cosechados. Superado el período de suberización de los tubérculos, se procede a la cosecha. Ésta se hace con tracción animal, mediante un pase de arado combinado en cada surco; luego se extraen manualmente los tubérculos, y se colocan en montículos, para después ser clasificados según tamaños sugeridos por el reglamento. Bajo este sistema de cosecha, el daño mecánico ocasionado a tubérculos es del 3%, y también tiene la ventaja de reducir el costo de mano de obra. Durante la cosecha se realiza un saneamiento o eliminación de tubérculos deformes, con daño mecánico (o por plagas), con síntomas de enfermedades, o que presenten características atípicas de la variedad; estos son depositados en agujeros profundos (1.5 m) y son cubiertos con cal y suelo. Posteriormente, los tubérculos cosechados son depositados en canastas plásticas (previamente desinfectadas) y transportados al almacén de germinación donde son pesados y ubicados en sus respectivas tarimas o cajas germinadoras, en las cuales cumplirán su fase de dormancia, brotación apical y por último, brotacion múltiple (listos para siembra). 29MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL Fotografía 33. Cultivo de papa defoliado. MANUAL DE PRODUCCIÓN DE SEMILLA DE PAPA MEDIANTE TÉCNICAS DE MULTIPLICACIÓN ASEXUAL30 Después de la cosecha, los tubérculos se almacenan para continuar sus etapas fenológicas hasta estar listas para la siguiente multiplicación o para ser comercializadas como semilla, deben de presentar un buen estado sanitario. Se pesan y se depositan en estructuras de germinación que pueden ser tarimas o cajas, se rotulan las cantidades y calibres. Cada categoría de semilla cuenta con almacenes específicos, es decir, hay almacenes para germinación de material prebásico, básico, registrado y certificado. 7. Almacenamiento y manejo de semilla de papa Los almacenes que tiene el CNPSP-H fueron construidos con materiales locales, y permiten el paso de luz difusa, o indirecta. Existen dos sistemas de germinación: en tarimas y en cajas germinadoras. En tarimas se distribuye la semilla en dos o tres capas, para que tenga buena ventilación, exposición a la luz difusa y para facilitar el volteo. Luego, se monitorea la evolución de la semilla-tubérculo, se aplican insecticidas a base de Bacillus thurigiensis y otros productos, como bactericidas y fungicidas de contacto
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