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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE MEDICINA DIVISIÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO HOSPITAL GENERAL DE MÉXICO DR. EDUARDO LICEAGA SERVICIO DE PEDIATRIA. “AGENTE ETIOLÓGICO MAS FRECUENTEMENTE AISLADO POR HEMOCULTIVO EN NEONATOS CON SEPSIS NEONATAL TARDÍA EN LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS NEONATALES” TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE: PEDIATRA PRESENTA PATRICIA JUQUILA RAMÍREZ MARTÍNEZ TUTOR DR. JOSÉ MANUEL ORTEGA CRUZ ASESOR METODOLOGICO DR. ADOLFO PÉREZ GARCÍA Ciudad de México, 2018 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. 2 INDICE 1. Resumen …………………………………………………………... 4 2. Antecedentes……………………………………………………… 5 2.1 Factores de riesgo……………………………………………. 6 2.2 Etiología ……………………………………………………….. 6 2.3 Diagnóstico…………………………………………………...… 7 2.4 Tratamiento…………………………………………………….. 7 3. Planteamiento del problema ……………………………………. 8 4. Justificación ………………………………………………………. 9 5. Hipótesis …………………………………………………………... 10 6. Objetivo general …………………………………………………... 11 6.1 Objetivo específicos ……………………………….………… 11 7. Metodología……………………………………………………….. 12 7.1 Tipo y diseño de estudio ………………………………..…… 12 7.2 Población…………………………………………………….... 12 7.3 Tamaño de la muestra ……………………………………..… 12 8. Criterios de inclusión……………………………………………… 13 9. Criterios de Exclusión …………………………………………… 13 10. Definición de variables …………………………………………… 14 11. Procedimiento ……………………………………………………… 16 12. Resultados …………………………………………………………. 17 13. Discusión …………………………………………………………… 22 14. Aspectos Éticos y de bioseguridad ……………………………… 23 3 AGRADECIMIENTOS A mi madre María por su amor incondicional, a mi padre Samuel por guiarme y enseñar a esforzarme y a mi hermana Maritza por tu confidencialidad y amor, por estar siempre., por ser quien soy, por su amor y apoyo gracias. A Alejandro y a Ian, amores míos, por todo su apoyo incondicional gracias por hacerme feliz. A mis tutores y asesores Dr. José Manuel Ortega y Dr. Adolfo Pérez por ayudarme a hacer esto posible. Al Dr. Juan Cruz Vidal por su enseñanza y paciencia y a mis compañeros de generación por su apoyo en etapas difíciles de este gran camino. . Y finalmente quiero agradecer a la Dra. Chavarria y Dr. Islas por confiar en mí, y dejarme formar parte de este gran equipo gracias. 4 “AGENTE ETIOLÓGICO MAS FRECUENTEMENTE AISLADO POR HEMOCULTIVO EN NEONATOS CON SEPSIS NEONATAL TARDÍA EN LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS NEONATALES” RESUMEN La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que en todo el mundo fallecen alrededor de cinco mil recién nacidos por año; 98% ocurre en países en vías de desarrollo y las infecciones causan de 30 a 40% de estas muertes.1 La sepsis neonatal causa aproximadamente 1,6 millones de muertes neonatales anualmente en los países en vías de desarrollo17. La Sepsis Neonatal Tardía (SNT) con mayor frecuencia se debe a organismos Gram-positivos (61.4%), seguidos por organismos Gram negativos (26.2%) y Cándida (10.5%).10 Objetivo. Conocer los microorganismos más frecuentemente aislados en sepsis neonatal tardía. Material y métodos. Se realizó un estudio Descriptivo, observacional, transversal y retrospectivo, en la Unidad de Neonatología del Hospital General de México “Dr. Eduardo Liceaga”, donde se revisaron los expedientes y resultados de hemocultivos en un periodo de 12 meses. Los microorganismos aislados se dividieron en 3 grupos, Gram positivos, Gram negativos y hongos. Los datos que se tomaron del expediente fueron sexo, edad gestacional, peso, y los microorganismos aislados en los hemocultivos. Resultados. Durante el periodo abril de 2017 a abril 2018, se estudiaron 68 recién nacidos que cumplían con los criterios de inclusión, con un resultado positivo y aislamiento de germen en 26 (38.2%). El 52.9% del total de los pacientes fueron del género femenino, y el 47.1% fueron masculinos. Los recién nacidos prematuros con peso muy bajo al nacimiento (<1500g) se vieron mayormente relacionados con la sepsis neonatal tardía en un 55.8% (38/68) a diferencia de los recién nacidos con peso bajo para el nacimiento (>1500 grs), con un 44.1% (30/68). En los expedientes que se reportó aislamiento de un microorganismo, los agentes predominantes fueron los gérmenes Gram positivos, que representan un 76.9% de la muestra, donde staphylococcus epidermidis fue el más frecuente (95%), seguido de los Gram negativos con 19.2%, de estos el más frecuente fue Klebsiella pneumoniae (60%), y con un 40% Escherichia coli, y por último hongos con un 3.8% de los que solo se aisló un caso de Candida Albicans. La mortalidad estuvo presente en un 14.7% de los pacientes con diagnóstico documentado en el expediente clínico, de los cuales el 60% se relacionó con un hemocultivo positivo, siendo los Gram negativos con un 66.6% los más frecuentes. Conclusiones: en la Unidad de neonatología del Hospital General de México, el microorganismo mas frecuentemente aislado por hemocultivo coincide con reportes realizados en otros lugares del país y a nivel mundial, siendo los gérmenes predominantes Gram positivos, Staphylococcus epidermidis, sin embargo este estudio no se realizaron revisiones de resistencia antibiograma, por lo que se requeriría de un estudio de seguimiento para establecer la resistencia a los antibióticos de este microorganismo, y adecuar el tratamiento. 5 ANTECEDENTES La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que en todo el mundo fallecen alrededor de cinco mil recién nacidos por año; 98% ocurre en países en vías de desarrollo y las infecciones causa de 30 a 40% de estas muertes.1 La sepsis neonatal tardía (SNT), se ha definido como un crecimiento microbiano positivo en 1 cultivo de muestras de sangre obtenidas después de las 72 h de vida con signos clínicos de sepsis acompañantes,2 relacionada con el ambiente posnatal nosocomial o comunitario 3. La SNT se presenta con un pico de incidencia con edad media de 20 días.4 En la Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales (UCIN), la mayoría de los episodios ocurren en recién nacidos prematuros (nacidos antes de las 37 semanas de gestación). 3 En los E.U., un gran estudio realizado durante un período de 2 años describió una incidencia del 21% de sepsis tardía, después del tercer día de vida.3 La incidencia de sepsis neonatal en países en vías de desarrollo varía entre 49 y 170 por cada 1,000 nacimientos vivos.4 En México la tasa es de 4 a 15.4 por cada mil nacidos vivos.5 Además se ha asociado directamente con la duración de la estancia y edad gestacional.6 Más de la mitad de los recién nacidos antes de las 28 semanas de gestación tuvieron al menos un episodio de SNT (56% y 50,9% a las 24-25 semanas y 26-27 semanas, respectivamente) en comparación con solo 15% y 9.3% entre los recién nacidos a los 32 -33 semanas o después de las 34 semanas de gestación, respectivamente9. La prevención, es ideal, pero a pesar del óptimo lavadode manos, el personal y el diseño de la UCIN, los recién nacidos prematuros continuarán desarrollando una infección secundaria a respuestas inmunes inmaduras, dispositivos invasivos e infecciones oportunistas.8 La mortalidad de recién nacidos con sepsis tardía es casi tres veces mayor que aquellos sin sepsis,4 incluso después de corregir la edad gestacional, sexo y otras comorbilidades.10 La mortalidad se considera atribuible al episodio de SNT solo si el paciente falleció dentro de los 7 días posteriores a la aparición de los datos clínicos de SNT o bacteriemia.11 La mayoría de las muertes relacionadas con la sepsis ocurrieron en recién nacidos en quienes se aislaron microorganismos Gram- negativos en hemocultivo.12 6 FACTORES DE RIESGO Dentro de los principales factores relacionados a SNT se encuentran la prematurez y el peso bajo al nacimiento, seguido de la instalación de catéter venoso central, retraso en el inicio de la alimentación enteral, ventilación mecánica asistida, uso de antimicrobianos de alto espectro. Retrasar la alimentación enteral aumenta el riesgo de colonización por patógenos gramnegativos, no solo por la protección inmunológica que proporciona la alimentación temprana, al promover el establecimiento de una flora intestinal saludable, sino también porque los recién nacidos no alimentados pasan períodos más largos con nutrición parenteral y accesos venosos centrales.3 El riesgo de infección también está influenciado por las prácticas de atención, incluida la higiene de las manos y desinfección.13 ETIOLOGÍA La SNT está ocasionada por patógenos adquiridos en el periodo posnatal,7 principalmente por organismos Gram-positivos (61.4%), seguidos por organismos Gram negativos (26.2%) y Candida (10.5%).10 En un estudio multicéntrico en el National Institute of Child Health and Human Development (NICHD), en donde en la mayoría de los episodios fueron causados por mictoorganismos Gram-positivos, Estafilococos coagulasa negativos (ECoN) con un 48% de las infecciones;14 catalogándose como el agente causante mas frecuente, independientemente de la edad gestacional,8 los organismos gramnegativos fueron responsables de casi el 18%14 siendo las especies de Klebsiella y Enterobacter los patógenos más comunes1. La tasa de mortalidad para los organismos Gram-positivos fue del 11%, para los Gram-negativos del 36%8. Por otro lado V. Khadilkar, y cols demostraron Staphylococcus epidermidis, como el microorganismo más frecuentemente aislado por hemocultivo, que se presentó en 23 episodios de infección confirmada.15 Se ha observado que las bacterias más comúnmente aisladas son especies de Staphylococcus (34.7%) o Enterobacteriaceae (44.9%), observando en este estudio Klebsiella pneuomoniae como el microorganismo mas común16 en hemocultivos (72.7%).17 En México la sepsis tardía, Staphylococcus aureus y estafilococos coagulasa-negativos, seguidos de enterobacterias, son los agentes más frecuentemente aislados.5 Las especies de Pseudomonas, Klebsiella 7 y Candida fueron los principales patógenos asociados con la muerte después de los episodios de SNT.18 DIAGNÓSTICO El hemocultivo es el “estándar de oro” para el diagnóstico de sepsis neonatal, ya que confirma la presencia de patógenos en la sangre. Sin embargo, la tasa de positividad de esta prueba es baja. El volumen recomendado de sangre para un hemocultivo en neonatos es de 1 mL. Usando este volumen la sensibilidad de esta prueba es de solo 30-40%. Si se usan 3 mL la sensibilidad sube hasta 70-80%.15 Lamentablemente, en la práctica, el volumen inoculado promedio es menor a 0,5 mL9. De todos los hemocultivos obtenidos, el 18.2% (63/345) fueron positivos.6 El tratamiento antimicrobiano empírico es recomendado, hasta que estén disponibles los resultados de las pruebas de cultivo y de susceptibilidad antimicrobiana que permitan establecer un manejo específico; por lo tanto, es fundamental conocer la epidemiología de sepsis neonatal y los patrones de resistencia de las bacterias identificadas.16 La profilaxis con antibióticos glucopéptidos (OR: 0.64, IC 95%: 0.47-0.87, P = 0.005) mostraron ser protectores contra la sepsis de inicio tardío,19 la vancomicina es uno de los antibióticos de elección ante la presunción de sepsis por SCN y otros gérmenes Gram positivos, y se emplea en el tratamiento empírico inicial en sepsis tardía o nosocomial, habitualmente asociada a un antibiótico de amplio espectro.20 TRATAMIENTO En un estudio realizado en el Hospital Infantil Privado de la Ciudad de México, se sigue considerando el uso de vancomicina en los casos con alta sospecha de resistencia antimicrobiana, limitando el espectro de los esquemas, los cuales sólo se modifican ante la mala evolución clínica. También se procura acortar los tiempos de tratamiento con antimicrobianos a los días necesarios para cada paciente. Por ello, el esquema empírico inicial de antimicrobianos no ha cambiado y para sepsis neonatal temprana se inicia con gentamicina y ampicilina y en la tardía con una cefalosporina (cefotaxima) y amikacina.5 Dada la baja tasa de resistencia de amikacina y el hecho de que no induce beta- lactamasas cromosómicas, debe utilizarse en lugar de cefalosporinas como tratamiento empírico de la sepsis neonatal, y el tratamiento debe modificarse en función de los resultados del antibiograma.16 8 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La falta de conocimiento preciso de un perfil de microorganismos asociado a la sepsis neonatal tardía ocasiona un retraso en el inicio del tratamiento antimicrobiano contribuyendo de forma importante a la mortalidad de los neonatos con este diagnóstico. 9 JUSTIFICACIÓN La sepsis neonatal tardía es un problema de salud frecuente, en la unidad de cuidados intensivos neonatales, por lo que es necesario conocer la etiología más frecuentemente aislada en los neonatos con este diagnóstico, lo que nos permitiría iniciar tratamiento previo al resultado del hemocultivo, mejorando las probabilidades de sobrevida. 10 HIPÓTESIS Staphylococcus epidermidis se encontrará en al menos en el 80% de los hemocultivos positivos de los pacientes diagnosticados con sepsis neonatal tardía. 11 OBJETIVO GENERAL Identificar los microorganismos más frecuentemente aislados por hemocultivo en sepsis neonatal tardía. OBJETIVOS ESPECIFICOS 1. Determinar a los recién nacidos pretérmino, quienes durante su estancia intrahospitalaria fueron diagnosticados con sepsis neonatal tardía. 2. Determinar cuántos de los neonatos diagnosticados con sepsis neonatal tardía, tuvieron un hemocultivo positivo. 3. Obtener el patógeno más frecuentemente aislado por hemocultivo. 4. Conocer cuál es el rango de peso en los recién nacido pretérmino en el que más se presenta la sepsis neonatal tardía. 12 METODOLOGÍA Se hará estadística descriptiva y se obtendrán los porcentajes de la población de estudio. TIPO Y DISEÑO DE ESTUDIO a) Descriptivo b) Observacional c) Transversal d) Retrospectivo POBLACIÓN a) Expedientes de recién nacidos con diagnóstico de sepsis neonatal tardía en la unidad de cuidados intensivos neonatales. TAMAÑO DE LA MUESTRA Para el cálculo de tamaño de muestra se utilizó el cálculo de una proporción con la ayuda del programa G*Power versión 3.1.5, considerando un tamaño de efecto de 20%, una alfa de 0.05, y una potencia de 95%, dando como resultado 68 pacientes. 13 CRITERIOS DE INCLUSIÓN a) Neonatos nacidos en el Hospital General de México b) Neonatos que cuenten con determinación de hemocultivo en el expediente clínico. c) Recién nacidos en quienes se encuentre documentado en el expediente clínico el diagnóstico de sepsis neonatal tardía. d)Recién nacidos con edad gestacional menor a 37 semanas CRITERIOS DE EXCLUSIÓN a) Hijo de madre con riesgo de sepsis neonatal (Debido a que esta condición se asocia a sepsis neonatal temprana). b) Neonato quien a su ingreso tuvo tratamiento antimicrobiano. c) Recién nacidos quienes hayan ingresado por malformaciones congénitas mayores. 14 DEFINICIÓN DE LAS VIARABLES Variable Definición operacional Tipo de variable Escala de medición Valores Edad en días Tiempo que ha vivido una persona u otro ser vivo contando desde su nacimiento Cuantitativa Independiente Continua No aplica Edad gestacional Tiempo con el que concluye al nacimiento. Cuantitativa/ind ependiente continua No aplica Genero Conjunto de personas o cosas que tienen características generales comunes. Cualitativa/inde pendiente Ordinal *nominal dicotómica 0: masculino 1: femenino Peso al nacimiento Medida de esta propiedad de los cuerpos. Cualitativa/inde pendiente Continua No aplica hemocultivo Es un cultivo microbiológico de la sangre. Es un método diagnóstico en medicina empleado para detectar infecciones por bacterias (Bacteriemia) u hongos en la sangre. Cualitativa/depe ndiente Continua 0: positivo 1: negativo Gram Organismo microscópico unicelular, carente de núcleo, que se Cualitativa/depe ndiente Nominal Gram: Positivo negativo 15 multiplica por división celular sencilla o por esporas. s. epidermidis Microorganismo Gram positivo Cualitativa/depe ndiente Nominal Presente Ausente Mortalidad última etapa necesaria del ciclo vital, donde aquellos que tienen una existencia que comienza con el nacimiento, la terminan con la muerte Cualitativa dicotómica/inde pendiente Nominal Si No https://deconceptos.com/ciencias-sociales/existencia 16 PROCEDIMIENTO recolecciòn de expedientes clínicos revisión de diagnósticos clínicos ¿cumple con criterios de inclusión? recopilaciòn de datos clínicos y de laboratorio en hoja de Excel (base de datos ) analisis de datos conclusiòn de resultados si No Se excluye del protocolo 17 RESULTADOS Durante el periodo abril de 2017 a abril 2018, se estudiaron 68 recién nacidos que cumplían con los criterios de inclusión, con resultado positivo y aislamiento de germen en 26 casos (38.2%). En los expedientes que se reportó aislamiento de un microorganismo, los agentes predominantes fueron los gérmenes Gram positivos, con un 76.9% (20/26) de la muestra, le sigue en orden de frecuencia los Gram negativos representando un 19.2% (5/26), y por último hongos con un 3.8% de los que solo se aisló un caso de Cándida albicans. La mortalidad se documentó en 10 pacientes (14.7%), de los cuales en 6 casos (60%) se relacionaron con un hemocultivo positivo; los más frecuentes relacionados con mortalidad fueron los Gram negativos con un 66.6% (4/10). 1. GRÁFICO 1: HEMOCULTIVO EN SEPSIS NEONATAL TARDÍA Se estudiaron 68 recién nacidos, en quienes se documentó sepsis neonatal tardía, de los que tuvieron un resultado positivo y aislamiento de germen en 26 casos (38.2%), y en 42 (61.7%) casos los hemocultivos se encontraron sin desarrollo. 0 10 20 30 40 50 60 70 POSITIVO NEGATIVO HEMOCULTIVO 18 GRÁFICO 1: GÉNERO EN SEPSIS NEONATAL El 52.9% del total de los pacientes fueron del género femenino, y el 47.1% fueron masculinos. 2. GRÁFICO 3: EL PESO EN LA SEPSIS NEONATAL TARDÍA Los recién nacidos prematuros con peso muy bajo al nacimiento (PMBN) (<1500grs) se vieron mayormente afectados con la sepsis neonatal tardía en un 55.8% (38/68) a diferencia de los recién nacidos con peso bajo para el nacimiento (PBN) (>1500 grs), con un 44.1% (30/68). mujeres 53% hombres 47% PMBN PBN 19 3. GRAFICO 4: MICROORGANISMOS CON MAYOR FRECUENCIA Se reportó aislamiento de un microorganismo, los agentes predominantes fueron los gérmenes Gram positivos, que representan un 76.9% (20/26) de la muestra, le sigue en orden de frecuencia los Gram negativos representando un 19.2% (5/26), y por último hongos con un 3.8% (1/26). 4. TABLA 1: MICROORGANISMOS MAS FRECUENTEMENTE AISLADOS MICROORGANISMO FRECUENCIA Grampositivos 76.9% (20/26) S. epidermidis (95%) 95% (19/20) S. Viridans (5%) 5% (1/20) MICROORGANISMO FRECUENCIA Gramnegativos 19.2% (5/26) Klebsiella pneumoniae 60% (3/6) Escherichia coli 40% (2/6) HONGOS FRECUENCIA C. Albicans 3.8% (1/26) En los expedientes que se reportó aislamiento de un microorganismo, los agentes predominantes fueron los gérmenes Gram positivos, que representan un 76.9% (20/26) de la muestra, donde Staphylococcus epidermidis fue el más frecuente 95%(19/20), le sigue en orden de frecuencia los Gram negativos representando un 19.2% (5/26), de estos, el Gram + Gram - FUNGICOS 0 10 20 30 40 50 60 70 80 20 más frecuente fue Klebsiella pneumoniae 60% (3/6), y con un 40% (2/6) se encontraron Escherichia coli y por último fúngicos con un 3.8% de los que solo se aisló un caso de Candida Albicans. 5. GRÁFICO 5: MORTALIDAD DE SEPSIS NEONATAL TARDÍA Fallecieron un total de 10 pacientes (14.7%), de los que en 6 casos (60%) se relacionó con un hemocultivo positivo GRÁFICO 6: MORTALIDAD ASOCIADA A MICROORGANISMOS Se documentó como microrganismo más frecuente relacionados a mortalidad a los Gram negativos en un 66.6% (4/10), comparado con un 33.3% (2/10) de casos relacionados con microorganismos grampositivos. Mortalidad Gramnegativos Grampositivos 0 50 100 1 Gramnegativos Grampositivos 21 5. GRÁFICO 7: MORTALIDAD ASOCIADA A MICROORGANISMOS GRAM NEGATIVOS En cuanto a los microorganismos gramnegativos que se encontraron: • Klebsiella pneumoniae con un 75% (3/4) y; • Escherichia coli un 25%. 0 10 20 30 40 50 60 70 80 klebsiella pneuomniae e. coli gram - 22 DISCUSIÓN Las infecciones en el periodo neonatal con frecuencia son fatales y causan morbilidad significativa a largo plazo en los supervivientes si no se tratan de manera oportuna y adecuada. El problema es mayor en neonatos prematuros y aquellos con otras comorbilidades. En la sepsis neonatal tardía lo colonización en sangre es a partir de las 72 horas del nacimiento. En el Hospital General de México en el periodo estudiado, la unidad de cuidados intensivos neonatales presentó una etiología similar a lo reportado en la literatura todos los neonatos son nacidos en esta institución, grampositivos fueron los gérmenes más frecuentes de estos el Staphylococcus epidermidis, sin embargo los gramnegativos se asociaron más a mortalidad neonatal en estos pacientes. NO contamos con el dato de sensibilidad y resistencia de cada microorganismo, ya que no fue objeto de estudio, por lo que valdría la pena retomarlo en otro estudio. Los neonatos mayormente afectados fueron los que contaron con peso muy bajo al nacimiento (<1500grs), así como edad gestacional baja, de los que se tomaron menos de 37 semanas de gestación. El diagnóstico oportuno de la sepsis neonatal tardía, complica el inicio del tratamiento, el hemocultivo es catalogado con el estándar de oro, sin embargo un alto porcentaje puede no desarrollar ningún microorganismo, lo que condicionaría aún un retraso mayor, lo mismo fue expuesto en nuestro estudio, con un porcentaje bajo de hemocultivos positivos, el tratamiento es vital para mejorar la condiciones futuras del recién nacido, por lo que se debería poner énfasis en documentar el microorganismo patógeno mas frecuente en la unidad de cuidados intensivos neonatales, con la finalidad de iniciar un tratamiento oportuno. 23 ASPECTOS ÉTICOSY DE BIOSEGURIDAD Al manejar expedientes clínicos, es un estudio sin riesgo, los datos serán tratados de manera confidencial. 24 RELEVANCIA Y EXPECTATIVAS De acuerdo con los resultados obtenidos se aplicarán en la práctica diaria de la unidad de neonatología. Alcanzar el grado académico en la especialidad de pediatría por medio de la tesis. 25 RECURSOS DISPONIBLES Recursos humanos: residente autor del trabajo, asesor y asesor metodológico Recursos materiales: expedientes clínicos RECURSOS NECESARIOS Se requirió de autorización para tener acceso de los expedientes del Hospital General de México. 26 REFERENCIAS (1) M.H. Tsai, S-M. Chu, C-W. Lee, J.F Hsu, H-R Huang, et al, Recurren late-onset sepsis in the neonatal intensive care unit: incidence, clinical characteristics and risk factors. Infectus disease [internet]. 2014 (junio 2018); volumen (20):O928-0935. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24796697 (2) Elsa Da Palma Afonso & Stijn Blot, Effect of gestational age on the epidemiology of late-onset sepsis in neonatal intensive care units a review. Clin Microbial Infect [internet] 2014; (20 junio 2018); vol. (20): O928–O935. disponible en: http://dx.doi.org/10.1080/14787210.2017.1379394. (3) C.P. Hornik, P. 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