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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO PROGRAMA DE MAESTRÍA EN CIENCIAS DE LA PRODUCCIÓN Y DE LA SALUD ANIMAL CARACTERIZACIÓN QUÍMICA E INCLUSIÓN DE LA HARINA DE Tithonia diversifolia COMO FUENTE DE PIGMENTO EN RACIONES PARA GALLINAS DE POSTURA DE PRIMER CICLO TESIS QUE PARA OPTAR POR EL GRADO DE MAESTRA EN CIENCIAS P R E S E N T A VILMA BARRITA RAMÍREZ TUTOR PRINCIPAL: BENJAMÍN FUENTE MARTÍNEZ PROGRAMA DE MAESTRÍA EN CIENCIAS DE LA PRODUCCIÓN Y DE LA SALUD ANIMAL, FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA COMITE TUTORAL: MARÍA ELENA CARRANCO JÁUREGUI INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS MÉDICAS Y NUTRICIÓN SALVADOR ZUBIRÁN JUAN CARLOS DEL RIO GARCÍA FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN MÉXICO, D.F. NOVIEMBRE 2015 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. I DEDICATORIAS A Dios, por permitirme levantarme cada mañana y llenar de bendiciones mi vida. A mi padre, Francisco Barrita por ser un ejemplo a seguir que el trabajo duro, la dedicación y la honradez son las llaves del éxito, me muestras cada día hay que esforzarse mucho para alcanzar las metas y que no importa todas las adversidades que podamos encontrarnos en el camino, el resultado siempre valdrá la pena. A mi madre, Antonia Ramírez por ser la madre mas cariñosa del mundo, por cuidar de mi y alentarme a perseguir mis sueños siendo un pilar en mi vida. A mis hermanos Rosa, Francisco y Verónica por su apoyo incondicional, por consentirme y alentarme a siempre seguir adelante. A mis viejos y muy queridos amigos (Chio, Mich, Esteban y Mitzel) por su apoyo, sus risas, sus abrazos y su siempre compañía, su amistad es invaluable, los quiero. A mis nuevos amigos (Anita, Aritzel, Adriana, Barbará, Jesús, Camilo, Eli y Viry), todos los que conocí a partir de iniciar este viaje, les agradezco compartir conmigo esta travesía, quienes mejor que ustedes para comprender todo lo que pase durante estos dos años, siempre dándonos apoyo y compartiendo momentos inolvidable, son los mejores. A todos y cada uno de mis profesores, son personas que admiro y respeto, gracias por incentivarme a seguir adelante, especialmente a mi tutor el Dr. Benjamín Fuente. "La verdadera enseñanza que trasmitimos es lo que vivimos; y somos buenos predicadores cuando ponemos en práctica lo que decimos." San Francisco de Asís “Solo Existen dos días en el año en que no se puede hacer nada. Uno se llama ayer otro mañana. Por lo tanto hoy es el día ideal para amar, crecer, hacer y principalmente vivir” Dalai Lama II AGRADECIMIENTOS A la Universidad Nacional Autónoma de México, a la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia y sus Profesores, por permitirme realizar mis estudios de Maestría y por todo el conocimiento compartido, siempre será un orgullo pertenecer a la máxima casa de estudios. Al CONACyT, al Sistema Nacional de Becas y a la Dirección General de Estudios de Posgrado de la UNAM, por el apoyo económico para realizar mis estudios de Maestría y la presente tesis. Al Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán, a su Departamento de Nutrición Animal “Dr. Fernando Pérez-Gil Romo”, especialmente a la Dra. Leonor Sanginés García por permitirme ser parte de esta investigación y confiar en mí para la realización de esta tarea. Al Centro de Enseñanza, Investigación y Extensión en Producción Avícola, especialmente al Dr. Ernesto Ávila, por su colaboración y apoyo en todo momento, así como al personal docente por su siempre amable atención. A la Unidad Académica de Medicina Veterinaria y Zootecnia, de la Universidad Autónoma de Nayarit y en particular a los integrantes del Cuerpo Académico de Forrajes y Nutrición Animal, por las facilidades prestadas para la obtención de Tithonia diversifolia. A Industrias Vepinsa SA., de CV., al Ing. Gustavo Rodríguez y el Dr. Manuel Quiroz, por todos los análisis de laboratorio y todo su apoyo brindado para la realización del presente trabajo. A Evonik Industries de México SA., de CV., por la realización del análisis de aminograma y todo su apoyo. A AB Vista y al Dr. Jorge Rubio por el apoyo prestado para la realización los análisis de ácido fítico y fitato. A mi asesor el Dr. Benjamín Fuente por su incomparable paciencia, por sus enseñanzas y por su gran trabajo para que esta investigación y mi tesis llegaran a buen término, sin usted esto no se podría haber logrado, GRACIAS. A la Dra. María Elena Carranco por su siempre disposición, su apoyo y sus enseñanzas para la elaboración de este trabajo. Al Dr. Juan Carlos Del Rio por su valioso tiempo y sus aportaciones para la elaboración de esta tesis. III RESUMEN La principal fuente de pigmento amarillo natural en México y que se emplea en la industria avícola es la flor de cempasúchil (Tagetes erecta) y buscando otras alternativas como fuente de xantofilas amarillas, se propone el empleo de harina de Tithonia diversifolia para la coloración de yema de huevo. La Tithonia diversifolia, también conocido como árbol maravilla, botón de oro, girasol mexicano, falso girasol, es una planta de la familia Asteraceae, la cual se encuentra en las áreas tropicales y subtropicales del Planeta. Es comúnmente aceptado que su origen es América Central o México. Tiene rápido crecimiento y baja demanda de insumos, se ha utilizado como planta multipropósito. Con estos antecedentes, el objetivo de esta investigación fue evaluar efecto de la inclusión de la harina de Tithonia diversifolia en raciones de gallinas ponedoras de primer ciclo sobre la concentración de pigmentos en la yema de huevo y sus parámetros productivos. Se determinó la composición química y la concentración de pigmentos a la harina de Tithonia diversifolia (HTD), destacando su contenido de proteína (25.29%) y el contenido de carotenoides totales (0.85g/kg)Se llevaron a cabo 2 ensayos utilizando gallinas de postura de estirpe Bovans blancas, primer ciclo con 30 semanas de edad y 11 en producción. Las dietas se formularon con base sorgo + pasta de soya cumpliendo con las necesidades nutricionales de esta estirpe en producción. Para los dos ensayos a la dieta testigo se le adicionó 5 ppm de xantofilas amarillas (Tagetes erecta) y a los tratamientos con inclusión de HTD se añadió 4 ppm de xantofilas rojas (Capsicum annum). Se llevaron registros semanales de: porcentaje de postura, consumo de alimento, peso y masa de huevo, conversión alimentaria, huevo roto, sucio y en fárfara. Primer ensayo (duración 6 semanas: las primeras 3 semanas la única fuente de pigmentos para yema de huevo fue la HTD, y las últimas tres semanas fue HTD + xantofilas rojas): 240 gallinas se distribuyeron en 5 tratamientos con 4 repeticiones de 12 aves cada una: 1.-Dieta testigo; 2.-Dieta con 1.77% de HTD; 3.-Dieta 5% de HTD; 4.-Dieta 10% de HTD y 5.-Dieta 15% de HTD. Al finalizar el ensayo se midió el color de yema. El peso de huevo, conversión alimentaria, porcentaje de huevo roto, sucio y fárfara no mostraron diferencia entre tratamientos (P>0.05). El porcentaje de IV postura (10 y 15% de HTD), consumo de alimento (15% de HTD) y masa de huevo (10 y 15% de HTD) fueron menores (P<0.05). Color de yema sin pigmento rojo elmás bajo fue 1.77% de HTD y los más altos fueron para 10 y 15% de HTD (P<0.05) y color de yema con pigmento rojo el menor fue con 1.77% de HTD (P<0.05). En el segundo experimento se utilizaron 192 gallinas en 4 tratamientos con 4 repeticiones de 12 aves cada una; y los tratamientos fueron: 1.-Dieta testigo; 2.-Dieta 5% de HTD; 3.-Dieta 10% de HTD y 4.-Dieta 15% de HTD. Al finalizar el experimento se les realizó un análisis estadístico de mediciones repetidas en el tiempo y comparación de medias con prueba de Tukey. Los resultados en 10 semanas no mostraron una diferencia para peso de huevo, conversión alimentaria, porcentaje de huevo roto, en fárfara y sucio entre los tratamientos (P>0.05); en cuanto al porcentaje de postura, consumo de alimento y masa de huevo los grupos con HTD presentaron valores inferiores al testigo (P<0.05) sin embargo el consumo de alimento en 5 y 10% éste fue mayor al testigo (P<0.05). De los resultados obtenidos en ambos experimentos, bajo las condiciones experimentales empleadas, se concluye que la harina de Thitonia diversifolia puede considerarse como una alternativa para la alimentación de las aves hasta un nivel de 10% de inclusión de HTD sin afectar parámetros productos. Palabras clave: Thitonia diversifolia, huevo, xantofilas, gallinas de postura, parámetros productivos. V ABSTRACT In Mexico, the most important source of natural yellow pigment that used in the poultry industry is the Aztec or Mexican marigold (Tagetes erecta) extract. In the search for alternative sources of yellow xanthopylls, the use of Tithonia diversifolia flour to dye egg yolk has been suggested. Tithonia diversifolia, also known as tree marigold, buttercup, Mexican sunflower, false sunflower is a plant of the Asteraceae family, which is found in tropical and subtropical areas of the globe. It is commonly accepted that its origin is Central America or Mexico. Has fast growth and low demand for inputs, has been used as a multipurpose plant. Against this background, the objective this study sought to the effect of inclusion of Tithonia diversifolia meal in laying hens rations first productive cycle on the concentration of pigments in the yolk and production parameters. The chemical composition and concentration of pigments Tithonia flour (HTD) is determined, highlighting its protein content (25.29%) and total carotenoid content (0.85g / kg). Two experiments were performed using 30-week-old Bovan white hens in their first cycle, with 11 weeks in production. Diets based on sorghum and soybean meal were formulated to cover the nutritional requirements of this breed. For each experiment, 5 ppm of yellow xanthophylls (Tagetes erecta) were added to the control diet, and 4 ppm of red xanthophylls (Capsicum annum) were added to those diets with Tithonia diversifolia (HTD) flour. Weekly registries were kept, which included: egg-laying percentage, food consumption, egg weight and mass, feed conversion, percentage of broken and dirty eggs, as well as percentage of eggs without shells. First experiment: (6 week duration: the first three weeks the only source of pigments for egg yolk was the HTD, and the last three weeks was HTD + red xanthophylls): 240 hens distributed in 5 treatment groups with 4 repetitions of 12 hens each: 1.-Control diet; 2.-Diet with 1.77% HTD; 3.-Diet with 5% HTD; 4.-Diet with 10% HTD, and 5.-Diet with 15% HTD. Upon completion of this experiment, yolk color was measured. The egg weight, feed conversion, percentage of broken or dirty eggs, and percentage of eggs without shells did not demonstrate a difference between treatment groups (P>0.05). In terms of egg-laying percentage (10 and 15% HTD), food consumption (15% HTD), and egg mass (10 and 15% HTD), were lower than VI with the control diet (P<0.05). Yolk coloration without red pigment the was low 1.77% HTD and the highest for 10 and 15% HTD (P<0.05), and yolk color with red pigment with the lowest was 1.77% HTD (P<0.05). In the second experiment, 192 hens were divided in 4 treatment groups, with 4 repetitions of 12 hens each. The treatments were: 1.-Control diet; 2.-Diet with 5% HTD; 3.-Diet with 10% HTD, and 4.-Diet with 15% HTD. Upon completion of the experiment, a Tukey test with statistical analysis of repeated measurements and comparison of means was realized. In ten weeks, the results did not demonstrate a difference between treatments in egg weight, feed conversion, percentage of broken and dirty eggs, or percentage of eggs without shells (P>0.05); in terms of egg-laying percentage, feed consumption, and egg mass, values inferior to the control diet were observed (P<0.05). Nevertheless, food consumption at 5 and 10% was higher than with the control diet (P<0.05). Based on the results obtained in both experiments, and under the experimental conditions described, it is concluded that Thitonia diversifolia flour can be considered an alternative pigment source in hens, which can be included in the diet at a rate of less than 10% without affecting productive parameters. Keywords: Thitonia diversifolia, egg, xanthophylls, laying hens, productive parameters VII ÍNDICE RESUMEN ABSTRACT 1. INTRODUCCIÓN ...................................................................................................................... 1 1.1 Avicultura ........................................................................................................................... 2 1.1.1 Situación de la avicultura en México ....................................................................... 2 1.1.2 Producción de huevo en México .............................................................................. 3 1.1.3 Importancia del huevo en la alimentación en México ............................................ 4 1.2 Pigmentos .......................................................................................................................... 9 1.2.1 Carotenoides ........................................................................................................... 10 1.2.1.1 Clasificación de los carotenoides ................................................................... 11 1.2.1.2 Clasificación de las xantofilas......................................................................... 11 1.2.1.3 Principales fuentes de pigmento empleados en la avicultura ...................... 12 1.3 Tithonia diversifolia ......................................................................................................... 13 1.3.1 Taxonomía y generalidades ................................................................................... 13 1.3.2 Contenido Nutricional .............................................................................................. 16 2. JUSTIFICACIÓN..................................................................................................................... 20 3. HIPÓTESIS ............................................................................................................................. 21 4. OBJETIVO .............................................................................................................................. 22 5. MATERIAL Y MÉTODOS ...................................................................................................... 23 - Obtención y determinación de la composición química de HTD .................................... 23 - Elaboración de dietas y ensayo biológico ........................................................................ 24 - Primer ensayo (Evaluación de la pigmentación de la yema) .......................................... 25 - Segundo ensayo (Evaluación de HTD sobre parámetros productivos) ......................... 30 6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ..............................................................................................34 - Composición química y concentración de pigmentos ..................................................... 34 - Primer ensayo (Evaluación de pigmentación de la yema) .............................................. 40 - Segundo ensayo (Evaluación de HTD sobre parámetros productivos) ......................... 47 7. CONCLUSIÓN GENERAL ..................................................................................................... 61 8. BIBLIOGRAFÍA ....................................................................................................................... 62 9. ANEXO .................................................................................................................................... 72 VIII LISTA DE CUADROS Cuadro 1. Preferencia de los consumidores por el color de la yema en diferentes países. ..... 6 Cuadro 2. Contenido de xantofilas en ingredientes usados en dietas para aves. ................... 13 Cuadro 3. Análisis proximal, nutrimentos digestibles totales y minerales de materia seca de Tithonia diversifolia, de acuerdo a su estado vegetativo (g/100g). ........................................... 17 Cuadro 4. Contenido de algunos compuestos nutricionales en el follaje de Tithonia diversifolia (g/100g). ....................................................................................................................... 18 Cuadro 5. Contenido de nutrimentos en Tithonia diversifolia de acuerdo con varios autores (g/100g). .......................................................................................................................................... 19 Cuadro 6. Composición de ingredientes y análisis calculado de las dietas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) durante las primeras tres semanas de experimentación para gallinas ponedoras de 30 semanas de edad. .................. 26 Cuadro 7. Composición de ingredientes y análisis calculado de las dietas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) y pigmento rojo vegetal durante las últimas tres semanas de experimentación para gallinas ponedoras de 30 semanas de edad........................................................................................................................... 27 Cuadro 8. Composición de ingredientes y análisis calculado de dietas con diferentes niveles de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) en el segundo ensayo para gallinas ponedoras con 30 semanas de edad. .......................................................................................... 31 Cuadro 9. Composición química (g/100 g) de harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................................................... 34 Cuadro 10. Resultados de los análisis antifisiológicos de harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. ....................................................................................................................... 35 Cuadro 11. Concentración de pigmentos (g/100 g) en harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................................................... 36 Cuadro 12. Perfil de aminoácidos de harina Tithonia diversifolia en porcentaje...................... 37 Cuadro 13. Parámetros productivos y color de yema de huevo de gallinas alimentadas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. ..................................... 42 Cuadro 14. Contenido de carotenoides totales, luteína, zeaxantina y capsantina en yema de huevo de gallinas alimentadas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................................................... 43 Cuadro 15. Evaluación colorimétrica en yema de huevo de gallinas alimentadas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia ...................................... 44 Cuadro 16. Parámetros productivos de gallinas Bovans Blanca en 10 semanas de experimentación a la adición de harina de Tithonia diversifolia................................................ 48 IX Cuadro 17. Parámetros productivos en gallinas Bovans Blanca de primer ciclo con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia en dietas para. ............................. 50 Cuadro 18. Porcentajes de huevo roto, en fárfara y sucio, y ganancia de peso con diferentes porcenajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. ........................................................ 55 Cuadro 19. Calidad de huevo con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia en gallinas Bovans ..................................................................................................... 56 X LISTA DE FIGURAS Figura 1. Estados productores de huevo en México (2015)......................................................... 4 Figura 2. Abanico colorimétrico de DSM® para evaluar pigmentación, (2014). ........................ 7 Figura 3. Escala de colores según el método de CIELab. ........................................................... 8 Figura 4. Planta de Tithonia diversifolia. ...................................................................................... 15 Figura 5. Hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. ..................................................................... 16 Figura 6. Yemas de huevo con diferentes niveles de inclusión de harina de Tithonia diversifolia con inclusión de pigmento rojo. ................................................................................. 41 Figura 7. Yemas de huevo con diferentes niveles de inclusión de harina de Tithonia diversifolia sin inclusión de pigmento rojo.................................................................................... 41 Figura 8. Regresión del porcentaje de postura con distintos porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................... 51 Figura 9. Regresión del consumo de alimento con distintos porcentajes de inclusión de la harina de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................... 52 Figura 10. Regresión de masa de huevo con distintos porcentajes de inclusión de la harina de Tithonia diversifolia. .................................................................................................................. 53 Figura 11. Regresión de la variable productiva con distintos porcentajes de inclusión de la harina de Tithonia diversifolia. ...................................................................................................... 54 Figura 12. Huevos con diferentes niveles de inclusión de harina de Tithonia diversifolia refrigerados por 15 días. ............................................................................................................... 59 file:///C:/Users/Wilmis/Documents/Tesis%20-%20maestria/Tesis/Arch%20unico/Tesis.docx%23_Toc435753446 file:///C:/Users/Wilmis/Documents/Tesis%20-%20maestria/Tesis/Arch%20unico/Tesis.docx%23_Toc435753446 file:///C:/Users/Wilmis/Documents/Tesis%20-%20maestria/Tesis/Arch%20unico/Tesis.docx%23_Toc435753447 file:///C:/Users/Wilmis/Documents/Tesis%20-%20maestria/Tesis/Arch%20unico/Tesis.docx%23_Toc435753447 XI ABREVIATURAS Y SIGLAS USADAS HTD Harina de Tithonia diversifolia TND Total de Nutrimentos Digestibles UIT Unidades Inhibidoras de Tripsina mg miligramos g gramos kg kilogramos µm micrómetros cm2 centímetros cuadrados Kcal Kilocalorías EEM Error estándar de la media1 1. INTRODUCCIÓN Un punto de importancia en la alimentación de las aves es la pigmentación de la yema de huevo por considerarse un factor substancial de tipo económico en México (Martínez et al., 2004; Cuca et al., 2009); porque el color está asociado con la calidad del producto y la decisión de aceptar un alimento depende en gran medida de la percepción del consumidor (Fletcher, 1992; Williams, 1992). La diferenciación del producto, así como la relación del color con la salud de la gallina constituye una ventaja comercial, traduciéndose en mejor precio de venta y preferencia por huevos con yemas más pigmentadas (Martínez et al., 2004; Cuca et al., 2009). Dentro de la producción pecuaria nacional la avicultura ocupa más del 60%, del cual el huevo representa 30% aproximadamente y la alimentación dentro de la producción ocupa del 60% al 70% de los costos. Entre los insumos para la elaboración de alimento para gallinas productoras de huevo para consumo humano es pigmentos amarillo y rojo constituyen una parte importante. Una alternativa de pigmento amarillo natural que puede utilizarse para este fin es la planta arbustiva Tithonia diversifolia conocida con diferentes nombres en varios países de Latinoamérica, India y África, que es un recurso disponible y de fácil implementación a nivel de campo. En México, una de las características del huevo que se relaciona directamente con el grado de aceptación por parte del consumidor es el color o pigmentación de la yema. Dependiendo de la ubicación geográfica, la cultura y las tradiciones hay percepciones específicas, sobre lo que constituye una buena, apetitosa y saludable pieza de huevo. En este contexto, existen algunos mercados que prefieren las yemas con el máximo color amarillo posible, otros prefieren los colores anaranjados o rojos, en tanto que otros se encuentran en una situación contraria rechazando a los huevos muy pigmentados (de Blas y Mateos, 1991). 2 1.1 Avicultura La avicultura es sin duda la rama de la ganadería con mayores antecedentes históricos en México, ya que desde antes del arribo de los españoles al continente Americano se practicaba la cría de aves de corral, principalmente de guajolote o pavo (USDA, 2000). Es a partir de los años cuarenta cuando la avicultura intensiva inicia su desarrollo, tecnificación y organización (Oteiza, 1997). En los años 80´s se observa un cambio importante en cuanto a los sistemas productivos con una clara tendencia hacia la tecnificación, la cual ha venido a reemplazar en gran medida al sistema semitecnificado y al de traspatio que se practicaba en áreas aledañas a las zonas urbanas en expansión. Actualmente esta rama del sector avícola ha alcanzado un nivel tecnológico, de eficiencia y productividad que puede equipararse con el de los países desarrollados (USDA, 2000). Dentro de la producción pecuaria nacional la avicultura ocupa más del 63% con una producción en el 2014 de más de 5.6 millones de toneladas, de lo cual el huevo representa 30% aproximadamente (UNA, 2015). 1.1.1 Situación de la avicultura en México En gran medida el desarrollo del sector productivo de huevo se ha sustentado en la conformación de consorcios que controlan diferentes aspectos de proceso productivo, logrando niveles de eficiencia y rentabilidad, cubriendo especialmente los nichos de mercado de las principales ciudades del país y con una fuerte penetración hacia los centros medios de población e inclusive hacia pequeñas zonas urbanas (USDA, 2000). La importancia de las aves productoras de huevo para plato en México radica en el papel estratégico que juega en la nutrición de la población, ya que sus productos 3 están presentes en la mayoría de los hogares, debido a que son de alta calidad, nutritivos, versátiles y con precios relativamente bajos (SAGARPA, 2008). En México existe una economía en constante fluctuación con permanente inflación, altos costos de producción y sin una política gubernamental a largo plazo para proteger a los avicultores. Durante los últimos siete años la industria avícola fue capaz, no sólo de sobrevivir, sino de crecer de manera significativa en 5.8% anual en producción de pollos y 4.6% en la de huevos, siendo mayores esas tasas de crecimiento a la de la población (Crivelli, 2009), es así que México ha logrado un nivel de producción tal, que es autosuficiente en productos avícolas (Gallardo et al., 2003; Villamar et al., 2009). El alto nivel tecnológico que tiene la industria avícola mexicana la coloca a la altura de las mejores del mundo. A nivel mundial México ocupa actualmente el 6° lugar en producción de huevo (2’572,300 toneladas/anuales) de plato superado sólo por China, E.U.A, India y Rusia (UNA, 2015). La industria avícola generó en 2014 un millón 154 mil empleos, de los cuales 192 mil fueron directos y 962 mil indirectos. Para el 2015 la industria avícola nacional mantendrá un crecimiento constante como ha ocurrido en los últimos años, consolidándose como una actividad estratégica para el país, tanto en el ámbito alimentario como económico (UNA, 2015). 1.1.2 Producción de huevo en México De acuerdo con datos del primer estimado elaborado por la Dirección de Estudios Económicos de la Unión Nacional de Avicultores, la avicultura mexicana registraría un crecimiento de 2.5% para el 2014. Asimismo se pronosticó que la producción de huevo en el país, tendría un crecimiento de 2.0% durante el 2015 (UNA, 2015). La industria de huevo en México creció 2.5% en relación a 2013. El valor de la producción avícola fue mayor a 132 mil millones de pesos durante el 2014. En materia de consumos, el consumidor mantiene una alta preferencia por los 4 productos avícolas pollo y huevo. Por otra parte, México se mantiene como el primer consumidor de huevo fresco a nivel mundial. Al cierre del 2014 el consumo per cápita de huevo llegó a 22 kg. Los principales productores de huevo en 2014 a nivel nacional fueron: Jalisco 55%, Puebla 15%, Sonora 8%, La Laguna 5%, Yucatán 4%, Sinaloa 3%, Nuevo León 3% y Guanajuato con 2%, como se muestra en la Figura 1 (UNA, 2015). Figura 1. Estados productores de huevo en México (2015). Durante mucho años, los productores de huevo han considerado que el éxito de las granjas depende principalmente de la cantidad de huevo producido; sin embargo, en la actualidad y a nivel mundial, se habla de la importancia de la calidad del huevo, siendo el principal factor a tomar en cuenta, debido a que es el resultado final del proceso de producción (Navarro, 1997; Esquivel, 1998). 1.1.3 Importancia del huevo en la alimentación en México El huevo es uno de los alimentos más antiguos que conoce el hombre, siendo mencionado en la Biblia y para muchas culturas es un simbolismo religioso de Jalisco 55% Puebla 15% Sonora 8% La Laguna 5% Yucatán 4% Sinaloa 3% Nuevo León 3% Guanajuato 2% 5 fertilidad y resurrección; el hombre de la antigüedad fue rodeándose de gallinas y de otras aves productoras de huevo, con el fin de obtener un elemento para alimentarse. No se sabe en realidad cuándo el hombre comenzó a utilizar el huevo para su consumo; aunque la historia de la India habla del año 3,200 A. C. Los egipcios y chinos demuestran que las aves han estado poniendo huevos para consumo desde el año 1,400 A. C.; el canto temprano del gallo y la regularidad con que aparecían los primeros huevos probablemente inspiró a los chinos a describir a las gallinas como “el animal doméstico que sabe la hora” (Buxade, 1993). De acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-159-SSA1-1996, que trata sobre huevos, productos y sus derivados, define al huevo como el producto de la ovulación de la gallina (Gallus gallus domesticus) y otras especies de aves que sean aceptadas para consumo humano. Los huevos de otras aves se designarán indicandoademás la especie de que procedan. Sin embargo éstos no son los únicos huevos comestibles ya que los de otras aves domésticas como pato, paloma, codorniz, ganso, oca, avestruz, pavo y de aves silvestres como chorlito, cigüeña y gaviota también pueden destinarse como alimentos para el ser humano. De igual manera se pueden aprovechar los huevos provenientes de tortugas, iguanas y muchas variedades de peces como arenque y esturión, la única diferencia está en que los huevos de gallina son los más consumidos. El huevo de gallina es la fuente de proteína más completa dentro del sector pecuario y por su bajo precio, lo ubica como la proteína de origen animal más barata en el mercado mexicano. En conjunto con la gran versatilidad en su empleo, lo sitúa como uno de los alimentos más demandados en el ámbito nacional (Arroyo, 2010). El consumo del huevo se da por necesidades nutricionales y una característica que determina la oferta del producto es el gusto por el color de la yema de huevo (Cuadro 1). Los índices de coloración en el huevo se dan por el consumo de un grupo de compuestos con amplia distribución en la naturaleza clasificada como 6 carotenoides. Éstos son un grupo de pigmentos muy difundidos tanto en el reino vegetal como animal. Poseen colores que van desde el amarillo-naranja al púrpura y se dividen en dos grupos: carotenos (hidrocarburos) y xantofilas (derivados oxigenados de los carotenos) (Berk, 2010). Cuadro 1. Preferencia de los consumidores por el color de la yema en diferentes países. Países Intervalo* Valor deseado* Argentina 7 a 12 8 Brasil 8 a 15 11 Chile 10 a 12 11 España 11 a 13 13 U.S.A. 7 a 10 9 México 9 a 12 11 Irlanda 7 a 10 9 Perú 7 a 12 9 Venezuela 7 a 11 8 *Valores del Abanico de DSM® Fuente: Becerril et al., 1988 Aunque para la población mexicana son prioritarios los factores de disponibilidad y costo del huevo, se ha observado que hay una marcada preferencia por consumir huevos con mayor pigmentación en la yema (Arroyo, 2010). La evaluación de color y el análisis del pigmento son conceptos diferentes, aunque de manera común se les emplea como sinónimos. La habilidad para describir un color en términos simples es difícil, aun teniendo una excelente visión, existen limitaciones que interfieren en la correcta evaluación (Becerril, 1989). Se han desarrollado y utilizado muchos métodos para evaluar la pigmentación en la piel de pollo y la yema de huevo. La selección del mejor método debe ser en función de alguna situación en particular, debido a que un solo método a veces no puede cumplir con lo que se desea evaluar (Davis y Kratzek, 1958; Fletcher, 1992). En 7 términos prácticos la pigmentación es considerada una herramienta para describir el color del producto final y existen varios métodos para evaluarlo: - Métodos directos. Consisten en comparar directamente mediante observación visual los productos avícolas con patrones pre-establecidos, aunque esta apreciación es subjetiva existen diferentes herramientas (Becerril, 1989). Abanicos colorimétricos: en el caso de la yema del huevo se han empleado diferentes dispositivos como el abanico de DSM® (Figura 2), Purina®, tarjetas de color de Hoechst que se comparan con el abanico colorimétrico, dispositivo que consta de una escala numérica del 1 al 15 donde las tonalidades varían del amarillo pálido hasta el naranja intenso. La desventaja de este método es que los patrones de coloración no son una medida exacta, ya que varían con la percepción de una persona a otra, además no describe con precisión el color por incapacidad de los ojos a distinguir las diferencias verdaderas en concentración de pigmentos (Becerril, 1989; Fletcher, 1992). Figura 2. Abanico colorimétrico de DSM® para evaluar pigmentación, (2014). Colorímetro de reflectancia: útil para medir el color de la piel del pollo de engorda o la yema de huevo. Se basa en el empleo de espectrofotómetros de 8 reflectancia especializada, que usan una fuente lumínica y un detector constante. Estos instrumentos iluminan el objetivo con una fuente de luz conocida y determinan la reflectancia en cuanto a longitudes de onda predefinidas que se usan para expresar y calcular el color. Pueden utilizarse equipos portátiles o fijos, y pueden emplearse tanto en interiores como en exteriores sin que esto implique diferencias en la lecturas (Becerril, 1989). La medición del color con el colorímetro Minolta CR 300 consta de 3 variables, las cuales se basan en el sistema CIELab (Figura 3) (Janky, 1986). a) Luminosidad (L): la cual va de 0 (negro absoluto) hasta 100 (iluminación total). b) Enrojecimiento (a): que oscila entre -60 a +60. Los valores con tendencia negativa corresponden a los colores verdes y los de tendencia positiva corresponden a los rojos. c) Amarillamiento (b): varían de -60 a +100 siendo los azules los valores negativos, mientras los amarillos corresponden a los valores positivos (Janky, 1986). Figura 3. Escala de colores según el método de CIELab. 9 - Métodos indirectos. Análisis químico del pigmento: se basa en la extracción de los pigmentos ya sea individual o en grupo. El análisis cuantitativo de los carotenoides involucra un manejo adecuado de los materiales que se requieren en el proceso. Durante la manipulación de los carotenoides se requiere de atmosferas inertes, reducción de la presión, luz tenue, temperaturas bajas y solventes libres de ácidos y peróxidos. La cuantificación de carotenoides se basa en la absorción de luz visible (Krinsky, 1988). HPLC (Cromatografía líquida de alta resolución): esta técnica se basa en la separación, identificación y cuantificación de los pigmentos. Es un proceso lento. Se aplica una pequeña presión hidrostática para hacer que los fluidos pasen a través de una columna y la elución requiere de varias horas, por lo que no se recomienda utilizar esta técnica para compuestos sensibles (Skoog et al., 2001). 1.2 Pigmentos En México, una de las características del huevo que se relaciona directamente con el grado de aceptación por parte del consumidor, es el color o pigmentación de la yema. Dependiendo de la ubicación geográfica, la cultura y las tradiciones, hay percepciones específicas sobre lo que constituye una buena, apetitosa y saludable pieza de huevo. En este contexto, existen algunos mercados que prefieren las yemas con el máximo color amarillo posible, otros prefieren los colores anaranjados o rojos, en tanto que otros se encuentran en una situación contraria rechazando incluso los huevos muy pigmentados (De Blas y Mateos, 1991). La pigmentación de la yema de huevo depende de los carotenoides que recibe la gallina en el alimento, ya que estos no pueden ser sintetizados ni por los mamíferos ni por las aves, estos se sinterizan en los tejidos vegetales (Carranco et al., 2011). La producción intensiva de las aves impide que estas se encuentren consumiendo vegetales al aire libre, por lo que las dietas deben complementarse con fuentes naturales ricas en carotenoides o mediante carotenoides sintéticos. 10 En la naturaleza existen varios tipos de moléculas pigmentantes y según su estructura se clasifican en: Derivados del tetrapirrol (clorofilas, pigmentos biliares y hemáticos) Derivados del benzopirano (antocianinas y flavonoides) Compuestos N-heterocíclicos (betalinas) Quinonas (benzoquinonas) Derivados de isoprenoides (carotenos y xantofilas) (Delgado et al., 2000; Wesche-Ebeling y Argaiza 2000) 1.2.1 Carotenoides Los carotenoides son compuestos ampliamente difundidos en la naturaleza, se encuentran presentes en diversas estructuras en plantas, animales, algas, hongos y bacterias. Estos pigmentos no sólo son responsables del color de flores y frutos o de estructuras animales como las plumas y picos dealgunos pájaros, el exoesqueleto de crustáceos y el músculo o la piel de algunos peces; son considerados también compuestos indispensables para la fotosíntesis, hasta el punto de que sin ellos la fotosíntesis no sería viable ya que su función en plantas y bacterias es captar energía luminosa, que luego es transferida a las clorofilas para ser transformada y poder ser aprovechada (Meléndez et al., 2007). Los carotenoides son sustancias solubles en lípidos, de naturaleza terpenoide, esto significa, que están formados por subunidades repetidas de molécula de cinco carbonos denominada isopreno, cuyo arreglo se hace inverso en el centro y pueden ser de cadena lineal o tener ciclizaciones en los extremos. Poseen un sistema conjugado de dobles enlaces denominados cadena poliénica y es esta parte de la molécula, conocida como cromóforo, la responsable de la capacidad de los carotenoides de absorber luz en la región visible y, en consecuencia, de su gran capacidad de coloración que van desde el amarillo al rojo y al púrpura. Los carotenoides se presentan en diferentes formas geométricas (isomería cis o trans o 11 Z-E), la forma trans es más efectiva para la pigmentación debido a que su coloración es más roja y estable (Hencken, 1992; Carranco et al., 2011). 1.2.1.1 Clasificación de los carotenoides Se han aislado y caracterizado más de 600 carotenoides (Surai et al., 2001) para los cuales se han propuesto diversas clasificaciones, la más simple es la que los subdivide en dos grandes grupos de acuerdo a su estructura química: Carotenos. Hidratos de carbono, que contienen solamente carbono e hidrógeno. Xantofilas. Hidratos de carbono, que además de contener carbono e hidrógeno, también poseen oxígeno en su estructura, conocidos también como oxicarotenoides. Por sus características químicas, éstas son las que tienen una importancia real en la pigmentación de la yema de huevo. Otra clasificación de los carotenoides es la propuesta por Marusich y Bauernfeind (1971), que se basa en su función como provitamina A y su acción pigmentante: Precursores de la vitamina A que pigmentan (α y β-carotenos) Precursores de la vitamina A que no pigmentan como son: Criptoxantina, β- apo-8' carotenoico. No precursores de la vitamina A, que no pigmentan, o bien pigmentan poco como la violaxantina y neoxantina. No precursores de la vitamina A que pigmentan, como la luteína, zeaxantina y cantaxantina. 1.2.1.2 Clasificación de las xantofilas Las xantofilas están ampliamente distribuidas en la naturaleza, por lo tanto los que se muestran a continuación son algunos de los oxicarotenoides, de origen natural 12 que se han empleado en la alimentación de las aves (De Blas y Mateos, 1991; Larbier y Leclerq, 1992): Luteína. Es de color amarillo y está presente en la harina de alfalfa, maíz amarillo, algas y en la flor de cempasúchil (Tagetes erecta). Zeaxantina. Con un color amarillo-naranja, presente en el maíz amarillo, en la alfalfa, el gluten de maíz y en la flor de cempasúchil. Capsantina. Aporta un color rojo y se encuentra en los chiles del género Capsicumm. Criptoxantina. Tiene un color amarillo-anaranjado. Se puede hallar abundantemente en el pigmento dulce y en menor proporción en el maíz y la alfalfa. Bixina. Es un pigmento amarillo procedente del arbusto tropical achiote o bija (Bixa Orellana). Citranasantina. Es un carotenoide de color amarillo-pardo y se halla en algunas frutas cítricas. Cantaxantina. Pigmento de color rojo oscuro, se encuentra en el hongo cantarela, robellón o níscalo, así como en el caparazón de algunos crustáceos 1.2.1.3 Principales fuentes de pigmento empleados en la avicultura La actual producción intensiva de las aves impide que tengan libre acceso a vegetales ricos en pigmentos, aunado a esto la duración del ciclo productivo es más corto, por lo que para alcanzar los niveles de pigmentación que demanda el mercado mexicano, la formulación de las dietas debe incluir ingredientes que proporcionen una alta concentración de xantofilas (Cuadro 2) (Sirri et al., 2007). 13 Cuadro 2. Contenido de xantofilas en ingredientes usados en dietas para aves. Ingrediente Contenido de xantofilas (mg/kg base seca) Alfalfa deshidratada (20% de PC) 400 – 450 Maíz amarillo 20 – 25 Flor de cempasúchil 6,000 – 10,000 Gluten de maíz amarillo 180 – 250 Etil ester del ácido apo-8 carotenoíco 100 Cantaxantina 100 Extracto saponificado de flor de cempasúchil 12,000 – 40,000 Extracto de saponificado de chiles 2,500 – 8,000 Fuente: Cuca et al., 2009 Las xantofilas han sido utilizadas durante muchos años en la avicultura como principal fuente de pigmentación de la piel y los huevos. Las cualidades de los exocarotenoides, dan como resultado el cambio en el color de los depósitos de grasa, dependiendo totalmente del tipo de xantofilas y la concentración en la dieta de las aves (Lesson y Summers, 2001; Fernández, 2002). Las principales fuentes de xantofilas empleadas en la avicultura en México son los carotenoides de la flor de cempasúchil y los de chiles del género Capsicumm. También se utilizan pigmentos de síntesis química como el apoester y la cantaxantina (Avila et al., 1990). 1.3 Tithonia diversifolia 1.3.1 Taxonomía y generalidades El SIIT (Sistema Integrado de Información Taxonómica) de CONABIO (2010), que es la versión en español del ITIS (Integrated Taxonomic Information System) del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos, clasifican taxonómicamente a Tithonia diversifolia de la siguiente manera: Reino: Plantae. 14 Subreino: Traqueobionta (plantas vasculares). Superdivisión: Spermatophyta (plantas con semillas). División: Magnoliophyta (plantas con flor). Clase: Magnoliopsida (dicotiledóneas). Subclase: Asteridae Orden: Asterales Roig y Mesa (1974) la observaron y clasificaron en Cuba, pero también ha sido reportada en Las Filipinas y Kenia (Wanjau et al., 1998), India, Ceilán, México, Guatemala, El Salvador, Costa Rica, Honduras, Panamá, Colombia y Venezuela (Martínez, 1979; Ríos, 1999) con diversos nombres y usos. Es también conocida como árbol maravilla, botón de oro, girasol mexicano, falso girasol, crisantemo de Nitobe, Quil Amargo y Wild Sunflower (Martínez, 1979). Tithonia se encuentra en las áreas tropicales y subtropicales del Planeta y posee casi 15 000 especies distribuidas por todo el mundo. El género posee 10 especies en Centroamérica y es comúnmente aceptado que su centro de origen es América Central o México (CONABIO, 2010). Crece en el borde de los caminos de forma rápida, incluso bajo condiciones desfavorables, y se multiplica fácilmente. Puede soportar la poda a nivel de suelo y la quema; las ramas podadas se ofrecen como alimento al ganado (Olabode et al., 2007). Se conoce que dicha especie mejora el reciclaje de nutrimentos, previene la erosión, reduce los efectos del pisoteo animal sobre el suelo, ofrece una alta productividad de biomasa sin insumos agroquímicos (Murgueitio et al., 2009). Tithonia diversifolia (Figura 4) es una planta herbácea o arbustiva robusta, hojas claramente lobadas, pedúnculo hinchado por debajo de la cabezuela, flores amarillas grandes, brácteas del involucro dispuestas en 4 series y de ápice redondeado a obtuso (a veces las brácteas externas algo puntiagudas), aquenios cubiertos de pelillos recostados sobre su superficie y con el vilano compuesto generalmente de 2 aristas y escamas (Pérez et al., 2009; CONABIO, 2010). Así 15 mismo, posee un gran volumen radicular, con habilidad especial para recuperar los escasos nutrimentos del suelo y un amplio rango de adaptación (Wanjau et al., 1998). Además, presenta un rápido crecimiento y baja demanda de insumos para su cultivo (Ríos, 1999) y es una especie con buena capacidad de producción debiomasa y rápida recuperación después del corte, lo que depende de la densidad de siembra, de los suelos y del estado vegetativo (CONABIO, 2010). Figura 4. Planta de Tithonia diversifolia. Tithonia diversifolia se ha utilizado como planta multipropósito: cerco vivo, abono verde, fuente de alimento para insectos, ornamental, en silvopastoreo de ganado bovino o forraje de corte en la alimentación de aves y rumiantes entre otros usos (Pérez et al., 2009). Tithonia diversifolia es una planta no leguminosa perteneciente a la familia Asteraceae (Figura 5), que sobresale por su excelente capacidad de producir biomasa comestible de alta calidad alimentaria. Desde la década de los 90 se comenzó a evaluar su potencial forrajero y se recomendó su uso para la 16 alimentación de ovinos, caprinos y bovinos, así como para monogástricos (Alonso et al., 2010; La O et al., 2010). Figura 5. Hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. Existen evidencias de que especies de plantas no leguminosas como Tithonia diversifolia acumulan tanto nitrógeno en sus hojas como las leguminosas, tiene altos niveles de fósforo, un gran volumen radicular, además de la habilidad para recuperar los escasos nutrimentos del suelo, con un amplio rango de adaptación, tolerando condiciones de acidez y baja fertilidad en el suelo (Mahecha y Rosales, 2005). 1.3.2 Contenido Nutricional Navarro y Rodríguez (1990), realizaron análisis bromatológicos de Tithonia diversifolia en cinco estados de desarrollo después de un corte de uniformización a nivel del suelo: 1. Crecimiento avanzado (30 días después del corte); 2. Prefloración (50 días); 3. Floración media (60 días); 4. Floración completa (74 días); 5. Pasada la floración (89 días). 17 Se tomaron muestras de hojas, peciolos, flores y tallos hasta 1.5 cm de diámetro (Cuadro 3). Cuadro 3. Análisis proximal, nutrimentos digestibles totales y minerales de materia seca de Tithonia diversifolia, de acuerdo a su estado vegetativo (g/100g). Crecimiento avanzado Prefloración Floración media Floración completa Pasada la floración Materia seca 14.1 17.22 17.25 17.75 23.25 Proteína cruda 28.51 27.48 22.00 20.0 14.84 Fibra cruda 3.83 2.5 1.63 3.3 2.7 Extracto etéreo 1.93 2.27 2.39 2.26 2.43 Cenizas 15.66 15.05 12.72 12.7 9.42 Extracto no nitrogenado 50 52.7 61.4 61.5 65.6 TND 48 46.8 46 46 45 Minerales Calcio 2.30 2.14 2.47 2.40 1.96 Fósforo 0.38 0.35 0.36 0.36 0.32 Magnesio 0.05 0.05 0.07 0.06 0.06 TND: Total de Nutrimentos Digestibles Fuente: Navarro y Rodríguez, 1990 En otro estudio realizado con Tithonia diversifolia por Rosales (1996) se encontraron valores de (g/100g): materia seca 23, cenizas 21.4, materia orgánica 78.6 y proteína cruda 24.3 (Cuadro 4). 18 Cuadro 4. Contenido de algunos compuestos nutricionales en el follaje de Tithonia diversifolia (g/100g). Proteína cruda 24.3 Proteína soluble 40.2 Materia orgánica 78.6 Total de carbohidratos solubles en agua 7.6 Azúcares totales 39.8 Azúcares reductores 35.0 Fibra detergente neutra (FDN) 35.3 Fibra detergente ácido (FDA) 30.4 Fuente: Rosales, 1996 Se reporta que el contenido de proteína de Tithonia diverfigolia varía entre 14.8 y 28.7% (Rosales, 1996). Odunsi et al., 1998 evaluaron la influencia de harina de hojas de Tithonia diversifolia en la dieta de gallinas ponedoras sobre el desarrollo de los animales y la calidad del huevo, reportando que el color de la yema fue mayor para todas las dietas que contenía Tithonia diversifolia, y concluyeron que la harina de Tithonia diversifolia muestra un gran potencial de uso en gallinas ponedoras, recomendándose el suministro del 15% como porcentaje de la dieta. En el Cuadro 5 se presentan los resultados del contenido de nutrimentos de Tithonia diversifolia de diferentes autores. 19 Cuadro 5. Contenido de nutrimentos en Tithonia diversifolia de acuerdo con varios autores (g/100g). Materia seca Proteína cruda Fibra cruda Extracto no nitrogenado Extracto etéreo Cenizas Inayat y Gordon (2009) 13.5 19.5 --- --- --- --- Padilla (2013) 16.6 20.9 21.1 39.4 3.4 15.2 Navarro y Rodríguez (1990) 17.9 22.6 2.8 58.2 2.2 13.1 García et al (2008) 24.4 25.7 --- --- 1.4 --- Vargas (1994) 25.0 --- --- --- --- --- 20 2. JUSTIFICACIÓN En la actualidad en México la industria avícola produce anualmente más de cinco millones de toneladas de alimento (huevo, pollo y pavo) para cubrir las demandas de la población. La avicultura representa para la alimentación mexicana el 60% de la producción pecuaria con carne y huevo. El consumo de huevo tiene varias ventajas sobre otros alimentos, dentro de ellas destaca el tener un alto valor nutricional, viene en su envase propio, fácil manejo, múltiples formas de preparar y combinar con otros alimentos, además es accesible a toda la población. Sin embargo una consideración importante para la población mexicana es la pigmentación de la yema, por lo que dentro de la alimentación de las aves la adición de pigmentos a la dieta es indispensable y al mismo tiempo conlleva un costo económico importante que impacta el costo del producto final que es el huevo. Por lo que se hace necesario explorar fuentes alternas de alimentos que aporten pigmentos diferentes a los utilizados actualmente en la industria de la producción de huevo, que sea factible de utilizar, aporte una pigmentación idónea y sea de un costo accesible que no impacte el costo de producción. Por lo que la harina de Tithonia diversifolia puede ser una alternativa viable para la coloración de la yema de huevo, de fácil inclusión en las dietas de gallinas de postura. Actualmente la Tithonia diversifolia todavía es considerada en algunas regiones como una maleza sin utilidad, crece fácilmente en el campo Mexicano y resultaría fácil su producción y procesamiento, por lo que se propone como una alternativa para la alimentación de las aves. 21 3. HIPÓTESIS Con el uso de la Tithonia diversifolia se obtendrá una pigmentación en la yema de huevo, semejante a la que se obtiene con los productos utilizados actualmente, sin alterar las características productivas de la gallina y la calidad del huevo. 22 4. OBJETIVO Objetivo general Evaluar el efecto de la inclusión de la harina de Tithonia diversifolia en raciones de gallinas ponedoras de primer ciclo sobre la concentración de pigmentos en la yema de huevo y sus parámetros productivos. Objetivos específicos: Determinar la composición química y concentración de pigmentos de harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. Evaluar el grado de pigmentación de la harina de Tithonia diversifolia en la yema de huevo a diferentes porcentajes de inclusión (0%, 1.77%, 5%, 10% y 15%) en la dieta de gallinas de postura de primer ciclo. Cuantificar la concentración de pigmentos en la yema de huevo de gallina de postura alimentada con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. Medir las variables productivas de la gallina de postura alimentada con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. Determinar la calidad física del huevo de gallina alimentada con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia. 23 5. MATERIAL Y MÉTODOS La presente investigación se llevo a cabo en un proceso de tres etapas: Durante la primera etapa se obtuvo la materia prima (Tithonia diversifolia) y se le determino su composición química, además de su concentración de pigmentos. La segunda etapa consistió en la realización de un primer ensayo con el objetivo de evaluar el grado de pigmentación de HTD a diferentes porcentajes de inclusión y la concentración de pigmentosen la yema de huevo. La tercera etapa consistió en la realización de un segundo ensayo con el objetivo de medir variables productivas de las gallinas alimentadas con diferentes porcentajes de inclusión de HTD y determinar la calidad física del huevo. - Obtención y determinación de la composición química de HTD Se llevó a cabo en la Unidad Académica de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Autónoma de Nayarit, ubicada en Compostela, Nayarit, México. Se ubica dentro de las coordenadas geográficas extremas entre los paralelos 21º22’ a 20º52’ de latitud norte y los meridianos 104º49’ a 105º22’ de longitud oeste (INEGI, 2010). Se cosecharon manualmente hojas y peciolos (644.5 kg/fresco) en los meses de diciembre 2013, enero, septiembre y octubre 2014 y eliminando todo el material ajeno a la investigación considerando el rebrote de 2 meses. Posteriormente se llevó a cabo un pre-secado en sombra en el mismo lugar de la cosecha y posteriormente se terminaron de secar en una estufa de secado a 60°C/24 horas. Una vez seca se molió en un molino de martillos con una malla de 1 mm, la harina (hojas + peciolos) se guardó en bolsas de plástico negro y se transportó al Centro de Enseñanza, Investigación y Extensión en Producción Avícola de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México, D.F. El análisis químico proximal se llevó a cabo por los métodos estandarizados descritos por la AOAC (2002): materia seca por el método indirecto de humedad en 24 estufa de secado (930.15), cenizas por calcinación (942.05), proteína cruda por el método de Kjeldahl (N x 6.25) (2001.11), extracto etéreo por el método de Soxhlet (920.39), fibra cruda (962.09), cuantificación de pigmentos por HPLC (USP 29/NF 24, 2012), perfil de aminoácidos por HPLC (Waters, 1993), taninos por la prueba cualitativa de taninos condensados (Makkar et al., 1993; Makkar et al., 1995) y taninos por prueba cuantitativa reportándose como ácido tánico (Pearson,1975), saponinas método cualitativo (Liener y Kakade,1969), alcaloides totales método cualitativo (Webb,1949), glucósidos cianogénicos método cualitativo (AOAC 2002), Inhibidor de tripsina (Kakade et al., 1974) y hemaglutininas (Jaffé et al., 1974). - Elaboración de dietas y ensayo biológico Se realizó en el Centro de Enseñanza, Investigación y Extensión en Producción Avícola (C.E.I.E.P.A.v) de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México, el cual se localiza en la calle de Manuel M. López S/N, en la Colonia Santiago Zapotitlán en la Delegación Tláhuac, Distrito Federal a una altura de 2250 msnm entre los paralelos 19°15´ latitud Oeste. Bajo condiciones de clima templado húmedo Cw, siendo enero el mes más frío y mayo el más caluroso, su temperatura promedio anual es de 16°C, con una precipitación pluvial anual media de 747 mm (INEGI, 2010). En ensayo se llevó a cabo en los meses de noviembre, diciembre y enero. Todos los procedimientos que se realizaron con las aves fueron de acuerdo a las normas del SICUAE para el cuidado y uso de animales de experimentación (Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 sobre las Especificaciones Técnicas para la producción, Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio). Se llevaron a cabo 2 ensayos con diferente inclusión de pigmentos comerciales tanto en testigo como en dietas prueba. 25 - Primer ensayo (Evaluación de la pigmentación de la yema) Se formularon dietas con base en sorgo + pasta de soya que cumplieron con las necesidades nutricionales de la estirpe de acuerdo a la fase de producción con el programa computacional Allix2. Ver 5.37.1. Este ensayo se llevó a cabo por 6 semanas divididas en: Primeras 3 semanas (Cuadro 6): 1. Dieta testigo con 15 ppm de pigmento comercial amarillo (Tagetes erecta). 2. Dieta con 1.77% de HTD (15 ppm de xantofilas totales). 3. Dieta con 5% de HTD (42.5 ppm de xantofilas totales). 4. Dieta con 10% de HTD (85 ppm de xantofilas totales). 5. Dieta con 15% de HTD (127.5ppm de xantofilas totales). Siguientes 3 semanas (Cuadro 7): 1. Dieta testigo con 15 ppm de pigmento comercial amarillo (Tagetes erecta) + 4 ppm de pigmento rojo comercial (Capsicum annuum). 2. Dieta con 1.77% HTD (15 ppm de xantofilas totales + 4 ppm pigmento rojo comercial (Capsicum annuum). 3. Dieta con 5% HTD (42.5 ppm de xantofilas totales + 4 ppm pigmento rojo comercial (Capsicum annuum). 4. Dieta con 10% HTD (85 ppm de xantofilas totales + 4 ppm pigmento rojo comercial (Capsicum annuum). 5. Dieta con 15% HTD (127.5ppm de xantofilas totales + 4 ppm pigmento rojo comercial (Capsicum annuum). 26 Cuadro 6. Composición de ingredientes y análisis calculado de las dietas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) durante las primeras tres semanas de experimentación para gallinas ponedoras de 30 semanas de edad. Harina de Tithonia diversifolia % Ingrediente Testigo 1.77 5 10 15 Sorgo 660.500 647.950 621.800 539.921 456.946 Pasta de soya 221.390 213.960 202.402 222.920 242.914 Carbonato de calcio 101.791 100.435 98.000 94.033 90.112 Harina de Tithonia diversifolia 0.000 17.700 50.000 100.000 150.000 Fosfato de calcio 4.568 4.659 4.553 4.361 4.183 Sal 3.026 3.033 3.046 3.057 3.068 Premezcla de vitaminas y minerales1 2.400 2.400 2.400 2.400 2.400 DL-Metionina 84% 2.289 2.327 2.401 2.042 1.704 Aceite vegetal 1.482 5.552 13.277 30.391 47.798 L-Lisina HCl 1.179 1.209 1.246 0.000 0.000 Cloruro de colina 60% 0.500 0.500 0.500 0.500 0.500 Pigmento amarillo vegetal2 0.500 0.000 0.000 0.000 0.000 Antioxidante3 0.150 0.150 0.150 0.150 0.150 Bambermicina 0.125 0.125 0.125 0.125 0.125 Fitasa4 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 Total 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 Análisis calculado Energía metabolizable, kcal/kg 2800 2800 2800 2800 2800 Proteína cruda, % 17.40 17.40 17.40 18.97 20.48 Metionina + cistina total, % 0.730 0.730 0.730 0.730 0.730 Lisina total, % 0.860 0.860 0.860 0.866 0.967 Treonina total, % 0.622 0.623 0.625 0.691 0.754 Triptófano total, % 0.205 0.199 0.189 0.196 0.201 Fibra cruda, % 2.446 2.583 2.831 3.331 3.824 Calcio total, % 4.100 4.100 4.100 4.100 4.100 Fósforo disponible, % 0.420 0.420 0.420 0.420 0.420 Sodio, % 0.180 0.180 0.180 0.180 0.180 1 Contenido por kg: A; 4.0 MUI: D3; 666,666.7 UI: E; 10,000.0 UI: Rovimix HyD; 5g: K3; 1.67g: B1; 0.83g: B2; 2.33g: B6; 1.17g: B12; 6,666.67 mg: Niacina; 10g: Ácido D-Pantotecnico; 3.33g: Ácido fólico; 0.33g: Biotin; 33.33mg: Colina; 100g: Hierro; 20g: Zinc; 26.67g: Manganeso; 36.67g: Cobre; 5g: Iodo; 0.33g: Selenio; 0.1g. 2 Florafil 93 Powder ( Vepinsa): 30g/kg (mínimo) de xantofilas totales 3 BHA 1.2%, BHT 9.0%, Etoxiquin 4.8%, Agentes quelantes 10.0%. 4 Quantum Blue 5000 FTU/kg derivada de E. coli. 27 Cuadro 7. Composición de ingredientes y análisis calculado de las dietas con diferentes porcentajes de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) y pigmento rojo vegetal durante las últimas tres semanas de experimentación para gallinas ponedoras de 30 semanas de edad.. Harina de Tithonia diversifolia % Ingrediente Testigo 1.77 5 10 15 Sorgo 660.090 647.550 621.400 539.721 456.936 Pasta de soya 221.000 213.860 202.002 222.720 242.414 Carbonato de calcio 101.791 100.435 98.000 94.033 90.112 Harina de Tithonia diversifolia 0.000 17.700 50.000 100.000 150.000 Fosfatode calcio 4.568 4.559 4.553 4.361 4.183 Sal 3.026 3.033 3.046 3.057 3.068 Premezcla de vitaminas y minerales1 2.400 2.400 2.400 2.400 2.400 DL-Metionina 84% 2.289 2.327 2.401 2.042 1.704 Aceite vegetal 1.482 5.252 13.277 29.991 47.508 L-Lisina HCl 1.179 1.209 1.246 0.000 0.000 Cloruro de colina 60% 0.500 0.500 0.500 0.500 0.500 Pigmento rojo vegetal2 0.800 0.800 0.800 0.800 0.800 Pigmento amarillo vegetal3 0.500 0.000 0.000 0.000 0.000 Antioxidante4 0.150 0.150 0.150 0.150 0.150 Bambermicina 0.125 0.125 0.125 0.125 0.125 Fitasa5 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 Total 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 Análisis calculado Energía metabolizable, kcal/kg 2800 2800 2800 2800 2800 Proteína cruda, % 17.400 17.400 17.400 18.970 20.480 Metionina + cistina total, % 0.730 0.730 0.730 0.730 0.730 Lisina total, % 0.860 0.860 0.860 0.866 0.967 Treonina total, % 0.622 0.623 0.625 0.691 0.754 Triptófano total, % 0.205 0.199 0.189 0.196 0.201 Fibra cruda, % 2.446 2.583 2.831 3.331 3.824 Calcio total, % 4.100 4.100 4.100 4.100 4.100 Fósforo disponible, % 0.420 0.420 0.420 0.420 0.420 Sodio, % 0.180 0.180 0.180 0.180 0.1806 1 Contenido por Kg: A; 4.0 MUI: D3; 666,666.7 UI: E; 10,000.0 UI: Rovimix HyD; 5g: K3; 1.67g: B1; 0.83g: B2; 2.33g: B6; 1.17g: B12; 6,666.67 mg: Niacina; 10g: Ácido D-Pantotecnico; 3.33g: Ácido fólico; 0.33g: Biotin; 33.33mg: Colina; 100g: Hierro; 20g: Zinc; 26.67g: Manganeso; 36.67g: Cobre; 5g: Iodo; 0.33g: Selenio; 0.1g. 2 Avired 5g/kg (mínimo) de xantofilas de frutos de Capsicum annum. 3 Florafil 93 Powder ( Vepinsa): 30g/kg (mínimo) de xantofilas totales 4 BHA 1.2%, BHT 9.0%, Etoxiquin 4.8%, Agentes quelantes 10.0%. 5 Quantum Blue 5000 FTU/kg derivada de E. coli. 28 Se utilizó una caseta de ambiente natural con jaulas dispuestas en un diseño pirámidal, se emplearon 240 gallinas de postura de la estirpe Bovans blancas de primer ciclo, de 30 semanas de edad y 11 semanas de producción con un peso promedio de 1.562 ± 0.051 kg, las cuales se distribuyeron en un diseño completamente al azar en 5 tratamientos con 4 repeticiones de 12 aves cada una. El agua y alimento se ofrecieron a libertad durante todo el experimento. Durante las 6 semanas de experimentación se llevaron registros semanales del porcentaje de postura, consumo de alimento/ave/día (g), peso del huevo (g), masa de huevo ave/día (g) y conversión alimentaria (kg:kg), el porcentaje de huevo roto, sucio y en fárfara (sin cascarón). Se colectaron 20 huevos por tratamiento al final de la semana tres y la semana seis y se les midió la coloración de la yema con un Espectrofotómetro de reflectancia marca TSS QCC Yolk Colour con transformaciones a valores absolutos de abanico de DSM. Se colectaron 8 huevos por tratamiento para la cuantificación de pigmentos por HPLC (USP 29/NF 24, 2012) para la yema de huevo. Análisis estadístico Se comprobaron los supuestos de Normalidad y Homogeneidad de varianzas para las variables que se midieron, y los resultados se muestran en el Anexo. Para las variables antes mencionadas se utilizó un diseño completamente al azar mediante el siguiente modelo (Kuehl, 2001): Yij = µ + Ti + ei(j) i = 1, 2, 3, 4 y 5 j = 1, 2, 3 y 4 Donde: Yij = Variable respuesta (porcentaje de postura, consumo de alimento/ave/día (g), peso del huevo (g), masa de huevo ave/día (g), conversión alimentaria (kg:kg), porcentaje de huevo roto, sucio y en fárfara, coloración de yema y cuantificación de pigmentos) 29 µ = Media general Ti = Efecto de i-ésimo tratamiento ei(j) = Error experimental Las diferencias entre medias se analizaron con la prueba de Tukey con un nivel de significancia de 0.05 con el programa computacional SPSS, versión 21.0 para Windows (Kuehl, 2001). Se realizó una transformación de las variables (Kuehl, 2001) de cuantificación de pigmentos (carotenoides totales y luteína) para obtener homogeneidad de varianzas mediante las Transformaciones Box-Cox. Para los carotenoides totales se utilizó la formula siguiente: y para la luteína: . 30 - Segundo ensayo (Evaluación de HTD sobre parámetros productivos) Se utilizó una caseta de ambiente natural con jaulas en forma de pirámide, se emplearon 192 gallinas de postura de la estirpe Bovans blancas de primer ciclo, con una edad de 30 semanas y 11 semanas de producción y un peso promedio de 1.562 ± 0.051kg, las cuales se distribuyeron en un diseño completamente al azar en 4 tratamientos con 4 repeticiones de 12 aves cada una. El agua y alimento se ofrecieron a libertad durante todo el ensayo. Se formularon dietas con base en sorgo + pasta de soya que cumplieron con las necesidades nutricionales de la estirpe de acuerdo a la fase producción, con el programa computacional Allix2. Ver 5.37.1 (Cuadro 8). Los tratamientos fueron: 1. Dieta testigo comercial. 2. Dieta con 5% de HTD. 3. Dieta con 10% de HTD. 4. Dieta con 15% de HTD. Antes de formular las dietas, a los ingredientes empleados se les realizó un aminograma para conocer su composición. 31 Cuadro 8. Composición de ingredientes y análisis calculado de dietas con diferentes niveles de inclusión de harina de Tithonia diversifolia (kg) en el segundo ensayo para gallinas ponedoras con 30 semanas de edad. Harina de Tithonia diversifolia % Ingrediente Testigo 5 10 15 Sorgo 660.100 621.402 539.721 456.940 Pasta de soya 221.000 202.002 222.720 242.414 Carbonato de calcio 101.791 98.000 94.033 90.112 Harina de Tithonia diversifolia 0 50.000 100.000 150.000 Fosfato de calcio 4.568 4.553 4.361 4.183 Sal 3.026 3.046 3.057 3.068 Premezcla de vitaminas y minerales1 2.400 2.400 2.400 2.400 DL-Metionina 2.289 2.401 2.042 1.704 Aceite vegetal 1.482 13.277 29.991 47.504 L-Lisina HCl 1.179 1.246 0 0 Cloruro de colina 60% 0.500 0.500 0.500 0.500 Pigmento rojo vegetal2 0.800 0.800 0.800 0.800 Pigmento amarillo vegetal3 0.500 0 0 0 Antioxidante4 0.150 0.150 0.150 0.150 Bambermicina 0.125 0.125 0.125 0.125 Fitasa5 0.100 0.100 0.100 0.100 Total 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 Análisis calculado Energía metabolizable, kcal/kg 2800 2800 2800 2800 Proteína cruda, % 17.4 17.4 18.97 20.48 Metionina + cistina total, % 0.73 0.73 0.73 0.73 Lisina total, % 0.86 0.86 0.866 0.967 Treonina total, % 0.622 0.625 0.691 0.754 Triptófano total, % 0.205 0.189 0.196 0.201 Fibra cruda, % 2.446 2.831 3.331 3.824 Calcio total, % 4.100 4.100 4.100 4.100 Fósforo disponible, % 0.420 0.420 0.420 0.420 Sodio, % 0.180 0.180 0.180 0.180 1 Contenido por kg: A; 4.0 MUI: D3; 666,666.7 UI: E; 10,000.0 UI: Rovimix HyD; 5g: K3; 1.67g: B1; 0.83g: B2; 2.33g: B6; 1.17g: B12; 6,666.67 mg: Niacina; 10g: Ácido D-Pantotecnico; 3.33g: Ácido fólico; 0.33g: Biotin; 33.33mg: Colina; 100g: Hierro; 20g: Zinc; 26.67g: Manganeso; 36.67g: Cobre; 5g: Iodo; 0.33g: Selenio; 0.1g. 2 Avired 5g/kg (mínimo) de xantofilas de frutos de Capsicum spp. 3 Florafil 93 Powder ( Vepinsa): 30g/kg (mínimo) de xantofilas totales 4 BHA 1.2%, BHT 9.0%, Etoxiquin 4.8%, Agentes quelantes 10.0%. 5 Quantum Blue 5000 FTU/kg derivadade E. coli. 32 Este segundo ensayo se llevó a cabo por 10 semanas con un registro semanal de porcentaje de postura, consumo de alimento/ave/día (g), peso del huevo (g), masa de huevo ave/día (g), índice de conversión alimentaria (kg:kg), porcentaje de huevo roto, sucio y en fárfara (sin cascarón). Al finalizar de la prueba se tomaron 20 huevos por tratamiento y se midió la coloración de la yema con un Colorímetro de reflectancia marca TSS QCC Yolk Colour con transformaciones a valores absolutos de abanico de DSM, unidades Haugh, grosor y resistencia de cascarón. Análisis estadístico Se comprobaron los supuestos de Normalidad y Homogeneidad de varianzas para las variables que se midieron, y los resultados se muestran en el Anexo. Para las variables porcentaje de postura, consumo de alimento/ave/día (g), peso del huevo (g), masa de huevo ave/día (g), conversión alimentaria (kg:kg), porcentaje de huevo roto, sucio y en fárfara (sin cascarón) se utilizó un diseño de mediciones repetidas en el tiempo mediante el siguiente modelo (Kuehl, 2001): Yij = µ + αi + δik + βj + (αβ)ij + eijk i = 1, 2, 3, y 4 j = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10 k = 1, 2, 3 y 4 Donde: Yij = Variable respuesta µ = Media general αi = Efecto de i-ésimo tratamiento ɗik = Error experimental aleatorio dentro de tratamientos βj = Efecto del j-ésimo tiempo (αβ)ij = Interacción entre tratamiento y tiempo eijk = Error experimental aleatorio en las mediciones repetidas 33 Para las variables de color de yema, Unidades Haugh, grosor y resistencia de cascarón se utilizó un diseño completamente al azar mediante el siguiente modelo (Kuehl, 2001): Yij = µ + Ti + ei(j) i = 1, 2, 3, y 4 j = 1, 2, 3 y 4 Donde: Yij = Variable respuesta µ = Media general Ti = Efecto de i-ésimo tratamiento ei(j) = error experimental Las diferencias entre medias se analizaron con la prueba de Tukey con un nivel de significancia del 0.05 con el programa SPSS, versión 21.0 para Windows. También se realizó un análisis de Regresión Múltiple (Kuehl, 2001) de las variables porcentaje de postura, consumo de alimento/ave/día (g), peso del huevo (g), masa de huevo ave/día (g), conversión alimentaria (kg:kg), porcentaje de huevo roto, sucio y en fárfara (sin cascarón), para encontrar un punto óptimo biológico el cual se calculó a partir de la siguiente fórmula: X= . Se realizó una transformación de las variables (Kuehl, 2001) de ganancia de peso para obtener una homogeneidad de varianzas mediante la siguiente fórmula: 34 6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN - Composición química y concentración de pigmentos Resultados La composición química de la harina Tithonia diversifolia (HTD) se muestra en el cuadro 9, se observa el alto contenido de proteína (25.29%), la presencia de fósforo fítico (0.70) y calcio (2.90). la ausencia de taninos condensados. Cuadro 9. Composición química (g/100 g) de harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. Base húmeda Base seca Humedad 7.84 0.00 Proteína cruda 25.29 27.44 Extracto etéreo 2.07 2.25 Fibra Cruda 11.16 12.11 Cenizas 17.08 18.53 ELN 36.56 39.67 Fósforo total 0.49 0.53 Calcio 2.90 3.15 Fósforo Fítico1 0.70 0.76 Sodio 16.55 18.36 Potasio 4879.12 5294.19 Magnesio 467.84 507.64 Cobre (mg/kg) Menos de 7 Menos de 9 Cinc (mg/kg) 151.64 164.54 Hierro (mg/kg) 379.98 412.31 1 Análisis realizados por AB Vista. 35 Los resultados de los análisis antifisiológicos de la harina Tithonia diversifolia (HTD) se muestra en el cuadro 10, se observa solo la presencia de ácido tánico (958.27 mg/100g), inhibidor de tripsina (307.16 UIT/g de muestra) y actividad ureásica (0.027 incremento en pH). Cuadro 10. Resultados de los análisis antifisiológicos de harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. Base húmeda Base seca Taninos condensados1 ND2 ND2 Ácido tánico (mg/100g) 958.27 1039.79 Saponinas Negativo Negativo Alcaloides Negativo Negativo Glucósidos cianogénicos Negativo Negativo Inhibidor de tripsina (UIT/g de muestra) 307.16 333.29 Hemaglutininas Negativo Negativo Actividad ureásica (incremento de pH) 0.027 0.030 1Análisis realizados por el Laboratorio de Bromatología de la Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán, UNAM. 2No Detectado. La concentración de pigmentos se muestra en el Cuadro 11, además de contener carotenoides totales en una parte (hojas y peciolos) donde es poco común que lo presente la planta (0.85%) además contiene luteína (46.7%) y zeaxantina (0.6%) importantes pigmentos utilizados en la industria avícola. 36 Cuadro 11. Concentración de pigmentos (g/100 g) en harina de hojas y peciolos de Tithonia diversifolia. Base húmeda Base seca Carotenoides totales (g/kg) 0.85 0.92 Sólidos 89.60 97.22 Carotenos o ésteres 28.10 30.49 B-Criptoxantina 5.90 6.40 Trans-Luteína 46.70 50.67 Trans-Zeaxantina 0.60 0.65 Trans-Luteína Epoxi 1.80 1.95 En el Cuadro 12 podemos observar el contenido de aminoácidos totales de la HTD donde se muestra que las hojas y peciolos son ricos en (g aa/100 de HDT, en base seca): lisina (2.146), metionina + cistina (1.213) y treonina (1.348) que son aminoácidos limitantes importantes en las dietas para gallina de postura así como para el tamaño de huevo. 37 Cuadro 12. Perfil de aminoácidos de harina Tithonia diversifolia en porcentaje. g aa/100 g de proteína Base seca Base húmeda Metionina 2.515 0.690 0.636 Cistina 2.280 0.626 0.577 Metionina+Cistina* 4.795 1.316 1.213 Lisina 8.485 2.328 2.146 Treonina 5.330 1.463 1.348 Ac. Aspartico 11.900 3.265 3.010 Ac. Glutamico 8.665 2.378 2.191 Prolina 8.515 2.337 2.153 Glicina 10.535 2.891 2.664 Alanina 7.700 2.113 1.947 Valina 9.815 2.693 2.482 Isoleucina 3.535 0.970 0.894 Leucina 8.315 2.282 2.103 Serina 7.820 2.146 1.978 Fenilalanina 5.480 1.504 1.386 Arginina* 3.809 1.045 0.963 Histidina* 1.488 0.408 0.376 *Evoniik Industries Discusión La harina de Tithonia diversifolia destaca por su contenido en proteína cruda (25.29%), la cual al compararla con otras muestras de Tithonia diversifolia (flores, hojas, peciolos y tallos) resultó ser similar a lo reportado por García et al., (2008) con un 25.7%. Al comparar a la HTD con un forraje, como la alfalfa (17 – 25%), la HTD llega a ser similar a ésta (Cuca et al., 2009). 38 En cuanto al extracto etéreo (2.07%) fue similar a lo que reportan Navarro y Rodríguez, (1990) con 2.2%; el contenido de calcio y fosforó de HTD (2.90% y 0.49% respectivamente), siendo mayor a lo mencionado por Navarro y Rodríguez, (1990) 2.47% y 0.36% respectivamente, esto puede ser debido a la porción de la planta que utilizaron estos autores (flores, hojas, peciolos y tallos), que fueron con un diámetro de 1.5 cm que pudo incrementar el contenido de fósforo y calcio. Cabe mencionar que para este estudio no se midió el diámetro de los pecíolos posiblemente a esto se deba la diferencia de los resultados, además de época de colecta, edad de planta, localización geográfica. Con respecto al contenido de aminoácidos esenciales en HTD se puede mencionar que presentaron un alto contenido (g aa/100 g de proteína): metionina (0.63), cistina (0.57), lisina (2.14), treonina (1.34), valina (2.48) y leucina (2.10), presentando un mayor aporte que el de harina de alfalfa (g aa/100 g de proteína): cistina (0.20), lisina (0.73), treonina (0.70), valina (0.90) y leucina (1.26) (Cuca et al., 2009); pero si se compara con una fuente de proteína utilizada en la avicultura como la pasta de soya: (48 g/100g proteína cruda) y aminoácidos (g aa/100 de proteína): metionia (0.70),
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