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Universidad Nacional Mayor de San Marcos Universidad del Perú. Decana de América VICERRECTORADO ACADÉMICO DE PREGRADO COMISIÓN ORGANIZADORA DE LA ESCUELA DE ESTUDIOS GENERALES Resolución Rectoral N°05389-R-16 AREA DE INGENIERIA PRÁCTICA N°5 Reconocimiento del proceso de fotosíntesis y extracción de clorofila DOCENTE : María Luz Maldonado ALUMNOS : Meza Martinez Diego Antonio Malásquez Salas Leonardo Fabián Salazar Herrera Óscar Miguel Casas Luyo Alexis Ricardo José Gabriel Figueroa Salas Lima-Perú 2020 Introducción: La fotosíntesis es el proceso mediante químico de conversión de materia inorgánica a materia orgánica gracias a la energía luminosa.En este proceso la energía lumínica se transforma en energía química, siendo el NADPH y el ATP las primeras moléculas en la que queda almacenada esta energía, además, es el principal mecanismo por el cual se nutren las plantas y otros organismos autótrofos que poseen clorofila, como las algas y algunos grupòs de bacterias. Podemos distinguir dos tipos de fotosíntesis, en función de las sustancias que utiliza el organismo, primero tenemos a la fotosíntesis oxigénica que se caracteriza por utilizar agua para la reducción de dióxido de carbono, se produce azúcares esenciales para el organismo y oxígeno. Este tipo de fotosíntesis se encuentra en plantas,algas y cianobacterias. Mientras que en la fotosíntesis anoxigénica, el organismo aprovecha la luz solar para romper moléculas de sulfuro de hidrógeno o hidrógeno gaseoso, liberando azufre como producto de reacción. Se lleva a cabo por bacterias verdes y púrpuras del azufre, que contienen una clorofila diferente a la de las plantas. En el siguiente informe veremos dos experimentos, en el cual el primero consta de analizar el método de hojas flotantes y el segundo el proceso de extracción de clorofila. Marco teórico: Las clorofilas son pigmentos de color verde encontradas especialmente en las cianobacterias, y en todo aquel organismo que contiene cloroplastos o membranas tilacoidales en sus células, esto incluye a las plantas y diversas algas, cuya importancia radica en el proceso de fotosíntesis que permite a las plantas y algas producir energía en base de la luz solar. La fotosíntesis es una reacción química donde el dióxido de carbono y el agua forman azúcares y producen oxígeno en presencia de energía lumínica, el objetivo de estos azúcares es servir como fuente de alimento que vendría a ser energía para las plantas. Objetivos: En el primer experimento, se busca un aprendizaje de cómo el método del disco de hoja flotante puede servir para medir la tasa de fotosíntesis. En el segundo experimento, se busca comprender cómo el alcohol etílico y la acetona facilitan el proceso de extracción de clorofila. Hipótesis: En el primer experimento, probaremos que los discos de espinaca, dentro de la solución de dióxido de carbono y jabón, al entrar en contacto con los haces de luz de la lámpara comenzará a elevarse. En el segundo experimento queremos demostrar que la afinidad química entre el alcohol etílico y la acetona, puesto que estos son solubles en solventes orgánicos, permite disolver la clorofila encontradas en las membranas vegetales, en este caso se empleó la espinaca, y poder extraerlas con facilidad. Tipo de investigación efectuada: Experimental y explicativa, ya que se ha empleado un proceso de verificación de una hipótesis por medio de la experimentación y posteriormente la explicación de los resultados obtenidos mediante este. Experimento 01: Reconocimiento del proceso de síntesis a través de la tasa fotosintética Materiales usados: ● Jabón líquido ● Recipiente con graduación ● Agua ● Mortero o dispositivo para triturar ● Lámpara o fuente de luz ● Cronómetro ● Jeringas de 10 ml ● Bicarbonato de sodio ● Alcohol de 96 grados ● Acetona ● Frascos de vidrio ● Hojas de espinaca frescas ● Papel toalla Procedimiento: 1. Preparación de solución de jabón líquido: En un recipiente graduado que contenga 500ml de agua de caño dispensar 35 mL de jabón líquido. Rotular dicho recipiente con el nombre “Solución Control”. 2. Preparación de solución de bicarbonato de sodio: En otro recipiente que contenga 500ml de agua, agregar 25 g. de bicarbonato de sodio y revolver. Luego agregar 250 mL. de la “solución control” obtenida en procedimiento “1”, mezclar. Rotular con el nombre “Solución de CO 2 ”. 3. Obtenido ya las dos preparaciones, etiquetar a la solución control con el siguiente nombre: “Solución de control de luz”, y al que colocamos al inicio como solución de CO 2 , etiquetarlo con el nombre “Luz de 15 cm-solución de CO2 ”. 4. Con las hojas verdes, proceder a perforar hasta obtener 10 discos para cada prueba que vamos a realizar (en total 20 discos). 5. Retirar el émbolo de la jeringa y transferir con cuidado los discos de las hojas al cuerpo o cilindro de la jeringa. 10 discos en dos jeringas para cada tratamiento que estamos desarrollando 6. Colocamos nuevamente el émbolo empujando hasta que quede un pequeño empujar el émbolo hasta que quede un pequeño volumen de aire y discos de hojas en el cilindro. Se debe tener cuidado de no dañar los discos de hojas. 7. Con otra jeringa que nos sirva como pipeta, introducir un pequeño volumen de solución de bicarbonato de sodio (4-5 ml) tratando de suspender los discos en la solución agregada. Colocar un dedo que tape el orificio para que no se salga el contenido y girar la jeringa, así mismo generar un vacío (con el émbolo de la jeringa, retrocediéndolo) entre la solución agregada en la jeringa con los discos y tenerlo por 10 segundos 8. Retiramos el émbolo y vertimos rápidamente los discos en el vaso etiquetado como “Luz de 15 cm-Solución de CO2”. En caso los discos se queden pegados a las paredes de la jeringa, agregar solución de bicarbonato de sodio preparado al inicio del experimento hasta que caigan. 9. Repetir los pasos para los discos agregados en la “solución de control de luz”. 10. Ambos vasos deben ser colocados a 15 cm de distancia de la fuente luz, es decir la lámpara. Por 30 minutos los cuales deben ser monitoreados y anotar los datos en las Tablas 1 y 2, registrando minuto a minuto la cantidad de discos que están flotando. Resultados: Tabla 1. Medición de cantidad de discos flotantes en tratamiento “Solución control Luz ”. Minuto N° de discos flotantes 0-2 min 0 2-4 min 0 4-6 min 0 6-8 min 0 8-10 min 0 10-12 min 0 12-14 min 0 14-16 min 0 16-18 min 0 18-20 min 0 20-22 min 0 22-24 min 0 24-26 min 0 26-28 min 0 Tabla 2. Medición de cantidad de discos flotantes en tratamiento “Luz de 15 cm-solución de CO 2 ”. Análisis de los resultados: Los discos de hoja flotan debido a los muchos espacios intercelulares utilizados para el intercambio de gases. Cuando los espacios de aire están infiltrados con el jabón, la densidad aumenta, lo que hace que los discos se hundan. El bicarbonato sirve como la fuente de carbono para la fotosíntesis. Al proporcionar los 28-30 min 0 30-32 min 0 32-34 min 0 34-36 min 0 36-38 min 0 Minuto N° de discos flotantes 0-2 min 0 2-4 min 0 4-6 min 06-8 min 0 8-10 min 0 10-12 min 2 12-14 min 3 14-16 min 3 16-18 min 3 18-20 min 4 20-22 min 4 22-24 min 5 24-26 min 6 26-28 min 6 28-30 min 7 30-32 min 7 32-34 min 8 34-36 min 8 36-38 min 8 componentes necesarios para la fotosíntesis, se producirá oxígeno en la hoja. A medida que se lleva a cabo la fotosíntesis, se libera oxígeno en el interior de la hoja, lo que hace que los discos se eleven. Conclusión: Durante el proceso fotosintético se hace uso de la luz, el agua y el CO2 para, en la fase luminosa, expulsar oxígeno gaseoso. Esto se pudo corroborar en el Luz 15cm Solución CO2, ya que ,al estar en la solución de agua bicarbonato y estar en exposición de la luz, los discos de hoja empezaron a flotar. Experimento 02: Extracción de clorofila Materiales usados: ● Alcohol ● Mortero ● Espinaca ● Papel toalla y/o hoja bond ● Colador Procedimiento: - Lavar las hojas de espinacas, cortarlas en pedacitos, y colocarlas en un mortero, junto con el alcohol. -Combinarla con el alcohol y separar los residuos sólidos en un recipiente de vidrio, - Sumergir la tira de papel en un frasco con alcohol y esperar una hora. Análisis de los resultados: Nos percatamos que el color del extracto es de color verde, quiere decir que en su mayoria es clorofila. Conclusión: Mediante el experimento realizado pudimos comprobar que gracias a la solubilidad de las clorofilas en alcohol etílico, se puedan extraer con mayor facilidad debido a que la molécula de clorofila está formada por un anillo porfirínico y un extremo de fitol, que permite la fijación del pigmento a la membrana fotosintética, pero hace que la molécula sea insoluble en agua. BIBLIOGRAFÍA: Cogua, J. (2011). Curso virtual de fisiología vegetal. Bogotá, D. C.: Universidad Nacional de Colombia. Disponible en: http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000051/lecciones/cap01/06_08.htm Curtis, H. y Barnes, S. (2001). Biología. Editorial Panamericana, Pp. 961- 964. Khan Academy. Luz y pigmentos fotosintéticos. Disponible en: https://es.khanacademy.org/science/biology/photosynthesis-in-plants/the-light- dependent-reactions-of-photosynthesis/a/light-and-photosynthetic-pigments Saenz, J. (2012). Fotosíntesis, concepciones, ideas, alternativas y analogías. Tesis para optar título de Magister en Ciencias exactas Universidad Nacional de Colombia, Bogotá. SALISBURY, Frank y ROSS, Cleon. Fisiología vegetal. Editora Iberoamérica, México, 1994. 759 p. BIOTED “Biología educativa”. Ministerio de Ciencia e Innovación, Gobierno de España [https://www.bioted.es/]. Citado 2020 octubre 25. Disponible en: https: //www.bioted.es/protocolos/FOTOSINTESIS.pdf http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000051/lecciones/cap01/06_08.htm http://www.bioted.es/protocolos/FOTOSINTESIS.pdf
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