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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE QUÍMICA Comportamiento reológico en flujo estacionario y no estacionario del mucílago de la semilla de chía (Salvia hispanica) T E S I S QUE P AR A OBTE NER E L TÍTUL O DE: Q U Í M I C A D E A L I M E N T O S P R E S E N T A L AURA C RISPI N CARRI LL O MÉXICO, D.F. 2006 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. JURADO ASIGNADO Presidente Marcos Francisco Báez Fernández Vocal Maria de los Ángeles Martínez Olmedo Secretario Alberto Tecante Coronel 1er. Suplente Irma Susana Rojas Tome 2do Suplente Maria de Lourdes Osnaya Suárez Lugar donde se desarrol ló el tema Laboratorio 313. Departamento de Alimentos y Biotecnología Facultad de Química - Conjunto “E” Asesor del tema Dr. Alberto Tecante Coronel _____________________________ Sustentante Laura Crispin Carril lo _____________________________ AGRADECIMIENTOS Agradezco a la Universidad Nacional Autónoma de México y a la Facultad de Química la oportunidad invaluable de formarme como profesionista. Agradezco a la Dirección General de Asuntos de Personal Académico (DGAPA- UNAM), la beca otorgada para la realización de esta tesis, así como mi participación como estudiante de licenciatura en el proyecto IN211602 “La semilla de chía (Salvia hispánica) como fuente de aceite, polisacárido y proteína: estudio para su valoración y aprovechamiento” Agradezco a la I. A. Mariana Ramírez Gilly por el apoyo técnico en las pruebas de reología. Mi más sincero agradecimiento al Dr. Alberto Tecante Coronel por brindarme su confianza, disponibilidad, tiempo y por los conocimientos que logro transmitirme en todo este tiempo. Finalmente de forma especial agradezco a los miembros del jurado: Marcos Francisco Báez Fernández Maria de los Ángeles Martínez Olmedo Irma Susana Rojas Tome Maria de Lourdes Osnaya Suárez Por sus valiosas sugerencias durante la revisión de este trabajo, ya que todas contribuyeron a su mejoramiento. A mis padres: Ofel ia Carri l lo Zumaya Por darme siempre su apoyo incondicional, por enseñarme a trabajar, luchar y nunca darme por vencida aun cuando las cosas no se den siempre como uno espera. Ezequiel Crispin Cervantes Por siempre estar comigo apoyandome, pero sobre todo por todas las lecciones importantes que me ha dado aun sin saberlo, por tu gran fuerza de voluntad pero sobre todo por demostrarme que nunca es tarde para comenzar de nuevo, que no importan los errores que se hayan cometido, no importa la edad, siempre estamos a tiempo de generar un futuro distinto. Pero sobre todo por siempre confiar en mí y estar siempre a mi lado, sin importar nada mil gracias a ambos, LOS AMO. Marco Antonio Crispin Carril lo José Luis Crispin Carri l lo Por que aun en la ausencia y en la distancia siempre están y estarán en mi corazón. Cecil ia Crispin Carril lo, Juan Carlos Álvarez Mena Ana Itzél , Juan Carlos Josimar y Amed Gersón Jesús Álvarez Crispin Por ser uno de los principales motores de mi vida, por todos esos fines de semana en su compañía y por saber que siempre no importa la hora o el día e inclusive la distancia siempre estaremos juntos… los quiero mucho. A Clemente Serafín que en todo momento ha estado conmigo y con mi familia y nunca dudo en tendernos su mano en los momentos más difíciles, gracias por todo tu apoyo ya que parte de lo que soy te lo debo a tí , te quiero mucho. Guadalupe Sánchez Chavarria y Francisco Reyes Monroy, por todo su apoyo a lo largo de este camino y a ti Fernando Reyes Sánchez por estar siempre a mi lado en los buenos pero sobre todo en los malos momentos, por ser una de las razones mas importantes de mi vida … TE AMO. A mis amigos los SADAPIS 97 (A TODOS) por todo lo que compartimos a lo largo de nuestro paso por la facultad y aun fuera ella, a Cecy, Faby, Mire, Raúl por todos los momentos buenos y malos que compartimos pero sobre todo por su incondicional amistad… mil gracias. Pedí fuerza. . . Y d ios me d io di f icultades Para hacerme fuerte. Ped í sabiduría. . . Y dios me dio problemas para Solucionar. Pedí prosper idad.. . Y dios me dio cerebro y Fuerza para trabajar . Ped í coraje. . . Y dios me dio pel igro para Vencer. Pedí amor. . . Y dios me dio gente con Problemas a quien ayudar. Pedí favores. . . Y dios me dio oportunidades. No recibí nada de lo que Quer ía. . . Recibí todo lo que necesitaba. ÍNDICE ÍNDICE DE CUADROS Y FIGURAS II NOMENCLATURA VI RESUMEN VII INTRODUCCIÓN 1 CAPITULO I GENERALIDADES DE LA SEMILLA DE CHÍA 1.1 Origen y características de la semilla de chía 2 1.2 Un cultivo viejo y nuevo a la vez 3 1.3 Composición de la semilla 4 1.4 Usos ancestrales y actuales 5 1.5 Conceptos básicos de reología 7 1.5.1 Comportamiento de flujo 7 1.5.2 Comportamiento dinámico 9 1.6 Hidrocoloides 11 1.6.1 Xantana 13 1.6.2 Guar 14 1.7 Hipótesis y objetivos 16 CAPITULO II METODOLOGÍA Y DESARROLLO EXPERIMENTAL 2.1 Diagrama general de investigación 17 2.2 Materiales 18 2.3 Métodos 18 CAPITULO III RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1 Propiedades de flujo 21 3.2 Propiedades viscoelásticas 42 3.3 Comparación con goma guar y xantana 69 CONCLUSIONES 76 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 78 ANEXO A Zonas de viscoelasticidad l ineal 81 ANEXO B Análisis estadístico Efecto del pH 83 ANEXO C Análisis de varianza Efecto de la adición de sales. 89 ANEXO D Prueba de rango múltiple de Duncan 92 ÍNDICE DE CUADROS Y FIGURAS CUADROS Págs. 3.1 Parámetros para e l modelo de Ley de Potencia, modelo Cross y modelo Carreau – Yasuda correspondientes a las curvas de viscosidad para las soluciones acuosas de mucí lago de chía a 25 °C y pH 6. 24 B.1 Prueba t de Student para soluciones s in adic ión de sales. 84 B.2 Prueba t de Student para soluciones con adición de 50 mM NaCl 85 B.3 Prueba t de Student para soluciones con adición de 50 mM KCl 86 B.4 Prueba t de Student para soluciones con adición de 10 mM CaCl2 87 B.5 Prueba t de Student para soluciones con adición de 50 mM MgCl 2 88 C.1 Anál i si s de Varianza para las dist intas sa les estudiadas 90 FIGURAS Págs. 1.1 Semi l la de chía. 2 1.2 Importancia re l ig iosa y económica de la semi l la de chía para los pobladores de Tenocht i t lán. 3 1.3 Flujo entre placas para le las. 7 1.4 Tipos de comportamiento a l f lujo. 8 1.5 Movimiento osci lator io . 9 1.6 Respuesta del esfuerzo de un sól ido ideal , un l íquido newtoniano y un f luido viscoelást i co. 10 1.7 Tipos de asociación de los hidrocoloides. 12 2.1 Diagrama general de la invest igación. 17 3.1 Curvas de viscosidad de soluciones acuosas de mucí lago de chía a di ferentes concentraciones a pH 6 y 25 °C. 22 3.2 Corre lación de los modelos reológicos con la vi scosidad de soluciones acuosas de mucí lago de chía a pH 6 y 25 °C. 23 3.3 Viscosidad aparente [η] a velocidad de cizal la constante de 194 s- 1 y 390 s-1 en función de la concentración [%] de mucí lago de chía a pH 6. 27 3.4 Viscosidad de soluciones acuosas demucí lago de chía con adición de 50 mM de sa les de iones monovalentes (NaCl , KCl) y 10 mM de sales de iones di va lentes (MgCl2 , CaCl2) a pH 6. 28 3.5 Efecto de la adición de sa les de iones monovalentes, KCl y NaCl , sobre la viscosidad de soluciones acuosas con di ferentes concentraciones de mucí lago de chía a pH 6 y 25 °C. 30 3.6 Efecto de la adición de sales diva lentes sobre la viscosidad de soluciones acuosas de di ferentes concentraciones de mucí lago de chía a pH 6 y 25 °C. 31 3.7 Efecto de la adición de 50 mM de sales monovalentes (NaCl , KCl ) y 10 mM de sales divalentes (CaCl2 y MgCl2) de soluciones con 0.2% de mucí lago de chía a pH 6 y 25 °C. 32 3.8 Viscosidad aparente (η) a velocidad de deformación de 390 s-1 en función de la concentración de mucí lago de chía a pH 6 sin y con adición de sa les mono y diva lentes. 34 3.9 Efecto del pH sobre la vi scosidad de soluciones con di ferente concentración de mucí lago de chía s in adición de sa les a pH 6 y a pH 3. 37 3.10 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con di ferente concentración de mucí lago de chía en presencia de 50 mM de NaCl a pH 6 y a pH 3. 38 3.11 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con di ferente concentración de mucí lago de chía en presencia de 50 mM de KCl a pH 6 y a pH 3. 39 3.12 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con di ferente concentración de mucí lago de chía en presencia de 10 mM de CaCl 2 a pH 6 y pH 3. 40 3.13 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con di ferente concentración de mucí lago de chía en presencia de 10 mM de MgCl2 a pH 6 y pH 3. 41 3.14 Espectros dinámicos de mucí lago de chía en solución acuosa a pH 6 y 25 °C. 43 3.15 Tangente del ángulo de desfase de mucí lago de chía en solución acuosa a di ferentes concentraciones a 25 °C y pH 6. 44 3.16 Espectros dinámicos de disoluciones de mucí lago de chía en solución acuosa con adición de 50 mM de KCl , 50 mM NaCl ,10 mM CaCl2 y 10 mM MgCl 2 a 25 °C y pH 6. 45 3.17 Tangente del ángulo de desfase de soluciones de mucí lago de chía con adición de KCl (50 mM), NaCl (50 mM), CaCl 2 (10 mM) y MgCl2 (10 mM) a 25 °C y pH 6. 47 3.18 Módulo de almacenamiento (G’) a ( = 15 rad/s para distintas concentraciones [%] de mucílago de chía a pH 6 con y sin adición de sales. 48 3.19 Viscosidad dinámica ((’) en función de la frecuencia (() a pH 6 con y sin adición de sales monovalentes y divalentes. 49 3.20 Espectros dinámicos de soluciones de mucílago de chía sin sal y con adición de KCl (50 mM), NaCl (50 mM) a 25 °C y pH 6. 51 3.21 Tangente de delta de soluciones con diferentes concentraciones de mucílago de chía sin adición de sal y con adición de KCl (50 mM), NaCl (50 mM) a pH 6 y 25 °C. 52 3.22 Espectros dinámicos de soluciones de mucílago de chía sin adición de sal, con adición de CaCl2 (10 mM) y MgCl2 (10 mM, triángulos) a 25 °C y pH 6. 54 3.23 Tangente de del ta de soluciones de mucí lago de chía s in adición de sa l con adición de CaCl2 (10mM) y MgCl2 (10 mM) a pH 6 y 25 °C. 55 3.24 Espectros dinámicos de soluciones de mucí lago de chía con adición de KCl (50 mM), NaCl (50 mM), CaCl 2 (10 mM) y MgCl2 (10 mM) a 25 °C y pH 6. 56 3.25 Tangente de del ta de soluciones de mucí lago de chía con adición de KCl (50 mM), NaCl (50 mM), CaCl 2 (10 mM) y MgCl2 (10 mM) a 25 °C y pH 6. 56 3.26 Espectro dinámicos de disoluciones de mucí lago de chía en solución acuosa s in adición de sa les a pH 6 y pH 3 a 25 °C. 59 3.27 Efecto del pH sobre la tangente δ de soluciones de mucí lago de chía s in adición de sa les a 25 °C. 60 3.28 Espectros dinámicos de soluciones de mucí lago de chía con adición de NaCl (50 mM) a pH 6 y pH 3 a 25 °C. 61 3.29 Efecto del pH sobre la tangente del ta de soluciones de mucí lago de chía con adición de NaCl (50 mM) a 25 °C, pH 6 y pH 3. 62 3.30 Espectros dinámicos de soluciones de mucí lago de chía con adición de KCl (50 mM) a pH 6 y pH 3 a 25 °C, 63 3.31 Tangente del ta de disoluciones de mucí lago de chía en solución acuosa con adición de 50 mM de KCl a 25 °C pH 6 y pH 3. 64 3.32 Espectros dinámicos de soluciones de mucí lago de chía con adición de MgCl2 (10 mM) a pH 6 y pH 3 y 25 °C. 65 3.33 Tangente del ta de disoluciones de mucí lago de chía en solución 66 acuosa con adición de 10 mM MgCl2 a 25 °C, pH 6 y pH 3. 3.34 Espectro dinámicos de soluciones de mucí lago de chía con adición de CaCl2 (10 mM) pH 6 y pH 3 a 25 °C, 67 3.35 Tangente de del ta de soluciones de mucí lago de chía con adición de CaCl2 (10 mM), pH 6 y pH 3 a 25 °C. 68 3.36 Curvas de viscosidad para soluciones acuosas de guar y mucí lago de chía con 0.1% y 0.5% de concentración, pH 6 y 25 °C. 71 3.37 Espectros dinámicos de soluciones acuosas de guar y mucí lago de chía con 0.1 % y 0.5% (m/v), pH 6 y 25 °C. 72 3.38 Tangente del ta contra frecuencia para soluciones acuosas de mucí lago de chía y guar a pH 6 y 25 °C. 73 3.39 Curva de viscosidad para solución acuosa de xantana con NaCl (50 mM) y mucí lago de chía con NaCl (50 mM) con 0.5% de concentración, pH 6 y 25 °C. 74 3.40 Espectros dinámicos de soluciones acuosas de xantana con NaCl (50 mM) y mucí lago de chía con NaCl (50 mM) con 0.5 % de concentración, pH 6 y 25 °C. 74 3.41 Tangente del ta contra la frecuencia para soluciones acuosas de mucí lago de chía y xantana con 50 mM de NaCl a pH 6 y 25 °C. 75 A-1 Barr ido de deformación Solución acuosa de mucí lago de chía 0.1% (m/v), pH 6 a 25 °C. 81 A-2 Barr ido de deformación Solución acuosa de mucí lago de chía 0.5% (m/v), pH 6 a 25 °C. 82 I RESUMEN En el presente trabajo se estudió el comportamiento de flujo mediante pruebas en régimen de cizalla estacionaria y el comportamiento viscoelástico en un régimen de cizalla oscilatoria de soluciones acuosas de mucílago de chía a 25 °C. Los comportamientos fueron expresados a través de la variación de la viscosidad con la velocidad de cizalla para el comportamiento del flujo y mediante las funciones materiales G’ y G’’ en función de ω para el comportamiento viscoelástico. Se determinó el efecto de la concentración (0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.5% y 0.9% (m/v) ), del pH (3 y 6), de la presencia de iones monovalentes NaCl, KCl, y divalentes CaCl2 y MgCl2 en una concentración de 50 mM y 10 mM, respectivamente, sobre el comportamiento reológico de las soluciones acuosas de mucílago de chía. Los resultados muestran que el mucílago de chía presenta un comportamiento no newtoniano fluidificado por cizalla que fue correlacionado mediante los modelos de ley de potencia, Cross y Carreau-Yasuda, siendo este último el que mejor resultados produjo. Observando un aumento de la viscosidad aparente de las soluciones con el aumento de la concentración de mucílago de chía, así como una disminución de esta misma viscosidad debida a la adición de las distintas sales empleadas agregadas. De igual forma se detecta que al variar el pH de 6 a 3 la viscosidad aparente de las soluciones se ve afectada significativamente aun en las soluciones con adición de sales y es más pronunciado para las soluciones con sales monovalentes empleadas (KCl, NaCl). En cuanto al comportamiento viscoelástico es posible señalar que al igual que en el régimen estacionario al aumentar la concentración de mucílago aumentaron los módulos (G’ y G’’) y disminuyeron al adicionar las sales. Se observa un efecto en las propiedades viscoelásticas al variar el pH en las soluciones sin adición de sales generando soluciones más elasticas, mientras que para las sales monovalentes no existe efecto, para las divalentes el cambio de pH genera soluciones ligeramente más viscosas, obteniendose un comportamientotipo líquido en todos los casos. En la comparación experimental realizada de las propiedades de flujo del mucílago con la presentada con la goma guar y xantana bajo las mismas condiciones y concentraciones muestran que el mucílago de chía tiene propiedades espesantes similares a la de guar, pero inferiores a la de xantana. En cuanto al comportamiento viscoelástico del mucílago la comparación experimental muestra que este forma soluciones de mayor viscoelasticidad que la guar, pero menos estructuradas que las de la xantana. Todos estos resultados permiten afirmar que el mucílago de chía puede ser usado como espesante pero no como agente formador de geles. INTRODUCCIÓN En la época precolombina, la chía era uno de los alimentos básicos de las civilizaciones de América Central, después del maíz, el fríjol y antes que el amaranto. Tenochtitlán, la capital del Imperio Azteca, recibía entre 5000 y 15000 toneladas por año como tributo de los pueblos conquistados (Rose – Hulman Institute of Technology, 2002). La semilla de chía fue utilizada no sólo como alimento sino también como ofrenda a los dioses aztecas; su uso en las ceremonias religiosas paganas provocó que los conquistadores españoles trataran de eliminarla y reemplazarla por especies traídas del Viejo Mundo. La semilla de chía es una excelente fuente de ácidos grasos omega-3 y actualmente se usa como suplemento dietético para personas, y en dietas de aves para producción de huevos y carne (Ayerza y Coates, 2001). A pesar de que se reconoce que la semilla es un “espesante natural”, es decir, un agente que aumenta la viscosidad del líquido al que se añade, sea este agua o jugo de fruta, las propiedades reológicas resultantes no han sido investigadas, por lo que no existe información acerca de esta propiedad del polisacárido presente como mucílago alrededor de la semilla cuando esta se pone en contacto con el líquido (Lin et al., 1994). Ya que el mucílago es el que imparte las características reológicas al líquido en el que se encuentra disuelto es importante caracterizar sus propiedades espesantes y sus propiedades viscoelásticas. Existe un solo reporte (Lin et al., 1994) en el cual se ha propuesto la estructura primaria del mucopolisacárido así como la técnica de extracción del mismo. Sin embargo, no existen reportes sobre sus propiedades reológicas que permitan explorar sus posibles aplicaciones en alimentos. CAPITULO I GENERALIDADES DE LA SEMILLA DE CHÍA 1.1 ORIGEN Y CARACTERISTICAS El término chía se refiere a un pequeño grupo de plantas anuales pertenecientes a la familia Lameaceae, nativas del suroeste de California, Texas, México y América Central (Hortiplex Plant Database, 2002; Plant for a future Database, 2002; Plantatlas 2002; Global Compendium of Weeds, 2002). Son características generales de la especie Hispánica poseer plantas anuales, con altura de un metro, con periodo de florecimiento en julio y agosto que crecen en suelos arcillosos o arenosos e incluso en zonas áridas, no toleran las heladas, ni crecen en la sombra (Plants for a future Database, 2002; Global Compendium of Weeds, 2002). La chía (Salvia hispánica L.) es una planta anual de verano que se extiende desde el oeste central de México hasta el norte de Guatemala (Rose – Hulman Institute of Technology, 2002). Las formas silvestres se dispersan a través de las sierra Madre Occidental de Sonora y de Chihuahua. La Salvia hispánica cuenta con varios nombres comunes como salvia española, artemisa española, chía mexicana, chía negra o simplemente chía (Figura 1.1) y crece en bosques de juníperos, encino, pino, pino – encino a una altitud aproximada de 1900 metros sobre el nivel del mar (SEMARNAT, 2002). Su cultivo está distribuido principalmente en los estados de Jalisco (Cuautitlán, Ahualulco de Mercado, Tolimán) y en Michoacán (Tzintzuntzán, Uruapan, Zacapu, Erongaricuaro, Huariqueo, Morelia, Pátzcuaro y La Piedad) (SEMARNAT, 2002). La semilla de chía es pequeña, de apenas unos milímetros de longitud y tiene una forma oval ligeramente aplanada, puede ser obscura y moteada aunque ocasionalmente puede ser blanca o albina. Figura 1.1 Semilla de chía Esta planta es resistente a las plagas, pero ocasionalmente puede ser atacada por plagas del suelo como la gallina ciega, aunque no es recomendable utilizar ningún agroquímico para combatirla, pues no serían semillas adecuadas para el consumo humano. Es una especie nativa de México, ampliamente cultivada e introducida a otros países de América. El aprovechamiento de esta especie es generalmente a nivel doméstico por lo que su comercialización se realiza principalmente en mercados locales. 1.2 UN CULTIVO NUEVO Y ANTIGUO A LA VEZ La chía tiene una larga historia como alimento humano. Hay evidencia científica que muestra que la semilla de chía comenzó a usarse en la alimentación humana unos 3500 años antes de Cristo y se convirtió en un cultivo básico en el centro de México entre 1500 y 900 años antes de Cristo (Rose – Hulman Institute of Technology, 2002). La semilla de chía se usó como alimento mezclada con otros cultivos, como bebida mezclada con agua, molida en harina, incluida en medicinas y prensada por su aceite utilizado luego como base para pinturas para el rostro y el cuerpo (Eatchia, 2002). Los aztecas recibían semilla de chía como tributo anual de los pueblos conquistados y la ofrecían a los dioses como parte de las ofrendas en las ceremonias religiosas (Eatchia, 2002). La ciudad de Tenochtitlán recibía cada año como tributo de los pueblos conquistados, un mínimo de 6360 toneladas de maíz, 4410 toneladas de frijoles, 4410 toneladas de chía y 3780 toneladas de amaranto (Figura 1.2). Figura 1.2 Importancia religiosa y económica de la semilla de chía para los pobladores de Tenochtitlán (Encarta,2003) El amaranto, el fríjol, la chía y el maíz comprendían los componentes principales de las dietas de las civilizaciones aztecas y mayas (Rose – Hulman Institute of Technology, 2002), sin embargo cuando Cristóbal Colón llegó al Nuevo Mundo, el cultivo de la chía decreció ya que para reprimir a los nativos, se suprimieron sus tradiciones y se destruyó la mayoría de su producción agrícola intensiva y el sistema de comercialización existente. Muchos cultivos que mantuvieron una posición preponderante en las dietas de la América pre-colombina, fueron desvanecidos por los españoles debido a la estrecha asociación con la religión y fueron reemplazadas por otras especies extranjeras (trigo, cebada, zanahorias, entre otros) que tenían una gran demanda entre los conquistadores. Hoy, en su lugar nativo, la especie está limitada a unas pocas hectáreas. Es más, hay muy pocas posibilidades de incrementar el área sembrada debido a factores sociales y políticos que han concluido en la subdivisión de la tierra en pequeñas granjas, y que han impuesto el cultivo del maíz, básicamente para preparar la popular tortilla (Eatchia, 2002). Actualmente se cultiva chía en diferentes países en forma regular como Argentina y Perú, (Eatchia, 2002). 1.3 COMPOSICIÓN DE LA SEMILLA La ciencia actual explica por qué las antiguas civilizaciones consideraban a la chía un componente básico de su dieta. El valor nutricio de la semilla de chía, le confiere un gran potencial para usarla dentro de los mercados alimenticios, es considerada suplemento dietético por la FDA; pero además completa las exigentes regulaciones de contenido de nutrimentos alimenticios establecidas por esta organización para ser un “alimento saludable” (FDA, 1999). Aunque la composición de la semilla de chía es variable y depende de la región donde se cultiva (Ayerza, 1995), se ha reportado que la semilla de chía posee del 19-23% de proteína. Porcentaje comparable favorablemente con otros granos como el trigo (14%), maíz (14%), arroz (8.5%) avena (15.3%), cebada(9.2%) y amaranto (14.8%) (Coates y Ayerza, 2001). En cuanto al contenido de aceite este puede variar entre un 32-39%, además posee el porcentaje más alto de ácidos grasos poli - insaturados, α -linolénico y linoleico de todos los cultivos, el porcentaje natural conocido más elevado de ácido α - linolénico (60-63%) si se considera que el cártamo y el girasol no tienen ácido graso α - linolénico, ácido graso Indispensable, con importancia significativa en gran cantidad de compuestos industriales tales como barnices, pinturas, cosméticos, entre otros. El contenido de hidratos de carbono se encuentra alrededor del 41% y 5.2% de cenizas. Una vez separado el aceite de la semilla de chía, el material remanente contiene un 50 - 60% de fibra, la semilla posee un 5% de fibra soluble que aparece como mucílago al colocarla en agua y es útil como fibra dietética. Por lo tanto, la chía no sólo es importante por su valor nutricio, sino también por su “naturaleza espesante”, importante dentro de la industria alimenticia y otras aplicaciones. La semilla de chía es una fuente rica de calcio, fósforo, magnesio, manganeso, cobre, potasio y molibdeno y una fuente buena de niacina, y zinc, y fuente de ácidos grasos omega-3 así como de vitamina B1 (tiamina) (Ayerza, 2003). Dado que la oxidación en la chía es mínima a nula dada la importante cantidad de antioxidantes que contiene, mantiene un gran potencial dentro de la industria alimenticia, comparada con otras fuentes de ácido graso α - linolénico como el lino, que muestra una descomposición rápida debido a la ausencia de antioxidantes. El lino también contiene cianoglucósidos y compuestos antagónicos a la vitamina B6 no presentes en la semilla de chía. También la biomasa de la chía tiene aceites esenciales en abundancia con una importancia comercial significativa en las industrias de sabores y fragancias. 1.4 USOS ANCESTRALES Y ACTUALES La forma mas común y antigua de consumo de esta semilla en los descendientes aztecas y mayas consiste en la preparación de una bebida muy popular llamada “Chía fresca”. Hoy, la semilla de chía mezclada con limón hace una bebida refrescante consumida no sólo en México, sino también en Guatemala, Nicaragua y el sudoeste de los Estados Unidos (Eatchia, 2002). El alto contenido proteínico de la semilla de chía hace útil la semilla como alimento para ganado e inclusive en algunos países se vende como alimento para animales con el producto denominado chía Pet TM. Existen varias aplicaciones potenciales industriales para la chía. Debido a que como ya se mencionó contiene hasta un 60% de fibra y de ella el 5% aproximadamente representa la fracción mucilaginosa, hace que la chía presente una “naturaleza espesante”, muy apreciada dentro de la industria de la cosmetologíca (Bushway y Belya, 1981). Otra forma de encontrar a la chía es en figurillas de arcilla en forma de animales que son cubiertos con la semilla que al agregar agua brota y cubre el cuerpo de la figurilla simulando el pelo de las figuritas. (Coates y Ayerza, 1996). El aceite puede ser empleado como sustituto del aceite de linaza y también como conservador en las pinturas para aplicación en lonas, cerámica y madera según lo encontrado en trabajo mexicano de la laca (Ayerza y Coates, 2002; Taga et al., 1984). Los aceites de la hoja de chía pueden ser útiles en condimentos y fragancias y, posiblemente como pesticidas, porque muchos insectos parecen evitar a la planta (Pascual – Villalobos et al., 1997). Una actividad importante de la semilla de chía es la antioxidante ya que una vez que éstas se han prensado y extraído el aceite, han demostrado poseer una fuerte actividad antioxidante. Los antioxidantes más importantes son el ácido clorogénico, el ácido cafeico y los flavonoles (Taga y col, 1984); importantes ya que estudios epidemiológicos indican que un alto nivel de consumo de alimentos y bebidas ricas en flavonoides pueden proteger contra las enfermedades cardiovasculares, embolia, cáncer de pulmón y cáncer de estomago (Ayerza y Coates, 2001). Otra aplicación actual interesante de la semilla de chía es la obtención de alimentos ricos en ácidos grasos Ω-3, los huevos provenientes de gallinas alimentadas con chía poseen una relación entre el ácido graso α- linolénico y el ácido graso docosahexanoico (DHA) similar a la que se encuentra en la leche humana. Cuando a la dieta se le agregan grandes cantidades de chía, la elongación e instauración del ácido α- linolénico se retarda y el contenido del ácido graso docosahexanoico (DHA) (un ácido graso muy inestable) permanece constante. Este comportamiento metabólico junto con la potente actividad antioxidante de la chía a través de los compuestos flavonoides y ácido cinámico, permiten a las gallinas producir huevos con una mayor estabilidad que la de los huevos con alto contenido de DHA (Ayerza y Coates , 2001). Cuando se utiliza como alimento animal se pueden obtener alimentos enriquecidos con omega-3 como pollo, jamón, leche, quesos, etc. Utilizada como una fuente de ácidos grasos omega-3, no requiere el uso de antioxidantes artificiales como las vitaminas sintéticas. 1.5 CONCEPTOS BÁSICOS DE REOLOGÍA La reología se define como la ciencia que estudia la deformación y el flujo de la materia. Es una rama de la física relacionada con la mecánica de la deformación de los cuerpos. La utilización de la reología en el análisis y caracterización del comportamiento de productos alimenticios cuando se les aplica una fuerza es relativamente reciente; para alimentos líquidos se inicia en 1960 y los primeros estudios sobre reología de sólidos son posteriores a 1970. Algunas de las principales causas son la variedad y complejidad en la composición y estructura de los alimentos, la dificultad en adaptar y utilizar ecuaciones matemáticas para explicar diferentes comportamientos reológicos. La Reología moderna, además de los comportamientos elástico y viscoso, estudia también sistemas complejos que presentan simultáneamente propiedades elásticas y viscosas, es decir, sustancias viscoelásticas. Un estudio reológico bien fundamentado es aquel que permite obtener funciones materiales de flujo estacionario y no estacionario a partir de una relación bien definida entre el esfuerzo y la deformación o velocidad de deformación. No existen hasta ahora estudios reológicos de soluciones de mucílago de la semilla de la chía sobre propiedades de flujo (flujo estacionario) y propiedades viscoelásticas dinámicas (régimen armónico). 1.5.1 COMPORTAMIENTO DE FLUJO EN ESTADO ESTACIONARIO Los fluidos pueden ser estudiados sujetándolos a un corte continuo a una velocidad constante. Lo anterior puede ser realizado usando dos platos paralelos con un fluido en el espacio entre ellos. El plato inferior esta fijo y el plato superior se mueve a una velocidad constante (u) la cual puede ser considerada como un incremento en el cambio de posición dividida por un pequeño periodo de tiempo, δL/δt. Se requiere una fuerza por unidad de área en el plato para que el movimiento resulte en un esfuerzo de cizalla en el plato superior (Figura 1.3). Figura 1.3 Flujo de cizalla o corte entre placas paralelas. El flujo descrito es en cizalla simple estacionaria para el cual la velocidad de cizalla queda definida como la velocidad de cambio de la deformación. En cizalla estacionaria existen tres funciones materiales dependientes de la velocidad de cizalla o corte, colectivamente llamadas funciones viscométricas, que son necesarias para establecer completamente el estado de esfuerzo de un fluido y son: - Viscosidad η = f ( • γ ) =σ/ • γ - El primero y segundo coeficiente de esfuerzos normales, Ψ1( • γ ) y Ψ2( • γ ). El primer coeficiente de esfuerzo normal Ψ1( • γ ) es fácilmente proporcionado por medidas en una geometría de cono platomientras que el segundo coeficiente de esfuerzos normales Ψ2( • γ ) es difícil de medir y consecuentemente raramente encontrado en la literatura. En general se pueden observar dos tipos de comportamiento de flujo (Figura 1.4). - Los fluidos newtonianos son aquellos cuya relación esfuerzo de corte contra gradiente de deformación es lineal y su viscosidad es constante a una temperatura y presión dadas. - Los fluidos no newtonianos son aquellos cuya relación esfuerzo de corte y gradiente de deformación no es lineal. Figura 1.4 Tipos de comportamiento al flujo. 1.5.2 COMPORTAMIENTO DINÁMICO Las pruebas dinámicas son el método más común para estudiar el comportamiento viscoelástico de los alimentos y son útiles en una variedad de aplicaciones incluyendo la evaluación de la dureza de geles, examen de la gelatinización de almidones, observación de la coagulación de las proteínas o desnaturalización, desarrollo de textura en productos cárnicos y de panadería, pruebas de vida media, entre otras. En los métodos dinámicos el material se somete a un esfuerzo o una deformación oscilatoria sinusoidal a una frecuencia ω (rad/s) y una amplitud de onda determinada que son transmitidos a través del material, la magnitud y el tiempo de movimiento de la transmisión depende de la naturaleza de la sustancia estudiada, generalmente se emplean geometría de platos paralelos, cono-plato o cilindros concéntricos fijos (Figura 1.5). Figura 1.5 Movimiento oscilatorio Estas son llamadas pruebas oscilatorias de baja amplitud, debido a que se emplean pequeñas deformaciones con el fin de mantener un comportamiento viscoelástico lineal que se observa cuando la deformación que sufren los materiales es suficientemente pequeña para que éstos no modifiquen significativamente su estructura y proporcionan información a tiempos cortos de observación (0.1-100 s). Las dos variables que se controlan en este tipo de mediciones son la frecuencia (ω) y la máxima amplitud de la deformación (γ0) y las respuestas que se miden son el esfuerzo sinusoidal (σ), el cual es medido y correlacionado con la deformación resultante, la viscosidad y propiedades elásticas en la muestra son simultáneamente determinadas por la mayoría de los reómetros. Este experimento también se realizar de manera inversa, donde se aplica un esfuerzo sinusoidal y se mide la deformación. En cada caso, las funciones materiales medidas son las mismas: el módulo de almacenamiento (G’) y el módulo de pérdida (G’’). El esfuerzo de cizalla producido por la deformación sinusoidal que puede ser escrita como: σ = G’ γ + (G’’ /ω) γ (1.1) Ambos módulos son funciones de la frecuencia y pueden ser expresados en términos del cociente entre la amplitud en fase y fuera de fase: G’ = [σ0 / γ0] cos (δ) y G’’ = [σ0 / γ0] sen (δ) (1.2) Para un sólido perfectamente elástico, toda la energía es almacenada, G’’ es cero y el esfuerzo y la deformación están en fase. En contraste, para un líquido con propiedades no elásticas toda la energía es disipada en forma de calor, G’ vale cero y el esfuerzo y la deformación se encuentran fuera de fase exactamente 90° (Figura 1.6). Figura 1.6 Respuesta del esfuerzo de un sólido ideal, un líquido newtoniano y un fluido viscoelástico Otra función importante empleada para describir el comportamiento viscoelástico es la tangente de la fase de desplazamiento (llamada tangente delta), la cual es también una función de la frecuencia: tan (δ) = G’’/ G’ (1.3) Esta cantidad adimensional es una medida de la relación de la energía pérdida y la energía almacenada en un ciclo de deformación, es decir, del predominio del carácter elástico sobre el carácter viscoso del material. ,:;o;~;,~;,lr-· ";·;:;~;·~':-:';·:'~·,GJlr-· J.:.::.I ~' , L 1.6 HIDROCOLOIDES Del gran número de polisacáridos presentes en los alimentos, todos ellos realizan alguna función basada en su estructura molecular, tamaño y fuerzas moleculares secundarias, que dan lugar principalmente a la formación de puentes de hidrógeno, confiriendo además a los alimentos propiedades, como son dureza, tersura, compacidad, capacidad espesante, viscosidad, adhesividad, capacidad de formar geles y buena palatabilidad, adicionalmente, su alto contenido en fibra ayuda a la movilidad intestinal. En principio, los polisacáridos deberían ser solubles en agua ya que poseen cadena de unidades glicosídicas compuestas por hexosas y pentosas. Cada una de estas unidades posee varios lugares capaces de formar puentes de hidrógeno; así en un glucano hay cinco oxígenos por unidad que tienen esa capacidad ya que cada oxígeno o hidrógeno posee esa capacidad de unirse a una molécula de agua y contribuir así a la solubilidad de la molécula entera. Las moléculas ramificadas no se acoplan bien entre si, de modo que no forman zonas de unión del suficiente tamaño y fuerza como para formar geles dando lugar a soluciones viscosas estables. Lo mismo es válido para moléculas que poseen grupos cargados, como son aquellas que contienen grupos carboxílicos, las cargas negativas provocan la aparición de fuerzas de repulsión de Coulomb, de tal manera que las cadenas no se aproximan unas a otras y no forman por lo tanto zonas de unión. Todos los polisacáridos solubles producen soluciones viscosas, a causa de su gran tamaño molecular [Fennema, 1993]. Las gomas hidrosolubles o hidrocoloides, son macromoléculas que se disuelven o dispersan fácilmente en el agua para producir un aumento muy grande de la viscosidad y en ciertos casos, un efecto gelificante y se utilizan generalmente a concentraciones del 1% o inferiores ya que muchas presentan una capacidad limitada de dispersión y la funcionalidad deseada se logra a estas concentraciones. Según su origen, se distinguen: • Las gomas de origen vegetal, esencialmente de naturaleza glucídica. • Las gomas de origen animal de naturaleza proteica (caseínatos y gelatina). El interés en los hidrocoloides está basado en su comportamiento reológico, por ejemplo, la viscosidad, la formación de geles y sus efectos estabilizantes. Estas propiedades pueden obtenerse solo después de alcanzar la disolución completa de las moléculas (Figura 1.7). El reordenamiento de estas está relacionado con varios parámetros: � El peso molecular de la molécula. � El tamaño de la molécula. � La presencia o no de grupos funcionales en la molécula. � La temperatura del medio. � Las interacciones con otros ingredientes en los medios, tales como otros hidrocoloides y cationes. Podemos decir que todos los hidrocoloides poseen la propiedad de aumentar considerablemente la viscosidad del medio acuoso a bajas concentraciones. Este poder espesante varía mucho de una goma a otra; es muy elevada para la goma xantana, las carrageninas, los derivados de la celulosa y las galactomananos, pero esta más limitado para las pectinas, la goma arábiga y los almidones. Figura 1.7 Tipos de asociación de los hidrocoloides. _ &1_ fi" .. _ E~p.U"'I.nlo M.N ~"'" ....... "'=O~"" ...", .. ",""",_tio",",' >'-'",.'0 ..,,~"" ...... ~ ",,., '" ""' "'''''' Funciones Los hidrocoloides están destinados a cumplir diversas funciones como agentes espesantes y gelificantes; modificadores de cristalización del hielo, agentes de suspensión y de estabilización de las emulsiones, de espumas, entre otros. Estas últimas funciones suelen reunirse, frecuentemente, bajo la denominación genérica de “estabilizantes”. Productos espesantes Son las gomas no gelificantes, así como ciertos almidones modificados, los galactomananos, el l-carragenano, el alginato de Na+ (en ausencia de Ca2+), o la goma xantana los que se emplean como espesantes. Se usan para la fabricación de salsas y condimentos diversos, cremas pasteleras, productos instantáneos, entre otros. Los métodos reológicos permiten, esencialmente, apreciar el poder espesantede los hidrocoloides. En efecto, se ha establecido que la sensación de consistencia percibida por el consumidor, depende enormemente de las propiedades de fluidez del producto. 1.6.1 XANTANA La Xantana fue el segundo polisacárido microbiano comercializado después de la dextrana, es un exopolisacárido producido por fermentación aeróbico de Xanthomonas camprestris, la estructura primaria consiste de un pentasacárido cuya cadena principal son dos β- D- glucopiranosas unidas a través de enlaces (1-4) en donde la segunda unidad glucosídica posee en la posición O-3 una ramificación constituida de un ácido D- glucorónico unido entre dos D-manosas. La xantana se disuelve fácilmente en agua fría o caliente generando soluciones altamente viscosas a concentraciones bajas de polisacárido, propiedad que favorece las cualidades de estabilizante en algunos sistemas alimenticios, reológicamente se ha definido como fluidificante a la cizalla (Fennema, 1993). La viscosidad de las soluciones de xantana se ha determinado que es independiente del pH y la temperatura en un amplio intervalo de estos, 1 a 13 y -4 a 93 °C respectivamente (Fennema, 1993), esta independencia de la viscosidad con la temperatura es única e importante en el ámbito industrial alimentario, ya que productos elaborados en frío pueden mantener constante su viscosidad al calentarlos o viceversa. Otras propiedades importantes atribuidas a esta goma son su alta resistencia a la degradación enzimática, estabilidad al congelamiento – descongelamiento. Aplicaciones La xantana es ampliamente usada no solo en la industria de los alimentos, en donde es utilizado en bebidas para mejorar su palatabilidad y la liberación del aroma, y en los zumos de naranja para estabilizar su turbidez. A causa de su estabilidad térmica es usado como espesante y estabilizante en muchos alimentos enlatados. En alimentos espesados con almidón y congelados, como pueden ser rellenos de frutas para tartas, la adición de xantana mejora en gran medida la estabilidad frente a la congelación-descongelación y disminuye la tendencia a la sinéresis. Se emplea también en salsas por su estabilidad al pH (Fennema, 1993). 1.6.2 GUAR La Guar, es un galactomanano formado por un esqueleto básico de unidades (1�4)-β- D-manopiranosilo con unidades de (1� 6)-α- D-galactopiranosilo cada dos de ellas. Se deriva del endospermo molido de la planta de guar, Cyamopsis tetragonolobus, de la familia de las leguminosas. La planta es cultivada comercialmente en India y Pakistán para el consumo humano y animal. También es cultivada en el semiárido sudoeste de los Estados Unidos. La Goma Guar es un polvo blanco a blanco-amarillento, casi sin olor y sin sabor, se dispersa e hidrata casi completamente en agua frío o caliente, formando soluciones muy viscosas siendo insoluble en solventes orgánicos, tiene una acción de buffer ya que sus soluciones son muy estables en el intervalo de pH entre 4 y 10. La Guar es un polímero no iónico compatible con la mayoría de otros hidrocoloides vegetales como tragacanto, karaya, arábiga, agar, alginatos, carragenatos, goma de algarrobo, pectina, metilcelulosa y carboximetilcelulosa. La Guar también es compatible con casi todos los almidones químicamente modificados, almidones crudos, celulosas modificadas, polímeros sintéticos, y proteínas solubles en agua. Algunas sales multivalentes y solventes miscibles en agua alteran la hidratación y la viscosidad de soluciones de goma guar y producen geles. El ión del borato inhibirá la hidratación de goma guar actúa como un agente de vinculación cruzada con goma guar hidratada formando geles de estructuras cohesivas. Aplicaciones La Guar se usa principalmente para espesar soluciones acuosas y para controlar la movilidad de materiales dispersados o disueltos. Es utilizada en quesos en los que previene la sinéresis, y en los helados en los que contribuye en la obtención de suavidad, cuerpo y resistencia al choque térmico. En los productos de panadería es agregada a diferentes tipos de masas durante el amasado, aumenta el rendimiento, da mayor elasticidad, y produce una textura más suave, vida de estante más larga y mejores propiedades de manejo. En pasteles y masas de bizcocho, goma guar produce un producto más suave que se saca fácilmente de los moldes y se rebana fácilmente sin desmenuzar. También es utilizado en productos cárnicos, tales como las salchichas, para mejorar su textura y rellenado de la tripa. En los aderezos y salsas para ensalada a una concentración de 0.2-0.8%, incrementando la viscosidad y contribuyendo a la palatabilidad. Es útil espesando diferentes bebidas de fruta y bebidas dietéticas sin azúcar. 1.7 HIPÓTESIS Y OBJETIVOS HIPÓTESIS El mucopolisacárido que exuda la semilla de chía tiene propiedades espesantes cuya intensidad depende de la concentración de polímero así como del pH, tipo y concentración de contra-iones, por lo que su comportamiento reológico será diferente modificando estas variables. Esto permitirá plantear posibles usos en la industria de alimentos. OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL El propósito general de este estudio es examinar por medio de pruebas de cizalla angular y cizalla oscilatoria las propiedades de flujo y viscoelásticas de soluciones de mucílago de semilla de chía para conocer su comportamiento en medios acuosos y explorar su posible aplicación como agente espesante y/o formador de geles. OBJETIVOS PARTICULARES Un primer objetivo es conocer el efecto de la concentración de polímero sobre las propiedades de flujo estacionario y no estacionario de sus soluciones acuosas bajo condiciones isotérmicas para determinar la capacidad espesante del mucílago de la semilla de chía. El segundo objetivo consiste en determinar el efecto del pH sobre las propiedades de flujo y viscoelásticas del mucílago de la semilla de chía en condiciones isotérmicas para determinar su estabilidad bajo diferentes condiciones de protonación. El tercer objetivo es estudiar el efecto de la presencia de contra-iones sobre las propiedades de flujo y viscoelásticas del mucílago de la semilla de chía en condiciones isotérmicas para conocer de qué manera iones de diferente naturaleza y concentración afecta a esas. Todos estos objetivos tienen como propósito examinar el comportamiento en fase acuosa del mucílago de la semilla de chía para poder evaluar y sugerir su posible aplicación ya sea como agente espesante y/o como formador de geles. CAPITULO II METODOLOGÍA Y DESARROLLO EXPERIMENTAL 2.1 DIAGRAMA GENERAL DE LA INVESTIGACIÓN La Figura 2.1 muestra el diagrama general de la investigación. Figura 2.1 Diagrama general de la investigación. Mucílago (polvo) Disolvente �Agua destilada �Agua destilada + sal (KCl, NaCl, CaCl2, MgCl2) Dispersión Calentamiento 70 C/15 min Enfriamiento Solución de mucílago de chía Ajustes de pH Cizalla rotacional APLICACIÓN DE MODELOS �LEY DE LA POTENCIA �CROSS �CARREAU - YASUDA Propiedades viscoelásticas Cizalla oscilatoria de baja amplitud Carácter viscoelástico Determinación Concentración real de la solución COMPARACIÓN CON POLISACARIDOS COMERCIALES Dispersión Calentamiento 70 C/ 15 min Enfriamiento Goma guar Agua destilada Goma xantana Agua destilada +50 mMNaCl Reología Propiedades de flujo Mucílago (polvo) Disolvente �Agua destilada �Agua destilada + sal (KCl, NaCl, CaCl2, MgCl2) Dispersión Calentamiento 70 C/15 min Enfriamiento Solución de mucílago de chía Ajustes de pH Cizalla rotacional APLICACIÓN DE MODELOS �LEY DE LA POTENCIA �CROSS �CARREAU - YASUDA Propiedades viscoelásticas Cizalla oscilatoria de baja amplitud Carácter viscoelástico Determinación Concentración real de la solución COMPARACIÓN CON POLISACARIDOS COMERCIALES Dispersión Calentamiento 70 C/ 15 min Enfriamiento Goma guar Agua destilada Goma xantana Aguadestilada +50 mMNaCl Reología Propiedades de flujo Mucílago (polvo) Disolvente �Agua destilada �Agua destilada + sal (KCl, NaCl, CaCl2, MgCl2) Dispersión Calentamiento 70 C/15 min Enfriamiento Solución de mucílago de chía Ajustes de pH Cizalla rotacional APLICACIÓN DE MODELOS �LEY DE LA POTENCIA �CROSS �CARREAU - YASUDA Propiedades viscoelásticas Cizalla oscilatoria de baja amplitud Carácter viscoelástico Determinación Concentración real de la solución COMPARACIÓN CON POLISACARIDOS COMERCIALES Dispersión Calentamiento 70 C/ 15 min Enfriamiento Goma guar Agua destilada Goma xantana Agua destilada +50 mMNaCl Reología Propiedades de flujo 2.2 MATERIALES El mucílago de la semilla de chía se obtuvo por liofilización de las semillas remojadas en agua a temperatura ambiente después de la formación de una cápsula gelatinosa a su alrededor. La humedad del mucílago fue 10%. Se usaron NaCl cristal Reactivo (J.T. Baker), KCl (Mallinckrodt Reactivo Analítico), MgCl2. 6-Hidrato, cristal (J.T. Baker) y CaCl2 (Mallinckrodt Grado desecante), ácido acético glacial (17 M), acetona (destilada), guar (Gomas Naturales, S.A. de C.V., México) y xantana (Keltrol T, Kelco, San Diego, EUA) ambas grado alimenticio. 2.3 MÉTODOS Se pesó mucílago en cantidad necesaria para obtener soluciones de concentración 0.9%, 0.7%, 0.5%, 0.3%, 0.2% y 0.1% (m/v) respectivamente. El polvo se agregó poco a poco en forma de lluvia muy fina al disolvente (agua destilada) con agitación magnética a temperatura ambiente y posteriormente se calentó la dispersión obtenida por 15 minutos a 70 °C. Se enfrió a temperatura ambiente y se centrífugo cada solución por 15 minutos a máxima velocidad para separar el material insoluble. Se ajustó el pH a 6 con ácido acético glacial (17 M) sólo en los casos en que fue necesario. Las soluciones con adición de alguna sal fueron preparadas disolviendo previamente la respectiva sal en agua destilada en cantidad suficiente para tener 50 mM de NaCl, 50 mM de KCl, 10 mM de CaCl2 y 10 mM MgCl2 y después continuar con la adición de mucílago como se señaló anteriormente. Cada una de las soluciones se examinó en el reómetro (ver adelante) por duplicado y posteriormente se ajustó el pH a 3 con ácido acético glacial (17 M) para volver a examinarlas en el reómetro por duplicado a este nuevo pH. Se siguió este procedimiento debido a que la cantidad de mucílago disponible para hacer las pruebas era limitada. Pruebas reológicas Las propiedades reológicas se determinaron empleando un reómetro de deformación controlada ARES-RFS III (Advanced Rheometric Expansion System-Rheometric Fluids Spectrometer, TA Instruments, EUA), en una geometría de cilindros concéntricos de doble pared (Double Wall Couette) con un diámetro interior de la copa de 27.94 mm, diámetro interior del cilindro interno de 29.5 mm, diámetro exterior del cilindro externo de 32.0 mm, diámetro exterior de la copa de 34 mm y un espacio anular de 1.00 mm. Algunas soluciones fueron examinadas en un reómetro de esfuerzo controlado (PAAR-PHYSICA) usando una geometría de cono-placa (KP25, Cono de 2°, diámetro = 7.5 cm). Las propiedades de flujo se examinaron a 25 °C empleando una velocidad de deformación ( • γ ) entre 0.01 s-1 y 500 s-1, cada una de ellas se realizó por duplicado. De lo anterior se obtuvieron datos que permitieron elaborar las curvas de viscosidad a fin de determinar el tipo de comportamiento de flujo que presenta el mucílago de la semilla de chía en solución acuosa. Todas las pruebas de realizaron por duplicado y se obtuvo el promedio de los datos obtenidos para cada solución y se usaron modelos para correlacionar el comportamiento presentado. Las propiedades dinámicas se analizaron en el reómetro ARES- RFS III usando la geometría ya descrita arriba a 25 °C mediante pruebas oscilatorias de baja amplitud. Se hizo primero un barrido de deformación para determinar la zona de viscoelasticidad lineal, con una frecuencia de oscilación (ω) de 6.28 rad/s y una deformación entre 1 y 50%. Una vez determinado el límite de viscoelasticidad lineal se hicieron barridos de frecuencia en la zona lineal con una variación de frecuencia desde 0.1 hasta 100 rad/s. De igual manera las pruebas se realizaron por duplicado y los datos se promediaron a fin de obtener el comportamiento. Sólo se consideraron los datos por arriba del torque mínimo que puede detectar el reómetro 0.4 (µN.m). Comparación con guar y xantana Para comparar las soluciones de mucílago de chía se seleccionó la Guar sin adición de sal en una concentración de 0.1% y 0.5% (m/v) y la xantana con adición de 50 mM de NaCl en una concentración de 0.5% (m/v), siguiendo el mismo procedimiento de preparación que se siguió para preparar las soluciones de mucílago de la semilla de chía como se señala a continuación. Se pesó la Xantana y Guar por separado en una cantidad correspondientemente para obtener soluciones de la concentración antes señalada y se agregaron cada una por separado en forma de lluvia muy fina al agua. En el caso de la solución 0.5% de goma xantana se adicionó cantidad suficiente de NaCl para obtener una solución 50 mM con agitación magnética para permitir la homogenización de la dispersión. Lo anterior se realizó a temperatura ambiente para posteriormente calentar la disolución obtenida por 15 minutos a 70 °C, y a continuación se dejó enfriar a 25 °C a fin de determinar tanto las propiedades de flujo como el comportamiento viscoelástico con la geometría de doble pared en las mismas condiciones en las que se examinó el mucílago de chía, es decir, para el comportamiento al flujo una temperatura de 25 °C con velocidad de deformación (γ) entre 0.01 s-1 y 500 s-1 y las propiedades dinámicas con un barrido de deformación con una frecuencia (ω) de 6.28 rad/s y una deformación (γ) entre 1% y 50% y un barrido de frecuencia en la zona de viscoelasticidad lineal con una variación de frecuencia (ω) entre 0.1 a 100 rad/s. Todas las pruebas se hicieron igualmente por duplicado. Determinación de la concentración real de las soluciones de mucílago de chía Una vez que se examinaron cada una de las soluciones a pH 6 y pH 3 en el reómetro, y dada la presencia de material insoluble en el polvo de mucílago, fue necesario determinar la concentración real de la solución examinada. Para ello se colocó papel filtro previamente cortado y pesado en balanza analítica sobre una caja Petri en una estufa a 110 °C a fin de colocar ambos a peso constante, posteriormente se midió un volumen conocido de mucílago el cual se precipitó en acetona en una relación 2:1. Para separar el precipitado obtenido se filtró al vació y se dejó secar completamente en un desecador por 48 horas aproximadamente y después se pesó y se determinó el peso de mucílago por diferencia. Considerando el volumen conocido de solución y la masa seca de mucílago, se determinó la concentración real en cada una de las soluciones y se expresó en porcentaje masa/volumen (m/v). CAPITULO III RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1 PROPIEDADES DE FLUJO EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE MUCÍLAGO Sin adición de sales La Figura 3.1 muestra el comportamiento de soluciones de mucílago con diferente concentración de polímero a pH 6. Las soluciones mostraron un comportamiento no newtoniano adelgazado por cizalla (shear-thinning) ya que la viscosidad disminuyó al aumentar la velocidad de deformación. Este comportamiento de flujo es característico de productos de frutas y vegetales así como de polímeros solubles (Steffe, 1996). La razón para un comportamiento de este tipo se debe en gran medida a la presencia de cadenas poliméricas en la solución las cuales al ser sometidas a una deformación de cizalla se orientan en capas las cuales pueden fluir muy fácilmente causando una disminución de la viscosidad al aumentar la velocidad de deformación (De Notta1997). Este tipo de comportamiento se caracteriza por presentar tres regiones: La primera es una región muy pequeña newtoniana donde la viscosidad, llamada viscosidad limite a cero velocidad de cizalla (η0), se caracteriza por ser constante e independiente del cambio de la velocidad de deformación. La segunda es una región en la cual la viscosidad aparente (η) disminuye con la velocidad de deformación y la tercera es una región nuevamente newtoniana pero inferior a la primera en la cual se alcanza la llamada viscosidad limite a velocidad de cizalla infinita (η∝). Para poder observar las tres regiones es necesario examinar el comportamiento sobre un amplio intervalo de velocidad de deformación, típicamente desde 0.001 hasta 10000 s-1, y tal intervalo no es accesible con un solo equipo lo que hace necesario el uso de varios tipos de reómetros. En el caso de las soluciones de mucílago de chía, la primera zona no se observó ya que la viscosidad a velocidades de deformación cercanas a 0.1 s-1 no fue constante. La segunda zona se observó en todos los casos y la tercera no fue claramente observable. Cabe aclarar que las soluciones con 0.2 y 0.5% de mucílago fueron examinadas en un Velocidad de cizalla [s -1 ] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 102 0.1% 0.2% 0.3% 0.5% 0.9% reómetro PAAR-PHYSICA cuya sensibilidad a bajas velocidades de deformación no es muy grande y por ello sólo fue posible obtener datos en el intervalo de velocidad de deformación mostrado en la Figura 3.1. Para tratar de describir el comportamiento de flujo de las soluciones acuosas del mucílago de chía se seleccionaron tres modelos reológicos y los datos fueron analizados empleando una rutina de regresión no lineal. Los modelos ensayados fueron: Figura 3.1 Curvas de viscosidad para soluciones acuosas de mucílago de chía a diferentes concentraciones, pH 6 y 25 °C. Ley de potencia o modelo de Ostwald de-Waele 1nK)( −γ=γη && (3.1) Carreau–Yasuda ( )[ ] a/)1n(a0 1)()( −∞∞ λγ+η−η+η=γη && (3.2) Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 102 Cross ( )[ ] 1n10 1)()( −−∞∞ λγ+η−η+η=γη && (3.3) Se seleccionaron estos tres modelos ya que son los más empleados para describir la variación de la viscosidad aparente con la velocidad de deformación. El Cuadro 3.1 muestra los resultados de las regresiones y los valores de los parámetros de cada modelo. Cada modelo produjo coeficientes de correlación superiores a 0.99, y para el caso de las soluciones 0.2 y 0.5% cuyo intervalo de prueba es más corto el modelo de Ley de potencia es el que mejor explica el comportamiento, sin embargo los modelos de Cross y de Carreau–Yasuda producen un mejor ajuste para el resto de las soluciones analizadas como se observa en la Figura 3.2. Por ello estos modelos se tomaron para el análisis de los parámetros. Figura 3.2 Correlación de los modelos reológicos con la viscosidad de soluciones acuosas de mucílago de chía a pH 6 y 25 °C. Línea azul continua (―――― ) ley de la potencia, línea negra cortada (- - -) modelo de Cross y línea roja punteada (…….) modelo de Carreau–Yasuda. Cuadro 3.1 Parámetros de los modelos de Cross y Carreau–Yasuda de las soluciones acuosas de mucílago de chía a 25 °C, pH 6. MODELO LEY DE LA POTENCIA Concentración (%) r K n Intervalo • γ 0.2 0.9952 0.094 0.699 33.7-500 0.5 0.9947 0.489 0.572 10-500 MODELO DE CROSS Concentración (%) r η0 (Pa.s) η∝ (Pa.s) λ (s) n Intervalo • γ 0.1 0.9990 2.487 0.010 17.84 0.846 0.1 a 500 0.3 0.9994 8.913 0.032 14.93 0.858 0.1 a 500 MODELO DE CARREAU - YASUDA Concentración (%) r η0 (Pa.s) η∝ (Pa.s) λ (s) n a Intervalo • γ 0.1 0.9999 0.701 0.007 8.950 0.249 12.550 0.1 a 500 0.3 0.9993 11.296 0.030 30.39 0.146 0.751 0.1 a 500 0.9 0.9998 0.002 0.103 315.8 0.188 1.753 0.1 a 500 De acuerdo con los valores de los parámetros obtenidos para cada modelo es evidente el carácter adelgazado por cizalla ya que todos los valores del parámetro n, relacionado con el índice de flujo de la ley de potencia tanto para el modelo de Cross como el de Carreau–Yasuda, es menor a la unidad. Sin embargo, no fue posible encontrar una correlación clara entre este parámetro y la concentración de mucílago ya que la tendencia esperada, disminución de n con el aumento de la concentración de mucílago, no se observó de manera clara. Como podemos observar en la Fig. 3.1 al aumentar la concentración de mucílago la viscosidad de las soluciones aumenta de manera progresiva y con ello el carácter no newtoniano. Por ello esperaríamos se intensificara dicho carácter, es decir, que las soluciones fueran más adelgazadas por cizalla como ha sido reportado para otros polisacáridos como la Xantana (Martínez- Padilla et al., 2004) en donde al aumentar la concentración, el índice de flujo (n) disminuye. En el caso de las soluciones de mucílago 0.2 y 0.5% el mejor modelo es el de Ley de potencia y se observa la tendencia esperada de este parámetro, mientras que tomando en cuenta sólo los valores correspondientes a las soluciones examinadas en un mismo intervalo de velocidad de deformación (0.1 a 500 s-1) y a las cuales se les aplico el modelo de Cross y Carreau – Yasuda , solo en el caso de este último se ve que disminuye para concentraciones de 0.1 a 0.3% ya que para el modelo Cross aumenta el valor del índice de flujo. Pero entre 0.3 a 0.9% esperaríamos una mayor disminución de n y no ocurre así, sino que se presenta un ligero aumento para el caso de Carreau – Yasuda y para el caso de el modelo Cross los datos para 0.9% no se ajustan al modelo y por ello no se presentan para el análisis. Por ello se podría pensar que a bajas concentraciones el comportamiento no newtoniano se intensifica al aumentar la concentración de 0.1 a 0.3%, sin embargo a concentraciones mayores a 0.3% el comportamiento no newtoniano se mantiene, de acuerdo con el modelo Carreau–Yasuda. Una probable explicación de este comportamiento es que probablemente las concentraciones examinadas estén por arriba de la concentración crítica, C*, característica de todos los polímeros en solución, que indica el límite que separa la zona diluida de la zona semi-diluida. Para poder establecer el valor de C* es necesario determinar la viscosidad intrínseca de las soluciones de mucílago sobre un intervalo más amplio de concentraciones que el usado en este trabajo. Se sugiere como trabajo futuro determinar la concentración C*. De la misma manera, es posible detectar que en el caso de Carreau–Yasuda el tiempo de transición de la zona de comportamiento newtoniano a la de comportamiento de ley de potencia aumenta con el aumento de la concentración para el mismo intervalo de velocidad de deformación (0.1 a 500 s-1). Esto no ocurre así para el caso del modelo de Cross, tomando el mismo intervalo, lo encontrado en el caso del modelo Carreau–Yasuda es congruente, ya que al aumentar la concentración y con ello la viscosidad esperamos que a menores velocidades de deformación ocurra la transición del comportamiento, puesto que el inverso de λ está relacionado con la velocidad de deformación a la cual ocurre la transición ya señalada. Por lo que el modelo que mejor describe el comportamiento de flujo de las soluciones de mucílago de chía es el de Carreau–Yasuda. Finalmente podemos señalar que la viscosidad aparente de la soluciones aumenta con el incremento de la concentración de mucílago de modo prácticamente lineal (Fig. 3.3) tanto para velocidades de cizalla de 194 s-1 como para 390 s-1 (en ambos casos r = 0.9990). Efecto de la adición de sales Se estudió el efecto de sales de iones mono y divalentes: NaCl, KCl, MgCl2 y CaCl2 en concentraciones de 50 mM y 10 mM para los mono y los divalentes, respectivamente. Dado que para la preparación delas muestras se empleo agua destilada y esta contiene los iones de interés fue necesario conocer el contenido de estos, por lo que se realizó una absorción atómica a una muestra de agua destilada y los contenidos expresados en concentración mM de la sal correspondiente para cada uno de ellos fue : 2.8 mM NaCl, 1.22 mM de KCl, 1.04 mM MgCl2 y 1.06 mM CaCl2 y dado que son bajas la concentraciones presentadas no incrementan de manera importante el contenido de sal, para cada una de las sales empleadas en las soluciones por lo que en los gráficos solo se expresan las concentraciones empleadas en la preparación de las muestras a estudiar. La Figura 3.4 muestra que en presencia individual de estas cuatro sales se observa un comportamiento no newtoniano de adelgazamiento por cizalla, así como un aumento de la viscosidad aparente con el aumento de la concentración de mucílago de chía. Podemos observar que, a diferencia de las soluciones sin adición de sal, las curvas con diferente concentración de mucílago están en general más separadas entre sí con excepción de 0.7 y 0.9% con NaCl para las cuales la viscosidad es muy cercana. Al comparar el cambio de la viscosidad de la solución de mucílago sin adición de sales con el presentado por las soluciones a las que se les adicionó KCl o NaCl (Figura 3.5) se observa una disminución de la viscosidad aparente siendo mayor la disminución para las soluciones a las cuales se les adicionó KCl que a aquellas a las que se les adicionó NaCl, así como una disminución más marcada para concentraciones menores de mucílago de chía. La Figura 3.6 muestra el comportamiento de las soluciones con adición de sales divalentes CaCl2 o MgCl2. Como en el caso de los iones monovalentes observamos también una disminución de la viscosidad aparente en presencia de sal. Sin embargo, esta disminución parece ser del mismo grado para ambas sales ya que sus correspondientes curvas de viscosidad se empalman. Es muy claro que las curvas de viscosidad en presencia de estas dos sales están por debajo de la curva correspondiente a la solución sin adición de sal. No obstante, la disminución de la viscosidad para una concentración de mucílago de 0.5% es menor. Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 Col 2 vs Col 1 Concentración [%] 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 b a Figura 3.3 Viscosidad aparente, η, a una velocidad de deformación de 194 s-1 [a] y 390 s-1 [b], en función de la concentración [%] de mucílago de chía a pH 6. NaCl Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 0.1% 0.2% 0.3% 0.5% 0.7% 0.9% KCl 0.1% 0.2% 0.3% 0.5% 0.7% 0.9% CaCl2 Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 0.1% 0.2% 0.3% 0.5% 0.7% MgCl2 Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 0.1% 0.2% 0.3% 0.5% 0.7% Figura 3.4 Viscosidad de soluciones acuosas de mucílago de chía con adición de 50 mM de sales de iones monovalentes (NaCl, KCl) y 10 mM de sales de iones divalentes (MgCl2, CaCl2) a pH 6 2 4-O-metil-α-D-Acido Glucopiranosilurónico Al analizar en su conjunto el efecto de todos los iones (Figura 3.7) observamos que la viscosidad se ve afectada en mayor grado por los iones divalentes que por los monovalentes de acuerdo con el orden decreciente MgCl2 > CaCl2 > KCl > NaCl. Esto demuestra que el mucílago de chía en solución es sensible a la presencia de iones y que su viscosidad se ve notablemente modificada tanto por el tipo de ión (mono o divalente) como por el tamaño del ión para un mismo tipo. Al realizar un análisis de varianza de los datos de la figura 3.7 se obtuvo que las cuatro sales tienen un efecto diferente sobre la viscosidad de las soluciones de mucílago de chía , y para determinar entre cuales no hay diferencia significativa se realizo una prueba de intervalos múltiples de Duncan y de ello se obtuvo que solo entre las solución con adición de CaCl2 y MgCl2 no hay diferencia, mientras que con el resto de tratamientos si existen diferencias ( KCl vs NaCl, KCl vs MgCl2, KCl vs CaCl2, CaCl2 vs NaCl , MgCl2 vs NaCl), corroborando lo observado en las gráficas. Esta sensibilidad resulta de la naturaleza polielectrolítica que posee el mucílago de chía. Al aumentar la fuerza iónica a 0.2236 M (para la adición de MgCl2 y CaCl2) y 0.3166 M (en el caso de adición de NaCl y KCl) del medio acuoso la viscosidad se ve afectada debido a la interacción de los iones con las cadenas de mucílago modificando su conformación (orientación en el espacio) así como su interacción con el disolvente (Lapasin y Pricl, 1995). En el caso de soluciones con mayor concentración de mucílago las interacciones cadena-cadena aumentan, pero al aumentar la fuerza iónica del sistema las interacciones electrostáticas también aumentan. Se ha reportado (Lin, K-Y., Daniel, J.R. & Whistler, R.L., 1994) que el mucílago de chía posee un alto contenido de ácido glucurónico así como de grupos cargados o polarizables (grupos –OH) a lo largo de su estructura primaria, la cual se ha postulado está constituida por la secuencia: �4)-β-D-Xilopiranosil (1�4)α-D-Glucopiranosil (1�4)- β-D-Xilopiranosil(1� 0.2% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 0.3% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 0.5% Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-2 10-1 100 101 Figura 3.5 Efecto de la adición de sales de iones monovalentes, KCl y NaCl, sobre la viscosidad de soluciones acuosas con diferentes concentraciones de mucílago de chía a pH 6 y 25 °C. Los círculos corresponden a las soluciones sin adición de sal, los cuadrados a la adición de 50 mM de NaCl y los triángulos a la adición de 50 mM de KCl. 0.1% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 0.2% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 0.5% Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-2 10-1 100 101 Figura 3.6 Efecto de la adición de sales divalentes sobre la viscosidad de soluciones acuosas de diferentes concentraciones de mucílago de chía a pH 6 y 25 °C. Los círculos corresponden a las soluciones sin adición de sal, los cuadrados a la adición de 10 mM de CaCl2 y los triángulos a la adición de 10 mM de MgCl2. 0.2% Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 50 mM NaCl 50 mM KCl 10 mM CaCl2 10 mM MgCl2 Figura 3.7 Efecto de la adición de 50 mM de sales monovalentes y 10 mM de sales divalentes de soluciones con 0.2% de mucílago de chía a pH 6 y 25 °C. La fuerza iónica aportada por la adición de sal ya sea mono o divalente provoca que las moléculas de mucílago se contraigan debido a un aumento de las interacciones electrostáticas que provoca la presencia de estas sales. Al contraerse las cadenas de mucílago de chía, su resistencia al flujo es menor y por ello la viscosidad disminuye y las curvas de viscosidad están por debajo de aquellas sin adición de sal. En el caso de las soluciones con menor concentración de mucílago las moléculas se encuentran más separadas unas de otras y las interacciones intramoleculares y con el disolvente son más favorables que las intermoleculares. En este caso el efecto de la sal es más pronunciado en comparación con lo que sucede en las soluciones más concentradas en donde ya existen interacciones cadena–cadena, intermoleculares, además de las cadena–disolvente y las intramoleculares (todas de corta duración). Las interacciones con los iones presentes en la solución tienden a regular el grado de contracción en la molécula por lo que se presenta una disminución de la viscosidad pero en menor grado que el presentadoen las soluciones con menor cantidad de polisacárido. Las principales interacciones moleculares que presentan los polisacáridos de naturaleza glucosídica tal como el mucílago de chía en solución acuosa son interacciones secundarias tales como fuerzas de Coulomb, dipolo–dipolo y Van der Waals que pese a ser débiles individualmente cuando actúan en su conjunto dan estabilidad conformacional al polisácarido en solución. Dentro de estas interacciones la dipolo–dipolo resulta de la interacción electrostática y es la responsable de la atracción de las moléculas entre sí. La de mayor importancia en estos casos es la de puente de hidrógeno ya que le permite a la molécula interaccionar con el disolvente y con diversas secciones de la larga cadena de polisácarido (Lapasin y Pricl, 1995). El comportamiento de polielectrólito presentado por el mucílago nos ayuda a explicar el aumento de la viscosidad al aumentar la concentración de mucílago observado en la Figura 3.1 ya que éste es un comportamiento normal de este tipo de moléculas, puesto que al aumentar el número de moléculas en solución (aumento de la concentración) se produce un exceso de energía que al disiparse provoca que la viscosidad aumente. Tal exceso ocurre cuando el campo de flujo aproxima dos o más moléculas de polisácarido y las fuerzas Coulombicas provocan que éstas se desvíen de sus trayectorias originales y con ello la resistencia al flujo sea mayor (Lapasin y Pricl, 1995). Este comportamiento es conocido como el segundo efecto electroviscoso de los polielectrólitos y a ello se debe el aumento de la viscosidad. De la misma manera observando la Figura 3.8 podemos advertir que la viscosidad es menor al adicionar las distintas sales y cómo esta disminución es mayor en el caso de sales divalentes que en las monovalentes, a pesar de que a bajas concentraciones de mucílago el comportamiento en presencia de NaCl parece ser similar al de CaCl2 (0.1 a 0.5%) a una velocidad de cizalla de 390 s-1. Asimismo podemos observar cómo aumenta la viscosidad aparente al aumentar la concentración de mucílago en todos los casos; sin y con sal. También podemos notar que el aumento lineal de la viscosidad con la concentración de mucílago observado sin adición de sal (ya que r = 0.9960), no se muestra en las soluciones con adición de sales tanto monovalentes como divalentes y que en el caso de éstas últimas este aumento lineal de la viscosidad con la concentración de Concentración [%] 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 SIN SAL NaCl KCl CaCl2 MgCl2 mucílago no es tan marcado (ya que el al realizar la regresión lineal de estos datos obtenemos que para NaCl, r = 0.9860, KCl r = 0.9218, CaCl2 r = 0.9139 y para MgCl2 r = 0.9099) Figura 3.8 Viscosidad aparente,η a velocidad de deformación de 390 s-1 en función de la concentración de mucílago de chía a pH 6 sin y con adición de sales mono y divalentes. Efecto del pH Como se muestra en las Figuras 3.9 a 3.13 al variar el pH de 6 a 3 tanto las soluciones sin sales como con éstas mostraron un comportamiento no newtoniano adelgazado por cizalla. Se puede apreciar que tanto sin adición (Fig. 3.9) cómo con adición de 50 mM de NaCl o KCl Fig. 3.10 y Fig. 3.11, respectivamente, hubo una disminución de la viscosidad al variar el pH de 6 a pH 3, del 36% en el caso de las soluciones sin adición de sal y del 24% y 23 % respectivamente para cada sal monovalente estudiada, mientras que en presencia de 10 mM de CaCl2 y MgCl2, Fig. 3.12 y 3.13, respectivamente, pese a que no se observa un efecto al cambiar el pH de 6 a 3 en las curvas de viscosidad para las soluciones con 0.1, 0.3, 0.5 y 0.7%, ya que se encuentran muy próximas una de la otra, manteniéndose siempre la curva de flujo obtenida a pH 3 por debajo de la obtenida a pH 6, alcanzándose en promedio una diferencia entre ambas curvas del orden de 14.5 % y 19.7% para cada sal empleada. A fin de corroborar la existencia de diferencia significativa entre ambos tratamientos con y sin la adición de las distintas sales se realizo el análisis estadístico correspondiente y se observa una diferencia significativa entre ambos pH para todos los casos estudiados. Sin embargo hay mayor grado de diferencia en las soluciones con adición de sales monovalentes que con aquellas a las cuales se les agrego sales divalentes, esto nos hace pensar que la adición de estas ultimas proporciona determinada estabilidad a la estructura del mucílago frente a la protonación del medio (pH 3), posiblemente frente a las interacciones que se forman con estos iones, mientras que al adicionar los iones monovalentes y ocurrir una mayor disminución de viscosidad en comparación con las divalentes las interacciones que se forman con las primeras son más débiles o más sensibles al medio ácido. La disminución de viscosidad por reducción del pH puede tener su origen en la ruptura de enlaces a lo largo del polisácarido ya que el medio ácido desestabiliza la estructura del mucílago formada por glucosa, xilosa y ácido glucurónico como ya se mencionó. En los casos en los que el pH es bajo y la concentración de ácido (fuerte) es grande puede ocurrir una hidrólisis de los enlaces (1�4) a lo largo del polisacárido y con ello romper la estructura así como las interacciones. Esto resultaría en una disminución drástica de la viscosidad. En nuestro caso las condiciones de acidez del medio a pH 3 no hacen probable que haya una hidrólisis ni siquiera incipiente del mucílago por lo que la disminución de viscosidad observada al bajar el pH probablemente se deba al encogimiento de las cadenas de mucílago (segundo efecto electroviscoso; Lapasin y Pricl, 1995) ya que en medio ácido se puede generar una mayor repulsión entre cadenas poliméricas debido a un efecto de “escudamiento” de cargas positivas alrededor del polímero haciendo que éste se contraiga aún más y con ello la viscosidad disminuya. Una razón de que en presencia de sales divalentes haya una menor disminución de viscosidad puede ser que dado que las moléculas ya se encuentran contraídas no sea posible una mayor contracción en medio ácido por un efecto de repulsión entre los protones y los iones divalentes. De manera adicional este comportamiento en medio ácido nos ayuda a reafirmar la naturaleza polielectrolítica del mucílago, ya que es sensible a los cambios de pH además de la adición de sales como ya se discutió anteriormente. 0.1% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 102 0.2% 0.3% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 102 0.5% Velocidad de cizalla [s-1] 100 101 102 103 0.9% Velocidad de cizalla [s-1] 10-1 100 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 100 101 102 Figura 3.9 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones con diferente concentración de mucílago de chía sin adición de sales a pH 6 (círculos) y a pH 3 (cuadrados). 0. 2% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-3 10-2 10-1 0. 3% 0.7% Velocidad de cizalla [s -1 ] 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-2 10-1 100 0.9% Velocidad de cizalla [s -1 ] 101 102 103 Figura 3.10 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con diferente concentración de mucílago de chía en presencia de 50 mM de NaCl a pH 6 (círculos) y a pH 3 (cuadrados). Figura 3.11 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con diferente concentración de mucílago de chía en presencia de 50 mM de KCl a pH 6 (círculos) y a pH 3 (cuadrados). 0.7% Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-2 10-1 100 0.9% Velocidad de cizalla [s -1 ] 101 102 103 Vi sc os id ad ap ar en te [P a. s] 10-2 10-1 100 Figura 3.12 Efecto del pH sobre la viscosidad de soluciones acuosas con diferente concentración de mucílago