- GRUPOS SANGUINEOS Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD 2022-2

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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV
PATOLOGIA CLINICA Y MEDICINA TRANSFUSIONAL
SEMANA 2 PRÁCTICA: 
GRUPOS SANGUÍNEOS Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD
DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA
SEDE LIMA:
FILIAL ICA:
FILIAL CHINCHA:
CICLO VI
SEMESTRE 2022-2
MATERIAL EXCLUSIVO PARA USO DEL DOCENTE DEL CURSO
INMUNOHEMATOLOGÍA
• Sub especialidad de la Medicina Transfusional 
• Encargada del estudio de la hemoclasificación y 
de la hemocompatibilidad de los componentes 
sanguíneos desde su extracción del donante 
hasta la transfusión al receptor.
• Contexto antígeno- anticuerpo in vitro.
¿Qué es un antígeno?
• Molécula con la 
capacidad de 
desencadenar una 
respuesta inmunitaria 
específica →
anticuerpo.
¿Qué es un anticuerpo?
• Molécula proteica 
plasmática que se 
forma como 
respuesta a un 
antígeno.
¿Qué pruebas podemos realizar?
• Estudio de los grupos sanguíneos: antígenos (Ag) y 
Anticuerpos (Ac). 
• Escrutinio de anticuerpos irregulares
• Prueba de Coombs
• Pruebas de compatibilidad (pruebas cruzadas).
INMUNOHEMATOLOGÍA DE LOS ERITROCITOS
¿Cuál es la composición de los antígenos?
• Moléculas compuesta por 
un solo tipo:
• Proteínas (Rh)
• Carbohidratos (ABO)
• Ácidos nucleicos
• Lípidos
• Moléculas compuestas
• Glucolípidos (P1)
• Glicoproteínas (K)
• Lipoproteínas
• Otros 
SISTEMAS 
DE GRUPOS 
SANGUÍNEOS
¿Cuál es el origen de los anticuerpos séricos 
antieritrocitarios?
• Regulares / Naturales:
• Anti-A y anti-B, que definen el grupo sérico.
• IgM ó
• IgM + IgG
• Irregulares:
• Aparecen posteriores al contacto con 
eritrocitos portadores del antígeno extraño 
(transfusiones, embarazo).
• Generalmente IgG
¿Cuál es la acción de los anticuerpos séricos 
antieritrocitarios?
• Aglutinantes o completos:
• Casi siempre IgM
• No aglutinantes o 
incompletos:
• Requieren técnicas variadas 
para poder observar la 
aglutinación, IgG
SISTEMA ABO
SISTEMA RH
DETERMINACIÓN DE GRUPO ABO - RH
• Basado en la prueba de 
hemaglutinación.
• Se utilizan reactivos comerciales 
que contienen anticuerpos 
específicos para cada antígeno 
que se mezcla con la muestra de 
sangre a clasificar.
• Esquematicamente luego de 
mezclar una gota de reactivo con 
una gota de sangre, se observa la 
hemaglutinación. Se recomienda 
hacerlo en tubo de ensayo.
PRUEBA GLOBULAR O DIRECTA
• Busca la presencia de los 
antígenos A y/o B y/o D en la 
membrana de los eritrocitos.
PRUEBA SÉRICA O INVERSA
• Busca la presencia 
de los anticuerpos 
anti A y/o anti B y/o 
anti D en el plasma 
o suero.
PRUEBA DE COOMBS
Técnica capaz de detectar la presencia
de anticuerpos en suero tipo IgG que
reaccionan con antígenos en la
superficie de los eritrocitos utilizando
anticuerpos antiglobulina humana
(suero de Coombs: AGH).
COOMBS DIRECTO
COOMBS INDIRECTO
PRUEBAS PRE TRANSFUSIONALES
• Pruebas realizadas con el objetivo de seleccionar los
componentes sanguíneos adecuados para el receptor, con la
finalidad que una vez transfundidos no causen destrucción de
las células del receptor y tengan una óptima duración.
• La correcta identificación del paciente se constituye en la parte
más importante del proceso, desde el momento de extraer la
muestra hasta la administración del componente sanguíneo.
Luego, con la muestra correcta, realizar las pruebas de
compatibilidad (PPCC).
REACCIÓN IN VITRO Ag - Ac
•Es una reacción reversible, desarrollada en dos 
pasos:
•Primero, sensibilización de los hematíes: el 
anticuerpo se fija a los antígenos ubicados en la 
membrana del eritrocito.
•Segundo, aglutinación.
¿QUÉ AFECTA A LA FASE DE SENSIBILIZACIÓN?
pH 6,9 – 7,2
Tiempo 15 a 60 minutos, según anticuerpo (sin potenciadores)
Proporción entre 
Ag y Ac
Relación entre # de moléculas del Ac (paratopes) y epítopos 
de eritrocitos
Temperatura Grado térmico óptimo para cada anticuerpo
Acs fríos: M, N, P
Acs calientes: Rh, Jk, K
Constante de 
afinidad
A mayor afinidad, más rápida es la velocidad de asociación y 
más lenta la velocidad de disociación
Tipo y naturaleza 
del Ac
No aglutinante / incompleto: IgG, necesita potenciadores 
macromoléculas, enzimas, AGH
¿QUÉ AFECTA LA FASE DE AGLUTINACIÓN?
• Intensidad iónica del medio (potencial Z)
• Diferencia de potencial entre el eritrocito con
carga negativa y rodeado de una nube de carga
positiva y el medio.
• Responsable de la fuerza de repulsión de los
eritrocitos.
• La distancia entre los eritrocitos es proporcional
al potencial Z:
• IgM, siempre puede producir aglutinación.
• IgG, en función de la localización del epítopo
en el antígeno.
¿Puede modificarse la reacción Ag – Ac?
Medios de 
suspensión:
Albúmina
LISS
Utilización de 
enzimas
Medios de suspensión
ALBÚMINA LISS (solución de baja fuerza iónica)
Disminuye el 
potencial Z
Permite que Ac IgG 
una eritrocitos 
adyacentes
Disminuye la nube iónica 
alrededor del eritrocito
Acorta el tiempo de 
sensibilización
Se puede utilizar como líquido 
de suspensión de los 
eritrocitos
Enzimas
• Los más utilizados: ficina, bromelina, papaína, tripsina, neuraminidasa.
• Eliminan cargas negativas disminuyendo el potencial Z.
• Algunas logran eliminar ciertos antígenos (ayuda en la identificación de Acs).
• Detectan anticuerpos no deseados.
• Requieren manipulación cuidadosa y entrenada.
• Bromelina:
• Potencia anticuerpos Rh
• Debilita o anula Acs anti Fya, FYb, M, N, S
• Ficina y papaína:
• Más utilizados en la identificación de AAII.
MÉTODOS PARA OBSERVAR AGLUTINACIÓN
•Técnica de aglutinación en tubo
•Técnica de aglutinación en columna
•Técnica de aglutinación en microplacas
AGLUTINACIÓN EN TUBO
1. Eritrocitos + suero / plasma
2. Incubación 
3. Centrifugación 
4. Lectura e interpretación del resultado 
AGLUTINACIÓN EN TUBO
• Técnica estándar.
• Ventajas:
• Se pueden añadir aditivos para potenciar la reacción: LISS, enzimas, 
AGH
• Permite la manipulación
• Hemólisis visible
• Desventajas:
• Aglutinación es inestable
• Requiere manipulación y lectura cuidadosa
• Utiliza una cantidad importante de eritrocitos y suero.
AGLUTINACIÓN EN COLUMNA
• La aglutinación se produce en gel.
• Las columnas se presentan en 
tarjetas de 6 a 8 determinaciones.
• Variedad de tarjetas en el mercado.
• Posibilidad de semi-automatización
y automatización, que incluye 
dispensación de muestras y 
reactivos, incubación, centrifugación 
y lectura e interpretación.
AGLUTINACIÓN EN COLUMNA
• Ventajas:
• Utilizan aditivos (LISS, EDTA) para aumentar la sensibilización, 
disminuyendo el tiempo de incubación.
• La reacción es semi permanente y necesita pequeñas cantidades de 
reactivo.
• Permite automatización.
• Desventajas:
• Precio del equipamiento (automático o semi automático).
• Son muy sensibles y pueden detectar anticuerpos que no son 
clínicamente significativos.
AGLUTINACIÓN EN MICROPLACAS:EIA
• Permite 
automatización y 
se usan para 
grandes series 
de muestras. 
• La aglutinación 
se produce en 
pocillos.
• Reactivos están 
unidos a la 
superficie de los 
pocillos.
¿CUÁL TÉCNICA ES MEJOR?
• Múltiples estudios comparan las tres técnicas.
• Mayor sensibilidad en: columna y microplaca (EAI).
• Incrementa número de falsos positivos.
• Seguridad transfusional controversial → Acs y trascendencia in 
vivo.
• Permite automatización:
• Permite analizar mayor número de muestras.
• Reducen trabajo manual y mejoran precisión.
• Estandarización y trazabilidad.
• Eliminan subjetividad en interpretación de resultados.
• Manipulación mínima de muestras. 
ESCRUTINIO DE ANTICUERPOS IRREGULARES
• Detecta presencia en el suero de aloanticuerpos inesperados 
dirigidos contra antígenos que no sean del grupo ABO.
• Transfusiones previas, embarazo.
• Composición antigénica del panel: D, C, c, E, e, Kell, k, Lea, 
Leb, Jka, Jkb, Fya, Fyb, P1, M, N, S y s.
PRUEBA CRUZADA 
• Con la finalidad de demostrar invitro que un hemocomponente
no va a ser perjudicial in vivo para el paciente.
• Se realiza en diferentes fases (salino, Coombs).
• No se ha demostrado reacciones relevantes en caso de transfusión 
con EAI (-) y PPCC (+) a posteriori.
• Recomendaciones de la AABB:
1. EAI positivo: PPCC con AGH
2. EAI negativo: salino rápido o PC electrónica
PRUEBA CRUZADA ELECTRÓNICA
• Método válido siempre que se disponga de un sistema
informático validado y controlado.
• Compatibilidad ABO-Rh se basa en los datos registrados
en el sistema informático.
• Los datos se obtienen mediante pruebas serológicas
realizadas al donante y al receptor.
• El sistema informático interpreta los resultados en función
de unas normas predeterminadas.
• Si no se cumplen, emite un sistema de alerta e impide la
liberación del hemocomponente no compatible.
REQUISITOS PARA PC ELECTRÓNICA
• Pacientes que poseen dos determinaciones de grupo ABO-Rh y 
en los que se ha demostrado la ausencia de AAII en el suero.
• No pueden ser incluidos cuando:
• La muestra extraída antes de las 72h previas.
• No existen dos determinaciones de grupo ABO-Rh.
• Se demuestra presencia o historia anterior de AAII en el suero.
• Pacientes sometidos a trasplante de médula ósea y cuyo grupo ha 
cambiado.