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GUIA DE DIAGNOSTICO HISTOLOGICO • Aparato Urinario • Aparato Respiratorio • Organos linfáticos 2008 1 Introducción al diagnóstico histológico Lo primero que debe hacer un alumno en el momento de diagnosticar un preparado histológico es recorrerlo en su TOTALIDAD a bajo aumento. Ësto le permite obtener dos datos muy importantes: por un lado, conocer la heterogeneidad del órgano en estudio (por ej, saber si tiene corteza y médula); por el otro, reconocer si en alguno de los extremos del preparado se observa tejido epitelial de revestimiento. Este segundo dato es crucial para el diagnóstico, ya que sabiendo diagnosticar el tipo de epitelio en cuestión, el alumno reduce notablemente las posibilidades diagnósticas para ese preparado. Errores frecuentes que comete el alumno y que lo llevan a un mal diagnóstico incluyen: 1) no saber identificar un epitelio de revestimiento (por ej, confunden urotelio con epitelio plano estratificado, confundiendo entonces vejiga con piel); 2) no distinguir los diferentes tipos de músculo entre sí, sobre todo el cardíaco del liso. 3) confundir músculo liso con colágeno denso, lo que dificulta diferenciar glándula mamaria de próstata, o, si sumamos esta confusión a la de los epitelios, vuelven a confundir piel con vejiga. El diagnóstico histológico presenta entonces dificultades múltiples, y es el primer ejercicio diagnóstico que el estudiante de medicina debe hacer. Plantea asimismo numerosas similitudes con la medicina de la práctica cotidiana en la que, ante un conjunto de datos aislados, que el médico debe saber reconocer en el paciente, se plantean posibilidades diagnósticas limitadas. Pero entonces hay que tener en claro una cosa, y es que el médico DEBE saber reconocer esos datos, a veces porque saltan a la vista, a veces porque los BUSCA. Qué cosas tienen en común el diagnóstico que un médico hace con un paciente todos los días con el que un alumno de histología hace con un preparado en 1er año??? Si el alumno sabe reconocer ciertas cosas y BUSCA otras, limita las posibilidades de diagnóstico de ese preparado, muchas veces llegando al diagnóstico acertado. Si no sabe reconocer datos elementales en el preparado (por ej, saber ver bien el epitelio de revestimiento), las posibilidades diagnósticas son muchas, y el riesgo de error es más alto. En estas Guías de Diagnóstico Histológico pretendo por un lado que obtengas conocimientos teóricos elementales sobre cada uno de los preparados histológicos que forman parte del programa de la materia, y por el otro, que tengas la opción de aplicarlos, con el preparado del órgano al alcance para mirarlo, recorrerlo, buscar lo que sabés que tenés que buscar, y, con tus conocimientos teóricos sumados a la práctica, hagas el diagnóstico correcto. En el examen hay un paso más, que es el de saber justificar el diagnóstico realizado. Si hiciste el diagnóstico buscando esos datos, justificar el diagnóstico es simplemente explicar eso: qué buscaste y qué encontraste. Si hiciste el diagnóstico adivinando, nunca vas a poder justificarlo. Como dije antes, los conocimientos teóricos que se exponen en esta Guía son básicos, son los necesarios para llegar al diagnóstico correcto, pero de ninguna manera pretenden (ni pueden) reemplazar los textos de la materia ni los conocimientos obtenidos en clase de tus docentes. El Autor GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 2 Riñón TUBULO ACINO SEROSO ACINO MUCOSO FOLICULO/ ALVEOLO A bajo aumento: es un órgano sólido, rico en células con escaso tejido conectivo interpuesto. Llama la atención la acidofilia del tejido. No veo epitelio de revestimiento en ninguna de sus caras. Es heterogéneo, distinguiéndose una corteza y una médula. Conclusión: es un órgano sólido. La alta celularidad debe llevarme a dos posibilidades: que se trate de un órgano linfoide (muchas células pequeñas, que casi no tienen citoplasma: Linfocitos) o que se trate de una glándula (recordemos el concepto de epitelio: tejido muy celular con escasa sustancia intercelular, recordemos entonces que el epitelio puede ser GLANDULAR). Ya desde el bajo aumento se nota que las células que componen la mayoría de este órgano tienen citoplasma abundante y acidófilo, por lo tanto, se trata de una glándula y no de un órgano linfoide. Y es una glándula con organización en corteza y médula. Posibilidades diagnósticas: Suprarrenal/Riñón Sigo a bajo aumento, pero BUSCO datos que me orienten: La zona más periférica del órgano, o corteza, presenta unas estructuras redondeadas que desde el bajo aumento deben llamar mi atención (los glomérulos renales). El resto del órgano da la impresión de organizarse en estructuras tubulares, de epitelio siempre acidófilo (los túbulos). Estos pueden verse redondos (cortes transversales) o alargados (cortes longitudinales). Sospecha elevada: Riñón Si bien tiene corteza y médula, las células no son de citoplasma vacuolado ni se disponen en cordones perpendiculares a la cápsula (no es suprarrenal). Es crucial para el diagnóstico saber diferenciar lo que es un túbulo (igual luz que pared) de un acino (más pared, casi no veo luz), de un folículo (tiroideo) o un alvéolo (mama, próstata) que tienen más luz que pared. A alto aumento: busco confirmar mi diagnóstico. A alto aumento el corpúsculo renal presenta una delgada pared con epitelio plano simple (hoja parietal de Bowmann) y un penacho capilar en el centro. Puedo distinguir en el polo vascular la mácula densa, que corresponde al túbulo distal (acidófilo pálido, límites intercelulares netos, luz prolija). La mayoría de los cortes de túbulos en la corteza corresponden en cambio a túbulos proximales (más acidófilos por tener más mitocondrias, luz más desprolija por las microvellosidades, límites intercelulares poco definidos). En la médula debo identificar asas capilares y diferenciarlas del asa de Henle (ramas delgadas, revestidas por células planas). CONCLUSIÓN: Riñón (Justifico: órg. Sólido, células acidófilas en túbulos, corteza y médula, corpúsculos renales en la corteza). Diagnóstico diferencial más difícil para el alumno: Páncreas (se confunden el corpúsculo renal con los Islotes de Langerhans y túbulos renales -acidófilos- con acinos serosos -basófilos). OJO!!! GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 3 Uréter A bajo aumento: es un órgano hueco del que veo la totalidad de la luz. La luz es festoneada y la pared posee músculo liso. En contacto con la luz, veo un epitelio de revestimiento con varias capas. Conclusión: es un órgano hueco con pared muscular. Si entra toda la luz del órgano en el campo del microscopio, las posibilidades diagnósticas son: Uréter/ Conducto deferente/ Esófago (de rata) Considerando el epitelio de revestimiento, debo poder reconocerlo con certeza. ESO es lo que me permite fácilmente diferenciar estos 3 órganos. A alto aumento: el epitelio tiene varias capas, y las células son poliédricas. La capa apical (en contacto con la luz) posee células poliédricas o redondeadas, con citoplasma claro, especialmente alrededor del núcleo (halo claro perinuclear). Estos rasgos son típicos de un urotelio. El esófago (OJITO) tiene un epitelio con varias capas también, pero la apical es PLANA y puede tener queratina. Además el músculo de la pared del esófago puede ser liso o estriado esquelético (en la Guía de Aprato Digestivo incluímos un esquema sobre cómo diferenciar el músculo liso del estriado). El conducto deferente tiene epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. Supongamos que se te complicó más e incluíste en el diagnóstico diferencial todo el tubo digestivo (rarísimo!). Recordá que éste tiene epitelio siempre cilíndrico simple (del estómago al colon). Y del intestino delgado en adelante, hay células caliciformes. CONCLUSIÓN: Uréter (Justifico:org. hueco, pared muscular, urotelio de revestimiento). GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 4 Vejiga A bajo aumento: si recorro todo el preparado reconozco en uno de los extremos un revestimiento epitelial, por lo que se trata de un órgano hueco. Por debajo de éste reconozco tejido conectivo y músculo liso. El epitelio posee varias capas y la mucosa (es decir, el epitelio con el tejido conectivo subyacente) presentan pliegues. Conclusión: es un órgano hueco con pared muscular. Es crucial saber reconocer el epitelio porque esto achica las posibilidades diagnósticas. A mayor aumento: recorro el epitelio. Tiene varias capas como dijimos antes, y las células son poliédricas. La capa apical (en contacto con la luz) posee células poliédricas o redondeadas, con citoplasma claro, especialmente alrededor del núcleo (halo claro perinuclear). Estos rasgos son típicos de un urotelio. Entonces tengo dos posibilidades diagnósticas: Uréter y Vejiga Si entra toda la luz del órgano en el campo del microscopio, será un uréter, mientras que si la pared muscular posee haces en distintas direcciones, y veo sólo un fragmento de la luz, será vejiga. CONCLUSIÓN: Vejiga (Justifico: org. hueco, pared muscular lisa con haces en diferentes direcciones, urotelio de revestimiento y pliegues en la mucosa). Confusión frecuente: PIEL (tenés que saber identificar el epitelio, que en la piel es plano estratificado y con queratina, y el tejido conectivo, que es acidófilo y se dispone en haces, pero NO es músculo liso como el de la vejiga), LENGUA (de nuevo, el epitelio!!! Y diferenciar músculo liso de estriado esquelético que es el que tiene la lengua). GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 5 Tráquea A bajo aumento: me doy cuenta de que se trata de un órgano hueco y que la pared tiene en su espesor un tejido muy basófilo, de aspecto vidrioso (cartílago hialino). En contacto con la luz, por supuesto, un epitelio. Conclusión: es un órgano hueco con cartílago en su pared. Posibilidades diagnósticas: Tráquea (imposible confundirla!). Confirmemos el diagnóstico, recorriendo a mayor aumento: el epitelio tiene una sola capa pero con núcleos en distintos niveles. Es cilíndrico y tiene cilias en la superficie apical. Cada tanto se distinguen células caliciformes (tienen forma de cáliz y se ven blancas, lo que llamamos "imagen negativa", porque la mucina no toma la coloración de rutina). Se trata entonces de un epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado con células caliciformes ("epitelio respiratorio"). Acordate que un epitelio seudoestratificado es SIMPLE, ya que todas las céulas contactan con la membrana basal. Por debajo del epitelio tenés tejido conectivo que puede tener acinos mucosos, serosos y también tejido linfoide. Y por debajo de éste, la gruesa capa de cartílago! OJO! En la rata el cartílago no tiene forma de herradura sino que son varios fragmentitos separados unos de otros. Donde no hay cartílago se ven haces de músculo liso que intentan unir los fragmentos entre sí. En el humano la tráquea tiene anillos de cartílago en herradura abiertos hacia atrás, y esa zona donde no veo cartílago tiene haces de músculo liso. Los preparados suelen ser de rata! Diagnóstico: TRAQUEA (Justifico: órgano hueco, epitelio respiratorio, cartílago hialino). Otro preparado con cartílago hialino: el de osificación, pero no ves epitelio respiratorio! El de médula ósea puede tener algún sector con cartílago pero es raro que preste a confusión. GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 6 Pulmón A bajo aumento: me doy cuenta de que se trata de un órgano macizo de muy baja densidad celular, ya que veo muchos espacios vacíos. Hay que recorrerlo siempre muy bien a bajo aumento, ya que se identifican algunas estructuras huecas, con epitelio de revestimiento y músculo o cartílago en su pared (bronquios y bronquíolos). Conclusión: es un órgano macizo hipocelular y con luces aisladas. Posibilidades diagnósticas: Pulmón Confirmemos el diagnóstico, recorriendo a mayor aumento: los espacios que veo en los sectores más vacíos, tienen una fina capa de tejido conectivo, vasos, y un epitelio plano simple (se trata de alvéolos). Ese epitelio plano simple tiene células achatadas (neumonocitos I) y otras más globosas (neumonocitos tipo II). A veces en la luz alveolar puedo identificar macrófagos que pueden o no tener un contenido negruzco (pigmento antracótico). Los macrófagos también se conocen como neumonocitos tipo III. Las estructuras huecas pueden tener diferentes características, según se trate de bronquios, bronquíolos propiamente dichos, terminales o respiratorios. Debo saber diagnosticar cada uno de ellos (se adjunta cuadro comparativo). Diagnóstico: PULMON (Justifico: órgano macizo, múltiples cavidades con epitelio plano simple, bronquios y bronquíolos). Bronquio intrapulmonar Bronquíolo propiamente dicho Bronquíolo terminal Bronquíolo respiratorio Epitelio Respiratorio (igual a la tráquea) Bronquiolar (de cilíndrico simple ciliado a cúbico simple) Idem Cúbico bajo Cartílago hialino Posee. En fragmentos. No posee No posee No posee Tejido linfoide Acúmulos No posee No posee No posee Músculo liso Posee entre los cartílago, en toda la circunsf. Abundante (+++) Menor cantidad (++) Escasa cantidad, imperceptible (+) Caracteres de la luz Redonda/oval Estrellada Redondeada Discontinua. Alvéolos en la pared. GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 7 Organos linfáticos A bajo aumento: se trata de órganos sólidos, ricos en células con escaso tejido conectivo interpuesto. Llama la atención la basofilia del tejido. No veo epitelio de revestimiento en ninguna de sus caras. Posee una cápsula de tejido conectivo. Conclusión: es un órgano sólido altamente celular (o es linfoide, o es glandular). Recordemos que los linfocitos tienen núcleo central basófilo intenso, redondo, y escaso citoplasma, también basófilo. Recorro a mayor aumento: SON LINFOCITOS, se trata entonces de un órgano linfoide capsulado. Posibilidades diagnósticas: Timo, Bazo, Ganglio Sigamos a bajo aumento: Si veo corteza y médula, tengo entonces dos opciones, que sea TIMO o que sea Ganglio, por eso tengo que recorrer todo el preparado. En el Timo, la corteza presenta mayor densidad de núcleos, mientras que la médula es más pálida, por tener menos células. La apariencia que da este órgano es la de tener corteza y médula en cada "pseudolobulillo". Supongamos que ésta es mi sospecha, busco confirmar a alto aumento: busco los corpúsculos de Hassall en la médula. Se ven fuertemente acidófilos, y tienen aspecto arremolinado (en catáfila de cebolla). Están compuestos por células citoreticulares envejecidas. En el Ganglio, la corteza presenta folículos linfoides (estructuras redondeadas de centro más pálido y periferia más oscura, por la mayor densidad celular). La corteza es bien periférica (no como la del timo que parece continuarse con los tabiques). La médula posee capilares y células que se disponen en cordones radiados alrededor de esos capilares. Si no veo corteza y médula, puede tratarse de BAZO. Al recorrerlo a bajo aumento, se observan folículos linfoides (como los del ganglio) pero en cualquier parte, superficial o profunda. Estos folículos constituyen lo que llamamos "pulpa blanca". En esos folículos puede verse, desde el bajo aumento, que llama la atención "algo acidófilo". Si ponés mayor aumento vas a ver que es una arteriola, y que no se ubica justo en el centro del folículo (es excéntrica). A veces pasa que la arteriola es cortada más longitudinalmente y ves la luz más elongada y la pared muscular rodeadas de tejido linfoide. Lo que rodea todas estas estructuras de la pulpa blanca es un tejido altamente celular, en general acidófilo (porquees rico en eritrocitos). Se trata de la pulpa roja, que puede tener cualquiera de las células de la sangre. Un dato propio del bazo es que la cápsula posee fibras de músculo liso. CONCLUSIÓN: Ganglio (Justifico: órg. Sólido linfoide, corteza y médula, folículos en la corteza). Timo: (Justifico: órg sólido linfoide, corteza y médula, aspecto multilobulado, corpúsculos de Hassall en la médula, NO tiene folículos). Bazo (Justifico: órg sólido densamente celular, no tiene corteza y médula, folículos de ubicación dispersa con arteriola excéntrica, pulpa roja, cápsula con músculo liso). TIMO BAZO GANGLIO GUIA DE DIAG�OSTICO HISTOLOGICO 8 Médula ósea Megacariocito Nido Rojo Nido blanco A bajo aumento: me doy cuenta de que se trata de un órgano macizo de densidad celular variable. Se ven espacios vacíos (que corresponden a adipocitos) y áreas más acidófilas (son trabéculas de hueso). Se ven entre los espacios vacíos algunos grupos celulares. Conclusión: órgano macizo con un componente de tejido adiposo. Posibilidades diagnósticas: Páncreas/Paratiroides/Mama/Médula ósea Siguiendo a bajo aumento, no veo gran densidad celular ni disposición en acinos serosos. Por lo tanto, infiero que no se trata de páncreas. Tampoco veo células claras y otras más acidófilas dispuestas en cordones (no será paratiroides). No se ven luces glandulares alveolares (no es mama). Podríamos decir que al alumno no le resulta fácil reconocer el preparado de médula, así que lo más sensato será que aprenda a recordar que existe, y que es uno de esos preparados que si no se piensa, se olvida. Está como dijimos, entre los órganos que tienen células adiposas intercaladas en forma aislada. La presencia de trabéculas de hueso ayuda en el diagnóstico. Sospecha elevada: Médula ósea A mayor aumento, confirmo: busco megacariocitos (células muy grandes acidófilas, con un único núcleo multilobulado, se ven desde el bajo aumento). Si vi los megacariocitos, busco entonces entre los grupos de células más pequeñas, diferenciar nidos blancos (que tienen células con núcleos arriñonados o en "cayado") y nidos rojos (grupos celulares donde todos los núcleos son redondos). Los nidos blancos son más abundantes porque los glóbulos blancos tienen una vida media más corta que los rojos. Pero a veces no se nota esa abundancia porque los cortes histológicos pueden haber tomado una parte del núcleo, dando una falsa imagen de núcleos redondos. Diagnóstico: Médula ósea (Justifico: órgano macizo, adipocitos, nidos rojos, nidos blancos y megacariocitos).
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