Infecciosas en caninos y felinos - Melissa

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Técnicas Diagnósticas Virales Caninas
 Moquillo canino
 Parvovirus canino
 Rotavirus-Coronavirus
 Herpes virus canino
 Adenovirus canino
ISSN 2469-2123
Moquillo canino 
Flia Paramyxoviridae
Gro Morbilivirus
ARN hebra (-)
Moquillo canino 
Técnicas diagnósticas
 Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
 Inmunofluorescencia directa (IFD)
 Inmunocromatografía
 RT-PCR
 Aislamiento e identificación
Moquillo canino 
 Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
 IgM 
 IgG
Aparecen a partir del 6to día post infección
No diferencia Ac vacunales de infección.
(excepto vacunas recombinantes)
IgM desaparece después de 3-4 semanas.
Realizar seroconversión.
Muestra: Suero
Moquillo canino 
 Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
IgM ≥1/25 IgG ≥1/50
Moquillo canino 
 Inmunofluorescencia directa (IFD)
Muestra: 
Extendidos conjuntival.(primeras 3 
semanas).
Lavados broncoalveolares.
Extendido genital.
Capa flogística(entre 2do y 9no día)
Obs: Portaobjetos bien limpios y 
desengrasados, sin rayas.
Moquillo canino 
 Inmunocromatografía
Liberación viral entre el 4 día y 
puede extenderse hasta 60-90 días
Moquillo canino 
 Inmunocromatografía
BVT de Medicatec
Detecta Ag de VMC a partir de los 7 días 
post infección
Muestra: Hisopados secreción ocular, 
descarga nasal, saliva, orina, capa 
flogística y plasma.
Moquillo canino 
 RT-PCR
Fragmento de 287 pb 
amplificado del GEN 
de la Nucleoproteina 
del VMC en este caso 
presente en todas las 
vacunas estudiadas.
Control 
Negativo
Vacuna 
1
Vacuna 
2
Vacuna 
3
Vacuna 
4
Control 
Positivo
Moquillo canino 
 RT-PCR
• Se amplía también un fragmento de 871 pb del gen de la Hemaglutinina, 
región variable del genoma. Fue digerido con la enzima de restricción Ndel
• El estudio de esta región del genoma viral permite una clara diferenciación 
entre cepas salvajes y cepas vacunales (no son reconocidas por Ndel) 
( Diagnóstico Molecular del VMC 6tas Jornadas Internacionales de Veterinaria Práctica Agosto 2009 CEVAN Gallo 
Calderon,M;Periolo,O;Iglesias,M;Mattion,N;La Torre,J)
Moquillo canino 
 RT-PCR
RT-PCR es una herramienta diagnóstica rápida, específica y sensible para 
detectar la presencia de secuencias genómicas del VMC en muestras de 
perros con enfermedad clínica compatible con moquillo.
Muestra para el diagnóstico: Sangre coagulada en tubo conservando el 
coágulo y sangre entera anticoagulada con EDTA 3K a 4ºC
Moquillo canino (C.I) 
Parvovirus canino
Flia. Parvoviridae
Virus ADN simple cadena
18-23 nm
PVC2a,PVC2b,PVC2c
Parvovirus canino
Técnicas Diagnósticas
 Inmunocromatografia
 Hemoaglutinación HA
 IHA
 PCR
 Aislamiento e identificación
Parvovirus canino 
 Inmunocromatografía
BVT de Medicatec
Detecta Ag de PVC a partir del 2-3 día 
post infección
Muestra: Hisopados rectales sin medio 
de transporte, materia fecal.
NO REALIZAR EL TEST DENTRO DE 
LAS 4 SEMANAS POSTERIORES A LA 
VACUNACIÓN
Parvovirus canino
 Hemoaglutinacion HA
PVC Hemoaglutina GR Cerdo
Detecta Ag (PVC) E.Infecciosas UBA
Muestra: Materia fecal fresca sin 
medio de transporte conservada a 
4ºC
IHA Detecta Ac Inmunología UBA
Muestra: Suero
Parvovirus canino
 PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa)
Cepas actuales : PVC2a – PVC2b – PVC2c
PVC2c tiene una sustitución aminoacídica de un Ac.Aspártico por 
Ac.Glutámico en la posición 426 de la proteína viral VP2
PCR para PVC permite diferenciar claramente las cepas presentes en las 
vacunas comerciales respecto a las cepas de campo
Muestra: Hisopado rectal, Materia fecal sin medio de transporte. Contenido 
intestinal refrigerado.
Rotavirus-Coronavirus
 Enteritis viral Canina
Diagnósico: PCR (*Cevan -Centro de Virología Animal-)
Muestras: Materia fecal sin medio de 
transporte ni conservantes tipo formol. 
Colocar en tubo esteril y conservar en la 
heladera 4ºC
Herpesvirus canino VHC-1
Herpesvirus  Citocidas
Recuperación asociada a Infección latente de por vida
 Trasplacentaria
 1ra semana de vida
 2da semana de vida
 Adultos
Herpesvirus canino VHC-1
Técnicas diagnósticas
• Aislamiento e identificación.
• PCR 
• Serología indica exposición no 
necesariamente infección activa.
IFI ≥1/80
Herpesvirus canino VHC-1
Muestras
Animal vivo: hisopados (vaginales, prepuciales,
lesiones papulovesiculares), sangre entera (IFI)
Animal muerto: Feto, Órganos de necropsia (riñón, 
pulmón, hígado, bazo, páncreas)
Colocadas en frasco estéril y conservadas a 4ºC
Adenovirus canino AVC-2
Técnicas diagnósticas
• Aislamiento e identificación. Enf.Infecciosas UBA
• PCR Cevan -Centro de Virología Animal
Adenovirus canino
Muestras
Animal vivo: Lavado traqueobronquial o hisopado 
nasal y ocular.
Animal muerto: Necropsia o materia fecal.
Colocadas en frasco estéril y conservadas a 4ºC
Técnicas Diagnósticas Virales Felinas
 Vif
 Vilef
 Coronavirus
 Enf.respiratoria felina
 Parvovirus felino
Inmunodeficiencia felina Vif
Técnicas diagnósticas
 Inmunocromatografía
 Elisa
 PCR
Inmunodeficiencia felina Vif
 Inmunocromatografía
Detecta Ac séricos a partir de 3 a 6 semanas post inoculación.
Los Ac se unen a un péptido sintético que reproduce el receptor gp40
95-97% sensibilidad.
Muestra: Suero (suero mejor que sangre entera)
Inmunodeficiencia felina Vif
 Elisa
Detecta Ac séricos 
Muestra: Suero (suero mejor que sangre entera)
Inmunodeficiencia felina Vif
 Diagnóstico Molecular PCR
Puede detectarse a partir de la 2da semana post infección.
Muestra: Sangre entera con anticoagulante (NO Heparina). Preservar 
a 4 ºC durante no más de 48 hs.
Volumen mínimo 2 ml.
Otras muestras : Coágulo sanguíneo (puede preservarse congelado)
Inmunodeficiencia felina Vif
 Recomendaciones para el diagnóstico de VIF
Leucemia felina (ViLeF)
Técnicas diagnósticas
 Inmunocromatografía
 Elisa
 PCR
Leucemia felina (ViLeF)
 Inmunocromatografía
Detecta Ag proteína p27 del ViLeF –soluble y libre en plasma-
Generalmente a partir del día 28 post infección
Muestra: Suero 
Leucemia felina (ViLeF)
 Diagnóstico Molecular PCR
Muestra: Sangre entera con anticoagulante (NO Heparina). Preservar 
a 4 ºC durante no más de 48 hs.
Volumen mínimo 2 ml.
Otras muestras : Coágulo sanguíneo (puede preservarse congelado)
Punción / Biopsia de Linfonódulo
Infección por ViLeF
Infección por ViLeF
Replicación en Ganglios linf
Rta eficaz  Ac
Gato saludable
-Regresor-
ViLeF (-)
Rta ineficaz  Viremia ViLeF (+)
Replicación 
Ganglios linfáticos 
y médula
Viremia persistente  ViLeF (+)
Enfermedad ViLeF (+)
Eliminación completa
Infección latente 
-ADN Proviral-
ViLeF (-)
PCR (+)
Reactivarse
Coronavirus felino
Sus dificultades diagnósticas...
Agente etiológico: Virus ARN de la Familia 
Coronaviridae. 
 CVEF
 VPIF
VPIF vs CoVF
Signos gastrointestinales leves
Enfermedad sistémica grave 
con alta mortalidad (95%)
Coronavirus felino
Análisis de Laboratorio
 Relación A/G
 AGP
 Serología  Ac - Inmunocromatografía
 PCR  No disponible
 Punción Líquidos biológicos
 Histopatología
Relación Albúmina-Globulina
• PIF efusiva: Análisis FQ Líquido: Exudado 
Pt: > 3,5 g/dl.
• PIF No efusiva: en suero o plasma 
Glob: > 4,0 g/dl
A/G: < 0,4 indicativa de PIF
A/G: > 0,8 descarta PIF
A/G: entre 0,4 y 0,8 ver otros parámetros
Alfa Glicoproteína ácida –AGP-
α-1-glicoproteína ácida Orosomucoide
Reactante de fase aguda temprana.
Métodos: Inmunoturbidimétrico.
Inmunodifusión radial.
• Método por Inmunodifusión radial
• Método inmunoturbidimétrico
Fundamento: la AGP reacciona con Ac específico 
formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez 
provocada por estos inmunocomplejos es proporcional 
a la concentración de AGP en la muestra.
Reactivos: Antisuero Anti AGP 
BufferpH 7,5
Calibrador Nivel alto de Proteínas
Muestra: Suero o plasma.
Lectura: Espectrofotómetro 340 nm
VN: 50-120 mg/dl PIF > 1.200 mg/dl
Enf respiratoria felina
 Herpes virus felino (VHF-1)
 Calicivirus felino
Diagnóstico disponible

Aislamiento e Identificación
Muestra recomendada: Lavados bronco-alveolares
Parvovirus felino
Técnicas Diagnósticas
 Hemoaglutinación HA
 Aislamiento e identificación
 PCR 
 Inmunocromatografía PVC...
Muestras: Hisopado rectal, Raspaje de mucosa intestinal. Materia 
fecal. Intestino ligado. Linfonódulos mesentéricos