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Diagnóstico Virus Rábico El diagnóstico definitivo que determina o no la presencia del virus es siempre POST MORTEM * Que Muestras se envían Caninos Felinos Murciélagos Roedores Equinos Bovinos. * Caninos y Felinos Se envía el cerebro entero De preferencia que tenga el cerebelo y la médula oblonga Refrigerado o congelado según la distancia Nunca agregar ningún desinfectante ni antiséptico. En felinos y caninos pequeños puede remitirse el cadáver directamente. * Murciélagos Se envía el animal VIVO Si ya murió se envía refrigerado o congelado según la distancia a recorrer. * Equinos Y Bovinos Se envía el cerebro refrigerado o congelado. MUY importante remitir médula oblonga y cerebelo. * Conclusiones Remisión Muestras Virus muy lábil Nunca agregar ningún desinfectante. Enviar refrigerado. Si se duda que llegue en buenas condiciones se puede congelar. Los murciélagos, de ser posible, remitirlos VIVOS Tratar de remitir cerebro, cerebelo y médula. * 3 tipos de pruebas - Tinciones Inmunológicas -Pruebas Biológicas -Biología Molecular (PCR) * Tinciones Inmunofluorescencia Directa (IFD) Prueba Rápida: Aprox. una hora Alta sensibilidad: 98% (operador dependiente) No es el diagnóstico definitivo * IFD Se realiza una impronta del tejido nervioso Se colorea con un reactivo que se une a las proteínas de la envoltura viral Se observa a microscopio con luz UV confrontado con un positivo * IFD * IFD Corpúsculos de Negri * IFD Corpúsculos de Negri * Prueba Biológica (Webster) Se realiza en ratones lactantes de menos de 3 días de vida. Tarda 21 días en completarse. 100% de sensibilidad. Es el DIAGNÓSTICO DEFINITIVO de la presencia del virus. * Webster Se toma una porción de tejido nervioso del animal remitido como sospechoso. Se morterea y diluye en agua destilada estéril. Se inocula vía intracerebral a 8 ratones lactantes de menos de tres días de vida. * Webster Durante 21 días esos ratones se observan diariamente en búsqueda de sintomatología nerviosa. En caso de que aparezcan síntomas o que algún ratón muera, se extrae el cerebro y se confirma la presencia del virus por IFD, informándose el resultado como POSITIVO. * Webster El agente debe provocar la enfermedad en un animal susceptible al ser inoculado. El agente debe ser aislado de nuevo de las lesiones (cerebro) producidas en los animales de experimentación. * Webster Si luego de 21 días los ratones permanecen sanos, sin ningún síntoma evidente, se informa como NEGATIVO. * Conclusiones IFD: Prueba rápida, alta sensibilidad, no es diagnóstivo definitivo. Prueba Biológica (Webster): Tarda 21 días, 100% de sensibilidad, es el diagnóstico definitivo. * * PCR (Biología molecular) Gran utilidad en muestras en gran estado de descomposición. Podridas o en las que no se han respetado las normas de conservación. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos Medición de anticuerpos protectores contra la rabia, por método de ELISA. Indica si el individuo posee un nivel mínimo de anticuerpos (título) por encima del cual se encontrará protegido en caso de exposición al virus. Se realiza en humanos, caninos y felinos. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos En qué casos se utiliza el dosaje de anticuerpos rábicos (DAR): Individuos que han recibido un tratamiento contra la rabia en forma profiláctica (pre-exposición); individuos que viven en zonas de riesgo, viajan a zonas endémicas, o están expuestos al virus debido a su actividad laboral. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos Animales que han sufrido mordeduras y que no se puede completar la observación antirrábica del mordedor (ya sea porque el mismo no ha sido identificado o no es posible acceder a él). Personas que han sufrido mordeduras y que tienen antecedentes de vacunación antirrábica. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos Felinos y caninos que han estado en contacto con murciélagos. Animales que viajen a países que exijan este estudio para permitir la entrada de dicha mascota al país. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos ¿Qué muestra remitir? Se envía suero o plasma refrigerado o congelado. Se puede enviar sangre refrigerada, si es remitida en el momento, procurando no hemolizar la muestra. * Dosaje de Anticuerpos Rábicos El resultado suele demorar unos tres a cinco días. Si es una urgencia puede solicitarse como tal y se realiza en 24 hs. * CONCLUSIONES El dosaje de anticuerpos rábicos NO se utiliza como método diagnóstico de la enfermedad. NO busca el antígeno (el virus) sino que mide la presencia de anticuerpos contra el mismo. Estos anticuerpos pueden ser vacunales o por la acción del virus mismo. * CONCLUSIONES Es útil para toda aquella situación en la que necesitemos saber si un individuo tiene un mínimo nivel de anticuerpos que lo protejen frente a una exposición o presunta exposición al virus. *
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