trabajo autonomo_1_segundo parcial - fabricio hurtado

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UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZONICA 
FACULTAD CIENCIAS DE LA VIDA 
CARRERA DE BIOLOGÍA 
CUARTO SEMESTRE 
NOMBRE: FABRICIO BYRON HURTADO FREIRE 
DOCENTE: LUIS RAMÓN BRAVO SÁNCHEZ 
MATERIA: ANÁLISIS QUÍMICO 
TRABAJO AUTÓNOMO 1. SEGUNDO PARCIAL. 
 
Resumen: Aplicación de la cromatografía de gases en la identificación de Entero bacterias. 
En este trabajo el objetivo principal fue la de identificar varias especies bacterianas tales como: 
Enterobacter clocae, Enterobacter aerogenes y Enterobacter agglomerans, usando la técnica de la 
cromatografía de gases en sustitución de las pruebas tradicionales, se determinó la composición de 
los perfiles de ácidos grasos a través de sus esteres para estas especies lo cual determinará la 
diferenciación entre éstas con el fin de establecer los picos más relevantes para su diferenciación. 
Para el análisis cromatográfico se usó un cromatógrafo de gases HEWLETT PACKARD (HP 5890 
A) con un detector de ionización de flama, una columna capilar heliflex RLS 150, de 30 m. con 
diámetro interno de 0.25 mm y espesor de película de 0.25 micro mol. 
También se usaron 3 cepas puras para cada especie, de las cuales 3 fueron tipificadas, para la 
obtención de la biomasa necesaria se cultivó cada bacteria en agar nutritivo por 24 horas, luego de 
eso lavaron la biomasa con una solución de formaldehido al 0.5%, centrifugándola durante 20 
minutos. Al realizar el análisis comparativo de los perfiles bacterianos determinaron que los ácidos 
grasos para la identificación de las 3 especies: el ácido octadecanoico con un total de 23 picos, el 
ácido cis-9,10-metilen octadecanoico con un total de 3 picos y por último el ácido cis -9 – 
hexadecanoioco con un total de 14 picos. Los perfiles de los ácidos grasos obtenidos para las tres 
especies estudiadas se podrán utilizar como patrones de referencias de identificación de muestras 
ambientales mediante la comparación de los cromatogramas de los perfiles de referencia y todo 
gracias al método analítico que la cromatografía de gases hace para determinar y comparar a estas 
especies, se puede decir que esta técnica en comparación con las tradicionales ofrece mayor rapidez 
y exactitud en la identificación de las entero bacterias. 
Bibliografía 
Robles Valderrama, E., Ramírez García, P., Gonzáles Arreaga, M., Sáinz Morales, M., Martínez Rodríguez, B., 
Durán Díaz, A., & Chávez Ramírez, D. (1999). Aplicación de la Cromatografía de Gases en la 
Identificación de Enterobacter clocae, Enterobacter aerogenes y Enterobacter agglomerans. Revista 
Latinoamericana de Microbiología, 1-6.