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Historia 
Bueno, antes de hablar de ELISA, debemos conocer la historia y es por eso que debemos tener claro que el radioinmunoensayo fue desarrollado en 1959 por Yalow y Berson. El ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas, es decir, ELISA se ha convertido en un procedimiento muy conocido desde su implementación en 1970. Su uso en laboratorios médicos, fabricación de productos in vitro, e incluso en procedimientos para organismos reguladores, proporcionó un método mas seguro y económico que el RIA. También es importante resaltar que la técnica ELISA fue contextualizada y desarrollada por Peter Perlmann, investigador principal, y Eva Engvall en la Universidad de Estocolmo, en Suecia. 
Procedimiento: 
1.	Determinar el número total de pocillos teniendo en cuenta todos los controles que indica el inserto del kit y control de calidad interna.
2.	Dispensar los micro litros indicados (según el inserto) de sueros controles positivos y negativos, sueros problema y sueros control interno en los respectivos micro pocillos, mezclar suavemente.
3.	incubar a la temperatura indicada por el tiempo necesario, generalmente en esta etapa se cubren los micro pocillos con papel adhesivo que acompaña al kit, para evitar su evaporación.
4.	Retirar el material adhesivo y proceder con los ciclos de lavado teniendo en cuenta el volumen dispensado y el tiempo de remojo indicados en el instructivo. Después del último lavado secar la microplaca sobre un papel absorbente dándole pequeños golpes para remover cualquier exceso de líquido de los pocillos.
5.	Colocar la cantidad necesaria de conjugado en cada pocillo, la dilución del conjugado debe realizarse durante el último ciclo de lavado.
6.	Cubrir la placa con el papel adhesivo e incubar a la temperatura indicada por el tiempo necesario.
7.	Retirar el material adhesivo y proceder con los ciclos de lavado de acuerdo al paso 4
8.	Durante el lavado prepare el volumen requerido de la solución substrato-cromógeno, la cual debe estar a temperatura ambiente y debe ser incolora, si se observa alguna coloración descartar la solución.
9.	Colocar la cantidad necesaria de sustrato en cada pocillo e incubar en oscuridad a temperatura ambiente por el tiempo indicado.
10.	Detener la reacción agregando la cantidad indicada de solución de parada en la misma secuencia que se agregó el substrato.
11.	Leer la absorbancia de los pocillos en un lector de ELISA teniendo en cuenta los filtros indicados. Es recomendable una lectura bicromática teniendo como filtro de referencia 620-630 nm. L Leer la microplaca en el tiempo indicado por el inserto.
12.	Evaluar la prueba teniendo en cuenta los criterios de validación que se indican en el instructivo del kit y suero control interno. Si la prueba es válida calcular el valor de corte e interpretar los resultados.
13.	Las muestras con resultados no reactivos se informan como tales.
14.	Las unidades de sangre cuyas muestras tienen resultados reactivos deberán ser eliminadas.
15.	Los donantes cuyos resultados son reactivos deben ser remitidos a la unidad de epidemiología.
ELISA INDIRECTO
Para empezar, se agrega suero que contenga anticuerpo primario (ab1) a un pozo de micro titulación cubierto con antígeno, y se permite que reaccione con el antígeno fijo al pozo, luego se realiza un lavado para eliminar cualquier anticuerpo primario libre, el anticuerpo unido al antígeno se detecta al añadir un anticuerpo conjugado con enzima (ab2) que se une al anticuerpo primario De nuevo, cualquier Ab2 libre es eliminado por lavado, y se añade un sustrato para la enzima. Por último, usando un lector de placa especializado, se mide la cantidad de producto de reacción coloreado, fluorescente o luminiscente que se forma, y se compara con la cantidad de producto generado cuando el mismo grupo de reacciones se efectúa usando una curva estándar de concentraciones de Ab1 conocidas.
ELISA SANDWICH 
En esta técnica, el anticuerpo (en lugar del antígeno) es inmovilizado en un pozo demicrotitulación. Se permite que una muestra que contiene cantidades desconocidas de antígeno reaccione con el anticuerpo inmovilizado. Después de que se lava el pozo, se añade un segundo anticuerpo ligado a enzima específico para un epítopo diferente sobre el antígeno, y se permite que reaccione con el antígeno unido. Después de que cualquier segundo anticuerpo libre se elimina mediante lavado, se añade sustrato, y se mide el producto de reacción coloreado.
ELISA COMPETITIVO 
En esta técnica, primero se incuba anticuerpo en solución con una muestra que contiene antígeno. La mezcla de antígeno-anticuerpo a continuación se añade a un pozo demicrotitulación cubierto con antígeno. Mientras más antígeno está presente en la muestra de fase de solución inicial, menos anticuerpo libre estará disponible para unirse al pozo cubierto con antígeno. Después de eliminar por lavado el anticuerpo no unido, puede añadirse un Ab2 conjugado con enzima específico para el isotipo del Ab1 para determinar la cantidad de Ab1unido al pozo.
DOCUMENTO EXPO.
Ahora hablaremos sobre las aplicaciones clínicas del Elisa directo antes de empezar les haré una breve introducción de lo que son las aplicaciones clínicas, esto viene siendo un método para evaluar la capacidad autorreguladora de un paciente ósea puede ayudar a formular una estrategia de tratamiento más global. En las aplicaciones clínicas nos encontramos como: 
Enfermedades producidas por parásito, ya sea una toxoplasmosis, triquinosis o tripanosomas. 
También tenemos las enfermedades producidas por micoplasmas,
Enfermedades producidas por bacterias como mycobacterium tuberculosis, brucelas, estreptococos, salmonela entre otros. 
Las enfermedades producidas por virus como la enfermedad de Newcastle, peste porcina, rotavirus, artritis vírica y leucemia felina.
Tipos de pruebas que se utilizan en la técnica: 
Para esta técnica tenemos diferentes tipos de pruebas que se pueden utilizar, está las de la proteína TAU que está es una proteína que estabiliza los microtúbulos y que cuando no funciona correctamente, se empieza a implicar en las patologías y demencias del sistema nervioso, la proteína B- amiloide que tiene una participación crucial en la enfermedad de Alzheimer cómo componente principal de las placas d amiloide que se encuentran en el los cerebros de los pacientes o el análisis de la presencia de anticuerpos IgM e IgG frente al virus SAR - Con V-2