Exactitud en CDG

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CALCULO DE EXACTITUD, CROMATOGRAFIA DE GASES 
CROMATOGRAFÍA DE GASES (CG) 
La cromatografía es básicamente una técnica de separación, su gran capacidad para reducir muestras complejas ha conducido a utilizarla cada vez más como técnica analítica. Esta utilización ha conducido al desarrollo de una instrumentación que puede actuar con mayor eficacia en la separación y con un mayor control de las condiciones cromatografícas para incrementar la reproducibilidad de los resultados.
Entre las técnicas cromatografícas utilizadas con fines analíticos, la cromatografía de gases es la que tiene una utilización más amplia. 
Por otra parte, el hecho de que esta con esta técnica las mezclas sean separadas en fase gaseosa, establece los límites de su utilización, que estarán marcados fundamentalmente por la estabilidad térmica de los compuestos a separar. 
Para realizar una separación mediante cromatografía, se inyecta una pequeña cantidad de la muestra a separar en una corriente de un gas inerte a elevada temperatura; dicha corriente, atraviesa una columna cromatográfica que separará los componentes de la mezcla por medio de un mecanismo de partición o adsorción. Para ambos procedimientos se necesita exactitud y precisión de la más alta calidad.
A exactitud le llamamos al término que nos da el grado de concordancia entre el valor medido y el verdadero a diferencia de precisión, que está relacionada con la reproductibilidad de las medidas, es decir, indica el grado de concordancia de varias medidas individuales.
Análisis cuantitativo por cromatografía de gases 
En la cromatografía de gases los parámetros cuantitativos se basa en la comparación de la altura, o el área del pico del analito con la de uno de los patrones. El uso, como parámetro del área del pico es más acertado cuando se requiere mayor exactitud en las determinaciones cuantitativas. Como se sabe, el área del pico es función de la cantidad de componente o de la concentración del mismo. Para interpretar cuantitativamente el cromatograma se realizan curvas de calibración, que permitan conocer la relación real que, para cada componente, existe entre el área del pico y la cantidad de componente presente en una muestra, de forma que todos los picos, adecuadamente corregidos, sean comparables
Exactitud
La exactitud describe la proximidad del valor medido respecto al valor “verdadero” o “aceptado”. Si se dispone de un estándar conocido, por ejemplo un material de referencia certificado, la medida será exacta si el valor obtenido es próximo al valor certificado.
Para comprender la diferencia entre precisión y exactitud veamos las siguientes situaciones: - Una medida puede ser reproducible pero errónea. Por ejemplo, si se comete un error al preparar una disolución patrón de Fe, ésta no tendrá la concentración deseada. Al llevar a cabo la cuantificación de Fe en una muestra repetidas veces, los resultados pueden ser muy precisos pero inexactos, porque la concentración real de la disolución patrón no es la que deseábamos preparar.
 En definitiva: buena precisión, mala exactitud. - Pero también puede ocurrir que las medidas sean poco reproducibles, pero en torno al valor correcto, porque la disolución patrón fuese preparada sin errores pero el método analítico empleado no sea muy reproducible. 
En definitiva: mala precisión, buena exactitud. - Situación ideal: procedimientos exactos y precisos. La exactitud es con frecuencia más difícil de determinar que la precisión, pues para la precisión basta con analizar varias réplicas de la muestra.
 Pero para determinar la exactitud se requiere el conocimiento del valor verdadero. Para obtener el valor verdadero de un parámetro, éste habrá tenido que ser medido experimentalmente y, como ya sabemos, toda medida experimental lleva asociada un error. 
CALCULO DE LA EXACTITUD
Considerando que el valor verdadero de un parámetro es igual a 0,2 ppm. 
El error absoluto al obtener 19,8 ppm sería – 0,2 ppm. El error absoluto del resultado 20,1 ppm es +0,1 ppm. Obsérvese que se mantiene el signo al expresar el error, pues nos informa si se produce por exceso o defecto. Error relativo: Frecuentemente este parámetro es más útil que el error absoluto. 
El error relativo para el caso concreto citado corresponde a -1%. 
1.2. TIPOS DE ERROR EXPERIMENTAL 
Cualquier medida lleva asociada una incertidumbre, que se llama error experimental. Los resultados pueden expresarse con un mayor o menor grado de confianza, pero nunca con total certeza. Los análisis químicos se ven afectados al menos por dos tipos de errores:
 SISTEMÁTICOS y ALEATORIOS. 
Existe otro tipo de error denominado BRUTO. 
ERROR SISTEMÁTICO: hace que la media de un conjunto de datos difiera del valor aceptado. El error sistemático, también llamado error determinado, se origina principalmente por un fallo del diseño del experimento o por un fallo del equipo. Si se repite el experimento en idénticas condiciones, vuelve a producirse este error; provocando que todos los resultados se hallen por encima o por debajo del valor aceptado. Este tipo de error es difícil de descubrir aunque no imposible. Supongamos que para la adición de reactivo valorante en una volumetría directa utilizamos una bureta de 10 mL, que no hemos calibrado previamente. El volumen liberado hasta alcanzar el punto final de la valoración es de 8,62 ± 0,02 mL. Si supuestamente se está obteniendo una concentración de analito por exceso, es probable que el volumen real liberado de valorante sea superior a los valores de lectura de bureta. La calibración del material volumétrico sería una buena forma de corregir este error sistemático.
Ahora, vamos a explicar un ejemplo del cálculo de la exactitud en cromatografía de gases, para que quede más claro el concepto y procedimiento a realizar.
Para el análisis se usa la cromatografía de gases para evaluar o analizar fitoesteroles
Como colestano, Colestanol, ergostenol y Estigmasterol. 
METODOLOGÍA
ESTÁNDARES DE FITOESTEROLES 
Se empleó una mezcla preparada a partir de cuatro estándares de fitoesteroles, la mezcla presentaba una concentración diferente para cada fitoesterol (5-α Colestano 100 ppm, Colestanol y Estigmasterol 133,55 ppm y ergostenol 233,5 ppm). Los estándares utilizados son de marca SUPELCO. 
CURVA DE CALIBRACIÓN DE LOS ESTÁNDARES DE FITOESTEROLES 
Una vez preparados los patrones externos, se inyectaron cinco veces al cromatógrafo de gases siguiendo el método cromatografícas previamente 40 establecido. Se realizó una curva de calibración para cada estándar de fitoesterol con los seis niveles de concentración, para así determinar los parámetros para la estandarización, siguiendo las metodologías de algunas investigaciones previas y la normativa de la Association of Official Analytical Chemist. 
 
ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO 
Se realizaron siete corridas con los estándares de fitoesteroles, logrando establecer las siguientes condiciones de operación para el análisis de fitoesteroles 
Esta tabla muestra las condiciones de operación del cromatógrafo de gases para el análisis de estándares de fitoesteroles. 
NIVELES DE CONCENTRACIÓN DE FITOESTEROLES
 Con la mezcla de los estándares de fitoesteroles, se hicieron varias diluciones para obtener patrones que cubran las concentraciones de los fitoesteroles tomando como referencia su respuesta en el equipo; se establecieron seis niveles de concentración para cada estándar como se observa en la tabla
Debemos obtener los datos experimentales para luego hacer el cálculo de la exactitud, para eso realizamos un sesgo experimental 
Sesgo 
El sesgo se calculó al aplicando la formula, Sesgo = μ – xt donde μ corresponde al valor promedio de concentración de cada nivel y xt es el valor esperada para cada nivel de concentración.
Para calcular la exactitud se prepararon por triplicado tres niveles de concentración diferentes. Con los datos obtenidos se calculó por medio del porcentaje de error.
La exactitud se calculó mediante la siguiente formula:
Resultados obtenidos para el cálculo de la exactitud
Como se apreciaen la tabla, los porcentajes de error entre los valores reales y experimentales fueron menores al 5%, lo que indica que la exactitud del método es buena, por consiguiente los valores experimentales son muy próximos a los reales.
La cromatografía de gases con ionización en llama, para analizar fitoesteroles arrojó valores aceptables en las figuras de mérito: la exactitud presenta porcentaje de error menores al 5% y indicando la precisión, reproducibilidad y repetibilidad de método demostrando así la validez de la técnica para el análisis de fitoesteroles.
ABSTRACT
The technique was standardized by gas chromatography with an ionization detector flame (GC-FID) for the analysis of phytosterols, parameters were calculated statistics, such as precision, detection limit, quantification limit, sensitivity, repeatability, linearity, reproducibility, bias and accuracy, achieving tolerable values ​​for these measures, allowing the use of the technique for the analysis of oily matrices.
The recovery percentage of phytosterols was evaluated with the technique of solid phase extraction (SEF), using silica cartridges, the technique showed a good recovery percentage of 110.15% with coefficients of variance less than 2%.
Se estandarizó la técnica por cromatografía de gases con detector de ionización de llama (GC-FID) para el análisis de fitoesteroles, se calcularon parámetros estadísticos, como la precisión, límite de detección, límite de cuantificación, sensibilidad, repetibilidad, linealidad, reproducibilidad, sesgo y exactitud, logrando valores tolerables para éstas medidas, permitiendo el uso de la técnica para el análisis de matrices oleosas.
Se evaluó el porcentaje de recuperación de fitoesteroles con la técnica de extracción en fase sólida (EFS), utilizando cartuchos de silica, la técnica mostró un buen porcentaje de recuperación de 110,15% con coeficientes de varianza menores al 2%.
COLESTANOL ppm
1	2	3	4	5.25	10.5	21	30	
COLESTANO PPM
1	2	3	4	5.25	10.5	21	30